Name: precision implementation of minimal erythema dose (med) testing to assess individual variation in human inflammatory response
Uploaded: 2019-10-03T13:30:00
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Questo lavoro è stato sostenuto da una sovvenzione del Virginia Tech College of Science Discovery Fund.

Tutti i metodi descritti di seguito, compreso l'uso di volontari umani, sono stati esaminati e approvati dal Comitato di revisione istituzionale locale (IRB) e sono conformi alla Dichiarazione di Helsinki e al rapporto Belmont. Tutti i partecipanti (N. 72) hanno firmato il consenso informato come indicato dal protocollo IRB. I criteri di inclusione/esclusione e le procedure di interruzione sono stati concepiti per massimizzare la sicurezza dei partecipanti e qualsiasi deviazione da queste procedure dovrebbe essere consid...

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	<li>Magnus, I. 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Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+measurement+of+skin+erythema+and+pigmentation:+new+means+of+implementation+of+diffuse+reflectance+spectroscopy+with+a+commercial+instrument.">In vivo measurement of skin erythema and pigmentation: new means of implementation of diffuse reflectance spectroscopy with a commercial instrument.</a> British Journal of Dermatology. 159 (3), 683-690 (2008).</li><li>Latreille, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+skin+colour+on+the+detection+of+cutaneous+erythema+and+tanning+phenomena+using+reflectance+spectrophotometry.">Influence of skin colour on the detection of cutaneous erythema and tanning phenomena using reflectance spectrophotometry.</a> Skin Research and Technology. 13 (3), 236-241 (2007).</li></ol>

L'implementazione di precisione dei test MED come descritto qui potrebbe offrire diversi vantaggi rispetto ad altre sfide infiammatorie esistenti in laboratorio che hanno raggiunto l'uso popolare. Ad esempio, i protocolli di blister di aspirazione17,18,19 sollevano un blister pieno di liquidi sulla pelle che viene successivamente aspirato con una siringa per ottenere l'accesso diretto al microambiente citochine. Anche se la vesc...

Il test minimo della dose di erythema (MED) è una procedura approvata dalla FDA per valutare la sensibilità cutanea alle radiazioni tipicamente nella gamma UVB, anche se il MED può essere determinato ad altre lunghezze d'onda nei raggi UV e nello spettro visibile1. L'erythema è definito come arrossamento superficiale sulla superficie della pelle causato dall'ingorgo dei capillari (le fasi successive dell'erythema sono più comunemente conosciute come scottature solari). I test MED sono stati ampiamente utilizzati nella letteratura dermatologica e nelle impostazioni di fototerapia clinica per identificare la quantità minima di radiazioni ultraviolette (UV) che produrranno la più piccola unità di cambiamento misurabile nel rossore della pelle. I test MED possono essere effettuati con una lampada UV disponibile in commercio, equivalente a quella utilizzata nella maggior parte degli impianti di concia commerciali.
Il test MED comporta la dispersione continua della radiazione UV o della luce dallo spettro visibile sulla superficie della pelle per un periodo di tempo predeterminato, con programmi di dosaggio a seconda principalmente della pigmentazione della pelle e dell'intensità e del tipo di radiazioni . Questa procedura è comunemente utilizzata in ambienti clinici per determinare gli orari di dosaggio per i pazienti che ricevono radioterapia UV per condizioni della pelle come la psoriasi e l'eczema2,3. Le procedure di base per determinare il MED in ambienti clinici sono state descritte altrove4e possono essere utilizzate per regolare il dosaggio totale delle radiazioni UV verso l'alto o verso il basso, a seconda della variazione individuale nella sensibilità della pelle.
La pigmentazione della pelle è forse la variabile più importante specifica del soggetto nel condurre e misurare i risultati della procedura MED6. Questo perché la durata dell'esposizione ai raggi UV necessaria per evocare la risposta minima dell'erithema è determinata principalmente dalla leggerezza o dall'oscurità della pelle del partecipante, come definito dal tipo di pelle Fitzpatrick (FST) del partecipante. FST7 è uno schema numerico per classificare il colore della pelle umana. La scala Fitzpatrick è uno strumento riconosciuto per la ricerca dermatologica sulla pigmentazione della pelle umana8,9, e classifica la pelle umana in una delle sei categorie dalla più leggera (FST I) alla più scura (FST VI).
Le tipologie FST più scure richiedono una durata UV più lunga, quindi è importante una classificazione accurata del FST. Esiste una vasta letteratura sui metodi per una valutazione accurata dell'FST, utilizzando un'ampia varietà di approcci, tra cui l'auto-report, l'intervista dermatologica e la valutazione basata sulla strumentazione. Le valutazioni degli osservatori di FST hanno dimostrato di essere correlate con l'attuale colore della pelle10,ma non il colore naturale della pelle 10, tuttavia l'FST può essere determinato soggettivamente11 utilizzando l'auto-report tramite questionario12 e/o valutazione oggettiva tramite Spettrofotometria. Fitzpatrick digitazione da spettrofotometria ha dimostrato di correlare strettamente all'auto-relazione dei partecipanti in una serie di studi10,13,14,15.
Nonostante l'utilità e l'uso diffuso dei test MED nei servizi clinici, questa procedura non è stata ampiamente adottata in ambienti di laboratorio per la misurazione della variazione individuale in risposta alla stimolazione pro-infiammatoria. Lo scopo della metodologia qui delineata è quello di fornire tecniche e procedure passo-passo che aumentino la precisione e la riproducibilità della procedura di test MED, al fine di facilitare il lavoro futuro in ambienti di laboratorio incentrati su valori la quantificazione della variabilità intra-individuale nella risposta infiammatoria. Forniamo inoltre risultati rappresentativi che illustrano la capacità di questo protocollo standardizzato di catturare con precisione la variazione da persona a persona nell'infiammazione.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>6-aperture dose testing patch (&#8220;Cuff&#8221;)</td>
			<td>Daavlin</td>
			<td>&#160;</td>
			<td>&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical grade adhesive solvent</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-reflective UV proof cloth</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Radiometer</td>
			<td>SolarLight</td>
			<td>Model 6.2 UVB Meter</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single use aloe or burn gel</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrophotometer</td>
			<td>Konika-Minolta</td>
			<td>CM-2600D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopwatch</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV lamp &#8211; Fiji Sun</td>
			<td>Sperti</td>
			<td></td>
			<td>Emission spectrum 280nm-400nm, approximately 25% UVB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV-proof safety glasses (2 pair)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UV-proof sleeve</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>White cotton gloves (2 pair)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

precision implementation of minimal erythema dose (med) testing to assess individual variation in human inflammatory response

Il test minimo della dose di erithema (MED) viene spesso utilizzato in ambienti clinici per determinare la minima quantità di irradiazione ultravioletta (UV) necessaria per produrre l'erithema (arrossamento infiammatorio) sulla superficie della pelle. In questo contesto, il MED è considerato un fattore chiave nel determinare le dosi iniziali per la fototerapia UV per condizioni comuni della pelle come la psoriasi e l'eczema. Nelle impostazioni di ricerca, il test MED ha anche il potenziale per essere un potente strumento per valutare la variazione all'interno e tra le persone nelle risposte infiammatorie. Tuttavia, i test MED non sono stati ampiamente adottati per l'uso in contesti di ricerca, probabilmente a causa della mancanza di linee guida pubblicate, che è un ostacolo per ottenere risultati riproducibili da questo saggio. Inoltre, i protocolli e le attrezzature per stabilire il MED variano ampiamente, rendendo difficile confrontare i risultati tra i laboratori. Qui descriviamo un metodo preciso e riproducibile per indurre e misurare l'erithema superficiale utilizzando protocolli e metodi di nuova progettazione che possono essere facilmente adattati ad altre apparecchiature e ambienti di laboratorio. Il metodo qui descritto include dettagli sulle procedure che consentiranno l'estrapolazione di un programma di dosaggio standardizzato ad altre apparecchiature in modo che questo protocollo possa essere adattato a qualsiasi fonte di radiazione UV.

Il programma di cronometraggio presentato nella Tabella 1 è un nuovo programma di dosaggio che è stato calcolato per catturare il MED, in media, al punto medio dell'evento di esposizione (cioè, apertura 3 o 4) per ogni FST. La base per la programmazione calcolata è la seguente.
I lavori precedenti hanno stabilito che per gli individui con FST 2, il MED mediano per le radiazioni nella gamma UVB è 66,9 milliwatt (mW) per cm2, 77.429 mW/cm2 per FST 3 e ...

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Precision Implementation of Minimal Erythema Dose MED Testing to Assess Individual Variation in Human Inflammatory Response

Il test minimo della dose di erithema (MED) viene utilizzato per stabilire orari di dosaggio per la fototerapia delle radiazioni ultraviolette. Può valutare la variazione individuale nella risposta infiammatoria, ma manca di metodologia per ottenere risultati riproducibili. Qui, presentiamo un'implementazione di precisione di MED e dimostriamo la sua capacità di catturare variazioni individuali nella risposta infiammatoria.

Implementazione di precisione dei test di dose minima di erithema (MED) per valutare la variazione individuale nella risposta infiammatoria umana

Minimal erythema dose (MED) testing is frequently used in clinical settings for determining the smallest amount of ultraviolet (UV) irradiation necessary ...

Il test minimo della dose di eritema, o test MED, è una tecnica con una lunga storia in contesti dermatologici e clinici di fototerapia. Ed è usato principalmente per determinare la minima quantità di radiazioni necessarie per produrre eritema, o arrossamento visibile sulla superficie della pelle. In questo particolare studio, quello che abbiamo fatto è sviluppare diverse nuove tecniche e procedure che consentono di adattare i test MED per uno scopo leggermente diverso, che è quello di quantificare con precisione la variazione nell'attivazione infiammatoria umana.Il principale vantaggio del dosing e della misurazione di precisione nei test MED riguarda la riproducibilità dei risultati, che apre quindi nuove possibilità per esaminare sistematicamente altri fattori che potrebbero essere correlati all'infiammazione. A dimostrare la procedura saranno due dottorandi del mio laboratorio, Holly Sullivan-Toole e Corinne Carlton. Inizia scortando il partecipante nella sala prove.Spiegare la procedura di test MED al partecipante e confermare la comprensione. Posizionare il polsino uno sull'avambraccio non dominante. Rimuovere solo il supporto protettivo in carta cerata dalle parti laterali, non centrali, del polsino.Dopo aver posizionato il polsino uno nel sito di esposizione previsto, posizionare i punti di riferimento utilizzando un marcatore permanente per assicurarsi che il polsino due sia situato esattamente nella stessa posizione. Quindi, contrassegnare la pelle in quattro punti al di fuori delle pieghe di ciascuno dei lembi laterali di uno dei polsini, in alto a destra, in alto a sinistra, in basso a destra e in basso a sinistra. Assicurarsi che i segni siano abbastanza scuri da durare 24 ore, quindi possono essere utilizzati per posizionare il polsino tre esattamente nella stessa posizione all'appuntamento di follow-up.Quindi, utilizzare uno spettrofotometro calibrato per registrare le letture in ciascuna delle sei aperture aperte in sequenza. Assicurarsi che lo spettrofotometro sia posizionato al centro delle aperture del polsino, evitando per quanto possibile talpe, cicatrici o altre imperfezioni. Infine, registrare in modo permanente tutti i valori SCI.Per garantire letture coerenti con lo stesso punto di calibrazione, mantenere lo spettrofotometro in posizione on per tutta la durata della procedura MED e non spegnersi fino al completamento delle letture post-esposizione. Dopo aver rimosso il polsino uno, posizionare il polsino due nella stessa posizione utilizzando i punti di riferimento disegnati sulla pelle per il polsino uno. Indossa le attrezzature di sicurezza necessarie, tra cui occhiali, maniche e guanti a prova di UV, e assicurati che il partecipante faccia lo stesso.Prima di attivare la lampada, disporre il braccio del partecipante in modo che i raggi UV della lampada siano perpendicolari all'angolo del polsino due sul braccio del partecipante. Attivare brevemente la lampada per regolare la distanza dal polsino due fino a quando il sensore del radiometro non legge 270 microwatt per centimetro al quadrato. Quindi, posizionare il sensore del radiometro rivolto verso la lampada UV, parallela alla superficie della pelle e il più vicino possibile alla posizione del polsino due.Quindi, rimuovere il primo rivestimento dell'apertura prima di attivare la sorgente UV. Rimuovere ogni finestra nella patch di test della dose in base al programma visualizzato qui, che illustra programmi di dosaggio separati a seconda del tipo di pelle Fitzpatrick del partecipante. Attivare la sorgente UV e il cronometro contemporaneamente e rimuovere ogni rivestimento di apertura sul polsino due secondo il corretto programma di dosaggio, che si basa su Fitzpatrick Skin Type.Quindi, spegnere la lampada al momento preciso specificato dal programma di dosaggio. Non disattivare il cronometro, poiché una serie aggiuntiva di letture dello spettrofotometro deve essere raccolta esattamente sette minuti dopo la disattivazione della lampada, come descritto di seguito. Infine, dopo esattamente sette minuti dalla disattivazione della lampada, registrare le letture finali dello spettrofotometro da ogni apertura in cuff two.Inizia calibrando lo spettrofotometro in preparazione all'appuntamento di follow-up, 24 ore dopo. Preparare il polsino tre rimuovendo tutti i rivestimenti dell'apertura e lasciando il supporto in carta di cera bianca sulla parte centrale del cerotto. Quando si posiziona il polsino tre sul braccio del partecipante, rimuovere il supporto in carta cerata bianca dai due lembi laterali del cerotto.Usa i punti di riferimento sull'avambraccio del partecipante per posizionare il polsino tre nella stessa posizione delle due patch precedenti. Infine, fai una lettura in ciascuna delle sei aperture aperte in sequenza. Questi risultati mostrano una risposta accurata della pelle ai test MED.Ecco i dati completi per un singolo soggetto rappresentativo, suddivisi per periodo di valutazione. Pre-esposizione, sette minuti dopo l'esposizione e follow-up di 24 ore. Ogni apertura, da due a sei, riceve il 25% in più di energia rispetto a quella precedente.Inoltre, vengono mostrati tutti i 72 soggetti, indicando la variazione che è probabile che si incontri, tra diversi FTS. Forse gli aspetti più importanti dei test MED di precisione riguardano l'aderenza al corretto programma di dosaggio per il tipo di pelle Fitzpatrick identificato e anche mantenere costantemente la giusta distanza tra la superficie della pelle e la fonte di luce UV. Parte della nostra motivazione nello sviluppo di queste tecniche è quella di facilitare la ricerca futura esaminando come le risposte infiammatorie potrebbero relazionarsi con un numero qualsiasi di variabili potenzialmente interessanti, come fattori psicologici, farmacologici o legati alla salute.

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Medicine

Precision Implementation of Minimal Erythema Dose (MED) Testing to Assess Individual Variation in Human Inflammatory Response

Minimal Erythema Dose (MED) Testing

Minimal Erythema Dose MED Testing

Minimal Eritema Dose (MED) Testing

Ultraviolet radiation (UV) therapy is  sometimes used as a treatment for various common skin conditions, including  psoriasis, acne, and eczema. The ...

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