Name: assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues
Uploaded: 2019-06-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

홍콩 연구 보조금 위원회 (17124718 및 17121714), 홍콩 건강 및 의료 연구 기금 [13142651 및 13142641], 홍콩 공동 연구 기금 [C7055-14G] 및 국가 기본 보조금을 통해 재정적으로 지원을 받았습니다. 중국의 연구 프로그램 [973 프로그램 2015CB553603].

다음 연구에 사용 되는 모든 동물은 의학 학부의 실험실 동물 단위에 의해 제공 되었다, 홍콩의 대학. 윤리 승인은 교육 및 연구를 위한 실험실 동물의 사용에 대 한 부서별 위원회에서 얻어 졌습니다 (CULATR, 4085-16).
1. 준비
<ol><li>약물의 제조
	<ol>
<li>물질 안전 보건 자료 (MSDS)에 명시 된 대로 약품을 수령한 직후에 보관 하십시오. 고 농도 원 액으로 용 매에 약물?...

<ol>
	<li>Furchgott, R. F., Zawadzki, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+obligatory+role+of+endothelial+cells+in+the+relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+acetylcholine.">The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine.</a> Nature. 288 (5789), 373-376 (1980).</li><li>Furchgott, R. F., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+relaxing+and+contracting+factors.">Endothelium-derived relaxing and contracting factors.</a> The FASEB Journal. 3 (9), 2007-2018 (1989).</li><li>Feletou, M., Kohler, R., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+vasoactive+factors+and+hypertension:+possible+roles+in+pathogenesis+and+as+treatment+targets.">Endothelium-derived vasoactive factors and hypertension: possible roles in pathogenesis and as treatment targets.</a> Current Hypertension Reports. 12 (4), 267-275 (2010).</li><li>Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction:+the+first+step+toward+coronary+arteriosclerosis.">Endothelial dysfunction: the first step toward coronary arteriosclerosis.</a> Circulation Journal. 73 (4), 595-601 (2009).</li><li>Feletou, M., Huang, Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-mediated+control+of+vascular+tone:+COX-1+and+COX-2+products.">Endothelium-mediated control of vascular tone: COX-1 and COX-2 products.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (3), 894-912 (2011).</li><li>Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanisms+of+endothelial+cell+dysfunction.">Cellular and molecular mechanisms of endothelial cell dysfunction.</a> Journal of Clinical Investigation. 100 (9), 2153 (1997).</li><li>Vanhoutte, P. M., Shimokawa, H., Tang, E. H., Feletou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+vascular+disease.">Endothelial dysfunction and vascular disease.</a> Acta physiologica. 196 (2), 193-222 (2009).</li><li>Kl&#246;&#223;, S., Bouloumi&#233;, A., M&#252;lsch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+and+chronic+hypertension+decrease+expression+of+rat+aortic+soluble+guanylyl+cyclase.">Aging and chronic hypertension decrease expression of rat aortic soluble guanylyl cyclase.</a> Hypertension. 35 (1), 43-47 (2000).</li><li>Csiszar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging-induced+phenotypic+changes+and+oxidative+stress+impair+coronary+arteriolar+function.">Aging-induced phenotypic changes and oxidative stress impair coronary arteriolar function.</a> Circulation Research. 90 (11), 1159-1166 (2002).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+SIRT1+prevents+age-induced+impairment+of+vasodilator+responses+by+enhancing+the+expression+and+activity+of+soluble+guanylyl+cyclase+in+smooth+muscle+cells.">Endothelial SIRT1 prevents age-induced impairment of vasodilator responses by enhancing the expression and activity of soluble guanylyl cyclase in smooth muscle cells.</a> Cardiovascular Research. , (2018).</li><li>Auch-Schwelk, W., Katusic, Z. S., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+inactivates+endothelium-derived+contracting+factor+in+the+rat+aorta.">Nitric oxide inactivates endothelium-derived contracting factor in the rat aorta.</a> Hypertension. 19 (5), 442-445 (1992).</li><li>Tang, E. H., Feletou, M., Huang, Y., Man, R. Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholine+and+sodium+nitroprusside+cause+long-term+inhibition+of+EDCF-mediated+contractions.">Acetylcholine and sodium nitroprusside cause long-term inhibition of EDCF-mediated contractions.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulation Physiology. 289 (6), H2434-H2440 (2005).</li><li>Ghiadoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+function+and+common+carotid+artery+wall+thickening+in+patients+with+essential+hypertension.">Endothelial function and common carotid artery wall thickening in patients with essential hypertension.</a> Hypertension. 32 (1), 25-32 (1998).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+Impairment+of+Vascular+Structure+and+Functions.">Age-related Impairment of Vascular Structure and Functions.</a> Aging and Disease. 8 (5), 590-610 (2017).</li><li>Tabit, C. E., Chung, W. B., Hamburg, N. M., Vita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+diabetes+mellitus:+Molecular+mechanisms+and+clinical+implications.">Endothelial dysfunction in diabetes mellitus: Molecular mechanisms and clinical implications.</a> Reviews in Endocrine &amp; Metabolic Disorders. 11 (1), 61-74 (2010).</li><li>Tanaka, K., Sata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+perivascular+adipose+tissue+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">Roles of perivascular adipose tissue in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Frontiers in Physiology. 9, 3 (2018).</li><li>Brown, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+in+vascular+function+and+disease:+a+review+of+current+research+and+animal+models.">Perivascular adipose tissue in vascular function and disease: a review of current research and animal models.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 34 (8), 1621-1630 (2014).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> The FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>G&#225;lvez-Prieto, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reduction+in+the+amount+and+anti-contractile+effect+of+periadventitial+mesenteric+adipose+tissue+precedes+hypertension+development+in+spontaneously+hypertensive+rats.">A reduction in the amount and anti-contractile effect of periadventitial mesenteric adipose tissue precedes hypertension development in spontaneously hypertensive rats.</a> Hypertension research. 31 (7), 1415 (2008).</li><li>Gao, Y. J., Lu, C., Su, L. Y., Sharma, A., Lee, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+vascular+function+by+perivascular+adipose+tissue:+the+role+of+endothelium+and+hydrogen+peroxide.">Modulation of vascular function by perivascular adipose tissue: the role of endothelium and hydrogen peroxide.</a> British Journal of Pharmacology. 151 (3), 323-331 (2007).</li><li>Gao, Y. -. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+promotes+vasoconstriction:+the+role+of+superoxide+anion.">Perivascular adipose tissue promotes vasoconstriction: the role of superoxide anion.</a> Cardiovascular Research. 71 (2), 363-373 (2006).</li><li>Szasz, T., Webb, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue:+more+than+just+structural+support.">Perivascular adipose tissue: more than just structural support.</a> Clinical Science (London). 122 (1), 1-12 (2012).</li><li>Ramirez, J. G., O'Malley, E. J., Ho, W. S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pro-contractile+effects+of+perivascular+fat+in+health+and+disease.">Pro-contractile effects of perivascular fat in health and disease.</a> Brish Journal of Pharmacology. 174 (20), 3482-3495 (2017).</li><li>Hajer, G. R., van Haeften, T. W., Visseren, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+dysfunction+in+obesity,+diabetes,+and+vascular+diseases.">Adipose tissue dysfunction in obesity, diabetes, and vascular diseases.</a> European Heart Journal. 29 (24), 2959-2971 (2008).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+properties+of+small+arterial+resistance+vessels+in+spontaneously+hypertensive+and+normotensive+rats.">Contractile properties of small arterial resistance vessels in spontaneously hypertensive and normotensive rats.</a> Circulation Research. 41 (1), 19-26 (1977).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ.">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260 (5552), 617-619 (1976).</li><li>del Campo, L., Ferrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wire+myography+to+study+vascular+tone+and+vascular+structure+of+isolated+mouse+arteries.">Wire myography to study vascular tone and vascular structure of isolated mouse arteries.</a> Methods in Molecular Biology. 1339, 255-276 (2015).</li><li>Dobrin, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+initial+length+on+length-tension+relationship+of+vascular+smooth+muscle.">Influence of initial length on length-tension relationship of vascular smooth muscle.</a> American Journal of Physiology. 225 (3), 664-670 (1973).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+prevents+metabolic+aging+caused+by+abnormal+SIRT1+function+in+adipose+tissues.">Calorie restriction prevents metabolic aging caused by abnormal SIRT1 function in adipose tissues.</a> Diabetes. 64 (5), 1576-1590 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caliber+dependent+calcitonin+gene-related+peptide-induced+relaxation+in+rat+coronary+arteries:+effect+of+K++on+the+tachyphylaxis.">Caliber dependent calcitonin gene-related peptide-induced relaxation in rat coronary arteries: effect of K+ on the tachyphylaxis.</a> European Journal of Pharmacology. 351 (1), 53-59 (1998).</li><li>Soltis, E. E., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perivascular+adipose+tissue+on+rat+aortic+smooth+muscle+responsiveness.">Influence of perivascular adipose tissue on rat aortic smooth muscle responsiveness.</a> Clinical and Experimental Hypertension A. 13 (2), 277-296 (1991).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>Fesus, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+is+a+novel+humoral+vasodilator.">Adiponectin is a novel humoral vasodilator.</a> Cardiovascular Research. 75 (4), 719-727 (2007).</li><li>Greenstein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+inflammation+and+hypoxia+abolish+the+protective+anticontractile+properties+of+perivascular+fat+in+obese+patients.">Local inflammation and hypoxia abolish the protective anticontractile properties of perivascular fat in obese patients.</a> Circulation. 119 (12), 1661-1670 (2009).</li><li>Yudkin, J. S., Eringa, E., Stehouwer, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Vasocrine"+signalling+from+perivascular+fat:+a+mechanism+linking+insulin+resistance+to+vascular+disease.">"Vasocrine" signalling from perivascular fat: a mechanism linking insulin resistance to vascular disease.</a> Lancet. 365 (9473), 1817-1820 (2005).</li><li>Xia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncoupling+of+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+perivascular+adipose+tissue+of+diet-induced+obese+mice.">Uncoupling of endothelial nitric oxide synthase in perivascular adipose tissue of diet-induced obese mice.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 36 (1), 78-85 (2016).</li><li>Xia, N., Forstermann, U., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+resveratrol+on+eNOS+in+the+endothelium+and+the+perivascular+adipose+tissue.">Effects of resveratrol on eNOS in the endothelium and the perivascular adipose tissue.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1403 (1), 132-141 (2017).</li><li>Schinzari, F., Tesauro, M., Cardillo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+and+perivascular+adipose+tissue+abnormalities+in+obesity-related+vascular+dysfunction:+novel+targets+for+treatment.">Endothelial and perivascular adipose tissue abnormalities in obesity-related vascular dysfunction: novel targets for treatment.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69 (6), 360-368 (2017).</li><li>Liu, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipocalin-2+deficiency+prevents+endothelial+dysfunction+associated+with+dietary+obesity:+role+of+cytochrome+P450+2C+inhibition.">Lipocalin-2 deficiency prevents endothelial dysfunction associated with dietary obesity: role of cytochrome P450 2C inhibition.</a> British Journal of Pharmacology. 165 (2), 520-531 (2012).</li><li>Martinez-Quinones, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+induced+morphological+and+physiological+changes+in+cells+of+the+arterial+wall.">Hypertension induced morphological and physiological changes in cells of the arterial wall.</a> American Journal of Hypertension. 31 (10), 1067-1078 (2018).</li><li>Outzen, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+value+of+mechanical+and+vasomotor+properties+of+mouse+isolated+mesenteric+resistance-sized+arteries.">Translational value of mechanical and vasomotor properties of mouse isolated mesenteric resistance-sized arteries.</a> Pharmacology Research and Perspectives. 3 (6), e00200 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Simonsen, A. H., Boonen, H. C., Outzen, E. M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ageing+on+the+passive+and+active+tension+and+pharmacodynamic+characteristics+of+rat+coronary+arteries:+age-dependent+increase+in+sensitivity+to+5-HT+and+K+.">Effect of ageing on the passive and active tension and pharmacodynamic characteristics of rat coronary arteries: age-dependent increase in sensitivity to 5-HT and K+.</a> Pharmacology. 90 (3-4), 160-168 (2012).</li></ol>

내 피 세포 외에 PVAT에서 유래한 신호는 평활 근 톤 반응성의 조절에 중요 한 역할을 한다 (30). 건강 한 pvat는 비만 및 대사 증후군31,32와 같은 병리학 적 상태에서 손실 되는 동맥에 대 한 항 수축 효과를 발휘 하는 NO 및 항 염증 adiponectin을 방출 합니다. 질병 상태에서 pvat는 내 피 세포 기능 장애 및 기타 심혈 관 이상33...

팽창과 동맥의 수축은 각각의 혈관 평활 근 세포의 이완 및 수축에 의해 달성 됩니다. 작은 동맥의 혈관 반응성의 변화는 혈액에 존재 하는 자율 신경 및 호르몬 (예: 카 테 콜 아민, 안 지 오 텐 신 II, 세로토닌, 바소)에 의해 동맥 혈압의 항상성 규칙에 기여 합니다. 지역 수준에서 평활 근 세포의 혈관 반응은 막의 내 피 세포와 동맥을 둘러싼 지방 조직의 신호에 의해 변조 됩니다 (그림 1).
내 피는 수 동적 장벽 뿐만 아니라 혈액과 기저 혈관 평활 근 세포 사이의 신호를 교환 하는 표면 역할도 한다. 다양 한 혈관 활성 물질을 방출 함으로써, 내 피는 혈관 톤 응답의 국부 제어에 중요 한 역할을 한다1. 예를 들어, 아 세 틸 콜린에 대 한 반응에서, 내 피 질 산화 질소 신 타제 (이 노스)는 산화 질소 (NO)를 생성 하는 내 피의 활성을 유발 하며,이는 용해성 guanylyl 사이 클론 (sGC) 을 활성화 시 킴으로써 기저 혈관 평활 근의 이완을 유도 한다 2. 다른 혈관 활성 물질에는 cyclooxygenases의 생성물 (예를 들어, 프로 스테이 시 클로 및 트 라 보네 아) 및 시 토 크롬 P450 모노 자 나아 제 (예: 12 hydroxyeicosatetraenoic 산, 12 hete) 및 epoxyeicosatrienoic 산, EETs) 및 혈관 활성 펩타이드 (예컨대, 엔도 텔 린 1 및 안 지 오 텐 신 II) 및 내 피 유래 하이퍼 편광 인자 (EDHF)3. 내 피 유래 혈관 확장 제와 혈관 수축 기 사이의 섬세 한 균형이 국부 혈관 운동 톤4,5를 유지 한다.
내 피 세포 기능 장애는 혈관 노화의 특징7인 내 피의 의존성의 혈관 확장6에서의 손상에 의해 특성화 된다. 나이가 들 수록 혈관 확장을 촉진 하는 내 피의 능력은 점진적으로 감소 하 게 되 고,이로 인해 혈 중 내 피 및 sGC에서의 비정상적인 발현 및 기능 뿐만 아니라 생체 이용률을 크게 감소 시 키 게 된다8 , 9 , 10. 감소 된 생체 이용률은 내 피 의존성 혈관 수축기의 생산을 증강 시킵니다. 나이 든 동맥에서, 내 피 세포 기능 장애는 벽 두께의 현저한 증가, 내측 핵의 수에 의해 반사 됨에 따라 배지에서 증식을 일으키고,이는 인간에서 관찰 되는 고혈압과 동맥 경화 증에서 동맥 농축을 연상 시키는 환자13,14. 또한, 비만, 당뇨병 또는 고혈압과 같은 병 리 생리학적 조건은 내 피 세포 기능 장애의 개발을 촉진 하는15,16.
혈관 주위 지방 조직 (PVAT)은 관 구조와 기능을 조절 하기 위해수많은 adipokines을 방출 합니다. Pvat의 항 수축 효과는 adiponectin, 과산화 수소 및 황화 수소18,20과 같은 이완 요인에 의해 매개 됩니다. 그러나, 위치 및 병 리 생리학적 조건에 따라, PVAT는 또한 다양 한 동맥 (21)에서 수축 반응을 향상 시킬 수 있다. Pvat가 생산 하는 수축 물질에는 안 지 오 텐 신 II, 렙 틴, 레 시 틴이 있으며 ROS22,23이 포함 되어 있습니다.  고립 된 혈관에 대 한 연구의 대부분에서, PVAT는 혈관 구조에 대 한 간단한 구조적 지원으로 간주 하 고 따라서 혈액 혈관 고리 세그먼트의 준비 동안 제거. 지방 기능 장애는 고혈압과 관련 된 심혈 관 합병증 (24)에 대 한 독립적 인 위험 인자를 나타내며, 혈관을 둘러싼 pvat의 관 반응성을 조사할 때 고려해 야 합니다. 다른 동맥.
상기 다중 와이어 myograph 시스템은 대동맥, 장 간 막, 신장, 대 퇴, 대뇌 및 관상 동맥 (25)을 포함 하는 다양 한 혈관의 혈관 운동 기능을 조사 하기 위해 널리 사용 되 고 있다. 여기에 설명 된 프로토콜은 와이어 myography를 사용 하 여 PVAT의 변조에 특별 한 초점을 맞춘 유전자 변형 마우스 모델에서 분리 된 장 간 막 동맥의 혈관 반응성을 평가 합니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6625</td>
			<td>Stock concentration: 10-1 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-NAME (N&#969;-nitro-L-arginine methyl ester)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N5751</td>
			<td>Stock concentration: 3 x 10-2 M 
			Working concentration: 10-4 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6126</td>
			<td>Stock concentration: 10-2 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619 (9,11-dideoxy-9&#945;,11&#945;methanoepoxy prostaglandin F2&#945;)</td>
			<td>Enzo</td>
			<td>BML-PG023-0001</td>
			<td>Stock concentration: 10-5 M 
			Working concentration: 1-3 x 10-8 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwire myograph</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/26</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML848</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labchart7</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adipo-SIRT1 wild type mice</td>
			<td>Laboratory Animal Unit, The University of Hong Kong</td>
			<td>CULATR NO.: 4085-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated Petri dishes</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten wires</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>300331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tools</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues

병 태 생리학적 자극에 대 한 변경 된 혈관 톤 반응성은 광범위 한 심혈 관 및 대사 성 질환의 발달에 기여 합니다. 내 피 세포 기능 장애는 동맥의 혈관 수축 감소와 혈관의 개선에 대 한 주요 범인을 나타낸다. 지방 (지방) 동맥을 둘러싼 조직은 혈관 평활 근 세포의 내 피 의존적 이완 및/또는 수축 조절에 중요 한 역할을 한다. 내 피와 혈관 주위 지방 조직 사이의 교차 회담은 와이어 myography 시스템에 의해 장착 된 혈관을 사용 하 여 ex 생체 내 평가 될 수 있다. 그러나, 다른 종, 나이, 유전 배경 및/또는 병 태 생리학적 조건의 동물에서 파생 된 동맥에 대 한 최적의 설정을 설정 해야 합니다.

정규화 인자 k 를 구하는 길이/인장 관계의 시험
혈관 세그먼트에 적용 되는 스트레칭의 양은 액 틴의 상호 작용의 정도에 영향을 미치며, 따라서 최대의 활성 력이 개발 되었습니다. 따라서, 모든 유형의 혈관에 대해, 최대 활성 력에 필요한 스트레칭 양을 결정 하는 것은 적절 한 근 전도 연구에 필요 합니?...

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Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

혈관 주위 지방 조직에 의해 변조에 초점을 맞춘 분리 된 장 간 동맥을 사용 하 여 혈관 톤 응답성의 평가

이 프로토콜은 마우스에서 분리 된 장 간 막 동맥의 경 벽 등각 장력을 평가 하는 와이어 묘 조 그래피의 사용을 설명 하며, 내 피 세포 및 혈관 주위 지방 조직에서 방출 되는 요인에의 한 변조를 특별히 고려 합니다.

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

우리는 유효하게 그들을 둘러싸고 있는 지방의 존재 또는 부재에 있는 동일 동물 또는 다른 동물 또는 동맥에서 또는 내피의 존재 또는 부재에서 준비를 유효하게 비교할 수 있도록 아주 엄격한 프로토콜이 필요합니다. 이 실험 기술의 주요 장점은 우리가 동상 측정 조건하에서 동일한 동맥의 고리를 비교하고 따라서 우리가 조사하는 실험 요인의 영향에 관하여 유효하게 결론을 내릴 수 있다는 것입니다. 이 프로토콜은 다른 유전자 변형 동물의 지방 조직에 의해 혈관 반응성의 변조에 대한 통찰력을 제공합니다.지방 조직 기능 장애는 고혈압과 관련 심장 혈관 합병증에 대한 독립적 인 위험 요소를 나타냅니다. 당사의 근사 에는 특히 장착 중에 선박이 손상되지 않도록 하고 선박이 다양한 자극에 적절하게 반응하도록 하기 위해 각 지점에서 각 지점에서 극도의 주의가 필요한 여러 가지 복잡한 단계가 포함됩니다. 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 막심 동맥 고리의 준비 및 해부로 이 절차를 시작합니다.컴퓨터를 켜고 데이터 기록 소프트웨어를 엽니다. 실험을 새 이름으로 랩 차트 데이터 파일로 저장하여 원래 설정 파일을 덮어쓰지 않도록 합니다. 정규화 설정 창을 열고 K 팩터를 하나로 설정합니다.IP 교정, 대상 압력, 온라인 평균 시간 및 지연 시간의 기본 값을 수락합니다. 설정을 저장하려면 확인을 클릭합니다. 관심 있는 채널을 선택하고 정규화 창에서 와이어 직경, 조직 끝점 및 초기 마이크로미터 판독을 입력합니다.정상화 절차를 시작하려면 마이크로미터 나사를 시계 반대 방향으로 돌려 혈관에 첫 번째 수동 스트레칭을 적용합니다. 선박이 안정화될 때까지 3분을 기다린 후, 정규화 창에 새 마이크로미터 판독값을 입력합니다. 벽 장력은 자동으로 계산되고 그래프의 점으로 표시됩니다.각 수동 스트레칭 후, 제어 크렙스 버퍼를 150 밀리알륨 염화칼륨을 함유한 이소 삼투압 높은 칼륨 크렙으로 대체하십시오. 수축이 약 3분 만에 고원에 도달하면, 칼륨 활성화 력으로부터 각 스트레치에서 패시브 포스를 빼서 활성력을 기록한다. 벽 장력과 내부 둘레 값을 계산합니다.높은 칼륨 버퍼를 신선한 크렙스 버퍼로 대체하여 높은 칼륨 상태를 제거하십시오. 5분 동안 세 번 세탁을 반복합니다. 수동 스트레칭을 유도하고 활성 장력이 감소하기 시작할 때까지 대체 회전에서 활성 수축을 유도하여 정규화 단계를 반복합니다.높은 칼륨 크렙스 버퍼를 철저히 씻어 내고 30~45분 동안 준비를 균형하게 준비합니다. 후속 실험 중에 활성 수축 응답만 기록되도록 기저 장력을 0으로 재설정합니다. 각 동맥의 인접한 섹션에서 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 페어링된 동맥 링을 준비하고 마운트합니다.PVAT가 그대로 있는 동맥 링 1개를 준비하고 다른 하나는 PVAT를 제거합니다. 정상화 후, 크렙스를 함유한 챔버에 115밀리알륨 염화칼륨 용액을 추가하여 높은 칼륨 크렙스 버퍼로 동맥 세그먼트를 사전 계약한다. 고원 기간에 수축 후, 높은 칼륨을 씻어 신선한 aerated 크렙스 버퍼로 버퍼를 교체.5분 동안 세 번 세탁을 반복합니다. 염화칼륨 자극을 반복하고 세 번 세척하고 염화칼륨 자극으로 인한 장력에서 기준장력을 빼서 염화칼륨에 대한 최대 수축 반응을 기록한다. 마지막 수축 및 세척 후, 따뜻하고, 분화 된 크렙스 버퍼로 챔버를 리필하고 다음 작업을 수행하기 전에 약 30 분 동안 동맥을 복구 할 수 있습니다.각 챔버에, 유족의 누적량을 추가하여 정지 제제의 농도 의존성 증가 및 등소장력을 유도한다. 고뇌의 마지막 복용량을 추가 한 후, 철저하게 약물을 씻어 신선한 크렙스 버퍼로 챔버를 다시 작성합니다. 염화칼륨의 백분율이 증가함에 따라 농도 의존성 반응을 플롯하여 최대 수축을 유도합니다.산화 질소의 기여를 평가하기 위해, phenylephrine의 첨가 전에 30 분 동안 산화 질소 신디마제 억제제 L-NAME로 제제를 배양. 제2 농도 응답 곡선을 순차적으로 수행하기 위해, 챔버를 완전히 반복적으로 세척하여 톤의 추가 변화가 관찰되지 때까지 이전의 모든 작용제를 제거하십시오. 길이 장력 관계의 정규화는 표준 차우 또는 고지방 식단으로 공급되는 마우스 모델으로부터 분리된 막질 동맥에 대해 수행되었다.수은 교원 압력 또는 IC100의 100밀리미터에 해당하는 내부 둘레가 얻을 때까지 동맥 세그먼트의 증분 스트레칭에 의해 수동 길이 장력 관계가 확립되었다. 각 스트레칭 후, 115 밀리머발륨 염화 칼륨수축을 자극하기 위해 적용되었다. 활성 길이 장력 곡선은 Y축의 활성 힘 데이터와 X축의 마이크로미터 데이터에서 계산된 IC 값에서 플롯되었습니다.피크 고원 내에 있는 IC 값은 IC1입니다. 정규화 계수인 K는 IC1 및 IC100의 비율로 계산되었으며, 이는 후속 실험에서 동일한 용기 유형의 샘플에 적용될 수 있었다. 여기에 는 주변 PVAT의 유무에 관계없이 막질 동맥에서 페닐레프린에 대한 혈관 수축 반응의 출력 기록이 표시됩니다.페닐레프린의 누적 농도는 16주 된 아디포셋 1마리마우스로부터 수집된 막질 동맥의 수축을 자극하기 위해 적용되었다. 수축 반응은 150 밀리알륨 염화칼륨의 백분율로 기록되고 최대 수축을 유도했다. 수축 곡선 아래 영역은 비교를 위해 플롯되었습니다.adiposet 1 마우스에서 PVAT페닐프린에 대한 반응에 대한 수축 방지 효과를 유도. KCL 유도 수축을 얻을 때, 응답은 안정적이고 안정적이어야 한다. KCL의 3가지 증분 투여 후에도 응답이 계속 증가하는 경우 KCL 자극이 필요할 수 있습니다.긴장의 최적 조건을 달성하기 위해, 정상화 단계는 매우 중요하다, 이 혈관을 열 수있는 힘을 결정으로. 제대로 수행되지 않으면 전체 실험에 영향을 미칩니다. 이 프로토콜은 페닐레프린 유도 수축 또는 이완 이외에 다른 설정에 적용될 수 있다.예를 들어, 심분 지방 조직의 존재 또는 부재에서, 자율 신경, 또는 내피. 이 프로토콜을 통해 연구자들은 비만, 당뇨병 및 심혈관 질환과 같은 다양한 병리학 적 조건하에서 병들게 된 동물 모델의 작은 혈관을 검사 할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Biology

Right Hemihepatectomy by Suprahilar Intrahepatic Transection of the Right Hemipedicle using a Vascular Stapler

혈관 스테플러를 사용하여 마우스 오른쪽 Hemipedicle의 Suprahilar Intrahepatic의 절개에 의해 오른쪽 Hemihepatectomy

Successful hepatic resection requires profound anatomical knowledge and delicate surgical technique. Hemihepatectomies are mostly performed after ...

연구

생물학

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

예 생체내</em혈관 반응성 조사를위한> 절연 골격 Microvessel 준비

The isolated  microvessel preparation is an ex vivo preparation that allows for examination of the different contributions of  factors that control vessel ...

Using Digital Image Correlation to Characterize Local Strains on Vascular Tissue Specimens

디지털 이미지의 상관 관계를 사용하면 혈관 조직 표본의 로컬 균주의 특성을

Characterization of the mechanical behavior of biological and engineered soft tissues is a central component of fundamental biomedical research and ...

Analysis of Cell Suspensions Isolated from Solid Tissues by Spectral Flow Cytometry

스펙트럼 유동 세포 계측법에 의해 고체 조직에서 분리 한 세포 현탁액의 분석

Flow cytometry has been used for the past 40 years to define and analyze the phenotype of lymphoid and other hematopoietic cells. Initially restricted to ...

Differentiation Capacity of Human Aortic Perivascular Adipose Progenitor Cells

인간의 대동맥 혈관 주위 지방 조상 세포의 분화 능력

Adipose tissue is a rich source of multi-potent mesenchymal stem cells (MSC) capable of differentiating into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic ...

Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

마우스 전형 지방 조직에서 지방 전구의 준비

Obesity and metabolic disorders such as diabetes, heart disease, and cancer, are all associated with dramatic adipose tissue remodeling. Tissue-resident ...

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

[18F]FDG 마이크로 PET/MR 이미징을 사용한 마우스의 갈색 및 베이지 지방 조직의 시각화 및 정량화

Brown and beige adipocytes are now recognized as potential therapeutic targets for obesity and metabolic syndromes. Non-invasive molecular imaging methods ...

Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase

엘라스타제의 혈관주위 적용에 의해 유도된 마우스 복부 대동맥류 모델

Abdominal aortic aneurysm (AAA), although primarily asymptomatic, is potentially life-threatening as the rupture of AAA usually has a devastating outcome. ...

Semi-Automated Isolation of Murine White Adipose Tissue

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator (Video) | JoVE 

조직 해리기를 사용하여 쥐 백색 지방 조직에서 기질 혈관 분획의 반자동 분리

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their ...

Culturing Preadipocytes Isolated from Murine Perivascular Adipose Tissue

Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of Stromal Vascular Fraction-derived Preadipocytes from Mouse Periaortic Adipose Tissue

The Significance of Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of SVF-Derived Preadipocytes from Mouse Perivascular Adipose Tissue (Video) | JoVE

Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of Stromal Vascular Fraction-derived Preadipocytes from Mouse Periaortic Adipose Tissue(마우스 대동맥 주위 지방 조직에서 기질 혈관 분획 유래 지방세포의 분리, 배양 및 지방 유도)