Name: assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues
Uploaded: 2019-06-03T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

Bu çalışma finans araştırma Grant Konseyi Hong Kong [17124718 ve 17121714], Hong Kong sağlık ve Tıp Araştırma Fonu [13142651 ve 13142641], Işbirliği araştırma fonu Hong Kong [C7055-14G] ve ulusal temel tarafından hibe tarafından mali destek oldu Çin araştırma programı [973 programı 2015CB553603].

Aşağıdaki çalışmada kullanılan tüm hayvanlar, Hong Kong Üniversitesi Tıp Fakültesi laboratuar hayvan ünitesi tarafından sağlandı. Öğretim ve araştırma için Laboratuvar hayvanlarının kullanımı bölümlendirme Komitesi 'nden etik onay alındı (CULATR, No.: 4085-16).
1. preparatlar
<ol><li>İlaçların hazırlanması
	<ol>
<li>İlaçları aldıktan hemen sonra malzeme güvenliği veri sayfası 'nda (MSDS) belirtildiği gibi uygun şekilde saklayın. İl...

<ol>
	<li>Furchgott, R. F., Zawadzki, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+obligatory+role+of+endothelial+cells+in+the+relaxation+of+arterial+smooth+muscle+by+acetylcholine.">The obligatory role of endothelial cells in the relaxation of arterial smooth muscle by acetylcholine.</a> Nature. 288 (5789), 373-376 (1980).</li><li>Furchgott, R. F., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+relaxing+and+contracting+factors.">Endothelium-derived relaxing and contracting factors.</a> The FASEB Journal. 3 (9), 2007-2018 (1989).</li><li>Feletou, M., Kohler, R., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-derived+vasoactive+factors+and+hypertension:+possible+roles+in+pathogenesis+and+as+treatment+targets.">Endothelium-derived vasoactive factors and hypertension: possible roles in pathogenesis and as treatment targets.</a> Current Hypertension Reports. 12 (4), 267-275 (2010).</li><li>Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction:+the+first+step+toward+coronary+arteriosclerosis.">Endothelial dysfunction: the first step toward coronary arteriosclerosis.</a> Circulation Journal. 73 (4), 595-601 (2009).</li><li>Feletou, M., Huang, Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelium-mediated+control+of+vascular+tone:+COX-1+and+COX-2+products.">Endothelium-mediated control of vascular tone: COX-1 and COX-2 products.</a> British Journal of Pharmacology. 164 (3), 894-912 (2011).</li><li>Harrison, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanisms+of+endothelial+cell+dysfunction.">Cellular and molecular mechanisms of endothelial cell dysfunction.</a> Journal of Clinical Investigation. 100 (9), 2153 (1997).</li><li>Vanhoutte, P. M., Shimokawa, H., Tang, E. H., Feletou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+vascular+disease.">Endothelial dysfunction and vascular disease.</a> Acta physiologica. 196 (2), 193-222 (2009).</li><li>Kl&#246;&#223;, S., Bouloumi&#233;, A., M&#252;lsch, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+and+chronic+hypertension+decrease+expression+of+rat+aortic+soluble+guanylyl+cyclase.">Aging and chronic hypertension decrease expression of rat aortic soluble guanylyl cyclase.</a> Hypertension. 35 (1), 43-47 (2000).</li><li>Csiszar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging-induced+phenotypic+changes+and+oxidative+stress+impair+coronary+arteriolar+function.">Aging-induced phenotypic changes and oxidative stress impair coronary arteriolar function.</a> Circulation Research. 90 (11), 1159-1166 (2002).</li><li>Guo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+SIRT1+prevents+age-induced+impairment+of+vasodilator+responses+by+enhancing+the+expression+and+activity+of+soluble+guanylyl+cyclase+in+smooth+muscle+cells.">Endothelial SIRT1 prevents age-induced impairment of vasodilator responses by enhancing the expression and activity of soluble guanylyl cyclase in smooth muscle cells.</a> Cardiovascular Research. , (2018).</li><li>Auch-Schwelk, W., Katusic, Z. S., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+inactivates+endothelium-derived+contracting+factor+in+the+rat+aorta.">Nitric oxide inactivates endothelium-derived contracting factor in the rat aorta.</a> Hypertension. 19 (5), 442-445 (1992).</li><li>Tang, E. H., Feletou, M., Huang, Y., Man, R. Y., Vanhoutte, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acetylcholine+and+sodium+nitroprusside+cause+long-term+inhibition+of+EDCF-mediated+contractions.">Acetylcholine and sodium nitroprusside cause long-term inhibition of EDCF-mediated contractions.</a> American Journal of Physiology - Heart and Circulation Physiology. 289 (6), H2434-H2440 (2005).</li><li>Ghiadoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+function+and+common+carotid+artery+wall+thickening+in+patients+with+essential+hypertension.">Endothelial function and common carotid artery wall thickening in patients with essential hypertension.</a> Hypertension. 32 (1), 25-32 (1998).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+Impairment+of+Vascular+Structure+and+Functions.">Age-related Impairment of Vascular Structure and Functions.</a> Aging and Disease. 8 (5), 590-610 (2017).</li><li>Tabit, C. E., Chung, W. B., Hamburg, N. M., Vita, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+diabetes+mellitus:+Molecular+mechanisms+and+clinical+implications.">Endothelial dysfunction in diabetes mellitus: Molecular mechanisms and clinical implications.</a> Reviews in Endocrine &amp; Metabolic Disorders. 11 (1), 61-74 (2010).</li><li>Tanaka, K., Sata, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Roles+of+perivascular+adipose+tissue+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">Roles of perivascular adipose tissue in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Frontiers in Physiology. 9, 3 (2018).</li><li>Brown, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+in+vascular+function+and+disease:+a+review+of+current+research+and+animal+models.">Perivascular adipose tissue in vascular function and disease: a review of current research and animal models.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 34 (8), 1621-1630 (2014).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> The FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>G&#225;lvez-Prieto, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reduction+in+the+amount+and+anti-contractile+effect+of+periadventitial+mesenteric+adipose+tissue+precedes+hypertension+development+in+spontaneously+hypertensive+rats.">A reduction in the amount and anti-contractile effect of periadventitial mesenteric adipose tissue precedes hypertension development in spontaneously hypertensive rats.</a> Hypertension research. 31 (7), 1415 (2008).</li><li>Gao, Y. J., Lu, C., Su, L. Y., Sharma, A., Lee, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+vascular+function+by+perivascular+adipose+tissue:+the+role+of+endothelium+and+hydrogen+peroxide.">Modulation of vascular function by perivascular adipose tissue: the role of endothelium and hydrogen peroxide.</a> British Journal of Pharmacology. 151 (3), 323-331 (2007).</li><li>Gao, Y. -. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue+promotes+vasoconstriction:+the+role+of+superoxide+anion.">Perivascular adipose tissue promotes vasoconstriction: the role of superoxide anion.</a> Cardiovascular Research. 71 (2), 363-373 (2006).</li><li>Szasz, T., Webb, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+adipose+tissue:+more+than+just+structural+support.">Perivascular adipose tissue: more than just structural support.</a> Clinical Science (London). 122 (1), 1-12 (2012).</li><li>Ramirez, J. G., O'Malley, E. J., Ho, W. S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pro-contractile+effects+of+perivascular+fat+in+health+and+disease.">Pro-contractile effects of perivascular fat in health and disease.</a> Brish Journal of Pharmacology. 174 (20), 3482-3495 (2017).</li><li>Hajer, G. R., van Haeften, T. W., Visseren, F. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+dysfunction+in+obesity,+diabetes,+and+vascular+diseases.">Adipose tissue dysfunction in obesity, diabetes, and vascular diseases.</a> European Heart Journal. 29 (24), 2959-2971 (2008).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contractile+properties+of+small+arterial+resistance+vessels+in+spontaneously+hypertensive+and+normotensive+rats.">Contractile properties of small arterial resistance vessels in spontaneously hypertensive and normotensive rats.</a> Circulation Research. 41 (1), 19-26 (1977).</li><li>Mulvany, M. J., Halpern, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+properties+of+vascular+smooth+muscle+cells+in+situ.">Mechanical properties of vascular smooth muscle cells in situ.</a> Nature. 260 (5552), 617-619 (1976).</li><li>del Campo, L., Ferrer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wire+myography+to+study+vascular+tone+and+vascular+structure+of+isolated+mouse+arteries.">Wire myography to study vascular tone and vascular structure of isolated mouse arteries.</a> Methods in Molecular Biology. 1339, 255-276 (2015).</li><li>Dobrin, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+initial+length+on+length-tension+relationship+of+vascular+smooth+muscle.">Influence of initial length on length-tension relationship of vascular smooth muscle.</a> American Journal of Physiology. 225 (3), 664-670 (1973).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+prevents+metabolic+aging+caused+by+abnormal+SIRT1+function+in+adipose+tissues.">Calorie restriction prevents metabolic aging caused by abnormal SIRT1 function in adipose tissues.</a> Diabetes. 64 (5), 1576-1590 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caliber+dependent+calcitonin+gene-related+peptide-induced+relaxation+in+rat+coronary+arteries:+effect+of+K++on+the+tachyphylaxis.">Caliber dependent calcitonin gene-related peptide-induced relaxation in rat coronary arteries: effect of K+ on the tachyphylaxis.</a> European Journal of Pharmacology. 351 (1), 53-59 (1998).</li><li>Soltis, E. E., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+perivascular+adipose+tissue+on+rat+aortic+smooth+muscle+responsiveness.">Influence of perivascular adipose tissue on rat aortic smooth muscle responsiveness.</a> Clinical and Experimental Hypertension A. 13 (2), 277-296 (1991).</li><li>Lohn, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periadventitial+fat+releases+a+vascular+relaxing+factor.">Periadventitial fat releases a vascular relaxing factor.</a> FASEB Journal. 16 (9), 1057-1063 (2002).</li><li>Fesus, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+is+a+novel+humoral+vasodilator.">Adiponectin is a novel humoral vasodilator.</a> Cardiovascular Research. 75 (4), 719-727 (2007).</li><li>Greenstein, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+inflammation+and+hypoxia+abolish+the+protective+anticontractile+properties+of+perivascular+fat+in+obese+patients.">Local inflammation and hypoxia abolish the protective anticontractile properties of perivascular fat in obese patients.</a> Circulation. 119 (12), 1661-1670 (2009).</li><li>Yudkin, J. S., Eringa, E., Stehouwer, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Vasocrine"+signalling+from+perivascular+fat:+a+mechanism+linking+insulin+resistance+to+vascular+disease.">"Vasocrine" signalling from perivascular fat: a mechanism linking insulin resistance to vascular disease.</a> Lancet. 365 (9473), 1817-1820 (2005).</li><li>Xia, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncoupling+of+endothelial+nitric+oxide+synthase+in+perivascular+adipose+tissue+of+diet-induced+obese+mice.">Uncoupling of endothelial nitric oxide synthase in perivascular adipose tissue of diet-induced obese mice.</a> Arteriosclerosis Thrombosis and Vascular Biology. 36 (1), 78-85 (2016).</li><li>Xia, N., Forstermann, U., Li, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+resveratrol+on+eNOS+in+the+endothelium+and+the+perivascular+adipose+tissue.">Effects of resveratrol on eNOS in the endothelium and the perivascular adipose tissue.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1403 (1), 132-141 (2017).</li><li>Schinzari, F., Tesauro, M., Cardillo, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+and+perivascular+adipose+tissue+abnormalities+in+obesity-related+vascular+dysfunction:+novel+targets+for+treatment.">Endothelial and perivascular adipose tissue abnormalities in obesity-related vascular dysfunction: novel targets for treatment.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology. 69 (6), 360-368 (2017).</li><li>Liu, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipocalin-2+deficiency+prevents+endothelial+dysfunction+associated+with+dietary+obesity:+role+of+cytochrome+P450+2C+inhibition.">Lipocalin-2 deficiency prevents endothelial dysfunction associated with dietary obesity: role of cytochrome P450 2C inhibition.</a> British Journal of Pharmacology. 165 (2), 520-531 (2012).</li><li>Martinez-Quinones, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+induced+morphological+and+physiological+changes+in+cells+of+the+arterial+wall.">Hypertension induced morphological and physiological changes in cells of the arterial wall.</a> American Journal of Hypertension. 31 (10), 1067-1078 (2018).</li><li>Outzen, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+value+of+mechanical+and+vasomotor+properties+of+mouse+isolated+mesenteric+resistance-sized+arteries.">Translational value of mechanical and vasomotor properties of mouse isolated mesenteric resistance-sized arteries.</a> Pharmacology Research and Perspectives. 3 (6), e00200 (2015).</li><li>Sheykhzade, M., Simonsen, A. H., Boonen, H. C., Outzen, E. M., Nyborg, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ageing+on+the+passive+and+active+tension+and+pharmacodynamic+characteristics+of+rat+coronary+arteries:+age-dependent+increase+in+sensitivity+to+5-HT+and+K+.">Effect of ageing on the passive and active tension and pharmacodynamic characteristics of rat coronary arteries: age-dependent increase in sensitivity to 5-HT and K+.</a> Pharmacology. 90 (3-4), 160-168 (2012).</li></ol>

Endotel hücrelerinden ayrı olarak, PVAT 'dan elde edilen sinyaller, pürüzsüz kas tonu reaktivite30' unun düzenlenmesi konusunda önemli bir rol oynamaktadır. Sağlıklı pvat, obezite ve metabolik sendrom31,32gibi patolojik koşullarda kaybedilen arterlerde Anti-kontrifli bir etkiye sahip olmayan ve anti-inflamatuar adiponektin bültenleri. Hastalık durumları, pvat endotel disfonksiyon ve diğer kardiyovasküler anomalilerin geli?...

Arterlerin DİLATASYONLARI ve daralması, sırasıyla, vasküler pürüzsüz kas hücrelerinin gevşemeleri ve kasılmaları ile elde edilir. Küçük arterlerin vasküler yanıt değişiklikleri otonjik sinirler ve hormonlar kanda mevcut (örneğin, katekolaminler, Anjiyotensin II, serotonin, vasopressin) arteriyel kan basıncı homeostatik düzenleme katkıda bulunur. Yerel düzeyde, pürüzsüz kas hücrelerinin vasküler tepkiler intima ve arterlerin çevreleyen adipoz dokusu hem endotel hücrelerinden sinyalleri ile modüler (Şekil 1).
Endotelyum sadece pasif bir bariyer değil, aynı zamanda kan ve altta yatan vasküler pürüzsüz Kas hücreleri arasında sinyal değişimi için bir yüzey olarak hizmet vermektedir. Çeşitli vazoaktif maddeleri serbest bırakarak, endotelyum vasküler ton yanıtlarının yerel kontrolünde kritik bir rol oynar1. Örneğin, asetilkolin yanıt olarak, endotel nitrik oksit sentaz (Enos) nitrik oksit üretmek için endotel aktive edilir (Hayır), hangi çözünür Guanil siklaz (SGC) aktive ederek altta yatan vasküler pürüzsüz Kas rahatlama indükler 2. diğer vazoaktif maddeler dahil Nonsteroid antienflamatuar ilaçlar ürünleri (örn., protoktik ve trombokan A2), lipoksijenaz (örn., 12-hidroksiosatetraenoik asitler, 12-HETE), ve sitokrom P450 monooxygenases (hetes ve epoxyeicosatrienoic asitler, EETs), reaktif oksijen türleri (ROS), ve vazoaktif peptidler (örneğin, endothelin-1 ve Anjiyotensin II), ve endotel-türevi hiperpolarizasyon faktörleri (EDHF)3. Endotel türevi vazodilatörler ve vazokonstriktörler arasında hassas bir denge yerel vazomotor tonu4,5korur.
Endotel disfonksiyon endotelyum bağımlı vazodilatasyon6, vasküler yaşlanma bir damgasını bozukluğu ile karakterize7. Yaş ile, endotelyum vasodilatasyon teşvik yeteneği aşamalı olarak azalır, büyük ölçüde bir azaltılmış NO biyokullanılabilirlik, hem de anormal ifade ve fonksiyon eNOS endotelyum ve sGC vasküler pürüzsüz kas hücrelerinde8 , 9 , 10. azaltılmış hiçbir biyokullanılabilirlik endotel-bağımlı vasoconstrictors üretimini güçlendiren11,12. Yaşlı arterlerde, endotel disfonksiyon medyada hiperplazi neden olur, duvar kalınlığındaki işaretli artışların yansıtıldığı gibi, medial çekirdekler sayısı, hipertansiyon ve ateroskleroz arteriyel kalınlaşma anımsatan insan gözlenen hastalar13,14. Buna ek olarak, obezite, diyabet veya hipertansiyon gibi patofizyolojik koşullar endotel disfonksiyon gelişimini hızlandırır15,16.
Perivasküler adipoz doku (PVAT) vasküler yapı ve fonksiyon17düzenleyen sayısız adipokines bültenleri. Pvat 'ın Anti-kontrel etkisi, adiponektin, Hayır, hidrojen peroksit ve hidrojen sülfür18,19,20gibi rahatlatıcı faktörler tarafından aracılık edilir. Ancak, konum ve patofizyolojik duruma bağlı olarak, PVAT ayrıca çeşitli arterlerde kontril tepkiler artırabilir21. Pvat tarafından üretilen Pro-kontril maddeler Anjiyotensin-II, leptin, resistin ve Ros22,23içerir.  İzole kan damarlarındaki çalışmaların çoğunda PVAT, damar işleme için basit bir yapısal destek olarak kabul edilmiştir ve böylece kan damarının halka segmentlerinin hazırlanması sırasında kaldırılır. Adipoz disfonksiyon hipertansiyon ve ilişkili kardiyovasküler komplikasyonlar için bağımsız bir risk faktörü temsil beri24, kan damarları çevreleyen pvat vasküler tepkisini araştırırken dikkate alınmalıdır farklı arterlerde.
Çok tel miyografi sistemleri yaygın aort, mezenterik, böbrek, femoral, serebral ve koroner arter dahil olmak üzere çeşitli kan damarlarının vazomotor işlevlerini araştırmak için kullanılır25,26. Burada açıklanan protokoller, genetik olarak değiştirilmiş fare modellerinden izole edilen mezenterik arterlerde vasküler yanıt hızını değerlendirmek ve PVAT tarafından modülasyon üzerine özel bir odaklama ile tel miyografi kullanacak.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetylcholine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A6625</td>
			<td>Stock concentration: 10-1 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-NAME (N&#969;-nitro-L-arginine methyl ester)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>N5751</td>
			<td>Stock concentration: 3 x 10-2 M 
			Working concentration: 10-4 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenylephrine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6126</td>
			<td>Stock concentration: 10-2 M 
			Working concentration: 10-10 to 10-5 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U46619 (9,11-dideoxy-9&#945;,11&#945;methanoepoxy prostaglandin F2&#945;)</td>
			<td>Enzo</td>
			<td>BML-PG023-0001</td>
			<td>Stock concentration: 10-5 M 
			Working concentration: 1-3 x 10-8 M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiwire myograph</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>620M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/26</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML848</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labchart7</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adipo-SIRT1 wild type mice</td>
			<td>Laboratory Animal Unit, The University of Hong Kong</td>
			<td>CULATR NO.: 4085-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicon-coated Petri dishes</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tungsten wires</td>
			<td>Danish MyoTechnology (DMT)</td>
			<td>300331</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical tools</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessment of vascular tone responsiveness using isolated mesenteric arteries with a focus on modulation by perivascular adipose tissues

Patofizyolojik stimüllerin vasküler ton reaksiyonunun değiştirilmesi, çok çeşitli kardiyovasküler ve metabolik hastalıkların gelişmesine katkıda bulunur. Endotel disfonksiyon azaltılmış vazodilatasyon ve arterlerin vazokonstriksiyon gelişmiş için büyük bir suçlu temsil eder. Arterlerin çevreleyen Adipose (yağ) dokularda endotelyum bağımlı rahatlama ve/veya vasküler pürüzsüz kas hücrelerinin kasılma düzenlenmesi önemli roller oynar. Endotel ve perivasküler adipoz dokularının arasındaki çapraz görüşmeler, Tel miyografi sistemi ile monte edilmiş kan damarlarını kullanarak ex vivo olarak değerlendirilebilir. Ancak, farklı türler, yaş, genetik kökenden ve/veya patofizyolojik durumların hayvanlarından elde edilen arterlerde optimum ayarlar kurulmalıdır.

Normalleştirme faktörü k elde etmek için uzunluk/gerilim ilişkileri incelenmesi
Bir damar segmentine uygulanan streç miktarı, aktin-miyosin etkileşiminin kapsamını etkiler ve dolayısıyla geliştirilen maksimal aktif kuvvet. Böylece, her tür kan damarında, uygun miyografi çalışmaları için maksimal aktif kuvvet için gereken streç miktarını belirlemek gereklidir. Burada, fare modell...

Watch this Scientific Journal Video about Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues at JoVE.com

Assessment of Vascular Tone Responsiveness using Isolated Mesenteric Arteries with a Focus on Modulation by Perivascular Adipose Tissues

Perivasküler Adipose dokularında modülasyon odaklı Izole mezenterik arterlerin kullanıldığı vasküler ton tepkisini değerlendirmek

Protokol, farelerden izole edilen mezenterik arterlerin transmural izometrik gerginliğini değerlendirmek için tel miyografi kullanımını açıklar ve endotel hücrelerden ve perivasküler adipoz dokulardan salınan faktörlerin modülasyonunun özel olarak değerlendirilmesidir.

Altered vascular tone responsiveness to pathophysiological stimuli contributes to the development of a wide range of cardiovascular and metabolic ...

Çok sıkı bir protokol biz geçerli olarak aynı hayvanların veya farklı hayvanlar veya arterlerden onları çevreleyen yağ varlığı veya yokluğunda veya endotel varlığı veya yokluğunda preparatları karşılaştırabilirsiniz gereklidir. Bu deneysel tekniğin en büyük avantajı, izometrik koşullar altında aynı arter halkalarını karşılaştırabiliyor ve böylece araştırdığımız deneysel faktörlerin etkisi hakkında geçerli sonuçlara varabiliyoruz. Bu protokol, genetik olarak değiştirilmiş farklı hayvanların perivasküler yağ dokuları tarafından vasküler duyarlılık modülasyonu içine anlayışlar sağlar.Yağ dokusu bozuklukları hipertansiyon ve ilişkili kardiyovasküler komplikasyonlar için bağımsız bir risk faktörü temsil eder. Miyografımız, özellikle montaj sırasında damara zarar vermemek ve geminin çeşitli uyaranlara uygun şekilde yanıt vermesini sağlamak için her noktada aşırı dikkatli olunması gereken çok sayıda karmaşık adım içerir. Metin protokolünde açıklandığı gibi mezenterik arter halkalarının preparatları ve diseksiyonu ile bu prosedüre başlayın.Bilgisayarı açın ve veri kayıt yazılımını açın. Denemeyi, özgün ayar dosyasının üzerine yazmamak için yeni bir ada sahip bir laboratuvar grafiği veri dosyası olarak kaydedin. Normalleştirme ayarları penceresini açın ve K faktörlü bir ekive ayarlayın.IP kalibrasyonu, hedef basıncı, çevrimiçi ortalama süre ve gecikme süresi için varsayılan değerleri kabul edin. Ayarları kaydetmek için tamam'ı tıklatın. İlgi alan kanalları seçin ve normalleştirme penceresinde tel çapını, doku uç noktalarını ve ilk mikrometre okumasını girdi.Normalleştirme işlemini başlatmak için, mikrometre vidasını saat yönünün tersine çevirerek kan damarına ilk pasif esneme uygulayın. Geminin stabilize olması için üç dakika bekledikten sonra, normalleştirme penceresine yeni mikrometre okumasını girdi. Duvar gerilimi otomatik olarak hesaplanır ve grafikte bir nokta olarak gösterilir.Her pasif streç sonra, 150 milimolar potasyum klorür içeren bir izo-ozmotik yüksek potasyum krebs ile kontrol krebs tampon değiştirin. Kasılma yaklaşık üç dakika bir plato ulaştığında, potasyum aktive kuvvet her streç pasif kuvvet çıkararak aktif kuvvet kaydedin. Duvar gerilimini ve iç çevre değerlerini hesaplayın.Taze krebs tampon ile yüksek potasyum tampon değiştirerek yüksek potasyum durumu kaldırın. Beş dakika boyunca üç kez yıkama tekrarlayın. Aktif gerilim azalmaya başlayana kadar alternatif dönüşlerde aktif daralma nın ardından pasif esnemeler başlatarak normalleştirme adımlarını tekrarlayın.Iyice yüksek potasyum krebs tampon yıkayın ve başka bir 30 ila 45 dakika için hazırlıkları dengeleyin. Sonraki deneme sırasında yalnızca etkin kontraktil yanıtlar kaydedilebilsin diye bazal gerilimleri sıfırla. Her arterin bitişik bölümlerinden metin protokolünde açıklandığı gibi eşleştirilmiş arter halkalarını hazırlayın ve monte edin.PVAT bozulmamış bir arter halkası hazırlayın ve PVAT kaldırıldı ile diğer. Normalizasyondan sonra, krebs içeren odaya 115 milimolar potasyum klorür çözeltisi ekleyerek yüksek potasyum krebs tampon ile arteriyel segmentleri ön sözleşme. Plato dönemine daralma sonrasında, yüksek potasyum yıkama ve taze aerated krebs tampon ile tampon değiştirin.Beş dakika boyunca üç kez yıkama tekrarlayın. Potasyum klorür stimülasyonu ve yıkama üç kez tekrarlayın ve potasyum klorür stimülasyonu nedeniyle gerginlik taban gerilimi çıkararak potasyum klorür için maksimal kontraktil yanıt kaydedin. Son kasılma ve yıkama sonra, sıcak, havalandırılmış krebs tampon ile oda doldurmak ve arter sonraki görevi gerçekleştirmeden önce yaklaşık 30 dakika kurtarmak için izin.Her odaya, konsantrasyona bağlı artışları ve quiescent preparatların izometrik gerilimini tetiklemek için kümülatif miktarda fenilefrin ekleyin. Agonist son dozu ekledikten sonra, iyice ilaç yıkayın ve taze krebs tampon ile oda doldurmak. Potasyum klorür maksimal kasılmalar indüklenen artan yüzdeleri olarak konsantrasyon bağımlı yanıtları arsa.Nitrik oksit katkısını değerlendirmek için, fenilefrin eklenmesinden önce 30 dakika boyunca nitrik oksit syntaz inhibitörü L-NAME ile preparatları kuluçkaya yatırın. İkinci bir konsantrasyon yanıt eğrisini sırayla gerçekleştirmek için, tonda başka bir değişiklik görülmeyene kadar önceki agonistlerin tümlerini çıkarmak için odayı tamamen ve tekrar tekrar yıkayın. Standart yemek veya yüksek yağlı diyet ile beslenen fare modellerinden izole edilen mezenterik arterler için uzunluk-gerilim ilişkisinin normalizasyonu yapıldı.100 milimetreci cıva transmural basıncına veya IC100'e karşılık gelen iç çevre elde edilene kadar arter segmentlerinin kademeli olarak gerilerek pasif bir uzunluk-gerilim ilişkisi kuruldu. Her esnemeden sonra, 115 milimolar potasyum klorür kasılmaları uyarmak için uygulandı. Aktif uzunluk gerilim eğrileri Y eksenindeki aktif kuvvet verilerinden ve X eksenindeki mikrometre verilerinden hesaplanan IC değerlerinden çizilmiştir.Tepe platosu içinde bulunan bir IC değeri IC1'dir. Normalleştirme faktörü K, ic1 ve IC100 oranı olarak hesaplandı ve bu oran sonraki deneyde aynı damar tipi örneklere uygulanabiliyordu. Burada gösterilen mesenterik arterlerde fenilefrin vazokonstriktör yanıtlarının çıkış kayıtları veya çevreleyen PVAT olmadan.Fenilefrin kümülatif konsantrasyonları 16 haftalık adiposet bir fare toplanan mezenterik arterlerin kasılmaları uyarmak için uygulandı. Kontraktil tepkiler 150 milimolar potasyum klorür sonucu maksimal kontraksiyon yüzdesi olarak kaydedildi ve hesaplandı. Daralma eğrilerinin altındaki alan karşılaştırma için çizilmiştir.Adiposet bir fareden PVAT fenilefrin yanıtı üzerinde bir anti-kontraktil etkisi ortaya olduğunu unutmayın. KCL kaynaklı kasılmalar elde ederken, yanıtlar istikrarlı ve sabit olmalıdır. KCL'nin üç artımlı uygulamasından sonra yanıt hala artıyorsa, KCL stimülasyonu gerekebilir.Gerginliklerin en uygun koşullarını elde etmek için, normalleşme adımı çok önemlidir, bu kan damarlarını açmak için kuvvet belirler gibi. Eğer düzgün yapılmazsa, tüm deneyi etkileyecek. Bu protokol fenilefrin kaynaklı kasılma veya gevşemeye ek olarak diğer ayarlara da uygulanabilir.Örneğin, perivasküler yağ dokusu, otonom sinirler veya endotel varlığı veya yokluğunda. Bu protokol ile araştırmacılar, hastalıklı hayvan modellerinden küçük kan damarlarını obezite, diyabet ve kardiyovasküler hastalıklar gibi farklı patofizyolojik koşullar altında inceleyebilirler.

Research

JoVE Journal

Biology

Right Hemihepatectomy by Suprahilar Intrahepatic Transection of the Right Hemipedicle using a Vascular Stapler

Damar Zımba kullanarak sağ Hemipedicle Suprahilar İntrahepatik transeksiyonu sağ Hemihepatectomy

Successful hepatic resection requires profound anatomical knowledge and delicate surgical technique. Hemihepatectomies are mostly performed after ...

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

The ex vivo Isolated Skeletal Microvessel Preparation for Investigation of Vascular Reactivity

Ex vivo</emVasküler Reaktivite incelenmesi için> İzole İskelet mikrodamar Hazırlık

The isolated  microvessel preparation is an ex vivo preparation that allows for examination of the different contributions of  factors that control vessel ...

Using Digital Image Correlation to Characterize Local Strains on Vascular Tissue Specimens

Dijital Görüntü Korelasyon kullanma Vasküler Doku Örneklerinin Yerel düzensizliğin karakterize etmek

Characterization of the mechanical behavior of biological and engineered soft tissues is a central component of fundamental biomedical research and ...

Analysis of Cell Suspensions Isolated from Solid Tissues by Spectral Flow Cytometry

Spektral Sitometrisi ile Katı Dokular İzole Hücre Cezalar Analizi

Flow cytometry has been used for the past 40 years to define and analyze the phenotype of lymphoid and other hematopoietic cells. Initially restricted to ...

Differentiation Capacity of Human Aortic Perivascular Adipose Progenitor Cells

İnsan aort Perivasküler yağ progenitör hücre farklılaşması kapasitesi

Adipose tissue is a rich source of multi-potent mesenchymal stem cells (MSC) capable of differentiating into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic ...

Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

Fare Epidididimal Yağ Dokularından Yağ Progenitör Hücrelerinin Hazırlanması

Obesity and metabolic disorders such as diabetes, heart disease, and cancer, are all associated with dramatic adipose tissue remodeling. Tissue-resident ...

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

Visualization and Quantification of Brown and Beige Adipose Tissues in Mice using [18F]FDG Micro-PET/MR Imaging

[18F]FDG Micro-PET/MR Görüntüleme Kullanılarak Farelerde Kahverengi ve Bej Yağ Dokularının Görselleştirilmesi ve Ölçülmesi

Brown and beige adipocytes are now recognized as potential therapeutic targets for obesity and metabolic syndromes. Non-invasive molecular imaging methods ...

Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase

Elastazın Perivasküler Uygulaması ile İndüklenen Fare Abdominal Aort Anevrizması Modeli

Abdominal aortic aneurysm (AAA), although primarily asymptomatic, is potentially life-threatening as the rupture of AAA usually has a devastating outcome. ...

Semi-Automated Isolation of Murine White Adipose Tissue

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator

Semi-Automated Isolation of the Stromal Vascular Fraction from Murine White Adipose Tissue Using a Tissue Dissociator (Video) | JoVE 

Bir Doku Dissosiyatör Kullanarak Stromal Vasküler Fraksiyonun Murin Beyaz Yağ Dokusundan Yarı Otomatik İzolasyonu

The in vitro study of white, brown, and beige adipocyte differentiation enables the investigation of cell-autonomous functions of adipocytes and their ...