Name: ex vivo method for assessing the mouse reproductive tract spontaneous motility and a matlab-based uterus motion tracking algorithm for data analysis
Uploaded: 2019-09-01T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Method for Assessing the Mouse Reproductive Tract Spontaneous Motility and a MATLAB-based Uterus Motion Tracking Algorithm for Data Analysis at JoVE.c

עבודה זו נתמכת על-ידי קרנות IU פנימיות. . לפני שהוא תכנן את המחקר XC ו-AGO היו מעורבים בעיצוב הניסויים המתוארים.  FL ו-AGO ניתחו ופרשו את הנתונים. KLL, איוב, חליל ביצע את כל הניסויים vivo ex . חליל כתב את ה-MATLAB. . כתבתי את כתב היד  כל המחברים קראו ואישרו את הגרסה הסופית של כתב היד.

כל ההליכים עם בעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים מוסדיים בבית הספר לרפואה של אוניברסיטת אינדיאנה (אינדיאנפוליס, IN). 2-5 חודשים-129S-C57BL/6 עכברים בוגרים מינית שימשו במחקר.
זהירות: להבטיח בטיחות על ידי לבישת חלוק מעבדה, מסכה, וכפפות כאשר עובדים עם בעלי חיים וחו...

<ol>
	<li>Kuijsters, N. P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uterine+peristalsis+and+fertility:+current+knowledge+and+future+perspectives:+a+review+and+meta-analysis.">Uterine peristalsis and fertility: current knowledge and future perspectives: a review and meta-analysis.</a> Reproductive BioMedicine Online. 35 (1), 50-71 (2017).</li><li>Kural, M., Noor, N. N., Pandit, D., Joshi, T., Patil, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Menstrual+characteristics+and+prevalence+of+dysmenorrhea+in+college+going+girls.">Menstrual characteristics and prevalence of dysmenorrhea in college going girls.</a> Journal of Family Medicine and Primary Care. 4 (3), 426-431 (2015).</li><li>Dehnavi, Z. M., Jafarnejad, F., Kamali, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effect+of+aerobic+exercise+on+primary+dysmenorrhea:+A+clinical+trial+study.">The Effect of aerobic exercise on primary dysmenorrhea: A clinical trial study.</a> Journal of education and health promotion. 7, 3 (2018).</li><li>Lindner, H. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Significance+of+prostaglandins+in+the+regulation+of+cyclic+events+in+the+ovary+and+uterus.">Significance of prostaglandins in the regulation of cyclic events in the ovary and uterus.</a> Advances in prostaglandin and thromboxane research. 8, 1371-1390 (1980).</li><li>Bernardi, M., Lazzeri, L., Perelli, F., Reis, F. M., Petraglia, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysmenorrhea+and+related+disorders.">Dysmenorrhea and related disorders.</a> F1000 research. 6, 1645 (2017).</li><li>Marjoribanks, J., Ayeleke, R. O., Farquhar, C., Proctor, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonsteroidal+anti-inflammatory+drugs+for+dysmenorrhoea.">Nonsteroidal anti-inflammatory drugs for dysmenorrhoea.</a> The Cochrane database of systematic reviews. 7, 001751 (2015).</li><li>Oladosu, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+skeletal+muscle+activity+precedes+spontaneous+menstrual+cramping+pain+in+primary+dysmenorrhea.">Abdominal skeletal muscle activity precedes spontaneous menstrual cramping pain in primary dysmenorrhea.</a> American journal of obstetrics and gynecology. 219 (1), 91 (2018).</li><li>Lawson, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Occupational+exposures+among+nurses+and+risk+of+spontaneous+abortion.">Occupational exposures among nurses and risk of spontaneous abortion.</a> American journal of obstetrics and gynecology. 206 (4), 327-328 (2012).</li><li>Mazze, R. I., Wilson, A. I., Rice, S. A., Baden, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+development+in+mice+exposed+to+isoflurane.">Fetal development in mice exposed to isoflurane.</a> Teratology. 32 (3), 339-345 (1985).</li><li>Byers, S. L., Wiles, M. V., Dunn, S. L., Taft, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+estrous+cycle+identification+tool+and+images.">Mouse estrous cycle identification tool and images.</a> PLoS One. 7 (4), 35538 (2012).</li><li>Caligioni, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+reproductive+status/stages+in+mice.">Assessing reproductive status/stages in mice.</a> Current protocols in neuroscience. , (2009).</li><li>Segal, S., Csavoy, A. N., Datta, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+tocolytic+effect+of+catecholamines+in+the+gravid+rat+uterus.">The tocolytic effect of catecholamines in the gravid rat uterus.</a> Anesthesia and analgesia. 87 (4), 864-869 (1998).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenylephrine,+a+common+cold+remedy+active+ingredient,+suppresses+uterine+contractions+through+cAMP+signalling.">Phenylephrine, a common cold remedy active ingredient, suppresses uterine contractions through cAMP signalling.</a> Scientific reports. 8 (1), 11666 (2018).</li><li>Domino, M., Pawlinski, B., Gajewski, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomathematical+pattern+of+EMG+signal+propagation+in+smooth+muscle+of+the+non-pregnant+porcine+uterus.">Biomathematical pattern of EMG signal propagation in smooth muscle of the non-pregnant porcine uterus.</a> PLoS One. 12 (3), 0173452 (2017).</li><li>Crane, L. H., Martin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pace-maker+activity+in+the+myometrium+of+the+oestrous+rat:+in+vivo+studies+using+video-laparoscopy.">Pace-maker activity in the myometrium of the oestrous rat: in vivo studies using video-laparoscopy.</a> Reproduction, fertility, and development. 3 (5), 519-527 (1991).</li></ol>

כאן, תיארנו שיטה להערכת כמובן ספונטני של כל מערכת הרבייה המכרסמים, הכוללת את השחלות, ההטלה, קרניים הרחם והנרתיק. השתמשנו בשיטה דומה כדי להדגים את השפעת ההרפטית של הphenylephrine על תנועתיות הרחם הספונטנית13, עם זאת, בעבר לא יכולנו לספק ניתוח כמותי של הנתונים. בעבודה זו, פיתחנו אלגורית?...

כאיבר הנשי העיקרי, הרחם הוא חיוני לרבייה וחיוני להזנה של העובר1. הרחם מורכב משלוש שכבות: הפריטרינום, myometrium ו רירית. Myometrium הוא שכבת הקונקטילה הגדולה של הרחם וממלא תפקיד מפתח במסירה העובר. רירית הרחם היא השכבה הפנימית ביותר בטנה חלל רחמי והוא חיוני עבור השתלת העובר. בנשים שאינן בהריון של גיל הרבייה, שכבת רירית הרחם היא לשפוך חודשי בתחילת מחזור המחזור. Myometrium מסייע בתהליך זה לשפוך על ידי שמירה על התכווצויות myomeמשפטו ספונטנית הדרושים לניקוי רקמת רירית הרחם נמק מהרחם1.
למרבה הצער, הגדילה הגוברת של משפט העצמי עלולה לגרום לתופעות לוואי שליליות כגון דינוריאה, או כאבי וסת כואבים. הדבר נראה במיוחד אצל נשים צעירות וביטול נשים מפרנות2. עם זאת, הדברת שונה עבור כל אישה תלוי בחוזק של הצירים myometrial שלהם; התכווצויות חזק יותר משויכים לעתים קרובות עם התחושה של התכווצויות חמורות3. שימוש באולטרסאונד של הרחם יכול להיות מזוהה בדרך כלל כגלים של רירית הרחם. שחרור משופר של פרוסטגלנדינים במהלך הווסת4 ברחם שעברו sl, רירית הרחם הוא האמין לתרום להגדלת מבחן היתר משפט, וכתוצאה מכך איסכמיה ו היפוקסיה של שריר הרחם וכך גדל . כאב3
חוסר מעשה חמור יכול לעכב את הפעילות היום יומית של נשים מסוימות ו 3 כדי 33% של נשים יש כאב חמור מאוד, אשר יכול לגרום לאישה להיות מרותק למיטה עבור 1 עד 3 ימים כל מחזור הווסת5. דימננוריאה היא הגורם המוביל לתחלואה גינקולוגית בנשים בגיל הרבייה, ללא קשר לגיל, ללאום ולמעמד הכלכלי5. השכיחות המשוערת של חוסר הדברת הוא גבוה ומשתנה, החל מ 45% עד 93% אצל נשים בגיל הרבייה5.  דימננוריאה-כאבים משויכים יש השפעה על חיי היומיום של נשים עלול לגרום לביצועים אקדמיים עניים אצל מתבגרים, איכות נמוכה יותר של שינה, הגבלה של פעילויות יומיומיות, ואת מצב הרוח משתנה5.
הרבה נשים שחווים האתר מהווה מקום לטיפול בתרופות מנוגדות לדלפק כדי להקל על כאבם. תרופות כאלה מעל לדלפק מכילות מעכבי ציקלוחמצן (קוקס) אשר מונעים היווצרות של פרוסטגלנדינים6. עם זאת, מעכבי קוקס קשורים לאירועים וכלי דם לוואי, ועל כ -18% מהנשים עם הדידון אינם מגיבים למעכבי האלה7. לכן, יש צורך בתרופות חדשות כדי להפחית את התכווצויות הווסת. כיוון שמעל הרחם תורם לפתוגנזה של הדינוריאה, אסטרטגיה אפשרית אחת יכולה להיות השימוש בהרפיית הרחם.
מועיל לכמת את ההשפעות של תרופות מרפה פוטנציאלי במודל של באופן טבעי המתרחשים הצירים myometrial שפט ספונטנית כמו גל. עם זאת, עד כה, לא יעיל vivo שיטה לשעבר לבדיקת תרופות מרגיעות שרירים ברחם שלמים תוארה. כיום, מדידות מתח איזומטרי משמשות כדי להעריך את ההשפעות של תרופות להרפדלות. במהלך מדידות כאלה, רצועת שריר הרחם נשמרת באורך קבוע תחת מראש באמבט רקמה בעוד הכוח של התכווצויות שריר הרחם נרשם לפני ואחרי גירוי אוקסיטוצין בנוכחות או העדר של סם מרפה. למרות שגישה זו מועילה מאוד, היא דורשת ציוד יקר. יתר על כן, התכווצויות איזומטרי לא דומה הצירים הספונטאני הספונטנית כמו גל שמתרחשים באופן טבעי ברחם שלם. באופן ייחודי, גלי הרחם myometrial שפט במכרסמים יכול להיות מדומה כמו קרן הרחם לתנועתיות כאשר מערכת הרבייה כולה (שחלות, ההטלה, הרחם, והנרתיק) נשמרת בפתרון מאגר. כאן, אנו מציגים שיטה vivo ex לניטור התנועתיות הספונטנית של רחם העכבר ללא שינוי הממוקם בצלחת פטרי המכילה מאגר קרבס מחמצן. כמו כן, אנו מתארים אלגוריתם כימות תנועתיות ניצול מעקב MATLAB תנועה. גישה זו מספקת חלופה קלה וזולה פחות לבדיקת הפוטנציאל ההרפייתי של תרופות ותרכובות סינתטיות טבעיות.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:671px;" width="670">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:208px;">Epinephrine hydrochloride</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:75px;">&#160;E4642&#160;</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:208px;">Dulbecco&#39;s PBS</td>
			<td style="width:161px;">Fisher Sceintific&#160;</td>
			<td style="width:75px;">17-512Q</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:208px;">Ethanol 200 PROOF</td>
			<td style="width:161px;">Decon Laboratories</td>
			<td style="width:75px;">2701</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:208px;">NaCl</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:75px;">S7653</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:208px;">Glucose</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:75px;">G7528</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:208px;">KCl</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:75px;">P9333</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="29">
			<td height="29" style="height:29px;width:208px;">CaCl2 &#183; 2H2O</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:75px;">C5080</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:208px;">NaH2PO4</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:75px;">S0751</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="29">
			<td height="29" style="height:29px;width:208px;">MgCl2&#160; &#183; 6H2O</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:75px;">M9272</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="29">
			<td height="29" style="height:29px;width:208px;">NaHCO3</td>
			<td style="width:161px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:75px;">S6297</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="50">
			<td height="50" style="height:50px;width:208px;">Isoflurane, USP</td>
			<td style="width:161px;">Patterson Veterinary</td>
			<td style="width:75px;">07-893-2374</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="50">
			<td height="50" style="height:50px;width:208px;">Dissecting Extra-Fine-Pointed Precision Splinter Forceps</td>
			<td style="width:161px;">Fisher Sceintific</td>
			<td style="width:75px;">13-812-42</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="39">
			<td height="39" style="height:39px;width:208px;">Curved Hardened Fine Iris Scissors</td>
			<td style="width:161px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:75px;">14091-09</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="49">
			<td height="49" style="height:49px;width:208px;">Dissection High-performance Modular Stereomicroscope</td>
			<td style="width:161px;">Leica</td>
			<td style="width:75px;">MZ6&#160;</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:208px;">Digital 5 Megapixel Color Microscope Camera with active cooling system</td>
			<td style="width:161px;">Leica</td>
			<td style="width:75px;">&#160;DFC425 C</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="45">
			<td height="45" style="height:45px;width:208px;">Stereomaster Microscope Fiber-Optic Light Sources</td>
			<td style="width:161px;">Fisher Sceintific&#160;</td>
			<td style="width:75px;">12-562-21</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="45">
			<td height="45" style="height:45px;width:208px;">Weigh Boat</td>
			<td style="width:161px;">Fisher Sceintific&#160;</td>
			<td style="width:75px;">WB30304</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:208px;">Convertors Astound Standard Surgical Gown&#160;</td>
			<td style="width:161px;">Cardinal Health&#160;</td>
			<td style="width:75px;">9515</td>
			<td style="width:227px;">Small, Medium or Large</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:208px;">Gloves</td>
			<td style="width:161px;">McKesson Corporation</td>
			<td style="width:75px;">20-1080</td>
			<td style="width:227px;">Small, Medium, or Large; powder-free sterile latex or nitrile surgical gloves</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">&#160;Petri Dish</td>
			<td style="width:161px;">Corning Falcon</td>
			<td>351029</td>
			<td style="width:227px;">100 mm</td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;">&#160;Petri Dish</td>
			<td style="width:161px;">Corning Falcon</td>
			<td style="width:75px;">353001</td>
			<td style="width:227px;">35 mm</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">95% O2- 5% CO2 gas mixture</td>
			<td>Praxair</td>
			<td style="width:75px;">&#160;MM OXCD5-K</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Ear-loop Masks</td>
			<td>Valumax International</td>
			<td style="width:75px;">5430E-PP</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">DSLR 24.2 MP Camera</td>
			<td>Canon</td>
			<td style="width:75px;">EOS Rebel T6i</td>
			<td style="width:227px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:208px;">MATLAB</td>
			<td style="width:161px;">MathWorks</td>
			<td style="width:75px;">N/A</td>
			<td style="width:227px;">version 2019 or later</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex vivo method for assessing the mouse reproductive tract spontaneous motility and a matlab-based uterus motion tracking algorithm for data analysis

דימננוריאה, או התכווצויות כואבות, הוא הסימפטום השכיח ביותר הקשורים מיעוט בנקבות וחומרת שלה יכול להפריע חיי היומיום של נשים. כאן, אנו מציגים שיטה קלה וזולה שתהיה אינסטרומנטלית לבדיקת תרופות חדשות היורדת מתגובת הרחם. שיטה זו מנצלת את היכולת הייחודית של מערכת הרבייה של העכבר כולו כדי להפגין תנועתיות ספונטנית כאשר מתוחזק לשעבר vivo בצלחת פטרי המכילה מאגר קרבס מחמצן. התנועתיות הספונטנית הזאת דומה לפעילות הניסיונית של הרחם האנושי, המכונה גלי רירית-רחם. כדי להדגים את יעילות השיטה, העסקנו סם להרפיית רחם מוכר, אפינפרין. אנו מדגימים כי התנועתיות הספונטנית של מערכת הרבייה של העכבר כולו יכולה להיות מהירה והפיך מעכבות על ידי 1 μM אדרנלין במודל זה פטרי צלחת. תיעוד שינויי תנועתיות הרחם ניתן לבצע בקלות באמצעות טלפון חכם רגיל או מצלמה דיגיטלית מתוחכמת. פיתחנו אלגוריתם מבוסס MATLAB המאפשר מעקב תנועה לכמת שינויי תנועתיות הרחם ספונטנית על ידי מדידת שיעור של תנועות קרן הרחם. היתרון העיקרי של גישה זו vivo ex היא כי מערכת הרבייה נשאר שלם לאורך כל הניסוי כולו, שמירה על כל אינטראקציה הסלולר הפנימית בתוך רחמי. המגבלה העיקרית של הגישה הזאת היא כי עד 10-20% של שטרן עלול להפגין תנועתיות ספונטנית. עד כה, זוהי השיטה הvivo לשעבר הכמותית הראשונה להערכת תנועתיות הרחם הספונטנית במודל צלחת פטרי.

איור 1 מראה תמונות מייצגות שצולמו במהלך הליכי הבידוד של דרכי הרבייה המתוארים בפרוטוקול זה. כדי להימנע מזיהום מאגר עם פרווה, אשר יקטין את איכות הווידאו, הלחלח את גוף העכבר עם 70% אתנול. בחינת הסדר העיקרית עבור סעיף הניתוח של הפרוטוקול היא למצוא את שלפוחית השתן. הרחם והנרתיק יה?...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Method for Assessing the Mouse Reproductive Tract Spontaneous Motility and a MATLAB-based Uterus Motion Tracking Algorithm for Data Analysis at JoVE.c

Ex Vivo Method for Assessing the Mouse Reproductive Tract Spontaneous Motility and a MATLAB-based Uterus Motion Tracking Algorithm for Data Analysis

התכווצויות הרחם חשובים לרווחתם של הנקבות. עם זאת, באופן פתולוגי הגדילה הפתולוגית עלולה לגרום לדיסנוריאה, במיוחד לנשים צעירות. כאן, אנו מתארים הכנה vivo ex פשוטה המאפשרת הערכה מהירה של היעילות של מרפה שרירים חלקה שניתן להשתמש בהם לטיפול בדינוריאה.

שיטה Vivo Ex להערכת בדרכי הרבייה של העכבר לתנועתיות ספונטנית מעקב הרחם MATLAB מבוסס על התנועה אלגוריתם לניתוח נתונים

Dysmenorrhea, or painful cramping, is the most common symptom associated with menses in females and its severity can hinder women&#39;s everyday lives. ...

הפרוטוקול שלנו הוא משמעותי כי הוא מספק את שיטת האקס ויוו הכמותית הראשונה להערכת תנועתיות ספונטנית של רחם שלם. גישה חדשנית זו מספקת חלופה קלה ופחות יקרה לבדיקת הפוטנציאל הרפה של תרופות המתרחשות באופן טבעי בתרכובות סינתטיות. יתרון מרכזי של טכניקה זו הוא כי כל האינטראקציות התאיות תוך רחמי להישאר שלם לאורך כל הניסוי.על התכווצות הרחם קשורה דיסמניוריאה, אשר מרגיעי הרחם עשוי להיות שימושי לטיפול. שיטה זו מספקת דרך קלה לבדוק מרגיעים חדשים. לאחר אישור שלב מחזור estrous, מניחים את העכבר בתצב supine, ולהפיץ את גפיים כדי לחשוף את אזור האגן הבטן.הרטב את הבטן עם 70% אתנול, ולהשתמש מדפים כדי להרים בזהירות את העור מעולה הדגדגן. בצע חתכים רוחביים קטנים על ההיבטים הרוחבים של אזור הבטן התחתונה עד גפיים העליונות כדי לחשוף את peritoneum. בזהירות לחתוך דרך peritoneum לחשוף את מערכת העיכול מבלי לפגוע בקרני הרחם, ולהשתמש מדפים כדי להסיר את fascia ואת רקמת השומן המכסה את מערכת העיכול.הסר את התריסודן, ג'ג'ונום, ileum, cecum, ואת המעי הגס העולה וה רוחבי. אתר את שלפוחית השתן כדי לאתר את הנרתיק שנמצא ישירות מתחת לשלפוחית השתן. אתר את סימפיזת הערווה בהתכנסות של עצמות הערווה, caudal לשלפוחית השתן, ולהשתמש במספריים כדי לבצע בזהירות חתך בצדדים הצדדיים של סימפיזת הערווה דרך הרקמה הבין-גולגולתית fibrocartilaginous כדי לקבל גישה ולספק מסלול לחילוץ הנרתיק.חותכים דרך הנקבים הממוקמים בין פי הטבעת לחלק התחתון של הפות, ולהשתמש במלקחיים כדי להרים את הנרתיק כדי לאפשר כריתה איטית של פי הטבעת. לזהות את שתי קרני הרחם כי bifurcate לתוך מזלג rostrally לתוך הנרתיק ולאתר oviduct מפותל השחלה בסוף כל קרן. זיהוי נכון של קרני הרחם הוא קריטי להליך כדי להבטיח שהרקמות לא ייפגעו.השתמש מספריים ניתוח קטן כדי להסיר את כל הרצועות להתחבר ולתמוך קרניים, oviducts ושחלות בתוך חלל הבטן, ולהסיר את הנרתיק, הרחם, oviducts ושחלות. מעבירים את כל מערכת הרבייה המבודדת לצלחת פטרי 100 מילימטר המכילה 10 מיליליטר של PBS של דולבקו. השתמש מדפים ומספריים כירורגיים כדי להסיר כל רקמת חיבור ושומן המקיפה את קרני הרחם ואת הנרתיק, כמו גם כל פרווה באזור הערווה שיכול לעכב את איכות התמונה.הסר את הרצועה הרחבה כדי לאפשר תנועתיות של קרני הרחם ולשטוף את הרקמה פעמיים עם PBS טרי של Dulbecco לכל לשטוף לפני העברת מערכת הרבייה מבודדת לתוך צלחת פטרי 35 מילימטר המכיל שלושה מיליליטר של פתרון קרבס מחומצן. להדמיית תנועתיות ספונטנית, מניחים את צלחת פטרי על משטח שחור בטמפרטורת החדר, ומאפשרים 15 עד 30 דקות להתחלת התכווצויות ספונטניות. כאשר ניתן לצפות בתנועה, להקליט את תנועתיות הרחם ספונטנית במשך 10 דקות ממטוס אקסיאלי באמצעות כל סוג של ציוד וידאו דיגיטלי.לאחר מכן, להעביר את ההכנה לתוך צלחת פטרי המכיל חיץ קרבס מחומצן בתוספת תרכובת הבדיקה ולתזמן את תנועתיות הרחם ספונטנית במשך 10 דקות נוספות באותו אופן. בסוף תקופת ההקלטה, לשטוף את כל מערכת הרבייה ב 10 מיליליטר של PBS של Dulbecco בצלחת פטרי 100 מילימטר, ולהעביר את המדגם לתוך צלחת פטרי חדשה של חיץ קרבס מחומצן טרי כדי להעריך את הפיך של הטיפול. הקלט את תנועתיות הרחם הספונטנית במשך כעשר דקות באותו אופן, כמו בשתי ההקלטות האחרונות.לאחר מכן להעביר את ההכנה עוד 35 מילימטר צלחת פטרי מלא חיץ קרבס מחומצן בתוספת הרכב עבור תרכובת הבדיקה כדי להבטיח כי אין שינויים הנגרמים מכנית תנועתיות הרחם ספונטנית. הכנת דרכי הרבייה הפגינה תנועתיות גבוהה בלוחות A ו- C בהיעדר אפינפרין. אבל פנוטיפ זה רדום בפאנל B עם נוכחות של אפינפרין מיקרו מולר אחד.כאן, ניתוח נתונים מדגם של ניהול אפינפרין והתאוששות תנועתיות ספונטנית מוצג, הממחיש כיצד ההשפעות של ההורמון על תנועתיות ספונטנית בדרכי הרבייה ניתן לכמת מן ההקלטות של הרקמה נלקח לפני, במהלך, ואחרי טיפול מורכב הבדיקה. חשוב להימנע דחיסה או overstretching קרני הרחם אחרת שום התכווצות ספונטנית לא יצוין. השיטה שלנו עשויה לשמש גם לבדיקת תרכובות שעשויות להגדיל את התכווצות הרחם.הליך זה עשוי להיות מיושם על הרחם העכבר בהריון בשלבים המוקדמים יותר של ההריון. לניסוי זה יש פוטנציאל לשדרג לפורמט של שש צלחות היטב להקרנת תרופות תפוקה.

Research

JoVE Journal

Biology

Assessing Neural Stem Cell Motility Using an Agarose Gel-based Microfluidic Device

הערכת תנועתיות עצבי לתאי גזע באמצעות התקן הג&#39;ל מבוסס agarose Microfluidic

While microfluidic technology is reaching a new level of maturity for macromolecular assays, cell-based assays are still at an infant stage1. This is ...

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

שיטת לתרבות מוקדם של עוברים צ&#39;יק לשעבר vivo (תרבות חדש)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

In utero and ex vivo Electroporation for Gene Expression in Mouse Retinal Ganglion Cells

In utero and ex vivo Electroporation for Gene Expression in Mouse Retinal Ganglion Cells

ב electroporation ברחם לשעבר vivo על ביטוי גנים בתאים עכבר גנגליון רשתית

The retina and its sole output neuron, the retinal ganglion cell (RGC), comprise an excellent model in which to examine biological questions such as cell ...

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

מערכת ל<em&gt; Vivo לשעבר</em&gt; Culturing של לבלב עוברי

The pancreas controls vital functions of our body,  including the production of digestive enzymes and regulation of blood sugar  levels1. Although in the ...

A Novel Bayesian Change-point Algorithm for Genome-wide Analysis of Diverse ChIPseq Data Types

אלגוריתם רומן ייס שינוי נקודות לניתוח הגנום רחב, של סוגי נתוני ChIPseq מגוונים

ChIPseq is a widely used technique for investigating protein-DNA interactions. Read density profiles are generated by using next-sequencing of ...

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

Ex vivo Method for High Resolution Imaging of Cilia Motility in Rodent Airway Epithelia

שיטת vivo לשעבר להדמיה ברזולוציה גבוהה של תנועתיות צילה במכרסמי Airway epithelia

An ex vivo technique for imaging mouse airway epithelia for quantitative  analysis of motile cilia function important for insight into mucociliary  ...

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

רומן<em&gt; Ex vivo</em&gt; שיטת תרבות ללב העכבר העוברית

Developmental studies in the mouse are hampered  by the inaccessibility of the embryo during gestation. Thus, protocols to  isolate and culture individual ...

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

בVivo Microinjection וElectroporation של אשך העכבר

This video and article contribution gives a comprehensive description of microinjection and electroporation of mouse testis in vivo. This particular ...

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

Spatiotemporal Mapping of Motility in Ex Vivo Preparations of the Intestines

מיפוי Spatiotemporal של תנועתיות ב<em&gt; Ex Vivo</em&gt; תכשירים מהמעיים

Multiple approaches have been used to record and evaluate gastrointestinal motility including: recording changes in muscle tension, intraluminal pressure, ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

מדידת הקשיחות של<em&gt; Ex Vivo</em&gt; עכבר Aortas באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...