Name: dual bioluminescence imaging of tumor progression and angiogenesis
Uploaded: 2019-08-01T13:00:00
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Cette recherche a été appuyée par le National Key R-D Program of China (2017YFA0103200), la National Natural Science Foundation of China (81671734) et les principaux projets du Programme de soutien scientifique et technologique de Tianjin (18YFZCSY00010), les fonds de recherche fondamentale pour les Universités centrales (63191155). Nous reconnaissons les révisions de Gloria Nance, qui ont été utiles pour améliorer la qualité de notre manuscrit.

Les expériences doivent être conformes aux réglementations nationales et institutionnelles concernant l'utilisation des animaux à des fins de recherche. Les autorisations pour réaliser des expériences doivent être obtenues. Le traitement des animaux et les procédures expérimentales de l'étude adhèrent aux lignes directrices du Comité des soins et de l'utilisation des animaux de l'Université de Nankai qui sont conformes aux Lignes directrices pour les soins aux animaux approuvées par les National Institutes ...

<ol>
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R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Red-emitting+chimeric+firefly+luciferase+for+in+vivo+imaging+in+low+ATP+cellular+environments.">Red-emitting chimeric firefly luciferase for in vivo imaging in low ATP cellular environments.</a> Analytical Biochemistry. 534, 36-39 (2017).</li><li>McLatchie, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+sensitive+in+vivo+imaging+of+Trypanosoma+brucei+expressing+&amp;#34;red-shifted&amp;#34;+luciferase.">Highly sensitive in vivo imaging of Trypanosoma brucei expressing &amp;#34;red-shifted&amp;#34; luciferase.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 7, e2571 (2013).</li></ol>

Dans ce protocole, une approche double BLI non-invasive est décrite pour surveiller le développement de tumeur et l'angiogenèse. Le système de journaliste BLI est d'abord développé, contenant le gène de suicide DeSV-ttk/GCV pour suivre la progression et la régression de tumeur in vivo par l'imagerie de Rluc. Pendant ce temps, l'angiogenèse tumorale est évaluée à l'aide de souris Vegfr2-Fluc-KI via l'imagerie Fluc. Ce modèle de souris tumeur-portant est capable de fournir une plate-forme pratique pour le dév...

L'angiogenèse est un processus essentiel dans la progression du cancer de petits néoplasmes localisés à de plus grandes tumeurs potentiellement métastatiques1,2. La corrélation entre la croissance tumorale et l'angiogenèse devient l'un des points d'emphase dans le domaine de la recherche en oncologie. Cependant, les méthodes traditionnelles de mesure des changements morphologiques ne parviennent pas à surveiller la progression de tumeur et l'angiogenèse simultanément chez les animaux vivants en utilisant une approche visualisée.
L'imagerie de bioluminescence (BLI) des cellules de tumeur est une méthode expérimentale particulièrement appropriée pour surveiller la croissance de tumeur en raison de sa non-invasiveness, sensibilité, et spécificité3,4,5,6 . La technologie BLI est basée sur le principe que la luciferase peut catalyser l'oxydation d'un substrat spécifique tout en émettant la bioluminescence. La luciférase exprimée dans les cellules tumorales implantées réagit avec le substrat injecté, qui peut être détecté par un système d'imagerie vivant, et les signaux reflètent indirectement les changements dans le nombre de cellules ou la localisation cellulaire in vivo6,7.
À l'exception de la croissance tumorale, l'angiogenèse tumorale (l'étape critique de la progression du cancer) peut également être visualisée par la technologie BLI à l'aide de souris transgéniques Vegfr2-Fluc-KI8,9,10. Le facteur de croissance endothéliale vasculaire (Vegf) récepteur 2 (Vegfr2), un type de récepteur Vegf, est principalement exprimé dans les cellules endothéliales vasculaires des souris adultes11. Chez les souris transgéniques Vegfr2-Fluc-KI, la séquence d'ADN de la luciferase Firefly (Fluc) est frappée dans le premier exon de la séquence endogène Vegfr2. En conséquence, le Fluc est exprimé (qui apparaît sous forme de signaux BLI) d'une manière identique au niveau d'angiogenèse chez la souris. Pour se développer au-delà de quelques millimètres de taille, la tumeur recrute de nouvelles vascularisations à partir de vaisseaux sanguins existants, qui expriment fortement le Vegfr2 déclenché par des facteurs de croissance des cellules tumorales1. Ceci ouvre la possibilité d'utiliser des souris transgéniques vegfr2-Fluc-KI pour surveiller non-invasivement l'angiogenèse de tumeur par BLI.
Dans ce protocole, un modèle de souris tumeur-portant est établi pour surveiller la progression de tumeur et l'angiogenèse dans une souris simple par le luciferase de Luciferase de Feu (Fluc) et la luciferase de Renilla (Rluc) image, respectivement (figure 1). Une lignée cellulaire 4T1 (4T1-RR) est créée qui exprime de façon stable le Rluc et la protéine fluorescente rouge (RP) pour retracer la croissance cellulaire par imagerie Rluc. Pour étudier plus avant les changements dynamiques de l'angiogenèse dans la progression et la régression de la tumeur, une autre lignée cellulaire 4T1 (4T1-RRT) est créée qui exprime le virus de l'herpès simplex de gène de suicide tronqué thymidine kinase (HSV-ttk), Rluc, et RFP. Par administration de ganciclovir (GCV), les cellules exprimant hSV-ttk sont sélectivement ablated. Basé sur ces lignées cellulaires, un modèle tumoral-portant dans les souris de Vegfr2-Fluc-KI est construit qui sert de modèle expérimental reliant la progression de tumeur et l'angiogenèse de tumeur in vivo.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL Tubes</td>
			<td>Axygen Scientific</td>
			<td>MCT-105-C-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Tubes</td>
			<td>Corning Glass Works</td>
			<td>601052-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>293T</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-3216</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4T1</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-2539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Dish</td>
			<td>Corning Glass Works</td>
			<td>430166</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well Plate</td>
			<td>Corning Glass Works</td>
			<td>3516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosafety Cabinet</td>
			<td>Shanghai Lishen Scientific</td>
			<td>Hfsafe-900LC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blasticidine S Hydrochloride (BSD)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>15205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Counting Kit-8</td>
			<td>MedChem Express</td>
			<td>HY-K0301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 Tegulated Incubator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>4111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coelenterazine (CTZ)</td>
			<td>NanoLight Technology</td>
			<td>479474</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-luciferin Potassium Salt</td>
			<td>Caliper Life Sciences</td>
			<td>119222</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM Medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11995500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>BIOIND</td>
			<td>04-001-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Ti-E/U/S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ganciclovir (GCV)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Y0001129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphics Software</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>Graphpad Prism 6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringe Needles</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>328421</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>691477H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lentiviral Packaging System</td>
			<td>Biosettia</td>
			<td>cDNA-pLV03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liposome</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11668019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Imaging Software</td>
			<td>Caliper Life Sciences</td>
			<td>Living Imaging Software 4.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Imaging System</td>
			<td>Caliper Life Sciences</td>
			<td>IVIS Lumina II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Medium</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>31985-070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Corning Glass Works</td>
			<td>R21031399</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polybrene</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H9268-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI1640 Medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11875500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SORVALL ST 16R Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Thermo Sorvall ST 16 ST16R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-low Temperature Refrigerator</td>
			<td>Haier</td>
			<td>DW-86L338</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XGI-8 Gas Anesthesia System</td>
			<td>XENOGEN Corporation</td>
			<td>7293</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dual bioluminescence imaging of tumor progression and angiogenesis

L'angiogenèse, comme un processus crucial de progression tumorale, est devenue un point chaud de recherche et la cible de la thérapie anti-tumorale. Cependant, il n'y a aucun modèle fiable pour tracer la progression et l'angiogenèse de tumeur simultanément d'une manière visuelle et sensible. L'imagerie par bioluminescence montre sa supériorité unique dans l'imagerie vivante en raison de ses avantages de sensibilité élevée, de forte spécificité et de mesure précise. Présenté ici est un protocole pour établir un modèle de souris tumeur-portant en injectant une renilla luciferase-étiquetée ligne de cellules de cancer du sein de monourine 4T1 dans la souris transgénique avec l'expression de luciferase de Firefly angiogenèse-induite. Ce modèle de souris fournit un outil valable pour surveiller simultanément la progression de tumeur et l'angiogenèse en temps réel par la double imagerie de bioluminescence dans une souris simple. Ce modèle peut être largement appliqué dans le criblage de drogue antitumoral et la recherche d'oncologie.

Dans cette expérience, un modèle de souris de cancer du sein a été établi utilisant des cellules 4T1 pour étudier la relation entre la croissance de tumeur et l'angiogenèse de tumeur (figure 1). Tout d'abord, deux lentivirus ont été emballés, qui portaient des séquences génétiques exprimant Rluc/RFP (LV-RR) et Rluc/RFP/HSV-ttk (LV-RRT), respectivement, comme indiqué précédemment7. Ensuite, deux lignées cellulaires 4T1 ...

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Dual Bioluminescence Imaging of Tumor Progression and Angiogenesis

Double imagerie de bioluminescence de la progression tumorale et de l'angiogenèse

Ce protocole décrit l'établissement d'un modèle de souris tumeur-portant pour surveiller la progression de tumeur et l'angiogenèse en temps réel par la formation image double de bioluminescence.

Angiogenesis, as a crucial process of tumor progression, has become a research hotspot and target of anti-tumor therapy. However, there is no reliable ...

L’angiogenèse joue un rôle important dans la métastase et la progression tumorales. Dans ce protocole, nous utiliserons la méthode d’imagerie de bioluminescence double pour surveiller la progression dynamique de tumeur et l’angiogenèse dans un modèle de souris du cancer du sein. Dans ce modèle, nous pouvons suivre la croissance de tumeur et l’angiogenèse simultanément dans la souris simple par luciferase de Firefly et imagerie de luciferase de Renilla, respectivement.Ce modèle peut être largement appliqué dans le dépistage des médicaments antitumorals et la recherche en oncologie. Ce modèle de double bioluminescence peut être utilisé pour suivre la progression tumorale et la régression et pour détecter les processus moléculaires liés aux tumeurs en réponse aux stratégies thérapeutiques. L’angiogenèse est un processus crucial de progression tumorale.Par conséquent, la surveillance de la progression tumorale et de l’angiogenèse d’une manière visuelle et sensible est nécessaire pour développer des traitements tumoraux efficaces. Les procédures seront démontrées par Kaiyue Zhang, Chen Wang et Shang Chen, étudiants de notre laboratoire. Pour l’emballage du lentivirus et les semences de production une fois 10 à la sixième des 293T cellules en deux millilitres de DMEM complétées par 10% de sérum bovin fœtal par puits dans une plaque de six puits pour la culture de nuit dans un incubateur humidifié à 37 degrés Celsius et 5% de dioxyde de carbone.Le lendemain matin, mélangez 7,5 microlitres de liposome avec 250 microlitres de minimal essential medium dans deux tubes séparés de 1,5 millilitre pour une incubation de cinq minutes à température ambiante. Pour préparer les solutions d’ADN, ajoutez le vecteur RR du lentivirus plasmide et les plasmides d’aide à 250 microlitres de minimal essential medium dans des tubes individuels de 1,5 millilitre comme indiqué dans le tableau. À la fin de l’incubation, ajouter délicatement les solutions RR d’ADN aux suspensions liposome d’une manière goutte-sage et permettre à l’ADN de se lier aux membranes lipidiques pendant 20 minutes à température ambiante.Pendant que le mélange est en incubation, remplacez le supernatant de la culture cellulaire 293T par un millilitre de milieu de culture frais, et ajoutez doucement 0,5 millilitres du mélange d’ADN liposome approprié à chaque puits. Retourner les cellules à l’incubateur de culture cellulaire pendant 12 à 16 heures avant de remplacer le supernatant dans chaque puits par un millilitre de milieu de culture frais complété par des antibiotiques. Après 36 heures supplémentaires d’incubation, mettre les supernatants en un tube conique par souche de lentivirus pour sédimenter les cellules 293T par centrifugation.Transférez ensuite les supernatants contenant du RR de lentivirus dans des tubes de stockage stériles de polypropylène de 1,5 millilitre pour le stockage à moins 80 degrés Celsius. Pour la transduction lentiviral pour l’expression de gène dans les cellules mammaires de tumeur 4T1, remplacez le supernatant dans chaque puits d’une plaque de culture cellulaire de 4T1 de six puits avec un millilitre de milieu frais de culture cellulaire RPMI-basé complété avec le sérum bovin foetal et un millilitre du stock lentiviral. Ajouter ensuite huit microgrammes par millilitre de polybrene à chaque puits, et pipette doucement à quelques reprises pour mélanger.Centrifuger la plaque pour aider à augmenter l’efficacité de transduction, et retourner les cellules à l’incubateur de culture cellulaire pendant quatre à 12 heures. À la fin de l’incubation, remplacer le supernatant dans chaque puits par un milieu de culture frais complété par du sérum et des antibiotiques pour éliminer les particules lentivirales et le polybrene. Pour sélectionner les cellules induites par le lentivirus, passer les cultures cellulaires 4T1 transduced à un rapport un à trois à un à un à quatre avec le milieu de sélection, en changeant le milieu tous les deux à trois jours.Après sept jours de sélection de culture moyenne, visualisez les cultures cellulaires transduced sous un microscope inversé de contraste de phase de fluorescence et comptez le nombre de cellules protéiques fluorescentes rouges positives ou RFP-4T1 et toutes les cellules 4T1 dans trois champs de vision pour estimer le rapport RFP-positif. Pour mettre en place un modèle de souris porteuse de tumeurs, lavez les cultures cellulaires transduced à 80 % confluentes avec PBS avant de détacher les cellules de deux millilitres de trypsine-EDTA par plaque de culture de 60 millimètres. Lorsque les cellules se sont levées du fond de la plaque arrêter la réaction avec cinq à 10 millilitres de sérum complété milieu par plaque.Et transférer les cultures dans des tubes de centrifugeuse individuels de 15 millilitres pour le comptage. Diluer les cellules à une fois 10 à la sixième cellule pour 100 microlitres de milieu de culture sans concentration sérique. Et injecter sous-cutanément 100 microlitres de la lignée cellulaire 4T1-RR dans l’épaule gauche d’une souris modèle tumorale anesthésiée, et 100 microlitres de la lignée cellulaire 4T1-RRT dans l’épaule droite de la même souris.Après les injections, placez chaque souris dans une zone de récupération appropriée avec un support thermique jusqu’à ce qu’elle soit complètement récupérée. Palpez les masses tumorales tous les jours pendant sept jours pour confirmer que les souris portent une tumeur. Au septième jour post-implantation, injecter intraperitoneally 50 microgrammes par kilogramme de Ganciclovir dans chaque souris tumeur-roulement deux fois par jour jusqu’à la fin de l’expérience.Pour la croissance tumorale, ouvrez le système d’imagerie vivante. Initialisez le logiciel Living Imaging et initialisez le système. Pendant que le système est en train d’initialiser, utilisez une seringue à insuline pour injecter chaque souris pour être photographiée avec le volume approprié de coelenterazine dans la rétrobulbar.Placez les souris injectées dans la chambre de la caméra et obtenez immédiatement plusieurs photos de la souris dorsalement pour acquérir les signaux renilla luciferase des cellules 4T1 jusqu’à ce que les signaux bioluminescents disparaissent. 10 minutes après l’imagerie renilla luciferase, utilisez une seringue à insuline pour injecter intraperitoneally le volume approprié de D-luciferin dans chaque animal. 10 minutes après l’injection de D-luciferin, placez les souris dans la chambre de la caméra et obtenez plusieurs images de la dorsale de la souris pour acquérir les signaux luciferase Firefly de l’angiogenèse.Après la transduction de lentivirus, plus de 99% des cellules sont RFP-positives sans différences dans la morphologie de culture cellulaire observée entre les deux lignées cellulaires transduced. Par la suite, l’imagerie par bioluminescence des cellules transduced révèle que les deux lignées cellulaires émettent de forts signaux bioluminescents d’une force similaire. Après injection sous-cutanée des lignées cellulaires transduites dans un modèle transgénique de souris porteuses de tumeurs, la croissance tumorale induite par l’angiogenèse peut être évaluée par des signaux luciferase Firefly en présence de D-luciferin chez le même animal.À sept jours après implantation, l’administration de Ganciclovir induit la mort dans les cellules 4T1-RRT ayant pour résultat une réduction dramatique du signal de luciferase de Renilla dans les tumeurs établies par ces cellules. Les signaux luciferase firefly augmentent également en conjonction avec une augmentation de l’expression et de la diminution de Renilla luciferase après le déclin de luciferase. Pris ensemble, ces résultats suggèrent qu’il y ait une corrélation directe entre l’angiogenèse de tumeur et la croissance de tumeur.En effet, la mort de cellule de tumeur ganciclovir-induite peut mener à une inhibition de l’angiogenèse de tumeur. En outre, l’immunostaining pour le récepteur de facteur de croissance endothélial anti-vasculaire II, comme marqueur de l’angiogenèse, indique une structure microvasculaire plus significativement établie dans les sections de tissu de tumeur de 4T1-RR que dans les sections des tumeurs de 4T1-RRT, compatibles au déclin du signal luciferase de Firefly observé après administration de Ganciclovir. L’étape la plus critique du protocole est l’utilisation de deux types de luciferase, tels que FLuc et RLuc pour le suivi simultané des cellules et de l’angiogenèse.Cette technologie pourrait être utilisée pour traiter les cellules cancéreuses à différents endroits, et elle peut être largement utilisée dans les modèles de cancer du virus. Ce modèle de souris permettant la croissance tumorale et les effets anti-tumoraux du système de suivi HSV-ttk/GCV à visualiser dynamiquement chez un animal vivant. Une installation de niveau II de biosécurité est nécessaire pour prévenir une transfection par lentivirus, car le média contient des particules de lentivirus qui pourraient être nocives pour l’homme.

Research

JoVE Journal

Medicine

Dual-mode Imaging of Cutaneous Tissue Oxygenation and Vascular Function

Double mode d&#39;imagerie de l&#39;oxygénation des tissus cutanés et la fonction vasculaire

Accurate assessment of cutaneous tissue oxygenation and vascular function is important for appropriate detection, staging, and treatment of many health ...

Recherche

Médecine

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In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

In vivo double Substrat Bioluminescent Imaging

Our understanding of how and when breast cancer cells transit from established primary tumors to metastatic sites has increased at an exceptional rate ...

MAME Models for 4D Live-cell Imaging of Tumor: Microenvironment Interactions that Impact Malignant Progression

Modèles de MAME pour 4D imagerie des cellules vivantes de la tumeur: Interactions microenvironnement Progression impact malin

We have developed 3D coculture models, which we term MAME (mammary architecture and microenvironment engineering), and used them for live-cell imaging in ...

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

In vivo Imaging of Tumor Angiogenesis using Fluorescence Confocal Videomicroscopy

Dans l&#39;imagerie in vivo de angiogenèse tumorale en utilisant la fluorescence confocale vidéomicroscopie

Fibered confocal fluorescence in vivo imaging with a fiber optic bundle uses the same principle as fluorescent confocal microscopy. It can excite ...

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel haute résolution<em&gt; In vivo</em&gt; Technique d&#39;imagerie pour étudier la réponse dynamique des structures intracrâniennes à la croissance tumorale et de thérapeutique

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Décollement de la rétine modèle chez les rongeurs par injection sous-rétinienne de hyaluronate de sodium

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Candida albicans Biofilm Development on Medically-relevant Foreign Bodies in a Mouse Subcutaneous Model Followed by Bioluminescence Imaging

Candida albicans Biofilm Development on Medically-relevant Foreign Bodies in a Mouse Subcutaneous Model Followed by Bioluminescence Imaging

Candida albicans biofilm développement sur ​​les organismes étrangères médicalement pertinents dans une souris modèle sous-cutanée Suivi par bioluminescence Imaging

Candida albicans biofilm development on biotic and/or abiotic surfaces represents a specific threat for hospitalized patients. So far, C. albicans ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Mise en place d&#39;un modèle de xénogreffe humain de myélome multiple dans le poulet pour étudier la croissance tumorale, l&#39;invasion et l&#39;angiogenèse

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...