Name: dual bioluminescence imaging of tumor progression and angiogenesis
Uploaded: 2019-08-01T13:00:00
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Esta investigación fue apoyada por el Programa Nacional Clave de I+D de China (2017YFA0103200), la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (81671734), y los Proyectos Clave del Programa de Apoyo a la Ciencia y Tecnología de Tianjin (18YFZCSY00010), Fondos De Investigación universidades centrales (63191155). Reconocemos las revisiones de Gloria Nance, que fueron valiosas para mejorar la calidad de nuestro manuscrito.

Los experimentos deben cumplir con las regulaciones nacionales e institucionales relativas al uso de animales con fines de investigación. Se deben obtener permisos para llevar a cabo experimentos. El tratamiento de los animales y los procedimientos experimentales del estudio se adhieren a las Directrices del Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Nankai que se ajustan a las Directrices para el Cuidado de los Animales aprobadas por los Institutos Nacionales de Salud (NIH).
1. ...

<ol>
	<li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+angiogenesis:+therapeutic+implications.">Tumor angiogenesis: therapeutic implications.</a> The New England Journal of Medicine. 285, 1182-1186 (1971).</li><li>Kerbel, R. 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W., Cao, Y., Moeller, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cycling+hypoxia+and+free+radicals+regulate+angiogenesis+and+radiotherapy+response.">Cycling hypoxia and free radicals regulate angiogenesis and radiotherapy response.</a> Nature Reviews. Cancer. 8, 425-437 (2008).</li><li>Wigerup, C., Pahlman, S., Bexell, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+targeting+of+hypoxia+and+hypoxia-inducible+factors+in+cancer.">Therapeutic targeting of hypoxia and hypoxia-inducible factors in cancer.</a> Pharmacology &amp; Therapeutics. 164, 152-169 (2016).</li><li>Wong, P. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-action+combination+therapy+enhances+angiogenesis+while+reducing+tumor+growth+and+spread.">Dual-action combination therapy enhances angiogenesis while reducing tumor growth and spread.</a> Cancer Cell. 27, 123-137 (2015).</li><li>Mezzanotte, L., van &#39;t Root, M., Karatas, H., Goun, E. A., Lowik, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+Molecular+Bioluminescence+Imaging:+New+Tools+and+Applications.">In vivo Molecular Bioluminescence Imaging: New Tools and Applications.</a> Trends in Biotechnology. 35, 640-652 (2017).</li><li>Du, W., Tao, H., Zhao, S., He, Z. X., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+applications+of+molecular+imaging+in+cardiovascular+disease+and+stem+cell+therapy.">Translational applications of molecular imaging in cardiovascular disease and stem cell therapy.</a> Biochimie. 116, 43-51 (2015).</li><li>Liu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis,+biodistribution,+and+imaging+of+PEGylated-acetylated+polyamidoamine+dendrimers.">Synthesis, biodistribution, and imaging of PEGylated-acetylated polyamidoamine dendrimers.</a> Journal of Nanoscience and Nanotechnology. 14, 3305-3312 (2014).</li><li>Branchini, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Red-emitting+chimeric+firefly+luciferase+for+in+vivo+imaging+in+low+ATP+cellular+environments.">Red-emitting chimeric firefly luciferase for in vivo imaging in low ATP cellular environments.</a> Analytical Biochemistry. 534, 36-39 (2017).</li><li>McLatchie, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+sensitive+in+vivo+imaging+of+Trypanosoma+brucei+expressing+&amp;#34;red-shifted&amp;#34;+luciferase.">Highly sensitive in vivo imaging of Trypanosoma brucei expressing &amp;#34;red-shifted&amp;#34; luciferase.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 7, e2571 (2013).</li></ol>

En este protocolo, se describe un enfoque de BLI dual no invasivo para monitorear el desarrollo tumoral y la angiogénesis. El sistema de reporteros bli se desarrolla por primera vez, que contiene el gen suicida HSV-ttk/GCV para rastrear la progresión del tumor y la regresión in vivo por imágenes Rluc. Mientras tanto, la angiogénesis tumoral se evalúa utilizando ratones Vegfr2-Fluc-KI a través de imágenes de Fluc. Este modelo de ratón con tumores es capaz de proporcionar una plataforma práctica para el desarroll...

La angiogénesis es un proceso esencial en la progresión del cáncer de neoplasias pequeñas y localizadas a tumores más grandes y potencialmente metastásicos1,2. La correlación entre el crecimiento tumoral y la angiogénesis se convierte en uno de los puntos de énfasis en el campo de la investigación oncológica. Sin embargo, los métodos tradicionales para medir los cambios morfológicos no monitorean la progresión tumoral y la angiogénesis simultáneamente en animales vivos utilizando un enfoque visualizado.
La imagen de bioluminiscencia (BLI) de las células tumorales es un método experimental particularmente apropiado para controlar el crecimiento tumoral debido a su no invasividad, sensibilidad y especificidad3,4,5,6 . La tecnología BLI se basa en el principio de que la luciferasa puede catalizar la oxidación de un sustrato específico mientras emite bioluminiscencia. La luciferasa expresada en células tumorales implantadas reacciona con el sustrato inyectado, que puede ser detectado por un sistema de imágenes vivo, y las señales reflejan indirectamente los cambios en el número de células o localización celular in vivo6,7.
A excepción del crecimiento tumoral, la angiogénesis tumoral (el paso crítico en la progresión del cáncer) también se puede visualizar a través de la tecnología BLI utilizando ratones transgénicos Vegfr2-Fluc-KI8,9,10. El receptor 2 del factor de crecimiento endotelial vascular (Vegf), un tipo de receptor Vegf, se expresa principalmente en las células endoteliales vasculares de ratones adultos11. En los ratones transgénicos Vegfr2-Fluc-KI, la secuencia de ADN de La luciérnaga de luciérnaga (Fluc) se golpea en el primer exón de la secuencia endógena Vegfr2. Como resultado, el Fluc se expresa (que aparece como señales BLI) de una manera que es idéntica al nivel de angiogénesis en ratones. Para crecer más allá de unos pocos milímetros de tamaño, el tumor recluta nuevas vasculaturas de los vasos sanguíneos existentes, que expresan altamente el Vegfr2 desencadenado por factores de crecimiento de las células tumorales1. Esto abre la posibilidad de usar ratones transgénicos Vegfr2-Fluc-KI para monitorear no invasivamente la angiogénesis tumoral por BLI.
En este protocolo, se establece un modelo de ratón con tumores para monitorear la progresión tumoral y la angiogénesis en un solo ratón a través de la luciferasa de luciérnaga (Fluc) y la imagen de Renilla luciferase (Rluc), respectivamente (Figura1). Se crea una línea celular 4T1 (4T1-RR) que expresa establemente Rluc y proteína fluorescente roja (RFP) para rastrear el crecimiento celular por imágenes Rluc. Para investigar más a fondo los cambios dinámicos de la angiogénesis en la progresión y regresión del tumor, se crea otra línea celular 4T1 (4T1-RRT) que expresa el virus del herpes simple suicida truncado por timidasquina (HSV-ttk), Rluc y RFP. Mediante la administración de ganciclovir (GCV), las células que expresan el VHS-ttk se ablan selectivamente. Basado en estas líneas celulares, se construye un modelo de portador de tumores en ratones Vegfr2-Fluc-KI que sirve como un modelo experimental que une la progresión tumoral y la angiogénesis tumoral in vivo.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.25% Trypsin-0.53 mM EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL Tubes</td>
			<td>Axygen Scientific</td>
			<td>MCT-105-C-S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Tubes</td>
			<td>Corning Glass Works</td>
			<td>601052-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>293T</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-3216</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4T1</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-2539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Dish</td>
			<td>Corning Glass Works</td>
			<td>430166</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well Plate</td>
			<td>Corning Glass Works</td>
			<td>3516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosafety Cabinet</td>
			<td>Shanghai Lishen Scientific</td>
			<td>Hfsafe-900LC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blasticidine S Hydrochloride (BSD)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>15205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Counting Kit-8</td>
			<td>MedChem Express</td>
			<td>HY-K0301</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 Tegulated Incubator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>4111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coelenterazine (CTZ)</td>
			<td>NanoLight Technology</td>
			<td>479474</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-luciferin Potassium Salt</td>
			<td>Caliper Life Sciences</td>
			<td>119222</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM Medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11995500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>BIOIND</td>
			<td>04-001-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Ti-E/U/S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ganciclovir (GCV)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Y0001129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphics Software</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>Graphpad Prism 6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringe Needles</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>328421</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>691477H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lentiviral Packaging System</td>
			<td>Biosettia</td>
			<td>cDNA-pLV03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liposome</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11668019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Imaging Software</td>
			<td>Caliper Life Sciences</td>
			<td>Living Imaging Software 4.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Imaging System</td>
			<td>Caliper Life Sciences</td>
			<td>IVIS Lumina II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Medium</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>31985-070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline (PBS)</td>
			<td>Corning Glass Works</td>
			<td>R21031399</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polybrene</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H9268-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI1640 Medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>C11875500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SORVALL ST 16R Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>Thermo Sorvall ST 16 ST16R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-low Temperature Refrigerator</td>
			<td>Haier</td>
			<td>DW-86L338</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XGI-8 Gas Anesthesia System</td>
			<td>XENOGEN Corporation</td>
			<td>7293</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

dual bioluminescence imaging of tumor progression and angiogenesis

La angiogénesis, como un proceso crucial de progresión tumoral, se ha convertido en un punto crítico de investigación y objetivo de la terapia antitumoral. Sin embargo, no existe un modelo fiable para rastrear la progresión tumoral y la angiogénesis simultáneamente de una manera visual y sensible. Las imágenes de bioluminiscencia muestran su superioridad única en las imágenes vivas debido a sus ventajas de alta sensibilidad, fuerte especificidad y medición precisa. Aquí se presenta un protocolo para establecer un modelo de ratón con tumores mediante la inyección de una línea 4T1 de células de cáncer de mama murina con etiqueta de Renilla luciferasse en el ratón transgénico con expresión de luciferasa de luciérnaga inducida por angiogénesis. Este modelo de ratón proporciona una valiosa herramienta para monitorear simultáneamente la progresión tumoral y la angiogénesis en tiempo real mediante imágenes de bioluminiscencia dual en un solo ratón. Este modelo puede aplicarse ampliamente en la detección de fármacos antitumorales y la investigación oncológica.

En este experimento, se estableció un modelo de ratón de cáncer de mama utilizando células 4T1 para investigar la relación entre el crecimiento tumoral y la angiogénesis tumoral (Figura 1). En primer lugar, se empaquetaron dos lentivirus, que llevaban secuencias genéticas que expresaban Rluc/RFP (LV-RR) y Rluc/RFP/HSV-ttk (LV-RRT), respectivamente, como se informó anteriormente7. Luego, dos líneas celulares 4T1 diferentes, lla...

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Dual Bioluminescence Imaging of Tumor Progression and Angiogenesis

Imagen de bioluminiscencia dual de la progresión tumoral y la angiogénesis

Este protocolo describe el establecimiento de un modelo de ratón con tumores para monitorear la progresión tumoral y la angiogénesis en tiempo real mediante imágenes de bioluminiscencia dual.

Angiogenesis, as a crucial process of tumor progression, has become a research hotspot and target of anti-tumor therapy. However, there is no reliable ...

La angiogénesis desempeña un papel importante en la metástasis y progresión tumoral. En este protocolo, utilizaremos el método de imágenes de bioluminiscencia dual para monitorear la progresión tumoral dinámica y la angiogénesis en un modelo de ratón de cáncer de mama. En este modelo, podemos rastrear el crecimiento tumoral y la angiogénesis simultáneamente en el solo ratón a través de firefly luciferase y Renilla luciferase imaging, respectivamente.Este modelo puede aplicarse ampliamente en la investigación de detección de fármacos antitumorales y oncología. Este modelo dual de bioluminiscencia se puede utilizar para realizar un seguimiento de la progresión y regresión tumoral y para detectar procesos moleculares relacionados con tumores en respuesta a estrategias terapéuticas. La angiogénesis es un proceso crucial de progresión tumoral.Por lo tanto, es necesario controlar la progresión tumoral y la angiogénesis de manera visual y sensible para desarrollar tratamientos tumorales eficaces. Los procedimientos serán demostrados por Kaiyue Zhang, Chen Wang y Shang Chen, estudiantes de nuestro laboratorio. Para el envasado y la producción de lentivirus de una a la 10 a la sexta de las células 293T en dos mililitros de DMEM complementados con un 10% de suero bovino fetal por pozo en una placa de seis pozos para cultivo nocturno en una incubadora humidificada a 37 grados centígrados y 5% dióxido de carbono.A la mañana siguiente mezcla 7,5 microlitros de liposoma con 250 microlitros de Minimal Essential Medium en dos tubos separados de 1,5 mililitros para una incubación de cinco minutos a temperatura ambiente. Para preparar las soluciones de ADN añadir el vector de lentivirus RR plásmido de plásmido y plásmidos auxiliares de plásmido a 250 microlitros de Minimal Essential Medium en tubos individuales de 1,5 mililitros como se describe en la tabla. Al final de la incubación añadir suavemente las soluciones de ADN RR a las suspensiones liposomas de una manera gota y permitir que el ADN se una a las membranas lipídicas durante 20 minutos a temperatura ambiente.Mientras la mezcla está incubando, reemplace el sobrenadante del cultivo celular 293T con un mililitro de medio de cultivo fresco, y agregue suavemente 0,5 mililitros de la mezcla de ADN liposoma apropiada a cada pozo. Devolver las células a la incubadora de cultivo celular durante 12 a 16 horas antes de reemplazar el sobrenadante en cada pozo con un mililitro de medio de cultivo fresco complementado con antibióticos. Después de 36 horas adicionales de incubación, acomoda los sobrenadantes en un tubo cónico por cepa de lentivirus para sedimentar las células 293T por centrifugación.A continuación, transfiera los sobrenadantes que contienen lentivirus RR a tubos individuales de almacenamiento de polipropileno estéril de 1,5 mililitros para su almacenamiento a menos 80 grados centígrados. Para la transducción lentiviral para la expresión génica en células tumorales mamarias 4T1, reemplace el sobrenadante en cada pozo de una placa de cultivo celular de seis pozos 4T1 por un mililitro de medio de cultivo celular fresco basado en RPMI complementado con suero bovino fetal y un mililitro de caldo lentiviral. A continuación, agregue ocho microgramos por mililitro de polibroo a cada pocóter, y pipetee suavemente unas cuantas veces para mezclar.Centrifugar la placa para ayudar a aumentar la eficiencia de la transducción, y devolver las células a la incubadora de cultivo celular durante cuatro a 12 horas. Al final de la incubación, reemplazar el sobrenadante en cada pozo con medio de cultivo fresco complementado con suero y antibióticos para eliminar cualquier partícula lentiviral y Polybrene. Para seleccionar las células transducidas por lentivirus, pasaje los cultivos celulares 4T1 transducidos en una relación de uno a tres a uno a cuatro con el medio de selección, cambiando el medio cada dos a tres días.Después de siete días de cultivo medio de selección, vea los cultivos celulares transducidos bajo un microscopio de contraste de fase invertida de fluorescencia y cuente el número de células de proteína fluorescente roja positivas o RFP-4T1 y todas las células 4T1 en tres campos de visión para estimar la relación RFP-positiva. Para configurar un modelo de ratón portador de tumores, lave 80%cultivos celulares transducidos con pbS antes de separar las células con dos mililitros de trippsina-EDTA por placa de cultivo de 60 milímetros. Cuando las células se han levantado de los fondos de la placa detener la reacción con cinco a 10 mililitros de suero suplementado medio por placa.Y transferir las culturas a tubos de centrífuga individuales de 15 mililitros para contar. Diluir las células a una vez 10 a la sexta célula por cada 100 microlitros de medio de cultivo sin concentración sérica. E inyecte por vía subcutánea 100 microlitros de la línea celular 4T1-RR en el hombro izquierdo de un ratón modelo anestesado portador de tumor, y 100 microlitros de la línea celular 4T1-RRT en el hombro derecho del mismo ratón.Después de las inyecciones, coloque cada ratón en un área de recuperación adecuada con un soporte térmico hasta que se recupere por completo. Palpa las masas tumorales todos los días durante siete días para confirmar que los ratones son portadores de tumores. En el día siete postimplantación, inyectar por vía intraperitoneal 50 microgramos por kilogramo de Ganciclovir en cada ratón portador de tumor dos veces al día hasta el final del experimento.Para el crecimiento del tumor, abra el Sistema de Imágenes Vivientes. Inicializar el software Living Imaging e inicializar el sistema. Mientras el sistema se está inicializando, utilice una jeringa de insulina para inyectar cada ratón para obtener una imagen del volumen adecuado de coelenterazina en el retrobulbar.Coloque los ratones inyectados en la cámara de la cámara e inmediatamente obtenga varias imágenes del ratón dorsalmente para adquirir las señales de Renilla luciferase de las células 4T1 hasta que las señales bioluminiscentes se desvanezcan. 10 minutos después de la toma de imágenes de Renilla luciferase, utilice una jeringa de insulina para inyectar por vía intraperitoneal el volumen adecuado de D-luciferina en cada animal. 10 minutos después de la inyección de D-luciferina, coloque los ratones en la cámara de la cámara y obtenga varias imágenes de la dorsal del ratón para adquirir las señales de Firefly luciferase de la angiogénesis.Después de la transducción del lentivirus, más del 99% de las células son RFP-positivas sin diferencias en la morfología del cultivo celular observada entre las dos líneas celulares transducidas. Posteriormente, las imágenes de bioluminiscencia de las células transducidas revelan que ambas líneas celulares emiten señales bioluminiscentes fuertes de una fuerza similar. Después de la inyección subcutánea de las líneas celulares transducidas en un modelo de ratón portador de tumor transgénico, el crecimiento tumoral inducido por la angiogénesis puede ser evaluado por señales de Firefly luciferase en presencia de D-luciferina en el mismo animal.A los siete días después de la implantación, la administración de Ganciclovir induce la muerte en las células 4T1-RRT, lo que resulta en una reducción dramática de la señal de Renilla luciferase en los tumores establecidos por estas células. Las señales de luciferasa de luciérnculo también aumentan junto con un aumento en la expresión de renilla luciferasa y disminución después de la disminución de la luciferasa. En conjunto, estos resultados sugieren que existe una correlación directa entre la angiogénesis tumoral y el crecimiento tumoral.De hecho, la muerte de células tumorales inducida por Ganciclovir puede conducir a una inhibición de la angiogénesis tumoral. Además, la inmunostaining para el receptor II del factor de crecimiento endotelial anti-vascular, como marcador de angiogénesis, revela una estructura microvascular más significativamente establecida en las secciones del tejido tumoral 4T1-RR que en secciones de tumores 4T1-RRT, consistente con la disminución de la señal de Firefly luciferasa observada después de la administración de Ganciclovir. El paso más crítico del protocolo es el uso de dos tipos de luciferasa, como FLuc y RLuc para el seguimiento simultáneo de las células y la angiogénesis.Esta tecnología podría ser utilizada para tratar las células cancerosas dentro de diferentes lugares, y se puede utilizar ampliamente en modelos de cáncer de virus. Este modelo de ratón permite visualizar dinámicamente el crecimiento tumoral y los efectos antitumorales del sistema de seguimiento HSV-ttk/GCV en un animal vivo. Se requiere una instalación de nivel II de bioseguridad para prevenir una transfección de lentivirus, ya que los medios contienen partículas de lentivirus que podrían ser perjudiciales para los seres humanos.

Research

JoVE Journal

Medicine

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Investigación

Medicina

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Imágenes in vivo de la angiogénesis tumoral usando fluorescencia confocal videomicroscopia

Fibered confocal fluorescence in vivo imaging with a fiber optic bundle uses the same principle as fluorescent confocal microscopy. It can excite ...

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

Una novela de alta resolución<em&gt; En vivo</em&gt; Técnica de escaneo para el Estudio de la respuesta dinámica de estructuras intracraneales al crecimiento del tumor y Terapéutica

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

Retinal Detachment Model in Rodents by Subretinal Injection of Sodium Hyaluronate

Desprendimiento de Retina modelo en roedores por inyección subretiniana de Hialuronato de Sodio

Subretinal injection of sodium hyaluronate is a widely accepted method of inducing retinal detachment (RD). However, the height and duration of RD or the ...

Candida albicans Biofilm Development on Medically-relevant Foreign Bodies in a Mouse Subcutaneous Model Followed by Bioluminescence Imaging

Candida albicans Biofilm Development on Medically-relevant Foreign Bodies in a Mouse Subcutaneous Model Followed by Bioluminescence Imaging

Candida albicans biopelícula Desarrollo de Cuerpos Extraños médicamente relevantes en un modelo de ratón subcutánea Seguido por bioluminiscencia Imaging

Candida albicans biofilm development on biotic and/or abiotic surfaces represents a specific threat for hospitalized patients. So far, C. albicans ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Establecimiento de un modelo de xenoinjerto Humano mieloma múltiple en el pollo para estudiar el crecimiento del tumor, la invasión y la angiogénesis

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...