Name: assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues
Uploaded: 2019-06-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

وكان هذا العمل دعما ماليا من خلال المنح المقدمة من مجلس منح البحوث في هونغ كونغ [17124718 و 17121714] ، وصندوق هونغ كونغ للبحوث الصحية والطبية [13142651 و 13142641] ، وصندوق البحوث التعاونية لهونغ كونغ [C7055] ، والوطنية الاساسيه برنامج البحوث في الصين [973 برنامج 2015 CB553603].

وقدمت جميع الكائنات المستخدمة في الدراسة التالية من قبل وحده المختبرات الحيوانية في كليه الطب ، جامعه هونغ كونغ. تم الحصول علي الموافقة الاخلاقيه من اللجنة الاداريه المعنية باستخدام المختبرات الحيوانية للتدريس والبحث (CULATR, no.: 4085-16).
1-الاعمال التحضيرية
<ol><li>اعداد الاد?...

<ol>
	<li>Furchgott, R. F., Zawadzki, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+obligatory+role+of+endothelial+cells+in+the+relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+acetylcholine.">The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine.</a> Nature. 288 (5789), 373-376 (1980).</li><li>Furchgott, R. F., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+relaxing+and+contracting+factors.">Endothelium-derived relaxing and contracting factors.</a> The FASEB Journal. 3 (9), 2007-2018 (1989).</li><li>Feletou, M., Kohler, R., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+vasoactive+factors+and+hypertension:+possible+roles+in+pathogenesis+and+as+treatment+targets.">Endothelium-derived vasoactive factors and hypertension: possible roles in pathogenesis and as treatment targets.</a> Current Hypertension Reports. 12 (4), 267-275 (2010).</li><li>Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction:+the+first+step+toward+coronary+arteriosclerosis.">Endothelial dysfunction: the first step toward coronary arteriosclerosis.</a> Circulation Journal. 73 (4), 595-601 (2009).</li><li>Feletou, M., Huang, Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-mediated+control+of+vascular+tone:+COX-1+and+COX-2+products.">Endothelium-mediated control of vascular tone: COX-1 and COX-2 products.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (3), 894-912 (2011).</li><li>Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanisms+of+endothelial+cell+dysfunction.">Cellular and molecular mechanisms of endothelial cell dysfunction.</a> Journal of Clinical Investigation. 100 (9), 2153 (1997).</li><li>Vanhoutte, P. M., Shimokawa, H., Tang, E. H., Feletou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+vascular+disease.">Endothelial dysfunction and vascular disease.</a> Acta physiologica. 196 (2), 193-222 (2009).</li><li>Kl&#246;&#223;, S., Bouloumi&#233;, A., M&#252;lsch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+and+chronic+hypertension+decrease+expression+of+rat+aortic+soluble+guanylyl+cyclase.">Aging and chronic hypertension decrease expression of rat aortic soluble guanylyl cyclase.</a> Hypertension. 35 (1), 43-47 (2000).</li><li>Csiszar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging-induced+phenotypic+changes+and+oxidative+stress+impair+coronary+arteriolar+function.">Aging-induced phenotypic changes and oxidative stress impair coronary arteriolar function.</a> Circulation Research. 90 (11), 1159-1166 (2002).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+SIRT1+prevents+age-induced+impairment+of+vasodilator+responses+by+enhancing+the+expression+and+activity+of+soluble+guanylyl+cyclase+in+smooth+muscle+cells.">Endothelial SIRT1 prevents age-induced impairment of vasodilator responses by enhancing the expression and activity of soluble guanylyl cyclase in smooth muscle cells.</a> Cardiovascular Research. , (2018).</li><li>Auch-Schwelk, W., Katusic, Z. S., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+inactivates+endothelium-derived+contracting+factor+in+the+rat+aorta.">Nitric oxide inactivates endothelium-derived contracting factor in the rat aorta.</a> Hypertension. 19 (5), 442-445 (1992).</li><li>Tang, E. H., Feletou, M., Huang, Y., Man, R. Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholine+and+sodium+nitroprusside+cause+long-term+inhibition+of+EDCF-mediated+contractions.">Acetylcholine and sodium nitroprusside cause long-term inhibition of EDCF-mediated contractions.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulation Physiology. 289 (6), H2434-H2440 (2005).</li><li>Ghiadoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+function+and+common+carotid+artery+wall+thickening+in+patients+with+essential+hypertension.">Endothelial function and common carotid artery wall thickening in patients with essential hypertension.</a> Hypertension. 32 (1), 25-32 (1998).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+Impairment+of+Vascular+Structure+and+Functions.">Age-related Impairment of Vascular Structure and Functions.</a> Aging and Disease. 8 (5), 590-610 (2017).</li><li>Tabit, C. E., Chung, W. B., Hamburg, N. M., Vita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+diabetes+mellitus:+Molecular+mechanisms+and+clinical+implications.">Endothelial dysfunction in diabetes mellitus: Molecular mechanisms and clinical implications.</a> Reviews in Endocrine &amp; Metabolic Disorders. 11 (1), 61-74 (2010).</li><li>Tanaka, K., Sata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+perivascular+adipose+tissue+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">Roles of perivascular adipose tissue in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Frontiers in Physiology. 9, 3 (2018).</li><li>Brown, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+in+vascular+function+and+disease:+a+review+of+current+research+and+animal+models.">Perivascular adipose tissue in vascular function and disease: a review of current research and animal models.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 34 (8), 1621-1630 (2014).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> The FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>G&#225;lvez-Prieto, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reduction+in+the+amount+and+anti-contractile+effect+of+periadventitial+mesenteric+adipose+tissue+precedes+hypertension+development+in+spontaneously+hypertensive+rats.">A reduction in the amount and anti-contractile effect of periadventitial mesenteric adipose tissue precedes hypertension development in spontaneously hypertensive rats.</a> Hypertension research. 31 (7), 1415 (2008).</li><li>Gao, Y. J., Lu, C., Su, L. Y., Sharma, A., Lee, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+vascular+function+by+perivascular+adipose+tissue:+the+role+of+endothelium+and+hydrogen+peroxide.">Modulation of vascular function by perivascular adipose tissue: the role of endothelium and hydrogen peroxide.</a> British Journal of Pharmacology. 151 (3), 323-331 (2007).</li><li>Gao, Y. -. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+promotes+vasoconstriction:+the+role+of+superoxide+anion.">Perivascular adipose tissue promotes vasoconstriction: the role of superoxide anion.</a> Cardiovascular Research. 71 (2), 363-373 (2006).</li><li>Szasz, T., Webb, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue:+more+than+just+structural+support.">Perivascular adipose tissue: more than just structural support.</a> Clinical Science (London). 122 (1), 1-12 (2012).</li><li>Ramirez, J. G., O'Malley, E. J., Ho, W. S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pro-contractile+effects+of+perivascular+fat+in+health+and+disease.">Pro-contractile effects of perivascular fat in health and disease.</a> Brish Journal of Pharmacology. 174 (20), 3482-3495 (2017).</li><li>Hajer, G. R., van Haeften, T. W., Visseren, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+dysfunction+in+obesity,+diabetes,+and+vascular+diseases.">Adipose tissue dysfunction in obesity, diabetes, and vascular diseases.</a> European Heart Journal. 29 (24), 2959-2971 (2008).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+properties+of+small+arterial+resistance+vessels+in+spontaneously+hypertensive+and+normotensive+rats.">Contractile properties of small arterial resistance vessels in spontaneously hypertensive and normotensive rats.</a> Circulation Research. 41 (1), 19-26 (1977).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ.">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260 (5552), 617-619 (1976).</li><li>del Campo, L., Ferrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wire+myography+to+study+vascular+tone+and+vascular+structure+of+isolated+mouse+arteries.">Wire myography to study vascular tone and vascular structure of isolated mouse arteries.</a> Methods in Molecular Biology. 1339, 255-276 (2015).</li><li>Dobrin, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+initial+length+on+length-tension+relationship+of+vascular+smooth+muscle.">Influence of initial length on length-tension relationship of vascular smooth muscle.</a> American Journal of Physiology. 225 (3), 664-670 (1973).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+prevents+metabolic+aging+caused+by+abnormal+SIRT1+function+in+adipose+tissues.">Calorie restriction prevents metabolic aging caused by abnormal SIRT1 function in adipose tissues.</a> Diabetes. 64 (5), 1576-1590 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caliber+dependent+calcitonin+gene-related+peptide-induced+relaxation+in+rat+coronary+arteries:+effect+of+K++on+the+tachyphylaxis.">Caliber dependent calcitonin gene-related peptide-induced relaxation in rat coronary arteries: effect of K+ on the tachyphylaxis.</a> European Journal of Pharmacology. 351 (1), 53-59 (1998).</li><li>Soltis, E. E., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perivascular+adipose+tissue+on+rat+aortic+smooth+muscle+responsiveness.">Influence of perivascular adipose tissue on rat aortic smooth muscle responsiveness.</a> Clinical and Experimental Hypertension A. 13 (2), 277-296 (1991).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>Fesus, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+is+a+novel+humoral+vasodilator.">Adiponectin is a novel humoral vasodilator.</a> Cardiovascular Research. 75 (4), 719-727 (2007).</li><li>Greenstein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+inflammation+and+hypoxia+abolish+the+protective+anticontractile+properties+of+perivascular+fat+in+obese+patients.">Local inflammation and hypoxia abolish the protective anticontractile properties of perivascular fat in obese patients.</a> Circulation. 119 (12), 1661-1670 (2009).</li><li>Yudkin, J. S., Eringa, E., Stehouwer, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Vasocrine"+signalling+from+perivascular+fat:+a+mechanism+linking+insulin+resistance+to+vascular+disease.">"Vasocrine" signalling from perivascular fat: a mechanism linking insulin resistance to vascular disease.</a> Lancet. 365 (9473), 1817-1820 (2005).</li><li>Xia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncoupling+of+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+perivascular+adipose+tissue+of+diet-induced+obese+mice.">Uncoupling of endothelial nitric oxide synthase in perivascular adipose tissue of diet-induced obese mice.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 36 (1), 78-85 (2016).</li><li>Xia, N., Forstermann, U., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+resveratrol+on+eNOS+in+the+endothelium+and+the+perivascular+adipose+tissue.">Effects of resveratrol on eNOS in the endothelium and the perivascular adipose tissue.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1403 (1), 132-141 (2017).</li><li>Schinzari, F., Tesauro, M., Cardillo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+and+perivascular+adipose+tissue+abnormalities+in+obesity-related+vascular+dysfunction:+novel+targets+for+treatment.">Endothelial and perivascular adipose tissue abnormalities in obesity-related vascular dysfunction: novel targets for treatment.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69 (6), 360-368 (2017).</li><li>Liu, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipocalin-2+deficiency+prevents+endothelial+dysfunction+associated+with+dietary+obesity:+role+of+cytochrome+P450+2C+inhibition.">Lipocalin-2 deficiency prevents endothelial dysfunction associated with dietary obesity: role of cytochrome P450 2C inhibition.</a> British Journal of Pharmacology. 165 (2), 520-531 (2012).</li><li>Martinez-Quinones, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+induced+morphological+and+physiological+changes+in+cells+of+the+arterial+wall.">Hypertension induced morphological and physiological changes in cells of the arterial wall.</a> American Journal of Hypertension. 31 (10), 1067-1078 (2018).</li><li>Outzen, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+value+of+mechanical+and+vasomotor+properties+of+mouse+isolated+mesenteric+resistance-sized+arteries.">Translational value of mechanical and vasomotor properties of mouse isolated mesenteric resistance-sized arteries.</a> Pharmacology Research and Perspectives. 3 (6), e00200 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Simonsen, A. H., Boonen, H. C., Outzen, E. M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ageing+on+the+passive+and+active+tension+and+pharmacodynamic+characteristics+of+rat+coronary+arteries:+age-dependent+increase+in+sensitivity+to+5-HT+and+K+.">Effect of ageing on the passive and active tension and pharmacodynamic characteristics of rat coronary arteries: age-dependent increase in sensitivity to 5-HT and K+.</a> Pharmacology. 90 (3-4), 160-168 (2012).</li></ol>

وبصرف الفضل عن الخلايا البطانية ، والإشارات المستمدة من PVAT تلعب دورا هاما في تنظيم العضلات السلس التفاعلات العضلية30. Pvat صحية النشرات لا والمضادة للالتهابات اديبونكتين لممارسه تاثير مضاد لمقلص علي الشرايين ، والتي تضيع في ظل الظروف المرضية مثل السمنة ومتلازمة الأيض<sup class="xref"...

يتم تحقيق التضيقات وتضييقات الشرايين عن طريق الارتخاء والانقباضات ، علي التوالي ، من خلايا العضلات الملساء الوعائية. التغيرات في استجابه الاوعيه الدموية من الشرايين الصغيرة تسهم في تنظيم الساكنة الدموية من ضغط الدم الشرياني عن طريق الأعصاب لااراديه والهرمونات الموجودة في الدم (علي سبيل المثال ، الكاتيكولولامين ، انجيوتنسين الثاني ، السيروتونين ، vasopressin). علي المستوي المحلي ، يتم تضمين الاستجابات الوعائية لخلايا العضلات الملساء بواسطة إشارات من كل من الخلايا البطانية للالعشير والانسجه الدهنية المحيطة بالشرايين (الشكل 1).
البطانة ليس فقط حاجزا سلبيا ، ولكن أيضا بمثابه سطح لتبادل الإشارات بين الدم وخلايا العضلات الملساء الاوعيه الدموية الاساسيه. عن طريق الإفراج عن مختلف المواد الفعالة للاوعيه ، بطانة يلعب دورا حاسما في السيطرة المحلية علي الاستجابات لهجة الاوعيه الدموية1. علي سبيل المثال, ردا علي استيل, يتم تنشيط synthase أكسيد النيتريك البطانية (نوس) في بطانة لإنتاج أكسيد النيتريك (NO), الذي يدفع الاسترخاء من العضلات الاساسيه السلس الاوعيه الدموية عن طريق تفعيل القابلة للذوبان guanylyl سيكلواسي (بوابه القيادة) 2. غيرها من المواد الفعالة للاوعيه وتشمل المنتجات من سيكلوكسيجيناسيس (علي سبيل المثال ، proستايسي و ثروبوككسان A2) ، ليبوكسيجيناز (علي سبيل المثال ، 12-هيدروكسي ييكوسيكاتينيويك الأحماض ، 12-hete) ، و سيتوكروم P450 مونوكسيجيناسيس (hete و الأحماض الدهنية, EETs), أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS), الببتيدات النشطة للاوعيه (مثل, الاندوثيلين و انجيوتنسين II), وعوامل فرط الاستقطاب بطانة (EDHF)3. التوازن الدقيق بين موسعات الاوعيه المشتقة من بطانة والمضيقين للاوعيه الحفاظ علي لهجة حركي المحلية4,5.
ويتميز الخلل البطانية من ضعف في توسع الاوعيه المعتمدة علي بطانة6, السمة المميزة للشيخوخة الاوعيه الدموية7. مع العمر ، يتم تخفيض قدره بطانة لتعزيز توسع الاوعيه تدريجيا ، ويرجع ذلك إلى حد كبير إلى انخفاض التوافر البيولوجي لا ، فضلا عن التعبير غير طبيعي ووظيفة نوس في البطانة وبوابه القيادة في خلايا العضلات الملساء الاوعيه الدموية8 , 9 , 10. خفض التوافر البيولوجي لا يقوي إنتاج بطانة التي تعتمد علي مضيق الاوعيه11,12. في الشرايين القديمة ، يسبب الخلل الغشائي فرط تنسج في وسائل الاعلام ، كما ينعكس في الزيادات الملحوظة في سماكه الجدار ، وعدد من النوى الإنسي ، والتي تذكرنا بسماكة الشرايين في ارتفاع ضغط الدم وتصلب الشرايين لوحظ في الإنسان مرضي13,14. الاضافه إلى ذلك ، الحالات المرضية الفسيولوجية مثل السمنة ، والسكري أو ارتفاع ضغط الدم تسريع تطوير الخلل الغشائي15،16.
الانسجه الدهنية الوعائية (PVAT) النشرات العديد من اديبوكينس لتنظيم هيكل الاوعيه الدموية ووظيفة17. وتوسط التاثير المضاد لمقلص من pvat من قبل عوامل الاسترخاء ، مثل اديبوكتين ، لا ، بيروكسيد الهيدروجين وكبريتيد الهيدروجين18،19،20. ومع ذلك ، اعتمادا علي الموقع والحالة المرضية ، PVAT أيضا يمكن ان تعزز استجابات مقلص في مختلف الشرايين21. وتشمل المواد الموالية لمقلص التي تنتجها pvat انجيوتنسين-الثاني ، ليبتين ، المقاومة ، والروس22،23.  في معظم الدراسات علي الاوعيه الدموية المعزولة, وقد اعتبر PVAT كدعم الهيكلية بسيطه للاوعيه الدموية التالي ازالتها اثناء اعداد أجزاء حلقه السفينة الدم. منذ الخلل الوظيفي الدهني يمثل عامل خطر مستقل لارتفاع ضغط الدم ومضاعفات القلب والاوعيه الدموية المرتبطة بها24، يجب النظر في pvat المحيطة الاوعيه الدموية عند التحقيق في الاستجابة الوعائية شرايين مختلفه.
وقد استخدمت أنظمه متعددة الأسلاك myograph علي نطاق واسع للتحقيق في وظائف حركي مجموعه متنوعة من الاوعيه الدموية ، بما في ذلك الشريان الابهر ، المساريقي ، الكلي ، الفخذ ، الدماغي والشرايين التاجية25،26. البروتوكولات الموصوفة هنا سوف تستخدم الأسلاك التصويرية لتقييم استجابه الاوعيه الدموية في الشرايين المساريقيه المعزولة عن نماذج الماوس المعدلة وراثيا ، مع تركيز خاص علي التحوير من قبل PVAT.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6625</td>
			<td>Stock concentration: 10-1 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-NAME (N&#969;-nitro-L-arginine methyl ester)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N5751</td>
			<td>Stock concentration: 3 x 10-2 M 
			Working concentration: 10-4 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6126</td>
			<td>Stock concentration: 10-2 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619 (9,11-dideoxy-9&#945;,11&#945;methanoepoxy prostaglandin F2&#945;)</td>
			<td>Enzo</td>
			<td>BML-PG023-0001</td>
			<td>Stock concentration: 10-5 M 
			Working concentration: 1-3 x 10-8 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwire myograph</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/26</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML848</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labchart7</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adipo-SIRT1 wild type mice</td>
			<td>Laboratory Animal Unit, The University of Hong Kong</td>
			<td>CULATR NO.: 4085-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated Petri dishes</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten wires</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>300331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tools</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues

تغيير استجابه لهجة الاوعيه الدموية للمؤثرات المرضية الفسيولوجية يساهم في تطوير مجموعه واسعه من الامراض القلبية الوعائية والايضيه. الخلل الغشائي يمثل الجاني الرئيسي للحد من توسع الاوعيه وزيادة انقباض الشرايين. الانسجه الدهنية (الدهون) المحيطة بالشرايين تلعب أدوارا مهمة في تنظيم الاسترخاء بطانة الاعتماد عليها و/أو انكماش خلايا العضلات الملساء الوعائية. ويمكن تقييم المحادثات المتقاطعة بين الانسجه الدهنية البطانته والوعائية السابقة باستخدام الاوعيه الدموية المثبتة بواسطة نظام التصوير بالأسلاك. ومع ذلك ، ينبغي وضع الإعدادات المثلي للشرايين المستمدة من الكائنات الحيوانية من مختلف الأنواع ، والاعمار ، والخلفيات الوراثية و/أو الظروف المرضية الفسيولوجية.

فحص علاقات الطول/التوتر للحصول علي عامل التطبيع k
ويؤثر مقدار التمدد المطبق علي جزء السفينة علي مدي تفاعل اكتين-ميوسين ، التالي القوه النشطة القصوى التي طورت. التالي ، لكل نوع من الاوعيه الدموية ، وتحديد كميه التمدد اللازمة ...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

تقييم استجابه نغمه الاوعيه الدموية باستخدام الشرايين المساريقيه المعزولة مع التركيز علي التحوير بواسطة الانسجه الدهنية الوعائية

يصف البروتوكول استخدام التصوير الضوئي للسلك لتقييم التوتر الكهربي لامتري لشرايين المساريقي المعزولة عن الفئران ، مع النظر بشكل خاص في التحوير بواسطة العوامل المنبعثة من الخلايا البطانية والانسجه الدهنية الوعائية.

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

مطلوب بروتوكول صارم جدا حتى نتمكن من مقارنة صحيحة الاستعدادات من نفس الحيوانات أو من الحيوانات المختلفة أو الشرايين في وجود أو عدم وجود الدهون التي تحيط بها أو في وجود أو عدم وجود endothelium. الميزة الرئيسية لهذه التقنية التجريبية هي أنه يمكننا مقارنة حلقات من نفس الشريان في ظل حالة متساوي القياس وبالتالي جعل استنتاجات صحيحة بشأن تأثير العوامل التجريبية التي نحقق فيها. يوفر هذا البروتوكول رؤى في تعديل استجابة الأوعية الدموية من قبل الأنسجة الدهنية الغدد الوعائية من الحيوانات المعدلة وراثيا مختلفة.تمثل اختلالات الأنسجة الدهنية عامل خطر مستقل لارتفاع ضغط الدم ومضاعفاته القلبية الوعائية المرتبطة به. يتضمن myograph لدينا خطوات معقدة متعددة تتطلب الحذر الشديد في كل نقطة لتجنب إتلاف السفينة ، خاصة أثناء التركيب ، ولضمان استجابة السفينة بشكل مناسب لمختلف المحفزات. ابدأ هذا الإجراء مع الاستعدادات وتشريح الحلقات الشريانية المساريقية كما هو موضح في بروتوكول النص.قم بتشغيل الكمبيوتر وافتح برنامج تسجيل البيانات. حفظ التجربة كملف بيانات مخطط معملي باسم جديد لتجنب الكتابة فوق ملف الإعداد الأصلي. افتح إطار إعدادات التهيئة ثم قم بتعيين عامل K إلى واحد.قبول القيم الافتراضية لمعايرة IPs وضغط الهدف ووقت متوسط عبر الإنترنت ووقت التأخير. انقر فوق "موافق" لحفظ الإعدادات. حدد القنوات ذات الاهتمام وإدخال قطر السلك، ونقاط النهاية للأنسجة، والقراءة الأولية للميكرومتر في نافذة التطبيع.لبدء إجراءات التطبيع، وتطبيق أول تمتد السلبي على الأوعية الدموية عن طريق تحويل المسمار ميكرومتر عكس عقارب الساعة. بعد الانتظار ثلاث دقائق للسفينة لتحقيق الاستقرار، وإدخال القراءة ميكرومتر جديد في نافذة التطبيع. يتم حساب التوتر في الجدار تلقائياً، كما يظهر كنقطة في الرسم البياني.بعد كل امتداد سلبي، استبدل حاجز كريبس التحكم بـ كريبس البوتاسيوم العالي iso-osmotic الذي يحتوي على كلوريد البوتاسيوم 150 ملليمولار. عندما يصل الانكماش إلى الهضبة في حوالي ثلاث دقائق ، سجل القوة النشطة عن طريق طرح القوة السلبية عند كل امتداد من قوة تنشيط البوتاسيوم. حساب التوتر الجدار، فضلا عن القيم محيط الداخلية.إزالة حالة البوتاسيوم عالية عن طريق استبدال العازلة البوتاسيوم عالية مع عازلة كريبس الطازجة. كرر الغسيل ثلاث مرات على مدى خمس دقائق. كرر خطوات التطبيع عن طريق تحفيز تمتد السلبي تليها انكماش نشط في المنعطفات البديلة حتى يبدأ التوتر النشط في الانخفاض.غسل جيدا من ارتفاع العازلة كريبس البوتاسيوم وتكريس الاستعدادات لآخر 30 إلى 45 دقيقة. إعادة ضبط التوترات القاعدية إلى الصفر بحيث سيتم تسجيل الاستجابات المتعاقدة النشطة فقط أثناء التجربة اللاحقة. إعداد وتركيب حلقات الشرايين المقترنة كما هو موضح في بروتوكول النص من الأجزاء المجاورة لكل شريان.إعداد حلقة شريانية واحدة مع PVAT سليمة والأخرى مع إزالة PVAT. بعد التطبيع، precontract الأجزاء الشريانية مع ارتفاع البوتاسيوم كريبس العازلة بإضافة 115 ملليمتر كلوريد البوتاسيوم حل إلى غرفة تحتوي على كريبس. بعد الانكماش لفترة الهضبة، وغسل من البوتاسيوم عالية واستبدال العازلة مع عازلة كريبس الهواء النقي.كرر الغسيل ثلاث مرات على مدى خمس دقائق. كرر تحفيز كلوريد البوتاسيوم وغسل ثلاث مرات وسجل أقصى استجابة انكماشية لكلوريد البوتاسيوم عن طريق طرح التوتر الأساسي من التوتر بسبب تحفيز كلوريد البوتاسيوم. بعد الانكماش الأخير والغسيل، إعادة ملء الغرفة مع الحارة، ومخزنة يهبس، والسماح للشريان لاسترداد لحوالي 30 دقيقة قبل تنفيذ المهمة التالية.إلى كل غرفة، إضافة الكميات التراكمية من الفينيلفرين للحث على الزيادات التي تعتمد على التركيز والتوتر متساوي القياس من الاستعدادات هادئة. بعد إضافة الجرعة الأخيرة من ناهض، وغسل المخدرات جيدا وإعادة ملء الغرفة مع عازلة كريبس الطازجة. رسم الردود تعتمد التركيز كما زيادة النسب المئوية من كلوريد البوتاسيوم الناجمة عن تقلصات الحد الأقصى.لتقييم مساهمة أكسيد النيتريك، احتضان الاستعدادات مع مثبط أكسيد النيتريك سينثاز L-NAME لمدة 30 دقيقة قبل إضافة فينيليفرين. لأداء منحنى استجابة تركيز الثاني بالتسلسل، وغسل الغرفة تماما ومرّاً وتكراراً لإزالة كل من الناهضين السابقة حتى لا يتم ملاحظة أي تغييرات أخرى في لهجة. تم تطبيع العلاقة بين الطول والتوتر للشرايين المساريق معزولة عن نماذج الماوس التي تغذيها بـ chow القياسي أو نظام غذائي عالي الدهون.وقد تم تأسيس علاقة سلبية بين الطول والتوتر عن طريق التمدد التدريجي للأجزاء من الشريان إلى أن تم الحصول على محيط داخلي يعادل 100 ملليمتر من الضغط العابر للزئبق، أو IC100. بعد كل امتداد، تم تطبيق كلوريد البوتاسيوم 115 ملليمولر لتحفيز الانقباضات. تم رسم منحنيات التوتر النشطة من بيانات القوة النشطة على المحور ص وقيم IC المحسوبة من بيانات ميكرومتر على المحور س.قيمة IC تقع داخل هضبة الذروة IC1. وحُسب عامل التطبيع K كنسبة من IC1 وIC100، والتي يمكن بعد ذلك تطبيقها على عينات من نفس نوع السفينة في التجربة اللاحقة. يظهر هنا هي تسجيلات الإخراج من استجابات فاسوكونسرتريكور فينيليفرين في الشرايين المساريقية مع أو بدون PVAT المحيطة.تم تطبيق التركيزات التراكمية من الفينيلفرين لتحفيز تقلصات الشرايين المسنتة التي تم جمعها من adiposet 16 أسبوعا اديبوست واحد الفئران. وقد سُجلت الردود على التقلصات واحتسبت كنسبة مئوية من 150 ملليمولار من انكماش البوتاسيوم المستحث بأقصى حد. تم رسم المنطقة تحت منحنيات الانقباض للمقارنة.لاحظ أن PVAT من adiposet واحد الفئران أثار تأثير مضاد للانقباض على الاستجابة إلى فينيليفرين. عند الحصول على تقلصات من قبل KCL الناجمة عن, الاستجابات يجب أن تكون مستقرة وثابتة. إذا كانت الاستجابة لا تزال في ازدياد بعد ثلاث إدارات تدريجية من KCL، قد تكون هناك حاجة إلى تحفيز KCL.لتحقيق الظروف المثلى للتوترات ، فإن خطوة التطبيع مهمة للغاية ، حيث أن هذا يحدد قوة فتح الأوعية الدموية. إذا لم يتم ذلك بشكل صحيح ، فإنه سيؤثر على التجربة بأكملها. يمكن تطبيق هذا البروتوكول على إعدادات أخرى بالإضافة إلى انكماش أو استرخاء مستحث فينيليفرين.على سبيل المثال، في وجود أو عدم وجود الأنسجة الدهنية perivascular، والأعصاب اللاإرادية، أو endothelium. مع هذا البروتوكول، يمكن للباحثين فحص الأوعية الدموية الصغيرة من نماذج الحيوانات المريضة في ظل ظروف مختلفة فيزيائية مرضية، مثل السمنة والسكري وأمراض القلب والأوعية الدموية.

Research

JoVE Journal

Biology

Right Hemihepatectomy by Suprahilar Intrahepatic Transection of the Right Hemipedicle using a Vascular Stapler

استئصال نصف الكبد عن طريق الحق Transection داخل الكبد Suprahilar من Hemipedicle الحق باستخدام دبابيس الأوعية الدموية

Successful hepatic resection requires profound anatomical knowledge and delicate surgical technique. Hemihepatectomies are mostly performed after ...

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

و خارج الحي متفرقة التحضير Microvessel الهيكل العظمي للتحقيق في التفاعل الأوعية الدموية

The isolated  microvessel preparation is an ex vivo preparation that allows for examination of the different contributions of  factors that control vessel ...

Using Digital Image Correlation to Characterize Local Strains on Vascular Tissue Specimens

باستخدام ارتباط صورة رقمية لوصف سلالات المحلية على الأوعية الدموية عينات الأنسجة

Characterization of the mechanical behavior of biological and engineered soft tissues is a central component of fundamental biomedical research and ...

Analysis of Cell Suspensions Isolated from Solid Tissues by Spectral Flow Cytometry

تحليل معلقات خلية معزولة من الأنسجة الصلبة من قبل الطيفي التدفق الخلوي

Flow cytometry has been used for the past 40 years to define and analyze the phenotype of lymphoid and other hematopoietic cells. Initially restricted to ...

Differentiation Capacity of Human Aortic Perivascular Adipose Progenitor Cells

قدرة التمايز للخلايا الدهنية ارتشاح الابهري البشرية السلف

Adipose tissue is a rich source of multi-potent mesenchymal stem cells (MSC) capable of differentiating into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic ...

Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

إعداد الخلايا الدهنية بروجينيتور من ماوس Epididymal الأنسجة الدهنية

Obesity and metabolic disorders such as diabetes, heart disease, and cancer, are all associated with dramatic adipose tissue remodeling. Tissue-resident ...

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

التصور والقياس الكمي للأنسجة الدهنية البنية والبيج في الفئران باستخدام [18F] FDG Micro-PET / MR التصوير

Brown and beige adipocytes are now recognized as potential therapeutic targets for obesity and metabolic syndromes. Non-invasive molecular imaging methods ...

Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase

نموذج تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني للفأر الناجم عن التطبيق المحيطي للإيلاستيز

Abdominal aortic aneurysm (AAA), although primarily asymptomatic, is potentially life-threatening as the rupture of AAA usually has a devastating outcome. ...

Semi-Automated Isolation of Murine White Adipose Tissue

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator (Video) | JoVE 

عزل شبه آلي للجزء الوعائي اللحمي من الأنسجة الدهنية البيضاء باستخدام مفكك الأنسجة

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their ...