Name: spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells
Uploaded: 2019-06-07T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Office of Assistant Secretary of Defense for Health Affairs, gjennom fagfellevurderte Cancer Research program under prisen W81XWH-16-1-0272. Meninger, tolkninger, konklusjoner og anbefalinger er de av forfatterne og er ikke nødvendigvis godkjent av Department of Defense. Dette arbeidet ble også støttet av et frø stipend fra Cornell Stem Cell program til AC White. H. Moon ble støttet av Cornell Center for virveldyr Genomics Scholar program.

Alle dyr prosedyrer er utført i samsvar med Cornell University institusjonelle Animal Care og use Committee (IACUC).
1. forberedelse
<ol><li>
Samle halen klipp fra 12 dagers postnatal mus og fordøye i 400 μL av 0,05 N NaOH ved 95 ° c for 1 h. Vortex og tilsett 32 μL av 1 M Tris-HCl, pH 7. Genotype mus i henhold til PCR protokoller gitt gjennom Jackson Laboratory og identifisere mus med genotype av interesse6. - Tyr-CreER – hemizygous (+/CreE...

<ol>
	<li>Wernli, K. J., Henrikson, N. B., Morrison, C. C., Nguyen, M., Pocobelli, G., Blasi, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+skin+cancer+in+adults:+updated+evidence+report+and+systematic+review+for+the+US+preventive+services+task+force.">Screening for skin cancer in adults: updated evidence report and systematic review for the US preventive services task force.</a> The Journal of the American Medical Association. 316 (4), 436-447 (2016).</li><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2018.">Cancer statistics, 2018.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 68 (1), 7-30 (2018).</li><li>White, A. C., Lowry, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refining+the+role+for+adult+stem+cells+as+cancer+cells+of+origin.">Refining the role for adult stem cells as cancer cells of origin.</a> Trends in Cell Biology. 25 (1), 11-20 (2015).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+cancer+cells+of+origin+in+cutaneous+tumors.">Understanding cancer cells of origin in cutaneous tumors.</a> Cancer Stem Cells. , 263-284 (2016).</li><li>Blanpain, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+the+cellular+origin+of+cancer.">Tracing the cellular origin of cancer.</a> Nature Cell Biology. 15 (2), 126-134 (2013).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melanocyte+stem+cell+activation+and+translocation+initiate+cutaneous+melanoma+in+response+to+UV+exposure.">Melanocyte stem cell activation and translocation initiate cutaneous melanoma in response to UV exposure.</a> Cell Stem Cell. 21 (5), 665-678 (2017).</li><li>Moon, H., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+path+from+melanocyte+stem+cells+to+cutaneous+melanoma+illuminated+by+UVB.">A path from melanocyte stem cells to cutaneous melanoma illuminated by UVB.</a> Molecular &#38; Cellular Oncology. 5 (2), e1409864 (2018).</li><li>Rabbani, P., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+activation+of+Wnt+in+epithelial+and+melanocyte+stem+cells+initiates+pigmented+hair+regeneration.">Coordinated activation of Wnt in epithelial and melanocyte stem cells initiates pigmented hair regeneration.</a> Cell. 145 (6), 941-955 (2011).</li><li>Chou, W. C., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+migration+of+follicular+melanocyte+stem+cells+to+the+epidermis+after+wounding+or+UVB+irradiation+is+dependent+on+Mc1r+signaling.">Direct migration of follicular melanocyte stem cells to the epidermis after wounding or UVB irradiation is dependent on Mc1r signaling.</a> Nature Medicine. 19 (7), 924-929 (2013).</li><li>Keyes, B. E., Segal, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nfatc1+orchestrates+aging+in+hair+follicle+stem+cells.">Nfatc1 orchestrates aging in hair follicle stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (51), (2013).</li><li>M&#252;ller-R&#246;ver, S., Handjiski, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comprehensive+guide+for+the+accurate+classification+of+murine+hair+follicles+in+distinct+hair+cycle+stages.">A comprehensive guide for the accurate classification of murine hair follicles in distinct hair cycle stages.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 117 (1), 3-15 (2001).</li><li>Kastenmayer, R. J., Fain, M. A., Perdue, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+retrospective+study+of+idiopathic+ulcerative+dermatitis+in+mice+with+a+C57BL/6+background.">A retrospective study of idiopathic ulcerative dermatitis in mice with a C57BL/6 background.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science&#8239;: JAALAS. 45 (6), 8-12 (2006).</li><li>Vultur, A., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SnapShot:+melanoma.">SnapShot: melanoma.</a> Cancer Cell. 23 (5), (2013).</li><li>Dankort, D., Curley, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Braf(V600E)+cooperates+with+Pten+loss+to+induce+metastatic+melanoma.">Braf(V600E) cooperates with Pten loss to induce metastatic melanoma.</a> Nature Genetics. 41 (5), 544-552 (2009).</li><li>Viros, A., Sanchez-Laorden, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraviolet+radiation+accelerates+BRAF-driven+melanomagenesis+by+targeting+TP53.">Ultraviolet radiation accelerates BRAF-driven melanomagenesis by targeting TP53.</a> Nature. 511 (7510), 478-482 (2014).</li></ol>

Hallmark genetiske forandringer ofte funnet i hud melanom svulster er godt beskrevet13. Den mest dominerende føreren mutasjon er BRAFV600E, og en genetisk konstruert musemodell for BRAFV600E-mediert melanom ble generert av Bosenberg gruppe14 og avsatt i Jackson Laboratory. Ved hjelp av denne muse modellen, viste vår siste studie kravet om mobilnettet aktivering av tumor utsatt MCSCer for betydelig initiering av BRAFV600E</s...

Melanom, den ondartede form av melanocytic svulster, er den mest aggressive kreft i huden med hud melanom ansvarlig for flertallet av hudkreft dødsfall1. I USA er melanom ofte diagnostisert; Det anslås å være den 5th til 6th vanligste krefttype blant de estimerte nye krefttilfeller i 20182. Videre, mens den generelle kreft forekomsten har vist trenden med gradvis reduksjon de siste ti årene, viser forekomsten av forekomst av hud melanom i løpet av de siste ti årene en kontinuerlig og rask økning i begge kjønn2.
For å bekjempe hud melanom mer effektivt er det viktig å forstå de tidlige hendelsene i melanom utvikling fra sine Opprinnelses celler for å bedre identifisere klinisk effektive forebyggende metoder. Det er nå kjent at voksne stamceller kan betydelig bidra til tumor dannelse som mobilnettet opprinnelsen til kreft i mange forskjellige typer organer, inkludert hud vev3,4,5. Tilsvarende voksen melanocyte stamceller (MCSCer) i murine rygg hud kan fungere som melanom celler opprinnelse på avvikende aktivering av RAS/RAF og akt trasé6. Men disse kreftfremkallende mutasjoner alene er ikke i stand til å effektivt indusere tumor dannelse fra Quiescent MCSCer. melanocytic svulster etter hvert utvikle seg når MCSCer blir aktive under naturlig hår sykling. Men i denne protokollen, vil vi beskrive metoder for å kunstig indusere mobilnettet aktivering av tumor utsatt MCSCer, og dermed tilrettelegge presis kontroll av melanom Initiation6,7.
Gjennom metodene som er beskrevet her, romlig og timelig kontroll av hud melanom initiering fra tumor utsatt MCSCer uttrykker kreftfremkallende BRAFV600E sammen med tap av Pten uttrykk kan med hell utføres, som vi tidligere har rapportert6. Denne metoden inkorporerer tidligere funn som demonstrerer hårsekken stilk cellen aktivisering gjennom hårfjerning samt hvordan eksponering av murine hud til UV-B kan forenkle aktivering av MCSCer bosatt til hårsekken og translokasjon av denne cellulære pasientpopulasjonen til interfollicular epidermis6,8,9,10. Disse in vivo modellsystemer kan gi verdifull informasjon om hvordan fysiologiske og miljømessige endringer kan endre den cellulære statusen til melanom-utsatt MCSCer, som igjen kan indusere betydelig initiering av melanom i huden.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T5648-1G</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>13258</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>45-C8267-2.5L-EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4OH-tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H7904-25MG</td>
			<td>For topical treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26g 1/2&#34; needles</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet hair trimmer</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>09990-502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removal cream</td>
			<td>Nair</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Available at most drug stores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultraviolet light bulb</td>
			<td>UVP</td>
			<td>95-0042-08</td>
			<td>model XX-15M midrange UV lamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 proof ethanol</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>pure ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoplast PE</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22900700</td>
			<td>paraffin pellets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral Buffered Formalin, 10%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear-Rite 3</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>6901</td>
			<td>xylene substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O.C.T. Compound</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>23730571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>89199-430</td>
			<td>for FFPE processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryomolds</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4557</td>
			<td>25 x 20 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FFPE metal mold</td>
			<td>Leica</td>
			<td>3803082</td>
			<td>24 x 24 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia inhalation system</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14085-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14558-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum</td>
			<td>FST</td>
			<td>14018-13</td>
			<td>Straight, blunt/blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11252-00</td>
			<td>Dumont #5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Micro-Adson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tyr-CreER; LSL-BrafV600E; Pten-f/f</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>13590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSL-tdTomato</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>007914</td>
			<td>ai14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCATTACCGGTCGATGCAACGAGTGATGAG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GAGTGAACGAACCTGGTCGAAATCAGTGCG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>TGAGTATTTTTGTGGCAACTGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTCTGCTGGGAAAGCGGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AGCTAGCCACCATGGCTTGAGTAAGTCTGCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCTTTACAAGCGCACGCAGACTGTAGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>ACTCAAGGCAGGGATGAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AATCTAGGGCCTCTTGTGCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCTTGATATCGAATTCCTGCAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AAGGGAGCTGCAGTGGAGTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCGAAAATCTGTGGGAAGTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GGCATTAAAGCAGCGTATCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-4</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTGTTCCTGTACGGCATGG</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells

Hud melanom er godt kjent som den mest aggressive hudkreft. Selv om risikofaktorene og de store genetiske endringene fortsatt dokumenteres med økende dybde, har forekomst frekvensen av hud melanom vist en rask og kontinuerlig økning de siste ti årene. For å finne effektive forebyggende metoder, er det viktig å forstå de tidlige trinnene av melanom initiering i huden. Tidligere data har vist at follikulær melanocyte stamceller (MCSCer) i voksen hud vev kan fungere som melanom celler opprinnelse når uttrykke kreftfremkallende mutasjoner og genetiske endringer. Tumorigenesis som oppstår fra melanom utsatt MCSCer kan bli indusert når MCSCer overgang fra en Quiescent til aktiv tilstand. Denne overgangen i melanom utsatt MCSCer kan fremmes av modulering av enten hårsekken stamceller ' aktivitet stat eller gjennom ytre miljømessige faktorer som ultrafiolett-B (UV-B). Disse faktorene kan kunstig manipuleres i laboratoriet av kjemiske hårfjerning, som forårsaker overgangen av hårsekken stamceller og MCSCer fra en Quiescent til aktiv tilstand, og ved UV-B eksponering ved hjelp av et stasjonære lys. Disse metodene gir vellykket romlig og timelig kontroll av hudens melanom initiering i murine rygg hud. Derfor, disse in vivo modellsystemer vil være verdifullt å definere de tidlige trinnene av hud melanom initiering og kan brukes til å teste potensielle metoder for tumor forebygging.

Hårfjerning av hud melanom forårsaket av kjemiske
Prosedyren for kjemisk hårfjerning er avbildet i figur 2. Når musene er 7-ukers postnatal, er deres rygg hud i telogen. Under telogen, hårsekken stamceller og MCSCer er kjent for å være i en Quiescent, hviletilstand. Huden skal ikke vise noen signifikant hårvekst etter barbering. På den annen side, kjemisk hårfjerning kan i...

Watch this Scientific Journal Video about Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells at JoVE.com

Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells

Romlig og Temporal kontroll av murine melanom innvielse fra mutant melanocyte stamceller

Følgende prosedyre beskriver en metode for romlig og timelig kontroll av melanocytic tumor initiering i murine rygg hud ved hjelp av en genetisk konstruert musemodell. Denne protokollen beskriver makroskopisk og mikroskopisk hud melanom innvielse.

Cutaneous melanoma is well known as the most aggressive skin cancer. Although the risk factors and major genetic alterations continue to be documented ...

Melanom er mye diagnostisert over hele verden, med økende forekomst. Disse protokollene gjør at de tidlige stadiene av melanominitiering kan kontrolleres nøye, noe som letter studiet av utviklingen. Ved å kontrollere tid og plassering av melanocytt stamcelleaktivering, har vi muligheten til å skjelne endringene i stamcellepopulasjonen og dens nye stamme melanom initiering.Demonstrere prosedyren vil være Dahihm Kim og Luye An, graduate studenter fra laboratoriet. To til tre dager før du begynner prosedyren, bruk en elektrisk trimmer til å barbere dorsal huden fra hver bedøvet syv uker gamle mus. På dagen for eksperimentet, bruk en bomullspinne til å påføre et tynt lag med hårfjerningskrem på den eksponerte huden.Når kremen er jevnt påført, bruk rene bomullspinner for å fjerne kremen, etterfulgt av mild tørking med en fuktig klut for å fjerne eventuell restkrem. Deretter returnerer hver mus til sitt hjem bur med overvåking til full gjenoppretting. For UV-B bestråling, dekk den dorsale huden med UV-B beskyttende materiale slik at bare ønsket region vil bli utsatt, og dekke UV-kammeret med et UV-bestandig lokk.Slå deretter på UV-B-lampen for å bestråle musen for riktig eksperimentell tidsperiode før du returnerer musen til et tomt bur med overvåking til full gjenoppretting. For å isolere hudprøvene, bruk en elektrisk trimmer til å fjerne hår fra det dorsale hudområdet til de eutaniserte bestrålte musene, og børst lett den eksponerte huden med et lofritt vev for å rydde området. Lag et lite snitt med skarp saks like over bunnen av halen og sett inn store, stumpe saks i snittet for å skille subdermal bindevev.Bruk skarp saks, skjær forsiktig langs kanten av hudområdet av interesse for å isolere vevsprøven og plassere det utskåret hudvevet på et rent papirhåndkle. Bruk deretter kjedelige tang for å strekke huden slik at den holder seg til håndkleet og er stram. Når alle prøvene er høstet, legg en hudprøve og papirhåndkle bak i et stykke brettet filterpapir rett ved siden av pressen, og ta vare på at prøven er jevn og ikke brettet eller krøllet.Lukk sidene av filterpapiret med stifter, og trim papiret. Senk deretter prøvene helt ned i 10% nøytral bufret formalin i tre til fem timer ved romtemperatur før du vasker vevet med to fem minutters vasker i deionisert vann. Etter den andre vasken, fjern forsiktig eventuell gjenværende materiale fra hudvevet, og trim kantene på prøvene slik at de ikke er taggete.Deretter lager du tre sagittalkutt i hver prøve slik at bredden på stripene ikke er mer enn fem millimeter, og gjør tverrgående kutt slik at prøvene ikke er mer enn 20 millimeter brede. Plasser en kryoform som inneholder optimal skjæretemperatur eller OCT-medium i stående retning, og plasser fire til fem hudstykker på toppen av OCT. Når alle bitene er på plass, bruk to par fine tang for å bringe den lange kanten av hvert stykke hud til bunnen av kryoformen slik at prøvene er vertikale i OCT og vinkelrett på bunnen av formen.Fyll deretter formen med ekstra OCT til den andre leppen og legg formen på en flat overflate av et stykke tørris, ved hjelp av tang for å justere eventuelle hudstykker som kan ha forskjøvet seg under overføringen som blokken begynner å fryse etter behov. Når mus er syv uker postnatal, er deres dorsal hud i telogen. Under telogen, hårsekken og melanocytt stamceller er kjent for å være i en quiescent hviletilstand, og huden bør ikke vise noen betydelig hårvekst etter barbering.Kjemisk hårfjerning kan imidlertid indusere hårsekk stamcelleaktivering, noe som induserer betydelig hårvekst i interesseområdet. Som kjemisk hårfjerning kan betydelig indusere aktivering av både hårsekken og melanocytt stamceller, melanom-utsatt melanocytt stamceller i en aktiv tilstand kan danne svulster og mikroskopisk melanom initiering kan observeres innen to uker etter kjemisk hårfjerning. UV-B bestråling kan også indusere tumorinitiering fra quiescent, tumorutsatte melanocytt stamceller.Viktigere, UV-B induserer direkte translokasjon av melanocytt stamceller fra deres follikulære stamcelle nisje til inter-follikulær epidermis. Videre kan UV-B indusere melanocytt stamcelle-opprinnelse kutan melanom dannelse i hele interfollicular epidermis. I likhet med dorsal hud, uv-B-indusert melanom initiering kan observeres spesielt i andre hudområder, for eksempel ørehud.Faktisk, sammenlignet med kontroll av ørehud, dekket av UV-resistent klut, viser ørehud utsatt for UV-B en høyere pigmentering på grunn av en høyere byrde av melanominitiering. Ulike doser uv-B kan ha forskjellige effekter på musehud og melanocyttaktivitet. Derfor er det viktig å bestemme og optimalisere bestrålingsdosen før du starter eksperimentet.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

En musemodell av Fatigue indusert av Peripheral Bestråling

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

Harnessing the DNA Dye-triggered Side Population Phenotype to Detect and Purify Cancer Stem Cells from Biological Samples

Harnessing DNA Dye-utløst Side Population Fenotype for å oppdage og rense kreft stamceller fra biologiske prøver

Cancer is a stem cell-driven disease and eradication of these cells has become a major therapeutic goal. Deciphering vulnerabilities of Cancer Stem Cells ...

Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells

Bruker CRISPR/Cas9 Gene redigering for å undersøke kreftfremkallende aktiviteten av muterte Calreticulin i cytokin avhengige blodkreft cellene

Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) is an adaptive immunity system in prokaryotes that has been repurposed by scientists to ...

Investigation of Genetic Dependencies Using CRISPR-Cas9-based Competition Assays

Undersøkelse av genetisk avhengigheter ved hjelp av CRISPR-Cas9-baserte konkurranse analyser

Gene perturbation studies have been extensively used to investigate the role of individual genes in AML pathogenesis. For achieving complete gene ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Mesenchymal stamceller isolert fra cellulose vev og co kultur kreftceller å studere deres samhandling

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Rapid Generation of Primary Murine Melanocyte and Fibroblast Cultures

Rapid Generation av primær murine melanocyte og Fibroblast kulturer

Defects in fibroblast or melanocyte function are associated with skin diseases, including poor barrier function, defective wound healing, pigmentation ...

Flow Cytometric Analysis of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and MLL-AF9 Driven Leukemia

Flow analytiske analyse av mitokondrie reaktive oksygen arter i murine blodkreft stem og stamceller og MLL-AF9 drevet leukemi

We present a flow cytometric approach for analyzing mitochondrial ROS in various live bone marrow (BM)-derived stem and progenitor cell populations from ...

Isolation of Exosome-Enriched Extracellular Vesicles Carrying Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor from Embryonic Stem Cells

Isolering av exosome-beriket ekstracellulære vesikler som bærer granulocytt-makrofag kolonistimulerende faktor fra embryonale stamceller

Embryonic stem cells (ESCs) are pluripotent stem cells capable of self-renewal and differentiation into all types of embryonic cells. Like many other cell ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Isolering av Stem-lignende celler fra 3-dimensjonale spheroid kulturer

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Preparation of Mitochondria from Ovarian Cancer Tissues and Control Ovarian Tissues for Quantitative Proteomics Analysis

Utarbeidelse av mitokondrier fra eggstokkene Cancer vev og kontroll eggstokkene vev for kvantitativ Proteomikk analyse

Ovarian cancer is a common gynecologic cancer with high mortality but unclear molecular mechanism. Most ovarian cancers are diagnosed in the advanced ...