Name: use of a wireless video-eeg system to monitor epileptiform discharges following lateral fluid-percussion induced traumatic brain injury
Uploaded: 2019-06-21T14:00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Use of a Wireless Video-EEG System to Monitor Epileptiform Discharges Following Lateral Fluid-Percussion Induced Traumatic Brain Injury at JoVE.com

Wij willen Paul Dressel bedanken voor zijn onschatbare steun in het grafisch ontwerp en de voorbereiding van figuren.

Alle procedures werden goedgekeurd door en volgden richtlijnen van de Universiteit bij de institutionele dierlijke zorg en het gebruiks Comité van buffels.
1. Fluid percussie blessure
<ol><li>Draag een lab jas of chirurgische jurk, chirurgisch masker, chirurgische handschoenen, en het hoofdbedekking en steriliseren alle gereedschappen en materialen die contact opnemen met de chirurgische site.</li>
	<li>Verdoven een 10-12-week-oude, mannelijke, Wistar rat (350-400 g) met 3% Isofluraan en 1 L/min zuurstof in een inductie kamer van passende grootte voor ratten. Verwijder de rat uit de inductie kamer en verplaats het naar de prep gebied zodra het bewusteloos is. Zet de steriele oogheelkundige zalf in beide ogen.</li>
	<li>Scheer het haar op het hoofd van de rat met elektrische tondeuse met een #40 mes van net boven de ogen naar de caudale basis van de oren om genoeg chirurgische veld te produceren. Verwijder alle losse, geknipt haar van de site.</li>
	<li>Reinig de chirurgische site door het toepassen van 2% chloorhexidine scrub om de geschoren hoofdhuid, gevolgd door 70% ethanol. Begin bij het centrum en ga naar buiten in concentrische cirkels uit de buurt van de incisie site. Herhaal dit proces 3 keer. Breng Betadine oplossing op de site op dezelfde manier en mag drogen.</li>
	<li>Plaats de verdoofd rat in de stereotaxische frame en onderhouden anesthesie op 2-3% Isofluraan-1 L/min zuurstof via neus. Controleer of het verlies van terugtrekking reflex van achterpoten en het verlies van palpebrale reflex om ervoor te zorgen de rat is in een chirurgisch vlak van anesthesie.</li>
	<li>Controleer de ademhalingssnelheid, de hartslag, de lichaamstemperatuur en de zuurstofverzadiging gedurende de hele operatie. Handhaaf hartslag tussen 300-400 BPM, en SpO2 boven 90%. Opmerking: een puls-Oximeter bevestigd aan een achterste voet kan worden gebruikt om de constante te lezen uit de hartslag en SpO2te bieden. Een hartslag boven de 400 BPM geeft aan dat de rat niet voldoende verdoofd is. Een zelfregulerende opwarming pad, gekoppeld aan een rectale thermometer, ingesteld op 37 ° c, kan worden geplaatst onder de rat gedurende de operatie om de lichaamstemperatuur te handhaven. Een stereomicroscoop met een lichtbron in combinatie met een optische vezel lamp zijn nuttig voor het visualiseren van de procedure.</li>
	<li>Gebruik een 23 g naald te injecteren 0,5% bupivacaïne hydrochloride intradermally in de hoofdhuid op de incisie site voor lokale analgesie 10-15 minuten voorafgaand aan het maken van een incisie.</li>
	<li>Maak een 1,5-2,5 cm middellijn incisie door de huid en de spieren van de hoofdhuid met behulp van een #10 scalpel mes. Trek de huid en spieren om de schedel bloot en zorgen voor een duidelijk chirurgisch veld. Weerspiegelen de onderliggende fascia en vetweefsel weg van het bot met steriele wattenstaafjes. Opmerking: een elektrische cauterisatie eenheid is handig voor het bereiken van snelle hemostase.</li>
	<li>Scheren de laterale nok van de linker pariëtale bot met behulp van een chirurgische curette om een gladde vlakke ondergrond te produceren, zodat de basis van de vrouwelijke-vrouwelijke Luer Lock hub kan rusten met de schedel.</li>
	<li>Irrigatie het schedel oppervlak en de omliggende weefsels met 2,0 mg/mL gentamicine oplossing in steriele zout. Blot overtollige oplossing met een steriele wattenstaafjes.</li>
	<li>Breng 3% waterstofperoxide aan op de schedel om het bot te drogen. Nota: als het been niet voldoende droog is zal het tand cement niet behoorlijk aanhangen en vormt een stevige verbinding.</li>
	<li>Maak een 5 mm diameter craniectomy site via de linker pariëtale bot. Nota: een trephine beetje dat in een machts boor wordt geplaatst die aan het stereotactische kader wordt gehecht kan nuttig zijn om de craniectomy in werking te stellen. Gebruik een handboor met een diameter van 5 mm trephine om de craniectomy langzaam af te maken door het resterende bot. Wanneer dicht bij het voltooien van de craniectomy, roteer de trephine in omgekeerde om breuk van de onderliggende dura mater te verhinderen. Er zal een dunner worden van de schedel rond de omtrek van de schijf en de schedel flap voelt los wanneer het licht wordt ingedrukt.</li>
	<li>Verwijder de bone flap met de chirurgische curette en glad weefsel Tang. Opmerking: sommige bloeden kan optreden, maar hemostase kan snel worden bereikt door het toepassen van zachte druk met steriele wattenstaafjes.</li>
	<li>Gebruik een stereomicroscoop en verlichting om visueel te inspecteren de Dura voor tekenen van breuk.  Een dunne rand van het bot zal blijven rond de omtrek van de craniectomy site.  Voorzichtig verwijderen van deze velg met gladde weefsel Tang zorg niet te scheuren de Dura.</li>
	<li>Zwabber de schedel met 70% ethylalcohol om om het even welk beenstof te verwijderen en de schedel te drogen.</li>
	<li>Breng een dun laagje cyanoacrylaat gel lijm aan de onderkant van de Luer Lock hub en Beveilig het aan de schedel over de craniectomy zonder de opening te belemmeren. Wees voorzichtig om de lijm niet in contact te brengen met de Dura. Verder, afdichting van de Luer-Lock op zijn plaats met een extra dun laagje lijm rond de buitenkant van de naaf.</li>
	<li>Bereid een drijfmest van tand cement. Breng het cement op het oppervlak van de schedel rond en over de basis van de Luer Lock hub om het te beveiligen op zijn plaats.</li>
	<li>Vul de Luer Lock hub met een steriele conserveermiddel vrije kunstmatige cereberal spinale vloeistof (CB) oplossing (pH 7,4) met behulp van een spuit en naald, zodat een convexe bolus van zoute kan worden gezien boven de bovenkant van de velg. Opmerking: de oplossing houdt de Dura vochtig als de tandheelkundige cement droogt en fungeert als een indicatie van de integriteit van het zegel. Als het oplossings niveau helemaal daalt, is dat een indicatie van een lek in het systeem en moet het Luer-slot verwijderd en vervangen worden.</li>
	<li>Zodra de tandheelkundige cement volledig is genezen, stop gas anesthesie en verwijder de rat uit de stereotaxische frame.</li>
	<li>Plaats de rat op een platform naast het FPI apparaat.</li>
	<li>De FPI apparaat heeft een gebogen metalen tip die zich uitstrekt van de druk transducer aan het einde van het vloeistof reservoir. Beveilig een lengte van 12 cm van de druk slang aan het einde van de gebogen tip met het tegenovergestelde uiteinde eindigend in een 2 cm mannelijke Luer lock twist connector. Beveilig de rat aan de FPI apparaat door het aansluiten van de vrouwelijke uiteinde van de naaf op de schedel van de rat aan de mannelijke connector. Opmerking: Zorg ervoor dat de verbinding stevig is beveiligd en dat alle luchtbellen zijn verwijderd uit het systeem.</li>
	<li>Plaats het dier in sternal lighouding en herhaaldelijk te controleren op terugkeer van de terugtrekking reflex. Zodra de rat herwonnen terugtrekking reflex, maar is nog steeds verdoofd, laat de slinger van de FPI apparaat om een enkele 20 MS druk puls veroorzaken en verwondingen induceren. Nota: het is belangrijk om de verwonding niet te veroorzaken terwijl het dier diep verdoofd is aangezien dit neigt om verhoogde mortaliteit toe te schrijven aan neurogene-veroorzaakt longoedeem. Alle apparaten tonen variabiliteit. Echter, op het apparaat dat wordt gebruikt voor dit experiment, een 17 ° hoek plaatsing van de hamer produceert een 2,2-2,3 atmosferische druk puls. Ongewonden, Sham dieren ondergaan alle van dezelfde procedures, met uitzondering van de werkelijke vloeistof puls aan de induceren letsel.</li>
	<li>Ontkoppel onmiddellijk de rat van het FPI apparaat na verwonding, plaats het in strenge lighouding, en voorzie supplementaire zuurstof (1 L/min) via een neuskegel tot de spontane ademhaling terugkeert. Apnea is een verwachte gevolg van de schade. Indien nodig, bieden periodieke handmatige ademhaling via een zak ventiel masker totdat de rat begint spontaan ademen op zijn eigen. Opmerking: typisch, apneu duurt minder dan 2 min. Een voorbijgaande snelle stijging van de hartslag (> 500 BPM) wordt waargenomen onmiddellijk na de toediening van de druk puls als gevolg van een Catecholamine burst. Dit kan worden gecontroleerd met een puls Oximeter bevestigd aan de voet van de rat en kan dienen als een mogelijke indicatie dat een ernstige verwonding heeft plaatsgevonden.</li>
	<li>Monitor de rat continu en registreer de tijd van de terugkeer van de juiste reflex (stabiele ambulation op alle vier de ledematen).</li>
	<li>De omvang van de atmosferische druk puls voor elke rat moet worden binnen ± 0,05 atmosferen van elkaar. Bevestig dat elk van de druk impuls een vlot signaal op de oscilloscoop met verenigbare omvang en duur veroorzaakt. Opmerking: een lawaaierig signaal kan aangeven luchtbellen in het systeem dat moet worden verwijderd voordat het leveren van de schade puls. Atmosferische druk pulsen die een ernstige verwonding te produceren, in dit experiment, zijn die meestal resulteren in dierlijke juiste tijden van 30-60 min. Dit bereik van de juiste tijden worden geassocieerd met een sterftecijfer van ongeveer 40-50%).</li>
	<li>Toegediend 10 mL van de voorverwarmde zoutoplossing onderhuids als ondersteunende zorg.</li>
	<li>Terug de rat naar zijn huis kooi en laat het te herstellen voor ten minste 4 uur. Nota: de verhoogde mortaliteit is waargenomen wanneer de ratten onmiddellijk terug onder anesthesie worden geplaatst.</li>
</ol>2. implantatie van corticale EEG-elektroden en video-EEG-opname
<ol><li>Op 4 uur na de blessure, verdoven de rat zoals eerder beschreven en plaats deze terug in de stereotactische frame om de Luer Lock hub en tandheelkundige cement te verwijderen. Nota: de hub en het cement zullen gemakkelijk met gematigde druk breken. Bij het verwijderen van de naaf, Controleer zorgvuldig voor eventuele breuk of beschadiging van de Dura. Onmiddellijk euthanaseren elk dier met schade aan de Dura.</li>
	<li>Breng een kleine druppel van 0,5% bupivacaïne hydrochloride aan de schedel in elk van de locaties waar 5 pilot gaten moeten worden geboord (Zie Figuur 1).</li>
	<li>Boor pilot gaten door de schedel met een hand-held 0,1 mm boor bit.</li>
	<li>Beveilig een roestvrijstalen elektrode schroef in elk pilot gat op de volgende locaties: een referentie schroef is geplaatst caudale aan de Lambda over de kleine hersenen. De elektroden van de opname worden geplaatst: 1) over de hemisfeer ipsilaterale en rostrale aan craniectomy; 2) over de hemisfeer ipsilaterale en caudale aan craniectomy; 3) over de hemisfeer contralaterale en rostrale aan craniectomy; 4) over de hemisfeer contralaterale en caudale aan craniectomy.</li>
	<li>Zwabber de schedel met 70% ethylalcohol om om het even welk beenstof te verwijderen.</li>
	<li>Bedek de craniectomy site met een dun laagje steriele Bone Wax om de blootgestelde Dura te dekken.</li>
	<li>Sluit een elektrode array aan de 5 EEG-elektroden door het inpakken van de blootgestelde uiteinde van een kleurgecodeerde elektrode draad stevig rond zijn aangewezen roestvast stalen elektrode schroef. Opmerking: de tegenovergestelde uiteinden van elke elektrode draad is geplaatst in een specifieke, aangewezen locatie binnen de voetstuk connector.</li>
	<li>Bereid een drijfmest van het bot cement.</li>
	<li>Verzamel de elektrodedraden in een spoel onder het voetstuk en beveilig de draden en het voetstuk op zijn plaats met beencement. Houd het voetstuk in positie totdat het bot cement heeft genezen. Opmerking: het bot moet in het bijzonder droog en leeg zijn van een overblijvend bloed om een goede hechting te bereiken en vroegtijdige verwijdering van de borstband te voorkomen.</li>
	<li>Bevestig de draadloze zender met verse batterijen op de sokkel voordat u het dier uit de stereotactische frame.</li>
	<li>Plaats het dier in zijn huis kooi en plaats de kooi in de nabijheid van de ontvanger en in het zicht van een aangewezen videocamera. Initiëren video/EEG opname.</li>
</ol>3. verzameling van video-EEG-opnames
<ol><li>Voorafgaand aan het verzamelen van EEG-signalen, doe een frequentiebereik van de kamer waar ratten zullen worden gehuisvest voor EEG collectie om eventuele storende frequenties te identificeren om de verzameling van EEG-opname te voorkomen met een frequentie die achtergrondgeluid heeft.</li>
	<li>Stel alle zenders in op specifieke frequenties die vrij zijn van interferentie.</li>
	<li>Stel de sampling frequentie en het invoerbereik van elke programmeerbare zender in. Opmerking: dit kan worden gedaan met behulp van een slimme tool die door de fabrikant van het systeem. Zenders kunnen samplen met een maximumsnelheid van 1000 Hz, en een maximaal ingangsbereik van ± 10 mV. In dit experiment, EEG-opnames tussen 0,5 Hz tot 30 Hz werden geanalyseerd. Daarom werd de sample rate vastgesteld op 250 Hz. We observeren doorgaans amplitudes van minder dan 1 mV. Het ingestelde invoerbereik bedroeg dus ± 2 mV.</li>
	<li>Gebruik EEG collectie software die door de fabrikant om continu record video-EEG begin op de dag van de schade koppelen van elke draadloze zender via een unieke frequentie naar een specifieke ontvanger. Opmerking: elke zender receiver pair is in staat om de controle 4 monopolaire EEG-kanalen, en versnelling in de X, Y en Z vliegtuigen. EEG-gegevens kunnen worden weggeschreven naar een opslagserver. De videogegevens moeten worden opgeslagen op een NAS-apparaat dat is gekoppeld aan de opslagserver. De EEG-analyse software synchroniseert de video-en EEG-opname op basis van de tijd die wordt bijgehouden door de opslagserver.</li>
	<li>Gebruik de video collectie software om video van elke rat opnemen met een eigen 2 MP resolutie camera (1920 x 1080) geconfigureerd om op te nemen op 30 frames/s. Opmerking: elke camera heeft zijn eigen infraroodverlichting voor video-collectie 's nachts.</li>
	<li>Configureer het systeem om alle video-en EEG-opnames automatisch op te slaan op een opslagserver om de 24 uur. De Video's produceren nogal grote bestanden.</li>
</ol>4. video/EEG-analyse
<ol><li>Synchroniseer de video met elke EEG-opname op 1/10 s resolutie. Doe dit met behulp van de systeem fabrikanten video/EEG-analyse software die een metabestand met de stempel van de precieze tijd van zowel de EEG en de video creëert.</li>
	<li>Handmatig scherm door middel van EEG-opnames te identificeren index gebeurtenissen die inbeslagneming activiteit te definiëren.</li>
	<li>Met behulp van de video/EEG-analyse software en index EEG evenementen, maak een configuratie bestand dat de belangrijkste parameters gebruikt (dat wil zeggen, de macht in specifieke frequentiebanden, de verhouding van de frequentiebanden om de totale macht, acceleratie drempel, enz.) om de kenmerken te definiëren van de potentiële inbeslagneming evenementen.</li>
	<li>Voer de EEG-analyse software om potentiële regio's van EEG-opname die in aanmerking komen op basis van de parameters geselecteerd in het configuratie bestand te identificeren. Opmerking: de EEG-analyse-software zorgt voor automatische inbeslagneming detectie en Highlights regio's van belang in de EEG-signalen en biedt FFT Power spectrum analyse over het signaal.</li>
	<li>Bevestig potentiële convulsieve aanvallen met behulp van video-opnames verzameld tijdens de overname, die worden gesynchroniseerd met de respectieve ratten van elk EEG-opnames.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Flanagan, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invited+Commentary+on+Centers+for+Disease+Control+and+Prevention+Report+to+Congress:+Traumatic+Brain+Injury+in+the+United+States:+Epidemiology+and+Rehabilitation.">Invited Commentary on Centers for Disease Control and Prevention Report to Congress: Traumatic Brain Injury in the United States: Epidemiology and Rehabilitation.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 96, 1753-1755 (2015).</li><li>Annegers, J. F., Coan, S. P., Hauser, W. A., Leestma, J., Duffell, W., Tarver, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epilepsy,+vagal+nerve+stimulation+by+the+NCP+system,+mortality,+and+sudden,+unexpected,+unexplained+death.">Epilepsy, vagal nerve stimulation by the NCP system, mortality, and sudden, unexpected, unexplained death.</a> Epilepsia. 39, 206-212 (1998).</li><li>Lowenstein, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epilepsy+after+head+injury:+an+overview.">Epilepsy after head injury: an overview.</a> Epilepsia. 50, 4-9 (2009).</li><li>Englander, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analyzing+risk+factors+for+late+posttraumatic+seizures:+a+prospective,+multicenter+investigation.">Analyzing risk factors for late posttraumatic seizures: a prospective, multicenter investigation.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 84, 365-373 (2003).</li><li>Faul, M. X. L., Wald, M. M., Coronado, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+Brain+Injury+in+the+United+States:+Emergency+Department+Visits,+Hospitalizations+and+Deaths+2002-2006.">Traumatic Brain Injury in the United States: Emergency Department Visits, Hospitalizations and Deaths 2002-2006.</a> Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Injury Prevention and Control. , (2010).</li><li>Herman, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epilepsy+after+brain+insult:+targeting+epileptogenesis.">Epilepsy after brain insult: targeting epileptogenesis.</a> Neurology. 59, 21-26 (2002).</li><li>Annegers, J. F., Coan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+risks+of+epilepsy+after+traumatic+brain+injury.">The risks of epilepsy after traumatic brain injury.</a> Seizure. 9, 453-457 (2000).</li><li>Christensen, J., Pedersen, M. G., Pedersen, C. B., Sidenius, P., Olsen, J., Vestergaard, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+risk+of+epilepsy+after+traumatic+brain+injury+in+children+and+young+adults:+a+population-based+cohort+study.">Long-term risk of epilepsy after traumatic brain injury in children and young adults: a population-based cohort study.</a> Lancet. 373, 1105-1110 (2009).</li><li>Webb, T. S., Whitehead, C. R., Wells, T. S., Gore, R. K., Otte, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurologically-related+sequelae+associated+with+mild+traumatic+brain+injury.">Neurologically-related sequelae associated with mild traumatic brain injury.</a> Brain Injury. 29, 430-437 (2015).</li><li>Mahler, B., Carlsson, S., Andersson, T., Adelow, C., Ahlbom, A., Tomson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unprovoked+seizures+after+traumatic+brain+injury:+A+population-based+case-control+study.">Unprovoked seizures after traumatic brain injury: A population-based case-control study.</a> Epilepsia. 56, 1438-1444 (2015).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-traumatic+seizures--a+prospective,+multicenter,+large+case+study+after+head+injury+in+China.">Post-traumatic seizures--a prospective, multicenter, large case study after head injury in China.</a> Epilepsy Research. 107, 272-278 (2013).</li><li>Simonato, M., French, J. A., Galanopoulou, A. S., O'Brien, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Issues+for+new+antiepilepsy+drug+development.">Issues for new antiepilepsy drug development.</a> Current Opinion in Neurology. 26, 195-200 (2013).</li><li>Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+traumatic+brain+injury.">Animal models of traumatic brain injury.</a> Nature Review Neuroscience. 14, 128-142 (2013).</li><li>Kharatishvili, I., Nissinen, J. P., McIntosh, T. K., Pitkanen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+posttraumatic+epilepsy+induced+by+lateral+fluid-percussion+brain+injury+in+rats.">A model of posttraumatic epilepsy induced by lateral fluid-percussion brain injury in rats.</a> Neuroscienc. 140, 685-697 (2006).</li><li>McIntosh, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+brain+injury+in+the+rat:+characterization+of+a+lateral+fluid-percussion+model.">Traumatic brain injury in the rat: characterization of a lateral fluid-percussion model.</a> Neuroscience. 28, 233-244 (1989).</li><li>Thompson, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lateral+fluid+percussion+brain+injury:+a+15-year+review+and+evaluation.">Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation.</a> Journal of Neurotrauma. 22, 42-75 (2005).</li><li>Curia, G., Eastman, C. L., Miller, J. W., D'Ambrosio, R., Laskowitz, D., Grant, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+Post-Traumatic+Epilepsy+for+Therapy+Development.">Modeling Post-Traumatic Epilepsy for Therapy Development.</a> Translational Research in Traumatic Brain Injury. , (2016).</li><li>D'Ambrosio, R., Fairbanks, J. P., Fender, J. S., Born, D. E., Doyle, D. L., Miller, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-traumatic+epilepsy+following+fluid+percussion+injury+in+the+rat.">Post-traumatic epilepsy following fluid percussion injury in the rat.</a> Brain. 127, 304-314 (2004).</li><li>Saatman, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classification+of+traumatic+brain+injury+for+targeted+therapies.">Classification of traumatic brain injury for targeted therapies.</a> Journal of Neurotrauma. 25, 719-738 (2008).</li><li>Smith, D., Brooke, D., Wohlgehagen, E., Rau, T., Poulsen, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+and+Spatial+Changes+in+the+Pattern+of+Iba1+and+CD68+Staining+in+the+Rat+Brain+Following+Severe+Traumatic+Brain+Injury.">Temporal and Spatial Changes in the Pattern of Iba1 and CD68 Staining in the Rat Brain Following Severe Traumatic Brain Injury.</a> Modern Research in Inflammation. 4, 9-23 (2015).</li><li>Ndode-Ekane, X. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Harmonization+of+lateral+fluid-percussion+injury+model+production+and+post-injury+monitoring+in+a+preclinical+multicenter+biomarker+discovery+study+on+post-traumatic+epileptogenesis.">Harmonization of lateral fluid-percussion injury model production and post-injury monitoring in a preclinical multicenter biomarker discovery study on post-traumatic epileptogenesis.</a> Epilepsy Research. 151, 7-16 (2019).</li><li>Ciszek, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Informatics+tools+to+assess+the+success+of+procedural+harmonization+in+preclinical+multicenter+biomarker+discovery+study+on+post-traumatic+epileptogenesis.">Informatics tools to assess the success of procedural harmonization in preclinical multicenter biomarker discovery study on post-traumatic epileptogenesis.</a> Epilepsy Research. 150, 17-26 (2019).</li><li>Immonen, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Harmonization+of+pipeline+for+preclinical+multicenter+MRI+biomarker+discovery+in+a+rat+model+of+post-traumatic+epileptogenesis.">Harmonization of pipeline for preclinical multicenter MRI biomarker discovery in a rat model of post-traumatic epileptogenesis.</a> Epilepsy Research. 150, 46-57 (2019).</li><li>Kamnaksh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Harmonization+of+pipeline+for+preclinical+multicenter+plasma+protein+and+miRNA+biomarker+discovery+in+a+rat+model+of+post-traumatic+epileptogenesis.">Harmonization of pipeline for preclinical multicenter plasma protein and miRNA biomarker discovery in a rat model of post-traumatic epileptogenesis.</a> Epilepsy Research. 149, 92-101 (2019).</li><li>Redell, J. B., Moore, A. N., Ward, N. H., Hergenroeder, G. W., Dash, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+traumatic+brain+injury+alters+plasma+microRNA+levels.">Human traumatic brain injury alters plasma microRNA levels.</a> Journal of Neurotrauma. 27, 2147-2156 (2010).</li><li>Smith, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Convulsive+seizures+and+EEG+spikes+after+lateral+fluid-percussion+injury+in+the+rat.">Convulsive seizures and EEG spikes after lateral fluid-percussion injury in the rat.</a> Epilepsy Research. 147, 87-94 (2018).</li><li>Eastman, C. L., Fender, J. S., Temkin, N. R., D'Ambrosio, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+methods+for+epilepsy+therapy+development+using+an+etiologically+realistic+model+of+focal+epilepsy+in+the+rat.">Optimized methods for epilepsy therapy development using an etiologically realistic model of focal epilepsy in the rat.</a> Experimental Neurology. 264, 150-162 (2015).</li><li>Shultz, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+structural+or+functional+changes+following+traumatic+brain+injury+in+the+rat+predict+epileptic+outcome.">Can structural or functional changes following traumatic brain injury in the rat predict epileptic outcome.</a> Epilepsia. 54, 1240-1250 (2013).</li></ol>

Chelasea R Richardson is een medewerker van emka Scientific, de leverancier van dit draadloze telemetrie systeem beschreven.

Er is aanzienlijke variabiliteit gerapporteerd tussen laboratoria met betrekking tot de specifieke parameters en methoden die worden gebruikt voor de FPI TBI model 14,26,27,28. Deze inconsistenties hebben geresulteerd in tegenstrijdige resultaten en maken het moeilijk om de inspanningen en uitkomsten tussen de laboratoria te harmoniseren. Hier hebben we een gedetailleerde methodologie voor het beschrijven van onze aanpak van de lange termijn, continue opname van video/EEG te controleren voor post-traumatische epileptiform activiteit. Een aantal stappen zijn van cruciaal belang voor het genereren van reproduceerbare resultaten met de beschreven methode.
Ten eerste, aangezien de incidentie van post-traumatische epilepsie correleert met de ernst van de verwondingen, gelden de voorwaarden die resulteren in de meest ernstige TBI. Gebruik in het bijzonder een 5 mm craniectomy om ervoor te zorgen dat een voldoende groot gebied van Dura wordt blootgesteld. Bovendien, veilig een vrouwelijk-vrouwelijk Luer Lock apparaat op het oppervlak van de schedel, met de opening direct geplaatst op de craniectomy. Dit verschilt van andere laboratoria die gebruik hebben gemaakt van een kleinere craniectomy (3 mm) en/of geplaatst een gemodificeerde naald naaf in de craniectomy, die effectief vermindert de opening grootte. Door het Luer-slot buiten de craniectomy te plaatsen, wordt de 5mm opening gehandhaafd. Deze specifieke parameters beïnvloeden de totale kracht die op de Dura wordt toegepast. De atmosferische druk toegepast op de Dura heeft ook een grote invloed op de ernst van de waargenomen schade. Helaas, atmosferische druk is zeer variabel en lijkt afhankelijk van het apparaat. Sommige Labs hebben gemeld het toepassen van een druk puls van 8-10 MS18. In tegenstelling, de methode hier beschreven resulteert in een 20 MS druk puls. Dit is in overeenstemming met andere Labs die lijken te genereren meer ernstige schade 14,28. Het is duidelijk dat de verwonding-veroorzakende druk impuls een parameter is die aanzienlijke veranderlijkheid tussen laboratoria toont en moet empirisch worden bepaald. De ernst van de verwondingen kan echter worden bepaald op basis van een combinatie van sterftecijfers (40-50%), waarbij de reflex tijden (> 30 min)26worden gerecht. Het is ook van cruciaal belang dat alleen dieren met een intacte Dura worden opgenomen in de studie. Bovendien, als de craniectomy wordt afgesloten door een lijm of cement zodanig dat een deel van de Dura onder de craniectomy niet wordt blootgesteld aan de volle kracht van de vloeistof druk puls, dan is het dier moet worden geëlimineerd uit de studie.  Ook, overtollige lijm onder de Luer Lock kan vasthouden aan de Dura en verwijder deze met de cement dop, zelfs na een succesvolle blessure.  Ten slotte geeft de vloeiende vorm van de druk Pulse curve op de oscilloscoop Trace de indicatie dat er geen luchtbellen zijn in de vloeistof kamer en geeft aan dat de zuiger zonder impedantie beweegt.
Anesthesie is een andere kritieke factor die moet worden gecontroleerd. Isofluraan blootstelling moet worden gehouden tot de laagste niveaus mogelijk om een chirurgisch vlak van anesthesie te handhaven. Ratten blootgesteld aan hogere niveaus van Isofluraan of voor lange duur hebben meer kans op neurogene-geïnduceerde longoedeem te ontwikkelen. De voorbereiding van de schedel vertegenwoordigt een ander kritisch aspect van de methode. In het bijzonder, het drogen van de schedel en het verwijderen van een bot stof helpt om te voorkomen dat de ratten uit het verwijderen van de zender voortijdig.
De plaatsing van de schroeven en de aansluiting van de EEG draden zijn uiteraard van cruciaal belang voor het produceren van consequent reproduceerbare opnames. Het is belangrijk dat de schroeven niet te diep worden geplaatst om een laesie op de hersenen te induceren. De bone flap hersteld van de craniectomy van volwassen (12 weken oud) mannelijke Wistar ratten is consequent 2 mm dik. Gebruik EEG-elektrode schroeven met een 2,5 mm schacht. Het is nuttig om de uiteinden van gebogen mug hemostatische Tang te gebruiken als een spacer om ervoor te zorgen dat de schroeven alleen uit te breiden tot de basis van het bot en niet uitsteken in de hersenen.
De hier gepresenteerde aanpak heeft een aantal beperkingen. Batterijen moeten regelmatig worden gewijzigd. De frequentie van de batterij veranderingen is afhankelijk van de sampling rate. Batterijen worden meestal een keer per week veranderd voor een sampling rate van 1000 Hz. Dit tijdsbestek kan worden verlengd door de Samplingsnelheid te verlagen. Het systeem is ook beperkt tot de opname van vier monopolaire EEG-elektroden. Echter, dit biedt twee kanalen per halfrond en kan onderscheid maken tussen focal en algemene gebeurtenissen en kan differentiëren tussen anterior en posterior veranderingen. Ondanks deze beperkingen, deze aanpak biedt een redelijke methode voor het uitvoeren van continue video/EEG monitoring en detectie van epileptiform veranderingen na ernstige TBI.
De methode hier beschreven resulteert in zowel stroom en convulsieve epileptische aanvallen binnen een maand na TBI. Daarom, deze aanpak biedt een redelijke termijn waarin de studie potentiële therapeutische voor het voorkomen van epileptogenese na ernstige TBI. Deze aanpak biedt ook een methode om de moleculaire mechanismen geassocieerd met PTE te onderzoeken en kan leiden tot de identificatie van potentiële biomarkers die kunnen worden gebruikt om patiënten te identificeren die het meest risico op het ontwikkelen van PTE.

In een 2015 rapport aan Congres, meldden de centra voor de controle van de ziekte dat ongeveer 2.500.000 mensen per jaar traumatische hersenenverwonding (TBI) in de V.S.1lijden. Er wordt geschat dat TBI veroorzaakt 20% van de symptomatische epilepsie en 5% van alle epilepsie2,3,4. Daarnaast, ongeveer 20% van de TBI patiënten te ontwikkelen post-traumatische epilepsie5. Belangrijk, chronische, terugkerende aanvallen die optreden als gevolg van TBI zijn vaak pharmacoresistant, het verhogen van de last van de ziekte6. De precieze mechanismen die leiden tot post-traumatische epilepsie (PTE) blijven onduidelijk. Verscheidene belangrijke epidemiologische studies hebben echter de incidentie en het potentiële risico van het ontwikkelen van post-traumatische epilepsie (PTE)2,4,7,8,9 ,10,11. Deze epidemiologische studies elk versterkt de correlatie van de ernst van de schade met het risico van epileptogenese.
De huidige methoden die veelvuldig zijn gebruikt om nieuwe anti-epilepsie therapieën te identificeren hebben zich sterk gebaseerd op modellen die gebruik maken van chemo-convulsants of elektrische aanmaak om epilepsie te induceren12. Gezien de hoge incidentie van de apotheek-resistentie tegen drugs ontwikkeld in deze modellen door TBI patiënten, we veronderstellen dat TBI-geïnduceerde epileptische aanvallen kunnen afwijken van chemoconvulsant of aandoening-geïnduceerde epileptische aanvallen en kan betrekking hebben op verschillende trajecten of processen van epileptogenese. Daarom kan een TBI model beter geschikt zijn voor de ontwikkeling van behandelingen die effectiever zijn om post-traumatische epileptogenese te voorkomen.
De vloeistof percussie blessure (FPI) model van TBI is gebruikt voor decennia en is een gerenommeerde methode om zowel TBI en Pte13,14,15,16,17te onderzoeken, 18. echter, zoals we onlangs herzien, is er een hoge mate van variabiliteit in de FPI methoden gerapporteerd in laboratoria19,20. Dit gebrek aan consistentie tussen laboratoria voorkomt reproduceerbaarheid van preklinische bevindingen en maakt de interpretatie van de resultaten een uitdaging. Als gevolg daarvan zijn er meer belangstelling en inspanningen gedaan om een grotere harmonisatie te bewerkstelligen voor dit soort studies21,22,23en24.
In een poging om de samenhang en de harmonisatie tussen de laboratoria gericht op het bestuderen van posttraumatische epileptogenese verder te vergroten, bieden we hier een gedetailleerde methodologie van onze aanpak. We hebben eerder gemeld een 60% incidentie van convulsieve epileptische aanvallen binnen zes weken na ernstige TBI20. Wij gebruiken nu deze benadering om ratten te controleren die de dag van verwonding beginnen en hen onophoudelijk 24 uren per dag voor maximaal 4 weken volgen. We hebben ervoor gekozen om een draadloos telemetrie systeem te gebruiken dat verschillende voordelen biedt. Ten eerste, ratten zijn in staat om vrij te bewegen over hun kooi, en dus vermindert stress. Tweede een vermindering van het signaallawaai als de rat fungeert als de grond. Bovendien, ons huidige systeem maakt gebruik van een versnellingsmeter die snelle beweging detecteert in alle drie de vliegtuigen (X, Y en Z) en kan nuttig zijn om convulsieve inbeslagneming gebeurtenissen te identificeren. Ten slotte, het draadloze telemetrie systeem zorgt voor eenvoudiger beheer van ratten, zoals aanvullende zoute injecties, wegen en het uitvoeren van neurologische Ernst scores, die ingewikkeld is wanneer ratten zijn gehecht aan een Tether. Deze aanpak heeft echter ook een aantal beperkingen. Eerst, kunnen de aanvankelijke kosten van een systeem om van maximaal acht ratten gelijktijdig te registreren in de waaier van $60.000 zijn. Ten tweede, wordt de macht beperkt door een batterij bron. Dit vereist dagelijkse monitoring en vervanging van batterijen. De tijd die nodig is tussen de veranderingen van de batterij kan worden beïnvloed door de sampling rate. Echter, voor een 1000 Hz sampling rate, batterijen worden meestal een keer per week. De beperkte stroomvoorziening beperkt ook het systeem tot de opname van slechts vier EEG-signalen. Ten slotte, signaal drop-out is beperkt, maar doet af en toe optreden. Echter, deze aanpak biedt een consistente en betrouwbare methode om post-traumatische epileptogenese te controleren en kan helpen bij de identificatie van nieuwe therapeutische behandelingen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1496px;" width="1496">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">1.00 mm Drill Bits</td>
			<td style="width:275px;">Drill Bit City: New Carbide Tools</td>
			<td style="width:119px;">05M200</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">3M ESPE Durelon Carboxylate Cement</td>
			<td style="width:275px;">3M , Neuss Germany</td>
			<td style="width:119px;">38019</td>
			<td style="width:720px;">Dental Cement</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">4-0 Suture</td>
			<td style="width:275px;">Ethicon, Sommerville, NJ</td>
			<td style="width:119px;">K831H</td>
			<td style="width:720px;">4-0 Ethicon Perma-hand Silk, 26mm 1/2c Taperpoint, 30&#34; (75cm), Black Braided non-absorbable suture&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">5 mm outer diameter trephine</td>
			<td style="width:275px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">18004-50</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Bonewax</td>
			<td style="width:275px;">Medline Industries, Mendelcin, IL</td>
			<td style="width:119px;">REF DYNJBW25</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Buprenorphine HCL, Injection (0.3 mg/mL) 1 mL vial</td>
			<td style="width:275px;">Par Pharmalogical, Chestnut Ridge NY</td>
			<td style="width:119px;">3003706</td>
			<td style="width:720px;">NDC 42023-179-01</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Dumont #6 Forceps</td>
			<td style="width:275px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11260-20</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Dumont #7b Forceps</td>
			<td style="width:275px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11270-20</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">ecgAUTO</td>
			<td style="width:275px;">EMKA Technologies, Falls Church, VA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Female Luer Thread Style Coupler Clear Polycarbonare&#160;&#160;</td>
			<td style="width:275px;">Cole-Palmer instrument</td>
			<td style="width:119px;">SKO#45501-22</td>
			<td style="width:720px;">Order lot #214271</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Foot Power Drill</td>
			<td style="width:275px;">Grobet USA, Carlstadt, NJ</td>
			<td style="width:119px;">Model C-300</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:383px;">GentaMax 100 (Gentamicin, Sulfate Solution)</td>
			<td style="width:275px;">Phoenix, Manufactured by Clipper Distributing Company LLC, St. Joseph, MO</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;">NDC 57319-520-05</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Hill&#39;s Prescription Diet a/d Canine/Feline</td>
			<td style="width:275px;">&#160;Hill&#39;s Pet Nutrition, Inc. , Topeka, KS</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">IOX2 Software&#160;</td>
			<td style="width:275px;">EMKA Technologies, Falls Church, VA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:383px;">Isoflorane, USP</td>
			<td style="width:275px;">Piramal Enterprise Limited, Andhra, India</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;">NDC 66794-013-25</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">IsoTech Anesthesia machine</td>
			<td style="width:275px;">SurgiVet</td>
			<td style="width:119px;">WWV9000</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Lateral FPI device</td>
			<td style="width:275px;">AmScien</td>
			<td style="width:119px;">302</td>
			<td style="width:720px;">curved tip, with pressure tubing extension. connected via screw lock connector (Cole-Palmer; #4550-22)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Leica A60 Stereomicroscope</td>
			<td style="width:275px;">Leica Biosystems, Richmond, VA</td>
			<td style="width:119px;">PN: 10 450 488</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Marcaine (0.5%) Bupivacaine hcl injection usp 5 mg/mL</td>
			<td style="width:275px;">Hospira, Lake Forest, IL</td>
			<td style="width:119px;">CA-3627</td>
			<td style="width:720px;">50mL multiple dose vial; NDC 0409-1610-50</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Micro-Adson Forceps</td>
			<td style="width:275px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">11018-12</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Olsen-Hegar Needle Holders with Suture Cutters</td>
			<td style="width:275px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">12002-14</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">PALACOS R+G bone cement with gentamicin</td>
			<td style="width:275px;">Heraeus,&#160;</td>
			<td style="width:119px;">REF: 5036964</td>
			<td style="width:720px;">Radiopaque bone cement containing 1 x 0.5g Gentamicin</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Physio Suite</td>
			<td style="width:275px;">Kent Scientific, Terrington, CT</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Povidone-iodine solution</td>
			<td style="width:275px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;">Betadine&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:383px;">Puralube Vet Ointment</td>
			<td style="width:275px;">Dechra Veterinary Products, Overland Park KS</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;">NDC 17033-211-38</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Scalpel blade (#10) and holder</td>
			<td style="width:275px;">Integra Miltex, York, PA</td>
			<td style="width:119px;">REF: 4-110</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Scalpel Handle - #4</td>
			<td style="width:275px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">10004-13</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Sickle Knife</td>
			<td style="width:275px;">Bausch + Lomb Storz Instruments</td>
			<td style="width:119px;">N1705 HM</td>
			<td style="width:720px;">5mm curved blade. Round handle. Overall length 168mm, 6.6 inches.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Silverstein Micro Mirror</td>
			<td style="width:275px;">Bausch + Lomb Storz Instruments</td>
			<td style="width:119px;">N1706 S8</td>
			<td style="width:720px;">3mm diameter. Angled 45 degrees. Overall length 180mm, 7.2 inches</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Storage NAS</td>
			<td style="width:275px;">Synology Inc.&#160;</td>
			<td style="width:119px;">DS3615xs</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Synology Assistant&#160;</td>
			<td style="width:275px;">Synology Inc.&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:383px;">Thermal Cautery Unit</td>
			<td style="width:275px;">Geiger Medical Technology, Delasco Council Bluffs, IA</td>
			<td style="width:119px;">Model NO: 150</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:383px;">Vetivex</td>
			<td style="width:275px;">Dechra Veterinary Products, Overland Park KS</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:720px;">Veterinary pHyLyteTM Injection pH 7.4 (Multiple Electrolytes Injection, Type 1, USP)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Video Cameras</td>
			<td style="width:275px;">TRENDnet, Torrance, CA</td>
			<td style="width:119px;">TV-IP314PI</td>
			<td style="width:720px;">Indoor/Outdoor 4MP H.265 WDR PoE IR Bullet Network Cameral</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Video NAS</td>
			<td style="width:275px;">Synology Inc.&#160;</td>
			<td style="width:119px;">DS916</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Wistar IGS rats&#160;</td>
			<td style="width:275px;">Charles River</td>
			<td style="width:119px;">strain code 003</td>
			<td style="width:720px;">12 wk old at the time of injury</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:383px;">Wullstein Retractor</td>
			<td style="width:275px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:119px;">17018-11</td>
			<td style="width:720px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

use of a wireless video-eeg system to monitor epileptiform discharges following lateral fluid-percussion induced traumatic brain injury

De laterale vloeistof percussie blessure (FPI) model is goed ingeburgerd en is gebruikt om TBI en post-traumatische epilepsie (PTE) studie. Er is echter aanzienlijke variabiliteit gemeld voor de specifieke parameters die worden gebruikt in verschillende studies die dit model hebben toegepast, waardoor het moeilijk is om de resultaten tussen laboratoria te harmoniseren en te interpreteren. Bij voorbeeld, variabiliteit is gerapporteerd over de grootte en de locatie van de craniectomy, hoe de Luer Lock hub is geplaatst ten opzichte van de craniectomy, de atmosferische druk toegepast op de Dura en de duur van de druk puls. Elk van deze parameters kan impact letsel Ernst, die direct correleert met de incidentie van PTE. Dit is gemanifesteerd als een breed scala van sterftecijfers, het recht reflex tijden en incidentie van convulsieve epileptische aanvallen gemeld. Hier bieden we een gedetailleerd protocol voor de methode die we hebben gebruikt om te helpen harmonisering tussen studies te vergemakkelijken. We gebruikten FPI in combinatie met een draadloze EEG telemetrie systeem om continu te controleren voor stroom veranderingen en detecteren inbeslagneming activiteit.  FPI wordt geïnduceerd door het creëren van een 5 mm craniectomy over de linker halfrond, tussen de Bregma en Lambda en grenzend aan de laterale NOK. Een Luer Lock hub is beveiligd op de schedel over de craniectomy. Deze hub is aangesloten op de FPI apparaat, en een 20-milliseconde druk puls wordt rechtstreeks geleverd aan de intacte Dura door middel van druk slang aangesloten op de naaf via een twist lock connector. Na terugwinning, zijn de ratten re-verdoofd om de hub te verwijderen. Vijf 0,5 mm, roestvrijstaal EEG elektrode schroeven worden geplaatst in contact met de Dura door de schedel en dienen als vier opname-elektroden en een referentie-elektrode. De elektrodedraden worden verzameld in een voetstuk connector die is bevestigd op zijn plaats met bot cement. Continu video/EEG opnames worden verzameld voor maximaal 4 weken na TBI.

Met dit model, we geïnduceerde ernstige TBI in volwassen, mannelijke, Wistar ratten. Onder de voorwaarden die we hier beschrijven, we meestal observeren sterftecijfers van 40-50%, en het recht reflex tijden van 30-60 min zoals eerder beschreven20. We waren in staat om video te verzamelen/EEG opnames 24 h/dag te beginnen op de dag van de schade. In Figuur 1a wordt een diagram weergegeven met de locatie van vier monopolaire EEG-elektroden en één referentie-elektrode. Afbeeldingen die de locatie en het uiterlijk aantonen van de TBI laesies die worden verwacht met de hier beschreven voorwaarden, zijn weergegeven in Figuur 1B-D. Onder de hier beschreven voorwaarden, we consequent observeren Delta vertragen binnen de eerste drie dagen na TBI. Minder ernstig gewonde ratten vertonen eenzijdige, intermitterende Delta vertragen (figuren 2c-D). In tegenstelling, continue, bilaterale Delta vertragen wordt waargenomen na meer ernstige verwondingen (Figuur 3C-D). Één of andere graad van Delta het vertragen werd constant waargenomen in alle TBI ratten maar werd niet ontdekt in om het even welke schijnvertoning in werking gesteld (craniectomy slechts) controle ratten (cijfers 2a-b; 3a-b). Het uitgebreide Delta vertragen werd constant waargenomen tijdens de eerste drie dagen na verwonding in de meeste TBI ratten. Interessant, ratten tonen meestal uitgesproken gewichtsverlies tijdens de eerste drie dagen na de schade. Niet-convulsieve epileptische aanvallen worden incidenteel waargenomen in de eerste week volgende op TBI (Figuur 4 C-D). Klinische aanvallen, presenteren als Spike clusters geassocieerd met het fokken en vallen evenals de onderarm Clonus kan worden waargenomen na een week na TBI (Figuur 5C-D). Tot slot, Figuur 6 presenteert representatieve beelden van occasionele intermitterende signaal drop-out en het verlies van het signaal als gevolg van falen van de batterij.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59637/59637fig1.jpg"> Figuur 1 . Locatie van craniectomy, elektrode plaatsing, en laesie. (A) toont een schematisch schema van de rat schedel met de locaties van de craniectomy (grijze cirkel in de linker halfrond), vier monopolaire elektroden (zwarte stippen; 1, 2, 3, 4) gelegen tussen de Bregma en Lambda en een referentie-elektrode (zwarte stip, R) Geplaatst middellijn, posterior aan de Lambda; (B) toont coronale post-MORTEM T2 MRI-scans met de locatie van de laesie geïdentificeerd door een rode cirkel; (C) toont een 2-D kaart van de cortex waar de locatie en de grootte van de laesie is geïdentificeerd (blauwe regio). (D) toont een Nissl gekleurd coronale sectie met de laesie boxed, laesie is 100x vergroot in beeld aan de rechterkant. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59637/59637fig1large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59637/59637fig2.jpg"> Figuur 2 . Eenzijdige, intermitterende Delta vertragen verzameld op de dag van een matige TBI. (A) toont een 90 s EEG trace van een schijnvertoning bediend, ongeblesseerde controle rat op de dag van de operatie. Alle vier de kanalen worden gepresenteerd. Een 10 s lange trace (overgenomen uit de boxed regio) werd gewonnen uit de 3e kanaal om beter te visualiseren de baseline EEG patroon. Een 2048 MS EPOC deel van deze werd vervolgens geselecteerd om te worden geanalyseerd in de overeenkomstige FFT. (B) FFT analyse van 2048 MS geselecteerde EPOC van de ongewonde Sham geëxploiteerd dier op de dag van de operatie. (C) toont een 90 s EEG Trace, waaruit blijkt dat de intermitterende, eenzijdige Delta vertragen patroon van een matig gewonde dier op de dag van de schade. Een 10 s lange trace (overgenomen uit de boxed regio) werd gewonnen uit de 3e kanaal om beter te visualiseren de Delta vertragen EEG patroon. Een 2048 MS EPOC deel van deze werd vervolgens geselecteerd om te worden geanalyseerd in de overeenkomstige FFT. (D) FFT analyse van 2048 MS geselecteerde EPOC van de gematigde TBI dier op de dag van de schade. 90 s EEG tracings, van boven naar beneden zijn biopotenties 1, 2, 3, 4, overeenkomend met hun locaties rond de craniectomy site zoals te zien in Figuur 1. Grijze verticale markeringen definiëren 1 s intervallen op de EEG-sporen. Alle EEG-sporen worden getoond op een schaal van (± 500 µV).  Binnen FFT analyse grafieken was het totale geanalyseerde frequentiebereik 0,5-30 Hz. Dit werd verder opgesplitst in 4 afzonderlijke frequentiebanden van Delta (geel, 0.5-4 Hz), theta (Purple, 4-8 Hz), Alfa (rood, 8-12 Hz), en Beta (groen, 12-30 Hz).  % (Power) grafiek getoond in de FFT analyse vertelt welk percentage van de totale macht in de geanalyseerde EPOC komt van elke eerder opgegeven frequentieband, waardoor verdere wiskundige karakterisering van de EEG golfvorm patronen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59637/59637fig2large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59637/59637fig3.jpg"> Figuur 3 . Bilaterale, continue Delta afremmen verzameld op de dag van een ernstige TBI. (A) toont een 90 s EEG trace van een schijnvertoning bediend, ongeblesseerde controle rat op de dag van de operatie. Alle vier de kanalen worden gepresenteerd.  Een 10 s lange trace (overgenomen uit de boxed regio) werd gewonnen uit de 3e kanaal om beter te visualiseren de baseline EEG patroon. Een 2048 MS EPOC deel van deze werd vervolgens geselecteerd om te worden geanalyseerd in de overeenkomstige FFT. (B) FFT analyse van 2048 MS geselecteerde EPOC van de ongewonde Sham geëxploiteerd dier op de dag van de operatie. (C) toont een 90 s EEG Trace, waaruit blijkt dat de continue, bilaterale Delta vertragen patroon van een ernstig gewonde dier op de dag van de schade.  Een 10 s lange trace (overgenomen uit de boxed regio) werd gewonnen uit de 3e kanaal om beter te visualiseren de Delta vertragen EEG patroon. Een 2048 MS EPOC deel van deze werd vervolgens geselecteerd om te worden geanalyseerd in de overeenkomstige FFT. (D) FFT analyse van 2048 MS geselecteerde EPOC van de ernstige TBI dier op de dag van de schade. 90 s EEG tracings, van boven naar beneden zijn biopotenties 1, 2, 3, 4, overeenkomend met hun locaties rond de craniectomy site zoals te zien in Figuur 1. Grijze verticale markeringen definiëren 1 s intervallen op de EEG-sporen. Alle EEG-sporen worden getoond op een schaal van (± 500 µV).  Binnen FFT analyse grafieken was het totale geanalyseerde frequentiebereik 0,5-30 Hz.  Dit werd verder opgesplitst in 4 afzonderlijke frequentiebanden van Delta (geel, 0.5-4 Hz), theta (Purple, 4-8 Hz), Alfa (rood, 8-12 Hz), en Beta (groen, 12-30 Hz). % (Power) grafiek getoond in de FFT analyse vertelt welk percentage van de totale macht in de geanalyseerde EPOC komt van elke eerder opgegeven frequentieband, waardoor verdere wiskundige karakterisering van de EEG golfvorm patronen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59637/59637fig3large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59637/59637fig4.jpg"> Figuur 4 . Nonconvulsive stroom inbeslagneming verzameld 3 dagen na ernstige TBI. (A) toont een 90 s EEG trace van een schijnvertoning bediend, ongeblesseerde controle Rat 3 dagen25 na de operatie. Alle vier de kanalen worden gepresenteerd. Een 10 s lange trace (overgenomen uit de boxed regio) werd gewonnen uit de 3e kanaal om beter te visualiseren de baseline EEG patroon. Een 2048 MS EPOC deel van deze werd vervolgens geselecteerd om te worden geanalyseerd in de overeenkomstige FFT. (B) FFT analyse van 2048 MS geselecteerde EPOC van de onbeschadigde Sham geëxploiteerd dier op de dag drie25 na de operatie. (C) toont een 90 s EEG Trace drie 25 dagen na ernstige verwondingen.  Deze show gebouw, snel stekelige patroon aanwezig bilateraal en over alle 4 het verzamelen van kanalen.  Een 10 s lange trace (overgenomen uit de boxed regio) werd gewonnen uit de 3e kanaal om beter te visualiseren de stekelige EEG patroon. Een 2048 MS EPOC deel van deze werd vervolgens geselecteerd om te worden geanalyseerd in de overeenkomstige FFT. (D) FFT analyse van 2048 MS geselecteerde EPOC van de ernstige TBI dier op de dag van de schade.  90 s EEG tracings, van boven naar beneden zijn biopotenties 1, 2, 3, 4, overeenkomend met hun locaties rond de craniectomy site zoals te zien in Figuur 1. Grijze verticale markeringen definiëren 1 s intervallen op de EEG-sporen. Alle EEG-sporen worden getoond op een schaal van (± 500 µV).  Binnen FFT analyse grafieken was het totale geanalyseerde frequentiebereik 0,5-30 Hz.  Dit werd verder opgesplitst in 4 afzonderlijke frequentiebanden van Delta (geel, 0.5-4 Hz), theta (Purple, 4-8 Hz), Alfa (rood, 8-12 Hz), en Beta (groen, 12-30 Hz).  % (Power) grafiek getoond in de FFT analyse vertelt welk percentage van de totale macht in de geanalyseerde EPOC komt van elke eerder opgegeven frequentieband, waardoor verdere wiskundige karakterisering van de EEG golfvorm patronen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59637/59637fig4large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59637/59637fig5.jpg"> Figuur 5 . Convulsieve stroom inbeslagneming verzamelde 9 dagen na TBI. (A) toont een 90 s EEG trace van een schijnvertoning bediend, ongeblesseerde controle rat negen (9) dagen na de operatie. Alle vier de kanalen worden gepresenteerd. Een 10 s lange trace (overgenomen uit de boxed regio) werd gewonnen uit de 3e kanaal om beter te visualiseren de baseline EEG patroon. Een 2048 MS EPOC deel van deze werd vervolgens geselecteerd om te worden geanalyseerd in de overeenkomstige FFT. (B) FFT analyse van 2048 MS geselecteerde EPOC van de ongewonde Sham geëxploiteerd dier op de dag Nine (9) na de operatie. (C) toont een 90 s EEG Trace negen (9) dagen na ernstige verwondingen. Deze show gebouw, snel stekelige patroon aanwezig bilateraal en over alle 4 het verzamelen van kanalen. Een 10 s lange trace (overgenomen uit de boxed regio) werd gewonnen uit de 3e kanaal om beter te visualiseren de stekelige EEG patroon.  Een 2048 MS EPOC deel van deze werd vervolgens geselecteerd om te worden geanalyseerd in de overeenkomstige FFT. (D) FFT analyse van 2048 MS geselecteerde EPOC uit de ernstige TBI Animal negen (9) dagen na de schade. 90 s EEG tracings, van boven naar beneden zijn biopotenties 1, 2, 3, 4, overeenkomend met hun locaties rond de craniectomy site zoals te zien in Figuur 1. Grijze verticale markeringen definiëren 1 s intervallen op de EEG-sporen. Alle EEG-sporen worden getoond op een schaal van (± 500 µV). Binnen FFT analyse grafieken was het totale geanalyseerde frequentiebereik 0,5-30 Hz. Dit werd verder opgesplitst in 4 afzonderlijke frequentiebanden van Delta (geel, 0.5-4 Hz), theta (Purple, 4-8 Hz), Alfa (rood, 8-12 Hz), en Beta (groen, 12-30 Hz).  % (Power) grafiek getoond in de FFT analyse vertelt welk percentage van de totale macht in de geanalyseerde EPOC komt van elke eerder opgegeven frequentieband, waardoor verdere wiskundige karakterisering van de EEG golfvorm patronen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59637/59637fig5large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59637/59637fig6.jpg"> Figuur 6 . Signaal drop-out. Dit zijn 3 aparte voorbeelden van wat signaal drop-out als gevolg van zender of ontvanger problemen verschijnt als op de EEG-opname. (A) Dit is een voorbeeld van intermitterende uitval van het EEG-signaal op een opname.  (B) Dit is een voorbeeld van drop-out als gevolg van falen van de batterij tijdens continue draadloze telemetrie verschijnt als op een EEG tracing.  (C) binnen de omcirkelde regio, kan worden gezien dat wanneer de kwaliteit van het signaal (QoS) daalt van 100 tot 0, de EEG tracering wordt afgevlakt en stagnerende op 0 µV.  Grijze verticale markeringen definiëren 1 s intervallen op de EEG-sporen. Alle EEG-sporen worden getoond op een schaal van (± 500 µV). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59637/59637fig6large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Use of a Wireless Video-EEG System to Monitor Epileptiform Discharges Following Lateral Fluid-Percussion Induced Traumatic Brain Injury at JoVE.com 

Use of a Wireless Video-EEG System to Monitor Epileptiform Discharges Following Lateral Fluid-Percussion Induced Traumatic Brain Injury (Video) | JoVE 

Hier presenteren we een protocol om ernstige TBI te induceren met de laterale vloeistof percussie blessure (FPI) model bij volwassen, mannelijke Wistar ratten. We tonen ook het gebruik van een draadloze telemetrie systeem om continu video-EEG-opnames en monitor voor epileptiform lozingen in overeenstemming met post-traumatische epileptogenese te verzamelen.

Gebruik van een draadloze video-EEG-systeem te controleren epileptiform lozingen na laterale vloeistof-percussie geïnduceerde traumatisch hersenletsel

The lateral fluid percussion injury (FPI) model is well established and has been used to study TBI and post-traumatic epilepsy (PTE). However, ...

Dit protocol biedt een mogelijkheid om studies te harmoniseren die gebruik maken van de rat laterale vloeistof percussie letsel van traumatisch hersenletsel in combinatie met EEG-opname via draadloze telemetrie. Het kan worden gebruikt om factoren te onderzoeken die posttraumatische epileptogenese beïnvloeden en om het neurotherapeutische potentieel van druginterventies te testen, die de ontwikkeling van posttraumatische epilepsie kunnen verhinderen. Deze aanpak maakt de lange-stern video EEG-opname van vrij bewegende ratten en zorgt voor de matige manipulatie van dieren zonder de onderbreking van EEG-opname.Het aantonen van de procedure zal Matthew McGuire zijn, een MD-promovendus uit mijn laboratorium. Zie het manuscript bij dit protocol voor gedetailleerde chirurgische ingrepen. Maak een 1 1/2 tot 2 1/2-centimeter middellijn incisie door de huid en spieren van de hoofdhuid met behulp van een nummer 10 scalpel mes.Trek de huid en spieren in om de schedel bloot te leggen en zorg voor een duidelijk chirurgisch veld. Elektrocauterie is nuttig voor het bereiken van snelle hemostase. Scheer vervolgens de laterale nok van het linker pariëtale bot met behulp van een chirurgische curette om een glad, plat oppervlak te produceren, zodat de basis van de vrouwelijke Luer lock hub kan rusten met de schedel.Irrigeer het schedeloppervlak en de omliggende weefsels met 2,0 milligram per milliliter gentamicine-oplossing in steriele zoutoplossing en dep overtollige oplossing met steriele wattenstaafjes. Breng vervolgens 3% waterstofperoxide aan op de schedel om het bot te drogen. Op dit punt, maak een vijf-millimeter diameter craniectomie site door de linker pariëtale bot.Verwijder vervolgens de botflap met de chirurgische curette en gladde weefsel tangen. Vervolgens, met behulp van een stereo microscoop, voorzichtig verwijderen van de dunne rand van het bot resterende met glad weefsel tangen, waarbij ervoor wordt gezorgd niet te scheuren de dura. Dan, wattenstaafje de schedel met 70% ethanol om alle botstof te verwijderen en om de schedel te drogen.Breng een dunne laag cyanoacrylaatlijm aan rond de onderrand van de Luer lock hub en bevestig deze aan de schedel over de craniectomie zonder de opening te belemmeren en zonder de lijm toe te staan contact te maken met de dura. Sluit vervolgens het Luer-slot op zijn plaats af met een dun laagje lijm rond de buitenbasis van de naaf. Bereid vervolgens een drijfmest van tandcement voor en breng dit aan op het oppervlak van de schedel rond en over de basis van de Luer lock-hub om het op zijn plaats te beveiligen.Vul vervolgens de Luer lock hub met een steriele conserveermiddelvrije oplossing die meerdere elektrolyten bevat, met behulp van een spuit en naald. Een bolus van zout moet worden gezien boven de bovenkant van de velg. Zodra de tandheelkundige cement is volledig genezen, stoppen met gas anesthesie en verwijder de rat uit de stereotaxic frame.Plaats de rat op een platform naast de vloeistof percussie letsel apparaat in sternale recumbency. Zet vervolgens een 12-centimeter lengte van de drukbuizen vast aan het einde van de gebogen punt van het apparaat, waarbij het tegenovergestelde uiteinde eindigt in een mannelijke Luer-vergrendelconnector van twee centimeter. Beveilig de rat op het apparaat door het vrouwelijke uiteinde van de hub op de schedel van de rat aan te sluiten op de mannelijke connector.Controleer het dier herhaaldelijk op terugkeer van de terugtrekkingsreflex. Zodra de rat herwint terugtrekking reflex, maar is nog steeds verdoofd, laat de slinger van het apparaat om een enkele 20-milliseconde drukpuls veroorzaken en leiden tot letsel. Koppel vervolgens onmiddellijk de rat los van het FPI-apparaat, plaats deze in sternale recumbency en zorg voor aanvullende zuurstof via een neuskegel totdat de spontane ademhaling terugkeert.Merk op dat apneu is een verwacht gevolg van de schade. Indien nodig, periodieke handmatige ademhalingen via een zak klep masker totdat de rat begint spontaan te ademen op zijn eigen. Controleer continu en noteert de tijd van terugkeer van de juiste reflex.Vier uur na de verwonding, opnieuw verdoven de rat, en plaats het terug in de stereotactische frame om de Luer lock hub en tandcement te verwijderen. Breng een kleine druppel van 0,5% bupivacaine hydrochloride aan op de schedel op elk van de locaties waar vijf proefgaten moeten worden geboord. Boor vervolgens de pilootgaten door de schedel met een handgeschakelde boorbit van 0,1 millimeter.Bevestig vervolgens de roestvrijstalen elektrodeschroeven. Plaats eerst een referentieschroef caudal naar de lambda, over het cerebellum. Plaats dan de opname-elektroden op de vier locaties zoals hier te zien is.Zorg ervoor dat u de schedel met 70% ethanol om eventuele botstof te verwijderen. Bedek vervolgens de craniectomieplaats met een dunne laag steriele botwas om de blootgestelde dura te bedekken. Sluit nu een elektrodearray aan op de vijf EEG-elektroden door het blootgestelde uiteinde van een kleurgecodeerde elektrodedraad strak rond de aangewezen roestvrijstalen elektrodeschroef te wikkelen.Verzamel de elektrodedraden in een spoel onder het voetstuk en zet de draden en het voetstuk op hun plaats met botcement. Houd het voetstuk in positie totdat het botcement is genezen. Tot slot bevestig je de draadloze zender met verse batterijen op het voetstuk voordat je het dier uit het stereotactische frame haalt.Vanaf de dag van de blessure gebruikt u de collectiesoftware van de EEG-fabrikant om continu video-EEG op te nemen en elke draadloze zender via een unieke frequentie te koppelen aan een specifieke ontvanger. Neem video's op van elke rat met een eigen camera geconfigureerd om op te nemen met 30 frames per seconde. Scherm handmatig door de EEG-opnamen om indexgebeurtenissen te identificeren die de epileptische activiteit definiëren.Dit cijfer toont eenzijdige, intermitterende delta vertraging verzameld op de dag van een matige TBI. Hier zien we een 90-seconden EEG-spoor van een sham-operated, ongewonde controle rat met FFT analyse van 2, 048-milliseconde geselecteerde EPOC. Dan zien we hier een EEG-spoor van een matig gewond dier, dat het intermitterende, eenzijdige delta vertragende patroon en FFT-analyse van 2, 048 milliseconden geselecteerde EPOC aantoont.Dit cijfer toont bilaterale, continue delta vertraging verzameld op de dag van een ernstige TBI, met behulp van dezelfde analysetechnieken. Hier zien we een EEG-spoor van 90 seconden, dat het continue, bilaterale deltaverzwakkende patroon van een ernstig gewond dier aantoont. Hier zien we niet-onopvulbare elektrografische aanval activiteit verzameld drie dagen na ernstige TBI.Gegevens van een controlerat drie dagen na de operatie wordt getoond, evenals een 90-seconden EEG-spoor drie dagen na ernstig letsel, en FFT-analyse van een 2, 048-milliseconde geselecteerde EPOC. Ten slotte toont dit cijfer krampachtige elektrografische epileptische aanvalsactiviteit verzameld negen dagen na de TBI, met FFT-analyse van dit dier. Hier zien we ook representatieve beelden van incidentele incidentele signaaluitval en verlies van signaal als gevolg van batterijuitval.Het is belangrijk om ervoor te zorgen dat de dura niet wordt verstoord en intact blijft na de craniectomie en dat de Luer lock hub stevig aan de schedel is verzegeld. Het is ook belangrijk om ervoor te zorgen dat de elektrodedraden goed contact maken met de opnameschroeven die in de schedel worden geplaatst. Tot slot, zorg ervoor dat de schedel vrij is van stof en droog om ervoor te zorgen dat het botcement zich op lange termijn aan het hoofd hecht.

Research

JoVE Journal

Behavior

Use of a Wireless Video-EEG System to Monitor Epileptiform Discharges Following Lateral Fluid-Percussion Induced Traumatic Brain Injury

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior

Use of the Operant Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) to Measure Changes in Nociceptive Behavior (Video) | JoVE 

Gebruik van de operante Orofacial Pain Assessment Device (OPAD) om veranderingen in Nociceptieve Gedrag Meet

We present an operant  system for the detection of pain in awake, conscious rodents. The Orofacial  Pain Assessment Device (OPAD) assesses pain behaviors ...

Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury

Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury (Video) | JoVE 

Gebruik van een acht-arm Radial Water Maze te Werken en Reference geheugen Assess Na Neonatale Hersenletsel

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food ...

Compensatory Limb Use and Behavioral Assessment of Motor Skill Learning Following Sensorimotor Cortex Injury in a Mouse Model of Ischemic Stroke

Compensatory Limb Use and Behavioral Assessment of Motor Skill Learning Following Sensorimotor Cortex Injury in a Mouse Model of Ischemic Stroke (Video) | JoVE 

Compenserende Limb Gebruik en Behavioral Assessment of Motor Skill Learning Na Sensorimotor Cortex Letselschade in een muismodel van ischemische beroerte

Mouse models have become increasingly popular in the field of behavioral neuroscience, and specifically in studies of experimental stroke. As models ...

Assessment of Murine Exercise Endurance Without the Use of a Shock Grid: An Alternative to Forced Exercise

Assessment of Murine Exercise Endurance Without the Use of a Shock Grid: An Alternative to Forced Exercise (Video) | JoVE 

Beoordeling van Muriene Oefening Endurance zonder het gebruik van een Shock Grid: Een alternatief voor Forced Exercise

Using laboratory mouse models, the molecular pathways responsible for the metabolic benefits of endurance exercise are beginning to be defined. The most ...

Exploring the Use of Isolated Expressions and Film Clips to Evaluate Emotion Recognition by People with Traumatic Brain Injury

Exploring the Use of Isolated Expressions and Film Clips to Evaluate Emotion Recognition by People with Traumatic Brain Injury (Video) | JoVE 

Het verkennen van het gebruik van geïsoleerde Uitdrukkingen en Film Clips te evalueren Emotion Erkenning door mensen met een traumatisch hersenletsel

The current study presented 60 people with traumatic brain injury (TBI) and 60 controls with isolated facial emotion expressions, isolated vocal emotion ...

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture

Manipulation of Epileptiform Electrocorticograms (ECoGs) and Sleep in Rats and Mice by Acupuncture (Video) | JoVE 

Manipulatie van Epileptiforme Electrocorticograms (ECoGs) en Sleep bij ratten en muizen door Acupunctuur

Ancient Chinese literature has documented that acupuncture possesses efficient therapeutic effects on epilepsy and insomnia. There is, however, little ...

Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze

Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze (Video) | JoVE 

Evaluatie van ruimtelijke geheugenvermindering in een muismodel van traumatische hersenletsel met behulp van een radiaal waterdierdool

Despite the recent increase in use of mouse models in scientific research, researchers continue to use cognitive tasks that were originally designed and ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury (Video) | JoVE 

Opsporen van gedrags tekorten in ratten na traumatisch hersenletsel

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Using Laser Doppler Imaging and Monitoring to Analyze Spinal Cord Microcirculation in Rat

Using Laser Doppler Imaging and Monitoring to Analyze Spinal Cord Microcirculation in Rat (Video) | JoVE 

Met behulp van Laser Doppler Imaging en toezicht voor het analyseren van ruggenmerg microcirculatie in Rat

Laser Doppler flowmetry (LDF) is a noninvasive method for blood flow (BF) measurement, which makes it preferable for measuring microcirculatory ...

Use of a Video Scoring Anchor for Rapid Serial Assessment of Social Communication in Toddlers

Use of a Video Scoring Anchor for Rapid Serial Assessment of Social Communication in Toddlers (Video) | JoVE 

Gebruik van een Video anker scoren voor snelle seriële beoordeling van sociale communicatie in peuters

Reciprocal social behavior (RSB), an early-emerging capacity to engage in social contingency&#8212;which is foundational for both social learning and ...