Name: spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells
Uploaded: 2019-06-07T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af Kontoret for den assisterende forsvarsminister for Sundhedsanliggender, gennem peer reviewed Cancer Research program under tildeling W81XWH-16-1-0272. Udtalelser, fortolkninger, konklusioner, og anbefalinger er dem af forfatterne og er ikke nødvendigvis godkendt af Department of Defense. Dette arbejde blev også støttet af en Seed tilskud fra Cornell Stem Cell program til A.C. White. H. Moon blev støttet af Cornell Center for hvirveldyr Genomics Scholar program.

Alle dyreforsøg udføres i overensstemmelse med Cornell Universitets institutionelle Komité for dyrepasning og-brug (IACUC).
1. forberedelse af
<ol><li>
Saml hale klip fra 12 dage postnatale mus og fordøje i 400 μL af 0,05 N NaOH ved 95 °C i 1 h. vortex og tilsæt 32 μL af 1 M Tris-HCl, pH 7. Genotype-mus i henhold til PCR-protokoller leveret gennem Jackson Laboratory og identificere mus med genotype af interesse6. - Tyr-CreER- hemizygous (+/...

<ol>
	<li>Wernli, K. J., Henrikson, N. B., Morrison, C. C., Nguyen, M., Pocobelli, G., Blasi, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+skin+cancer+in+adults:+updated+evidence+report+and+systematic+review+for+the+US+preventive+services+task+force.">Screening for skin cancer in adults: updated evidence report and systematic review for the US preventive services task force.</a> The Journal of the American Medical Association. 316 (4), 436-447 (2016).</li><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2018.">Cancer statistics, 2018.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 68 (1), 7-30 (2018).</li><li>White, A. C., Lowry, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refining+the+role+for+adult+stem+cells+as+cancer+cells+of+origin.">Refining the role for adult stem cells as cancer cells of origin.</a> Trends in Cell Biology. 25 (1), 11-20 (2015).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+cancer+cells+of+origin+in+cutaneous+tumors.">Understanding cancer cells of origin in cutaneous tumors.</a> Cancer Stem Cells. , 263-284 (2016).</li><li>Blanpain, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+the+cellular+origin+of+cancer.">Tracing the cellular origin of cancer.</a> Nature Cell Biology. 15 (2), 126-134 (2013).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melanocyte+stem+cell+activation+and+translocation+initiate+cutaneous+melanoma+in+response+to+UV+exposure.">Melanocyte stem cell activation and translocation initiate cutaneous melanoma in response to UV exposure.</a> Cell Stem Cell. 21 (5), 665-678 (2017).</li><li>Moon, H., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+path+from+melanocyte+stem+cells+to+cutaneous+melanoma+illuminated+by+UVB.">A path from melanocyte stem cells to cutaneous melanoma illuminated by UVB.</a> Molecular &#38; Cellular Oncology. 5 (2), e1409864 (2018).</li><li>Rabbani, P., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+activation+of+Wnt+in+epithelial+and+melanocyte+stem+cells+initiates+pigmented+hair+regeneration.">Coordinated activation of Wnt in epithelial and melanocyte stem cells initiates pigmented hair regeneration.</a> Cell. 145 (6), 941-955 (2011).</li><li>Chou, W. C., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+migration+of+follicular+melanocyte+stem+cells+to+the+epidermis+after+wounding+or+UVB+irradiation+is+dependent+on+Mc1r+signaling.">Direct migration of follicular melanocyte stem cells to the epidermis after wounding or UVB irradiation is dependent on Mc1r signaling.</a> Nature Medicine. 19 (7), 924-929 (2013).</li><li>Keyes, B. E., Segal, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nfatc1+orchestrates+aging+in+hair+follicle+stem+cells.">Nfatc1 orchestrates aging in hair follicle stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (51), (2013).</li><li>M&#252;ller-R&#246;ver, S., Handjiski, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comprehensive+guide+for+the+accurate+classification+of+murine+hair+follicles+in+distinct+hair+cycle+stages.">A comprehensive guide for the accurate classification of murine hair follicles in distinct hair cycle stages.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 117 (1), 3-15 (2001).</li><li>Kastenmayer, R. J., Fain, M. A., Perdue, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+retrospective+study+of+idiopathic+ulcerative+dermatitis+in+mice+with+a+C57BL/6+background.">A retrospective study of idiopathic ulcerative dermatitis in mice with a C57BL/6 background.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science&#8239;: JAALAS. 45 (6), 8-12 (2006).</li><li>Vultur, A., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SnapShot:+melanoma.">SnapShot: melanoma.</a> Cancer Cell. 23 (5), (2013).</li><li>Dankort, D., Curley, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Braf(V600E)+cooperates+with+Pten+loss+to+induce+metastatic+melanoma.">Braf(V600E) cooperates with Pten loss to induce metastatic melanoma.</a> Nature Genetics. 41 (5), 544-552 (2009).</li><li>Viros, A., Sanchez-Laorden, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraviolet+radiation+accelerates+BRAF-driven+melanomagenesis+by+targeting+TP53.">Ultraviolet radiation accelerates BRAF-driven melanomagenesis by targeting TP53.</a> Nature. 511 (7510), 478-482 (2014).</li></ol>

Kendetegnende genetiske ændringer ofte findes i kutane melanom tumorer er blevet godt beskrevet13. Den mest dominerende driver mutation er BRAFV600E, og en gensplejset musemodel for BRAFV600E-medieret melanom blev genereret af Bosenberg gruppe14 og deponeret i Jackson Laboratory. Ved hjælp af denne musemodel demonstrerede vores nylige undersøgelse kravet om cellulær aktivering af tumor-tilbøjelige MCSCs for den betydelige initier...

Melanom, den maligne form af melanocytiske tumorer, er den mest aggressive kræft i huden med kutane melanom ansvarlig for de fleste af hudkræft dødsfald1. I USA, melanom er almindeligt diagnosticeret; Det forventes at være den 5th til 6th mest almindelige kræfttype blandt de anslåede nye kræfttilfælde i 20182. Desuden, mens den samlede kræfttilfælde har vist tendensen til gradvis reduktion i de seneste årtier, kutane melanom Incidensrater i løbet af de sidste par årtier demonstrere en kontinuerlig og hurtig stigning i begge køn2.
For at bekæmpe kutane melanom mere effektivt, er det vigtigt klart at forstå de tidlige begivenheder af melanom udvikling fra deres celler i oprindelse for bedre at identificere klinisk effektive forebyggende metoder. Det er nu kendt, at voksne stamceller kan bidrage væsentligt til tumordannelse som den cellulære oprindelse af kræft i mange forskellige typer af organer, herunder hudvæv3,4,5. På samme måde kan voksne melanocytiske stamceller (mcscs) i den murine ryghud arbejde som melanom celler oprindelse ved afvigende aktivering af RAS/RAF og akt Pathways6. Men, disse onkogene mutationer alene er ikke i stand til effektivt at fremkalde tumordannelse fra inaktiv mcscs. melanocytiske tumorer udvikler sig til sidst, når mcscs bliver aktive under naturlig hårcykling. Men, i denne protokol, vil vi beskrive metoder til kunstigt at fremkalde cellulære aktivering af tumor-tilbøjelige mcscs, og dermed lette præcis kontrol af melanom indledning6,7.
Gennem de her beskrevne metoder kan rumlig og tidsmæssig kontrol af kutan melanom initiering fra tumor-tilbøjelige MCSC'er, der udtrykker onkogenic BRAFV600E sammen med tab af pten -udtryk, udføres med succes, da vi tidligere har rapporteret6. Denne metode inkorporerer tidligere fund, der demonstrerer hårfollikel stamcelle aktivering gennem hårfjerning samt hvordan eksponering af murine hud til UV-B kan lette aktivering af MCSCs hjemmehørende til hårfollikel og omplacering af denne cellulære delpopulation til den interfollikulære epidermis6,8,9,10. Disse in vivo modelsystemer kan give værdifulde oplysninger om, hvordan fysiologiske og miljømæssige ændringer kan ændre cellulære status af melanom-tilbøjelige MCSCs, som igen kan fremkalde betydelig initiering af melanom i huden.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T5648-1G</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>13258</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>45-C8267-2.5L-EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4OH-tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H7904-25MG</td>
			<td>For topical treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26g 1/2&#34; needles</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet hair trimmer</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>09990-502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removal cream</td>
			<td>Nair</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Available at most drug stores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultraviolet light bulb</td>
			<td>UVP</td>
			<td>95-0042-08</td>
			<td>model XX-15M midrange UV lamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 proof ethanol</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>pure ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoplast PE</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22900700</td>
			<td>paraffin pellets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral Buffered Formalin, 10%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear-Rite 3</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>6901</td>
			<td>xylene substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O.C.T. Compound</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>23730571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>89199-430</td>
			<td>for FFPE processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryomolds</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4557</td>
			<td>25 x 20 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FFPE metal mold</td>
			<td>Leica</td>
			<td>3803082</td>
			<td>24 x 24 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia inhalation system</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14085-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14558-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum</td>
			<td>FST</td>
			<td>14018-13</td>
			<td>Straight, blunt/blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11252-00</td>
			<td>Dumont #5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Micro-Adson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tyr-CreER; LSL-BrafV600E; Pten-f/f</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>13590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSL-tdTomato</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>007914</td>
			<td>ai14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCATTACCGGTCGATGCAACGAGTGATGAG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GAGTGAACGAACCTGGTCGAAATCAGTGCG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>TGAGTATTTTTGTGGCAACTGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTCTGCTGGGAAAGCGGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AGCTAGCCACCATGGCTTGAGTAAGTCTGCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCTTTACAAGCGCACGCAGACTGTAGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>ACTCAAGGCAGGGATGAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AATCTAGGGCCTCTTGTGCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCTTGATATCGAATTCCTGCAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AAGGGAGCTGCAGTGGAGTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCGAAAATCTGTGGGAAGTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GGCATTAAAGCAGCGTATCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-4</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTGTTCCTGTACGGCATGG</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells

Kutan melanom er velkendt som den mest aggressive hudkræft. Selv om risikofaktorerne og de store genetiske ændringer fortsat er dokumenteret med stigende dybde, har hyppigheden af kutane melanom vist en hurtig og kontinuerlig stigning i de seneste årtier. For at finde effektive forebyggende metoder, er det vigtigt at forstå de tidlige trin af melanom initiering i huden. Tidligere data har vist, at follikulære melanocytiske stamceller (MCSCs) i voksne hudvæv kan fungere som melanomer celler i oprindelse, når de udtrykker onkogene mutationer og genetiske ændringer. Tumorigenesis som følge af melanom-tilbøjelige MCSCs kan induceres, når MCSCs overgang fra en opstigning til aktiv tilstand. Denne overgang i melanom-tilbøjelige MCSCs kan fremmes ved modulation af enten hårfollikel stamceller ' aktivitet tilstand eller gennem ydre miljøfaktorer såsom ultraviolet-B (UV-B). Disse faktorer kan kunstigt manipuleres i laboratoriet ved kemisk Depilation, som forårsager overgang af hårfollikel stamceller og MCSC'er fra en op til aktiv tilstand, og ved UV-B eksponering ved hjælp af et stationære lys. Disse metoder giver en vellykket rumlig og tidsmæssig kontrol af kutan melanom initiering i murine dorsale hud. Derfor vil disse in vivo modelsystemer være værdifulde til at definere de tidlige trin af kutan melanom initiering og kan bruges til at teste potentielle metoder til tumor forebyggelse.

Kutan melanom initiering induceret af kemisk hårfjerning
Proceduren for kemisk hårfjerning er afbildet i figur 2. Når mus er 7-ugers postnatal, deres ryghud er i telogen. Under telogen er hårfollikel stamceller og MCSC'er kendt for at være i en hviletilstand. Huden bør ikke vise nogen signifikant hårvækst efter barbering. På den anden side, kemisk hårfjerning kan fremkalde...

Watch this Scientific Journal Video about Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells at JoVE.com

Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells

Rumlig og tidsmæssig kontrol af murine melanom initiering fra mutant melanocyte stamceller

Følgende procedure beskriver en metode til rumlig og tidsmæssig kontrol af melanocytisk tumor initiering i murine rygskind, ved hjælp af en gensplejset musemodel. I denne protokol beskrives makroskopisk og mikroskopisk kutan melanom-initiering.

Cutaneous melanoma is well known as the most aggressive skin cancer. Although the risk factors and major genetic alterations continue to be documented ...

Melanom er bredt diagnosticeret på verdensplan, med stigende forekomst. Disse protokoller gør det muligt at kontrollere de tidlige stadier af melanomstart omhyggeligt, hvilket letter undersøgelsen af dets udvikling. Ved at kontrollere tid og sted for melanocyt stamcelleaktivering, har vi evnen til at skelne ændringerne inden for stamcellepopulationen og dens nye stamme melanom indledning.Demonstration af proceduren vil være Dahihm Kim og Luye An, kandidatstuderende fra laboratoriet. To til tre dage før proceduren, skal du bruge en elektrisk trimmer til at barbere dorsal huden fra hver bedøvet syv uger gamle mus. På dagen for forsøget, bruge en vatpind til at anvende et tyndt lag af depilatory creme til den eksponerede hud.Når cremen er blevet jævnt anvendt, skal du bruge rene vatpinde til at fjerne cremen, efterfulgt af blid aftørring med en fugtig klud for at fjerne eventuelle resterende creme. Derefter returnere hver mus til sit hjem bur med overvågning, indtil fuld helbredelse. Til UV-B bestråling skal den dorsale hud dækkes med UV-B-beskyttende materiale, så kun det ønskede område vil blive eksponeret, og dæk UV-kammeret med et UV-resistentt låg.Tænd derefter for UV-B-lampen for at bestråle musen i den relevante forsøgsperiode, før musen returneres til et tomt bur med overvågning, indtil den er fuldt bjærgning. For at isolere hudprøverne skal du bruge en elektrisk trimmer til at fjerne hår fra det dorsale hudområde i de aflivede bestrålede mus og let børste den eksponerede hud med et fnugfrit væv for at rydde området. Lav et lille snit med skarpe saks lige over bunden af halen og indsæt store, stumpe saks i snittet for at adskille det subdermale bindevæv.Brug skarp saks, omhyggeligt skåret langs kanten af huden region af interesse for at isolere vævsprøven og placere den punkterede hudvæv på en ren køkkenrulle. Brug derefter kedelige kraftæceser til at strække huden, så den klæber til håndklædet og er stram. Når alle prøverne er høstet, anbringes en hudprøve og køkkenrulle bagside i et stykke foldet filterpapir umiddelbart ved siden af folden, idet det skal sikres, at prøven er glat og ikke foldet eller krøllet.Luk siderne af filterpapiret med hæfteklammer, og trim papiret. Derefter nedsænkes prøverne helt i 10% neutral buffered formalin i tre til fem timer ved stuetemperatur, før væv vaskes med to fem minutters vaske i deioniseret vand. Efter den anden vask fjernes eventuelt restmateriale fra hudvævet, og prøvernes kanter beskæres, så de ikke er takkede.Dernæst foretage tre sagittal nedskæringer i hver prøve, således at bredden af strimlerne er ikke mere end fem millimeter, og gøre tværgående nedskæringer, således at prøverne ikke er mere end 20 millimeter bred. Placer en kryoform, der indeholder optimal skæretemperatur eller OCT medium i et portræt retning, og placere fire til fem stykker hud på toppen af OLT. Når alle brikkerne er på plads, skal du bruge to par fine hætne til at bringe den lange kant af hvert stykke hud til bunden af kryoformen, så prøverne er lodrette i OLT og vinkelret på bunden af formen.Derefter fylde formen med ekstra OKT til den anden læbe og placere formen på en flad overflade af et stykke tøris, ved hjælp af snaft til at justere eventuelle hudstykker, der kan have flyttet under overførslen som blokken begynder at fryse efter behov. Når mus er syv uger efter fødslen, deres dorsale hud er i telogen. Under telogen, hårsækken og melanocyt stamceller er kendt for at være i en quiescent hviletilstand, og huden bør vise nogen signifikant hårvækst efter barbering.Kemisk hårfjerning, dog, kan fremkalde hårsækken stamcelleaktivering, inducerende betydelig hårvækst inden for området af interesse. Som kemisk hårfjerning kan i væsentlig grad fremkalde aktivering af både hårsækken og melanocyt stamceller, melanom-tilbøjelige melanocyt stamceller i en aktiv tilstand kan danne tumorer og mikroskopisk melanom indledning kan observeres inden for to uger efter kemisk hårfjerning. UV-B bestråling kan også fremkalde tumor indledning fra quiescent, tumor-tilbøjelige melanocyte stamceller.Vigtigere er det, UV-B inducerer direkte translokation af melanocyt stamceller fra deres follikulære stamceller niche til inter-follikulær epidermis. Desuden kan UV-B fremkalde melanocyt stamceller oprindelse kutan melanom dannelse i hele interfollicular epidermis. Svarende til dorsal hud, UV-B-induceret melanom indledning kan især observeres i andre hudområder, såsom øre hud.Faktisk, sammenlignet med kontrol øre hud, dækket af UV-resistentklud, øre hud udsat for UV-B viser en højere pigmentering på grund af en højere byrde af melanom indledning. Forskellige doser af UV-B kan have forskellige virkninger på musehud og melanocyt aktivitet. Det er derfor vigtigt at bestemme og optimere bestrålingsdosis, før du påbegynder dit eksperiment.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

En mus Model af træthed induceret af perifere Bestråling

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

Harnessing the DNA Dye-triggered Side Population Phenotype to Detect and Purify Cancer Stem Cells from Biological Samples

Udnyttelse af DNA-farve-udløst sidebefolkningens fenotype til at detektere og rense kræftstamceller fra biologiske prøver

Cancer is a stem cell-driven disease and eradication of these cells has become a major therapeutic goal. Deciphering vulnerabilities of Cancer Stem Cells ...

Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells

Ved hjælp af CRISPR/Cas9 gen redigering til at undersøge de muterede aktivitet af Mutant Calreticulin i cytokin afhængige hæmatopoietisk celler

Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) is an adaptive immunity system in prokaryotes that has been repurposed by scientists to ...

Investigation of Genetic Dependencies Using CRISPR-Cas9-based Competition Assays

Undersøgelse af genetiske afhængigheder ved hjælp af CRISPR-Cas9-baserede konkurrence Assays

Gene perturbation studies have been extensively used to investigate the role of individual genes in AML pathogenesis. For achieving complete gene ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Mesenkymale stamceller isoleret fra Pulp væv og fælles kultur med kræftceller til at studere deres interaktioner

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Rapid Generation of Primary Murine Melanocyte and Fibroblast Cultures

Hurtig generering af primære murine melanocyte og fibroblast kulturer

Defects in fibroblast or melanocyte function are associated with skin diseases, including poor barrier function, defective wound healing, pigmentation ...

Flow Cytometric Analysis of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and MLL-AF9 Driven Leukemia

Flow Cytometrisk analyse af mitokondrie reaktive oxygen arter i murine hæmatopoietiske stamceller og Progenitorcellerne og MLL-AF9 drevet leukæmi

We present a flow cytometric approach for analyzing mitochondrial ROS in various live bone marrow (BM)-derived stem and progenitor cell populations from ...

Isolation of Exosome-Enriched Extracellular Vesicles Carrying Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor from Embryonic Stem Cells

Isolering af exosome-beriget ekstracellulære vesikler Transporterer Granulocyte-Makrofag Colony-stimulerende faktor fra embryonale stamceller

Embryonic stem cells (ESCs) are pluripotent stem cells capable of self-renewal and differentiation into all types of embryonic cells. Like many other cell ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Isolering af Stem-lignende celler fra 3-dimensionelle sfæriske kulturer

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Preparation of Mitochondria from Ovarian Cancer Tissues and Control Ovarian Tissues for Quantitative Proteomics Analysis

Fremstilling af mitokondrier fra æggestokkene Cancer væv og kontrol ovarie væv til kvantitativ proteomics analyse

Ovarian cancer is a common gynecologic cancer with high mortality but unclear molecular mechanism. Most ovarian cancers are diagnosed in the advanced ...