Name: assessing tumor microenvironment of metastasis doorway-mediated vascular permeability associated with cancer cell dissemination using intravital imaging and fixed tissue analysis
Uploaded: 2019-06-26T14:00:00
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Gostaríamos de agradecer à unidade de imagem analítica (AIF) no Albert Einstein College of Medicine para suporte de imagem. Este trabalho foi apoiado por subsídios do NCI (P30CA013330, CA150344, CA 100324 e CA216248), o SIG 1S10OD019961-01, o centro de Biophotonics Gruss-Lipper e seu programa de imagem integrada, e Ruth L. Kirschstein de Montefiore T32 capacitação de cirurgiões para o estudo do microambiente tumoral (CA200561).

A GSK co-escreveu o manuscrito, realizou imagens para a figura 1C e 3B, desenvolveu protocolo de análise de tecido fixo, analisou e interpretou todos os dados; O JMP co-escreveu o manuscrito e realizou a cirurgia e a imagem intravital para a figura 1B, 2C e 3a; LB &AMP; AC realizou a cirurgia e a imagem intravital para a figura 2B; O RJ realizou a cirurgia e a imagem intravital para a figura 2a; JSC co-escreveu o manuscrito e analisou e interpretou todos os dados; Mho co-escreveu o manuscrito e analisou e interpretou todos os dados; e de executou a cirurgia e a imagem latente intravital para a Figura 2D, co-escreveu o manuscrito, desenvolveu a análise fixa do tecido e os protocolos intravital da imagem latente, e analisou e interpretou todos os dados.

Todos os experimentos com animais vivos devem ser conduzidos de acordo com as diretrizes e regulamentos de uso e cuidado com animais. Os procedimentos descritos neste estudo foram realizados de acordo com os regulamentos nacionais de saúde relativos ao cuidado e uso de animais experimentais e com a aprovação do colégio Albert Einstein de medicina cuidados e uso animal Comissão (IACUC).
1. avaliação da "permeabilidade de ruptura" usando imagens de animais vivos
<ol><li>Transpla...

Aqui, nós esboçamos dois protocolos que podem ser aplicados para visualizar e quantificar um tipo específico de permeabilidade vascular que esteja atual em entradas de TMEM e esteja associado com o rompimento de junções vasculares apertadas e dos aderens. Este tipo de permeabilidade vascular é transiente e controlado pelo complexo tripartida da pilha de tmem, como explicado acima de5. A capacidade de identificar e quantificar a permeabilidade vascular associada à TMEM é crucial para a aval...

Os avanços recentes em nossa compreensão da metástase do cancro descobriram que a transição epithelial-à-mesenchymal (EMT) e a indução de uma subpopulação migratória/invasora da pilha de cancro não são, por si só, suficientes para a disseminação hematógena 1. indeed, pensou-se previamente que as pilhas de cancro se por metástese intravasate através da totalidade do endotélio cancro-associado como o neovasculature do tumor é caracterizada frequentemente pela baixa cobertura do pericyte, e como tal, é altamente permeável e instável2,3,4. Embora altamente sugestivo de funções defeituosas dentro do tumor, as modificações vasculares durante a carcinogénese não fornecem a evidência por se que as pilhas do tumor podem penetrar vasos sanguíneos facilmente e em uma forma descontrolada. Introspecções dos estudos intravital da imagem latente (IVI), em que as pilhas do tumor Fluorescently-são etiquetadas e o vasculatura é etiquetado através da injeção intravenosa de pontas de prova fluorescentes (tais como o dextrano ou pontos do Quantum), mostra que, quando os vasos do tumor forem uniformemente permeável ao dextranos de baixo peso molecular (por exemplo, 70 kD), o dextranos de alto peso molecular (155 kD) e as células tumorais podem atravessar o endotélio apenas em sítios especializados de intravasação que estão preferencialmente localizados no ponto de ramificação vascular5, 6 anos de , as análises 7. immunohistochemical (IHC) usando modelos animais e o material paciente-derivado humano mostraram que estes locais são "doorways" que se especializam em regular a permeabilidade vascular, localmente e transientemente, fornecendo uma breve janela de oportunidade para que as células cancerosas migratórias/invasivas entrem na circulação. Estas portas são chamadas "microambiente do tumor da metástase" ou "tmem", e, completamente expectedly, sua densidade correlaciona com um risco aumentado de desenvolver a doença metastática em pacientes do cancro da mama8,9, a 10.
Cada porta TMEM consiste em três tipos distintos de células: um macrófago perivascular, uma célula tumoral sobreexpressando a proteína actina-reguladora de mamíferos ativada (Mena), e uma célula endotelial, tudo em contato físico direto uns com os outros1, 5,9,10,11,12,13. O evento-chave para a função de TMEM como uma entrada de intravasação é a liberação localizada do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) para o vaso subjacente pelo macrófago perivascular14. VEGF pode interromper junções neutralizantes entre as células endoteliais15,16,17,18,19, um fenômeno que resulta em vazamento vascular transitório, também conhecida como permeabilidade "estourando" como descrito em estudos de IVI 5. Os macrófagos de tmem foram mostrados para expressar o receptor da tirosina quinase TIE2, que é exigido para a função de tmem VEGF-negociada e homing destes macrófagos ao Niche perivascular5,20,21 , 22. além de regular a disseminação e a metástase de células cancerosas, TIE2+ macrófagos demonstraram ser reguladores centrais da angiogênesetumoral 21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31. Como tal, TIE2+ macrófagos representam um constituinte crítico do microambiente tumoral e o principal regulador da cascata metastática.
Para conceituar melhor a permeabilidade vascular mediada por TMEM (ou seja, "estourando"), é muito importante distingui-la de outros modos de permeabilidade vascular que não estão associados à dissolução de junções endoteliais de células celulares. Em um endotélio intacto (um cujas junções apertadas e aderens não são interrompidas), existem três tipos principais de permeabilidade vascular: (a) pinocitose, que pode, ou não, ser acoplada à transcitose do material ingerido; (b) transporte de material através de fenestrae endotelial; e (c) transporte de material através da via paracelular, que é regulado por junções apertadas endoteliais15,16,17,18,19,32 , 33 , 34. embora desregulamentado em muitos tumores, os modos acima mencionados da permeabilidade vascular foram descritos na maior parte no contexto da fisiologia e do Homeostasis normais do tecido, os extremos de que são os tecidos com uma ou outra permeabilidade limitada ( por exemplo, barreira hematoencefálica, barreira sangue-testis), ou permeabilidade abundante (por exemplo, capilares fenestrados do aparelho glomerular renal)34,35,36,37.
Usando a imagem latente intravital do multifotônica e a microscopia multiplexada da imunofluorescência, nós podemos distinguir entre a permeabilidade vascular tmem-negociada ("estourando") e outros modos da permeabilidade vascular em tumores do peito. Para conseguir isto, nós realizamos uma única injeção intravenosa de um peso elevado-molecular, sonda fluorescently-etiquetada nos ratos. Eventos de ruptura espontânea podem ser capturados usando imagens intravitais em camundongos vivos; ou alternativamente, o extravasamento da sonda pode ser quantificado por estudos de colocalização com vasculatura sanguínea (por exemplo, CD31+ ou Endomucin+) e portas tmem usando microscopia de imunofluorescência. Os protocolos apresentados aqui descrevem ambas as técnicas, que poderiam ser usadas independentemente ou conjuntamente umas com as outras.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:681px;" width="682">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Anti-rabbit IgG (Alexa 488)</td>
			<td style="width:224px;">Life Technologies Corporation</td>
			<td style="width:155px;">A-11034</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-rat IgG (Alexa 647)</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>A-21247</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1600-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Citrate</td>
			<td>Eng Scientific Inc</td>
			<td>9770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cover Glass Slips</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72296-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cyanoacrylate Adhesive</td>
			<td>Henkel Adhesive</td>
			<td>1647358</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DAPI</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dextran-Tetramethyl-Rhodamine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T1287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DMEM/F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11320-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endomucin (primary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-65495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Enrofloxacin</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>84753076 v-06/2015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F2442</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fish Skin Gelatin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>G7765</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Insulin Syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isofluorane</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CB40234</td>
			<td>Artificial extracellular matrix</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Needle (30 G)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>PBS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene Tubing</td>
			<td>Scientific Commodities Inc</td>
			<td>BB31695-PE/1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pulse Oximeter</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>MouseOx</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Puralube Vet Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>NDC 17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quantum Dots</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>Q21561MP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber</td>
			<td>McMaster Carr</td>
			<td>1310N14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TMR (primary antibody)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A6397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tween-20</td>
			<td>MP Biologicals</td>
			<td>TWEEN201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylene</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>184835</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing tumor microenvironment of metastasis doorway-mediated vascular permeability associated with cancer cell dissemination using intravital imaging and fixed tissue analysis

A causa mais comum de mortalidade relacionada ao câncer é a metástase, um processo que requer a disseminação de células cancerosas do tumor primário para sítios secundários. Recentemente, nós estabelecemos que a disseminação da pilha de cancro no cancro da mama preliminar e em locais metastáticos no pulmão ocorre somente nas entradas chamadas MicroEnvironment do tumor da metástase (TMEM). O número da entrada de TMEM é prognóstico para o retorno distante da doença metastática em pacientes do cancro da mama. As portas de tmem são compostas de uma célula cancerosa que expresse sobre-expressa a proteína reguladora de actina Mena no contato direto com um macrófago perivascular, pró-angiogênicos que expresse níveis elevados de TIE2 e de VEGF, onde ambas estas pilhas são amarradas firmemente a um sangue célula endotelial do vaso. As células cancerosas podem intravasate através das entradas de TMEM devido à permeabilidade vascular transiente orquestradas pela atividade comum do macrófago TMEM-associado e da célula cancerosa TMEM-associada de Mena-expressando. Neste manuscrito, nós descrevemos dois métodos para a avaliação da permeabilidade vascular transiente TMEM-negociada: imagem latente intravital e a imunofluorescência fixa do tecido. Embora ambos os métodos tenham suas vantagens e desvantagens, combinar os dois pode fornecer as análises as mais completas da permeabilidade vascular tmem-negociada assim como pré-requisitos microambientais para a função de tmem. Desde o processo metastático no cancro da mama, e possivelmente outros tipos de cancro, envolve a disseminação da pilha do cancro através das entradas de TMEM, é essencial empregar métodos bem estabelecidos para a análise da atividade da entrada de TMEM. Os dois métodos descritos aqui fornecem uma abordagem abrangente para a análise da atividade de entrada de TMEM, seja em animais ingênuos ou farmacologicamente tratados, o que é de suma importância para os ensaios pré-clínicos de agentes que impedem a célula cancerosa disseminação via TMEM.

Os procedimentos experimentais descritos neste artigo do protocolo são resumidos brevemente e ilustrados na Figura 1A-C.
Para medir a permeabilidade vascular mediada por TMEM ("atividade de ruptura") e reduzir o ruído experimental de outros modos de permeabilidade vascular (isto é, transcelular e paracelular, como explicado na introdução), realizamos intravenoso (i.v.) injeção de sondas de alto peso molecular, tais como 155 kDa Dextran, con...

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Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and Fixed Tissue Analysis

Avaliando o microambiente do tumor da permeabilidade vascular entrada-negociada metástase associada com a disseminação da pilha do cancro usando a imagem latente intravital e a análise fixa do tecido

Nós descrevemos dois métodos para avaliar a permeabilidade vascular transiente associada com o microambiente do tumor da função da entrada da metástase (TMEM) e da intravasação da pilha de cancro usando a injeção intravenosa do dextrano high-molecular do peso (155 kDa) nos ratos. Os métodos incluem a imagem latente intravital em animais vivos e a análise fixa do tecido usando a imunofluorescência.

The most common cause of cancer related mortality is metastasis, a process that requires dissemination of cancer cells from the primary tumor to secondary ...

Essas técnicas complementares avaliam e medem a permeabilidade da vasculatura tumoral utilizando dextran de alto peso molecular. O protocolo de tecido fixo oferece maior cobertura tumoral, é de alto rendimento e não requer equipamento de imagem multifotono. Por outro lado, o protocolo de imagem intravital oferece informações em tempo real sobre a cinética, função e interação dinâmica das células no microambiente tumoral de metástase ou TMEM.Assim, os protocolos aqui apresentados permitem a medição direta da permeabilidade vascular dependente do TMEM que se correlaciona fortemente com a disseminação de células cancerosas, portanto esses protocolos podem ser utilizados para avaliar o potencial metastático dos tumores. Para gerar pedaços de tecido tumoral adequados para transplante, comece com eutanásia de camundongos portadores de tumores, conforme descrito no protocolo de texto. Coloque uma placa de Petri com meio de cultura celular DMEM/F12 no gelo no capô da fumaça.Leve o rato para o capô da fumaça e higienize o abdômen do rato com 70% de álcool etílico. Usando luvas estéreis e ferramentas cirúrgicas, remova os tumores e coloque-os na placa de Petri. Corte o tumor em pequenos pedaços, descartando porções necrosadas enquanto estiverem na placa de Petri.Para transplantar os pedaços do tumor em hospedeiros receptores, anestesizem camundongos que foram criados com macrófagos geneticamente modificados e rotulados fluorescentemente, conforme descrito no protocolo de texto. Reduza a anestesia para aproximadamente 3% de isofluorano e aplique pomada oftálmica aos olhos do camundongo para evitar a secagem. Remova o cabelo da quarta glândula mamária do rato.Depois de limpar a pele com antisséptico, use instrumentos esterilizados para fazer uma pequena incisão de aproximadamente dois a três milímetros apenas inferior ao quarto mamilo. Disseca até que a almofada de gordura mamária seja exposta. Pegue uma peça de tumor da placa de Petri e cubra em matriz extracelular artificial.Transplante de tumores sob a quarta almofada de gordura mamária. Feche a incisão usando adesivo de cianoacrilato. Por fim, adicione um mililitro de antibiótico enrofloxacina à água potável dos animais.Anestesiar o mouse e inserir um cateter da veia da cauda conforme descrito no protocolo de texto. Faça uma incisão longitudinal de linha média começando imediatamente superior aos genitais e leve a incisão até o nível do aspecto superior da quarta glândula mamária. Leve a incisão transversal ao aspecto superior da quarta glândula mamária.É fundamental evitar comprometer o suprimento de sangue neste momento. Estabilize a aba da pele afixando um pequeno pedaço de borracha rígida medindo dois por dois centímetros ao lado da pele da aba. Os tumores devem estar no centro da área sendo estabilizados pela borracha.Aplique uma pequena película de cianoacrilato na borda externa da moldura da janela de imagem feita sob medida. Agora aplique uma pequena gota de PBS no centro do vidro de cobertura. Evite o contato entre o cianoacrilato na moldura da janela e o PBS no vidro para evitar a polimerização prematura do cianoacrilato.Seque o tecido de retalho ao redor com um lenço de laboratório. Afixe a pequena janela de imagem na aba de tecido com o tumor no centro da abertura clara. Transfira o cateter anestoizado do rato e da veia da cauda para o estágio do microscópio.Tenha extrema cautela para garantir que o cateter da veia da cauda não caia. Neste ponto, realize imagens intravitais de longo prazo, conforme descrito no protocolo de texto e em nossa publicação anterior do JoVE. Para maior análise de rendimento e maior cobertura tumoral, use imunofluorescência em tecido fixo para avaliar a permeabilidade vascular mediada pelo TMEM.Para realizar a coloração da imunofluorescência, primeiro prepare as amostras como descrito no protocolo de texto e, em seguida, realize a recuperação de antígenos aquecendo as seções submersas em citrato perto do ponto de ebulição por 20 minutos. Depois de deixar as amostras esfriarem até a temperatura ambiente por 15 a 20 minutos, lave as amostras em PBS três vezes por dois minutos cada lavagem. Bloqueie por 60 a 90 minutos no tampão de bloqueio, em seguida, incubar amostras com uma mistura de ratos primários e anticorpos rápidos que visam a endomucina e a tetrametodamina, respectivamente.Após a incubação, lave as amostras três vezes em PBST por dois minutos cada. Incubar amostras com uma mistura de anticorpos de burro secundário contra Rat IgG e IgG rápido, em seguida, lave as amostras três vezes em PBST por dois minutos cada. Realize uma coloração da DAPI de rotina e monte os slides usando um meio de montagem dura sem glicerol.Armazene as amostras em um local escuro até a varredura. Para obter resultados ideais, escaneie os slides em um scanner de slides digital. Para realizar a análise de imagens, capture 10 campos de alta potência por caso usando qualquer software adequado para patologia digital.Salve os canais de endomucina e TMR separadamente como TIFF. Usando ImageJ, carregue os arquivos TIFF e converta-os em imagens de 8 bits. Limite as imagens de 8 bits ao nível do controle negativo e gere duas imagens binarizadas mostrando as máscaras de endomucina e TMR.A partir das ferramentas binárias, selecione Preencher furos na máscara de endomucina. Gere a imagem limiar do Dextran e salve-a como ROI do Dextran. Além disso, gere a imagem de endomucina limiar e salve-a como ROI Vascular e gere a imagem de endomucina invertida e salve-a como ROI extravascular.Em seguida, gere a imagem do ROI Extravascular e do ROI DoXtran e salve-a como ROI Extravascular Dextran. Finalmente salve toda a imagem como ROI tumoral. Divida a área extravascular do ROI do Dextran pela área do ROI tumoral e multiplique por 100 para gerar a área percentual que o Dextran Extravascular cobre em todo o tumor.Repita o processo para 10 a 20 campos de alta potência por caixa e gere um Dextran extravascular médio para cada caso. Mostrada aqui é uma imagem de uma glândula mamária saudável e em desenvolvimento dentro de um animal transgênico. A vasculatura é rotulada por TMR Dextran em vermelho, epitélio dúctil mamário é rotulado pela proteína fluorescente dendra2 em verde, e macrófagos são rotulados por uma proteína fluorescente ciano.Em contraste, um carcinoma dútil invasivo com rótulo de dendra2 é mostrado em um animal com macrófagos e vasos rotulados. Tecido pulmonar saudável foi visualizado através de uma janela de imagem pulmonar dentro de um rato com vasculatura rotulada. Metástases pulmonares são evidentes após a injeção de células tumorais em um animal transgênico com macrófagos rotulados e vasculatura.Aqui estão imagens intravitais de um filme de imagem intravital de alto peso molecular rotulado de Vasos neo-angiogênicos dentro de um carcinoma invasivo de dendra2 transplantado da mama. A linha amarela pontilhada denota o contorno da área de vazamento vascular transitório antes, durante e depois do evento de vazamento. Uma porta TMEM é capturada em imagens ao vivo.A imunofluorescência multicanal mostra endomucina, de alto peso molecular Dextran, sua imagem mesclada junto com o DAPI, bem como o vaso sanguíneo limiar correspondente e máscaras Extravasculares Dextran. A seção sequencial correspondente da imunohistoquímica TMEM também é mostrada. O perfil vascular afastado do TMEM aparece como um perfil vascular não vazado, enquanto o perfil vascular associado ao TMEM aparece como um perfil vascular vazado.É muito importante evitar o corte dos vasos sanguíneos que fornecem o tumor durante a exposição cirúrgica do tumor. A metodologia aqui descrita pode ser combinada com o tratamento medicamentoso, o mesmo que inibir a função TMEM, prevenir a permeabilidade vascular, ou até mesmo normalizar a vasculatura tumoral para medir seu impacto e eficácia. Com estes protocolos, demonstramos anteriormente que a quimioterapia aumenta a permeabilidade vascular e a disseminação de células cancerosas e, na verdade, que essas alterações pró-metastáticas podem ser contornadas pela coadministração de inibidores da função TMEM.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

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o<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal Modelo Disc Tumor: visualização e quantificação da expressão gênica e invasão tumoral Usando Mosaicos Genéticos

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Pesquisa do câncer

Longitudinal Intravital Imaging of Brain Tumor Cell Behavior in Response to an Invasive Surgical Biopsy

Imagem latente longitudinal de intravital do comportamento da pilha do tumor cerebral em resposta a uma biópsia cirúrgica invasora

Biopsies are standard of care for cancer treatment and are clinically beneficial as they allow solid tumor diagnosis, prognosis, and personalized ...

Micromanipulation of Circulating Tumor Cells for Downstream Molecular Analysis and Metastatic Potential Assessment

Micromanipulação de células tumorais circulantes para análise molecular a jusante e avaliação do potencial metastático

Blood-borne metastasis accounts for&#160;most cancer-related deaths and involves circulating tumor cells (CTCs) that are successful in establishing new ...

Analysis of Side Population in Solid Tumor Cell Lines

Análise da população lateral em linhas celulares tumorais sólidas

Cancer stem cells (CSCs) are an important cause of tumor growth, metastasis, and recurrence. Isolation and identification of CSCs are of great ...

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Análise patológica da metástase pulmonar após injeção lateral de cauda-veia de células tumorais

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Expanding the Comprehension of the Tumor Microenvironment using Mass Spectrometry Imaging of Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded Tissue Samples

Expandindo a compreensão do microambiente tumoral usando imagens de espectrometria de massa de amostras de tecido fixo e parafina

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Larvas de zebrafish como modelo para avaliar potenciais radiossensibilizadores ou protetores

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Multiparametric Tumor Organoid Drug Screening Using Widefield Live-Cell Imaging for Bulk and Single-Organoid Analysis

Triagem de Drogas Organoides Tumorais Multiparamétricas Usando Imagem de Células Vivas de Campo Amplo para Análise a Granel e Organoide Único

Patient-derived tumor organoids (PDTOs) hold great promise for preclinical and translational research and predicting the patient therapy response from ex ...

Multiplex Immunofluorescence and Spatial Image Analysis of the Tumor Microenvironment

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment (Video) | JoVE 

Imunofluorescência Multiplex Combinada com Análise Espacial de Imagens para Avaliação Clínica e Biológica do Microambiente Tumoral

The tumor microenvironment (TME) is composed of a plethora of different cell types, such as cytotoxic immune cells and immunomodulatory cells. Depending ...