Name: thoracic spinal cord hemisection surgery and open-field locomotor assessment in the rat
Uploaded: 2019-06-26T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Thoracic Spinal Cord Hemisection Surgery and Open-Field Locomotor Assessment in the Rat at JoVE.com

यह काम स्वास्थ्य अनुसंधान के लिए कनाडा के संस्थानों (CIHR) द्वारा समर्थित किया गया था; एमओपी-142288) से एम.एम.एम. को फोंड्स डे रीचे कुबेक सेन्ट ( FRQS) से वेतन पुरस्कार द्वारा समर्थित किया गया था, और A.R.B FRQS से एक फैलोशिप द्वारा समर्थित किया गया था।

इस लेख में वर्णित प्रयोगों पशु देखभाल पर कनाडा परिषद के दिशा निर्देशों के अनुपालन में प्रदर्शन किया गया और Universit में नैतिकता समिति द्वारा अनुमोदित किया गया de Montral.
1. थोरैसिक अर्धखंड शल्य चिकित्स?...

अर्धखंड तकनीक की एक प्रमुख शक्ति घाव की चयनात्मकता और पुन: उत्पादनीयता है जो जानवरों के बीचहिस्टोलॉजिकल और व्यवहार फीनोटाइप्स में कम परिवर्तनशीलता की ओर ले जाती है . उचित रीढ़ की हड्डी के स्त?...

स्पाइनल कॉर्ड चोट (एससीआई) मोटर, संवेदी, और स्वायत्त समारोह में गंभीर गड़बड़ी के साथ जुड़ा हुआ है। SCI के प्रायोगिक पशु मॉडल एससीआई पैथोलॉजी में शामिल शारीरिक और शारीरिक घटनाओं को समझने के लिए मूल्यवान उपकरण हैं, मरम्मत और वसूली में तंत्रिका तंत्र की जांच करने के लिए, और संभावित चिकित्सीय की प्रभावकारिता और सुरक्षा के लिए स्क्रीन करने के लिए हस्तक्षेप. चूहा SCI अनुसंधान1में सबसे अधिक इस्तेमाल किया प्रजातियों है. चूहा मॉडल कम लागत, पुन: पेश करने के लिए आसान कर रहे हैं, और व्यवहार परीक्षण की एक बड़ी बैटरी कार्यात्मक परिणामों का आकलन करने के लिए उपलब्ध हैं2. पथ स्थानों में कुछ अंतर के बावजूद, चूहे रीढ़ की हड्डी के शेयरों समग्र इसी तरह sensorimotor बड़े स्तनधारियों के साथ कार्य करता है, primatesसहित 3,4. चूहे भी एससीआई के अनुरूप शारीरिक और व्यवहार के परिणामों को साझा करते हैं जो मनुष्यों से संबंधित5. गैर मानव प्राइमेट और बड़े पशु मॉडल मानव SCI6 के एक करीब सन्निकटन प्रदान कर सकते हैं और उपचार सुरक्षा और मानव प्रयोग से पहले प्रभावकारिता साबित करने के लिए आवश्यक हैं, लेकिन कम आमतौर पर नैतिक और पशु कल्याण के कारण उपयोग किया जाता है विचार, खर्च, और नियामक आवश्यकताओं7.
चूहा transection SCI मॉडल एक विच्छेदन चाकू या iridectomy कैंची एक laminectomy के बाद का उपयोग कर एक चयनात्मक घाव के साथ रीढ़ की हड्डी के लक्षित रुकावट द्वारा किया जाता है. एक पूर्ण ट्रांससेक्शन की तुलना में, चूहे में आंशिक ट्रांससेक्शन एक कम गंभीर चोट, आसान पश्चात पशु देखभाल, सहज चलन वसूली, और मनुष्यों में अधिक बारीकी से मॉडल एससीआई जो आंशिक रूप से कम से कम के साथ अधूरा है रीढ़ की हड्डी और अधिस्पिनल संरचनाओं को जोड़ने वाला ऊतक8. एक एकतरफा हेमीसेक्शन केवल एक तरफ सभी आरोही और अवरोही इलाकों को बाधित करता है, और अंतर्निहित जैविक तंत्र की खोज को बढ़ाने, परिमाणात्मक और अत्यधिक प्रतिलिपि बनाने योग्य चलन घाटे का उत्पादन करता है। अर्धखंड का सबसे प्रमुख कार्यात्मक परिणाम एक ही पक्ष पर एक प्रारंभिक अंग पक्षाघात और कई सप्ताह9,10से अधिक चलन समारोह के वर्गीकृत सहज वसूली के साथ घाव के स्तर से नीचे है, 11 , 12. अर्धखंड मॉडल विशेष रूप से क्षतिग्रस्त और अवशिष्ट पथों और कार्यात्मक वसूली9,11,12के साथ जुड़े सर्किट के तंत्रिका प्लास्टिक की जांच करने के लिए उपयोगी है, 13,14,15,16,17,18. विशेष रूप से, वक्ष स्तर पर किया जाने वाला अर्धखंड, अर्थात्, रीढ़ की हड्डी के सर्किट के ऊपर जो हिन्दीम चलन को नियंत्रित करता है, लोकोमोटर नियंत्रण में परिवर्तनों की जांच करने के लिए विशेष रूप से उपयोगी होता है। के रूप में एक गैर रेखीय संबंध घाव गंभीरता और SCI19के बाद चलकोमोटर वसूली के बीच मौजूद है, कार्यात्मक परिणामों का आकलन करने के लिए उचित व्यवहार परीक्षण प्रयोगात्मक मॉडल में सर्वोपरि है.
रैट2,20में कार्यात्मक चलन वसूली के विशिष्ट पहलुओं का आकलन करने के लिए व्यवहार परीक्षणों की एक व्यापक बैटरी उपलब्ध है . कई चलन परीक्षण एस आई आई आई के बाद जल्दी विश्वसनीय उपाय प्रदान नहीं करते हैं क्योंकि चूहे भी अपने शरीर के वजन का समर्थन करने के लिए अक्षम हैं। सहज चलन प्रदर्शन का एक उपाय जो चोट के बाद घाटे के प्रति संवेदनशील है, और पूर्व ऑपरेटिव प्रशिक्षण या विशेष उपकरणों की आवश्यकता नहीं है, उपयुक्त समय बिंदुओं के लिए चलन वसूली की निगरानी करने के लिए फायदेमंद है जिसमें पूरक विशेष व्यवहार परीक्षण. मार्टिनेज ओपन फील्ड मूल्यांकन स्कोर10,मूल रूप से चूहे में गर्भाशय ग्रीवा SCI के बाद चलकोमोटर प्रदर्शन के मूल्यांकन के लिए विकसित, एक में सहज ओवरग्राउंड चलन के दौरान वैश्विक चलन प्रदर्शन का आकलन एक 20 सूत्री क्रमबद्ध स्कोर है खुला मैदान. स्कोरिंग एक रूब्रिक का उपयोग कर प्रत्येक अंग के लिए अलग से आयोजित किया जाता है कि संधि अंग आंदोलन, वजन समर्थन, अंक की स्थिति, कदम क्षमताओं, forelimb-hindlimb समन्वय, और पूंछ सहित चलन उपायों की एक श्रृंखला के विशिष्ट मापदंडों का मूल्यांकन करता है स्थिति. मूल्यांकन स्कोर बासो, बीटी और ब्रेस्नाहान (बीबीबी) ओपन-फील्ड रेटिंग स्केल से लिया गया है जो थोरैसिक contusion21के बाद चलन प्रदर्शन का मूल्यांकन करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। यह सही और मज़बूती से दोनों forelimb और Hindlimb चलन समारोह का मूल्यांकन करने के लिए अनुकूलित है, विभिन्न स्कोरिंग पैरामीटर है कि BBB के पदानुक्रमित स्कोरिंग के साथ अनुकूल नहीं है की स्वतंत्र मूल्यांकन के लिए अनुमति देता है, और एक रैखिक वसूली प्रदान करता है प्रोफ़ाइल10| इसके अतिरिक्त, BBB की तुलना में, मूल्यांकन स्कोर संवेदनशील और अधिक गंभीर चोट मॉडल10,11,20,22में विश्वसनीय है. आकलन स्कोर का उपयोग चूहे के बाद ग्रीवा10,12 और थोरैसिक9 एससीआई में और दर्दनाक मस्तिष्क की चोट23के संयोजन में लोकोमोटर हानि का आकलन करने के लिए किया गया है .
हम यहाँ महिला लांग-एवन्स चूहे में T8 कशेरुक स्तर पर एक वक्ष हेमीसेक्शन एससीआई प्रदर्शन के लिए एक विस्तृत कदम दर कदम प्रोटोकॉल मौजूद है, और खुले क्षेत्र में Hindlimb चलन वसूली का आकलन करने के लिए।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1489px;" width="1489">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Baytril</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td style="width:294px;">11242</td>
			<td style="width:502px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Blunt dissection scissors</td>
			<td style="width:227px;">World Precision Instruments</td>
			<td>503669</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Buprenorphine hydrochoride</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Camera lens</td>
			<td style="width:227px;">Pentax</td>
			<td>C31204TH</td>
			<td>12.5-75mm, f1.8, 2/3&#34; format, C-mount</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">CMOS video camera</td>
			<td style="width:227px;">Basler</td>
			<td>acA2000-165uc</td>
			<td>2/3&#34; format, 2048 x 1088 pixels, up to 165 fps, C-mount, USB3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Compressed oxygen gas</td>
			<td style="width:227px;">Praxair</td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Cotton tipped applicators</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>108703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Delicate bone trimmers</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>16109-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Dissecting knife</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>10055-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont fine forceps (#5)</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethicon Vicryl 4/0 Violet Braided FS-2&#160; suture (J392H)</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td style="width:294px;">111689</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Feedback-controlled heating pad</td>
			<td style="width:227px;">Harvard Apparatus</td>
			<td>55-7020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Female Long-Evans rats</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td style="width:294px;">Strain code: 006</td>
			<td>225-250g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Gelfoam</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>102348</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Curved hemostat forceps</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>13003-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hot bead sterilizer</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Hydrogel</td>
			<td style="width:227px;">70-01-5022</td>
			<td>Clear H20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Isofluorane</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>118740</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Lactated Ringer&#39;s solution</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>116373</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Lidocaine (2%)</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>123684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Needle 30 ga</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>4799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Open-field area</td>
			<td style="width:227px;">Custom</td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td>Circular Plexiglas arena 96 cm diameter, 40 cm wall height</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Opthalmic ointment</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>110704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Personal computer&#160;</td>
			<td style="width:227px;"></td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td>With USB3 connectivity to record video with the listed camera</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Physiological saline</td>
			<td>CDMV</td>
			<td>1399</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Proviodine</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>4568</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rodent Liquid Diet</td>
			<td style="width:227px;">Bioserv</td>
			<td style="width:294px;">F1268</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Scalpal blade #11</td>
			<td style="width:227px;">CDMV</td>
			<td>6671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Self-retaining retractor</td>
			<td style="width:227px;">World Precision Instruments</td>
			<td>14240</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vannas iridectomy spring scissors</td>
			<td style="width:227px;">Fine Science Tools</td>
			<td>15002-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">Veterinary Anesthesia Machine and isofluarane vaporizer</td>
			<td style="width:227px;">Dispomed</td>
			<td style="width:294px;">975-0510-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:468px;">VLC media player</td>
			<td style="width:227px;">VideoLAN</td>
			<td style="width:294px;"></td>
			<td>videolan.org/vlc</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

thoracic spinal cord hemisection surgery and open-field locomotor assessment in the rat

स्पाइनल कॉर्ड चोट (एससीआई) घाव के स्तर के नीचे मोटर, संवेदी, और स्वायत्त समारोह में गड़बड़ी का कारण बनता है। प्रायोगिक पशु मॉडल एससीआई के बाद लोकोमोटर वसूली में शामिल तंत्रिका तंत्र को समझने के लिए और नैदानिक आबादी के लिए उपचार डिजाइन करने के लिए मूल्यवान उपकरण हैं। प्रजातियों की एक विस्तृत विविधता में उपयोग किया जाता है कि भ्रम, संपीड़न, और transection चोटों सहित कई प्रयोगात्मक एससीआई मॉडल हैं। एक अर्धखंड में रीढ़ की हड्डी की एकपक्षीय ट्रांससेक्शन शामिल होता है और केवल एक तरफ सभी आरोही और अवरोही पथ को बाधित करता है। स्पाइनल हेमीसेक्शन contusion या संपीड़न तकनीक है कि बख्शा और क्षतिग्रस्त कार्यात्मक वसूली के साथ जुड़े रास्ते में तंत्रिका प्लास्टिक की जांच के लिए उपयोगी है की तुलना में एक अत्यधिक चयनात्मक और reproduible चोट पैदा करता है. हम चूहे में T8 कशेरुक स्तर पर एक वक्ष हेमीसेक्शन प्रदर्शन करने के लिए एक विस्तृत कदम दर कदम प्रोटोकॉल प्रस्तुत है कि कई पर चलन समारोह के वर्गीकृत सहज वसूली के साथ घाव के पक्ष पर hindlimb के एक प्रारंभिक पक्षाघात में परिणाम सप्ताह. हम भी खुले क्षेत्र में कार्यात्मक वसूली का आकलन करने के लिए एक चलन स्कोरिंग प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। चलन मूल्यांकन एक रैखिक वसूली प्रोफ़ाइल प्रदान करता है और दोनों जल्दी और बार बार चोट के बाद किया जा सकता है क्रम में सही रूप में उचित समय अंक जिसमें अधिक विशेष व्यवहार परीक्षण का संचालन करने के लिए जानवरों स्क्रीन. प्रस्तुत हेमीसेक्शन तकनीक को आसानी से अन्य ट्रांससेक्शन मॉडल और प्रजातियों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है, और चलन मूल्यांकन को विभिन्न प्रकार के एससीआई और अन्य चोट मॉडल में इस्तेमाल किया जा सकता है ताकि लोकोमोटर समारोह स्कोर किया जा सके।

संगति के एक उच्च डिग्री के साथ प्रजननीय घावों को अर्धखंड तकनीक के साथ उत्पन्न किया जा सकता है। प्रयोगात्मक समूहों के बीच घावों के आकार का आकलन करने और तुलना करने के लिए, रीढ़ की हड्डी के कुल पार-सेक्शन क?...

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Thoracic Spinal Cord Hemisection Surgery and Open-Field Locomotor Assessment in the Rat

चूहा वक्ष रीढ़ की हड्डी hemisection चलन वसूली और उपचार प्रभावकारिता के तंत्रिका तंत्र की जांच करने के लिए एकतरफा रीढ़ की हड्डी की चोट का एक मूल्यवान और reproduible मॉडल है. इस आलेख में अर्धखंड प्रक्रिया करने के लिए और एक खुले क्षेत्र के क्षेत्र में चलन प्रदर्शन का आकलन करने के लिए एक विस्तृत चरण-दर-चरण मार्गदर्शिका शामिल है।

चूहा में थोरैसिक स्पाइनल कॉर्ड हेमीसेक्शन सर्जरी और ओपन-फील्ड लोकोमोटर आकलन

Spinal cord injury (SCI) causes disturbances in motor, sensory, and autonomic function below the level of the lesion. Experimental animal models are ...

स्पाइनल हेमिक्शन मात्रात्मक और आदर्श प्रजनन योग्य लोकोमोटर घाटे का उत्पादन करता है जिसे हमारे द्वारा विकसित किए गए लोकोमोटिव पैमाने के साथ कैप्चर किया जा सकता है। इस तकनीक का मुख्य लाभ घाव की चयनशीलता और प्रजनन क्षमता है, जो जानवरों के बीच व्यवहार फेनोटाइप में कम परिवर्तनशीलता की ओर ले जाती है। एक एनेस्थेटाइज्ड वयस्क चूहे में पैर की अंगुली चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करने के बाद, मुंडा त्वचा में एक २.५ सेंटीमीटर चीरा टी-6 से टी-10 कशेरुकी के लिए overlying और कुंद कैंची का उपयोग करने के लिए त्वचा और सतही वसा वापस लेना ।कुंद विच्छेदन कैंची और पैरावर्टेब्रल मांसपेशियों को अलग करने के लिए एक आत्म-बनाए रखने वाला रिट्रैक्टर का उपयोग करें, टी-7 के पृष्ठीय पहलू पर टी-9 कशेरुकी को सम्मिलित करें और डिब्राइड के लिए ठीक संदंश और कपास-इत्तला देने वाले एप्लीकेटर्स का उपयोग करें और स्पिनस प्रक्रियाओं और कशेरुका लैमिना को बेनकाब करने के लिए किसी भी शेष ऊतक को साफ करें। दर को स्टीरियो माइक्रोस्कोप के नीचे रखें और टी-7 और टी-8 कशेरुकी पर द्विपक्षीय रूप से पहलुओं को सावधानीपूर्वक काटने के लिए नाजुक हड्डी ट्रिमर्स का उपयोग करें। टी-8 और टी-9 कशेरुका लैमिना के बीच पृष्ठीय संयोजी ऊतक में एक मिलीमीटर सतही कटौती करने के लिए एक स्केलपेल का उपयोग करें, जिसमें ध्यान रखा जाए कि अंतर्निहित कॉर्ड को घायल न करें और टी-8 कशेरुका की स्पिनस प्रक्रिया को हटाने के लिए हड्डी ट्रिमर का उपयोग करें।टी-7 स्पिनस प्रक्रिया पर सावधानीपूर्वक क्लैंप किए गए घुमावदार हेमोस्टेटिक संदंश के साथ, टी-8 लैमिना के कौडल छोर को लगभग 20 डिग्री तक घुमाएं और टी-8 लैमिना के तहत हड्डी ट्रिमर डालें। रीढ़ की हड्डी को बेनकाब करने के लिए ट्रांसवर्स प्रक्रियाओं के लिए कशेरुका लैमिना मध्य प्रदेश के बाईं और दाईं ओर कटौती को दोहराकर, लैमिना के साथ विस्तारित एक मिडलाइन कट बनाएं। उजागर रीढ़ की हड्डी में 2% लिडोकेन के ड्रिप 100 माइक्रोलीटर और टी-8 स्पाइनल सेगमेंट को ओवरलेइंग ड्यूरा को हटाने के लिए ठीक संदंश और इरिडेक्टॉमी कैंची का उपयोग करें।उजागर कॉर्ड के लिए लिडोकेन प्रशासन दोहराएं और उजागर टी-7 से टी-9 कशेरुका के बीच विस्तारित स्पिनस प्रक्रियाओं के बीच बनाई गई एक केंद्र रेखा के दृश्य द्वारा कॉर्ड के मिडलाइन की पहचान करें। रीढ़ की हड्डी को स्थिर करने के लिए ठीक संदंश का उपयोग करना, जानवर के एक तरफ मिडलाइन से रीढ़ की हड्डी को कम करने के लिए एक विच्छेदन चाकू का उपयोग करें, इस बात का ध्यान रखते हुए कि वेंट्रल साइड पर पूर्वकाल रीढ़ की धमनी के माध्यम से कटौती न करें। इरिडेक्टॉमी कैंची का उपयोग करके, रीढ़ की हड्डी के घाव पक्ष पर किसी भी शेष ऊतक के माध्यम से सावधानीपूर्वक कटौती की जाती है ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि वेंट्रल-पार्श्व चतुर्भुज उचित रूप से स्थानांतरित हो जाता है और एक बाँझ, लगभग छह बाय दो मिलीमीटर खारा लथपथ हेमोस्टेटिक स्पंज को रीढ़ की हड्डी के ऊपर उजागर गुहा में रखते हैं।फिर, मांसपेशियों की परतों और चीरा साइट के आसपास की त्वचा को बंद करने के लिए 4-ओ पॉलीग्लेक्टिन 910 टांके का उपयोग करें और चूहे को पूर्ण वसूली तक निगरानी के साथ गर्मी के दीपक के नीचे गर्म वातावरण में रखें। व्यवहार परीक्षण के लिए उपयुक्त प्रयोगात्मक समय बिंदु पर, चूहों को क्षेत्र में आदी होने के बाद, वीडियो रिकॉर्डिंग शुरू करें और लोकोमोटर गतिविधि को प्रोत्साहित करने के लिए मंद प्रकाश स्थितियों के तहत, क्षेत्र के केंद्र में चूहे रखें। चूहे को कम से कम चार मिनट के लिए पता लगाने की अनुमति दें, चूहे को वापस अखाड़े के केंद्र में ले जाने दें जब यह लोकोमोशन को बढ़ावा देने के लिए 20 सेकंड से अधिक समय तक स्थिर रहता है।फिर, रिकॉर्ड किए गए परीक्षण सत्र के लोकोमोटर प्रदर्शन को स्कोर करें। आर्टिकुलर अंग आंदोलनों के लिए, टखने, घुटने और कूल्हे के लिए अलग से सहज लोकोमोशन के दौरान हिंडलिब संयुक्त आंदोलनों को स्कोर करें, या तो सामान्य, मामूली या अनुपस्थित के रूप में। वजन समर्थन के लिए, हिंडलिब एक्सटेंसर मांसपेशियों की क्षमता का मूल्यांकन करने के लिए अनुबंध और लोडेड शरीर के वजन का समर्थन जब अंग के लिए जमीन पर है जब चूहा स्थिर है, साथ ही सक्रिय लोकोमोशन के दौरान ।अंक की स्थिति के लिए, हिंडलिब अंकों की स्थिति का मूल्यांकन करें जबकि चूहा स्थिर और लोकोमोशन के दौरान है। कदम पैरामीटर को केवल तभी पूरा करें जब चूहा प्रारंभिक संपर्क के समय हिंडलिम्ब पंजा प्लेसमेंट के अभिविन्यास को रेटिंग देकर अपने शरीर के वजन का समर्थन कर सकता है और कदम के दौरान स्विंग चरण की तरलता के अलावा जमीन से लिफ्ट पर। पूर्वअलम्ब/हिंडलिम्ब समन्वय पैरामीटर को तभी पूरा करें जब परीक्षण के दौरान लगातार चार कदम हों और यदि अंग सक्रिय रूप से शरीर के वजन का समर्थन कर सकते हैं ।लोकोमोशन के दौरान पूंछ की स्थिति का मूल्यांकन करें या तो ऊपर या नीचे। फिर प्रत्येक पैरामीटर से व्यक्तिगत स्कोर जोड़ें ताकि प्रत्येक हिंडलिब के लिए अधिकतम 20 अंक प्रदान किए जा सकें। प्रयोगात्मक समूहों के बीच घाव के आकार का आकलन और तुलना करने के लिए, रीढ़ की हड्डी के कुल क्रॉस-सेक्शन के प्रतिशत के रूप में घाव के अधिकतम क्षेत्र की गणना रीढ़ की हड्डी के वर्गों के हिस्टोलॉजिकल धुंधला के साथ आसानी से की जा सकती है।उदाहरण के लिए, चूहों के बीच साझा अधिकतम घाव क्षेत्र के अनुपात के ओवरले के साथ बाएं हेमिकॉर्ड के इस प्रतिनिधि घाव ने क्रॉस-सेक्शनल कॉर्ड क्षेत्र के लगभग 47% के औसत घाव आकार का प्रदर्शन किया। बाईं ओर हेमिक्शन के बाद पहले पांच हफ्तों में बरकरार राज्य में लोकोमोटर प्रदर्शन में ये प्रतिनिधि परिवर्तन सर्जरी के बाद पहले तीन हफ्तों के दौरान जानवर के बाएं हिंडलिम्ब में लोकोमोशन की एक महत्वपूर्ण हानि प्रदर्शित करते हैं। प्रक्रिया के बाद दो सप्ताह तक सही हिंडलंब में लोकोमोशन के स्तर में सुधार देखा जाता है।याद रखने के लिए सबसे महत्वपूर्ण बातें यह हैं कि एक सफल प्रोटोकॉल के लिए हेमसेक्शन और उचित पोस्ट-सर्जिकल पशु देखभाल और निगरानी के लिए स्पाइनल मिडलाइन की सटीक पहचान आवश्यक है। यह व्यवहार मूल्यांकन लोकोमोटर वसूली पर ब्याज के विशिष्ट प्रश्न को संबोधित करने के लिए विशेष परीक्षण के साथ पूरक के लिए ऊपरी पैरेट्रेकोर्विल सूचकांकों के लिए स्क्रीन करने के लिए एक आदर्श प्रोटोकॉल प्रदान करता है।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Dissection and Culture of Commissural Neurons from Embryonic Spinal Cord

विच्छेदन और भ्रूणीय स्पाइनल कॉर्ड से Commissural न्यूरॉन्स की संस्कृति

Commissural neurons have been widely used to investigate the mechanisms underlying axon guidance during embryonic spinal cord development. The cell bodies ...

Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication

कोशिकी सक्शन इलेक्ट्रोड निर्माण: स्पाइनल कॉर्ड इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी द्वितीय

Development of neural circuitries and locomotion can be studied using neonatal rodent spinal cord central pattern generator (CPG) behavior. We demonstrate ...

Spinal Cord Transection in the Larval Zebrafish

लार्वा zebrafish में रीढ़ की हड्डी transection

Mammals fail in sensory and motor recovery following spinal cord injury due to lack of axonal regrowth below the level of injury as well as an inability ...

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

An Ex Vivo Laser-induced Spinal Cord Injury Model to Assess Mechanisms of Axonal Degeneration in Real-time

एक<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; लेजर प्रेरित स्पाइनल कॉर्ड चोट मॉडल वास्तविक समय में axonal अध: पतन के तंत्र का आकलन करने के लिए

Injured CNS axons fail to regenerate and often retract away from the injury site. Axons spared from the initial injury may later undergo secondary axonal ...

Diffusion Imaging in the Rat Cervical Spinal Cord

चूहा ग्रीवा रीढ़ की हड्डी में प्रसार इमेजिंग

Magnetic resonance imaging (MRI) is the state of the art approach for assessing the status of the spinal cord noninvasively, and can be used as a ...

Spinal Cord Neurons Isolation and Culture from Neonatal Mice

नवजात शिशुओं से स्पाइनल कॉर्ड न्यूरॉन्स अलगाव और संस्कृति

We present a protocol for the isolation and culture of spinal cord neurons. The neurons are obtained from neonatal C57BL/6 mice and are isolated on ...

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

Imaging Neural Activity in the Primary Somatosensory Cortex Using Thy1-GCaMP6s Transgenic Mice

इमेजिंग तंत्रिका गतिविधि प्राथमिक Somatosensory प्रांतस्था का उपयोग Thy1-GCaMP6s ट्रांसजेनिक चूहों में

The mammalian brain exhibits marked symmetry across the sagittal plane. However, detailed description of neural dynamics in symmetric brain regions in ...

An In Vivo Duo-color Method for Imaging Vascular Dynamics Following Contusive Spinal Cord Injury

An In Vivo Duo-color Method for Imaging Vascular Dynamics Following Contusive Spinal Cord Injury

Vivo में एक डुओ-रंग विधि इमेजिंग संवहनी गतिशीलता के लिए निंनलिखित Contusive रीढ़ की हड्डी में चोट

Spinal cord injury (SCI) causes significant vascular disruption at the site of injury. Vascular pathology occurs immediately after SCI and continues ...

Laminectomy and Spinal Cord Window Implantation in the Mouse

माउस में लेमिनेक्टॉमी और स्पाइनल कॉर्ड विंडो प्रत्यारोपण

This protocol describes a method for spinal cord laminectomy and glass window implantation for in vivo imaging of the mouse spinal cord. An integrated ...

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

एक मसूर का सीधा इंजेक्शन वेक्टर चूहे रीढ़ की हड्डी में कई मोटर रास्ते पर प्रकाश डाला गया

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...