Name: evaluation of photosynthetic behaviors by simultaneous measurements of leaf reflectance and chlorophyll fluorescence analyses
Uploaded: 2019-08-09T15:00:00
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Agradecemos al Dr. Kouki Hikosaka (Universidad de Tohoku) por estimular las discusiones, la asistencia con un espacio de trabajo e instrumentos para experimentos. La obra fue apoyada en parte por KAKENHI [números de subvención 18K05592, 18J40098] y la Fundación Naito.

1. Cultivo de plantas de Arabidopsis
<ol><li>Remojar las semillas de Arabidopsis thaliana en agua desionizada esterilizada en un microtubo, e incubar durante 2 días a 4oC en la oscuridad.</li>
	<li>Coloque aproximadamente cuatro de las semillas imbibebe, tratadas en frío en la superficie del suelo utilizando una micropipette. Incubar las macetas plantadas en una cámara de crecimiento con una luz de 16 h (120 mmol fotones m–2 s–1) y 8 h de período oscuro a 22oC y 20oC, respectivame...

<ol>
	<li>Xue, J., Su, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Significant+remote+sensing+vegetation+indices:+A+review+of+developments+and+applications.">Significant remote sensing vegetation indices: A review of developments and applications.</a> Journal of Sensors. 1353691, (2017).</li><li>Cotrozzi, L., Townsend, P. A., Pellegrini, E., Nali, C., Couture, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflectance+spectroscopy:+a+novel+approach+to+better+understand+and+monitor+the+impact+of+air+pollution+on+Mediterranean+plants.">Reflectance spectroscopy: a novel approach to better understand and monitor the impact of air pollution on Mediterranean plants.</a> Environmental Science and Pollution Research. 25 (9), 8249-8267 (2018).</li><li>Han, L., Yang, G., Yang, H., Xu, B., Li, Z., Yang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clustering+Field-Based+Maize+Phenotyping+of+Plant-Height+Growth+and+Canopy+Spectral+Dynamics+Using+a+UAV+Remote-Sensing+Approach.">Clustering Field-Based Maize Phenotyping of Plant-Height Growth and Canopy Spectral Dynamics Using a UAV Remote-Sensing Approach.</a> Frontiers in Plant Science. 9, 1638 (2018).</li><li>Baker, N. 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V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+the+efficiency+of+photoprotection.">Quantifying the efficiency of photoprotection.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. 372 (1730), 20160393 (2017).</li><li>Gamon, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remote+sensing+of+the+xanthophyll+cycle+and+chlorophyll+fluorescence+in+sunflower+leaves+and+canopies.">Remote sensing of the xanthophyll cycle and chlorophyll fluorescence in sunflower leaves and canopies.</a> Oecologia. 85 (1), 1-7 (1990).</li><li>Gamon, J. A., Pe&#241;uelas, J., Field, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+narrow-waveband+spectral+index+that+tracks+diurnal+changes+in+photosynthetic+efficiency.">A narrow-waveband spectral index that tracks diurnal changes in photosynthetic efficiency.</a> Remote Sensing of Environment. 41 (1), 35-44 (1992).</li><li>Rahimzadeh-Bajgiran, P., Munehiro, M., Omasa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationships+between+the+photochemical+reflectance+index+(PRI)+and+chlorophyll+fluorescence+parameters+and+plant+pigment+indices+at+different+leaf+growth+stages.">Relationships between the photochemical reflectance index (PRI) and chlorophyll fluorescence parameters and plant pigment indices at different leaf growth stages.</a> Photosynthesis Research. 113 (1-3), 261-271 (2012).</li><li>Niyogi, K. K., Grossman, A. R., Bj&#246;rkman, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arabidopsis+mutants+define+a+central+role+for+the+xanthophyll+cycle+in+the+regulation+of+photosynthetic+energy+conversion.">Arabidopsis mutants define a central role for the xanthophyll cycle in the regulation of photosynthetic energy conversion.</a> Plant Cell. 10 (7), 1121-1134 (1998).</li><li>Kohzuma, K., Hikosaka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physiological+validation+of+photochemical+reflectance+index+(PRI)+as+a+photosynthetic+parameter+using+Arabidopsis+thaliana+mutants.">Physiological validation of photochemical reflectance index (PRI) as a photosynthetic parameter using Arabidopsis thaliana mutants.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 498, 52-57 (2018).</li><li>Hikosaka, K., Noda, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+leaf+CO2+assimilation+and+Photosystem+II+photochemistry+from+chlorophyll+fluorescence+and+the+photochemical+reflectance+index.">Modeling leaf CO2 assimilation and Photosystem II photochemistry from chlorophyll fluorescence and the photochemical reflectance index.</a> Plant, Cell and Environment. 42 (2), 730-739 (2019).</li><li>Brooks, M. D., Sylak-Glassman, E. J., Fleming, G. R., Niyogi, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+thioredoxin-like/&#946;-propeller+protein+maintains+the+efficiency+of+light+harvesting+in+Arabidopsis.">A thioredoxin-like/&#946;-propeller protein maintains the efficiency of light harvesting in Arabidopsis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (29), E2733-E2740 (2013).</li><li>Nilkens, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+slowly+inducible+zeaxanthin-dependent+component+of+non-photochemical+quenching+of+chlorophyll+fluorescence+generated+under+steady-state+conditions+in+Arabidopsis.">Identification of a slowly inducible zeaxanthin-dependent component of non-photochemical quenching of chlorophyll fluorescence generated under steady-state conditions in Arabidopsis.</a> Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics. 1797 (4), 466-475 (2010).</li><li>Davis, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+to+photosynthesis+by+proton+motive+force-induced+photosystem+II+photodamage.">Limitations to photosynthesis by proton motive force-induced photosystem II photodamage.</a> Elife. 5, 16921 (2016).</li><li>Wong, C. Y. S., Gamon, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+photochemical+reflectance+index+provides+an+optical+indicator+of+spring+photosynthetic+activation+in+evergreen+conifers.">The photochemical reflectance index provides an optical indicator of spring photosynthetic activation in evergreen conifers.</a> New Phytologist. 206 (1), 196-208 (2015).</li><li>Miyake, C., Amako, K., Shiraishi, N., Sugimoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acclimation+of+Tobacco+Leaves+to+High+Light+Intensity+Drives+the+Plastoquinone+Oxidation+System&#8212;Relationship+Among+the+Fraction+of+Open+PSII+Centers,+Non-Photochemical+Quenching+of+Chl+Fluorescence+and+the+Maximum+Quantum+Yield+of+PSII+in+the+Dark.">Acclimation of Tobacco Leaves to High Light Intensity Drives the Plastoquinone Oxidation System&#8212;Relationship Among the Fraction of Open PSII Centers, Non-Photochemical Quenching of Chl Fluorescence and the Maximum Quantum Yield of PSII in the Dark.</a> Plant and Cell Physiology. 50 (4), 730-743 (2009).</li><li>Munekage, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclic+electron+flow+around+photosystem+I+is+essential+for+photosynthesis.">Cyclic electron flow around photosystem I is essential for photosynthesis.</a> Nature. 429 (6991), 579-582 (2004).</li><li>Tubuxin, B., Rahimzadeh-Bajgiran, P., Ginnan, Y., Hosoi, F., Omasa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimating+chlorophyll+content+and+photochemical+yield+of+photosystem+II+(&#934;PSII)+using+solar-induced+chlorophyll+fluorescence+measurements+at+different+growing+stages+of+attached+leaves.">Estimating chlorophyll content and photochemical yield of photosystem II (&#934;PSII) using solar-induced chlorophyll fluorescence measurements at different growing stages of attached leaves.</a> Journal of Experimental Botany. 66 (18), 5595-5603 (2015).</li></ol>

En este estudio, obtuvimos evidencia adicional para demostrar que PRI representa pigmentos de xantofila midiendo simultáneamente la fluorescencia de clorofila y la reflectancia de las hojas.
Una luz halógena, que tiene longitudes de onda similares a la luz solar, fue adaptada para su uso como fuente de luz actínica para activar la fotosíntesis. Inicialmente usamos una fuente de luz LED blanca para evitar daños térmicos de la superficie de la hoja, pero esto produjo cinética de relajaci?...

La reflectancia de la hoja se utiliza para detectarremotamente índices de vegetación que reflejan la fotosíntesis o rasgos en las plantas 1,2. El índice de vegetación de diferencia normalizada (NDVI), que se basa en señales de reflexión infrarroja, es uno de los índices de vegetación más conocidos para la detección de propiedades relacionadas con la clorofila, y se utiliza en la ecología y las ciencias agrícolas como indicador de respuestas ambientales en árboles o cultivos3. En estudios de campo, aunque se han desarrollado y utilizado muchos parámetros (por ejemplo, índice de clorofila (CI), índice de agua (WI), etc.), pocas verificaciones detalladas de lo que estos parámetros detectan directa (o indirectamente) utilizando mutantes.
El análisis de modulación de amplitud de pulso (PAM) de fluorescencia de clorofila es un método eficaz para medir las reacciones fotosintéticas y los procesos involucrados en el fotosistema II (PSII)4. La fluorescencia de clorofila puede detectarse con unacámara y utilizarse para la detección de la fotosíntesis de mutantes 5. Sin embargo, la detección de la fluorescencia de la clorofila requiere protocolos complejos como el tratamiento oscuro o pulsos de saturación de luz, que son difíciles de implementar en estudios de campo.
La energía de la luz solar absorbida por la hoja se consume principalmente por reacciones fotosintéticas. Por el contrario, la absorción del exceso de energía lusivas puede generar especies reactivas de oxígeno, lo que causa daños a las moléculas fotosintéticas. El exceso de energía lusitiva debe disiparse como calor a través de mecanismos de temple no fotoquímicos (NPQ)6. El índice de reflectancia fotoquímica (PRI), que refleja los cambios dependientes de la luz en los parámetros de reflectancia de las hojas, se deriva de la reflectancia de banda estrecha a 531 y 570 nm (longitud de onda de referencia)7,8. Se ha informado que se correlaciona con NPQ en el análisis de fluorescencia de clorofila9. Sin embargo, dado que NPQ es un parámetro compuesto que incluye el ciclo de xantofila, la tradición estatal y la fotoinhibición, se requiere una validación detallada para entender lo que mide el parámetro PRI. Nos hemos centrado en el ciclo de xantofilla, un sistema de disipación térmica que implica la desoxidación de pigmentos de xantofila (violaxantina a la anteraxantina y zeaxantina) y un componente principal del NPQ porque las correlaciones entre PRI y la conversión de estos pigmentos se ha divulgado en estudios anteriores8.
Muchos mutantes relacionados con la fotosíntesis han sido aislados e identificados en Arabidopsis. El mutante npq1 no acumula zeaxantina porque lleva una mutación en violaxantina deepoxidase (VDE), que cataliza la conversión de violaxantina a zeaxantina10. Para establecer si PRI sólo detecta cambios en los pigmentos de xantofila, medimos simultáneamente el PRI y la fluorescencia de clorofila en la misma zona de la hoja en npq1 y el tipo salvaje y luego diseccionamos NPQ en diferentes escalas de tiempo de relajación oscura para extraer el componente relacionado con la xantofila11. Estas mediciones simultáneas proporcionan una técnica valiosa para la asignación de índices de vegetación. Además, dado que el PRI se correlaciona con la productividad primaria bruta (GPP), la capacidad de asignar PRI precisamente a un componente tiene aplicaciones importantes en la ecología12.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Halogen light source</td>
			<td>OptoSigma</td>
			<td>SHLA-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light quantum meter</td>
			<td>LI-COR</td>
			<td>LI-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PAM chlorophyll fluorometer</td>
			<td>Walz</td>
			<td>JUNIOR-PAM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PAM controliing software</td>
			<td>Walz</td>
			<td>WinControl-3.27</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reflectance standard</td>
			<td>Labsphere, Inc.</td>
			<td>SRT-99-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectral radiometer</td>
			<td>ADS Inc.</td>
			<td>Field Spec3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectral radiometer controlling software</td>
			<td>ADS Inc.</td>
			<td>RS3</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluation of photosynthetic behaviors by simultaneous measurements of leaf reflectance and chlorophyll fluorescence analyses

Clorofila un análisis de fluorescencia se utiliza ampliamente para medir los comportamientos fotosintéticos en plantas intactas, y ha dado lugar al desarrollo de muchos parámetros que miden eficientemente la fotosíntesis. El análisis de la reflectancia de la hoja proporciona varios índices de vegetación en ecología y agricultura, incluyendo el índice de reflectancia fotoquímica (PRI), que se puede utilizar como un indicador de disipación de energía térmica durante la fotosíntesis porque se correlaciona con temple no fotoquímico (NPQ). Sin embargo, puesto que el NPQ es un parámetro compuesto, su validación se requiere para entender la naturaleza del parámetro PRI. Para obtener evidencia fisiológica para la evaluación del parámetro PRI, medimos simultáneamente la fluorescencia de clorofila y la reflectancia de las hojas en las plantas mutantes defectuosas del ciclo de xantofilina (npq1) y Arabidopsis de tipo silvestre. Además, el parámetro qZ, que probablemente refleja el ciclo de xantofila, se extrajo de los resultados del análisis de fluorescencia de clorofila mediante el monitoreo de la cinética de relajación de NPQ después de apagar la luz. Estas mediciones simultáneas se llevaron a cabo utilizando un fluorómetro de clorofila de modulación de amplitud de pulso (PAM) y un radiómetro espectral. Las sondas de fibra de ambos instrumentos se colocaron cerca unade según la otra para detectar señales desde la misma posición de la hoja. Se utilizó una fuente de luz externa para activar la fotosíntesis, y las luces de medición y la luz saturada se proporcionaron desde el instrumento PAM. Este sistema experimental nos permitió monitorear el PRI dependiente de la luz en la planta intacta y reveló que los cambios dependientes de la luz en PRI difieren significativamente entre el tipo salvaje y el mutante npq1. Además, PRI estaba fuertemente correlacionado con qZ, lo que significa que qZ refleja el ciclo de xantofila. En conjunto, estas mediciones demostraron que la medición simultánea de la reflectancia de las hojas y la fluorescencia de clorofila es un enfoque válido para la evaluación de parámetros.

La Figura 1 presenta un diagrama esquemático de la configuración experimental para medir simultáneamente la fluorescencia de clorofila y la reflectancia de las hojas. Las sondas de fibra del PAM y el radiómetro espectral se fijaron perpendicularmente a la superficie de la hoja en el soporte de la hoja en la etapa de muestra hecha a medida, y se utilizó una lámpara halógena para la irradiación de luz actínica desde ambas direcciones izquierda y derech...

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Evaluation of Photosynthetic Behaviors by Simultaneous Measurements of Leaf Reflectance and Chlorophyll Fluorescence Analyses

Describimos un nuevo enfoque técnico para estudiar las respuestas fotosintéticas en plantas superiores que implica mediciones simultáneas de clorofila una fluorescencia y la reflectancia de las hojas utilizando un PAM y un radiómetro espectral para la detección de señales de la misma zona de la hoja en Arabidopsis.

Evaluación de comportamientos fotosintéticos mediante mediciones simultáneas de la reflectancia de la hoja y análisis de fluorescencia de clorofila

Chlorophyll a fluorescence analysis is widely used to measure photosynthetic behaviors in intact plants, and has resulted in the development of many ...

La medición simultánea de la reflectancia de la hoja con el análisis de fluorescencia de clorofila utilizando el modelo de planta mutante ya conocido facilita el establecimiento de nuevos parámetros de reflectancia. La construcción de nuevos parámetros de reflectancia de la hoja por nuestro método permite el monitoreo en tiempo real de los comportamientos cambiantes de la planta en condiciones ambientales naturales. Antes de comenzar un experimento, configure un sistema de medición como se muestra en este esquema.Con una etapa de muestra, fuente de luz, fluorómetro PAM y radiómetro espectral. A continuación, conecte una placa de acero cuadrada de 10 cm con un orificio de un cm de diámetro a la etapa de muestra hecha a medida. Y encaja dos sondas de fibra delgada firmemente juntas.Envuelva las sondas con cinta de plástico. A continuación, utilice un soporte para sujetar las sondas grabadas en la etapa de muestra. Coloque las sondas verticalmente en la etapa de muestra.Y adjunte una guía de luz biforked hecha de fibras de vidrio a la fuente de luz halógena. A continuación, borre la etapa de la muestra desde ambas direcciones en ángulos de aproximadamente 45 grados. Ajuste de la fuente de luz para que la luz ilumine uniformemente el escenario de la muestra sin proyectar sombras.Para la medición simultánea de la reflectancia izquierda y el análisis de florescencia de clorofila establecido, en una habitación oscura con luz de celofán verde colocar una planta de prueba en el soporte de la hoja de la etapa de la muestra y tocar la hoja contra el agujero de placa de acero en el escenario. Después de apagar la luz verde débil, encienda el fluorómetro PAM y borre la muestra de la hoja con una luz de medición. Mueva el ajustador de modo que la intensidad de la florescencia mida aproximadamente 100 y mida la distancia entre la sonda y la hoja.Fije el ajustador en su lugar y registre el valor de la distancia en el ajustador. A continuación, apague la luz de medición y retire la planta de ensayo. Para la medición de la intensidad de la luz actínica, coloque un cuantificador de luz en la posición donde se colocará la hoja de la muestra.E irradiar luz de la fuente de luz halógena para medir la intensidad de la fuente de luz. Determine qué posiciones de la esfera de fuente de luz generan intensidades de 30, 60, 120, 240 y 480 protones micromolares por metro cuadrado por segundo. Coloque una placa blanca como estándar reflectante en la posición de la muestra de la hoja.Y encienda un radiómetro espectral. Ajuste la reflectancia espectral entre 350 y 850 nanómetros. No hay datos espectrales en este momento, ya que no hay luz irradiante.Encienda la lámpara halógena para irradiar con 480 fotones micromolares por metro cuadrado por segundo. La mayor intensidad de irradiación en esta prueba y ajustar la fuerza de detección del radiómetro para evitar la saturación. A continuación, registre la reflectancia espectral bajo iluminación con 30, 60, 120, 240 y 480 fotones micromolares por metro cuadrado por segundo.Para la medición simultánea de la reflectancia de la hoja y el análisis de la florescencia de clorofila transferir la planta de la cámara de crecimiento a cuarto oscuro con la misma temperatura y humedad. Después de una hora coloque una planta de Arabidopsis en la posición de la muestra de la hoja. Y fije la hoja de muestra a la hoja para que la superficie de la hoja sea perpendicular a las sondas de detección.Encienda el fluorómetro PAM e inicie la grabación de la curva. Este valor se denomina cero. Encienda la luz de medición y espere aproximadamente 30 segundos para que la curva responda.Este valor se llamaba F cero. Proporcione un pulso saturado de 4.000 fotones micromolares por metro cuadrado por segundo durante 0,8 segundos desde el PAM y obtenga el valor más alto del pico en la curva con una mayor intensidad de fluorescencia. Este valor se llama Fm.Then use la fórmula para calcular el rendimiento cuántico máximo del sistema fotográfico dos en la oscuridad.Para medir los comportamientos fotosintéticos en estado estacionario, después de grabar Fm irradiar la muestra de hoja con los 30 fotones micromolares por metro cuadrado por segundo. Al encender el radiómetro espectral para monitorear la reflectancia de la hoja. Espere al menos 20 minutos para que la reacción fotosintética alcance un estado estable.Durante este período de reacción, el pulso de saturación se suministrará a intervalos de un minuto. La intensidad de la florescencia del estado estacionario se llama Fs.El valor máximo de la florescencia alcanzado después de 20 minutos de luz pulsada se llama Fm prime. Registre la reflectancia espectral en este punto.Para calcular la actividad de fotosíntesis en estado estacionario calcular los rendimientos cuánticos del sistema fotográfico dos que se pueden estimar irradiando con pulsos saturados bajo luz actínica. Estimar el flujo de electrones lineales desde el sistema fotográfico dos centros de reacción. A continuación, calcule el temple no fotoquímico y calcule el índice de reflectancia fotoquímica a partir de 531 y 570 nanómetros.Después de adquirir Fs y la reflectancia de la hoja apague la luz actínica y proporcione un pulso saturante a intervalos de un minuto durante la relajación oscura. El valor máximo de florescencia inducido por el pulso de saturación bajo la oscuridad se llama Fm double prime. Y guarde los datos de doble prima Fm en dos y 10 minutos después de apagar la luz actínica.Para calcular los parámetros del temple no fotoquímico de los conexores de relajación, estime el qE con los dos minutos de adaptación oscura Fm dobles datos primo. Calcule el temple dependiente de zanthoxylum, qZ, con los datos de doble prima Fm de adaptación oscura de 10 minutos. A continuación, calcule el estado inhibidor de la foto.Como siguiente medición, encienda la luz actínica a 60 fotones micromolares por metro cuadrado por segundo y repita la misma medición. En este experimento representativo, se compararon plantas de tipo salvaje y arabidopsis mutante. El cambio en el índice de reflectancia fotoquímica, PRI, calculado a partir de la reflectancia de la hoja, se planteó contra el flujo de electrones lineales dependiente de la luz del sistema fotográfico dos según lo estimado por el fluorómetro PAM.En este experimento, el cambio en el PRI se correlacionó negativamente con el flujo lineal de electrones en plantas de tipo salvaje, pero no en plantas mutantes. qZ que representa el ciclo de xantofila fue fraccionado de la relajación oscura connectics de temple no fotoquímico y también fue trazado contra el cambio en el PRI. En este análisis, el qZ también se correlacionó fuertemente con el cambio en PRI para ambas cepas vegetales, lo que implica que el PRI refleja el ciclo de xantofila.Para la medición simultánea de la misma área de la hoja utilizando la misma fuente de luz o intensidad, utilice la misma fibra de detección en el dispositivo de fijación para colocar la hoja verticalmente. La espectroscopia de reflectancia tiene un potencial para ser utilizada en el análisis de una variedad de fenotipos, en plantas de tipo silvestre y mutadas para dilucidar los mecanismos moleculares de las plantas.

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