Name: assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues
Uploaded: 2019-06-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

Dette arbeidet ble økonomisk støtte av tilskudd fra Research Grant Council of Hong Kong [17124718 og 17121714], Hong Kong Health and Medical Research Fund [13142651 og 13142641], Collaborative Research Fund of Hong Kong [C7055-14G], og National Basic Forskningsprogrammet i Kina [973 program 2015CB553603].

Alle dyrene anvendt for det fulgte studere var forsynt av det laboratorium dyr enhet av det fakultet av medisin, det universitet av Hong Kong. Etisk godkjenning ble innhentet fra avdelings utvalget komité for bruk av Laboratoriedyr for undervisning og forskning (CULATR, nr.: 4085-16).
1. forberedelser
<ol><li>Utarbeidelse av narkotika
	<ol>
<li>Oppbevar legemidler på riktig måte som angitt i sikkerhets data bladet (HMS) umiddelbart etter å ha mottatt dem. Løs opp stoffe...

<ol>
	<li>Furchgott, R. F., Zawadzki, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+obligatory+role+of+endothelial+cells+in+the+relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+acetylcholine.">The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine.</a> Nature. 288 (5789), 373-376 (1980).</li><li>Furchgott, R. F., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+relaxing+and+contracting+factors.">Endothelium-derived relaxing and contracting factors.</a> The FASEB Journal. 3 (9), 2007-2018 (1989).</li><li>Feletou, M., Kohler, R., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+vasoactive+factors+and+hypertension:+possible+roles+in+pathogenesis+and+as+treatment+targets.">Endothelium-derived vasoactive factors and hypertension: possible roles in pathogenesis and as treatment targets.</a> Current Hypertension Reports. 12 (4), 267-275 (2010).</li><li>Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction:+the+first+step+toward+coronary+arteriosclerosis.">Endothelial dysfunction: the first step toward coronary arteriosclerosis.</a> Circulation Journal. 73 (4), 595-601 (2009).</li><li>Feletou, M., Huang, Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-mediated+control+of+vascular+tone:+COX-1+and+COX-2+products.">Endothelium-mediated control of vascular tone: COX-1 and COX-2 products.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (3), 894-912 (2011).</li><li>Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanisms+of+endothelial+cell+dysfunction.">Cellular and molecular mechanisms of endothelial cell dysfunction.</a> Journal of Clinical Investigation. 100 (9), 2153 (1997).</li><li>Vanhoutte, P. M., Shimokawa, H., Tang, E. H., Feletou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+vascular+disease.">Endothelial dysfunction and vascular disease.</a> Acta physiologica. 196 (2), 193-222 (2009).</li><li>Kl&#246;&#223;, S., Bouloumi&#233;, A., M&#252;lsch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+and+chronic+hypertension+decrease+expression+of+rat+aortic+soluble+guanylyl+cyclase.">Aging and chronic hypertension decrease expression of rat aortic soluble guanylyl cyclase.</a> Hypertension. 35 (1), 43-47 (2000).</li><li>Csiszar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging-induced+phenotypic+changes+and+oxidative+stress+impair+coronary+arteriolar+function.">Aging-induced phenotypic changes and oxidative stress impair coronary arteriolar function.</a> Circulation Research. 90 (11), 1159-1166 (2002).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+SIRT1+prevents+age-induced+impairment+of+vasodilator+responses+by+enhancing+the+expression+and+activity+of+soluble+guanylyl+cyclase+in+smooth+muscle+cells.">Endothelial SIRT1 prevents age-induced impairment of vasodilator responses by enhancing the expression and activity of soluble guanylyl cyclase in smooth muscle cells.</a> Cardiovascular Research. , (2018).</li><li>Auch-Schwelk, W., Katusic, Z. S., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+inactivates+endothelium-derived+contracting+factor+in+the+rat+aorta.">Nitric oxide inactivates endothelium-derived contracting factor in the rat aorta.</a> Hypertension. 19 (5), 442-445 (1992).</li><li>Tang, E. H., Feletou, M., Huang, Y., Man, R. Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholine+and+sodium+nitroprusside+cause+long-term+inhibition+of+EDCF-mediated+contractions.">Acetylcholine and sodium nitroprusside cause long-term inhibition of EDCF-mediated contractions.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulation Physiology. 289 (6), H2434-H2440 (2005).</li><li>Ghiadoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+function+and+common+carotid+artery+wall+thickening+in+patients+with+essential+hypertension.">Endothelial function and common carotid artery wall thickening in patients with essential hypertension.</a> Hypertension. 32 (1), 25-32 (1998).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+Impairment+of+Vascular+Structure+and+Functions.">Age-related Impairment of Vascular Structure and Functions.</a> Aging and Disease. 8 (5), 590-610 (2017).</li><li>Tabit, C. E., Chung, W. B., Hamburg, N. M., Vita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+diabetes+mellitus:+Molecular+mechanisms+and+clinical+implications.">Endothelial dysfunction in diabetes mellitus: Molecular mechanisms and clinical implications.</a> Reviews in Endocrine &amp; Metabolic Disorders. 11 (1), 61-74 (2010).</li><li>Tanaka, K., Sata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+perivascular+adipose+tissue+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">Roles of perivascular adipose tissue in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Frontiers in Physiology. 9, 3 (2018).</li><li>Brown, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+in+vascular+function+and+disease:+a+review+of+current+research+and+animal+models.">Perivascular adipose tissue in vascular function and disease: a review of current research and animal models.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 34 (8), 1621-1630 (2014).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> The FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>G&#225;lvez-Prieto, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reduction+in+the+amount+and+anti-contractile+effect+of+periadventitial+mesenteric+adipose+tissue+precedes+hypertension+development+in+spontaneously+hypertensive+rats.">A reduction in the amount and anti-contractile effect of periadventitial mesenteric adipose tissue precedes hypertension development in spontaneously hypertensive rats.</a> Hypertension research. 31 (7), 1415 (2008).</li><li>Gao, Y. J., Lu, C., Su, L. Y., Sharma, A., Lee, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+vascular+function+by+perivascular+adipose+tissue:+the+role+of+endothelium+and+hydrogen+peroxide.">Modulation of vascular function by perivascular adipose tissue: the role of endothelium and hydrogen peroxide.</a> British Journal of Pharmacology. 151 (3), 323-331 (2007).</li><li>Gao, Y. -. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+promotes+vasoconstriction:+the+role+of+superoxide+anion.">Perivascular adipose tissue promotes vasoconstriction: the role of superoxide anion.</a> Cardiovascular Research. 71 (2), 363-373 (2006).</li><li>Szasz, T., Webb, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue:+more+than+just+structural+support.">Perivascular adipose tissue: more than just structural support.</a> Clinical Science (London). 122 (1), 1-12 (2012).</li><li>Ramirez, J. G., O'Malley, E. J., Ho, W. S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pro-contractile+effects+of+perivascular+fat+in+health+and+disease.">Pro-contractile effects of perivascular fat in health and disease.</a> Brish Journal of Pharmacology. 174 (20), 3482-3495 (2017).</li><li>Hajer, G. R., van Haeften, T. W., Visseren, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+dysfunction+in+obesity,+diabetes,+and+vascular+diseases.">Adipose tissue dysfunction in obesity, diabetes, and vascular diseases.</a> European Heart Journal. 29 (24), 2959-2971 (2008).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+properties+of+small+arterial+resistance+vessels+in+spontaneously+hypertensive+and+normotensive+rats.">Contractile properties of small arterial resistance vessels in spontaneously hypertensive and normotensive rats.</a> Circulation Research. 41 (1), 19-26 (1977).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ.">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260 (5552), 617-619 (1976).</li><li>del Campo, L., Ferrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wire+myography+to+study+vascular+tone+and+vascular+structure+of+isolated+mouse+arteries.">Wire myography to study vascular tone and vascular structure of isolated mouse arteries.</a> Methods in Molecular Biology. 1339, 255-276 (2015).</li><li>Dobrin, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+initial+length+on+length-tension+relationship+of+vascular+smooth+muscle.">Influence of initial length on length-tension relationship of vascular smooth muscle.</a> American Journal of Physiology. 225 (3), 664-670 (1973).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+prevents+metabolic+aging+caused+by+abnormal+SIRT1+function+in+adipose+tissues.">Calorie restriction prevents metabolic aging caused by abnormal SIRT1 function in adipose tissues.</a> Diabetes. 64 (5), 1576-1590 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caliber+dependent+calcitonin+gene-related+peptide-induced+relaxation+in+rat+coronary+arteries:+effect+of+K++on+the+tachyphylaxis.">Caliber dependent calcitonin gene-related peptide-induced relaxation in rat coronary arteries: effect of K+ on the tachyphylaxis.</a> European Journal of Pharmacology. 351 (1), 53-59 (1998).</li><li>Soltis, E. E., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perivascular+adipose+tissue+on+rat+aortic+smooth+muscle+responsiveness.">Influence of perivascular adipose tissue on rat aortic smooth muscle responsiveness.</a> Clinical and Experimental Hypertension A. 13 (2), 277-296 (1991).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>Fesus, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+is+a+novel+humoral+vasodilator.">Adiponectin is a novel humoral vasodilator.</a> Cardiovascular Research. 75 (4), 719-727 (2007).</li><li>Greenstein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+inflammation+and+hypoxia+abolish+the+protective+anticontractile+properties+of+perivascular+fat+in+obese+patients.">Local inflammation and hypoxia abolish the protective anticontractile properties of perivascular fat in obese patients.</a> Circulation. 119 (12), 1661-1670 (2009).</li><li>Yudkin, J. S., Eringa, E., Stehouwer, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Vasocrine"+signalling+from+perivascular+fat:+a+mechanism+linking+insulin+resistance+to+vascular+disease.">"Vasocrine" signalling from perivascular fat: a mechanism linking insulin resistance to vascular disease.</a> Lancet. 365 (9473), 1817-1820 (2005).</li><li>Xia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncoupling+of+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+perivascular+adipose+tissue+of+diet-induced+obese+mice.">Uncoupling of endothelial nitric oxide synthase in perivascular adipose tissue of diet-induced obese mice.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 36 (1), 78-85 (2016).</li><li>Xia, N., Forstermann, U., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+resveratrol+on+eNOS+in+the+endothelium+and+the+perivascular+adipose+tissue.">Effects of resveratrol on eNOS in the endothelium and the perivascular adipose tissue.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1403 (1), 132-141 (2017).</li><li>Schinzari, F., Tesauro, M., Cardillo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+and+perivascular+adipose+tissue+abnormalities+in+obesity-related+vascular+dysfunction:+novel+targets+for+treatment.">Endothelial and perivascular adipose tissue abnormalities in obesity-related vascular dysfunction: novel targets for treatment.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69 (6), 360-368 (2017).</li><li>Liu, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipocalin-2+deficiency+prevents+endothelial+dysfunction+associated+with+dietary+obesity:+role+of+cytochrome+P450+2C+inhibition.">Lipocalin-2 deficiency prevents endothelial dysfunction associated with dietary obesity: role of cytochrome P450 2C inhibition.</a> British Journal of Pharmacology. 165 (2), 520-531 (2012).</li><li>Martinez-Quinones, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+induced+morphological+and+physiological+changes+in+cells+of+the+arterial+wall.">Hypertension induced morphological and physiological changes in cells of the arterial wall.</a> American Journal of Hypertension. 31 (10), 1067-1078 (2018).</li><li>Outzen, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+value+of+mechanical+and+vasomotor+properties+of+mouse+isolated+mesenteric+resistance-sized+arteries.">Translational value of mechanical and vasomotor properties of mouse isolated mesenteric resistance-sized arteries.</a> Pharmacology Research and Perspectives. 3 (6), e00200 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Simonsen, A. H., Boonen, H. C., Outzen, E. M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ageing+on+the+passive+and+active+tension+and+pharmacodynamic+characteristics+of+rat+coronary+arteries:+age-dependent+increase+in+sensitivity+to+5-HT+and+K+.">Effect of ageing on the passive and active tension and pharmacodynamic characteristics of rat coronary arteries: age-dependent increase in sensitivity to 5-HT and K+.</a> Pharmacology. 90 (3-4), 160-168 (2012).</li></ol>

Bortsett fra de endothelial cellene, signaler avledet fra PVAT spille en viktig rolle i regulering av glatt muskeltonus reaktivitet30. Sunn PVAT utgivelser nei og anti-inflammatorisk adiponectin å utøve en anti-kontraktile effekt på arterier, som er tapt under patologiske tilstander som fedme og Metabolsk syndrom31,32. I sykdomstilstander, PVAT bidrar til utvikling av endothelial dysfunksjon og andre kardiovaskulære unormalt<sup class=...

Dilatations og constrictions av arterier oppnås ved relaxations og sammentrekninger, henholdsvis av deres vaskulære glatte muskelceller. Endringer i vaskulær respons av små arterier bidra til homøostatisk regulering av arteriell blodtrykk av autonome nerver og hormoner som finnes i blodet (f. eks, katekolaminer, angiotensin II, serotonin, vasopressin). På lokalt nivå, den vaskulære reaksjoner av glatte muskelceller er modulert av signaler fra både endothelial cellene i intima og fettvev rundt arteriene (figur 1).
Endotelet er ikke bare en passiv barriere, men fungerer også som en overflate for å utveksle signaler mellom blodet og de underliggende vaskulære glatte muskel cellene. Ved å slippe ulike vasoactive stoffer, spiller endotelet en avgjørende rolle i den lokale kontrollen av vaskulær tone svar1. For eksempel, som følge av acetylkolin, aktiveres endothelial nitrogenoksid syntase (eNOS) i endotelet for å produsere nitrogenoksid (NO), som induserer avslapping av underliggende vaskulær glatt muskel ved å aktivere løselig guanylyl cyclase (sGC) 2. andre vasoactive stoffer inkluderer produkter av cyclooxygenases (f. eks, prostasyklin og Thromboxane A2), lipoksygenase (f. eks, 12-hydroxyeicosatetraenoic syrer, 12-hete), og cytokrom P450 monooxygenases (HETEs og epoxyeicosatrienoic syrer, EETs), reaktive oksygen arter (ROS) og vasoactive peptider (f. eks endothelin-1 og angiotensin II), og endotelet-avledede hyperpolarizing faktorer (EDHF)3. En delikat balanse mellom endotelet-avledet vasodilatorer og vasoconstrictors opprettholde den lokale vasomotorisk tone4,5.
Endothelial dysfunksjon er karakterisert ved svekkelse i endotelet-avhengige vasodilatasjon6, et kjennetegn på vaskulær aldring7. Med alderen reduseres endotelet evne til å fremme vasodilatasjon gradvis, skyldes i stor grad en redusert NO biotilgjengelighet, samt unormal uttrykk og funksjon av eNOS i endotelet og sGC i vaskulære glatte muskelceller8 , 9 andre priser , 10. redusert ingen biotilgjengelighet potenserer produksjonen av endotelet-avhengige vasoconstrictors11,12. I alderen arterier, endothelial dysfunksjon forårsaker trykk i Media, som gjenspeiles av den markerte økningen i veggtykkelse, antall mellomliggende kjerner, som minner om arteriell tykkelse i hypertensjon og aterosklerose observert i humant pasienter13,14. I tillegg patofysiologiske forhold som fedme, diabetes eller hypertensjon akselerere utviklingen av endothelial dysfunksjon15,16.
Inflammasjon fettvev (PVAT) utgivelser mange adipokines å regulere Vaskulær struktur og funksjon17. Den anti-kontraktile effekten av PVAT er mediert av avslappende faktorer, slik som adiponectin, nei, hydrogenperoksid og hydrogensulfid18,19,20. Imidlertid, avhenger på plasseringen og patofysiologiske forfatning, PVAT likeledes kanne forsterke kontraktile svar inne forskjellige arterier21. De Pro-kontraktile stoffene som produseres av PVAT inkluderer angiotensin-II, leptin, resistin, og ros22,23.  I de fleste studier på isolerte blodårer har PVAT blitt betraktet som en enkel strukturell støtte for blodkar og dermed fjernet under utarbeidelse av blod fartøy ring segmenter. Siden fett dysfunksjon representerer en uavhengig risikofaktor for hypertensjon og tilhørende kardiovaskulære komplikasjoner24, den PVAT rundt blodkarene bør vurderes ved undersøkelse av vaskulær respons på forskjellige arterier.
Multi wire myograph systemer har blitt mye brukt til å undersøke vasomotorisk funksjoner av en rekke blodkar, inkludert aorta, chrezbryzheechno, nyre, lår, cerebral og koronar arterier25,26. Protokollene beskrevet her vil bruke wire myography å evaluere vaskulær respons i chrezbryzheechno arterier isolert fra genmodifiserte mus modeller, med et spesielt fokus på modulering av PVAT.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6625</td>
			<td>Stock concentration: 10-1 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-NAME (N&#969;-nitro-L-arginine methyl ester)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N5751</td>
			<td>Stock concentration: 3 x 10-2 M 
			Working concentration: 10-4 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6126</td>
			<td>Stock concentration: 10-2 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619 (9,11-dideoxy-9&#945;,11&#945;methanoepoxy prostaglandin F2&#945;)</td>
			<td>Enzo</td>
			<td>BML-PG023-0001</td>
			<td>Stock concentration: 10-5 M 
			Working concentration: 1-3 x 10-8 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwire myograph</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/26</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML848</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labchart7</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adipo-SIRT1 wild type mice</td>
			<td>Laboratory Animal Unit, The University of Hong Kong</td>
			<td>CULATR NO.: 4085-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated Petri dishes</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten wires</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>300331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tools</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues

Endret vaskulær tone respons til patofysiologiske stimuli bidrar til utvikling av et bredt spekter av hjerte-og metabolske sykdommer. Endothelial dysfunksjon representerer en stor gjerningsmann for den reduserte vasodilatasjon og forbedret vasokonstriksjon av arterier. Fett (fett) vev rundt arteriene spille viktige roller i regulering av endotelet-avhengige avslapping og/eller sammentrekning av vaskulære glatte muskelceller. Korset-forhandlingene mellom endotelet og inflammasjon fettvev kan vurderes ex vivo bruke montert blodkar av en wire myography system. Imidlertid bør optimale innstillinger etableres for arterier avledet fra dyr av forskjellige arter, aldre, genetisk bakgrunn og/eller patofysiologiske forhold.

Undersøkelse av lengde/spenning relasjoner for å oppnå normalisering faktor k
Mengden strekk som påføres et fartøy segment påvirker omfanget av utgangen-myosin interaksjon og dermed maksimal aktiv kraft utviklet. Således, for enhver type av blod fartøy, avgjør beløpet av strekke behøvde for maksimal aktiv Force er krevde for lated myography studier. Her er normalisering av lengde/spenning fo...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

Vurdering av vaskulær tone respons ved hjelp av isolerte Chrezbryzheechno arterier med fokus på modulering av inflammasjon fettvev

Protokollen beskriver bruk av wire myography å evaluere transmuralt isometrisk spenning av chrezbryzheechno arterier isolert fra mus, med spesiell vurdering av modulering av faktorer løslatt fra endothelial celler og inflammasjon fettvev.

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

Svært streng protokoll er nødvendig slik at vi kan gyldig sammenligne preparater fra de samme dyrene eller fra forskjellige dyr eller arterier i nærvær eller fravær av fettet som omgir dem eller i nærvær eller fravær av endotelet. Den største fordelen med denne eksperimentelle teknikken er at vi kan sammenligne ringer av samme arterie under isometrisk tilstand og dermed gyldig gjøre konklusjoner om virkningen av de eksperimentelle faktorene vi undersøker. Denne protokollen gir innsikt i modulering av vaskulær respons av perivascular fettvev av forskjellige genmodifiserte dyr.Fettvev dysfunksjoner representerer en uavhengig risikofaktor for hypertensjon og tilhørende kardiovaskulære komplikasjoner. Vår myograf innebærer flere kompliserte trinn som krever ekstrem forsiktighet på hvert punkt for å unngå å skade fartøyet, spesielt under montering, og for å sikre at fartøyet reagerer riktig på ulike stimuli. Begynn denne prosedyren med preparater og disseksjon av de mesenteriske arterielle ringene som beskrevet i tekstprotokollen.Slå på datamaskinen og åpne dataregistreringsprogramvaren. Lagre eksperimentet som en datafil for laboratoriediagram med et nytt navn for å unngå å overskrive den opprinnelige innstillingsfilen. Åpne vinduet for normaliseringsinnstillinger, og sett K-faktoren til én.Godta standardverdiene for IPer-kalibrering, måltrykk, nettsnitttid og forsinkelsestid. Klikk ok for å lagre innstillingene. Velg interessekanaler og skriv inn tråddiameteren, vevsendepunkter og innledende mikrometeravlesning i normaliseringsvinduet.For å starte normaliseringsprosedyren, bruk den første passive strekningen til blodkaret ved å dreie mikrometerskruen mot klokken. Etter å ha ventet tre minutter på at fartøyet skal stabilisere seg, legger du inn den nye mikrometeravlesningen i normaliseringsvinduet. Veggspenningen beregnes automatisk og vises som et punkt på grafen.Etter hver passive strekning, erstatt kontroll krebs buffer med en iso-osmotisk høy kalium krebs som inneholder 150 millimolar kaliumklorid. Når sammentrekningen når et platå på omtrent tre minutter, registrerer du den aktive kraften ved å trekke den passive kraften på hver strekning fra kaliumaktivert kraft. Beregn veggspenningen, samt de interne omkretsverdiene.Fjern den høye kaliumtilstanden ved å erstatte den høye kaliumbufferen med fersk krebsbuffer. Gjenta vasken i tre ganger over fem minutter. Gjenta normaliseringstrinnene ved å indusere passive strekninger etterfulgt av aktiv sammentrekning i alternative svinger til den aktive spenningen begynner å avta.Vask ut den høye kaliumrbsbufferen grundig og likevekt preparatene i ytterligere 30 til 45 minutter. Tilbakestill basalspenningene til null slik at bare aktive kontraktile svar registreres under det påfølgende eksperimentet. Forbered og monter parparerte arterielle ringer som beskrevet i tekstprotokollen fra de tilstøtende delene av hver arterie.Forbered den ene arterielle ringen med PVAT intakt og den andre med PVAT fjernet. Etter normalisering, precontract arterielle segmenter med høy kalium krebs buffer ved å legge 115 millimolar kaliumklorid løsning til kammeret som inneholder krebs. Etter sammentrekning til platåperioden, vask ut det høye kaliumet og erstatt bufferen med fersk luftet krebs buffer.Gjenta vask tre ganger over fem minutter. Gjenta kaliumkloridstimuleringen og vask tre ganger og registrer maksimal kontraktil respons på kaliumklorid ved å trekke grunnlinjespenningen fra spenningen på grunn av kaliumkloridstimulering. Etter den siste sammentrekningen og vaskingen, fyll kammeret med varm, luftet krebs buffer og la arterien gjenopprette i ca 30 minutter før du utfører neste oppgave.Til hvert kammer, legg til kumulative mengder fenylefrin for å indusere de konsentrasjonsavhengige økningene og isometrisk spenning av quiescent preparatene. Etter å ha lagt til den siste dosen av agonist, vask ut stoffet grundig og fyll kammeret med fersk krebs buffer. Plott konsentrasjonsavhengige responser som økende prosentandeler av kaliumkloridindusert maksimale sammentrekninger.For å vurdere bidraget fra nitrogenoksid, inkuber preparatene med nitrogenoksidsyntasehemmeren L-NAME i 30 minutter før tilsetning av fenylefrin. For å utføre en annen konsentrasjonsresponskurve sekvensielt, vask kammeret helt og gjentatte ganger for å fjerne alle de tidligere agonistene til ingen ytterligere endringer i tone observeres. Normalisering av lengde-spenning forholdet ble utført for mesenteriske arterier isolert fra musemodeller matet med standard chow eller en høy-fett diett.En passiv lengde-spenning forholdet ble etablert ved inkrementell strekking av arteriesegmentene til en intern omkrets tilsvarende 100 millimeter kvikksølv transmural trykk, eller IC100, ble oppnådd. Etter hver strekning ble 115 millimolarkaliumklorid påført for å stimulere sammentrekninger. De aktive lengdespenningskurvene ble plottet fra de aktive kraftdataene på Y-aksen og de beregnede IC-verdiene fra mikrometerdataene på X-aksen.En IC-verdi som ligger innenfor toppplatået er IC1. Normaliseringsfaktoren, K, ble beregnet som forholdet mellom IC1 og IC100, som deretter kunne brukes på prøver av samme fartøytype i det påfølgende eksperimentet. Vist her er utgangsopptak av vasokonstriktorresponser på fenylefrin i mesenteriske arterier med eller uten omkringliggende PVAT.Kumulative konsentrasjoner av fenylefrin ble brukt for å stimulere sammentrekningene av mesenteriske arterier samlet inn fra 16 uker gamle fettet ett mus. De kontraktile svarene ble registrert og beregnet som en prosentandel av 150 millimolar kaliumklorid indusert maksimal sammentrekning. Området under sammentrekningskurvene ble plottet for sammenligning.Legg merke til at PVAT fra fettete en mus fremkalte en anti-kontraktil effekt på responsen på fenylefrin. Ved oppnåelse av KCL-induserte sammentrekninger må svarene være stabile og stabile. Hvis responsen fortsatt øker etter tre inkrementelle administrasjoner av KCL, kan KCL-stimulering være nødvendig.For å oppnå optimale forhold i spenningene er normaliseringstrinnet svært viktig, da dette bestemmer kraften for å åpne blodkarene. Hvis det ikke gjøres riktig, vil det påvirke hele eksperimentet. Denne protokollen kan brukes på andre innstillinger i tillegg til fenylefrin-indusert sammentrekning eller avslapning.For eksempel, i nærvær eller fravær av perivascular fettvev, autonome nerver, eller endotel. Med denne protokollen kan forskere undersøke små blodkar fra syke dyremodeller under forskjellige patofysiologiske forhold, som fedme, diabetes og kardiovaskulære sykdommer.

Research

JoVE Journal

Biology

Right Hemihepatectomy by Suprahilar Intrahepatic Transection of the Right Hemipedicle using a Vascular Stapler

Successful hepatic resection requires profound anatomical knowledge and delicate surgical technique. Hemihepatectomies are mostly performed after ...

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

Det Ex vivo Isolert Skeletal Microvessel Forberedelse for etterforskning av vaskulær reaktivitet

The isolated  microvessel preparation is an ex vivo preparation that allows for examination of the different contributions of  factors that control vessel ...

Using Digital Image Correlation to Characterize Local Strains on Vascular Tissue Specimens

Ved hjelp av Digital Image Correlation å karakter Lokale Stammer på vaskulær vevsprøver

Characterization of the mechanical behavior of biological and engineered soft tissues is a central component of fundamental biomedical research and ...

Analysis of Cell Suspensions Isolated from Solid Tissues by Spectral Flow Cytometry

Analyse av cellesuspensjoner Isolert fra solid vev ved Spectral Flow Cytometry

Flow cytometry has been used for the past 40 years to define and analyze the phenotype of lymphoid and other hematopoietic cells. Initially restricted to ...

Differentiation Capacity of Human Aortic Perivascular Adipose Progenitor Cells

Differensiering kapasitet på menneskelig aorta Perivascular liggende under Adipose Progenitor celler

Adipose tissue is a rich source of multi-potent mesenchymal stem cells (MSC) capable of differentiating into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic ...

Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

Fremstilling av fett stamceller fra mus epididymal fettvev

Obesity and metabolic disorders such as diabetes, heart disease, and cancer, are all associated with dramatic adipose tissue remodeling. Tissue-resident ...

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualisering og kvantifisering av brunt og beige fettvev hos mus ved bruk av [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Brown and beige adipocytes are now recognized as potential therapeutic targets for obesity and metabolic syndromes. Non-invasive molecular imaging methods ...

Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase

Mus Abdominal Aortic Aneurysm Modell Indusert av Perivascular Anvendelse av Elastase

Abdominal aortic aneurysm (AAA), although primarily asymptomatic, is potentially life-threatening as the rupture of AAA usually has a devastating outcome. ...

Semi-Automated Isolation of Murine White Adipose Tissue

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator (Video) | JoVE 

Semi-automatisert isolering av den stromale vaskulære fraksjonen fra murine hvitt fettvev ved bruk av en vevsdissosiator

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their ...