Name: a plasma sample preparation for mass spectrometry using an automated workstation
Uploaded: 2020-04-24T13:30:00
Duration: 7 min 12 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Plasma Sample Preparation for Mass Spectrometry using an Automated Workstation at JoVE.com

<ol>
	<li>Fu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+Reproducible+Automated+Proteomics+Sample+Preparation+Workflow+for+Quantitative+Mass+Spectrometry.">Highly Reproducible Automated Proteomics Sample Preparation Workflow for Quantitative Mass Spectrometry.</a> Journal of Proteome Research. 17 (1), 420-428 (2018).</li><li>Lehmann, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+mass+spectrometry+proteomics+(cMSP)+for+medical+laboratory:+What+does+the+future+hold?.">Clinical mass spectrometry proteomics (cMSP) for medical laboratory: What does the future hold?.</a> Clinica Chimica Acta. 467, 51-58 (2017).</li><li>Abbatiello, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-Scale+Interlaboratory+Study+to+Develop,+Analytically+Validate+and+Apply+Highly+Multiplexed,+Quantitative+Peptide+Assays+to+Measure+Cancer-Relevant+Proteins+in+Plasma.">Large-Scale Interlaboratory Study to Develop, Analytically Validate and Apply Highly Multiplexed, Quantitative Peptide Assays to Measure Cancer-Relevant Proteins in Plasma.</a> Molecular &amp; Cellular Proteomics. 14 (9), 2357-2374 (2015).</li><li>Kuster, B., Schirle, M., Mallick, P., Aebersold, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scoring+proteomes+with+proteotypic+peptide+probes.">Scoring proteomes with proteotypic peptide probes.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 6 (7), 577-583 (2005).</li><li>Carr, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+peptide+measurements+in+biology+and+medicine:+best+practices+for+mass+spectrometry-based+assay+development+using+a+fit-for-purpose+approach.">Targeted peptide measurements in biology and medicine: best practices for mass spectrometry-based assay development using a fit-for-purpose approach.</a> Molecular &amp; Cellular Proteomics. 13 (3), 907-917 (2014).</li><li>Yates, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pivotal+role+of+computers+and+software+in+mass+spectrometry+-+SEQUEST+and+20+years+of+tandem+MS+database+searching.">Pivotal role of computers and software in mass spectrometry - SEQUEST and 20 years of tandem MS database searching.</a> Journal of the American Society for Mass Spectrometry. 26 (11), 1804-1813 (2015).</li><li>Nilsson, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mass+spectrometry+in+high-throughput+proteomics:+ready+for+the+big+time.">Mass spectrometry in high-throughput proteomics: ready for the big time.</a> Nature Methods. 7 (9), 681-685 (2010).</li><li>Van Eyk, J. E., Sobhani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Precision+Medicine.">Precision Medicine.</a> Circulation. 138 (20), 2172-2174 (2018).</li><li>Hoofnagle, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+the+Generation,+Quantification,+Storage,+and+Handling+of+Peptides+Used+for+Mass+Spectrometry-Based+Assays.">Recommendations for the Generation, Quantification, Storage, and Handling of Peptides Used for Mass Spectrometry-Based Assays.</a> Clinical Chemistry. 62 (1), 48-69 (2016).</li><li>Wijayawardena, B., Fu, Q., Johnson, C., Van Eyk, J. E., Kowalski, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+Reproducible+Automated+Proteomics+Sample+Preparation+on+Biomek+i-Series.">Highly Reproducible Automated Proteomics Sample Preparation on Biomek i-Series.</a> Technical note, Beckman Coulter Life Science. Document # AAG-4890APP02. 19, (2019).</li></ol>

Provbearbetning för masspektrometri kräver proteindenaturering, reduktion och alkylering för att blockera cysteiner, och trypsinsammamning för att klyva proteiner i peptider. Varje kemisk eller enzymatisk reaktion måste initieras vid en bestämd tidpunkt och utföras vid en kontrollerad temperatur, och varje steg i processen innebär flera vätskeöverföringssteg där experimentell variation kan införas. Automatiserad exempelbearbetning ger en lösning på detta dilemma. För närvarande tillgängliga vätskehanteringssystem har kapacitet att överföra reagenser till 96-brunnsplattor med en noggrannhet och precision på mindre än 5 %, beroende på vilken huvud- och spetstyp som används, och att ruva prover, med om så önskas skakningar, under kontrollerade temperaturer från 14 °C till 70 °C. Vi använde en automatiserad flytande hanterare för att bearbeta plasma för SRM-analyser i ett 96-brunnsformat.
Det finns tusentals proteas klyvning platser inom komplexa blandningar av proteiner i serum, plasma och andra biologiska prover; och vart och ett av dessa proteiner har unika egenskaper som påverkar klyvning plats tillgänglighet och stabiliteten i de resulterande peptiderna. Det är därför omöjligt att utforma ett prov bearbetning förfarande som är optimal för varje protein. Det bästa alternativet är att vara så konsekvent som möjligt.
För att uppnå konsekvens optimerade vi varje pipetteringssteg som utfördes av den automatiserade vätskehanteraren. Vi övervägde först den volym som krävs och begränsningar som ålagts av vätskans typ (plasma, vattenhaltiga eller organiska) och motsvarande egenskaper (viskositet, sammanhållning och volatilitet), hårdvara (arbetsstation pipettering-huvud och platta greppa armar), och labware. Vi varierade sedan hastighet och efterföljande luftgapet för strävan, hastighet och blowout volym för dispensering, och kraft och varaktighet blandning, samtidigt som en spets touch efter strävan och / eller dispensering, om det behövs, för att eliminera vätska som följer utsidan av tips (figur 13, Kompletterande tabell 1). En unik SIL-peptid, förskärmad för stabilitet, spetsades i varje reagens för att göra det möjligt att övervaka precisionen i varje vätskehanteringssteg. Efter optimering var process-CV:n för de flesta övergångar mindre än 10 %, vilket visade på god reproducerbarhet med den automatiserade arbetsstationen (figur 9, figur 10, figur 11 och figur 12).
Det automatiserade arbetsflöde som presenteras här ger konsekvent enzymatisk nedbrytning med förbättrad reproducerbarhet och genomströmning jämfört med manuella metoder (figur 9, figur 10). Detta tillvägagångssätt lovar att förbättra noggrannheten och tillförlitligheten hos biomarköridentifiering och validering av masspektrometri.

Masspektrometri (MS) -baserade protein och peptid kvantifiering alltmer tillämpas som ett bioanalytiskt verktyg för plasmaanalys i grundforskning och kliniska laboratorier2,3. Den nödvändiga instrumenteringen och informatiken har utvecklats snabbt eftersom MS har blivit den metod som krävs för att kvantifiera proteiner eller modifierade proteiner genom att rikta in sig på specifika peptidsekvenser på grund av dess förmåga att kvantifiera hundratals peptider i en enda MS-körning4. Provberedningen är grunden för all proteomisk analys. Före MS-analys, proteinerna i ett biologiskt prov är vanligtvis denatureras, minskas, alkyleras, rötas till tryptiska peptider, och avsaltade5. Alkylering blockerar cysteiner för att förhindra okontrollerade modifieringar och se till att alla cysteiner har samma massa. Därefter tillsätts trypsin för att smälta proteiner i peptider. Vart och ett av dessa steg kräver optimering, och hela processen utförs traditionellt manuellt, vilket möjliggör införandet av analytiska fel.
Den traditionella biomarkörutvecklingspipelinen består av två huvudprocesser: hagelgevärsproteomik för global proteinupptäckt för att skapa en djupgående proteininventering6 och riktad proteomik för verifiering och validering som syftar till proteinkvantiteter med hög precision och hög genomströmning7. Oavsett MS-metoden, provberedning är densamma och kretsar kring enzymatisk klyvning av proteiner i en peptid blandning. Som föreslagits av Van Eyk och Sobhani8, med en metod som möjliggör korrekt, exakt och reproducerbar analys för både upptäckt och riktade analyser är önskvärt att effektivt flytta upptäckt biomarkörer till kliniska genomförda analyser. För att göra detta kommer automatisering av provberedning vara till hjälp och ge möjlighet att öka effektiviteten till hög genomströmningsanalys. Manuella metoder introducerar vanligtvis analytiska fel utöver godtagbara gränser som anges av Food and Drug Administration (FDA) i den reviderade bioanalytiska metodvalideringsvägledningen, som omfattar biomarkörer och diagnostik2,9. Utvecklingen av en snabb, mycket exakt, och handsfree MS protein prov förberedelse arbetsflöde kommer att vara nödvändigt att underlätta biomarkör forskning, vilket kräver att förbereda och analysera tusentals biologiska prover. MS provberedning har många steg där fel kan införas, och processen är tråkig och tidskrävande.
I vår förbättrade metod, en automatiserad arbetsstation programmerades för att utföra alla nödvändiga plasmaprov beredning förfaranden i totalt 6 steg(figur 1) för att säkerställa: 1) korrekta vätskeöverföringar; 2) reaktionen initieras och stoppas vid en konsekvent tidpunkt; 3) reaktionen utförs vid en kontrollerad temperatur (dvs. inkubator); och 4) reaktionen har jämn blandning för alla reaktioner. Vi implementerade också lägger till exogena kvalitetskontrollproteiner och interna standarder (stabila isotopmärkta peptidstandarder) för att säkerställa en kvalitet och reproducerbar genomströmning av LC-MS-baserade protein- och peptidkvantifiering i ett 96-brunnsformat. Inklusive reagensberedning, arbetstid och totalt 1 000 000 pipetteringssteg skulle krävas för att bearbeta 96 prover i enskilda rör. Automatisering minskar praktisk tid och antalet mänskliga interaktioner inblandade.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>A Pooled healthy human plasma</td>
			<td>Bioreclamation Inc.</td>
			<td></td>
			<td>human plasma tested in the manuscript</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile, HPLC Grade</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A998SK1</td>
			<td>LC MS/MS solvent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B-Galactosidase Recombinant from E.Coli</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G3153-5MG</td>
			<td>exogenous control proteins.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomek i7 Automated Workstation</td>
			<td>Beckman Coulter, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>The proteomic sample preparation workstation: Biomek automated workstations are not intended or validated for use in the diagnosis of disease or other conditions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomek i-Series Tips 230&#181;L Non-Sterile</td>
			<td>Beckman Coulter, Inc.</td>
			<td>B85903&#160;</td>
			<td>Tips, i7 consumable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomek i-Series Tips 90&#181;L Non-Sterile</td>
			<td>Beckman Coulter, Inc.</td>
			<td>B85881&#160;</td>
			<td>Tips, i7 consumable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FG, Kit Trypsin TPCK</td>
			<td>Sciex</td>
			<td>4445250</td>
			<td>Trypsin used in digestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hard-Shell 96-Well PCR Plates, low profile, thin wall, skirted, green/clear&#160;</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>#hsp9641</td>
			<td>Autosampler plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octyl B-D-Glucopyranoside</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>O9882-5G</td>
			<td>detergent used in digestion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene, 96-Round Deep Well Plates Sterile</td>
			<td>Beckman Coulter, Inc.</td>
			<td>267007</td>
			<td>Reagent and digestion plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prominence UFLCXR HPLC system</td>
			<td>Shimadzu, Japan</td>
			<td></td>
			<td>High flow LC sytem</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QTRAP 6500</td>
			<td>SCIEX</td>
			<td></td>
			<td>Mass spectrometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water, HPLC Grade</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>W54</td>
			<td>LC MS/MS solvent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xbridge BEH30 C18 2.1mm x 100mm</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186003564</td>
			<td>LC MSMS column</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a plasma sample preparation for mass spectrometry using an automated workstation

Provberedning för masspektrometrianalys i proteomik kräver enzymatisk klyvning av proteiner i en peptidblandning. Denna process innebär många inkubation och vätskeöverföring steg för att uppnå denaturering, minskning, alkylering och klyvning. Genom att anpassa arbetsflödet till en automatiserad arbetsstation kan effektiviteten ökas och varianskoefficienterna minskas, vilket ger mer tillförlitliga data för statistiska jämförelser mellan exempeltyper. Vi har tidigare beskrivit ett automatiskt arbetsflöde för förberedelse av proteomiska prov1. Här rapporterar vi utvecklingen av ett effektivare och bättre kontrollerat arbetsflöde med följande fördelar: 1) Antalet vätskeöverföringssteg minskas från nio till sex genom att kombinera reagenser; 2) Pipetteringstiden reduceras genom selektiv spets pipettering med hjälp av ett 96-läges pipetterande huvud med flera kanaler; 3) Potentiell genomströmning ökar genom tillgången på upp till 45 däck positioner; 4) Fullständig inneslutning av systemet ger förbättrad temperatur- och miljökontroll och minskar risken för kontaminering av prover eller reagenser; och 5) Tillsats av stabila isotop märkta peptider, samt β-galactosidase protein, till varje prov gör övervakning och kvalitetskontroll möjligt under hela processen. Dessa maskinvaru- och processförbättringar ger god reproducerbarhet och förbättrar precisionen inom analysen och analysens precision (CV på mindre än 20 %) LC-MS-baserade protein- och peptidkvantifiering. Hela arbetsflödet för att smälta 96 prover i en 96-brunnsplatta kan slutföras på cirka 5 timmar.

Watch this Scientific Journal Video about A Plasma Sample Preparation for Mass Spectrometry using an Automated Workstation at JoVE.com

A Plasma Sample Preparation for Mass Spectrometry using an Automated Workstation

Här presenterar vi en automatiserad plasma protein matsmältningsmetod för massa spectrometri-baserade kvantitativa proteomisk analys. I detta protokoll, vätskan överföra och inkubation steg för protein denaturering, minskning, alkylering, och trypsin matsmältning reaktioner effektiviseras och automatiseras. Det tar cirka fem timmar att förbereda en 96-brunnsplatta med önskad precision.

Ett plasmaprovförberedelse för masspektrometri med hjälp av en automatiserad arbetsstation

Sample preparation for mass spectrometry analysis in proteomics requires enzymatic cleavage of proteins into a peptide mixture. This process involves ...

Detta automatiserade arbetsflöde ger en konsekvent protein enzymatisk matsmältning med utmärkt reproducerbarhet och genomströmning. Detta förbättrar noggrannheten och tillförlitligheten hos biomarkörupptäckt, validering och klinisk tillämpning genom masspektrometri. Fördelen med denna teknik är att hela arbetsflödet kan slutföras för 96 prover på cirka fem timmar med intra-assay och inter-assay CV på mindre än 20%för majoriteten av proteiner.Denna exakta hög genomströmning provberedning gör det möjligt för oss att undersöka sjukdomsproteomer av vävnad eller biofluider i större skala. Dessutom ger det automatiserade arbetsflödet för proteomiskt provförberedande en solid grund för hög halt och en kvantitativ proteomisk analys. Demonstrera förfarandet kommer att Dr.Qin Fu, chef för High Throughput Center på Cedar Sinai och Mr.Casey Johnson, en forskarassistent från mitt laboratorium.Innan du börjar analysen, lägga till fem microliters av poolade friska mänskliga plasma i en 96 runda djupa väl propylen platta. När alla prover har laddats, öppna programvaran för vätskehanterarenhet och under metodfliken väljer du hem alla axlar för att orientera den automatiserade vätskehanteraren. Bekräfta att alla arbetsstationssprutorna inte innehåller några synliga luftbubblor och öppna en ny metod och klicka på Kör för att initiera metoden.Ange sant i ange ett värde som ska användas för autosampler prompt att ha en autosampler platta förberedd i slutet av metoden och klicka på OK. Ange ett i ange ett värde som ska användas för första kolumnen prompt och klicka på OK. Ange 12 i ange ett värde som ska användas för senaste kolumn prompt och klicka på OK. Om en provplatta används med provvolymer på minst 20 mikroliter, anger du true i ange ett värde som ska användas för provplatta prompt och klicka på OK. Följ anvisningarna i fönstret Guidad Labware-inställning och klicka på Fortsätt. Ladda lämpliga reagenser i lämpliga brunnar och klicka på Nästa. Klicka på Nästa igen för att lägga ut den automatiserade flytande hanterare däck som illustreras inklusive reagens, reaktion, prov och autosampler plattor, sex-väl 90 microliter spets lådor, en tom 90 mikroliter spets låda, och en full 230 microliter spets låda.Klicka sedan på Slutför för att börja metoden. Vid fortsätt efter centrifugering prompten, hämta reaktionsplattan och placera plattan i centrifug. I slutet av centrifugeringen, returnera reaktionsplattan till sitt läge inom den automatiserade vätskehanteraren och klicka på Fortsätt.För flytande kromatografi och tandem masspektrometri analys, lösa peptiderna i en C18 2.1 av 100 millimeter 3.5 mikrometer kolumn genom högt flöde högt tryck vätskekromatografi med en flödeshastighet på 250 mikroliters per minut och analyseras i linje på en trippel quadrupole masspektrometer. Fem minuter efter inlastning, jämvikt kolumnen med 5%buffert B lösning och elute peptiderna med en linjär 5-35%gradient av buffert B över 30 minuter. Vid slutet av elueringen tvättar du kolonnen med 98%buffert B i 10 minuter följt av en femminuterstvätt med 5%buffert B innan du laddar nästa prov.För online avledning, använd en tvåfas omkopplingsventil för att avleda post-kolumnen eluent till avfall innan den kommer in i jonkällan. När alla proverna har eluterats kan flera reaktionsövervakningsdata behandlas. I denna representativa analys, tre beta-gal peptider och två albumin peptider övervakades från spetsade beta-gal och bearbetade plasma albumin proteiner.Precisionen för arbetsflödet för automatiserad provberedning beräknades som procent av varianskoefficienten för det totala proteomiska valda arbetsflödet för reaktionsövervakning minus procentskoefficienten för den vätskekromatografi tandemmassepektrometri. Som väntat observerades bra signalintensiteter för både de mänskliga serumalbumin och beta-gal-proteinerna. För att övervaka precisionen hos de flytande överförande stegen kan stabila isotopmärkta peptidstandarder spetsas för det endogena humana serumalbumin och exogent beta-gal-proteinet i oberoende reagensöverföringssteg.För att validera det automatiserade arbetsflödet för proteomiskt provförberedelse beräknades intradagskoefficienten för variansvärden från 21 brunnar som förberetts samma dag. Den genomsnittliga intradagsprocentskoefficienten för varians för 40 proteiner varierade från 4–20 %För att utvärdera kanteffekten av det plattbaserade automatiserade arbetsflödet kan procentkoefficienten för varians beräknas från specifika brunnar inom angivna kolumner och rader. I detta representativa experiment var de multipla reaktionsövervakningssignalintensiteterna likartade i alla kolumn- och radkonfigurationerna med procentkoefficienten för variansen som sträcker sig från 3-22%De viktigaste stegen är att lägga till ett prov på rätt sätt enligt önskad 96-brunnsplattkarta och korrekt ställa in reagensplattan enligt instruktionen av programvaran.Denna automatiserade proteomiska provberedningsmetod gör det möjligt för forskare att samla in tillförlitliga och kvantitativa proteomikdata i stor skala.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Time-resolved ElectroSpray Ionization Hydrogen-deuterium Exchange Mass Spectrometry for Studying Protein Structure and Dynamics

Tidsupplöst elektrosprayjonisering Väte-deuterium Exchange-masspektrometri för att studera Protein Structure and Dynamics

Intrinsically disordered proteins (IDPs) have long been a challenge to structural biologists due to their lack of stable secondary structure elements. ...

Resolving Affinity Purified Protein Complexes by Blue Native PAGE and Protein Correlation Profiling

Lösa affinitetsrenat proteinkomplex av Blue Native PAGE och protein Korrelation profilering

Most proteins act in association with others; hence, it is crucial to characterize these functional units in order to fully understand biological ...

Lipid Droplet Isolation for Quantitative Mass Spectrometry Analysis

Lipid Droplet Isolation för Kvantitativ masspektrometri Analys

Lipid droplets are vital to the replication of a variety of different pathogens, most prominently the Hepatitis C Virus (HCV), as the putative site of ...

Glycoproteomics of the Extracellular Matrix: A Method for Intact Glycopeptide Analysis Using Mass Spectrometry

Glycoproteomics av ​​den extracellulära matrisen: En metod för intakt glykopeptiden analys med masspektrometri

Fibrosis is a hallmark of many cardiovascular diseases and is associated with the exacerbated secretion and deposition of the extracellular matrix (ECM). ...

Sample Preparation for Mass Spectrometry-based Identification of RNA-binding Regions

Provberedning för Mass Spectrometry-baserade identifiering av RNA-bindande regioner

Noncoding RNAs play important roles in several nuclear processes, including regulating gene expression, chromatin structure, and DNA repair. In most ...

Optimal Preparation of Formalin Fixed Samples for Peptide Based Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization Mass Spectrometry Imaging Workflows

Optimal förberedelse av formalinbeständiga prover för peptid baserat Matrix assisterad Laser Desorption/jonisering masspektrometri Imaging arbetsflöden

The use of matrix-assisted laser desorption/ionization, mass spectrometry imaging (MALDI MSI) has rapidly expanded, since this technique analyzes a host ...

Detection of Protein Ubiquitination Sites by Peptide Enrichment and Mass Spectrometry

Detektion av protein ubiquitination platser av peptidanrikning och masspektrometri

The posttranslational modification of proteins by the small protein ubiquitin is involved in many cellular events. After tryptic digestion of ...

An All-in-one Sample Holder for Macromolecular X-ray Crystallography with Minimal Background Scattering

En allt-i-ett-provhållare för makro molekyl ära röntgenkristallografi med minimal bakgrunds spridning

Macromolecular X-ray crystallography (MX) is the most prominent method to obtain high-resolution three-dimensional knowledge of biological macromolecules. ...

Sample Preparation for Probe Electrospray Ionization Mass Spectrometry

Provberedning för probe electrospray jonisering Masspektrometri

Mass spectrometry (MS) is a powerful tool in analytical chemistry because it provides very accurate information about molecules, such as mass-to-charge ...

Quantitative Analysis of the Cellular Lipidome of Saccharomyces Cerevisiae Using Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry

Quantitative Analysis of the Cellular Lipidome of Saccharomyces Cerevisiae Using Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry

Kvantitativ analys av cellulär lipidom e av Saccharomyces Cerevisiae med hjälp av flytande kromatografi tillsammans med Tandem Mass Spectrometri

Lipids are structurally diverse amphipathic molecules that are insoluble in water. Lipids are essential contributors to the organization and function of ...