Name: assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues
Uploaded: 2019-06-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

Ces travaux ont été soutenus financièrement par les subventions du Research Grant Council de Hong Kong [17124718 et 17121714], le Fonds de recherche en santé et en médecine de Hong Kong [13142651 et 13142641], le Fonds de recherche collaborative de Hong Kong [C7055-14G], et le national Basic Programme de recherche de la Chine [973 programme 2015CB553603].

Tous les animaux utilisés pour l’étude suivante ont été fournis par l’unité des animaux de laboratoire de la faculté de médecine de l’Université de Hong Kong. L’approbation éthique a été obtenue du Comité ministériel sur l’utilisation des animaux de laboratoire pour l’enseignement et la recherche (CULATR, no.: 4085-16).
1. les préparations
<ol><li>Préparation des médicaments
	<ol>
<li>Stockez les médicaments de façon appropriée, comme indiqué ...

<ol>
	<li>Furchgott, R. F., Zawadzki, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+obligatory+role+of+endothelial+cells+in+the+relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+acetylcholine.">The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine.</a> Nature. 288 (5789), 373-376 (1980).</li><li>Furchgott, R. F., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+relaxing+and+contracting+factors.">Endothelium-derived relaxing and contracting factors.</a> The FASEB Journal. 3 (9), 2007-2018 (1989).</li><li>Feletou, M., Kohler, R., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+vasoactive+factors+and+hypertension:+possible+roles+in+pathogenesis+and+as+treatment+targets.">Endothelium-derived vasoactive factors and hypertension: possible roles in pathogenesis and as treatment targets.</a> Current Hypertension Reports. 12 (4), 267-275 (2010).</li><li>Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction:+the+first+step+toward+coronary+arteriosclerosis.">Endothelial dysfunction: the first step toward coronary arteriosclerosis.</a> Circulation Journal. 73 (4), 595-601 (2009).</li><li>Feletou, M., Huang, Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-mediated+control+of+vascular+tone:+COX-1+and+COX-2+products.">Endothelium-mediated control of vascular tone: COX-1 and COX-2 products.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (3), 894-912 (2011).</li><li>Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanisms+of+endothelial+cell+dysfunction.">Cellular and molecular mechanisms of endothelial cell dysfunction.</a> Journal of Clinical Investigation. 100 (9), 2153 (1997).</li><li>Vanhoutte, P. M., Shimokawa, H., Tang, E. H., Feletou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+vascular+disease.">Endothelial dysfunction and vascular disease.</a> Acta physiologica. 196 (2), 193-222 (2009).</li><li>Kl&#246;&#223;, S., Bouloumi&#233;, A., M&#252;lsch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+and+chronic+hypertension+decrease+expression+of+rat+aortic+soluble+guanylyl+cyclase.">Aging and chronic hypertension decrease expression of rat aortic soluble guanylyl cyclase.</a> Hypertension. 35 (1), 43-47 (2000).</li><li>Csiszar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging-induced+phenotypic+changes+and+oxidative+stress+impair+coronary+arteriolar+function.">Aging-induced phenotypic changes and oxidative stress impair coronary arteriolar function.</a> Circulation Research. 90 (11), 1159-1166 (2002).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+SIRT1+prevents+age-induced+impairment+of+vasodilator+responses+by+enhancing+the+expression+and+activity+of+soluble+guanylyl+cyclase+in+smooth+muscle+cells.">Endothelial SIRT1 prevents age-induced impairment of vasodilator responses by enhancing the expression and activity of soluble guanylyl cyclase in smooth muscle cells.</a> Cardiovascular Research. , (2018).</li><li>Auch-Schwelk, W., Katusic, Z. S., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+inactivates+endothelium-derived+contracting+factor+in+the+rat+aorta.">Nitric oxide inactivates endothelium-derived contracting factor in the rat aorta.</a> Hypertension. 19 (5), 442-445 (1992).</li><li>Tang, E. H., Feletou, M., Huang, Y., Man, R. Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholine+and+sodium+nitroprusside+cause+long-term+inhibition+of+EDCF-mediated+contractions.">Acetylcholine and sodium nitroprusside cause long-term inhibition of EDCF-mediated contractions.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulation Physiology. 289 (6), H2434-H2440 (2005).</li><li>Ghiadoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+function+and+common+carotid+artery+wall+thickening+in+patients+with+essential+hypertension.">Endothelial function and common carotid artery wall thickening in patients with essential hypertension.</a> Hypertension. 32 (1), 25-32 (1998).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+Impairment+of+Vascular+Structure+and+Functions.">Age-related Impairment of Vascular Structure and Functions.</a> Aging and Disease. 8 (5), 590-610 (2017).</li><li>Tabit, C. E., Chung, W. B., Hamburg, N. M., Vita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+diabetes+mellitus:+Molecular+mechanisms+and+clinical+implications.">Endothelial dysfunction in diabetes mellitus: Molecular mechanisms and clinical implications.</a> Reviews in Endocrine &amp; Metabolic Disorders. 11 (1), 61-74 (2010).</li><li>Tanaka, K., Sata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+perivascular+adipose+tissue+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">Roles of perivascular adipose tissue in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Frontiers in Physiology. 9, 3 (2018).</li><li>Brown, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+in+vascular+function+and+disease:+a+review+of+current+research+and+animal+models.">Perivascular adipose tissue in vascular function and disease: a review of current research and animal models.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 34 (8), 1621-1630 (2014).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> The FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>G&#225;lvez-Prieto, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reduction+in+the+amount+and+anti-contractile+effect+of+periadventitial+mesenteric+adipose+tissue+precedes+hypertension+development+in+spontaneously+hypertensive+rats.">A reduction in the amount and anti-contractile effect of periadventitial mesenteric adipose tissue precedes hypertension development in spontaneously hypertensive rats.</a> Hypertension research. 31 (7), 1415 (2008).</li><li>Gao, Y. J., Lu, C., Su, L. Y., Sharma, A., Lee, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+vascular+function+by+perivascular+adipose+tissue:+the+role+of+endothelium+and+hydrogen+peroxide.">Modulation of vascular function by perivascular adipose tissue: the role of endothelium and hydrogen peroxide.</a> British Journal of Pharmacology. 151 (3), 323-331 (2007).</li><li>Gao, Y. -. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+promotes+vasoconstriction:+the+role+of+superoxide+anion.">Perivascular adipose tissue promotes vasoconstriction: the role of superoxide anion.</a> Cardiovascular Research. 71 (2), 363-373 (2006).</li><li>Szasz, T., Webb, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue:+more+than+just+structural+support.">Perivascular adipose tissue: more than just structural support.</a> Clinical Science (London). 122 (1), 1-12 (2012).</li><li>Ramirez, J. G., O'Malley, E. J., Ho, W. S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pro-contractile+effects+of+perivascular+fat+in+health+and+disease.">Pro-contractile effects of perivascular fat in health and disease.</a> Brish Journal of Pharmacology. 174 (20), 3482-3495 (2017).</li><li>Hajer, G. R., van Haeften, T. W., Visseren, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+dysfunction+in+obesity,+diabetes,+and+vascular+diseases.">Adipose tissue dysfunction in obesity, diabetes, and vascular diseases.</a> European Heart Journal. 29 (24), 2959-2971 (2008).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+properties+of+small+arterial+resistance+vessels+in+spontaneously+hypertensive+and+normotensive+rats.">Contractile properties of small arterial resistance vessels in spontaneously hypertensive and normotensive rats.</a> Circulation Research. 41 (1), 19-26 (1977).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ.">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260 (5552), 617-619 (1976).</li><li>del Campo, L., Ferrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wire+myography+to+study+vascular+tone+and+vascular+structure+of+isolated+mouse+arteries.">Wire myography to study vascular tone and vascular structure of isolated mouse arteries.</a> Methods in Molecular Biology. 1339, 255-276 (2015).</li><li>Dobrin, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+initial+length+on+length-tension+relationship+of+vascular+smooth+muscle.">Influence of initial length on length-tension relationship of vascular smooth muscle.</a> American Journal of Physiology. 225 (3), 664-670 (1973).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+prevents+metabolic+aging+caused+by+abnormal+SIRT1+function+in+adipose+tissues.">Calorie restriction prevents metabolic aging caused by abnormal SIRT1 function in adipose tissues.</a> Diabetes. 64 (5), 1576-1590 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caliber+dependent+calcitonin+gene-related+peptide-induced+relaxation+in+rat+coronary+arteries:+effect+of+K++on+the+tachyphylaxis.">Caliber dependent calcitonin gene-related peptide-induced relaxation in rat coronary arteries: effect of K+ on the tachyphylaxis.</a> European Journal of Pharmacology. 351 (1), 53-59 (1998).</li><li>Soltis, E. E., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perivascular+adipose+tissue+on+rat+aortic+smooth+muscle+responsiveness.">Influence of perivascular adipose tissue on rat aortic smooth muscle responsiveness.</a> Clinical and Experimental Hypertension A. 13 (2), 277-296 (1991).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>Fesus, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+is+a+novel+humoral+vasodilator.">Adiponectin is a novel humoral vasodilator.</a> Cardiovascular Research. 75 (4), 719-727 (2007).</li><li>Greenstein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+inflammation+and+hypoxia+abolish+the+protective+anticontractile+properties+of+perivascular+fat+in+obese+patients.">Local inflammation and hypoxia abolish the protective anticontractile properties of perivascular fat in obese patients.</a> Circulation. 119 (12), 1661-1670 (2009).</li><li>Yudkin, J. S., Eringa, E., Stehouwer, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Vasocrine"+signalling+from+perivascular+fat:+a+mechanism+linking+insulin+resistance+to+vascular+disease.">"Vasocrine" signalling from perivascular fat: a mechanism linking insulin resistance to vascular disease.</a> Lancet. 365 (9473), 1817-1820 (2005).</li><li>Xia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncoupling+of+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+perivascular+adipose+tissue+of+diet-induced+obese+mice.">Uncoupling of endothelial nitric oxide synthase in perivascular adipose tissue of diet-induced obese mice.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 36 (1), 78-85 (2016).</li><li>Xia, N., Forstermann, U., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+resveratrol+on+eNOS+in+the+endothelium+and+the+perivascular+adipose+tissue.">Effects of resveratrol on eNOS in the endothelium and the perivascular adipose tissue.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1403 (1), 132-141 (2017).</li><li>Schinzari, F., Tesauro, M., Cardillo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+and+perivascular+adipose+tissue+abnormalities+in+obesity-related+vascular+dysfunction:+novel+targets+for+treatment.">Endothelial and perivascular adipose tissue abnormalities in obesity-related vascular dysfunction: novel targets for treatment.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69 (6), 360-368 (2017).</li><li>Liu, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipocalin-2+deficiency+prevents+endothelial+dysfunction+associated+with+dietary+obesity:+role+of+cytochrome+P450+2C+inhibition.">Lipocalin-2 deficiency prevents endothelial dysfunction associated with dietary obesity: role of cytochrome P450 2C inhibition.</a> British Journal of Pharmacology. 165 (2), 520-531 (2012).</li><li>Martinez-Quinones, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+induced+morphological+and+physiological+changes+in+cells+of+the+arterial+wall.">Hypertension induced morphological and physiological changes in cells of the arterial wall.</a> American Journal of Hypertension. 31 (10), 1067-1078 (2018).</li><li>Outzen, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+value+of+mechanical+and+vasomotor+properties+of+mouse+isolated+mesenteric+resistance-sized+arteries.">Translational value of mechanical and vasomotor properties of mouse isolated mesenteric resistance-sized arteries.</a> Pharmacology Research and Perspectives. 3 (6), e00200 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Simonsen, A. H., Boonen, H. C., Outzen, E. M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ageing+on+the+passive+and+active+tension+and+pharmacodynamic+characteristics+of+rat+coronary+arteries:+age-dependent+increase+in+sensitivity+to+5-HT+and+K+.">Effect of ageing on the passive and active tension and pharmacodynamic characteristics of rat coronary arteries: age-dependent increase in sensitivity to 5-HT and K+.</a> Pharmacology. 90 (3-4), 160-168 (2012).</li></ol>

Outre les cellules endothéliales, les signaux dérivés de la PVAT jouent un rôle important dans la régulation de la réactivité de la tonalité musculaire lisse30. La pvat saine libère non et l’adiponectine anti-inflammatoire pour exercer un effet anti-contractile sur les artères, qui est perdue dans des conditions pathologiques telles que l’obésité et le syndrome métabolique31,32. Dans les États de la maladie, la pvat contr...

Les dilatations et les constrictions des artères sont obtenues par des relaxations et des contractions, respectivement, de leurs cellules musculaires lisses vasculaires. Les changements dans la réactivité vasculaire des petites artères contribuent à la régulation homéostatique de la pression artérielle par les nerfs et les hormones autonomes présents dans le sang (p. ex. catécholamines, angiotensine II, sérotonine, vasopressine). Au niveau local, les réponses vasculaires des cellules musculaires lisses sont modulées par des signaux provenant des cellules endothéliales de l’intima et du tissu adipeux entourant les artères (figure 1).
L’endothélium n’est pas seulement une barrière passive, mais sert également de surface pour échanger des signaux entre le sang et les cellules musculaires lisses vasculaires sous-jacentes. En libérant diverses substances vasoactives, l’endothélium joue un rôle crucial dans le contrôle local des réponses des tonus vasculaires1. Par exemple, en réponse à l’acétylcholine, l’oxyde nitrique synthase endothélial (eNOS) est activé dans l’endothélium pour produire de l’oxyde nitrique (NO), ce qui induit la relaxation du muscle lisse vasculaire sous-jacent en activant la guanylyl cyclase soluble (sGC) 2. les autres substances vasoactives comprennent les produits des cyclooxygénases (p. ex., prostacycline et thromboxane A2), la lipoxygénase (p. ex., les acides 12-hydroxyeicosatetraénoïque, 12-HETE) et les monooxygénases du cytochrome P450 (hetes et les acides époxyyicosatriénoïques, les EETs), les espèces réactives de l’oxygène (ROS) et les peptides vasoactifs (p. ex., l’endothéline-1 et l’angiotensine II) et les facteurs hyperpolarisants dérivés de l’endothélium (EDHF)3. Un équilibre délicat entre les vasodilatateurs et les vasoconstricteurs dérivés de l’endothélium maintient le ton vasomoteur local4,5.
La dysfonction endothéliale est caractérisée par l’altération de la vasodilatation dépendante de l’endothélium6, une caractéristique du vieillissement vasculaire7. Avec l’âge, la capacité de l’endothélium à favoriser la vasodilatation est progressivement réduite, due en grande partie à une diminution de la biodisponibilité non, ainsi que l’expression anormale et la fonction d’eNOS dans l’endothélium et sGC dans les cellules musculaires lisses vasculaires8 , le 9 , 10. réduction aucune biodisponibilité ne potentialise la production de vasoconstricteurs dépendants de l’endothélium11,12. Dans les artères âgées, la dysfonction endothéliale provoque une hyperplasie dans les milieux, comme le reflètent les augmentations marquées de l’épaisseur de paroi, le nombre de noyaux médiaux, qui rappellent l’épaississement artériel dans l’hypertension et l’athérosclérose observée dans les patients13,14. De plus, des affections pathophysiologiques telles que l’obésité, le diabète ou l’hypertension accélèrent le développement de la dysfonction endothéliale15,16.
Le tissu adipeux perivasculaire (PVAT) libère de nombreuses adipokines pour réguler la structure vasculaire et la fonction17. L’effet anti-contractile de la pvat est médié par des facteurs relaxants, tels que l’adiponectine, non, le peroxyde d’hydrogène et le sulfure d’hydrogène18,19,20. Cependant, en fonction de l’emplacement et de l’État pathophysiologique, la PVAT peut également améliorer les réponses contractiles dans diverses artères21. Les substances pro-contractiles produites par la pvat comprennent l’angiotensine-II, la leptine, la résistine et les ROS22,23.  Dans la plupart des études sur les vaisseaux sanguins isolés, la pvat a été considérée comme un soutien structurel simple pour le système vasculaire et ainsi enlevée lors de la préparation des segments de l’anneau des vaisseaux sanguins. Étant donné que le dysfonctionnement adipeux représente un facteur de risque indépendant pour l’hypertension et les complications cardiovasculaires associées24, la pvat entourant les vaisseaux sanguins doit être envisagée lors de l’étude de la réactivité vasculaire de différentes artères.
Les systèmes de myographes multi-fils ont été largement utilisés pour étudier les fonctions vasomotrices d’une variété de vaisseaux sanguins, y compris l’aorte, les artères mésentériques, rénales, fémorales, cérébrales et coronaires25,26. Les protocoles décrits ici utiliseront la myographie de fil pour évaluer la réactivité vasculaire dans les artères mésentériques isolées des modèles de souris génétiquement modifiées, avec un accent particulier sur la modulation par la PVAT.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6625</td>
			<td>Stock concentration: 10-1 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-NAME (N&#969;-nitro-L-arginine methyl ester)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N5751</td>
			<td>Stock concentration: 3 x 10-2 M 
			Working concentration: 10-4 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6126</td>
			<td>Stock concentration: 10-2 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619 (9,11-dideoxy-9&#945;,11&#945;methanoepoxy prostaglandin F2&#945;)</td>
			<td>Enzo</td>
			<td>BML-PG023-0001</td>
			<td>Stock concentration: 10-5 M 
			Working concentration: 1-3 x 10-8 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwire myograph</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/26</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML848</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labchart7</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adipo-SIRT1 wild type mice</td>
			<td>Laboratory Animal Unit, The University of Hong Kong</td>
			<td>CULATR NO.: 4085-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated Petri dishes</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten wires</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>300331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tools</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues

La réactivité des tonus vasculaires aux stimuli pathophysiologiques contribue au développement d’un large éventail de maladies cardiovasculaires et métaboliques. La dysfonction endothéliale représente un grand coupable pour la vasodilatation réduite et la vasoconstriction accrue des artères. Les tissus adipeux (gras) entourant les artères jouent un rôle important dans la régulation de la relaxation dépendante de l’endothélium et/ou de la contraction des cellules musculaires lisses vasculaires. Les pourparlers croisés entre l’endothélium et les tissus adipeux périvasculaires peuvent être évalués ex vivo à l’aide de vaisseaux sanguins montés par un système de myographie par fil. Cependant, des paramètres optimaux devraient être établis pour les artères dérivées d’animaux de différentes espèces, âges, origines génétiques et/ou conditions pathophysiologiques.

Examen des relations longueur/tension pour obtenir le facteur de normalisation k
La quantité d’étirement appliquée à un segment de vaisseaux influe sur l’étendue de l’interaction actine-myosin et donc sur la force active maximale développée. Ainsi, pour chaque type de vaisseau sanguin, il faut déterminer la quantité d’étirement nécessaire à la force active maximale pour des études d...

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Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

Évaluation de la réactivité de la tonalité vasculaire à l’aide d’artères mésentériques isolées avec focalisation sur la modulation par les tissus adipeux Perivasculaires

Le protocole décrit l’utilisation de la myographie de fil pour évaluer la tension isométrique transmurale des artères mésentériques isolées des souris, avec une prise en considération spéciale de la modulation par des facteurs libérés des cellules endothéliales et des tissus adipeux périivasculaires.

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

Un protocole très strict est nécessaire afin que nous puissions valablement comparer les préparations des mêmes animaux ou de différents animaux ou artères en présence ou en l’absence de la graisse qui les entoure ou en présence ou en l’absence de l’endothélium. Le principal avantage de cette technique expérimentale est que nous pouvons comparer les anneaux d’une même artère dans un état isométrique et donc valablement tirer des conclusions concernant l’impact des facteurs expérimentaux que nous étudions. Ce protocole donne un aperçu de la modulation de la réactivité vasculaire par les tissus adipeux périvasculaires de différents animaux génétiquement modifiés.Les dysfonctionnements adipeux de tissu représentent un facteur de risque indépendant pour l’hypertension et ses complications cardio-vasculaires associées. Notre myographe comporte de multiples étapes compliquées qui exigent une extrême prudence à chaque point pour éviter d’endommager le navire, en particulier pendant le montage, et pour s’assurer que le navire réagit de façon appropriée à divers stimuli. Commencez cette procédure par des préparations et une dissection des anneaux artériaux mésentériques tels que décrits dans le protocole de texte.Allumez l’ordinateur et ouvrez le logiciel d’enregistrement de données. Enregistrez l’expérience en tant que fichier de données de graphique de laboratoire avec un nouveau nom pour éviter de surécrire le fichier de paramètre d’origine. Ouvrez la fenêtre paramètres de normalisation et réglez le facteur K en un seul.Acceptez les valeurs par défaut pour l’étalonnage des ADRESSES, la pression cible, le temps de moyenne en ligne et le temps de retard. Cliquez bien pour enregistrer les paramètres. Sélectionnez les canaux d’intérêt et entrez le diamètre du fil, les paramètres des tissus et la lecture initiale du micromètre dans la fenêtre de normalisation.Pour commencer la procédure de normalisation, appliquez le premier étirement passif sur le vaisseau sanguin en tournant la vis du micromètre dans le sens inverse des aiguilles d’une montre. Après avoir attendu trois minutes que le navire se stabilise, entrez la nouvelle lecture du micromètre dans la fenêtre de normalisation. La tension du mur est automatiquement calculée et affichée comme un point sur le graphique.Après chaque étirement passif, remplacer le tampon krebs de contrôle par un krebs iso-osmotique à haute teneur en potassium contenant du chlorure de potassium de 150 millimlaires. Lorsque la contraction atteint un plateau à environ trois minutes, enregistrer la force active en soustrayant la force passive à chaque étirement de la force activée par le potassium. Calculez la tension du mur, ainsi que les valeurs de circonférence interne.Enlevez l’état élevé de potassium en remplaçant le tampon de potassium élevé par le tampon frais de krebs. Répéter le lavage trois fois sur cinq minutes. Répétez les étapes de normalisation en induisant des étirements passifs suivis d’une contraction active dans d’autres virages jusqu’à ce que la tension active commence à diminuer.Bien laver le tampon krebs à haute teneur en potassium et équilibrer les préparations pendant encore 30 à 45 minutes. Réinitialiser les tensions basales à zéro de sorte que seules les réponses contractiles actives seront enregistrées au cours de l’expérience suivante. Préparer et monter des anneaux artériels appariés tels que décrits dans le protocole de texte des sections adjacentes de chaque artère.Préparer un anneau artélial avec PVAT intact et l’autre avec PVAT enlevé. Après normalisation, précontractez les segments artériaux avec le tampon élevé de krebs de potassium en ajoutant la solution de chlorure de potassium de 115 millimlaires à la chambre contenant des krebs. Après contraction à la période du plateau, laver le potassium élevé et remplacer le tampon par tampon krebs aéré frais.Répéter le lavage trois fois sur cinq minutes. Répétez la stimulation du chlorure de potassium et le lavage trois fois et enregistrez la réponse contractile maximale au chlorure de potassium en soustrayant la tension de base de la tension due à la stimulation du chlorure de potassium. Après la dernière contraction et le lavage, remplissez la chambre d’un tampon krebs chaud et aéré et laissez l’artère récupérer pendant environ 30 minutes avant d’effectuer la tâche suivante.À chaque chambre, ajouter des quantités cumulatives de phényléphrine pour induire les augmentations dépendantes de la concentration et la tension isométrique des préparations quiescentes. Après avoir ajouté la dernière dose d’agoniste, lavez soigneusement le médicament et remplissez la chambre avec un tampon krebs frais. Tracez les réponses dépendantes de la concentration comme des pourcentages croissants de contractions maximales induites par le chlorure de potassium.Pour évaluer la contribution de l’oxyde nitrique, incuber les préparations avec l’inhibiteur de synthase d’oxyde nitrique L-NAME pendant 30 minutes avant l’ajout de phényléphrine. Pour effectuer une deuxième courbe de réponse de concentration séquentiellement, lavez la chambre complètement et à plusieurs reprises pour enlever tous les agonistes précédents jusqu’à ce qu’aucun autre changement de ton ne soit observé. La normalisation de la relation longueur-tension a été effectuée pour les artères mesenteric isolées des modèles de souris alimentés avec le chow standard ou un régime à haute teneur en graisses.Une relation longueur-tension passive a été établie par étirement progressif des segments d’artère jusqu’à ce qu’une circonférence interne correspondant à 100 millimètres de pression trans-muros de mercure, ou IC100, ait été obtenue. Après chaque étirement, 115 millimolaire chlorure de potassium a été appliqué pour stimuler les contractions. Les courbes de tension de longueur active ont été tracées à partir des données de force active sur l’axe Y et des valeurs IC calculées à partir des données micromètres de l’axe X.Une valeur IC se trouvant dans le plateau de pointe est IC1. Le facteur de normalisation, K, a été calculé comme le rapport d’IC1 et d’IC100, qui pourrait ensuite être appliqué à des échantillons du même type de navire dans l’expérience subséquente. On y voit des enregistrements de sortie des réponses vasoconstrictrices à la phényléphrine dans les artères mésentériques avec ou sans PVAT environnant.Des concentrations cumulatives de phényléphrine ont été appliquées pour stimuler les contractions des artères mésentériques recueillies chez une souris adiposet vieille de 16 semaines. Les réponses contractiles ont été enregistrées et calculées en pourcentage de la contraction maximale induite par le chlorure de potassium de 150 millimlaires. La zone sous les courbes de contraction ont été tracées à des fins de comparaison.Notez que PVAT de l’adiposet une souris a obtenu un effet anti-contractile sur la réponse à la phényléphrine. Lors de l’obtention de contractions induites par KCL, les réponses doivent être stables et stables. Si la réponse augmente encore après trois administrations incrémentielles de KCL, la stimulation de KCL peut être nécessaire.Pour atteindre des conditions optimales des tensions, l’étape de normalisation est très importante, car cela détermine la force d’ouvrir les vaisseaux sanguins. Si ce n’est pas fait correctement, cela affectera l’ensemble de l’expérience. Ce protocole peut être appliqué à d’autres paramètres en plus de la contraction ou de la relaxation induite par la phényléphrine.Par exemple, en présence ou en l’absence de tissu adipeux périvasculaire, de nerfs autonomes ou d’endothélium. Avec ce protocole, les chercheurs peuvent examiner les petits vaisseaux sanguins à partir de modèles animaux atteints de maladies dans différentes conditions pathophysiologiques, telles que l’obésité, le diabète et les maladies cardiovasculaires.

Research

JoVE Journal

Biology

Right Hemihepatectomy by Suprahilar Intrahepatic Transection of the Right Hemipedicle using a Vascular Stapler

Hémihépatectomie droite par Transection intrahépatique Suprahilar de l&#39;Hemipedicle droit à l&#39;aide d&#39;une agrafeuse vasculaire

Successful hepatic resection requires profound anatomical knowledge and delicate surgical technique. Hemihepatectomies are mostly performed after ...

Recherche

Biologie

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

La Ex vivo Préparation isolé microvaisseaux squelettique pour les enquêtes de la réactivité vasculaire

The isolated  microvessel preparation is an ex vivo preparation that allows for examination of the different contributions of  factors that control vessel ...

Using Digital Image Correlation to Characterize Local Strains on Vascular Tissue Specimens

Utilisation de corrélation d&#39;images à caractériser les souches locales sur des échantillons de tissus vasculaires

Characterization of the mechanical behavior of biological and engineered soft tissues is a central component of fundamental biomedical research and ...

Analysis of Cell Suspensions Isolated from Solid Tissues by Spectral Flow Cytometry

Analyse des suspensions de cellules isolées de tissus solides par Spectral cytométrie en flux

Flow cytometry has been used for the past 40 years to define and analyze the phenotype of lymphoid and other hematopoietic cells. Initially restricted to ...

Differentiation Capacity of Human Aortic Perivascular Adipose Progenitor Cells

Capacité de différenciation des cellules souches humaines aortiques périvasculaires adipeux

Adipose tissue is a rich source of multi-potent mesenchymal stem cells (MSC) capable of differentiating into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic ...

Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

Préparation des cellules progénitrices adipeuses à partir de tissus adipeux épididymaux de souris

Obesity and metabolic disorders such as diabetes, heart disease, and cancer, are all associated with dramatic adipose tissue remodeling. Tissue-resident ...

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualisation et quantification des tissus adipeux bruns et beiges chez la souris à l’aide de l’imagerie micro-PET/MR [18F]FDG

Brown and beige adipocytes are now recognized as potential therapeutic targets for obesity and metabolic syndromes. Non-invasive molecular imaging methods ...

Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase

Modèle d’anévrisme de l’aorte abdominale de souris induit par l’application périvasculaire d’élastase

Abdominal aortic aneurysm (AAA), although primarily asymptomatic, is potentially life-threatening as the rupture of AAA usually has a devastating outcome. ...

Semi-Automated Isolation of Murine White Adipose Tissue

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator (Video) | JoVE 

Isolement semi-automatisé de la fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux blanc murin à l’aide d’un dissociateur tissulaire

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their ...

Culturing Preadipocytes Isolated from Murine Perivascular Adipose Tissue

Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of Stromal Vascular Fraction-derived Preadipocytes from Mouse Periaortic Adipose Tissue

The Significance of Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of SVF-Derived Preadipocytes from Mouse Perivascular Adipose Tissue (Video) | JoVE

Isolement, culture et induction adipogénique de préadipocytes dérivés de la fraction vasculaire stromale à partir de tissu adipeux périaortique de souris