Name: spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells
Uploaded: 2019-06-07T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells at JoVE.com

Ce travail a été appuyé par le Bureau du sous-secrétaire à la défense pour les affaires de santé, par l’entremise du programme de recherche sur le cancer par les pairs sous le prix W81XWH-16-1-0272. Les opinions, les interprétations, les conclusions et les recommandations sont celles des auteurs et ne sont pas nécessairement approuvées par le ministère de la défense. Ce travail a également été appuyé par une subvention de semences du programme de cellules souches de Cornell à A.C. White. H. Moon a été soutenue par le Cornell Center for Vertéate génomique Scholar Program.

Toutes les procédures animales sont exécutées conformément au Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux de l’Université Cornell (IACUC).
1. la préparation
<ol><li>
Prélever des clips de queue à partir de souris postnatales de 12 jours et digérer dans 400 μL de 0,05 N NaOH à 95 ° c pendant 1 h. vortex et ajouter 32 μL de Tris-HCl 1 M, pH 7. Les souris génotypes selon les protocoles de PCR fournis par le laboratoire Jackson et identifient les souris...

<ol>
	<li>Wernli, K. J., Henrikson, N. B., Morrison, C. C., Nguyen, M., Pocobelli, G., Blasi, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+skin+cancer+in+adults:+updated+evidence+report+and+systematic+review+for+the+US+preventive+services+task+force.">Screening for skin cancer in adults: updated evidence report and systematic review for the US preventive services task force.</a> The Journal of the American Medical Association. 316 (4), 436-447 (2016).</li><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2018.">Cancer statistics, 2018.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 68 (1), 7-30 (2018).</li><li>White, A. C., Lowry, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refining+the+role+for+adult+stem+cells+as+cancer+cells+of+origin.">Refining the role for adult stem cells as cancer cells of origin.</a> Trends in Cell Biology. 25 (1), 11-20 (2015).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+cancer+cells+of+origin+in+cutaneous+tumors.">Understanding cancer cells of origin in cutaneous tumors.</a> Cancer Stem Cells. , 263-284 (2016).</li><li>Blanpain, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+the+cellular+origin+of+cancer.">Tracing the cellular origin of cancer.</a> Nature Cell Biology. 15 (2), 126-134 (2013).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melanocyte+stem+cell+activation+and+translocation+initiate+cutaneous+melanoma+in+response+to+UV+exposure.">Melanocyte stem cell activation and translocation initiate cutaneous melanoma in response to UV exposure.</a> Cell Stem Cell. 21 (5), 665-678 (2017).</li><li>Moon, H., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+path+from+melanocyte+stem+cells+to+cutaneous+melanoma+illuminated+by+UVB.">A path from melanocyte stem cells to cutaneous melanoma illuminated by UVB.</a> Molecular &#38; Cellular Oncology. 5 (2), e1409864 (2018).</li><li>Rabbani, P., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+activation+of+Wnt+in+epithelial+and+melanocyte+stem+cells+initiates+pigmented+hair+regeneration.">Coordinated activation of Wnt in epithelial and melanocyte stem cells initiates pigmented hair regeneration.</a> Cell. 145 (6), 941-955 (2011).</li><li>Chou, W. C., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+migration+of+follicular+melanocyte+stem+cells+to+the+epidermis+after+wounding+or+UVB+irradiation+is+dependent+on+Mc1r+signaling.">Direct migration of follicular melanocyte stem cells to the epidermis after wounding or UVB irradiation is dependent on Mc1r signaling.</a> Nature Medicine. 19 (7), 924-929 (2013).</li><li>Keyes, B. E., Segal, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nfatc1+orchestrates+aging+in+hair+follicle+stem+cells.">Nfatc1 orchestrates aging in hair follicle stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (51), (2013).</li><li>M&#252;ller-R&#246;ver, S., Handjiski, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comprehensive+guide+for+the+accurate+classification+of+murine+hair+follicles+in+distinct+hair+cycle+stages.">A comprehensive guide for the accurate classification of murine hair follicles in distinct hair cycle stages.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 117 (1), 3-15 (2001).</li><li>Kastenmayer, R. J., Fain, M. A., Perdue, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+retrospective+study+of+idiopathic+ulcerative+dermatitis+in+mice+with+a+C57BL/6+background.">A retrospective study of idiopathic ulcerative dermatitis in mice with a C57BL/6 background.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science&#8239;: JAALAS. 45 (6), 8-12 (2006).</li><li>Vultur, A., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SnapShot:+melanoma.">SnapShot: melanoma.</a> Cancer Cell. 23 (5), (2013).</li><li>Dankort, D., Curley, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Braf(V600E)+cooperates+with+Pten+loss+to+induce+metastatic+melanoma.">Braf(V600E) cooperates with Pten loss to induce metastatic melanoma.</a> Nature Genetics. 41 (5), 544-552 (2009).</li><li>Viros, A., Sanchez-Laorden, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraviolet+radiation+accelerates+BRAF-driven+melanomagenesis+by+targeting+TP53.">Ultraviolet radiation accelerates BRAF-driven melanomagenesis by targeting TP53.</a> Nature. 511 (7510), 478-482 (2014).</li></ol>

Les altérations génétiques de marque fréquemment trouvées dans les tumeurs cutanées de mélanome ont été bien décrites13. La mutation de conducteur la plus dominante est BRAFV600E, et un modèle de souris génétiquement modifié pour le mélanome de BRAFV600Ea été généré par le groupe Bosenberg14 et déposé dans le laboratoire de Jackson. En utilisant ce modèle de souris, notre étude récente a démontré l’exigenc...

Le mélanome, la forme maligne des tumeurs mélanocytaires, est le cancer le plus agressif dans la peau avec un mélanome cutané responsable de la majorité des décès par cancer de la peau1. Aux États-Unis, le mélanome est couramment diagnostiqué; Il devrait s’agir du 5ème au 6ème type de cancer le plus fréquent parmi les nouveaux cas de cancer estimés en 20182. En outre, alors que les incidences globales sur le cancer ont montré la tendance de la réduction progressive au cours des dernières décennies, les taux d’incidence des mélanomes cutanés au cours des dernières décennies démontrent une augmentation continue et rapide des deux sexes2.
Pour lutter plus efficacement contre le mélanome cutané, il est important de bien comprendre les premiers événements du développement du mélanome à partir de leurs cellules d’origine afin de mieux identifier les méthodes préventives cliniquement efficaces. Il est maintenant connu que les cellules souches adultes peuvent contribuer significativement à la formation de tumeurs comme les origines cellulaires des cancers dans de nombreux types différents d’organes, y compris les tissus de la peau3,4,5. De même, les cellules souches de mélanocytes adultes (mcscs) dans la peau dorsale murin peuvent fonctionner comme des cellules de mélanome d’origine lors d’une activation aberrante des voies RAS/RAF et Akt 6. Cependant, ces mutations oncogéniques seules ne sont pas en mesure d’induire efficacement la formation de tumeurs des MCSC quiescents. les tumeurs mélanocytaires finissent par se développer lorsque les MCSCs deviennent actifs lors du cyclisme sur les cheveux naturels. Cependant, dans ce protocole, nous décrirons des méthodes pour induire artificiellement l’activation cellulaire des mcscs sujettes à la tumeur, facilitant ainsi un contrôle précis du mélanome initiation6,7.
Grâce aux méthodes décrites ici, le contrôle spatial et temporel de l’initiation du mélanome cutané à partir de MCSCs à tendance tumorale exprimant des BRAFV600E oncogéniques ainsi que la perte d’expression de PTEN peuvent être exécutés avec succès, car nous ont déjà rapporté6. Cette méthode incorpore les résultats antérieurs qui démontrent l’activation de cellules souches de follicule pileux par dépilation ainsi que comment l’exposition de la peau de murin à UV-B peut faciliter l’activation des mcscs résidant au follicule pileux et à la translocation de ce cellulaire sous-population à l’épiderme interfolliculaire6,8,9,10. Ces systèmes de modèles in vivo peuvent fournir des informations précieuses sur la façon dont les changements physiologiques et environnementaux peuvent altérer l’État cellulaire des MCSC sujettes aux mélanomes, qui à leur tour peuvent induire une initiation significative du mélanome dans la peau.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T5648-1G</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>13258</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>45-C8267-2.5L-EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4OH-tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H7904-25MG</td>
			<td>For topical treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26g 1/2&#34; needles</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet hair trimmer</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>09990-502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removal cream</td>
			<td>Nair</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Available at most drug stores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultraviolet light bulb</td>
			<td>UVP</td>
			<td>95-0042-08</td>
			<td>model XX-15M midrange UV lamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 proof ethanol</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>pure ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoplast PE</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22900700</td>
			<td>paraffin pellets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral Buffered Formalin, 10%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear-Rite 3</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>6901</td>
			<td>xylene substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O.C.T. Compound</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>23730571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>89199-430</td>
			<td>for FFPE processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryomolds</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4557</td>
			<td>25 x 20 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FFPE metal mold</td>
			<td>Leica</td>
			<td>3803082</td>
			<td>24 x 24 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia inhalation system</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14085-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14558-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum</td>
			<td>FST</td>
			<td>14018-13</td>
			<td>Straight, blunt/blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11252-00</td>
			<td>Dumont #5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Micro-Adson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tyr-CreER; LSL-BrafV600E; Pten-f/f</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>13590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSL-tdTomato</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>007914</td>
			<td>ai14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCATTACCGGTCGATGCAACGAGTGATGAG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GAGTGAACGAACCTGGTCGAAATCAGTGCG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>TGAGTATTTTTGTGGCAACTGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTCTGCTGGGAAAGCGGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AGCTAGCCACCATGGCTTGAGTAAGTCTGCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCTTTACAAGCGCACGCAGACTGTAGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>ACTCAAGGCAGGGATGAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AATCTAGGGCCTCTTGTGCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCTTGATATCGAATTCCTGCAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AAGGGAGCTGCAGTGGAGTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCGAAAATCTGTGGGAAGTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GGCATTAAAGCAGCGTATCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-4</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTGTTCCTGTACGGCATGG</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells

Le mélanome cutané est bien connu comme le cancer de la peau le plus agressif. Bien que les facteurs de risque et les modifications génétiques majeures continuent d’être documentés avec une profondeur croissante, le taux d’incidence du mélanome cutané a montré une augmentation rapide et continue au cours des dernières décennies. Afin de trouver des méthodes préventives efficaces, il est important de comprendre les premiers pas de l’initiation du mélanome dans la peau. Des données antérieures ont démontré que les cellules souches de mélanocytes folliculaires (MCSCs) dans les tissus cutanés adultes peuvent agir comme des cellules d’origine du mélanome lorsqu’elles expriment des mutations oncogéniques et des altérations génétiques. La tumorigenèse causée par les MCSC sujettes aux mélanomes peut être induite lorsque les MCSCs passent d’un état de repos à actif. Cette transition dans les MCSCs sujettes aux mélanomes peut être favorisée par la modulation de l’état d’activité des cellules souches du follicule pileux ou par des facteurs environnementaux extrinsiques tels que l’ultraviolet-B (UV-B). Ces facteurs peuvent être manipulés artificiellement en laboratoire par dépilation chimique, ce qui provoque la transition des cellules souches de follicule pileux et des MCSCs d’un état de repos à actif, et par l’exposition UV-B utilisant une lumière de paillehaut. Ces méthodes permettent un contrôle spatial et temporel réussi de l’initiation du mélanome cutané dans la peau dorsale murin. Par conséquent, ces systèmes de modèles in vivo seront utiles pour définir les premiers pas de l’initiation du mélanome cutané et pourraient être utilisés pour tester les méthodes potentielles de prévention des tumeurs.

Initiation du mélanome cutané induite par dépilation chimique
La procédure de dépilation chimique est représentée dans la figure 2. Lorsque les souris sont 7 semaines postnatales, leur peau dorsale est en télogène. Au cours de la télogène, les cellules souches du follicule pileux et les MCSCs sont connues pour être dans un état de repos. La peau ne doit pas montrer de c...

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Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells

Contrôle spatial et temporel de l’initiation du mélanome murin à partir de cellules souches de mélanocytes mutants

La procédure suivante décrit une méthode de contrôle spatial et temporel de l’initiation de tumeurs mélanocytaires dans la peau dorsale murin, à l’aide d’un modèle de souris génétiquement modifiée. Ce protocole décrit l’initiation des mélanomes cutanés macroscopiques et microscopiques.

Cutaneous melanoma is well known as the most aggressive skin cancer. Although the risk factors and major genetic alterations continue to be documented ...

Le mélanome est largement diagnostiqué dans le monde entier, avec une incidence croissante. Ces protocoles permettent de contrôler soigneusement les premiers stades de l’initiation du mélanome, ce qui facilite l’étude de son développement. En contrôlant l’heure et l’emplacement de l’activation des cellules souches mélanocytes, nous avons la capacité de discerner les changements au sein de la population de cellules souches et son initiation du mélanome de souche nouvelle souche.Dahihm Kim et Luye An, étudiants diplômés du laboratoire, démontreront la procédure. Deux à trois jours avant le début de l’intervention, utilisez une tondeuse électrique pour raser la peau dorsale de chaque souris anesthésiée de sept semaines. Le jour de l’expérience, utilisez un coton-tige pour appliquer une fine couche de crème depilatory sur la peau exposée.Une fois que la crème a été appliquée uniformément, utilisez des cotons-tiges propres pour enlever la crème, suivie d’un léger essuyage avec un chiffon humide pour enlever toute crème résiduelle. Retournez ensuite chaque souris dans sa cage d’accueil avec surveillance jusqu’à ce qu’elle soit complètement rétablie. Pour l’irradiation UV-B, couvrez la peau dorsale d’un matériau protecteur UV-B de sorte que seule la région désirée soit exposée, et couvrez la chambre UV d’un couvercle résistant aux UV.Allumez ensuite la lampe UV-B pour irradier la souris pendant la période expérimentale appropriée avant de retourner la souris dans une cage vide avec surveillance jusqu’à la récupération complète. Pour isoler les échantillons de peau, utilisez une tondeuse électrique pour enlever les cheveux de la zone dorsale de la peau des souris irradiées euthanasiées, et brossez légèrement la peau exposée avec un tissu sans peluche pour dégager la zone. Faire une petite incision avec des ciseaux pointus juste au-dessus de la base de la queue et insérer de grands ciseaux émoussés dans l’incision pour séparer les tissus conjonctifs sous-dermaux.À l’aide de ciseaux pointus, couper soigneusement le long du bord de la région de la peau d’intérêt pour isoler l’échantillon de tissu et placer le tissu de la peau excisée sur une serviette en papier propre. Ensuite, utilisez des forceps ternes pour étirer la peau afin qu’elle adhère à la serviette et est tendue. Lorsque tous les échantillons ont été récoltés, placez un échantillon de peau et un support de serviette en papier dans un morceau de papier filtre plié immédiatement à côté du pli, en prenant soin que l’échantillon est lisse et non plié ou froissé.Fermez les côtés du papier filtre avec des agrafes et coupez le papier. Puis submergez complètement les échantillons dans de la formaline tamponnée neutre à 10 % pendant trois à cinq heures à température ambiante avant de laver les tissus avec deux lavages de cinq minutes dans de l’eau déionisée. Après le deuxième lavage, retirez soigneusement tout matériau résiduel des tissus de la peau et coupez les bords des échantillons afin qu’ils ne soient pas déchiquetés.Ensuite, faire trois coupes sagittales dans chaque échantillon de sorte que la largeur des bandes n’est pas plus de cinq millimètres, et faire des coupes transversales de sorte que les échantillons ne sont pas plus de 20 millimètres de large. Placez un moule cryo contenant une température de coupe optimale ou un milieu OCT dans une orientation portrait, et placez quatre à cinq morceaux de peau sur le dessus de l’OCT. Lorsque tous les morceaux sont en place, utilisez deux paires de forceps fins pour apporter le long bord de chaque morceau de peau au fond du moule cryo de sorte que les échantillons sont verticaux dans l’OCT et perpendiculairement à la base du moule.Remplissez ensuite le moule avec oct supplémentaire à la deuxième lèvre et placez le moule sur une surface plane d’un morceau de glace sèche, en utilisant des forceps pour ajuster tous les morceaux de peau qui peuvent avoir changé pendant le transfert que le bloc commence à geler si nécessaire. Lorsque les souris sont sept semaines après la naissance, leur peau dorsale est en telogène. Pendant le telogen, le follicule pileux et les cellules souches de mélanocyte sont connus pour être dans un état de repos quiescent, et la peau ne devrait montrer aucune croissance significative de cheveux après rasage.La dépilation chimique, cependant, peut induire l’activation de cellules souches de follicule pileux, induisant la croissance significative de cheveux dans la région d’intérêt. Comme la déppilation chimique peut induire de manière significative l’activation des cellules souches du follicule pileux et des mélanocytes, les cellules souches mélanocytes sujettes au mélanome à l’état actif peuvent former des tumeurs et l’initiation microscopique du mélanome peut être observée dans les deux semaines suivant la déppilation chimique. L’irradiation UV-B peut également induire l’initiation de tumeur des cellules souches de mélanocytes quiescentes et tumeur-enclines.Fait important, les UV-B induit la translocation directe des cellules souches mélanocytes de leur niche folliculaire de cellules souches à l’épiderme inter folliculaire. En outre, UV-B peut induire la formation cutanée de mélanome d’origine de cellules souches dans tout l’épiderme interfollicular. Semblable à la peau dorsale, l’initiation du mélanome induite par les UV-B peut être observée notamment dans d’autres zones de la peau, comme la peau de l’oreille.En effet, comparée à la peau d’oreille de contrôle, couverte par le tissu UV-résistant, la peau d’oreille exposée aux UV-B démontre une pigmentation plus élevée due à une charge plus élevée d’initiation de mélanome. Différentes doses d’UV-B peuvent avoir des effets différents sur la peau de la souris et l’activité des mélanocytes. Par conséquent, il est important de déterminer et d’optimiser la dose d’irradiation avant de commencer votre expérience.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

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Recherche

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Tirer parti du phénotype de population latérale déclenchée par l&#39;ADN pour détecter et purifier les cellules souches du cancer à partir d&#39;échantillons biologiques

Cancer is a stem cell-driven disease and eradication of these cells has become a major therapeutic goal. Deciphering vulnerabilities of Cancer Stem Cells ...

Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells

À l’aide de CRISPR/Cas9 gène édition pour étudier l’activité oncogénique de calréticuline mutante dans les cellules hématopoïétiques dépendant de Cytokine

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Enquête de dépendances génétiques utilisant la concurrence fondée sur les Cas9-CRISPR

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We present a flow cytometric approach for analyzing mitochondrial ROS in various live bone marrow (BM)-derived stem and progenitor cell populations from ...

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Isolement de vésicules extracellulaires enrichies en exosomes transportant un facteur de stimulation des colonies de granulocytes-macrophages à partir de cellules souches embryonnaires

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