Name: in vitro elisa test to evaluate rabies vaccine potency
Uploaded: 2020-05-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency at JoVE.com

Dr. Sylvie Morgeaux og Dr. Jean-Michel Chapsal må anerkjennes for deres viktigste deltakelse for å etablere ELISA-analysen om vaksinegrupper og for å organisere internasjonale workshops og samarbeidsstudier. Vi takker Sabrina Kali for kritisk lesning av manuskriptet. Dr. Pierre Perrin var ansvarlig for isolasjon og karakterisering av mAb-D1. Dette arbeidet har i hovedsak blitt støttet av Institut Pasteur-finansiering.

1. Sikkerhetsforanstaltninger
MERK: Denne metoden gjelder for både levende RABV og inaktivert vaksine.
<ol><li>Bruk gode prosedyrer for laboratoriepraksis og sikkerhet.</li>
	<li>Bruk tilstrekkelig personlig beskyttelsesutstyr (PVU), inkludert engangsfrakk, hansker, maske, briller osv.</li>
	<li>Når det levende viruset er titrerat, bruk et klasse II biologisk sikkerhetsskap.<ol>
<li>Vurder materiale i kontakt med prøvene (reagenser, vaskeløsninger osv.) som smittsomt materiale.</li>
		<l...

Epitopen anerkjent av mAb-D1 ligger i det antigene området III av RABV glykoprotein som ikke bare er immunodominerende for induksjon av VNAbs, men også involvert i nevrovirulens, patogene40,41 og reseptorgjenkjenning42. Det er et annet viktig antigent sted langs glykoprotein, sted II43, mot hvilke flere MAbs har blitt isolert som mAb-WI-111235. Disse kan også brukes i lignende type eksperi...

Siden mer enn 50 år brukes NIH-testen1 som en gullstandardmetode for å evaluere rabiesvaksinens styrke før batchutgivelsen. Denne testen består av en intraperitoneal immunisering av grupper av mus med vaksinen som skal testes etterfulgt av en intra-cerebral (IC) utfordring 14 dager senere med Challenge Virus Standard (CVS) stamme av rabies virus (RABV). Styrken evalueres fra andelen mus som overlever IC-utfordringen. Selv om WHO2 og European Pharmacopeia3 fortsatt krever NIH-testen for å vurdere vaksinens styrke, lider denne testen flere hindringer: resultatene er svært variable4; smittsomme RABV brukes under utfordringen, og dette krever både tekniske ferdigheter og strenge biosikkerhetstiltak; et stort antall dyr brukes, og alvorlighetsgraden av utfordringen reiser alvorlige etiske bekymringer5. En mindre alvorlig variant av denne testen er utviklet: to uker etter intra-peritoneal immunisering, mus er ikke utfordret av IC, men blødde og testet for tilstedeværelse av spesifikke RABV nøytraliserende antistoffer (VNAbs) i deres serum ved hjelp av en in vitro nøytralisering test. Denne testen krever imidlertid fortsatt å ofre et stort antall laboratoriemus, selv om den allerede er i bruk for veterinærvaksinene6,7 og har blitt vurdert for humane vaksiner8.
Per nå oppfordrer både International9 og European10 anbefalinger produsenter og nasjonale kontrolllaboratorier (Official Medicine Control Laboratories - OMCLs) til å implementere erstatning, reduksjon og raffinement av laboratoriedyrtesting, referert til 3Rs strategi. Eu-direktiv 2010/63/EU (gjelder siden 2013/01/01) knyttet til beskyttelse og velferd for dyr har også forsterket begrensningene for vaksineprodusenter og laboratorier som er involvert i kvalitetskontroll av rabiesvaksiner samt i rabiesforskning11. Som et resultat har utvikling, validering og bruk av alternative in vitro tilnærminger nå blitt en prioritet. Dette er ikke bare etisk forsvarlig, men kan også redusere batch testing kostnader og forkorte tiden for resultater til timer i stedet for uker3.
På overflaten av RABV partikkel, glykoprotein vedtar en trimeric form12,13,14,15,16. I rabiesvaksine utgjør denne innfødte trimeric formen den store immunogen indusere VNAbs17 mens monomeriske, oppløselige eller denaturertglykoproteiner er dårlig immungene18,19. Dermed er bevaring av trimmere av glykoproteinet langs vaksineproduksjonsprosessen en god indikator for bevaring av et optimalt immungenpotensial. Flere immunkjemiske metoder, som antistoffbindende test20,21, den enkle radiale immundiffusjonen (SRD) test22 og ELISA-testen23,24,25,26,27 anbefales av WHO Technical Report Series2 og den europeiske monografien3 for å kvantifisere antigeninnholdet i rabiesvaksiner. Disse brukes av produsenter til å overvåke konsistensen av vaksineproduksjon og av OMCL for å vurdere den konsekvente formuleringen av grupper av humane vaksiner28, selv om NIH-testen fortsatt vurderes for styrken.
Alle disse immunkjemiske metodene er imidlertid ikke like. SRD-testen krever en forbehandling som kan endre membranforankret trimmere og resultere i en løselig eller denaturert form av glykoproteinet 22,29. Derfor er SRD ikke mye effektiv i diskriminering mellom immunogene og ikke-immungene glykoproteiner som resulterer i en ufullkommen vurdering av immunogenisiteten til en vaksinetomt. Derimot er ELISA-testen mer følsom22, bevarer den opprinnelige strukturen til glykoproteinet, og er mer hensiktsmessig å bestemme innholdet i de innfødte foldede trimmene av glykoprotein. ELISA-testen kan bruke enten kaninpolyklonale eller musmonoklonale antiglykoproteinantistoffer renset eller konsentrert med ammoniumsulfat. Studier har vist god konkordans mellom NIH-testen og antigeninnholdet evaluert av ELISA i vaksiner og konkludertmed at ELISA-metoder er egnet for in vitro potenstesten. Dette talsmenn som ELISA tester kan minst supplere eller erstatte NIH test4,26,27,30,31,32,33. I dag anbefaler Den europeiske pharmacopoeia bruk av validerte serologiske eller immunokjemiske analyser som alternativer til NIH-testen3. Fullstendig unngåelse av dyrebruk for vaksinestyrke har blitt et realistisk perspektiv.
Metoden nedenfor er basert på en indirekte ELISA sandwich immunocapture ved hjelp av en mus monoklonal antistoff klone (mAb-D1) som gjenkjenner antigene områder III (aa 330 til 338) av trimeric RABV glykoprotein15,34. Denne metoden ble utviklet i utgangspunktet ved Institut Pasteur26,30 deretter optimalisert og validert av Agence Nationale de Sécurité du Médicament et des produits de santé (ANSM) laboratorium, det vil si den franske OMCL4,33. MAb-D1 brukes både til å sensibilisere platen og deretter for å oppdage det fangede antigenet. Dette gjør det mulig for spesifikk kvantifisering av glykoproteintrimmerne, det vil si det immunogene RABV-antigenet. MAb-D1 som brukes til deteksjon er merket med peroksidase, som avsløres i nærvær av substrat et og krom. Sammenligning av absorbansen målt for den testede vaksinen og referansevaksinen gjør det mulig å bestemme det immunogene glykoproteininnholdet. Det er verdt å merke seg at samme type analyse kan brukes for forskjellige mAbs gjenkjenne ulike antigene steder av RABV glykoprotein35. Metoden for å skaffe og rense eller konsentrere seg med ammoniumsulfat anti-glykoprotein polyklonale kaninimmunoglobuliner G (IgG) eller monoklonale museglobuliner har blitt grundig beskrevet tidligere36 sammen med metoden for å konjugere antistoffer med peroxidase37.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1523px;" width="1522">
	<tbody>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Class II Biological Safety Cabinet</td>
			<td style="width:340px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:262px;">10445753</td>
			<td style="width:456px;">if titrating live virus</td>
		</tr>
		<tr height="69">
			<td height="69" style="height:69px;width:465px;">Clear Flat-Bottom Immuno Nonsterile 96-Well Plates, 400 &#181;L, MAXISORP</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>439454</td>
			<td>good for binding to the loaded antibody</td>
		</tr>
		<tr height="86">
			<td height="86" style="height:85px;width:465px;">Equip Labo Polypropylene Laboratory Fume Hood</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>12576606</td>
			<td>for the preparation of sulfuric acid</td>
		</tr>
		<tr height="112">
			<td height="112" style="height:113px;width:465px;">Immunology Plate Strong 
			Adsorption MAXISORP Flat Bottom 
			Well F96</td>
			<td style="width:340px;">Dutscher</td>
			<td>55303</td>
			<td>good for binding to the loaded antibody</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;">Microplate Sealing Tape(100 sheets)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>15036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Microplate&#160; single mode reader Sunrise</td>
			<td style="width:340px;">TECAN</td>
			<td style="width:262px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;">Microplate shaker-incubator</td>
			<td style="width:340px;">Dutscher</td>
			<td>441504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:465px;">Microplate washer Wellwash</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>5165000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:63px;width:465px;">Multichannel pipette (30-300 &#181;L) 12 channels</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:262px;">4661180N</td>
			<td style="width:456px;"></td>
		</tr>
		<tr height="103">
			<td height="103" style="height:104px;width:465px;">Single Channel pipettes (Kit 2 : Finnpipettes F2 0.2-2 &#956;L micro, 2-20 &#956;L, 20-200 &#956;L &#38; 100-1000 &#956;L)</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4700880</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro elisa test to evaluate rabies vaccine potency

Den økende globale bekymringen for dyrevelferden oppmuntrer produsenter og National Control Laboratories (OMCLs) til å følge 3Rs-strategien for erstatning, reduksjon og raffinement av laboratoriedyrtestingen. Utviklingen av in vitro tilnærminger anbefales på WHO og europeiske nivåer som alternativer til NIH-testen for evaluering av rabies vaksine styrke. Ved overflaten av rabiesviruset (RABV) partikkel utgjør trimmere av glykoprotein det store immunogen for å indusere Viral Neutralizing Antibodies (VNAbs). En ELISA-test, hvor nøytraliserende monoklonale antistoffer (mAb-D1) gjenkjenner den trimeric formen av glykoproteinet, er utviklet for å bestemme innholdet i det innfødte trimericglykoproteinet sammen med produksjonen av vaksinebatchene. Denne in vitro potenstesten viste en god konkordans med NIH-testen og har blitt funnet egnet i samarbeidsstudier av RABV-vaksineprodusenter og OMCLer. Unngåelse av dyrebruk er et oppnåelig mål i nær fremtid.
Metoden som presenteres er basert på en indirekte ELISA sandwich immunocapture ved hjelp av mAb-D1 som gjenkjenner de antigene stedene III (aa 330 til 338) av trimeric RABV glykoprotein, det vil si det genene immun RABV antigen. mAb-D1 brukes til både belegg og påvisning av glykoproteintrimmer ei vaksinebatch. Siden epitopen gjenkjennes på grunn av konformasjonsegenskapene, kan det potensielt denaturert glykoprotein (mindre immunogent) ikke fanges opp og oppdages av mAb-D1. Vaksinen som skal testes inkuberes i en plate sensibilisert med mAb-D1. Bundet trimeric RABV glykoproteiner identifiseres ved å legge til mAb-D1 igjen, merket med peroksidase og deretter avslørt i nærvær av substrat og krom. Sammenligning av absorbansen målt for den testede vaksinen og referansevaksinen gjør det mulig å bestemme det immunogene glykoproteininnholdet.

I følgende eksempel brukes referansevaksinen Lot 09, bestående av rensede inaktiverte rabiesviruspartikler (PV-vaksinestamme). Glykoproteintrimmerne (10 μg/ml) innholdet i dette er etablert etter bestemmelse av den totale mengden virusproteiner (BCA-test) og evaluering av prosentandelen av glykoproteinet ved SDS-polyakrylamidgelelektroforese. Alternativt kan en kalibrert referansevaksine, for eksempel WHO 6th International Standard (IS) for Rabies Vaccine (NIBSC-kode: 07/162...

Watch this Scientific Journal Video about In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency at JoVE.com

In Vitro ELISA Test to Evaluate Rabies Vaccine Potency

Her beskriver vi en indirekte ELISA sandwich immunocapture for å bestemme immungen glykoprotein innholdet i rabies vaksiner. Denne testen bruker et nøytraliserende monoklonalt antistoff (mAb-D1) som gjenkjenner glykoproteintrimmere. Det er et alternativ til in vivo NIH-testen for å følge konsistensen av vaksinepotens under produksjonen.

In Vitro ELISA Test for å evaluere Rabies vaksine styrke

The growing global concern for the animal welfare is encouraging manufacturers and the National Control Laboratories (OMCLs) to follow the 3Rs strategy ...

For å redusere dyretesting og på grunn av variabiliteten til NH-testen, oppfordrer WHO til å utvikle in vitro-tilnærminger for evaluering av rabiesvaksinestyrke. Denne ELISA-testen viser en god konkordans med en klassisk NH-test for å gjenkjenne den immunogene formen av glykoproteinet, viser høy følsomhet og kan utføres innen bare en dag. Evaluering av rabies vaksine potens in vitro av ELISA er et alternativ til in vivo NH test.Det fremmes av produsenter og nasjonale kontrolllaboratorier. Det er viktig å fordele store volumer i duplikat for hver fortynning og å godt tørke platen på absorberende papir etter vasker for å unngå For å starte denne prosedyren, ta på tilstrekkelig personlig beskyttelsesutstyr, inkludert engangsfrakk, hansker, maske og briller. Behandle forurensede materialer ved å senke det i en løsning på 2,6% natriumhypokloritt i 30 minutter for dekontaminering.Deretter setter du ut en 96-brønns immunoassayplate og legger til 200 mikroliter av monoklonalt antistoff fortynnet i karbonatbufferen til hver brønn. Dekk platen med selvklebende film og inkuber mikroplaten ved 37 grader Celsius i tre timer i et fuktet miljø. Deretter forsiktig aspirere og overføre brønninnholdet til en mottaker som inneholder en løsning på 2,6% natriumhypokloritt.Inverter mikroplaten og la den tørke på absorberende papir ved romtemperatur i fem minutter. Legg først til 300 mikroliter av passiviseringsbufferen til hver brønn. Dekk platen med selvklebende film og inkuber ved 37 grader Celsius i 30 minutter.Etter dette overfører du innholdet i brønnen til en som inneholder en løsning på 2,6% natriumhypokloritt. For å vaske platen, tilsett 300 mikroliter av vaskebufferen til hver brønn. Deretter aspirerer du forsiktig og overfører brønninnholdet til en mottaker som inneholder en løsning på 2,6% natriumhypokloritt.Gjenta denne vaskeprosessen fem ganger til for å vaske den sensibiliserte platen grundig. Etter dette, inverter mikroplaten og la den tørke på et stykke absorberende papir ved romtemperatur i ett minutt. Rekonstituer referansevaksinen i ett milliliter destillert vann slik at den endelige konsentrasjonen av rabiesvirusglykoprotein er 10 mikrogram per milliliter.Forbered en 10-ganger fortynning av den rekonstituerte referansevaksinen i fortynningsmiddelet for å nå et rabiesvirusglykoproteinkonsentrasjon på ett mikrogram per milliliter. Deretter utfører du seks serielle todoble fortynninger av denne referansevaksinen i fortynningsmiddelet som beskrevet i tabell en av tekstprotokollen. Fordel 200 mikroliter av fortynningsmiddelet i dupliserte brønner for å tjene som en blindkontroll og 200 mikroliter per brønn for hver referansevaksinefortynning i duplikat.Deretter forbereder du en 10-ganger fortynning av den testede vaksinen i fortynningsmiddelet og forbereder syv to ganger seriefortynninger av den testede vaksinen i fortynningsmiddel som beskrevet i tabell to av tekstprotokollen. Fordel 200 mikroliter av hver testet vaksinefortynning i duplikat til hver brønn av mikroplaten. Dekk mikroplaten med selvklebende film og inkuber ved 37 grader Celsius i en time.Etter dette, fjern filmen. Aspirer forsiktig og overfør innholdet i hver brønn til en mottaker som inneholder en 2,7% natriumhypoklorittløsning. For å vaske platen, tilsett 300 mikroliter vaskebuffer til hver brønn, aspirer forsiktig og overfør innholdet i hver brønn til en mottaker som inneholder en 2,6% natriumhypoklorittløsning.Gjenta vaskeprosessen fem ganger til for å fjerne det ubundet antigenet og bevare G-protein trimere bundet til belagt antistoff. Inverter den vasket mikroplaten og la den tørke på et stykke absorberende papir ved romtemperatur i ett minutt. Fordel deretter 200 mikroliter av anbefalt fortynning av peroksidase merket D1 monoklonalt antistoff i fortynningsmiddel til hver brønn.Dekk mikroplaten med selvklebende film og inkuber ved 37 grader Celsius i en time. Deretter fjerner du filmen, aspirerer forsiktig, og overfører innholdet i hver brønn til en mottaker som inneholder en 2,6% natriumhypoklorittløsning. For å vaske mikroplaten, tilsett 300 mikroliter vaskebuffer til hver brønn.Aspirer forsiktig og overfør innholdet i hver brønn til en mottaker som inneholder 2,6% natriumhypoklorittoppløsning. Gjenta denne vaskeprosessen fem ganger til for å fjerne det ubundne peroksidasemerket antistoffet. Inverter den vasket mikroplaten og la den tørke på et stykke absorberende papir ved romtemperatur i ett minutt.Deretter distribuerer du 200 mikroliter substratkromoogenløsning i hver brønn. Forsegle mikroplaten med film og inkuber ved romtemperatur i mørket i 30 minutter. Tilsett deretter 50 mikroliter med å stoppe løsningen i hver brønn for å stoppe reaksjonen.Tørk forsiktig av bunnen av mikroplaten og legg den i spektrofotometeret. Bestem den optiske tettheten ved 492 nanometer for alle brønnene som brukes. Samle inn disse dataene i en regnearkfil for analyse.Etter dette oppretter du plott for både referansevaksinekurven og de optiske tetthetsverdiene som beskrevet i tekstprotokollen. I denne studien brukes in vitro ELISA-testen til å evaluere rabiesvaksinestyrke. Representative optiske tetthetsverdier fra et typisk eksperiment vises her.Disse verdiene brukes til å tegne referansevaksinekurven ved å plotte den gjennomsnittlige optiske tettheten for de forskjellige fortynningene av referansevaksinen på den vertikale aksen og konsentrasjonen av glykoproteinet på den horisontale aksen. Glykoproteininnholdet i den testede vaksinen anslås deretter ved hjelp av denne kurven. Evalueringen er presis for fortynninger som har en gjennomsnittlig optisk tetthetsverdi i linerområdet i referansevaksinekurven.Tatt i betraktning fortynningen av en-til-40, tilsvarer den vertikale projeksjonen av OD 1534 på x-aksen 500 nanogram per milliliter. Så den testede vaksinen er anslått til 20 mikrogram per milliliter glykoprotein. Når in vitro-styrken er etablert, er det nødvendig å sammenligne den testede vaksinen med referansen seks WHO internasjonale standard kalibrert i internasjonale enheter.Den samme metoden kan brukes sammen med andre antistoffer for å forstørre påvisning av flere vaksinestammer, inkludert de som brukes i veterinærvaksiner som er klassisk mer variable. Antistoffer kan også brukes i konkurranse om titrering av antirabbyantistoffer i equine eller humant serum. Forholdsregler må tas med vaksiner som ikke er inaktivert eller med virus.Pass på å bruke personlig verneutstyr, bruk hansker og dekontaminere alt riktig. Vær også forsiktig med tabletter av da de er kreftfremkallende og med den sure natriumhypoklorittoppløsningen.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

The migration of T lymphocytes involves the adhesive interaction of cell surface integrins with ligands expressed on other cells or with extracellular ...

A Restriction Enzyme Based Cloning Method to Assess the In vitro Replication Capacity of HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Viruses

A Restriction Enzyme Based Cloning Method to Assess the In vitro Replication Capacity of HIV-1 Subtype C Gag-MJ4 Chimeric Viruses

Et restriksjonsenzym Basert Cloning metode for å vurdere den<em&gt; In vitro</em&gt; Replication Kapasitet av HIV-1 Undertype C gag-MJ4 Chimerisk virus

The protective effect of many HLA class I alleles on HIV-1 pathogenesis and disease progression is, in part, attributed to their ability to target ...

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

In Vitro Analyse av MyD88-mediert cellulær immunrespons til West Nile Virus Mutant Strain Infeksjon

An attenuated West Nile virus (WNV), a nonstructural (NS) 4B-P38G mutant, induced higher innate cytokine and T cell responses than the wild-type WNV in ...

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Image-based Flow Cytometry Technique to Evaluate Changes in Granulocyte Function In Vitro

Bildebasert flowcytometrisystemer Technique å evaluere Endringer i Granulocytt Funksjon<em&gt; In Vitro</em

Granulocytes play a key role in the body&#8217;s innate immune response to bacterial and viral infections. While methods exist to measure granulocyte ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

En roman In Vitro sår helbredelse analysen for å vurdere celle migrasjon

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...

Enhanced Rabies Surveillance Using a Direct Rapid Immunohistochemical Test

Forsterket rabiat overvåking benytter en direkte rask Immunhistokjemiske test

Laboratory-based surveillance is integral for rabies prevention, control and management efforts. While the DFA is the gold standard for rabies diagnosis, ...

Field Postmortem Rabies Rapid Immunochromatographic Diagnostic Test for Resource-Limited Settings with Further Molecular Applications

Felt Postmortem Rabies Rapid Immunochromatographic Diagnostic Test for Ressursbegrensede innstillinger med ytterligere molekylære applikasjoner

Functional rabies surveillance systems are crucial to provide reliable data and increase the political commitment necessary for disease control. To date, ...

Immunohistochemistry Test for the Lyssavirus Antigen Detection from Formalin-Fixed Tissues

Immunhiistokjemi Test for Lyssavirus Antigen Deteksjon fra Formalin-fast vev

One of the primary diagnostic modalities for rabies is the detection of viral ribonucleoprotein (RNP) complex (antigen) in the infected tissue samples. ...

Opsono-Adherence Assay to Evaluate Functional Antibodies in Vaccine Development Against Bacillus anthracis and Other Encapsulated Pathogens

Opsono-Adherence Assay to Evaluate Functional Antibodies in Vaccine Development Against Bacillus anthracis and Other Encapsulated Pathogens

Opsono-overholdelse analyse for å evaluere funksjonelle antistoffer i vaksineutvikling mot Bacillus anthracis og andre innkapslede patogener

The opsono-adherence assay is a functional assay that enumerates the attachment of bacterial pathogens to professional phagocytes. Because adherence is ...

Purification and Expansion of Mouse Invariant Natural Killer T Cells for in vitro and in vivo Studies

Rensing og utvidelse av mus konstant naturlig killer T celler for in vitro og in vivo studier

Invariant Natural Killer T (iNKT) cells are innate-like T Lymphocytes expressing a conserved semi-invariant T cell receptor (TCR) specific for self or ...