Name: robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils
Uploaded: 2020-01-21T12:00:00
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J. W. C. wird von den Canadian Institutes of Health Research (CIHR) unterstützt. Die Autoren danken Dr. Chunxiang Sun für ihre Unterstützung bei der Durchführung der Trypan-Blaufärbung.

Alle murinen Studien entsprachen den einschlägigen ethischen Vorschriften und wurden vom University of Toronto Animal Care Committee und der Research Ethics Board (Protokoll 20011930) genehmigt.
1. Ligature Installation
HINWEIS: Dies ist ein nicht-steriler chirurgischer Eingriff, der in einem Standard-Operationssaal durchgeführt werden kann. Die Verwendung von keimfreien Tieren (hier nicht behandelt) erfordert den Umgang innerhalb eines Biosicherheitsschranks, die V...

Das kritischste Element, das mit der Verwendung des murinen Ligatur-induzierten Modells der Parodontitis verbunden ist, ist um die Beibehaltung der Ligatur bis zum Zeitpunkt des Opfers oder der absichtlichen Entfernung zentriert. Die installierte biofilmretentive Ligatur ist in der Lage, einen signifikanten Verlust der alveolären Knochenhöhe in nur 6 Tagen zu induzieren, Plateau zwischen dem 11-16 Tage Zeitraum39. Die Entscheidung, Tiersubjekte vor der maximalen Periode des Knochenverlustes zu o...

Parodontitis (PD) ist eine osteolytische Erkrankung, die mit einer signifikanten Wirtsmorbidität und wirtschaftlichen Belastung verbunden ist, die sich durch Zahnfleischentzündung und Verlust der Weichteilanhaftung und der ossösen Unterstützung für das betroffene Gebiss1,2,3,4manifestiert. Dieser Prozess wird durch Wechselwirkungen zwischen der oralen Mikrobiota und dem angeborenen Immunsystem des Wirts bestimmt. Es ist auch verbunden mit Verschlimmerung von anderen systemischen entzündlichen Erkrankungen wie Diabetes, Herz-Kreislauf-Erkrankungen, und Krebs5,6,7,8. Historisch wurde vermutet, dass pd Pathogenese von großen Mengen spezifischer Bakterien wie Porphyromonas gingivalis9abhängig ist. Jüngste Erkenntnisse deuten jedoch darauf hin, dass die mikrobielle Komponente von PD durch den zahnärztlichen Biofilm vermittelt wird. Der Biofilm ist eine organisierte, komplexe Gemeinschaft zahlreicher Mikroorganismen, die in gesunden symbiotischen und destruktiven dysbiotischen Zuständen existieren können10,11. Der orale Biofilm bietet normalerweise Resistenzen gegen den Wirt, indem er die Etablierung von Brennpunkten pathogener Bakterien verhindert und fördert die ideale Zahnfleischgewebestruktur und -funktion durch Regulierung der Wirtsimmunantwort12,13. Störungen der gleichgewichtikomischen Beziehung zwischen commensalen Organismen innerhalb der Mundhöhle und dem Wirtsimmunsystem können zu Veränderungen der Gewebehomöostase führen, was zu Dysbakteriose und Entwicklung des markenzeichen klinischen und radiographischen Aussehens von PD5,10,12,13,14führt.
Interessanterweise ist die Etablierung einer oralen Dysbakteriose, während für die Einleitung von PD erforderlich, nicht ausreichend, um PD bei allen Personen zu treiben, in Richtung der Fähigkeit des Wirts Immunantwort, den Übergang von Mikrobiota zwischen symbiotischen und dysbiotischen Zuständen zu untergraben15. Dies wirft ein besonderes Schlaglicht auf die Mittel, mit denen PD eine der Hauptfiguren des angeborenen Immunsystems beeinflusst, nämlich das polymorphonukleare Granulozyten (PMN), oder Neutrophil, aus lokaler und systemischer Perspektive16,17.
Beim Menschen werden PMNs mit einer Rate von 2 x 106 Zellen/h in gesunden parodontalen Bindegeweben aus dem Kreislauf rekrutiert, wo sie die vorherrschende Leukozytenpopulation sind. Hierbei werden sie anschließend als Bestandteil der Zahnfleischflüssigkeit aus dem Zahnfleischsulkus in die Mundhöhle ausgestoßen. In Gegenwart von PD manifestiert sich Neutrophie in der Zirkulation und Mundhöhle, wo diese Effektorzellen einen hyperinflammatorischen Phänotyp besitzen, der zur oben genannten Zerstörung des Parodontiums17,18,19,20,21,22führt. Daher ist es von größter Bedeutung, die Rolle von PMNs bei PD und anderen systemischen entzündungshemmenden Erkrankungen zu verstehen.
Obwohl weithin anerkannt ist, dass chronische Krankheiten wechselseitig mit PD in Verbindung gebracht werden, müssen die zugrunde liegenden Mechanismen noch aufgeklärt werden, was zu Schwierigkeiten bei der Bewältigung dieser morbiden und potenziell tödlichen systemischen Bedingungen beiträgt. Mehrere experimentelle Tiermodelle, jedes mit einzigartigen Vor- und Nachteilen, wurden verwendet, um die Pathophysiologie von PD23,24zu studieren. Mit Blick auf murine Modelle, gibt es eine Vielzahl von Protokollen, durch die die Untersuchung von PD erleichtert wird; sie besitzen jedoch mehrere technische und physiologische Mängel25,26,27,28,29,30,31.
Erstens erfordert das orale Gavage-Maus-Modell zahlreiche orale Impfungen menschlicher Parodontalerreger, um Zahnfleischentzündungen und Knochenverlust zu erzeugen. Zusätzlich, Es ist in der Regel von einer Periode der Antibiotika-Behandlung voran, um die murine commensale orale Flora zu unterwandern25. Dieses Modell erfordert oft eine spezielle Schulung, um die orale Gavage sicher durchzuführen, verwendet nur einen kleinen Bruchteil der parodontalen Krankheitserreger aus dem komplexeren menschlichen oralen Mikrobiom und erfordert mehrere Monate, um den Knochenverlust von Alveolar zu etablieren.
Im Gegensatz dazu nutzen chemisch induzierte murine Modelle die orale Abgabe von Trinitrobenzolsulfonsäure (TNBS) oder Dextransulfat-Natrium (DSS), Wirkstoffe, die häufig bei der Etablierung von murinen Modellen der Kolitis über einen Zeitraum von mehreren Monaten verwendet werden, um parodontalen Knochenverlust zu induzieren26. Es stehen intraorale und extraorale Abszessmodelle zur Verfügung, die die murinen Schneidezähne und Gewebe des Dorsums bzw. Desvariums betreffen. Im früheren Abszessmodell werden mehrere Injektionen von Bakterien verabreicht, wodurch mehrere Gingivaabszesse und ein Mangel an Alveolarknochenverlust entstehen, was ihre Verwendung in der Studie von PD begrenzt. Letztere Abszessmodelle sind deutlich geeigneter, bakterielle Virulenz, Entzündungen und Knochenresorption an Stellen außerhalb der Mundhöhle zu untersuchen, was die Bewertung des Parodontiums und des oralen Mikrobioms27,28,29,30,31eliminiert.
Mit dem ligaturinduzierten Modell der Parodontitis wurde üblicherweise eine geflochtene Seidennaht um den zweiten Molaren herum installiert. Alternativ kann ein einzelnes lineares Segment von Nahtmaterial zwischen dem ersten und zweiten Molaren32,33eingefügt werden. Das Ziel der Ligatur Platzierung ist es, bakterielle Ansammlung zu erleichtern und Dysbiose innerhalb der Zahnfleischsulci zu erzeugen, was zu parodontalen Gewebeentzündungen und Zerstörung der Gewebe, die das Parodontium bilden. Vor allem ist dieses Modell in der Lage, deutlich mehr alveolären Knochenverlust im Vergleich zu den häufiger verwendeten oralen Gavage Modell34produzieren. Erschwerend kommt hinzu, dass die Natürliche Resistenz mehrerer Mäusestämme (d. h. C57BL/6) gegen die Entwicklung des Alveolarknochenverlustes durch mehrere Mäusestämme (d. h. C57BL/6) erschwert wird. Dies ist auch problematisch, da dieser Stamm am häufigsten in der murinenbasierten Tierforschung verwendet wird35.
Bestehende Verfahren, die von Marchesan et al. und Abe und Hajishengallis beschrieben wurden, wurden entwickelt, um den technischen Akt der Platzierung der Ligatur33,36zu vereinfachen. Leider erfordert das frühere Protokoll spezielle 3D-gedruckte Geräte und besitzt das Potenzial für vorzeitigen Ligaturverlust, wodurch der Einsatz von Tieren und die Kosten, die mit zusätzlicher Zeit im Operationssaal verbunden sind, erhöht werden. Darüber hinaus erzeugen beide Protokolle nur kleine Regionen des erkrankten Parodontiums, die für eine Studie zur Verfügung stehen.
Die Vorteile, die mit dieser Technik liegen, basieren auf der gleichzeitigen Untersuchung der oralen Dysbiose und Immunologie, die das Parodontium steuern, der Nutzung von Low-Cost-Tieren mit unterschiedlichem genetischen Hintergrund und einfachen Haltungs- und Haltungspraktiken. Daher sollte das Ziel darin bestehen, das Volumen des erkrankten Gewebes zu maximieren und bei versuchen, die Grundsätze der Reduzierung der Tierforschung zu praktizieren, den Tierkonsum auf ein möglichst niedriges Niveau zu reduzieren. Dies erfordert, dass alle Tiere in die experimentellen Analysen einbezogen werden können37. Es sollte jedoch beachtet werden, dass unabhängig davon, welches Tiermodell der Parodontitis verwendet wird, es kein einziges Modell gibt, das jedes Element der menschlichen PD-Pathophysiologie umfasst.
Dieses neue Protokoll verwendet die Platzierung einer Ligatur um mehrere kieferlänstige Molzähne mit Instrumenten und Materialien, die in den meisten Laboratorien zu finden sind. Es lässt eine ausreichende Zeit, um einfach und sicher eine Ligatur zu installieren, die unwahrscheinlich ist, vorzeitig zu avulsieren. Schließlich wird, da PMNs die Zerstörung des Parodontiums in PD koordinieren, auch eine neuartige Methode zur Wiederherstellung oraler Neutrophile in einer weise vorgestellt, die dem Menschen ähnlich ist.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-mouse F4/80 Antibody</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>123131</td>
			<td>BV421, Clone BM8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse Ly6G Antibody</td>
			<td>BD</td>
			<td>560602</td>
			<td>PerCP-Cy5.5, Clone 1A8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 Male Mice</td>
			<td>Charles River</td>
			<td></td>
			<td>8 to 12 weeks old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Centrifuge Tube</td>
			<td>FroggaBio</td>
			<td>TB15-500</td>
			<td>15 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Centrifuge Tube</td>
			<td>FroggaBio</td>
			<td>TB50-500</td>
			<td>50 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS Buffer</td>
			<td>Multiple</td>
			<td></td>
			<td>1% BSA (BioShop), 2mM EDTA (Merck), 1x HBSS-/- (Gibco)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACSDiva</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td>v8.0.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibre-Lite</td>
			<td>Dolan-Jenner</td>
			<td></td>
			<td>Model 180</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlowJo</td>
			<td>Tree Star</td>
			<td></td>
			<td>v10.0.8r1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat Therapy Pump</td>
			<td>Hallowell</td>
			<td></td>
			<td>HTP-1500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot Glass Bead Sterilizer</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>66118-10</td>
			<td>Germinator 500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Scissors</td>
			<td>Almedic</td>
			<td>7602-A8-684</td>
			<td>Straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Vetoquinol</td>
			<td></td>
			<td>100mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSRFortessa</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td>X-20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse Serum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M5905-5ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Mesh Filter</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-547</td>
			<td>40 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>28908</td>
			<td>16% (w/v), Methanol Free</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered Saline</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1408-500ML</td>
			<td>Without CaCl2 and MgCl2, 10x</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Disposable Syringes</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Serum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R9759-5ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silk Suture</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>SS652</td>
			<td>C13 USP 5-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Splinter Forceps</td>
			<td>Almedic</td>
			<td>7726-A10-700</td>
			<td>#1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Splinter Forceps</td>
			<td>Almedic</td>
			<td>7727-A10-704</td>
			<td>#5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Dissecting Microscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>28865</td>
			<td>Photo-Zusatz</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Hypodemic Needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>305111</td>
			<td>26G X 1/2&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Rompun</td>
			<td></td>
			<td>20mg/mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils

Die Hauptvorteile der Untersuchung der Pathophysiologie der Parodontitis unter Verwendung muriner Modelle sind die reduzierten Kosten von Tieren, eine Reihe genetisch veränderter Stämme, die große Anzahl von Analysen, die an geernteten weich und harten Geweben durchgeführt werden können. Viele dieser Systeme unterliegen jedoch Verfahrenskritik. Als Alternative kann das ligaturinduzierte Modell der Parodontitis eingesetzt werden, das durch die lokalisierte Entwicklung und Retention eines dysbiotischen oralen Mikrobioms angetrieben wird, das schnell induziert und relativ zuverlässig ist. Leider sind die Varianten des ligaturinduzierten murinen Parodontitisprotokolls zu fokalen Regionen des Parodontiums isoliert und unterliegen einer vorzeitigen Avulsion der installierten Ligatur. Dadurch wird die für nachfolgende Analysen verfügbare Gewebemenge minimiert und die Anzahl der für die Untersuchung erforderlichen Tiere erhöht. Dieses Protokoll beschreibt die präzisen Manipulationen, die erforderlich sind, um erweiterte Molligaturen mit verbesserter Retention und Verwendung einer neuartigen Spültechnik zur Wiederherstellung oraler Neutrophilen bei Mäusen mit einem alternativen Ansatz, der die oben genannten technischen Herausforderungen.

Repräsentative Flusszytometriedaten aus oralen Spülproben einer naiven (Abbildung 3A) und entzündeten (Abbildung 3B) murinen Mundhöhle sekundär zu der Ligatur-induzierten Parodontitis zur Verfügung gestellt. Die Wiederherstellung von PMNs aus einer installierten Ligatur wird ebenfalls demonstriert (Abbildung 3C). Durchflusszytometerkanalspannungen wurden manuell kalibriert und...

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Robust Ligature-Induced Model of Murine Periodontitis for the Evaluation of Oral Neutrophils

Dieser Artikel stellt ein Protokoll zur Erstellung eines Ligatur-induzierten Modells der murinen Parodontitis mit mehreren Kiefer-Molaren, was zu größeren Bereichen des beteiligten Zahnfleischgewebes und Knochen für die nachfolgende Analyse sowie reduzierten Tiergebrauch. Eine Technik zur Beurteilung oraler Neutrophile in einer Weise, die dem menschlichen Probanden entspricht, wird ebenfalls beschrieben.

Robuste Ligatur-induzierte Modell der Murine Parodontitis für die Bewertung von oralen Neutrophilen

The main advantages of studying the pathophysiology of periodontal disease utilizing murine models are the reduced cost of animals, array of genetically ...

Das hier beschriebene Protokoll liefert den Forschern eine Methode, um orale Neutrophile innerhalb eines ligaturinduzierten Tiermodells der Parodontitis analog zu menschlichen Teilnehmern zu untersuchen. Der Hauptvorteil dieser Technik wird durch das erhöhte Volumen an entzündeten Zahnfleischgeweben hervorgehoben, das für die nachfolgende Analyse zur Verfügung steht, was den Tierischen Verbrauch reduziert. Unsere Fähigkeit, die biofilmbeschichteten Ligaturen aus der Umgebung der Zähne zu holen, ermöglicht die Simulation einer effektiven Behandlung einer lokalisierten Parodontitis.Die Verwendung dieses Modells könnte bei der Untersuchung der systemischen Auswirkungen der Parodontitis in einem Tiermodell aufgrund der erhöhten Bereiche von entzündeten Zahnfleischgeweben angewendet werden. Die Vertrautheit mit dem Einsatz von mikrochirurgischen Instrumenten und Seziermikroskopen sowie das Binden von Chirurgenknoten vor dem Umgang mit lebenden Tiersubjekten wird stark empfohlen. Die visuelle Demonstration dieser Technik ist entscheidend, um die Länge der Lernkurve zu reduzieren, die erforderlich ist, um eine kompetente Ligaturplatzierung zu erreichen.Demonstriert wird das Verfahren von Jeff Chadwig, einem Doktoranden aus meinem Labor. Beginnen Sie, indem Sie die Maus auf einer beheizten chirurgischen Plattform positionieren. Nachdem Sie sichergestellt haben, dass die Maus richtig beästhetisiert ist, stabilisieren Sie die Maxilla und den Unterkiefer in der offenen Position mit elastischen Bändern.Stützen Sie den Hals mit einer Baumwollrolle, um die Maxilla in einer horizontalen Position zu halten und den Körper und Schwanz zu bedecken, um Wärmeverlust zu mildern. Positionieren Sie das Operationsmikroskop an der gewünschten Vergrößerung und Beleuchtung über der Mundhöhle. Verwenden Sie Splitterzangen, um eine sterile 50 oder kleinere geflochtene Seidennaht um die Kiefermuskeln M1 und M2 innerhalb des Zahnfleischsulkus zu installieren.Positionieren Sie den distalen Schwanz der Naht auf der Gaumenseite des Gebisses und setzen Sie das proximale Segment zwischen dem Kontakt von M2 und M3 ein. Wickeln Sie es dann um die bukkale Oberfläche von M2 und legen Sie es zwischen den Kontakt von M1 und M2 ein. Stellen Sie sicher, dass beide Enden der Naht fest gezogen werden, um sie in den Zahnfleischsulkus zu treiben. Wickeln Sie das proximale Nahtsegment um M1 unter seiner Konturhöhe und legen Sie es zwischen den Kontakten von M1 und M2 ein. Ziehen Sie den proximalen Schwanz der Naht fest, um alle Hosen zu entfernen. Binden Sie die Enden der Naht mit einem Chirurgen Knoten und trimmen Sie die Schwänze so sortieren wie möglich.Legen Sie den Knoten in die Zahnfleischumarmung zwischen M1 und M2 auf der Gaumenseite des Kieferhöhlens. Es ist wichtig, dass der Knoten, der verwendet wird, um die Ligatur zu sichern, sicher ist und in Position ist, wo er das Tier nicht reizen oder mit dem Mastix stören wird. Nach der Ligatur-Installation, entfernen Sie die Maus aus dem chirurgischen Gerät und legen Sie es in einen sauberen Käfig unter einer Wärmelampe, stellen Sie sicher, dass sie zu überwachen, bis vollständig erholt.Sterilisieren Sie die chirurgischen Instrumente in der heißen Glasperlensterilisator zwischen jedem Tier. Beherbergen Sie jede Maus mit der entsprechenden Umweltanreicherung und ermöglichen ad libitum Zugang zu gefiltertem Wasser und püriertem Standard-Chow in einer temperatur- und feuchtigkeitskontrollierten Umgebung für sieben bis elf Tage. Wenn Sie bereit sind, Proben zu sammeln, verwenden Sie eine Pipette, um die Mundhöhle mit 100 Mikrolitersterilisierter vier Grad Celsius PBS ohne Kalzium und Magnesium für 10 Sekunden zu spülen.Wiederholen Sie die Spülung zwei weitere Male, wobei jede Spülung in das gleiche 15 Milliliter konische sterile Reagenzglas für jedes Tier. Führen Sie den Inhalt jedes 15 Milliliter-Rohrs durch einen 40 Mikrometer Nylon-Netzfilter in ein 50 Milliliter konisches Rohr und übertragen Sie das Filtrat in ein neues 15 Milliliter-Reagenzglas. Fügen Sie 33,3 Mikroliter 16% Paraformaldehyd hinzu, um die Probenfixierung zu erleichtern.Wirbeln Sie die Proben sofort und inkubieren Sie sie auf Eis für 15 Minuten. Paraformaldehyd ist das gefährlichste Reagenz, das im Protokoll verwendet wird, und sollte mit der empfohlenen persönlichen Schutzausrüstung behandelt werden, die vom Hersteller empfohlen wird. Nach der Inkubation das Rohr auf 15 Milliliter mit PBS füllen und dann bei 1000xg und vier Grad Celsius fünf Minuten zentrifugieren.Aspirieren Sie den Überstand, setzen Sie das Pellet in einem Milliliter FACS-Puffer bei vier Grad Celsius wieder auf und zählen Sie die Zellen auf einem Hämozytometer oder automatisierten Zellzähler. Wiederholen Sie die Zentrifugation und aspirieren Sie den Überstand. Dann setzen Sie das Zellpellet in einem geeigneten Volumen von FACS-Puffer für eine Endkonzentration von 500, 000 bis 1 Million Zellen pro 50 Mikroliter FACS-Puffer wieder auf und übertragen die Zellen in das FACS-Rohr.Fügen Sie einen Mikroliter Rattenserum und zwei Mikroliter Anti-Maus-IGG-Antikörper zu 50 Mikrolitern der Probe hinzu. Wirbeln Sie die Probe sofort und blockieren Sie sie für 20 Minuten auf Eis. Fügen Sie dann die entsprechenden Antikörper zu jeder Probe hinzu.Wirbel und inkubieren auf Eis für 30 Minuten im Dunkeln. Waschen Sie die Proben nach der Inkubation mit einem Milliliter FACS-Puffer, Wirbel kurz und Zentrifuge für fünf Minuten bei 1000xg und vier Grad Celsius. Dump den Überstand und verblocke vorsichtig die Öffnung des FACS-Rohrs.Wiederholen Sie die Wäsche zweimal, und setzen Sie die Proben dann in 250 Mikroliter FACS-Puffer zur Lagerung wieder auf. Bedecken Sie die Rohre mit Paraffinfolie, wickeln Sie sie in Aluminiumfolie und lagern Sie sie bei vier Grad Celsius, bis sie zur Analyse bereit sind. Die Durchflusszytometrie wurde verwendet, um Neutrophile zu analysieren, die von einer oralen Spülung einer naiven Maus erholt wurden, sowie eine orale Spülung und wiedergewonnene Ligatur von einer Maus mit Ligatur-induzierter Parodontitis.Zur Beurteilung des Alveolarknochenverlustes wurden alveolare Knochenwerte vom Alveolarknochenkamm bis zur Zementoenamel-Kreuzung für gesunde und ligaierte Mäuse gemessen. Anschließend wurden die Messdifferenzen berechnet. Obwohl hier nicht überprüft, kann auch die histopathologische, immunhistochemische und morphometrische Bewertung des Parodontiums und des Alveolarknochens je nach Forschungsfrage durchgeführt werden.Dieses Modell wird derzeit in meinem Labor verwendet, um die Auswirkungen des oralen angeborenen Immunsystems auf systemische Gesundheit und Krankheit zu untersuchen.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

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Forschung

Immunologie und Infektion

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Ein analytisches Werkzeug-Box für umfassende biochemische, strukturelle und Transkriptom Evaluation of Oral Biofilme von Mutans Streptokokken Mediated

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