Name: spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells
Uploaded: 2019-06-07T14:45:00
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この作品は、ピアが受賞 W81XWH-16-1-0272 の下で癌研究プログラムを検討したことを通じて、保健省の補佐官の事務局長によって支持されました。意見、解釈、結論、および勧告は、著者のものであり、必ずしも国防総省によって承認されていません。この研究はまた、コーネル・ステム・セル・プログラムからのシード・グラントによっても支持されました。H. ムーンは、コーネル大学の脊椎動物ゲノム研究者プログラムによって支持されました。

すべての動物の処置は、コーネル大学機関の動物ケアおよびユース委員会 (IACUC) に従って行われます。
1. 準備
<ol><li>
12日目の生後マウスからのテールクリップを収集し、95° c で 0.05 N NaOH の400μ l を1時間にわたって消化します。ボルテックスと 1 M トリス-HCl、pH 7 の32μ l を追加します。ジャクソン研究所を通じて提供される PCR プロトコールに従って遺伝子型マウ...

<ol>
	<li>Wernli, K. J., Henrikson, N. B., Morrison, C. C., Nguyen, M., Pocobelli, G., Blasi, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+skin+cancer+in+adults:+updated+evidence+report+and+systematic+review+for+the+US+preventive+services+task+force.">Screening for skin cancer in adults: updated evidence report and systematic review for the US preventive services task force.</a> The Journal of the American Medical Association. 316 (4), 436-447 (2016).</li><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2018.">Cancer statistics, 2018.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 68 (1), 7-30 (2018).</li><li>White, A. C., Lowry, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refining+the+role+for+adult+stem+cells+as+cancer+cells+of+origin.">Refining the role for adult stem cells as cancer cells of origin.</a> Trends in Cell Biology. 25 (1), 11-20 (2015).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+cancer+cells+of+origin+in+cutaneous+tumors.">Understanding cancer cells of origin in cutaneous tumors.</a> Cancer Stem Cells. , 263-284 (2016).</li><li>Blanpain, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+the+cellular+origin+of+cancer.">Tracing the cellular origin of cancer.</a> Nature Cell Biology. 15 (2), 126-134 (2013).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melanocyte+stem+cell+activation+and+translocation+initiate+cutaneous+melanoma+in+response+to+UV+exposure.">Melanocyte stem cell activation and translocation initiate cutaneous melanoma in response to UV exposure.</a> Cell Stem Cell. 21 (5), 665-678 (2017).</li><li>Moon, H., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+path+from+melanocyte+stem+cells+to+cutaneous+melanoma+illuminated+by+UVB.">A path from melanocyte stem cells to cutaneous melanoma illuminated by UVB.</a> Molecular &#38; Cellular Oncology. 5 (2), e1409864 (2018).</li><li>Rabbani, P., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+activation+of+Wnt+in+epithelial+and+melanocyte+stem+cells+initiates+pigmented+hair+regeneration.">Coordinated activation of Wnt in epithelial and melanocyte stem cells initiates pigmented hair regeneration.</a> Cell. 145 (6), 941-955 (2011).</li><li>Chou, W. C., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+migration+of+follicular+melanocyte+stem+cells+to+the+epidermis+after+wounding+or+UVB+irradiation+is+dependent+on+Mc1r+signaling.">Direct migration of follicular melanocyte stem cells to the epidermis after wounding or UVB irradiation is dependent on Mc1r signaling.</a> Nature Medicine. 19 (7), 924-929 (2013).</li><li>Keyes, B. E., Segal, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nfatc1+orchestrates+aging+in+hair+follicle+stem+cells.">Nfatc1 orchestrates aging in hair follicle stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (51), (2013).</li><li>M&#252;ller-R&#246;ver, S., Handjiski, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comprehensive+guide+for+the+accurate+classification+of+murine+hair+follicles+in+distinct+hair+cycle+stages.">A comprehensive guide for the accurate classification of murine hair follicles in distinct hair cycle stages.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 117 (1), 3-15 (2001).</li><li>Kastenmayer, R. J., Fain, M. A., Perdue, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+retrospective+study+of+idiopathic+ulcerative+dermatitis+in+mice+with+a+C57BL/6+background.">A retrospective study of idiopathic ulcerative dermatitis in mice with a C57BL/6 background.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science&#8239;: JAALAS. 45 (6), 8-12 (2006).</li><li>Vultur, A., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SnapShot:+melanoma.">SnapShot: melanoma.</a> Cancer Cell. 23 (5), (2013).</li><li>Dankort, D., Curley, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Braf(V600E)+cooperates+with+Pten+loss+to+induce+metastatic+melanoma.">Braf(V600E) cooperates with Pten loss to induce metastatic melanoma.</a> Nature Genetics. 41 (5), 544-552 (2009).</li><li>Viros, A., Sanchez-Laorden, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraviolet+radiation+accelerates+BRAF-driven+melanomagenesis+by+targeting+TP53.">Ultraviolet radiation accelerates BRAF-driven melanomagenesis by targeting TP53.</a> Nature. 511 (7510), 478-482 (2014).</li></ol>

皮膚黒色腫腫瘍によく見られるホールマーク遺伝子改変がよく記載されている13.最も支配的なドライバ変異はBrafV600Eであり、 BrafV600E媒介性黒色腫の遺伝子組み換えマウスモデルはボーゼンベルクグループ14によって生成され、ジャクソン研究所に沈着した。このマウスモデルを用いて、我々の最近の研究は、背側皮膚<sup class="...

Melanocytic 腫瘍の悪性の形態である黒色腫は、皮膚悪性黒色腫を有する皮膚において最も攻撃的な癌であり、大部分の皮癌の死亡に関与している1.米国では、黒色腫は一般的に診断されます。20182の推定新癌症例の中でも 5番目から 6番目の最も一般的な癌型であると予測される。さらに、全体的な癌の発生率は、ここ数十年で徐々に減少している傾向を示しているが、過去数十年の間に皮膚黒色腫の発症速度は、両性2の連続的かつ急速に増加することを示している。
皮膚黒色腫に対してより効率的に対処するためには、臨床的に有効な予防的方法をよりよく特定するために、黒色腫の発生の初期の事象をその起源細胞から明確に理解することが重要である。成体幹細胞は、皮膚組織3、4、5を含む多くの異なる種類の器官において癌の細胞起源として腫瘍形成に有意に寄与し得ることが現在知られている。同様に、マウス背部皮膚における成人メラニン細胞幹細胞 (MCSCs) は、 Ras/RafおよびAkt経路6の異常な活性化の際に起源のメラノーマセルとして働くことができる。しかし、これらの発癌変異単独では、静止 MCSCs から腫瘍形成を効率的に誘導することはできない。 Melanocytic 腫瘍は、最終的に自然な髪のサイクリング中にアクティブになるときに発症します。しかし、このプロトコルでは、腫瘍を起こしやすい MCSCs の細胞活性化を人工的に誘発する方法を説明し、メラノーマの開始6,7の正確な制御を容易にします。
ここに記載された方法を通して、 Pten発現の損失と共に発癌BrafV600E を発現する腫瘍性 MCSCs からの皮膚黒色腫開始の空間的および時間的制御が首尾よく行われ、6を報告している。この方法は、脱毛を介して毛包幹細胞活性化を示し、UV B にマウスの皮膚の露出が毛包とこの細胞の転座に MCSCs の活性化を促進する方法を示す以前の所見を組み込んでいますinterfollicular 表皮6、8、9、10への亜集団。これらの in vivo モデルシステムは、生理的および環境的変化が黒色腫を起こしやすい MCSCs の細胞の状態をどのように変化させるかに関する貴重な情報を提供することができ、これは皮膚に黒色腫の著しい開始を誘発する可能性がある。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T5648-1G</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>13258</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>45-C8267-2.5L-EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4OH-tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H7904-25MG</td>
			<td>For topical treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26g 1/2&#34; needles</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet hair trimmer</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>09990-502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removal cream</td>
			<td>Nair</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Available at most drug stores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultraviolet light bulb</td>
			<td>UVP</td>
			<td>95-0042-08</td>
			<td>model XX-15M midrange UV lamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 proof ethanol</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>pure ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoplast PE</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22900700</td>
			<td>paraffin pellets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral Buffered Formalin, 10%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear-Rite 3</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>6901</td>
			<td>xylene substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O.C.T. Compound</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>23730571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>89199-430</td>
			<td>for FFPE processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryomolds</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4557</td>
			<td>25 x 20 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FFPE metal mold</td>
			<td>Leica</td>
			<td>3803082</td>
			<td>24 x 24 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia inhalation system</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14085-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14558-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum</td>
			<td>FST</td>
			<td>14018-13</td>
			<td>Straight, blunt/blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11252-00</td>
			<td>Dumont #5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Micro-Adson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tyr-CreER; LSL-BrafV600E; Pten-f/f</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>13590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSL-tdTomato</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>007914</td>
			<td>ai14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCATTACCGGTCGATGCAACGAGTGATGAG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GAGTGAACGAACCTGGTCGAAATCAGTGCG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>TGAGTATTTTTGTGGCAACTGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTCTGCTGGGAAAGCGGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AGCTAGCCACCATGGCTTGAGTAAGTCTGCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCTTTACAAGCGCACGCAGACTGTAGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>ACTCAAGGCAGGGATGAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AATCTAGGGCCTCTTGTGCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCTTGATATCGAATTCCTGCAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AAGGGAGCTGCAGTGGAGTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCGAAAATCTGTGGGAAGTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GGCATTAAAGCAGCGTATCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-4</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTGTTCCTGTACGGCATGG</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells

皮膚黒色腫は、最も攻撃的な皮膚癌としてよく知られている。リスク要因と主要な遺伝的変化は、増加する深さで文書化され続けているが、皮膚黒色腫の発生率は、近年の間に急速かつ連続的な増加を示している。効果的な予防方法を見つけるためには、皮膚における黒色腫開始の初期段階を理解することが重要です。以前のデータは、成体皮膚組織における濾胞性メラノサイト幹細胞 (MCSCs) が発癌突然変異および遺伝的改変を発現するときに起源のメラノーマ細胞として作用し得ることを実証した。黒色腫の発生しやすい MCSCs から生じる腫瘍形成は、静止状態から能動的に MCSCs 移行するときに誘発されます。黒色腫を起こしやすい MCSCs におけるこの移行は、毛包幹細胞の活性状態または紫外線 B (UV-B) のような外因性の環境因子の変調によって促進することができる。これらの因子は、実験室で化学脱毛によって人工的に操作することができ、毛包幹細胞および MCSCs を静止から活性状態に移行させ、卓上型光を用いて UV-B 曝露を引き起こす。これらの方法は、マウス背部皮膚における皮膚黒色腫開始の空間的および時間的な制御を成功させる。したがって、これらの in vivo モデルシステムは、皮膚黒色腫の開始の初期段階を定義するのに有益であり、腫瘍予防のための潜在的な方法を試験するために使用することができる。

化学脱毛によって誘発される皮膚黒色腫の開始
化学脱毛の手順は図 2に示されています。マウスが生後7週間のとき、その背側の皮膚は休止期にある。休止期の間、毛包幹細胞および MCSCs は休止状態にあることが知られている。皮膚はシェービング後に顕著な毛の成長を示さないはずで?...

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Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells

変異体メラノサイト幹細胞からのマウス黒色腫開始の空間的および時間的制御

以下の手順は、マウス背部皮膚における melanocytic 腫瘍開始の空間的および時間的な制御のための方法を説明する、遺伝子操作されたマウスモデルを使用する。このプロトコルは、肉眼的および微視的な皮膚黒色腫の開始を記載する。

Cutaneous melanoma is well known as the most aggressive skin cancer. Although the risk factors and major genetic alterations continue to be documented ...

黒色腫は世界的に広く診断され、発生率が増加しています。これらのプロトコルは、黒色腫開始の初期段階を慎重に制御することを可能にし、その発達の研究を促進する。メラノサイト幹細胞の活性化の時間と位置を制御することにより、幹細胞集団内の変化とその新しい株黒色腫の開始を識別する能力を有する。この手順のデモンストレーションは、研究室の大学院生であるダヒム・キムとルイ・アンです。処置を開始する2〜3日前に、電気トリマーを使用して、各麻酔付き7週間のマウスから後ろ肌を剃ります。実験当日は綿棒を使用して、露出した皮膚に脱毛クリームの薄い層を塗布します。クリームを均等に塗布したら、清潔な綿棒を使用してクリームを取り除き、湿った布で穏やかに拭いて残留クリームを取り除きます。その後、完全な回復まで監視して、ホームケージに各マウスを戻します。UV-B照射の場合は、所望の領域のみが露出するように、UV-B保護材料で後面皮膚を覆い、UV耐性の蓋でUVチャンバーを覆います。次に、UV-Bランプをオンにして、マウスを適切な実験期間に照射してから、完全に回復するまで監視してマウスを空のケージに戻します。皮膚サンプルを分離するには、電気トリマーを使用して安楽死させた照射マウスの後部皮膚領域から毛髪を除去し、露出した皮膚を糸くずのない組織で軽くブラッシングして領域をクリアする。尾の基部のすぐ上に鋭いはさみで小さな切開を行い、皮下結合組織を分離するために切開に大きな鈍いはさみを挿入します。鋭利なはさみを使用して、目的の皮膚領域の端に沿って慎重に切断し、組織サンプルを分離し、切除された皮膚組織をきれいなペーパータオルの上に置きます。その後、鈍い鉗子を使用して皮膚を伸ばし、タオルに付着し、緊張するようにします。すべてのサンプルが収穫されたら、折り目のすぐ隣にある折り畳まれたろ過紙にスキンサンプルとペーパータオルをバッキングし、サンプルが滑らかで折りたたんだりくしゃくしゃにしたりしないように注意してください。フィルターペーパーの側面をステープルで閉じ、用紙をトリミングします。その後、10%中性緩衝ホルマリンでサンプルを室温で3〜5時間完全に水没させ、脱イオン水に5分間の洗浄を2回洗浄して組織を洗浄します。2回目の洗浄後、皮膚組織から残留物質を慎重に取り除き、ギザギザしないようにサンプルの縁をトリミングします。次に、各サンプルに3つの矢状カットを行い、ストリップの幅が5ミリメートル以下になるようにし、サンプルの幅が20ミリメートル以下になるように横切りカットを行います。最適な切断温度またはOCT培地を含むクライオモールドを縦向きに配置し、OCTの上に4〜5個の皮膚を配置します。すべてのピースが配置されている場合は、2組の細かい鉗子を使用して、各スキンの長いエッジをクライオモールドの底に持ち込み、サンプルがOCT内で垂直になり、金型の底部に垂直になるようにします。次に、2 番目のリップに追加の OCT で金型を充填し、フォースを使用して、必要に応じてブロックが凍結し始めると、転送中にシフトした可能性のあるスキンピースを調整するために、ドライアイスの平らな表面に金型を配置します。マウスが出生後7週間である場合、背部皮膚は四色状態にある。四色細胞の間、毛包およびメラノサイト幹細胞は静止した休息状態にあることは知られており、皮膚は剃った後に有意な毛髪の成長を示すべきではない。しかし、化学的脱毛は、毛包幹細胞の活性化を誘発し、関心領域内で有意な毛髪成長を誘発する。化学的脱毛は毛包およびメラノサイト幹細胞の両方の活性化を有意に誘導することができるので、活発な状態で黒色腫を起こしやすいメラノサイト幹細胞は、腫瘍を形成し、化学的脱毛の2週間以内に観察することができる。UV-B照射はまた、静止、腫瘍が起こりやすいメラノサイト幹細胞からの腫瘍開始を誘導することができる。重要なことに、UV-Bは、卵胞性幹細胞ニッチから卵胞間表皮へのメラノサイト幹細胞の直接転位を誘導する。さらに、UV-Bは、濾胞性表皮全体にわたって、メラノサイト幹細胞由来の皮膚黒色腫形成を誘導することができる。皮膚の後部と同様に、UV-B誘発性黒色腫の開始は、耳の皮膚などの他の皮膚領域で顕著に観察され得る。実際、UV耐性布で覆われたコントロール耳の皮膚と比較して、UV-Bに曝露された耳の皮膚は、黒色腫の開始の負担が高いため、より高い色素沈着を示している。UV-Bの異なる用量は、マウスの皮膚およびメラノサイト活性に異なる効果を有し得る。したがって、実験を開始する前に照射量を決定し、最適化することが重要です。

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

周辺照射による疲労のマウスモデル

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

Harnessing the DNA Dye-triggered Side Population Phenotype to Detect and Purify Cancer Stem Cells from Biological Samples

生物学的サンプルからの癌幹細胞の検出と精製のためのDNA色素誘発側母集団表現型の活用

Cancer is a stem cell-driven disease and eradication of these cells has become a major therapeutic goal. Deciphering vulnerabilities of Cancer Stem Cells ...

Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells

CRISPR/Cas9 を使用して遺伝子変異カルレティキュリン サイトカイン依存性造血細胞での発癌性の活動を調査する編集

Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) is an adaptive immunity system in prokaryotes that has been repurposed by scientists to ...

Investigation of Genetic Dependencies Using CRISPR-Cas9-based Competition Assays

CRISPR ベース Cas9 の競争の試金を使用して遺伝的依存関係の調査

Gene perturbation studies have been extensively used to investigate the role of individual genes in AML pathogenesis. For achieving complete gene ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

それらの相互作用を研究する歯髄組織と癌細胞との共培養から間葉系幹細胞の分離

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Rapid Generation of Primary Murine Melanocyte and Fibroblast Cultures

原発性マウスメラノサイトと線維芽細胞培養の急速な生成

Defects in fibroblast or melanocyte function are associated with skin diseases, including poor barrier function, defective wound healing, pigmentation ...

Flow Cytometric Analysis of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and MLL-AF9 Driven Leukemia

マウス造血幹細胞および前駆細胞およびMLL-AF9駆動白血病におけるミトコンドリア活性酸素種のフローサイトメトリック解析

We present a flow cytometric approach for analyzing mitochondrial ROS in various live bone marrow (BM)-derived stem and progenitor cell populations from ...

Isolation of Exosome-Enriched Extracellular Vesicles Carrying Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor from Embryonic Stem Cells

胚性幹細胞からの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子を運ぶ外生エンリッチ細胞小胞の分離

Embryonic stem cells (ESCs) are pluripotent stem cells capable of self-renewal and differentiation into all types of embryonic cells. Like many other cell ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

3次元スフェロイド培養からの幹様細胞の分離

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Preparation of Mitochondria from Ovarian Cancer Tissues and Control Ovarian Tissues for Quantitative Proteomics Analysis

卵巣癌組織からのミトコンドリアの調製と定量プロテオミクス解析のためのコントロール卵巣組織

Ovarian cancer is a common gynecologic cancer with high mortality but unclear molecular mechanism. Most ovarian cancers are diagnosed in the advanced ...