Name: assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues
Uploaded: 2019-06-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

עבודה זו היתה תמיכה פיננסית על ידי המענקים של מחקר מלגת המועצה של הונג קונג [17124718 ו 17121714], הונג קונג בריאות ומחקר רפואי קרן [13142651 ו 13142641], קרן מחקר שיתופי של הונג קונג [C7055-14G], ואת הבסיס הלאומי תוכנית מחקר של סין [973 תוכנית 2015CB553603].

כל החיות ששימשו למחקר שלהלן סופקו על ידי יחידת חיות המעבדה של הפקולטה לרפואה, אוניברסיטת הונג קונג. התקבל אישור אתי מהוועדה המחלקתי על שימוש בבעלי חיים מעבדתיים להוראה ומחקר (אל-מע: 4085-16).
1. ההכנות
<ol><li>הכנת תרופות
	<ol>
<li>אחסן סמים כראוי כאמור בגליון נתוני בטיחות החו?...

<ol>
	<li>Furchgott, R. F., Zawadzki, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+obligatory+role+of+endothelial+cells+in+the+relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+acetylcholine.">The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine.</a> Nature. 288 (5789), 373-376 (1980).</li><li>Furchgott, R. F., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+relaxing+and+contracting+factors.">Endothelium-derived relaxing and contracting factors.</a> The FASEB Journal. 3 (9), 2007-2018 (1989).</li><li>Feletou, M., Kohler, R., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+vasoactive+factors+and+hypertension:+possible+roles+in+pathogenesis+and+as+treatment+targets.">Endothelium-derived vasoactive factors and hypertension: possible roles in pathogenesis and as treatment targets.</a> Current Hypertension Reports. 12 (4), 267-275 (2010).</li><li>Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction:+the+first+step+toward+coronary+arteriosclerosis.">Endothelial dysfunction: the first step toward coronary arteriosclerosis.</a> Circulation Journal. 73 (4), 595-601 (2009).</li><li>Feletou, M., Huang, Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-mediated+control+of+vascular+tone:+COX-1+and+COX-2+products.">Endothelium-mediated control of vascular tone: COX-1 and COX-2 products.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (3), 894-912 (2011).</li><li>Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanisms+of+endothelial+cell+dysfunction.">Cellular and molecular mechanisms of endothelial cell dysfunction.</a> Journal of Clinical Investigation. 100 (9), 2153 (1997).</li><li>Vanhoutte, P. M., Shimokawa, H., Tang, E. H., Feletou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+vascular+disease.">Endothelial dysfunction and vascular disease.</a> Acta physiologica. 196 (2), 193-222 (2009).</li><li>Kl&#246;&#223;, S., Bouloumi&#233;, A., M&#252;lsch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+and+chronic+hypertension+decrease+expression+of+rat+aortic+soluble+guanylyl+cyclase.">Aging and chronic hypertension decrease expression of rat aortic soluble guanylyl cyclase.</a> Hypertension. 35 (1), 43-47 (2000).</li><li>Csiszar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging-induced+phenotypic+changes+and+oxidative+stress+impair+coronary+arteriolar+function.">Aging-induced phenotypic changes and oxidative stress impair coronary arteriolar function.</a> Circulation Research. 90 (11), 1159-1166 (2002).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+SIRT1+prevents+age-induced+impairment+of+vasodilator+responses+by+enhancing+the+expression+and+activity+of+soluble+guanylyl+cyclase+in+smooth+muscle+cells.">Endothelial SIRT1 prevents age-induced impairment of vasodilator responses by enhancing the expression and activity of soluble guanylyl cyclase in smooth muscle cells.</a> Cardiovascular Research. , (2018).</li><li>Auch-Schwelk, W., Katusic, Z. S., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+inactivates+endothelium-derived+contracting+factor+in+the+rat+aorta.">Nitric oxide inactivates endothelium-derived contracting factor in the rat aorta.</a> Hypertension. 19 (5), 442-445 (1992).</li><li>Tang, E. H., Feletou, M., Huang, Y., Man, R. Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholine+and+sodium+nitroprusside+cause+long-term+inhibition+of+EDCF-mediated+contractions.">Acetylcholine and sodium nitroprusside cause long-term inhibition of EDCF-mediated contractions.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulation Physiology. 289 (6), H2434-H2440 (2005).</li><li>Ghiadoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+function+and+common+carotid+artery+wall+thickening+in+patients+with+essential+hypertension.">Endothelial function and common carotid artery wall thickening in patients with essential hypertension.</a> Hypertension. 32 (1), 25-32 (1998).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+Impairment+of+Vascular+Structure+and+Functions.">Age-related Impairment of Vascular Structure and Functions.</a> Aging and Disease. 8 (5), 590-610 (2017).</li><li>Tabit, C. E., Chung, W. B., Hamburg, N. M., Vita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+diabetes+mellitus:+Molecular+mechanisms+and+clinical+implications.">Endothelial dysfunction in diabetes mellitus: Molecular mechanisms and clinical implications.</a> Reviews in Endocrine &amp; Metabolic Disorders. 11 (1), 61-74 (2010).</li><li>Tanaka, K., Sata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+perivascular+adipose+tissue+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">Roles of perivascular adipose tissue in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Frontiers in Physiology. 9, 3 (2018).</li><li>Brown, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+in+vascular+function+and+disease:+a+review+of+current+research+and+animal+models.">Perivascular adipose tissue in vascular function and disease: a review of current research and animal models.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 34 (8), 1621-1630 (2014).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> The FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>G&#225;lvez-Prieto, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reduction+in+the+amount+and+anti-contractile+effect+of+periadventitial+mesenteric+adipose+tissue+precedes+hypertension+development+in+spontaneously+hypertensive+rats.">A reduction in the amount and anti-contractile effect of periadventitial mesenteric adipose tissue precedes hypertension development in spontaneously hypertensive rats.</a> Hypertension research. 31 (7), 1415 (2008).</li><li>Gao, Y. J., Lu, C., Su, L. Y., Sharma, A., Lee, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+vascular+function+by+perivascular+adipose+tissue:+the+role+of+endothelium+and+hydrogen+peroxide.">Modulation of vascular function by perivascular adipose tissue: the role of endothelium and hydrogen peroxide.</a> British Journal of Pharmacology. 151 (3), 323-331 (2007).</li><li>Gao, Y. -. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+promotes+vasoconstriction:+the+role+of+superoxide+anion.">Perivascular adipose tissue promotes vasoconstriction: the role of superoxide anion.</a> Cardiovascular Research. 71 (2), 363-373 (2006).</li><li>Szasz, T., Webb, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue:+more+than+just+structural+support.">Perivascular adipose tissue: more than just structural support.</a> Clinical Science (London). 122 (1), 1-12 (2012).</li><li>Ramirez, J. G., O'Malley, E. J., Ho, W. S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pro-contractile+effects+of+perivascular+fat+in+health+and+disease.">Pro-contractile effects of perivascular fat in health and disease.</a> Brish Journal of Pharmacology. 174 (20), 3482-3495 (2017).</li><li>Hajer, G. R., van Haeften, T. W., Visseren, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+dysfunction+in+obesity,+diabetes,+and+vascular+diseases.">Adipose tissue dysfunction in obesity, diabetes, and vascular diseases.</a> European Heart Journal. 29 (24), 2959-2971 (2008).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+properties+of+small+arterial+resistance+vessels+in+spontaneously+hypertensive+and+normotensive+rats.">Contractile properties of small arterial resistance vessels in spontaneously hypertensive and normotensive rats.</a> Circulation Research. 41 (1), 19-26 (1977).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ.">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260 (5552), 617-619 (1976).</li><li>del Campo, L., Ferrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wire+myography+to+study+vascular+tone+and+vascular+structure+of+isolated+mouse+arteries.">Wire myography to study vascular tone and vascular structure of isolated mouse arteries.</a> Methods in Molecular Biology. 1339, 255-276 (2015).</li><li>Dobrin, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+initial+length+on+length-tension+relationship+of+vascular+smooth+muscle.">Influence of initial length on length-tension relationship of vascular smooth muscle.</a> American Journal of Physiology. 225 (3), 664-670 (1973).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+prevents+metabolic+aging+caused+by+abnormal+SIRT1+function+in+adipose+tissues.">Calorie restriction prevents metabolic aging caused by abnormal SIRT1 function in adipose tissues.</a> Diabetes. 64 (5), 1576-1590 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caliber+dependent+calcitonin+gene-related+peptide-induced+relaxation+in+rat+coronary+arteries:+effect+of+K++on+the+tachyphylaxis.">Caliber dependent calcitonin gene-related peptide-induced relaxation in rat coronary arteries: effect of K+ on the tachyphylaxis.</a> European Journal of Pharmacology. 351 (1), 53-59 (1998).</li><li>Soltis, E. E., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perivascular+adipose+tissue+on+rat+aortic+smooth+muscle+responsiveness.">Influence of perivascular adipose tissue on rat aortic smooth muscle responsiveness.</a> Clinical and Experimental Hypertension A. 13 (2), 277-296 (1991).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>Fesus, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+is+a+novel+humoral+vasodilator.">Adiponectin is a novel humoral vasodilator.</a> Cardiovascular Research. 75 (4), 719-727 (2007).</li><li>Greenstein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+inflammation+and+hypoxia+abolish+the+protective+anticontractile+properties+of+perivascular+fat+in+obese+patients.">Local inflammation and hypoxia abolish the protective anticontractile properties of perivascular fat in obese patients.</a> Circulation. 119 (12), 1661-1670 (2009).</li><li>Yudkin, J. S., Eringa, E., Stehouwer, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Vasocrine"+signalling+from+perivascular+fat:+a+mechanism+linking+insulin+resistance+to+vascular+disease.">"Vasocrine" signalling from perivascular fat: a mechanism linking insulin resistance to vascular disease.</a> Lancet. 365 (9473), 1817-1820 (2005).</li><li>Xia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncoupling+of+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+perivascular+adipose+tissue+of+diet-induced+obese+mice.">Uncoupling of endothelial nitric oxide synthase in perivascular adipose tissue of diet-induced obese mice.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 36 (1), 78-85 (2016).</li><li>Xia, N., Forstermann, U., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+resveratrol+on+eNOS+in+the+endothelium+and+the+perivascular+adipose+tissue.">Effects of resveratrol on eNOS in the endothelium and the perivascular adipose tissue.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1403 (1), 132-141 (2017).</li><li>Schinzari, F., Tesauro, M., Cardillo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+and+perivascular+adipose+tissue+abnormalities+in+obesity-related+vascular+dysfunction:+novel+targets+for+treatment.">Endothelial and perivascular adipose tissue abnormalities in obesity-related vascular dysfunction: novel targets for treatment.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69 (6), 360-368 (2017).</li><li>Liu, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipocalin-2+deficiency+prevents+endothelial+dysfunction+associated+with+dietary+obesity:+role+of+cytochrome+P450+2C+inhibition.">Lipocalin-2 deficiency prevents endothelial dysfunction associated with dietary obesity: role of cytochrome P450 2C inhibition.</a> British Journal of Pharmacology. 165 (2), 520-531 (2012).</li><li>Martinez-Quinones, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+induced+morphological+and+physiological+changes+in+cells+of+the+arterial+wall.">Hypertension induced morphological and physiological changes in cells of the arterial wall.</a> American Journal of Hypertension. 31 (10), 1067-1078 (2018).</li><li>Outzen, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+value+of+mechanical+and+vasomotor+properties+of+mouse+isolated+mesenteric+resistance-sized+arteries.">Translational value of mechanical and vasomotor properties of mouse isolated mesenteric resistance-sized arteries.</a> Pharmacology Research and Perspectives. 3 (6), e00200 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Simonsen, A. H., Boonen, H. C., Outzen, E. M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ageing+on+the+passive+and+active+tension+and+pharmacodynamic+characteristics+of+rat+coronary+arteries:+age-dependent+increase+in+sensitivity+to+5-HT+and+K+.">Effect of ageing on the passive and active tension and pharmacodynamic characteristics of rat coronary arteries: age-dependent increase in sensitivity to 5-HT and K+.</a> Pharmacology. 90 (3-4), 160-168 (2012).</li></ol>

מלבד תאי האנדותל, אותות הנגזרים מהמע מ ממלאים תפקיד חשוב בוויסות הטון של השריר החלק החוזר30. Pvat בריא משחררת לא האנטי דלקתיות אדיפונקטין להפעיל אפקט אנטי קונקטילה על העורקים, אשר אובד בתנאים פתולוגיים כגון השמנה תסמונת מטבולית31,32. במצבי מחלה, pvat ?...

הפסקות והתכווצות של עורקים מושגת על ידי מרפה והתכווצויות, בהתאמה, של תאי שריר החלק שלהם כלי דם. שינויים בתגובתיות כלי דם של עורקים קטנים תורמים לרגולציה הומאטית של לחץ דם עורקי על ידי עצבים אוטונומית והורמונים המצויים בדם (למשל, catecholamines, אנגיוטנסין II, סרוטונין, ואסיסין). ברמה המקומית, התגובות כלי הדם של תאים שרירים חלקה מאופנן על ידי אותות מתאי האנדותל של האינטימה ואת רקמת השומן סביב העורקים (איור 1).
האנדותל הוא לא רק מכשול פסיבי, אלא גם משמש כמשטח להחלפת אותות בין הדם לבין תאי השריר החלקים הבסיסיים של כלי הדם. על ידי שחרור חומרים vasoactive שונים, האנדותל ממלא תפקיד קריטי בשליטה המקומית של התגובות בצליל כלי הדם1. לדוגמה, בתגובה לאצטילכולין, אנדותל תחמוצת החנקן סטנדרטים (אנוש) מופעל באנדותל כדי לייצר תחמוצת החנקן (NO), אשר משרה הרפיה של שריר החלק הבסיסי של כלי הדם על ידי הפעלת guanylyl cyclase מסיסים (ממפקדת הסטארגייט) 2. חומרים אחרים של ה-vasoactive כוללים את המוצרים של הציקלוחמצן (לדוגמה, פרוסטוליב ותרובוק2), ליפוקסיז'אז (למשל, 12-הידרויואיאוטיות חומצות, 12-HETE), ו ציטוכרום P450 מונקסיג'סים (Hete ו חומצות שורש החומצה, EETs), מינים החמצן תגובתי (ROS), ו פפטידים vasoactive (למשל, אנדותאלין -1 ו אנגיוטנסין II), והגורמים היפרקטליזציה הנגזרת (EDHF)3. שומרים על הטון המקומי. של מנוע4,5.
תפקוד לקוי של האנדותל מאופיין בפגם בvasodilatation התלוי באנדותל6, סימן ההיכר של הזדקנות כלי הדם7. עם הגיל, היכולת של אנדותל לקדם את vasodilatation היא מופחתת בהדרגה, בשל בעיקר לירידה ללא זמינות ביולוגית, כמו גם ביטוי בלתי תקין ותפקוד של אנוש באנדותל ובמפקדת הסטארגייט בתאי שריר כלי הדם חלק8 , מיכל בן 10 , 10. מופחתת ללא זמינות ביולוגית הפקת ביוציטורים בעלי תלות אנדותל,11,12. בעורקים הישנים, חוסר תפקוד אנדותל גורם היפרפלזיה בתקשורת, כפי שניכר על ידי עליות המסומנים בעובי הקיר, מספר הגרעין המדיאלי, אשר מזכירים את העיבוי העורקים ביתר לחץ דם וטרשת עורקים נצפתה אצל האדם חולים13,14. בנוסף, התנאים הפתופסלוגיים כגון השמנה, סוכרת או יתר לחץ דם להאיץ את ההתפתחות של בתפקוד אנדותל15,16.
רקמת השומן הפריסקולרית (PVAT) משחררת adipokines רבים להסדיר מבנה כלי דם ופונקציה17. השפעת האנטי-כועית של pvat מתווכת על ידי גורמים מרגיעים, כגון adiponectin, לא, חמצן מימן מימן גופריתי18,19,20. עם זאת, בהתאם למיקום ואת המצב פתופסולוגי, PVAT גם יכול לשפר את התגובות הקונקטילה בעורקים שונים21. החומרים הפרו-כוללים המיוצרים על ידי כולל אנגיוטנסין-II, לפטין, רסיסטין, ו-ROS22,23.  ברוב המחקרים על כלי דם בודדים, PVAT מ נחשב תמיכה מבנית פשוטה עבור ובכך הוסר במהלך הכנת מקטעי הטבעת של כלי הדם. מאחר שאדיפוז מייצגת גורם סיכון בלתי תלוי ליתר לחץ דם וכלי דם, הקשורים לבעיות לב וכלי דם24, יש לשקול את pvat מ סביב כלי הדם כאשר חוקרים את התגובתיות של עורקים שונים.
מערכות מיוגרפיה רב התיל השתמשו באופן נרחב כדי לחקור את פונקציות העושות של מגוון כלי דם, כולל העורקים, mesenteric, כליות, הירך, המוח ואת עורק כלילי25,26. הפרוטוקולים המתוארים במסמך זה ישתמשו במיגרפיה תיל כדי להעריך תגובתיות כלי דם בעורקים מצע מבודדים מדגמי עכבר ששונו גנטית, עם דגש מיוחד על אפנון על ידי pvat.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6625</td>
			<td>Stock concentration: 10-1 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-NAME (N&#969;-nitro-L-arginine methyl ester)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N5751</td>
			<td>Stock concentration: 3 x 10-2 M 
			Working concentration: 10-4 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6126</td>
			<td>Stock concentration: 10-2 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619 (9,11-dideoxy-9&#945;,11&#945;methanoepoxy prostaglandin F2&#945;)</td>
			<td>Enzo</td>
			<td>BML-PG023-0001</td>
			<td>Stock concentration: 10-5 M 
			Working concentration: 1-3 x 10-8 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwire myograph</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/26</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML848</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labchart7</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adipo-SIRT1 wild type mice</td>
			<td>Laboratory Animal Unit, The University of Hong Kong</td>
			<td>CULATR NO.: 4085-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated Petri dishes</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten wires</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>300331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tools</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues

היענות משתנה של כלי הדם לגירויים פתופסלוגיים תורמת לפיתוח מגוון רחב של מחלות לב וכלי דם ומטבולית. התפקוד הטיפולי של האנדותל מייצג את האשם הגדול ביותר של העורקים המוגברת והצמצם המשופר של העורק. רקמת אדיפוז (שומן) המקיפים את העורקים ממלאים תפקידים חשובים בוויסות הרפיה התלויה באנדותל ו/או התכווצות של תאי השריר החלקים והחלק של כלי הדם. ניתן להעריך את הקשר בין האנדותל לבין רקמות השומן הפריסקולרית, הvivo לשעבר באמצעות כלי דם נטענים על-ידי מערכת תיל מיאלואידית. עם זאת, יש להקים הגדרות אופטימליות עבור עורקים הנגזרים מבעלי חיים ממינים שונים, גילאים, רקעים גנטיים ו/או מצבים פתופסלוגיים.

בחינת מערכת היחסים האורך/המתח להשגת פקטור הנורמליזציה k
כמות המתיחה המוחלת על קטע הספינה משפיעה על היקף האינטראקציה של actin-רירן ולכן הכוח הפעיל המקסימלי התפתח. לפיכך, עבור כל סוג של כלי דם, קביעת כמות המתיחה הנדרשת עבור כוח פ?...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

הערכה של תגובתיות וסקולרית באמצעות העורקים המבודדים הבודדים באמצעות התמקדות באפנון על ידי פריסקולרית של הרקמות

הפרוטוקול מתאר את השימוש במיגרפיה תיל כדי להעריך את המתח האיזוגרפי של העורקים המסריים מבודדים מעכברים, עם שיקול מיוחד של האפנון על ידי גורמים שפורסמו מתאי האנדותל ורקמות השומן הפריסקולרית.

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

פרוטוקול קפדני מאוד נדרש, כך שנוכל להשוות באופן תקף את ההכנות מאותם בעלי חיים או מבעלי חיים או עורקים שונים בנוכחות או היעדר השומן המקיף אותם או בנוכחות או היעדר אנדותל. היתרון העיקרי של טכניקה ניסיונית זו הוא שאנחנו יכולים להשוות טבעות של אותו עורק במצב איזומטרי ובכך להסיק מסקנות בתוקף לגבי ההשפעה של הגורמים הניסיוניים שאנו חוקרים. פרוטוקול זה מספק תובנות על אפנון של היענות כלי הדם על ידי רקמות שומן כלי דם של בעלי חיים שונים מהונדסים גנטית.תפקוד לקוי של רקמת שומן מייצג גורם סיכון עצמאי עבור יתר לחץ דם וסיבוכים קרדיווסקולריים הקשורים שלה. המיאוגרף שלנו כרוך בצעדים מורכבים רבים הדורשים זהירות רבה בכל נקודה כדי למנוע פגיעה בכלי השיט, במיוחד במהלך ההרכבה, ולהבטיח כי הכלי מגיב כראוי לגירויים שונים. התחל הליך זה עם הכנות ניתוק של טבעות עורקים mesenteric כמתואר בפרוטוקול הטקסט.הפעל את המחשב ופתח את תוכנת הקלטת הנתונים. שמור את הניסוי כקובץ נתונים של תרשים מעבדה בשם חדש כדי להימנע מהחלפת קובץ ההגדרה המקורי. פתח את חלון הגדרות הנורמליזציה והגדר את גורם K לחלון.קבל את ערכי ברירת המחדל עבור כיול IPs, לחץ יעד, זמן ממוצע מקוון ותנוכי השהיה. לחץ על אישור כדי לשמור את ההגדרות. בחר ערוצי עניין והקלט את קוטר החוט, נקודות הקצה של הרקמות וקריאת המיקרומטר הראשונית בחלון הנורמליזציה.כדי להתחיל את הליך הנורמליזציה, להחיל את המתיחה הפסיבית הראשונה על כלי הדם על ידי הפיכת בורג מיקרומטר נגד כיוון השעון. לאחר המתנה של שלוש דקות עד שהספינה תתייצב, הזינו את קריאת המיקרומטר החדשה בחלון הנורמליזציה. מתח הקיר מחושב באופן אוטומטי ומוצג כנקודה בגרף.לאחר כל מתיחה פסיבית, החלף את מאגר קרבס הבקרה עם קרב אשלגן גבוה iso-osmotic המכיל 150 מילימולר אשלגן כלורי. כאשר ההתכווצות מגיעה לרמה של כשלוש דקות, יש לתעד את הכוח הפעיל על ידי חיסור הכוח הפסיבי בכל מתיחה מהכוח המופעל באשלגן. חשב את מתח הקיר, כמו גם את ערכי ההיקף הפנימיים.הסר את מצב אשלגן גבוה על ידי החלפת חיץ אשלגן גבוה עם חיץ קרבס טרי. יש לחזור על הכביסה במשך שלוש פעמים במשך חמש דקות. חזור על שלבי הנורמליזציה על-ידי גרימת מתיחות פסיביות ואחריהן התכווצות אקטיבית בתורות חלופיות עד שהמתח הפעיל יתחיל לרדת.לשטוף ביסודיות את חיץ קרבס אשלגן גבוה לצייד את ההכנות עוד 30 עד 45 דקות. אפס את המתחים הבסיסיים לאפס כך שרק תגובות חוזיות פעילות יירשמו במהלך הניסוי הבא. הכן והכן טבעות עורקים משויכות כמתואר בפרוטוקול הטקסט מהמקטעים הסמוכים של כל עורק.הכן טבעת עורקים אחת עם PVAT שלם והשני עם PVAT הוסר. לאחר הנורמליזציה, יש ליצור מראש את מקטעי העורקים עם מאגר אשלגן קרבס גבוה על ידי הוספת תספורת אשלגן כלורי 115 מילימולארית לתא המכיל קרבס. לאחר התכווצות לתקופת הרמה, לשטוף את אשלגן גבוה ולהחליף את החיץ עם חיץ קרבס אוויר טרי.יש לחזור על הכביסה שלוש פעמים במשך חמש דקות. חזור על גירוי אשלגן כלורי וכביסה שלוש פעמים ולתרשם את התגובה מתכווצת מקסימלית אשלגן כלורי על ידי חיסור המתח הבסיסי מן המתח עקב גירוי אשלגן כלורי. לאחר ההתכווצות והכביסה האחרונה, מלאו מחדש את התא עם חיץ קרבס חם ומוצף ומאפשרים העורק להתאושש במשך כ -30 דקות לפני ביצוע המשימה הבאה.לכל תא, להוסיף כמויות מצטברות של פנילפרין כדי לגרום לעליות תלויות ריכוז ומתח איזומטרי של ההכנות הקלות. לאחר הוספת המנה האחרונה של אגוניסט, לשטוף את התרופה ביסודיות ולמילוי התא עם חיץ קרבס טרי. התווה את התגובות תלויות הריכוז כאחוזים הולכים וגדלים של אשלגן כלורי המושרה התכווצויות מקסימליות.כדי להעריך את התרומה של תחמוצת החנקן, דגירה ההכנות עם מעכב תחמוצת החנקן סינתאז L-NAME במשך 30 דקות לפני הוספת פנילפירין. לביצוע עקומת תגובת ריכוז שנייה ברצף, לשטוף את התא לחלוטין שוב ושוב כדי להסיר את כל האגוניסטים הקודמים עד שלא נצפו שינויים נוספים בטון. נורמליזציה של מערכת היחסים מתח אורך בוצעה עבור עורקים mesenteric מבודד מודלים העכבר מוזן עם צ'או סטנדרטי או דיאטה עתירת שומן.מערכת יחסים פסיבית של מתח אורך הוקמה על ידי מתיחה מצטברת של מקטעי העורק עד שהושג היקף פנימי המתאים ל -100 מילימטרים של לחץ טרנסמורלי כספית, או IC100. לאחר כל מתיחה, 115 מילימולר אשלגן כלורי הוחל כדי לעורר התכווצויות. עקומות המתח באורך הפעיל הותוו מנתוני הכוח הפעיל בציר ה- Y וערכי ה- IC המחושבים מנתוני המיקרומטר בציר ה- X.ערך IC השוכן בתוך מישור השיא הוא IC1. גורם הנורמליזציה, K, חושב כיחס של IC1 ו- IC100, אשר לאחר מכן ניתן להחיל על דגימות מאותו סוג כלי בניסוי הבא. מוצגות כאן הקלטות פלט של תגובות vasoconstrictor לפנילפרין בעורקים mesenteric עם או בלי PVAT שמסביב.ריכוזים מצטברים של פנילפירין יושם כדי לעורר את התכווצויות של עורקים mesenteric שנאספו מ 16 שבועות adiposet עכבר אחד. התגובות מתכווצים נרשמו ומחושבים כאחוז של 150 מילימולר אשלגן כלורי המושרה התכווצות מקסימלית. האזור מתחת לעקומות ההתכווצות התווה להשוואה.שים לב כי PVAT מ adiposet עכברים אחד עורר השפעה נגד התכווצות על התגובה פנילפירין. בעת קבלת התכווצויות הנגרמות על-ידי KCL, התגובות חייבות להיות יציבות ויציבות. אם התגובה עדיין גדלה לאחר שלושה ניהולים מצטברים של KCL, ייתכן שיהיה צורך בגירוי KCL.כדי להשיג תנאים אופטימליים של המתחים, צעד הנורמליזציה חשוב מאוד, כמו זה קובע את הכוח לפתוח את כלי הדם. אם זה לא נעשה כראוי, זה ישפיע על כל הניסוי. פרוטוקול זה יכול להיות מיושם על הגדרות אחרות בנוסף התכווצות או הרפיה הנגרמת על ידי פנילפרין.לדוגמה, בנוכחות או היעדר רקמת שומן כלי דם, עצבים אוטונומיים או אנדותל. באמצעות פרוטוקול זה, חוקרים יכולים לבחון כלי דם קטנים ממודלים של בעלי חיים חולים בתנאים פתופיזיולוגיים שונים, כגון השמנת יתר, סוכרת ומחלות לב וכלי דם.

Research

JoVE Journal

Biology

Right Hemihepatectomy by Suprahilar Intrahepatic Transection of the Right Hemipedicle using a Vascular Stapler

Hemihepatectomy העכבר על ידי חיתוך רוחב intrahepatic Suprahilar של Hemipedicle העכבר באמצעות מהדק דם

Successful hepatic resection requires profound anatomical knowledge and delicate surgical technique. Hemihepatectomies are mostly performed after ...

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

לשעבר vivo הכנה מבודדת Microvessel השלד לחקירות תגובתיות כלי דם

The isolated  microvessel preparation is an ex vivo preparation that allows for examination of the different contributions of  factors that control vessel ...

Using Digital Image Correlation to Characterize Local Strains on Vascular Tissue Specimens

באמצעות מתאם תמונה דיגיטלי לאפיין זנים מקומיים בדגימות רקמת כלי דם

Characterization of the mechanical behavior of biological and engineered soft tissues is a central component of fundamental biomedical research and ...

Analysis of Cell Suspensions Isolated from Solid Tissues by Spectral Flow Cytometry

ניתוח של המתלים תא מבודד מרקמות Solid ידי זרימת cytometry ספקטרלי

Flow cytometry has been used for the past 40 years to define and analyze the phenotype of lymphoid and other hematopoietic cells. Initially restricted to ...

Differentiation Capacity of Human Aortic Perivascular Adipose Progenitor Cells

בידול קיבולת של האדם-אבי העורקים Perivascular שומן ובתאים

Adipose tissue is a rich source of multi-potent mesenchymal stem cells (MSC) capable of differentiating into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic ...

Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

הכנת תאי אדיפוס אבות מרקמות שומן אפידימליות עכבר

Obesity and metabolic disorders such as diabetes, heart disease, and cancer, are all associated with dramatic adipose tissue remodeling. Tissue-resident ...

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

הדמיה וכימות של רקמות שומן חום ובז' בעכברים באמצעות [18F]FDG מיקרו-PET/MR הדמיה

Brown and beige adipocytes are now recognized as potential therapeutic targets for obesity and metabolic syndromes. Non-invasive molecular imaging methods ...

Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase

עכבר בטן מפרצת אבי העורקים מודל המושרה על ידי יישום פרי וסקולרי של אלסטאז

Abdominal aortic aneurysm (AAA), although primarily asymptomatic, is potentially life-threatening as the rupture of AAA usually has a devastating outcome. ...

Semi-Automated Isolation of Murine White Adipose Tissue

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator (Video) | JoVE 

בידוד חצי אוטומטי של מקטע כלי הדם הסטרומלי מרקמת השומן הלבנה באמצעות דיסוציאטור רקמות

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their ...