Name: thoracic spinal cord hemisection surgery and open-field locomotor assessment in the rat
Uploaded: 2019-06-26T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Thoracic Spinal Cord Hemisection Surgery and Open-Field Locomotor Assessment in the Rat at JoVE.com

Diese Arbeit wurde von den Canadian Institutes for Health Research (CIHR; MOP-142288) an M.M. M.M. wurde durch eine Gehaltsprämie des Fonds de Recherche Québec Santé (FRQS) und A.R.B. durch ein Stipendium der FRQS unterstützt.

Die in diesem Artikel beschriebenen Experimente wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien des Canadian Council on Animal Care durchgeführt und von der Ethikkommission der Université de Montréal genehmigt.
1. Thorax-Hemisektions-Operation
<ol><li>Tragen Sie geeignete Schutzausrüstung (Handschuhe, Maske und Kleid), um eine aseptische Umgebung für die Operation zu erhalten. Reinigen Sie den operationsischen Bereich mit Alkoholtüchern und legen Sie sterile chirurgische Vorhänge über...

Eine wesentliche Stärke der Hemisektionstechnik ist die Selektivität und Reproduzierbarkeit der Läsion, die zu einer verminderten Variabilität in histologischen und verhaltensbildenden Phänotypen zwischen Tieren führt25. Um eine einseitige Läsion auf der entsprechenden Wirbelsäulenebene zu gewährleisten, ist eine genaue Identifizierung sowohl des richtigen Wirbelsegments als auch der Mittellinie des Rückenmarks von entscheidender Bedeutung. Da es eine Tendenz für das Rückenmark sein ka...

Rückenmarksverletzungen (SCI) sind mit schweren Störungen der motorischen, sensorischen und autonomen Funktion verbunden. Experimentelle Tiermodelle von SCI sind wertvolle Werkzeuge, um die anatomischen und physiologischen Ereignisse der SCI-Pathologie zu verstehen, die neuronalen Mechanismen bei der Reparatur und Wiederherstellung zu untersuchen und die Wirksamkeit und Sicherheit potenzieller therapeutischer Interventionen. Die Ratte ist die am häufigsten verwendete Art in SCI-Forschung1. Rattenmodelle sind kostengünstig, einfach zu reproduzieren, und eine große Batterie von Verhaltenstests zur Beurteilung der funktionellen Ergebnisse2zur Verfügung. Trotz einiger Unterschiede in den Traktpositionen teilt das Rückenmark der Ratte insgesamt ähnliche sensorimotorische Funktionen mit größeren Säugetieren, einschließlich Primaten3,4. Ratten teilen auch analoge physiologische und Verhaltensfolgen zu SCI, die sich auf den Menschen beziehen5. Nichtmenschliche Primaten- und Großtiermodelle können eine nähere Annäherung an den menschlichen SCI6 ermöglichen und sind für den Nachweis der Behandlungssicherheit und -wirksamkeit vor menschlichen Experimenten unerlässlich, werden aber aufgrund des ethischen und Tierschutzes seltener verwendet. Berücksichtigungen, Aufwendungen und regulatorischen Anforderungen7.
Rattentransektion SCI-Modelle werden durch die gezielte Unterbrechung des Rückenmarks mit einer selektiven Läsion mit einem Seziermesser oder einer Iritektomieschere nach einer Laminektomie durchgeführt. Im Vergleich zu einer vollständigen Transektion führt die partielle Transektion bei der Ratte zu einer weniger schweren Verletzung, einer leichteren postoperativen Tierpflege, einer spontanen Bewegungsregeneration und genauer enden den Modellen SCI beim Menschen, die überwiegend unvollständig ist, wobei die Gewebe, das das Rückenmark und die supraspinalen Strukturen verbindet8. Eine einseitige Halbsektion stört alle aufsteigenden und absteigenden Traktate nur auf einer Seite und erzeugt quantifizierbare und hochreproduzierbare Bewegungsdefizite, wodurch die Erforschung der zugrunde liegenden biologischen Mechanismen verbessert wird. Die prominenteste funktionelle Folge der Hemisektion ist eine anfängliche Gliedmaßenlähmung auf der gleichen Seite und unterhalb des Niveaus der Läsion mit abgestufter spontaner Wiederherstellung der Bewegungsfunktion über mehrere Wochen9,10, 11 , 12. Das Halbschnittmodell ist besonders nützlich, um die neuronale Plastizität beschädigter und Resttrakte und Schaltkreise im Zusammenhang mit der funktionellen Erholung9,11,12, 13,14,15,16,17,18. Insbesondere ist die Aufschnitte, die auf thorakaler Ebene durchgeführt werden, d.h. über den Wirbelsäulenkreisläufen, die die Hinterlimb-Fortbewegung steuern, besonders nützlich für die Untersuchung von Veränderungen in der Bewegungssteuerung. Da eine nichtlineare Beziehung zwischen Läsionsschweregrad und Bewegungsrückgewinnung nach SCI19besteht, sind geeignete Verhaltenstests zur Bewertung der funktionellen Ergebnisse in experimentellen Modellen von größter Bedeutung.
Eine umfassende Batterie von Verhaltenstests zur Verfügung, um spezifische Aspekte der funktionellen Bewegungsrückgewinnung in der Ratte2,20zu bewerten. Viele Bewegungstests bieten keine zuverlässigen Maßnahmen früh nach SCI, da Ratten zu behindert sind, um ihr Körpergewicht zu unterstützen. Ein Maß für die spontane Motorleistung, das früh nach einer Verletzung auf Defizite reagiert und keine präoperative Ausbildung oder spezielle Ausrüstung erfordert, ist von Vorteil, um die Erholung des Bewegungsapparates auf geeignete Zeitpunkte zu überwachen, in denen spezielle Verhaltenstests ergänzen. Der Martinez-Open-Field-Bewertungswert10, der ursprünglich für die Bewertung der Motorikleistung nach zervikalem SCI in der Ratte entwickelt wurde, ist ein 20-Punkte-Ordinal-Score zur Beurteilung der globalen Lokomotor-Leistung während spontaner oberirdischer Fortbewegung in offenes Feld. Die Bewertung erfolgt separat für jedes Glied unter Verwendung einer Rubrik, die bestimmte Parameter einer Reihe von bewegungsförmigen Maßnahmen bewertet, einschließlich Gelenkgelenkbewegung, Gewichtsstütze, Ziffernposition, Schrittfähigkeiten, Vorderglieda-Hinterschritt-Koordination und Schwanz stellung. Der Bewertungswert wird von der offenen Bewertungsskala Basso, Beattie und Bresnahan (BBB) abgeleitet, die zur Bewertung der Motorleistung nach Thoraxkontusion21entwickelt wurde. Es ist an die genaue und zuverlässige Bewertung sowohl der Vorder- als auch der Hinterhaut-Bewegungskraft-Funktion angepasst, ermöglicht eine unabhängige Bewertung der verschiedenen Bewertungsparameter, die mit der hierarchischen Bewertung des BBB nicht zugänglich sind, und bietet eine lineare Wiederherstellung. Profil10. Darüber hinaus ist der Bewertungswert im Vergleich zum BBB bei schwereren Verletzungsmodellen10,11,20,22sensibel und zuverlässig. Die Bewertungsbewertung wurde verwendet, um die motorische Beeinträchtigung der Ratte nach dem Gebärmutterhals10,12 und thorakale9 SCI allein und in Kombination mit traumatischen Hirnverletzungen23zu bewerten.
Wir präsentieren hier ein detailliertes Schritt-für-Schritt-Protokoll zur Durchführung eines Thorax-Hemisektions-SCI auf T8-Wirbelebene in der weiblichen Long-Evans-Ratte und zur Beurteilung der Rückdlimb-Locomotor-Erholung im offenen Feld.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1489px;" width="1489">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Baytril</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td style="width:294px;">11242</td>
			<td style="width:502px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Blunt dissection scissors</td>
			<td style="width:227px;">World Precision Instruments</td>
			<td>503669</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Buprenorphine hydrochoride</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Camera lens</td>
			<td style="width:227px;">Pentax</td>
			<td>C31204TH</td>
			<td>12.5-75mm, f1.8, 2/3&#34; format, C-mount</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">CMOS video camera</td>
			<td style="width:227px;">Basler</td>
			<td>acA2000-165uc</td>
			<td>2/3&#34; format, 2048 x 1088 pixels, up to 165 fps, C-mount, USB3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Compressed oxygen gas</td>
			<td style="width:227px;">Praxair</td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Cotton tipped applicators</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>108703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Delicate bone trimmers</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>16109-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Dissecting knife</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>10055-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont fine forceps (#5)</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethicon Vicryl 4/0 Violet Braided FS-2&#160; suture (J392H)</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td style="width:294px;">111689</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Feedback-controlled heating pad</td>
			<td style="width:227px;">Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Female Long-Evans rats</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td style="width:294px;">Strain code: 006</td>
			<td>225-250g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Gelfoam</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>102348</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Curved hemostat forceps</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>13003-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hot bead sterilizer</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Hydrogel</td>
			<td style="width:227px;">70-01-5022</td>
			<td>Clear H20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Isofluorane</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>118740</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Lactated Ringer&#39;s solution</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>116373</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Lidocaine (2%)</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>123684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Needle 30 ga</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>4799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Open-field area</td>
			<td style="width:227px;">Custom</td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td>Circular Plexiglas arena 96 cm diameter, 40 cm wall height</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Opthalmic ointment</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>110704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Personal computer&#160;</td>
			<td style="width:227px;"></td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td>With USB3 connectivity to record video with the listed camera</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Physiological saline</td>
			<td>CDMV</td>
			<td>1399</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Proviodine</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>4568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rodent Liquid Diet</td>
			<td style="width:227px;">Bioserv</td>
			<td style="width:294px;">F1268</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Scalpal blade #11</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>6671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Self-retaining retractor</td>
			<td style="width:227px;">World Precision Instruments</td>
			<td>14240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vannas iridectomy spring scissors</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>15002-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Veterinary Anesthesia Machine and isofluarane vaporizer</td>
			<td style="width:227px;">Dispomed</td>
			<td style="width:294px;">975-0510-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">VLC media player</td>
			<td style="width:227px;">VideoLAN</td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td>videolan.org/vlc</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

thoracic spinal cord hemisection surgery and open-field locomotor assessment in the rat

Rückenmarksverletzungen (SCI) verursachen Störungen der motorischen, sensorischen und autonomen Funktion unterhalb des Niveaus der Läsion. Experimentelle Tiermodelle sind wertvolle Werkzeuge, um die neuronalen Mechanismen zu verstehen, die an der Erholung des Bewegungsapparates nach SCI beteiligt sind, und um Therapien für klinische Populationen zu entwickeln. Es gibt mehrere experimentelle SCI-Modelle, einschließlich Prellungen, Kompression und Transektion Verletzungen, die in einer Vielzahl von Arten verwendet werden. Eine Halbsektion beinhaltet die einseitige Transsektion des Rückenmarks und stört alle auf- und absteigenden Trakte nur auf einer Seite. Die Spinalhemisektion produziert eine hochselektive und reproduzierbare Verletzung im Vergleich zu Konfusions- oder Kompressionstechniken, die für die Untersuchung der neuronalen Plastizität in geschliffenen und beschädigten Wegen im Zusammenhang mit funktioneller Erholung nützlich ist. Wir präsentieren ein detailliertes Schritt-für-Schritt-Protokoll für die Durchführung einer Thorax-Hemisektion auf der T8-Wirbelebene bei der Ratte, die zu einer anfänglichen Lähmung des Hinterbeins an der Seite der Läsion mit abgestufter spontaner Wiederherstellung der Bewegungsfunktion über mehrere Wochen. Wir bieten auch ein Locomotor Scoring-Protokoll, um die funktionelle Wiederherstellung im offenen Feld zu bewerten. Die Lokmotor-Bewertung bietet ein lineares Rückgewinnungsprofil und kann sowohl früh als auch wiederholt nach Verletzungen durchgeführt werden, um Tiere genau auf geeignete Zeitpunkte zu überprüfen, in denen spezialisiertere Verhaltenstests durchgeführt werden können. Die vorgestellte Hemisektionstechnik kann leicht an andere Transektionsmodelle und Arten angepasst werden, und die Bewegungsbewertung kann in einer Vielzahl von SCI- und anderen Verletzungsmodellen verwendet werden, um die Funktion des Bewegungsapparates zu bewerten.

Reproduzierbare Läsionen mit hoher Konsistenz können mit der Hemisektionstechnik erzeugt werden. Um läsionengrößen zwischen versuchsexperimentellen Gruppen zu bewerten und zu vergleichen, kann die maximale Fläche der Läsion als Prozentsatz des gesamten Querschnitts des Rückenmarks leicht mit histologischer Färbung von Rückenmarksabschnitten berechnet werden. Abbildung 1 zeigt eine repräsentative Läsion des linken Hämicords und eine Überlagerung des Anteils der maximalen Läsion...

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Thoracic Spinal Cord Hemisection Surgery and Open-Field Locomotor Assessment in the Rat

Die Brustbrust-Spinal-Hemisektion ist ein wertvolles und reproduzierbares Modell der einseitigen Rückenmarksverletzung, um die neuronalen Mechanismen der bewegungsmotorischen Erholung und Behandlungswirksamkeit zu untersuchen. Dieser Artikel enthält eine detaillierte Schritt-für-Schritt-Anleitung, um das Hemisection-Verfahren durchzuführen und die Leistung des Bewegungsapparates in einer Offenen Allee zu bewerten.

Thorax Rückenmarks-Hemisektionschirurgie und Open-Field-Locomotor Assessment in der Ratte

Spinal cord injury (SCI) causes disturbances in motor, sensory, and autonomic function below the level of the lesion. Experimental animal models are ...

Die Spinalhemisektion erzeugt quantifizierbare und ideale reproduzierbare Bewegungsdefizite, die mit der von uns entwickelten Lokomotivenwaage erfasst werden können. Der Hauptvorteil dieser Technik ist die Selektivität und Reproduzierbarkeit der Läsion, was zu einer reduzierten Variabilität der Verhaltensphänotypen zwischen Tieren führt. Nach der Bestätigung einer fehlenden Reaktion auf Zehenkneifung in einer anästhesierten erwachsenen Ratte, machen Sie einen 2,5 Zentimeter Schnitt in der rasierten Haut über die T-6 bis T-10 Wirbel und verwenden stumpfe Schere, um die Haut und oberflächliches Fett zurückzuziehen.Verwenden Sie stumpfe Sezierschere und einen selbsterhaltenden Retraktor, um die paravertebralen Muskeln zu trennen, indem Sie den dorsalen Aspekt der T-7 bis T-9 Wirbel einsetzen und feine Zangen und baumwollgekippte Applikatoren verwenden, um das verbleibende Gewebe zu debride und zu löschen, um die spinlösenProzesse und die Wirbellamina freizulegen. Platzieren Sie die Rate unter einem Stereomikroskop und verwenden Sie empfindliche Knochentrimmer, um die Facetten auf den Wirbeln T-7 und T-8 vorsichtig bilateral zu schneiden. Verwenden Sie ein Skalpell, um einen ein Millimeter oberflächlichen Schnitt im dorsalen Bindegewebe zwischen dem T-8 und T-9 Wirbellaminae zu machen, wobei darauf geachtet wird, die darunter liegende Schnur nicht zu verletzen und Knochentrimmer zu verwenden, um den spinlösen Prozess des T-8-Wirbels zu entfernen.Mit gekrümmten hämostatischen Zangen, die sorgfältig auf den T-7-Spinnprozess geklemmt sind, drehen Sie das kaudale Ende der T-8-Laminae leicht rostral um 20 Grad und setzen Sie die Knochenschneider unter die T-8-Lamina. Machen Sie einen Mittellinienschnitt, der sich entlang der Lamina erstreckt, indem Sie die Laminektomie fortsetzen, indem Sie die Schnitte auf der linken und rechten Seite der Wirbellamina medial zu den Querprozessen wiederholen, um das Rückenmark freizulegen. Tropft 100 Mikroliter 2%lidocaine in den exponierten Spinalkanal und verwenden Sie feine Zangen und Iridektomiescheren, um die Dura-Überlagerung des T-8-Rückenmarkssegments zu entfernen.Wiederholen Sie die Lidocain-Verabreichung an die exponierte Schnur und identifizieren Sie die Mittellinie der Schnur durch Visualisierung einer Mittellinie, die zwischen den spinösen Prozessen zwischen dem exponierten T-7 bis T-9-Wirbel erstellt wurde. Verwenden Sie feine Zangen, um das Rückenmark zu stabilisieren, verwenden Sie ein Sezieren des Rückenmarks, um das Rückenmark von der Mittellinie in Richtung einer Seite des Tieres zu schneiden, wobei darauf geachtet wird, die vordere Wirbelsäulenarterie auf der ventralen Seite nicht zu durchschneiden. Schneiden Sie mit einer Iridektomieschere das verbleibende Gewebe auf der Läsionsseite des Rückenmarks sorgfältig durch, um sicherzustellen, dass der ventral-laterale Quadrant entsprechend transsektiert wird, und legen Sie einen sterilen, etwa sechs mal zwei Millimeter großen, mit Wassermostatischen Schwamm entfernten Schwamm in den exponierten Hohlraum über dem Rückenmark.Dann verwenden Sie 4-O Polyglactin 910 Nähte, um Muskelschichten und die Haut um die Einschnittstelle zu schließen und die Ratte in einer warmen Umgebung unter einer Wärmelampe mit Überwachung bis zu einer vollständigen Erholung zu platzieren. Am entsprechenden experimentellen Zeitpunkt für Verhaltenstests, nachdem die Ratten in die Arena gewöhnt wurden, beginnen Sie die Videoaufnahme und platzieren Sie eine Ratte in der Mitte der Arena, unter gedämpften Lichtverhältnissen, um die Aktivität des Bewegungsapparates zu fördern. Erlauben Sie der Ratte, mindestens vier Minuten zu erforschen, und bewegen Sie die Ratte zurück in die Mitte der Arena, wenn sie länger als 20 Sekunden stehen bleibt, um die Fortbewegung zu fördern.Bewerten Sie dann die motorische Leistung der aufgezeichneten Testsitzung. Bei Gelenkgelenksbewegungen werden die Hinterlimbgelenkbewegungen während der spontanen Fortbewegung getrennt für Knöchel, Knie und Hüfte als normal, leicht oder abwesend einzeichen. Zur Gewichtsunterstützung, bewerten Sie die Fähigkeit der Hinterlimb ExtensorMuskeln, sich zusammenzuziehen und das belastete Körpergewicht zu unterstützen, wenn die Gliedmaße auf dem Boden ist, wenn die Ratte stationär ist, sowie während der aktiven Fortbewegung.Bewerten Sie für die Ziffernposition die Position der Hinterkieferziffern, während die Ratte stationär ist und während der Fortbewegung. Schließen Sie den Schrittparameter nur ab, wenn die Ratte ihr Körpergewicht während des Steppings unterstützen kann, indem sie die Ausrichtung der Hinterkieferpfote platzierung zum Zeitpunkt des Ersten Kontakts und beim Abheben vom Boden zusätzlich zur Fließfähigkeit der Schwingphase während des Steppings bewertet. Vervollständigen Sie den Parameter für die Forelimb/Hindlimb-Koordination nur, wenn während der Prüfung vier aufeinander folgende Schritte auftreten und die Gliedmaßen das Körpergewicht aktiv unterstützen können.Bewerten Sie die Schwanzposition während der Fortbewegung als entweder nach oben oder unten. Fügen Sie dann die einzelnen Punkte aus jedem Parameter hinzu, um eine Summe für jedes Hinterglied auf maximal 20 Punkte bereitzustellen. Um die Läsionsgrößen zwischen versuchsexperimentellen Gruppen zu bewerten und zu vergleichen, kann die maximale Fläche der Läsion als Prozentsatz des gesamten Querschnitts des Rückenmarks leicht mit histologischer Färbung der Rückenmarksabschnitte berechnet werden.Zum Beispiel zeigte diese repräsentative Läsion des linken Hemicords mit einer Überlagerung des Anteils der maximalen Läsionsfläche, die von Ratten geteilt wird, die mittlere Läsionsgröße von etwa 47% der Querschnittsschnurfläche. Diese repräsentativen Veränderungen der motorischen Leistung im intakten Zustand in den ersten fünf Wochen nach der linken Seitenhalbsektion zeigen eine signifikante Beeinträchtigung der Fortbewegung im linken Hinterglied des Tieres in den ersten drei Wochen nach der Operation. Eine Verbesserung des Fortbewegungsniveaus wird im rechten Hinterglied durch zwei Wochen nach dem Eingriff beobachtet.Die wichtigsten Dinge zu erinnern sind, dass eine genaue Identifizierung der Spinalmittellinie für die Hemisektion und die richtige postoperative Tierpflege und Überwachung sind für ein erfolgreiches Protokoll unerlässlich. Diese Verhaltensbeurteilung bietet ein ideales Protokoll zum Screenen für obere Paretrecorvial-Indizes zur Ergänzung mit speziellen Tests, um spezifische Interessenfragen zur Wiederherstellung des Bewegungsapparates zu behandeln.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

Dissection und Kultur kommissuralen Nervenzellen aus embryonalen Rückenmark

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Forschung

Neurowissenschaften

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

Spinal Cord Elektrophysiologie II: Extrazelluläre Saugelektrode Fabrication

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Spinal Cord Transection in the Larval Zebrafish

Rückenmarksdurchtrennung in der Zebrafisch-Larven

Mammals fail in sensory and motor recovery following spinal cord injury due to lack of axonal regrowth below the level of injury as well as an inability ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

Ein<em&gt; Ex vivo</em&gt; Laser-induzierte Rückenmarksverletzungen Modell zu Mechanismen der axonalen Degeneration Beurteilen Sie in Echtzeit

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Diffusion Imaging in the Rat Cervical Spinal Cord

Diffusionsbildgebung in der Ratte Halsmark

Magnetic resonance imaging (MRI) is the state of the art approach for assessing the status of the spinal cord noninvasively, and can be used as a ...

Spinal Cord Neurons Isolation and Culture from Neonatal Mice

Wirbelsäule Neuronen Isolierung und Kultur aus neonatalen Mäusen

We present a protocol for the isolation and culture of spinal cord neurons. The neurons are obtained from neonatal C57BL/6 mice and are isolated on ...

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Neuronalen Aktivität im primären somatosensorischen Cortex mit Thy1Imaging-GCaMP6s transgene Mäuse

The mammalian brain exhibits marked symmetry across the sagittal plane. However, detailed description of neural dynamics in symmetric brain regions in ...

An In Vivo Duo-color Method for Imaging Vascular Dynamics Following Contusive Spinal Cord Injury

An In Vivo Duo-color Method for Imaging Vascular Dynamics Following Contusive Spinal Cord Injury

Eine In Vivo Duo-Farbe-Methode für Imaging-vaskuläre Dynamik nach Contusive Spinal Cord Injury

Spinal cord injury (SCI) causes significant vascular disruption at the site of injury. Vascular pathology occurs immediately after SCI and continues ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

Laminektomie und Rückenmarksfenster-Implantation in der Maus

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

Direkter Einspritzung von Lentivirale Vektor zeigt mehrere motorische Bahnen im Rückenmark Ratte

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...