Name: in vitro elisa test to evaluate rabies vaccine potency
Uploaded: 2020-05-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency at JoVE.com

يجب الاعتراف بالدكتورة سيلفي مورجيو والدكتور جان ميشيل شابسال لمشاركتهما الرئيسية في إنشاء مقياس ELISA على دفعات اللقاحات وتنظيم ورش عمل دولية ودراسات تعاونية. نشكر صابرينا كالي على القراءة النقدية للمخطوطة. وكان الدكتور بيير بيرين مسؤولا ً عن عزل وتوصيف mAb-D1. وقد تم دعم هذا العمل بشكل رئيسي من قبل معهد تمويل باستور.

1- الاحتياطات الأمنية
ملاحظة: تنطبق هذه الطريقة على كل من RABV الحية واللقاح المعطلة.
<ol><li>استخدام ممارسات المختبرات الجيدة وإجراءات السلامة.</li>
	<li>ارتداء معدات الحماية الشخصية الكافية (PPE) بما في ذلك معطف المتاح، والقفازات، وقناع، والنظارات، الخ.</li>
	<li>عندما يتم مُرتَك الفير?...

يقع epitope المعترف بها من قبل mAb-D1 في الموقع المضاد للكائنات المضادة للبروتين الجليكوبروتين RABV الذي ليس فقط المناعي المهيمنة لتحريض VNAbs ولكن أيضا تشارك في الضراوة العصبية، والإمراضية40،,41 والتعرف على مستقبلات42. هناك موقع آخر مضاد للوراثيا على طول ...

منذ أكثر من 50 عاما، يتم استخدام اختبار المعاهد القومية للصحة1 كوسيلة معيار الذهب لتقييم قوة لقاح داء الكلب قبل الإفراج عن دفعة. يتكون هذا الاختبار من تحصين داخل perperitoneal لمجموعات من الفئران مع اللقاح ليتم اختبارها تليها تحدي داخل الدماغ (IC) بعد 14 يوما مع معيار فيروس التحدي (CVS) سلالة من فيروس داء الكلب (RABV). يتم تقييم الفعالية من نسبة الفئران الناجية من تحدي IC. على الرغم من أن منظمة الصحة العالمية2 والدوائية الأوروبية3 لا تزال تتطلب اختبار المعاهد القومية للصحة لتقييم قوة اللقاح، ويعاني هذا الاختبار عدة عقبات: النتائج متغيرة للغاية4; ويستخدم RABV المعدية خلال التحدي وهذا يتطلب كل من المهارة التقنية وتدابير السلامة البيولوجية الصارمة؛ وتستخدم أعداد كبيرة من الحيوانات، وشدة التحدي يثير مخاوف أخلاقية خطيرة5. وقد تم تطوير اختلاف أقل حدة من هذا الاختبار: بعد أسبوعين من التحصين داخل الجبقية، لا تتحدى الفئران من قبل IC ولكن نزف واختبارها لوجود أجسام مضادة محددة تحييد RABV (VNAbs) في مصلها باستخدام اختبار تحييد المختبر. ومع ذلك، لا يزال هذا الاختبار يتطلب التضحية بعدد كبير من فئران المختبر على الرغم من أنه يستخدم بالفعل لللقاحات البيطرية6،,7 وقد تم النظر في اللقاحات البشرية8..
وحتى الآن، تشجع التوصيات الدوليةالـ 9 والأوروبيةالعشرة المصنعين ومختبرات المراقبة الوطنية (مختبرات مراقبة الطب الرسمية - OMCLs) على تنفيذ استبدال الاختبارات الحيوانية المختبرية والحد منها وصقلها، التي يشار إليها باسم استراتيجية 3Rs. كما عزز التوجيه الأوروبي 2010/63/EU (الساري منذ 2013/01/01) المتعلق بحماية الحيوانات ورفاهيتها القيود المفروضة على مصنعي اللقاحات والمختبرات المشاركة في مراقبة جودة لقاحات داء الكلب وكذلك في بحوث داء الكلب11. ونتيجة لذلك، أصبح الآن وضع النهج البديلة في المختبر والتحقق من صحتها واستخدامها أولوية. هذه ليست فقط سليمة أخلاقيا ولكن يمكن أيضا خفض تكاليف اختبار دفعة وتقصير الوقت للنتائج إلى ساعات بدلا من أسابيع3.
على سطح الجسيمات RABV، وبروتين الجليكوبروتين يعتمد شكل التشذيب12،13،14،15،16. في لقاح داء الكلب، يشكل هذا الشكل الأصلي التشذيب المناعة الرئيسية التي تحفز VNAbs17 في حين أن البروتينات الجليكوبروتينية الأحادية أو القابلة للذوبان أو المشوهة هي ضعيفة المناعة18،19. وبالتالي، فإن الحفاظ على مغيري البروتين الجليكوبروتين يُمثل عملية إنتاج اللقاح مؤشراً جيداً للحفاظ على الإمكانات المناعية المثلى. العديد من الطرق المناعية الكيميائية، مثل اختبار الأجسام المضادة ملزمة20،,21،والأشعة المناعية شعاعية واحدة (SRD) اختبار22 واختبار ELISA23،,24،,25،,26، 27,27 هي الموصى بها من قبل سلسلة التقرير التقني لمنظمة الصحة العالمية2 والدراسة الأوروبية3 لقياس محتوى المستضد في لقاحات داء الكلب. وتستخدم هذه من قبل الشركات المصنعة لرصد اتساق إنتاج اللقاحات وOMCL لتقييم التركيب ة متسقة من دفعات من اللقاحات البشرية28، حتى لو كان اختبار المعاهد القومية للصحة لا يزال يعتبر لقوة.
ومع ذلك ، فإن كل هذه الأساليب المناعية الكيميائية ليست متساوية. يتطلب اختبار SRD معالجة مسبقة قد تغير التشذيب المرتكز على الغشاء وينتج عنه شكل قابل للذوبان أو مشوه من بروتين الجليكوبروتين22،29. وبالتالي، فإن SRD ليست فعالة كثيرا في التمييز بين البروتينات الجليكوبروتينية المناعية وغير المناعية مما أدى إلى تقييم ناقص للمناعة من الكثير من اللقاح. وعلى النقيض من ذلك، فإن اختبار ELISA هو أكثر حساسية22،ويحافظ على الهيكل الأصلي للبروتين الجليكوبروتين، وأكثر ملاءمة لتحديد محتوى التشذيب مطوية أصلا من البروتين الجليكوبروتين. يمكن لاختبار ELISA استخدام إما الأجسام المضادة المضادة للبروتين أحادي النسيلة أو أحادية النسيلة أو أحادية النسيلة أو أحادية النسيلة أو الأجسام المضادة للبروتين الجليكوبروتين المنقاة أو المركزة مع كبريتات الأمونيوم. وقد أظهرت الدراسات التوافق الجيد بين اختبار المعاهد القومية للصحة ومحتوى المستضد الذي تقيمه ELISA في اللقاحات وخلصت إلى أن أساليب ELISA مناسبة لاختبار الفعالية المختبرية. هذا يدعو إلى أن اختبارات ELISA قد تكمل على الأقل أو حتى تحل محل اختبار المعاهد القومية للصحة4،26،27،30،31،32،33., اليوم، توصي الأدوية الأوروبية باستخدام المواد الكيميائية المصلية أو المناعية المعتمدة كبدائل لاختبار المعاهد القومية للصحة3. وقد أصبح التجنب الكامل للاستخدام الحيواني لفعالية اللقاح منظوراً واقعياً.
ويستند الأسلوب المعروض أدناه على غير مباشر ELISA شطيرة المناعة باستخدام الماوس أحادي الكلون استنساخ الأجسام المضادة (mAb-D1) الذي يتعرف على المواقع المضادة للطبيعة الثالث (aa 330 إلى 338) من التشذيب RABV الجليكوبروتين15،34. تم تطوير هذه الطريقة في البداية في مختبر معهد باستور26،30 ثم تم تحسينها والتحقق من صحتها من قبل الوكالة الوطنية للعلوم والديمقراطية ومختبر produits de santé (ANSM) ، أي OMCL الفرنسية4،33. ويستخدم mAb-D1 على حد سواء لتوعية لوحة وبعد ذلك للكشف عن مستضد القبض. وهذا يسمح بالقياس الكمي المحدد لتقليم البروتين الجليكوبروتيني، أي مستضد RABV المناعي. ويسمى mAb-D1 المستخدمة للكشف مع البيروكسيداز، والتي يتم الكشف عنها في وجود الركيزة والكروموجين. وتتيح مقارنة الامتصاص المقيس للقاح المختبر واللقاح المرجعي تحديد محتوى البروتين الجليكوبروتيني المناعي. ومن الجدير بالذكر أن نفس النوع من الفحص يمكن تطبيقها على mAbs مختلفة الاعتراف المواقع المضادة للطبيعة المختلفة من بروتين الغليكوبروتين RABV35. طريقة الحصول على وتنقية أو التركيز مع كبريتات الأمونيوم المضادة للجليكوبروتين الجلوبيولين المناعي الأرانب G (IgG) أو جلوبيولين الماوس أحادي النسيقد وقد وصفت على نطاق واسع سابقا36 جنبا إلى جنب مع طريقة لاقتران الأجسام المضادة مع البيروكسية37.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1523px;" width="1522">
	<tbody>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Class II Biological Safety Cabinet</td>
			<td style="width:340px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:262px;">10445753</td>
			<td style="width:456px;">if titrating live virus</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:465px;">Clear Flat-Bottom Immuno Nonsterile 96-Well Plates, 400 &#181;L, MAXISORP</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>439454</td>
			<td>good for binding to the loaded antibody</td>
		</tr>
		<tr height="86">
			<td height="86" style="height:85px;width:465px;">Equip Labo Polypropylene Laboratory Fume Hood</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>12576606</td>
			<td>for the preparation of sulfuric acid</td>
		</tr>
		<tr height="112">
			<td height="112" style="height:113px;width:465px;">Immunology Plate Strong 
			Adsorption MAXISORP Flat Bottom 
			Well F96</td>
			<td style="width:340px;">Dutscher</td>
			<td>55303</td>
			<td>good for binding to the loaded antibody</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;">Microplate Sealing Tape(100 sheets)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Microplate&#160; single mode reader Sunrise</td>
			<td style="width:340px;">TECAN</td>
			<td style="width:262px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;">Microplate shaker-incubator</td>
			<td style="width:340px;">Dutscher</td>
			<td>441504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Microplate washer Wellwash</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>5165000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:63px;width:465px;">Multichannel pipette (30-300 &#181;L) 12 channels</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:262px;">4661180N</td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:104px;width:465px;">Single Channel pipettes (Kit 2 : Finnpipettes F2 0.2-2 &#956;L micro, 2-20 &#956;L, 20-200 &#956;L &#38; 100-1000 &#956;L)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4700880</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro elisa test to evaluate rabies vaccine potency

يشجع الاهتمام العالمي المتزايد برفاهية الحيوان المصنعين ومختبرات المراقبة الوطنية على اتباع استراتيجية 3Rs لاستبدال الاختبارات الحيوانية المختبرية والحد منها وصقلها. ويوصى بتطوير نُهج المختبر على مستوى منظمة الصحة العالمية وأوروبا كبدائل لاختبار المعاهد القومية للصحة لتقييم فعالية لقاح داء الكلب. على سطح فيروس داء الكلب (RABV) الجسيمات، التشذيب من بروتين الجليكوبروتين تشكل المناعي الرئيسي للحث على الأجسام المضادة تحييد الفيروسية (VNAbs). تم تطوير اختبار ELISA ، حيث يتعرف تحييد الأجسام المضادة أحادية النسيلة (mAb-D1) على الشكل التقليمي للبروتين الجليكوبروتيني ، لتحديد محتويات بروتين التشذيب الأصلي المطوى إلى جانب إنتاج دفعات اللقاح. أظهر هذا الاختبار في قوة المختبر توافقجيد مع اختبار المعاهد القومية للصحة وتم العثور على مناسبة في التجارب التعاونية من قبل مصنعي لقاحات RABV وOMCLs. إن تجنب استخدام الحيوانات هدف يمكن تحقيقه في المستقبل القريب.
ويستند الأسلوب المعروض على المناعة شطيرة ELISA غير مباشرة باستخدام mAb-D1 الذي يتعرف على المواقع المضادة للجينات الثالث (aa 330 إلى 338) من بروتين الغليكوبروتين RABV التشذيب، أي مستضد RABV المناعي. يستخدم mAb-D1 لكل من الطلاء والكشف عن مغيري البروتين الجليكوبروتين الموجود في دفعة اللقاح. نظرًا لأن البيتوب معترف به بسبب خصائصه المطابقة ، فإن بروتين الجليكوبروتين المشوه المحتمل (أقل مناعة) لا يمكن التقاطه واكتشافه بواسطة mAb-D1. يتم احتضان اللقاح الذي سيتم اختباره في لوحة حساسة مع mAb-D1. يتم تحديد البروتينات الزرجة المنضمة RABV بإضافة mAb-D1 مرة أخرى ، وتسمى بيروكسيديز ثم يتم الكشف عنها في وجود الركيزة والكروموجين. وتتيح مقارنة الامتصاص المقيس للقاح المختبر واللقاح المرجعي تحديد محتوى البروتين الجليكوبروتيني المناعي.

في المثال التالي يتم استخدام اللقاح المرجعي Lot 09 ، الذي يتكون من جزيئات فيروس داء الكلب المنشط النقي (سلالة اللقاح الكهروضوئي). وقد تم تحديد محتوى التشذيب الجليكوبروتين (10 ميكروغرام/مل) في هذا بعد تحديد الكمية الإجمالية للبروتينات الفيروسية (اختبار BCA) وتقييم النسبة المئو?...

Watch this Scientific Journal Video about In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency at JoVE.com

In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency

هنا نصف المناعة شطيرة ELISA غير مباشرة لتحديد محتويات البروتين الجليكوبروتين المناعي في لقاحات داء الكلب. يستخدم هذا الاختبار جسم مضاد أحادي النسيلة (mAb-D1) يتعرف على مرجّات البروتين الجليكوبروتيني. وهو بديل لاختبار المعاهد القومية للصحة في الجسم الحي لمتابعة اتساق فاعلية اللقاح أثناء الإنتاج.

في اختبار فيترو ELISA لتقييم قوة لقاح داء الكلب

The growing global concern for the animal welfare is encouraging manufacturers and the National Control Laboratories (OMCLs) to follow the 3Rs strategy ...

وبهدف الحد من اختبار الحيوانات وبسبب تغير اختبار NH، تشجع منظمة الصحة العالمية على تطوير نُهج في المختبر لتقييم فعالية لقاح داء الكلب. هذا الاختبار ELISA يظهر التوافق جيدة مع اختبار NH الكلاسيكية في التعرف على شكل مناعي من الجليكوبروتين، ويظهر حساسية عالية، ويمكن أن يؤديها في غضون يوم واحد فقط. تقييم قوة لقاح داء الكلب في المختبر من قبل ELISA هو بديل لاختبار NH في الجسم الحي.يتم الترويج لها من قبل المصنعين ومختبرات الرقابة الوطنية. من المهم توزيع وحدات تخزين مسبقة الحجم في نسخة مكررة لكل تخفيف وتجفيف البئر على لوحة على الورق ماصة بعد يغسل لتجنب لبدء هذا الإجراء، وضعت على معدات الحماية الشخصية بما في ذلك معطف المتاح، والقفازات، قناع، والنظارات. علاج المواد الملوثة عن طريق غمره في محلول من 2.6 ٪ هيبوكلوريت الصوديوم لمدة 30 دقيقة لإزالة التلوث.بعد ذلك ، حدد لوحة 96 مناعيًا جيدًا وأضف 200 ميكرولترات من الأجسام المضادة أحادية النسيلة المخففة في المخزن المؤقت للكربونات إلى كل بئر. غطي الطبق بطبق لاصق ويحضن اللوح الصغير على حرارة 37 درجة مئوية لمدة ثلاث ساعات في بيئة مرطبة. ثم الطامح بعناية ونقل محتوى البئر إلى المتلقي التي تحتوي على محلول من 2.6٪ هيبوكلوريت الصوديوم.عكس اللوحة الدقيقة واتركها تجف على الورق الماص في درجة حرارة الغرفة لمدة خمس دقائق. أولاً، إضافة 300 ميكرولترات من عازلة التخميل إلى كل بئر. غطي الطبق بالأفلام اللاصقة ويحضن على حرارة 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.بعد ذلك، نقل محتويات البئر إلى واحد يحتوي على محلول من 2.6٪ هيبوكلوريت الصوديوم. لغسل لوحة، إضافة 300 ميكرولترات من العازلة الغسيل إلى كل بئر. ثم الطامح بعناية ونقل محتوى البئر إلى المتلقي التي تحتوي على حل من 2.6٪ هيبوكلوريت الصوديوم.كرر عملية الغسيل هذه خمس مرات أخرى لغسل على نطاق واسع لوحة حساس. بعد ذلك، عكس اللوحة الدقيقة واتركها تجف على قطعة من الورق الماص في درجة حرارة الغرفة لمدة دقيقة واحدة. إعادة تركيب اللقاح المرجعي في مليلتر واحد من الماء المقطر بحيث يكون التركيز النهائي لفيروس داء الكلب glycoprotein هو 10 ميكروغرام لكل ملليلتر.إعداد تخفيف 10 أضعاف من لقاح المرجعية المعاد تشكيلها في diluent للوصول إلى فيروس داء الكلب تركيز الجليكوبروتين من ميكروغرام واحد لكل ملليلتر. بعد ذلك، قم بإجراء ستة عمليات تخفيف متسلسلة ذات شقين لهذا اللقاح المرجعي في المذال كما هو موضح في الجدول الأول من بروتوكول النص. توزيع 200 ميكرولتر من الم المسكن في آبار مكررة لتكون بمثابة سيطرة عمياء و200 ميكرولتر في البئر لكل تخفيف لقاح مرجعي مكرر.ثم إعداد تخفيف 10 أضعاف من اللقاح اختبارها في الملوين وإعداد سبعة شقين التخفيف المسلسل من اللقاح اختبار في مخفف كما هو مبين في الجدول الثاني من بروتوكول النص. توزيع 200 ميكرولترات من كل تخفيف لقاح مختبر في نسخ مكررة لكل بئر من الألواح الدقيقة. غطي اللوح الصغير بالأفلام اللاصقة ويحضن على حرارة 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة.بعد ذلك، قم بإزالة الفيلم. التعرق بعناية ونقل محتويات كل بئر إلى مستلم يحتوي على محلول هيبوكلوريت الصوديوم 2.7٪. لغسل لوحة، إضافة 300 ميكرولترات من الغسيل العازلة إلى كل بئر، التعرق بعناية ونقل محتويات كل بئر إلى المتلقي التي تحتوي على 2.6٪ حل هيبوكلوريت الصوديوم.كرر عملية الغسيل خمس مرات أخرى لإزالة المستضد غير منضم والحفاظ على الزخارف G-البروتين ملزمة إلى الأجسام المضادة المغلفة. عكس microplate غسلها والسماح لها الجافة على قطعة من الورق الماص في درجة حرارة الغرفة لمدة دقيقة واحدة. ثم توزيع 200 ميكرولترات من التخفيف الموصى بها من بيروكسيديز المسمى D1 الأجسام المضادة أحادية النسيلة في diluent إلى كل بئر.غطي اللوح الصغير بالأفلام اللاصقة ويحضن على حرارة 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة. بعد ذلك، إزالة الفيلم، وpirate بعناية، ونقل محتويات كل بئر إلى المتلقي التي تحتوي على 2.6٪ حل هيبوكلوريت الصوديوم. لغسل microplate، إضافة 300 ميكرولترات الغسيل العازلة إلى كل بئر.التعرق بعناية ونقل محتويات كل بئر إلى المتلقي التي تحتوي على 2.6٪ حل هيبوكلوريت الصوديوم. كرر عملية الغسيل هذه خمس مرات أخرى لإزالة الأجسام المضادة غير المنضمة من البيروكسيديز. عكس microplate غسلها والسماح لها الجافة على قطعة من الورق الماص في درجة حرارة الغرفة لمدة دقيقة واحدة.المقبل، وتوزيع 200 ميكرولترات من محلول الركيزة-الكروموجين في كل بئر. ختم microplate مع فيلم واحتضان في درجة حرارة الغرفة في الظلام لمدة 30 دقيقة. ثم إضافة 50 ميكرولتررس من وقف الحل في كل بئر لوقف رد الفعل.مسح بعناية الجزء السفلي من microplate ووضعها في مطياف. تحديد الكثافة البصرية عند 492 نانومتر لجميع الآبار المستخدمة. جمع هذه البيانات في ملف جدول بيانات للتحليل.بعد ذلك، قم بإنشاء مخططات لكل من منحنى اللقاح المرجعي وقيم الكثافة البصرية كما هو موضح في بروتوكول النص. في هذه الدراسة، يتم استخدام اختبار ELISA في المختبر لتقييم قوة لقاح داء الكلب. تظهر هنا قيم الكثافة البصرية التمثيلية من تجربة نموذجية.وتستخدم هذه القيم لرسم منحنى اللقاح المرجعي عن طريق رسم متوسط الكثافة البصرية للتخفيفات المختلفة من اللقاح المرجعي على المحور الرأسي وتركيز بروتين الجليكوبروتين على المحور الأفقي. ثم يُقدَّر محتوى بروتين الجليكوبروتين في اللقاح المختبر باستخدام هذا المنحنى. والتقييم دقيق بالنسبة للتخفيفات التي لها قيمة متوسطة للكثافة البصرية في منطقة الخطوط الملاحية المنتظمة من منحنى اللقاح المرجعي.ومع مراعاة تخفيف واحد إلى 40، فإن الإسقاط الرأسي لـ OD 1534 على المحور x يقابل 500 نانوغرام لكل ملليلتر. لذلك يقدر اللقاح المختبر بـ 20 ميكروغرام لكل ملليلتر من بروتين الجليكوبروتين. وعند إثبات الفعالية في المختبر، من الضروري مقارنة اللقاح المختبر بالمعيار المرجعي 6 معايير منظمة الصحة العالمية الدولية التي تم معايرتها في وحدات دولية.ويمكن استخدام نفس الطريقة مع الأجسام المضادة الأخرى لتوسيع نطاق الكشف عن المزيد من سلالات اللقاحات بما في ذلك تلك المستخدمة في اللقاحات البيطرية التي هي عادة أكثر متغيرة. ويمكن أيضا أن تستخدم الأجسام المضادة في المنافسة على المعايرة من الأجسام المضادة للاعتدادات في الخيول أو مصل الإنسان. يجب اتخاذ الاحتياطات مع اللقاحات التي لم يتم تعطيلها أو مع الفيروسات.تأكد من استخدام معدات الحماية الشخصية وارتداء القفازات وإزالة التلوث بشكل صحيح. أيضا، كن حذرا مع أقراص من كما هي مسرطنة ومع محلول هيبوكلوريت الصوديوم الحمضية.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

عزل الخلايا الليمفاوية T الإنسان والثقافة والتحليل للهجرة في المختبر</em

The migration of T lymphocytes involves the adhesive interaction of cell surface integrins with ligands expressed on other cells or with extracellular ...

A Restriction Enzyme Based Cloning Method to Assess the In vitro Replication Capacity of HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Viruses

A Restriction Enzyme Based Cloning Method to Assess the In vitro Replication Capacity of HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Viruses

تقييد أنزيم الاستنساخ القائم على أسلوب لتقييم<em&gt; في المختبر</em&gt; القدرة تكرار HIV-1 النوع الفرعي C-الكمامة MJ4 همي الفيروسات

The protective effect of many HLA class I alleles on HIV-1 pathogenesis and disease progression is, in part, attributed to their ability to target ...

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

في تحليل المختبر من الاستجابة المناعية الخلوية بوساطة Myd88 لفيروس غرب النيل المسخ سلالة العدوى

An attenuated West Nile virus (WNV), a nonstructural (NS) 4B-P38G mutant, induced higher innate cytokine and T cell responses than the wild-type WNV in ...

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

الصورة القائمة على التدفق الخلوي وتقنيات لتقييم التغيرات في الحبيبية وظيفة<em&gt; في المختبر</em

Granulocytes play a key role in the body&#8217;s innate immune response to bacterial and viral infections. While methods exist to measure granulocyte ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

رواية في المختبر الجرح المقايسة الشفاء لتقييم الهجرة الخلية

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...

Enhanced Rabies Surveillance Using a Direct Rapid Immunohistochemical Test

تعزيز مراقبة داء الكلب باستخدام اختبار سريع مباشر للمناعة الكيميائية

Laboratory-based surveillance is integral for rabies prevention, control and management efforts. While the DFA is the gold standard for rabies diagnosis, ...

Field Postmortem Rabies Rapid Immunochromatographic Diagnostic Test for Resource-Limited Settings with Further Molecular Applications

حقل ما بعد الوفاة داء الكلب اختبار تشخيصية مناعية سريعة لإعدادات الموارد المحدودة مع مزيد من التطبيقات الجزيئية

Functional rabies surveillance systems are crucial to provide reliable data and increase the political commitment necessary for disease control. To date, ...

Immunohistochemistry Test for the Lyssavirus Antigen Detection from Formalin-Fixed Tissues

اختبار الكيمياء المناعية للكشف عن مستضد فيروس ليسا من الأنسجة الثابتة الفورمالين

One of the primary diagnostic modalities for rabies is the detection of viral ribonucleoprotein (RNP) complex (antigen) in the infected tissue samples. ...

Opsono-Adherence Assay to Evaluate Functional Antibodies in Vaccine Development Against Bacillus anthracis and Other Encapsulated Pathogens

Opsono-Adherence Assay to Evaluate Functional Antibodies in Vaccine Development Against Bacillus anthracis and Other Encapsulated Pathogens

Opsono- الالتزام بـ اختبار لتقييم الأجسام المضادة الوظيفية في تطوير اللقاح ضد عصيات الجمرة الخبيثة وغيرها من مسببات الأمراض المغلفة

The opsono-adherence assay is a functional assay that enumerates the attachment of bacterial pathogens to professional phagocytes. Because adherence is ...

Purification and Expansion of Mouse Invariant Natural Killer T Cells for in vitro and in vivo Studies

تنقية وتوسيع الخلايا T القاتل الطبيعي الثابت الماوس في المختبر وفي دراسات في الجسم الحي

Invariant Natural Killer T (iNKT) cells are innate-like T Lymphocytes expressing a conserved semi-invariant T cell receptor (TCR) specific for self or ...