Name: spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells
Uploaded: 2019-06-07T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells at JoVE.com

Эта работа была поддержана Управлением помощника министра обороны по вопросам здравоохранения, в рамках программы исследования рака Peer Reviewed в рамках премии W81XWH-16-1-0272. Мнения, толкования, выводы и рекомендации являются мнениями авторов и не обязательно одобрены министерством обороны. Эта работа была также поддержана семенной грант от Корнельской программы стволовых клеток для A.C. White. H. Moon был поддержан Корнельским центром позвоночной геномики Стипендиат программы.

Все процедуры для животных выполняются в соответствии с Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Корнельского университета (IACUC).
1. Подготовка
<ol><li>
Соберите хвостовые зажимы от 12-дневных послеродовых мышей и переварить в 400 л 0,05 N NaOH при 95 град?...

<ol>
	<li>Wernli, K. J., Henrikson, N. B., Morrison, C. C., Nguyen, M., Pocobelli, G., Blasi, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+skin+cancer+in+adults:+updated+evidence+report+and+systematic+review+for+the+US+preventive+services+task+force.">Screening for skin cancer in adults: updated evidence report and systematic review for the US preventive services task force.</a> The Journal of the American Medical Association. 316 (4), 436-447 (2016).</li><li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+statistics,+2018.">Cancer statistics, 2018.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 68 (1), 7-30 (2018).</li><li>White, A. C., Lowry, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refining+the+role+for+adult+stem+cells+as+cancer+cells+of+origin.">Refining the role for adult stem cells as cancer cells of origin.</a> Trends in Cell Biology. 25 (1), 11-20 (2015).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+cancer+cells+of+origin+in+cutaneous+tumors.">Understanding cancer cells of origin in cutaneous tumors.</a> Cancer Stem Cells. , 263-284 (2016).</li><li>Blanpain, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tracing+the+cellular+origin+of+cancer.">Tracing the cellular origin of cancer.</a> Nature Cell Biology. 15 (2), 126-134 (2013).</li><li>Moon, H., Donahue, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melanocyte+stem+cell+activation+and+translocation+initiate+cutaneous+melanoma+in+response+to+UV+exposure.">Melanocyte stem cell activation and translocation initiate cutaneous melanoma in response to UV exposure.</a> Cell Stem Cell. 21 (5), 665-678 (2017).</li><li>Moon, H., White, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+path+from+melanocyte+stem+cells+to+cutaneous+melanoma+illuminated+by+UVB.">A path from melanocyte stem cells to cutaneous melanoma illuminated by UVB.</a> Molecular &#38; Cellular Oncology. 5 (2), e1409864 (2018).</li><li>Rabbani, P., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinated+activation+of+Wnt+in+epithelial+and+melanocyte+stem+cells+initiates+pigmented+hair+regeneration.">Coordinated activation of Wnt in epithelial and melanocyte stem cells initiates pigmented hair regeneration.</a> Cell. 145 (6), 941-955 (2011).</li><li>Chou, W. C., Takeo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+migration+of+follicular+melanocyte+stem+cells+to+the+epidermis+after+wounding+or+UVB+irradiation+is+dependent+on+Mc1r+signaling.">Direct migration of follicular melanocyte stem cells to the epidermis after wounding or UVB irradiation is dependent on Mc1r signaling.</a> Nature Medicine. 19 (7), 924-929 (2013).</li><li>Keyes, B. E., Segal, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nfatc1+orchestrates+aging+in+hair+follicle+stem+cells.">Nfatc1 orchestrates aging in hair follicle stem cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (51), (2013).</li><li>M&#252;ller-R&#246;ver, S., Handjiski, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comprehensive+guide+for+the+accurate+classification+of+murine+hair+follicles+in+distinct+hair+cycle+stages.">A comprehensive guide for the accurate classification of murine hair follicles in distinct hair cycle stages.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 117 (1), 3-15 (2001).</li><li>Kastenmayer, R. J., Fain, M. A., Perdue, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+retrospective+study+of+idiopathic+ulcerative+dermatitis+in+mice+with+a+C57BL/6+background.">A retrospective study of idiopathic ulcerative dermatitis in mice with a C57BL/6 background.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science&#8239;: JAALAS. 45 (6), 8-12 (2006).</li><li>Vultur, A., Herlyn, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SnapShot:+melanoma.">SnapShot: melanoma.</a> Cancer Cell. 23 (5), (2013).</li><li>Dankort, D., Curley, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Braf(V600E)+cooperates+with+Pten+loss+to+induce+metastatic+melanoma.">Braf(V600E) cooperates with Pten loss to induce metastatic melanoma.</a> Nature Genetics. 41 (5), 544-552 (2009).</li><li>Viros, A., Sanchez-Laorden, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraviolet+radiation+accelerates+BRAF-driven+melanomagenesis+by+targeting+TP53.">Ultraviolet radiation accelerates BRAF-driven melanomagenesis by targeting TP53.</a> Nature. 511 (7510), 478-482 (2014).</li></ol>

Hallmark генетические изменения часто встречаются в кожной меланомы опухолей были хорошо описаны13. Наиболее доминирующей мутацией драйвера является BrafV600E, а генетически модифицированная модель мыши для Braf V600E-опосредованноемеланома была создана группо?...

Меланома, злокачественная форма меланоцитических опухолей, является наиболее агрессивным раком в коже с кожной меланомой, ответственной за большинство случаев смерти от рака кожи1. В Соединенных Штатах, меланома обычно диагностируется; по прогнозам, это будет 5-й до 6-й наиболее распространенный тип рака среди предполагаемых новых случаев рака в 2018году 2. Кроме того, в то время как общие заболеваемости раком показали тенденцию постепенного сокращения в последние десятилетия, кожные показатели заболеваемости меланомой в течение последних нескольких десятилетий демонстрируют непрерывное и быстрое увеличение обоих полов2.
Для более эффективной борьбы с кожной меланомой важно четко понимать ранние события развития меланомы из их клеток происхождения, чтобы лучше определить клинически эффективные профилактические методы. В настоящее время известно, что взрослые стволовые клетки могут значительно способствовать образованию опухоли, как клеточного происхождения рака во многих различных типах органов, включая ткани кожи3,4,5. Аналогичным образом, взрослые стволовые клетки меланоцитов (MCSCs) в куринской нижней кожи может работать как клетки меланомы происхождения при аномальной активации Рас / Раф и Акт пути6. Тем не менее, эти онкогенные мутации сами по себе не в состоянии эффективно вызвать образование опухоли от тихих MCSCs. Меланоцитические опухоли в конечном итоге развиваться, когда MCSCs становятся активными во время естественного цикла волос. Однако, в этом протоколе, мы опишите методы искусственного индуцирования клеточной активации подверженных опухоли MCSCs, тем самым облегчая точный контроль меланомы инициации6,7.
С помощью методов, описанных здесь, пространственный и временный контроль кожной меланомы инициации от опухолевых MCSCs, выражающих онкогенные BrafV600E вместе с потерей экспрессии Pten может быть успешно выполнена, как мы ранее сообщалио 6. Этот метод включает в себя предыдущие выводы, которые демонстрируют активации волосяного фолликула через депиляцию, а также как воздействие кожи мурина на УФ-В может способствовать активации MCSCs резидентов волосяного фолликула и транслокации этой клеточной субпопуляции до межфолликулярной эпидермис6,8,9,10. Эти системы in vivo могут предоставить ценную информацию о том, как физиологические и экологические изменения могут изменить клеточный статус меланомы подверженных MCSCs, которые, в свою очередь, может вызвать значительное начало меланомы в коже.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T5648-1G</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tamoxifen</td>
			<td>Cayman Chemical</td>
			<td>13258</td>
			<td>For systemic injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corn oil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>45-C8267-2.5L-EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4OH-tamoxifen</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H7904-25MG</td>
			<td>For topical treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26g 1/2&#34; needles</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet hair trimmer</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>09990-502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removal cream</td>
			<td>Nair</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Available at most drug stores</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultraviolet light bulb</td>
			<td>UVP</td>
			<td>95-0042-08</td>
			<td>model XX-15M midrange UV lamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 proof ethanol</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>pure ethanol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoplast PE</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22900700</td>
			<td>paraffin pellets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral Buffered Formalin, 10%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501128-4L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear-Rite 3</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>6901</td>
			<td>xylene substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O.C.T. Compound</td>
			<td>Thermo</td>
			<td>23730571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>89199-430</td>
			<td>for FFPE processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryomolds</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4557</td>
			<td>25 x 20 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FFPE metal mold</td>
			<td>Leica</td>
			<td>3803082</td>
			<td>24 x 24 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia inhalation system</td>
			<td>various</td>
			<td></td>
			<td>Veterinary grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14085-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissor</td>
			<td>FST</td>
			<td>14558-09</td>
			<td>Straight, sharp/sharp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum</td>
			<td>FST</td>
			<td>14018-13</td>
			<td>Straight, blunt/blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11252-00</td>
			<td>Dumont #5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forcep</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Micro-Adson</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tyr-CreER; LSL-BrafV600E; Pten-f/f</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>13590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSL-tdTomato</td>
			<td>Jackson Labs</td>
			<td>007914</td>
			<td>ai14</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCATTACCGGTCGATGCAACGAGTGATGAG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cre-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GAGTGAACGAACCTGGTCGAAATCAGTGCG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>TGAGTATTTTTGTGGCAACTGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Braf-V600E-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTCTGCTGGGAAAGCGGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AGCTAGCCACCATGGCTTGAGTAAGTCTGCA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kras-G12D-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCTTTACAAGCGCACGCAGACTGTAGA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>ACTCAAGGCAGGGATGAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AATCTAGGGCCTCTTGTGCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pten-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GCTTGATATCGAATTCCTGCAGC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-1</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>AAGGGAGCTGCAGTGGAGTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-2</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CCGAAAATCTGTGGGAAGTC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-3</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>GGCATTAAAGCAGCGTATCC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tdTomato-4</td>
			<td></td>
			<td>n/a</td>
			<td>CTGTTCCTGTACGGCATGG</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

spatial and temporal control of murine melanoma initiation from mutant melanocyte stem cells

Кожная меланома хорошо известна как самый агрессивный рак кожи. Хотя факторы риска и основные генетические изменения продолжают фиксироваться с увеличением глубины, частота заболеваемости кожной меланомой в последние десятилетия быстро и непрерывно растет. Для того, чтобы найти эффективные профилактические методы, важно понимать ранние шаги начала меланомы в коже. Предыдущие данные показали, что фолликулярные меланоциты стволовых клеток (MCSCs) в тканях кожи взрослой кожи может выступать в качестве клеток меланомы происхождения при выражении онкогенных мутаций и генетических изменений. Tumorigenesis возникает от меланомы подверженных MCSCs может быть вызвано при переходе MCSCs от покоя к активному состоянию. Этот переход в меланомы подверженных MCSCs может быть повышена путем модуляции либо волосяного фолликула стволовых клеток состояние или через внутренние экологические факторы, такие как ультрафиолет-B (УФ-B). Эти факторы могут быть искусственно манипулировать в лаборатории путем химического депиляции, которая вызывает переход стволовых клеток волосяного фолликула и MCSCs от тихого к активному состоянию, и УФ-B воздействия с помощью скамейки света. Эти методы обеспечивают успешный пространственный и временный контроль кожной меланомы инициации в куринной донской кожи. Таким образом, эти системы in vivo будут полезны для определения ранних этапов начала кожной меланомы и могут быть использованы для тестирования потенциальных методов профилактики опухоли.

Кожная меланома инициации индуцированной химической депиляции
Процедура химического депиляции изображена на рисунке 2. Когда мыши 7-недельный послеродовой, их дорсальная кожа находится в телегене. Во время telo...

Watch this Scientific Journal Video about Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells at JoVE.com

Spatial and Temporal Control of Murine Melanoma Initiation from Mutant Melanocyte Stem Cells

Пространственный и временный контроль Мурин Меланомы Инициация от мутантных меланоцитов стволовых клеток

Следующая процедура описывает метод пространственного и временного контроля меланоцитарной опухоли инициации в куринной дорсальной кожи, используя генетически инженерии мыши модели. Этот протокол описывает макроскопические, а также микроскопические кожной меланомы инициации.

Cutaneous melanoma is well known as the most aggressive skin cancer. Although the risk factors and major genetic alterations continue to be documented ...

Меланома широко диагностируется во всем мире, с ростом заболеваемости. Эти протоколы позволяют тщательно контролировать ранние стадии инициации меланомы, облегчая изучение ее развития. Контролируя время и расположение активации стволовых клеток меланоцитов, мы можем различить изменения в популяции стволовых клеток и ее новое начало меланомы штамма.Демонстрацией процедуры будут Дахим Ким и Луйе Ан, аспиранты лаборатории. За два-три дня до начала процедуры используйте электрический триммер для бритья спинной кожи от каждой обезболивающей семинедельной мыши. В день эксперимента используйте ватный тампон, чтобы нанесите тонкий слой крема для депилямента на обыщевную кожу.После того, как крем был равномерно применен, используйте чистые ватные тампоны, чтобы удалить крем, а затем нежный вытирая влажной тканью, чтобы удалить любые остаточные сливки. Затем вернуть каждую мышь в свою домашнюю клетку с мониторингом до полного выздоровления. Для облучения УФ-В накройте спинную кожу ультрафиолетовым защитным материалом, чтобы подвергаться воздействию только нужной области, и накройте УФ-камеру УФ-резистентной крышкой.Затем включите лампу UV-B, чтобы облучить мышь в течение соответствующего экспериментального периода времени, прежде чем вернуть мышь в пустую клетку с мониторингом до полного выздоровления. Чтобы изолировать образцы кожи, используйте электрический триммер, чтобы удалить любые волосы из спинной области кожи облученных мышей, и слегка щеткой подвергаются кожи с ворсинки свободной ткани, чтобы очистить область. Сделайте небольшой разрез острыми ножницами чуть выше основания хвоста и вставьте большие тупые ножницы в разрез, чтобы отделить поддермальные соединительные ткани.Используя острые ножницы, тщательно вырезать вдоль края кожи области интереса, чтобы изолировать образец ткани и поместить вырезанной ткани кожи на чистое бумажное полотенце. Затем используйте тупые типсы, чтобы растянуть кожу так, чтобы она придерживалась полотенца и была подтянутой. Когда все образцы были собраны, поместите образец кожи и бумажное полотенце поддержку в кусок сложенной фильтровальной бумаги непосредственно рядом с складкой, заботясь о том, чтобы образец гладкий и не сложенный или мятый.Закройте стороны фильтровальной бумаги скобами и обрежьте бумагу. Затем полностью погрузить образцы в 10%нейтральный буферный формалин в течение трех-пяти часов при комнатной температуре перед мытьем тканей с двумя пятиминутными мойки в деионизированной воде. После второй стирки тщательно удалите остаточный материал из тканей кожи и обрежьте края образцов так, чтобы они не были зубчатыми.Затем сделайте три прогиба в каждом образце так, чтобы ширина полос не более пяти миллиметров, и сделайте поперечные разрезы так, чтобы образцы были не более 20 миллиметров в ширину. Позиция крио плесень, содержащая оптимальную температуру резки или OCT среды в портретной ориентации, и место от четырех до пяти кусков кожи на вершине OCT. Когда все части находятся на месте, использовать две пары тонких типсов довести длинный край каждого куска кожи в нижней части крио формы так, что образцы вертикальны в рамках OCT и перпендикулярно основанию формы.Затем заполните форму с дополнительными OCT на вторую губу и поместите плесень на плоскую поверхность куска сухого льда, используя типсы, чтобы настроить любые части кожи, которые, возможно, сместились во время передачи, как блок начинает замерзать по мере необходимости. Когда мышам семь недель послеродового, их спинная кожа находится в телогене. Во время телогена, волосяной фолликул и меланоцитов стволовых клеток, как известно, в состоянии покоя, и кожа не должна показывать значительный рост волос после бритья.Химическая депиляция, однако, может вызвать активацию стволовых клеток волосяного фолликула, вызывая значительный рост волос в пределах области интереса. Поскольку химическая депиляция может значительно вызвать активацию как волосяного фолликула, так и меланоцитов стволовых клеток, склонных к меланоме меланоцитов стволовых клеток в активном состоянии может образовывать опухоли и микроскопической меланомы начала можно наблюдать в течение двух недель после химического депиляции. УФ-B облучение может также вызвать инициирование опухоли из тихие, опухолевые меланоциты стволовых клеток.Важно отметить, что УФ-В индуцирует прямую транслокацию стволовых клеток меланоцитов из их фолликулярной ниши стволовых клеток в меж фолликулярный эпидермис. Кроме того, УФ-B может вызвать образование меланоцитов стволовых клеток, происходящих из кижной меланомы на протяжении всего межфолликулярного эпидермиса. Как и спинной кожи, УФ-B-индуцированной меланомы инициации можно заметно наблюдать в других областях кожи, таких как кожа уха.Действительно, по сравнению с контрольной кожей уха, покрытой УФ-резистентной тканью, кожа уха, подвергаемая воздействию УФ-В, демонстрирует более высокую пигментацию из-за более высокого бремени начала меланомы. Различные дозы УФ-В могут иметь различное влияние на кожу мыши и меланоцитов деятельности. Поэтому важно определить и оптимизировать дозу облучения до начала эксперимента.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

Мышь Модель усталости, индуцированный Peripheral Облучение

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

Harnessing the DNA Dye-triggered Side Population Phenotype to Detect and Purify Cancer Stem Cells from Biological Samples

Использование фенотипированного бокового популяционного фенотипа ДНК для обнаружения и очистки раковых стволовых клеток от биологических образцов

Cancer is a stem cell-driven disease and eradication of these cells has become a major therapeutic goal. Deciphering vulnerabilities of Cancer Stem Cells ...

Using CRISPR/Cas9 Gene Editing to Investigate the Oncogenic Activity of Mutant Calreticulin in Cytokine Dependent Hematopoietic Cells

С помощью ТРИФОСФАТЫ/Cas9 гена, редактирования для изучения онкогенных активность мутантов Calreticulin в зависимых Cytokine гемопоэтических клеток

Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) is an adaptive immunity system in prokaryotes that has been repurposed by scientists to ...

Investigation of Genetic Dependencies Using CRISPR-Cas9-based Competition Assays

Исследование генетических зависимостей с помощью анализов на основе ТРИФОСФАТЫ Cas9 конкурс

Gene perturbation studies have been extensively used to investigate the role of individual genes in AML pathogenesis. For achieving complete gene ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Мезенхимальных стволовых клеток изолированно от ткани пульпы и культуры совместно с раковых клеток, чтобы изучить их взаимодействия

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Rapid Generation of Primary Murine Melanocyte and Fibroblast Cultures

Быстрое поколение первичных культур Мурин Меланоцит и Фибробласт

Defects in fibroblast or melanocyte function are associated with skin diseases, including poor barrier function, defective wound healing, pigmentation ...

Flow Cytometric Analysis of Mitochondrial Reactive Oxygen Species in Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells and MLL-AF9 Driven Leukemia

Поток Цитометрический анализ митохондриальных реактивных видов кислорода в Мурин гематопоитических стволовых и прародителей клеток и MLL-AF9 Driven лейкемии

We present a flow cytometric approach for analyzing mitochondrial ROS in various live bone marrow (BM)-derived stem and progenitor cell populations from ...

Isolation of Exosome-Enriched Extracellular Vesicles Carrying Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor from Embryonic Stem Cells

Выделение экзосомных внеклеточных везикул, несущих гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор, из эмбриональных стволовых клеток

Embryonic stem cells (ESCs) are pluripotent stem cells capable of self-renewal and differentiation into all types of embryonic cells. Like many other cell ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Изоляция стволовых клеток от трехмерных сфероидных культур

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Preparation of Mitochondria from Ovarian Cancer Tissues and Control Ovarian Tissues for Quantitative Proteomics Analysis

Подготовка митохондрий из тканей рака яичников и контроль тканей яичников для количественного анализа протеомики

Ovarian cancer is a common gynecologic cancer with high mortality but unclear molecular mechanism. Most ovarian cancers are diagnosed in the advanced ...