Name: assessing tumor microenvironment of metastasis doorway-mediated vascular permeability associated with cancer cell dissemination using intravital imaging and fixed tissue analysis
Uploaded: 2019-06-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and F

Vi vill tacka analytisk Imaging Facility (AIF) i Albert Einstein College of Medicine för Imaging support. Detta arbete stöddes av bidrag från NCI (P30CA013330, CA150344, CA 100324 och CA216248), SIG 1S10OD019961-01, den Gruss-Lipper Biophotonics Center och dess integrerade Imaging program, och Montefiore ' s Ruth L. Kirschstein T32 utbildning beviljande av kirurger för studiet av tumören mikromiljö (CA200561).

GSK skrev manuskriptet, utförde Imaging för figur 1c och 3b, utvecklade fast vävnads analysprotokoll och analyserade och tolkade alla data; JMP skrev manuskriptet och utförde operationen och intravital avbildning för figur 1b, 2C och 3a; LB &AMP; AC utförde operationen och intravital avbildning för figur 2b; RJ utförde operationen och intravital avbildning för figur 2A; JSC skrev manuskriptet och analyserade och tolkade alla data; MHO co-skrev manuskriptet och analyserade och tolkade alla data; och de utförde operationen och intravital avbildning för figur 2D, co-skrev manuskriptet, utvecklat fast vävnad analys och intravital Imaging protokoll, och analyserade och tolkade alla data.

Alla experiment som använder levande djur måste utföras i enlighet med djur användnings-och skötsel riktlinjer och föreskrifter. De förfaranden som beskrivs i denna studie genomfördes i enlighet med National Institutes of Health förordningar om vård och användning av försöksdjur och med godkännande av Albert Einstein College of Medicine djuromsorg och användning Kommittén (IACUC).
1. utvärdering av "sprudlande permeabilitet" med levande djur avbildning
<ol><li>Transp...

Här skisserar vi två protokoll som kan tillämpas för att visualisera och kvantifiera en viss typ av vaskulär permeabilitet som finns på TMEM dörröppningar och är förknippad med störningar av vaskulära snäva och anhängare korsningar. Denna typ av vaskulär permeabilitet är övergående och kontrolleras av trepartsgruppen TMEM cell Complex, som förklaras ovan5. Förmågan att identifiera och kvantifiera TMEM-associerad vaskulär permeabilitet är avgörande för bedömningen av en Pr...

Senaste framstegen i vår förståelse av cancermetastaser har upptäckt att epitelial till mesenkymala övergång (EMT) och induktion av en flytt/invasiv cancer cell subpopulation är inte, i sig, tillräckligt för hematogen spridning 1. faktum är att det tidigare trodde att och målriktad cancerceller intravasate genom hela cancer-associerade endotelet som tumören kärlnybildning kännetecknas ofta av låga pericytbiologi täckning, och som sådan, är mycket permeabel och instabilt2,3,4. Även om mycket suggestiva av defekta funktioner inom tumören, vaskulära modifieringar under carcinogenes ger inte bevis i sig att tumörceller kan tränga igenom blodkärlen lätt och på ett okontrollerat sätt. Insikter från intravital Imaging (IVI) studier, där tumörceller är fluorescerande-märkta och kärlsystemet är märkt via intravenös injektion av fluorescerande sonder (såsom dextran eller kvantprickar), visar att, medan tumör fartyg är jämnt permeabel till låg molekylvikt dextrans (e.g. 70 kD), hög molekylvikt dextrans (155 kD) och tumörceller kan korsa endotelet endast på specialiserade platser för intravasation som företrädesvis ligger vid vaskulär gren punkt5, 6 , 7. immunohistokemiska (IHC) analyser med hjälp av djurmodeller och Human patient-härledda material har visat att dessa platser är "dörröppningar" som specialiserat sig på att reglera vaskulär permeabilitet, lokalt och transitivt, vilket ger ett kort fönster av möjlighet för flyttande/invasiva cancerceller att komma in i cirkulationen. Dessa dörröppningar kallas "tumör mikromiljö av metastaser" eller "tmem", och, ganska Expectedly, korrelerar deras densitet med en ökad risk att utveckla metastaserad sjukdom hos patienter med bröstcancer8,9, 10.
Varje TMEM dörröppning består av tre olika typer av celler: en perivaskulär makrofage, en tumör cell över-uttrycker aktin-reglerande protein däggdjur aktiverat (MENA), och en endotelcell, alla i direkt fysisk kontakt med varandra1, 5,9,10,11,12,13. Den viktigaste händelsen för funktionen av TMEM som en intravasation dörröppning är lokaliserad frisättning av vaskulär endotelial tillväxtfaktor (VEGF) på det underliggande kärlet av perivaskulär makrofage14. VEGF kan störa homotypiska korsningar mellan endotelceller15,16,17,18,19, ett fenomen som resulterar i övergående vaskulära läckage, även känd som "sprängning" permeabilitet enligt IVI-studierna 5. Tmem makrofager har visat sig uttrycka tyrosinkinasreceptorn TIE2, vilket krävs för VEGF-medierad tmem funktion och homing av dessa makrofager till perivaskulär nisch5,20,21 , 22. Förutom att reglera spridningen av cancerceller och metastaser har TIE2+ makrofager visats vara centrala regulatorer av tumör angiogenes21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31. Som sådan, TIE2+ makrofager representerar en kritisk beståndsdel i tumören mikromiljö och huvud regulator av metastaserad kaskad.
För att bättre konceptualisera tmem-medierad vaskulär permeabilitet (dvs "sprängning"), är det mycket viktigt att skilja den från andra former av vaskulär permeabilitet som inte är förknippade med upplösningen av endotelceller cell-cell korsningar. I en intakt endotel (en vars snäva och anhängare korsningar inte störs), det finns tre huvudsakliga typer av vaskulär permeabilitet: (a) pinocytosis, som kan, eller inte kan, kopplas till transcytosis av det intagna materialet; b) transport av material genom endotelfenestrae. och (c) transport av material genom den paracellulära vägen, som regleras av endoteliala täta korsningar15,16,17,18,19,32 , 33 , 34även avreglerad i många tumörer, de ovan nämnda lägena av vaskulär permeabilitet har beskrivits främst i samband med normal vävnadfysiologi och homeostas, vars ytterligheter är vävnader med antingen begränsad permeabilitet ( t. ex., blod-hjärnbarriären, blod-testis barriär), eller riklig permeabilitet (t. ex., Fenestrated kapillärer av njure glomerulär apparat)34,35,36,37.
Använda multiphoton intravital avbildning och multiplexade immunofluorescensmikroskopi, kan vi skilja mellan tmem-medierad vaskulär permeabilitet ("sprängning") och andra former av vaskulär permeabilitet i brösttumörer. För att uppnå detta, vi utför en enda intravenös injektion av en hög molekylvikt, Fluorescent-märkt sond i möss. Spontana sprängnings händelser kan sedan fångas med intravital avbildning i levande möss; Alternativt kan extravasering av sonden kvantifieras genom samtidig lokalisering studier med blodkärl (t. ex. CD31+ eller Endomucin+) och tmem dörröppningar med immunofluorescensmikroskopi. De protokoll som presenteras här beskriver båda dessa tekniker, som kan användas antingen självständigt eller tillsammans med varandra.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:681px;" width="682">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Anti-rabbit IgG (Alexa 488)</td>
			<td style="width:224px;">Life Technologies Corporation</td>
			<td style="width:155px;">A-11034</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-rat IgG (Alexa 647)</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>A-21247</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1600-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Citrate</td>
			<td>Eng Scientific Inc</td>
			<td>9770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cover Glass Slips</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72296-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cyanoacrylate Adhesive</td>
			<td>Henkel Adhesive</td>
			<td>1647358</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DAPI</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dextran-Tetramethyl-Rhodamine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T1287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DMEM/F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11320-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endomucin (primary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-65495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Enrofloxacin</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>84753076 v-06/2015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F2442</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fish Skin Gelatin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>G7765</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Insulin Syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isofluorane</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CB40234</td>
			<td>Artificial extracellular matrix</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Needle (30 G)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>PBS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene Tubing</td>
			<td>Scientific Commodities Inc</td>
			<td>BB31695-PE/1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pulse Oximeter</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>MouseOx</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Puralube Vet Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>NDC 17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quantum Dots</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>Q21561MP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber</td>
			<td>McMaster Carr</td>
			<td>1310N14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TMR (primary antibody)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A6397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tween-20</td>
			<td>MP Biologicals</td>
			<td>TWEEN201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylene</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>184835</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing tumor microenvironment of metastasis doorway-mediated vascular permeability associated with cancer cell dissemination using intravital imaging and fixed tissue analysis

Den vanligaste orsaken till cancerrelaterad dödlighet är metastaser, en process som kräver spridning av cancerceller från den primära tumören till sekundära platser. Nyligen, vi fastställt att Cancer Cell spridning i primär bröstcancer och vid metastaserande platser i lungorna sker endast vid dörröppningar kallas tumör mikromiljö av metastaser (TMEM). Tmem dörröppningen numrerar är prognostiska för avlägsen upprepning av metastaserad sjukdom i bröstcancer tålmodig. TMEM dörröppningar består av en cancer cell som över-uttrycker aktin reglerande proteinet Mena i direkt kontakt med en perivaskulär, proangiogen makrofage som uttrycker höga halter av TIE2 och VEGF, där båda dessa celler är tätt bundna till en blod kärl endotelcell. Cancerceller kan intravasate genom TMEM dörröppningar på grund av övergående vaskulär permeabilitet orkestreras av den gemensamma aktiviteten av TMEM-associerade makrofage och TMEM-associerade Mena-uttrycker cancer cell. I detta manuskript beskriver vi två metoder för bedömning av TMEM-medierad övergående vaskulär permeabilitet: intravital avbildning och fast vävnads immunofluorescens. Även om båda metoderna har sina fördelar och nackdelar, kombinera de två kan ge den mest kompletta analyser av tmem-medierad vaskulär permeabilitet samt kontrollerade förutsättningar för tmem funktion. Eftersom metastaserande process i bröstcancer, och möjligen andra typer av cancer, innebär Cancer Cell spridning via TMEM dörröppningar, är det viktigt att anställa väl etablerade metoder för analys av TMEM dörröppningen verksamhet. De två metoder som beskrivs här ger en övergripande strategi för analys av TMEM dörröppning aktivitet, antingen i naiva eller farmakologiskt behandlade djur, vilket är av största vikt för prekliniska prövningar av agenter som förhindrar cancer cell spridning via TMEM.

De experimentella procedurer som beskrivs i denna protokolls artikel sammanfattas kortfattat och illustreras i figur 1A-C.
För att mäta TMEM-medierad vaskulär permeabilitet ("sprängning aktivitet") och för att minska experimentella buller från andra former av vaskulär permeabilitet (dvs. transcellulära och paracellulära, som förklaras i inledningen), vi utfört intravenös (i.v.) injektion av högmolekylära sonder, såsom 155 kDa dextra...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and F

Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and Fixed Tissue Analysis

Bedömning tumör mikromiljö av metastaser Doorway-medierad vaskulär permeabilitet i samband med Cancer Cell spridning med Intravital avbildning och fast vävnads analys

Vi beskriver två metoder för att bedöma övergående vaskulär permeabilitet i samband med tumör mikromiljö av metastaser (TMEM) dörröppning funktion och cancer cell intravasation med hjälp av intravenös injektion av hög molekylvikt (155 kDa) dextran hos möss. Metoderna omfattar intravital avbildning i levande djur och fast vävnads analys med hjälp av immunofluorescens.

The most common cause of cancer related mortality is metastasis, a process that requires dissemination of cancer cells from the primary tumor to secondary ...

Dessa kompletterande tekniker utvärdera och mäta permeabiliteten av tumör vasculature med hjälp av hög-molekylär vikt Dextran. Den fasta-vävnad protokollet erbjuder större tumör täckning, är hög genomströmning, och kräver inte multiphoton bildframställning utrustning. Å andra sidan erbjuder det intravitatiska bildprotokollet realtidsinformation om kinetik, funktion och dynamiskt samspel mellan cellerna i tumörmikroomären av metastasering eller TMEM.Så protokollen som presenteras här möjliggör direkt mätning av TMEM-beroende vaskulär permeabilitet som starkt korrelerar med cancer cell spridning, därför dessa protokoll kan användas för att bedöma den metastaserande potential av tumörerna. För att generera bitar av tumörvävnad som lämpar sig för transplantation, börja med dödshjälp av tumörbärande möss som beskrivs i textprotokollet. Placera en petriskål med DMEM/F12 cellodlingsmedium på is i rökhuven.Ta med musen till rökhuven och sanera musens buk med 70 %etylalkohol. Använda sterila handskar och kirurgiska verktyg, ta bort tumörer och placera dem i Petri-skålen. Skär upp tumören i små bitar, kasta några nekrotiska portioner medan de är i Petri-skålen.För att transplantera tumörbitarna till mottagarvärdar, bedöva möss som har tagits upp med genetiskt modifierade, fluorescerande märkta makrofager som beskrivs i textprotokollet. Minska anestesin till cirka 3%isofluoran och applicera oftalmisk salva på ögonen på musen för att förhindra torkning. Ta bort hår från över den fjärde bröstkörtel av musen.Efter rengöring av huden med antiseptisk, använd steriliserade instrument för att göra ett litet snitt ungefär två till tre millimeter bara sämre än den fjärde bröstvårtan. Dissekera tills mammary fett pad är utsatt. Ta en tumör bit från Petriskålen och kappa i konstgjord extracellulär matris.Transplant tumörer under den fjärde bröstfett pad. Stäng snittet med hjälp av cyanoakrylatlim. Slutligen, tillsätt en milliliter enrofloxacin antibiotikum till djurens dricksvatten.Bedöva musen och sätt in en svansvenskateter enligt beskrivningen i textprotokollet. Gör en längsgående mittlinjen snitt med början omedelbart överlägsen könsorganen och bära snittet upp till nivån för den överlägsna aspekten av den fjärde bröstkörteln. Bär snittet tvärgående till den överlägsna aspekten av den fjärde bröstkörteln.Det är viktigt att undvika att äventyra blodtillförseln på denna punkt. Stabilisera hudfliken genom att fästa en liten bit styvt gummi som mäter två med två centimeter på flikens hudsida. Tumörerna bör vara i mitten av området som stabiliseras av gummit.Applicera en liten film av cyanoakrylat på den yttersta kanten av den skräddarsydda bildrutans fönsterkarm. Nu gäller en liten droppe PBS till mitten av täckglaset. Undvik kontakt mellan cyanoakrylatet på fönsterramen och PBS på glaset för att undvika för tidig polymerisering av cyanoakrylaten.Torka omgivande klaffvävnad med en laboratorium torka. Fäst det lilla bildfönstret på vävnadsfliken med tumören i mitten av den klara bländaren. Överför den sövda musen och svansvenkatetern till mikroskopstadiet.Var ytterst försiktig för att se till att svansvenkatetern inte faller ut. Vid denna punkt, utföra longterm intravital imaging som beskrivs i textprotokollet och i vår tidigare JoVE publikation. För högre genomströmningsanalys och större tumörtäckning, använd immunofluorescens i fast vävnad för att bedöma den TMEM-medierade kärlgenomsläppligheten.För att utföra immunofluorescensfärgning, förbered först proverna enligt beskrivningen i textprotokollet, utför sedan antigenhämtning genom att värma sektionerna nedsänkta i citrat nära kokpunkten i 20 minuter. Efter att ha låtit proverna svalna till rumstemperatur i 15 till 20 minuter, tvätta proverna i PBS tre gånger i två minuter varje tvätt. Blockera i 60 till 90 minuter i blockerande buffert, sedan inkubera prover med en blandning av primär råtta och snabba antikroppar som riktar endomucin och tetrametylramin respektive.Efter inkubationen, tvätta proverna tre gånger i PBST i två minuter vardera. Inkubera prover med en blandning av sekundära åsneantikroppar mot Rat IgG och snabb IgG, tvätta sedan proverna tre gånger i PBST i två minuter vardera. Utför en rutinmässig DAPI-färgning och montera objektglasen med hjälp av ett glycerolfritt hårt monteringsmedium.Förvara proverna på en mörk plats tills skanning. För optimalt resultat, skanna bilderna på en digital hel-slide scanner. För att utföra bildanalys, fånga 10 högeffektsfält per fall med hjälp av någon programvara som lämpar sig för digital patologi.Spara endomucin- och TMR-kanalerna separat som TIFF. Med hjälp av ImageJ laddar du upp TIFF-filerna och omvandlar dem till 8-bitarsbilder. Tröskelvärde 8-bitarsbilderna till nivån för den negativa kontrollen och generera två binarerade bilder som visar endomucin- och TMR-maskerna.Från verktygen Binär väljer du Fyll hål på endomucinmasken. Generera den tröskelvärde Dextran-bilden och spara den som Dextran ROI. Generera också den tröskelvärdet endomucin bilden och spara den som Vascular ROI och generera inverterad endomucin bilden och spara den som Extravascular ROI.Nästa generera den genomskärde Extravascular ROI och Dextran ROI-bilden och spara den som Extravascular Dextran ROI. Slutligen spara hela bilden som Tumor ROI. Dividera Extravascular Dextran ROI-området med Tumor ROI-området och multiplicera med 100 för att generera det procentiga område som Extravascular Dextran täcker i hela tumören.Upprepa processen för 10 till 20 högeffektsfält per ärende och generera en genomsnittlig Extravascular Dextran för varje enskilt fall. Visas här är en bild av en frisk, utvecklande bröstkörtel inom ett transgent djur. Vasculaturen är märkt av TMR Dextran i rött, bröstt duktilepitelet är märkt av fluorescerande proteinet dendra2 i grönt, och makrofager är märkta av ett cyanfluorescerande protein.Däremot visas en transplanterad dendra2-märkt invasiv segtarcinom i ett djur med märkta makrofager och kärl. Friska lungvävnad visualiserades genom en lung-imaging fönster inom en mus med märkta vasculature. Lung metastaser är uppenbart efter injektion av tumörceller i en transgena djur med märkta makrofager och vasculature.Visas här är stillbilder från en tidsfördärvad intravital bildbehandling film av hög molekylvikt Dextran-märkta neo-angiogenic fartyg inom en transplanterad dendra2-märkt invasiv carcinom av bröstet. Den streckade gula linjen betecknar konturen av det transienta vaskulära läckageområdet före, under och efter läckagehändelsen. En TMEM dörröppning fångas i live imaging.Flerkanals immunfluorescens visar endomucin, hög-molekylvikt Dextran, deras sammanslagna bild tillsammans med DAPI, liksom motsvarande thresholded blodkärl och Extravascular Dextran masker. Motsvarande sekventiella avsnitt av TMEM immunohistokemi visas också. Kärlprofilen bort från TMEM visas som en icke-läckande Vaskulär profil, medan TMEM-associerade Vaskulär profil visas som en läckande Vaskulär profil.Det är mycket viktigt att undvika att skära blodkärlen som försörjer tumören under den kirurgiska exponeringen av tumören. Den metod som beskrivs här kan kombineras med läkemedelsbehandling, samma som hämmar TMEM funktion, förhindra vaskulär permeabilitet, eller ens normalisera tumör vasculature att mäta deras inverkan och effekt. Med detta protokoll har vi tidigare visat att kemoterapi förbättrar vaskulär permeabilitet och cancer cell spridning och faktiskt att dessa pro-ögonbevarande förändringar kan kringgås genom co-administration av hämmare av TMEM funktion.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

De<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal skiva Tumör Modell: Visualisering och kvantifiering av genuttryck och tumör invasiv använda genetiska mosaiker

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Longitudinal Intravital Imaging of Brain Tumor Cell Behavior in Response to an Invasive Surgical Biopsy

Longitudinell Intravital avbildning av hjärntumör cell beteende som svar på en invasiv kirurgisk biopsi

Biopsies are standard of care for cancer treatment and are clinically beneficial as they allow solid tumor diagnosis, prognosis, and personalized ...

Micromanipulation of Circulating Tumor Cells for Downstream Molecular Analysis and Metastatic Potential Assessment

Micromanipulation av cirkulerande tumör celler för nedströms molekylär analys och metastatisk potentiell bedömning

Blood-borne metastasis accounts for&#160;most cancer-related deaths and involves circulating tumor cells (CTCs) that are successful in establishing new ...

Analysis of Side Population in Solid Tumor Cell Lines

Analys av sidopopulation i solida tumör cellinjer

Cancer stem cells (CSCs) are an important cause of tumor growth, metastasis, and recurrence. Isolation and identification of CSCs are of great ...

Pathological Analysis of Lung Metastasis Following Lateral Tail-Vein Injection of Tumor Cells

Patologisk analys av lungmetastasering efter lateral svansveninjektion av tumörceller

Metastasis, the primary cause of morbidity and mortality for most cancer patients, can be challenging to model preclinically in mice. Few spontaneous ...

A Label-Free Segmentation Approach for Intravital Imaging of Mammary Tumor Microenvironment

En etikettfri segmenteringsmetod för intravital avbildning av brösttumörmikromiljö

The ability to visualize complex and dynamic physiological interactions between numerous cell types and the extracellular matrix (ECM) within a live tumor ...

Expanding the Comprehension of the Tumor Microenvironment using Mass Spectrometry Imaging of Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded Tissue Samples

Utöka förståelsen av tumörmikromiljön med hjälp av masspektrometriavbildning av formalinfixerade och paraffininbäddade vävnadsprover

Advances in immune-based therapies have revolutionized cancer treatment and research. This has triggered growing demand for the characterization of the ...

Zebrafish Larvae as a Model to Evaluate Potential Radiosensitizers or Protectors

Zebrafisklarver som modell för att utvärdera potentiella radiosensibiliserare eller beskyddare

Zebrafish are extensively used in several kinds of research because they are one of the easily maintained vertebrate models and exhibit several features ...

Multiparametric Tumor Organoid Drug Screening Using Widefield Live-Cell Imaging for Bulk and Single-Organoid Analysis

Multiparametrisk tumörorganoid läkemedelsscreening med hjälp av Widefield Live-Cell Imaging för bulk- och enorganoidanalys

Patient-derived tumor organoids (PDTOs) hold great promise for preclinical and translational research and predicting the patient therapy response from ex ...

Multiplex Immunofluorescence and Spatial Image Analysis of the Tumor Microenvironment

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment (Video) | JoVE 

Multiplex immunofluorescens kombinerad med rumslig bildanalys för klinisk och biologisk bedömning av tumörmikromiljön

The tumor microenvironment (TME) is composed of a plethora of different cell types, such as cytotoxic immune cells and immunomodulatory cells. Depending ...