Name: a luciferase-fluorescent reporter influenza virus for live imaging and quantification of viral infection
Uploaded: 2019-08-14T14:45:00
Duration: 5 min 21 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Luciferase-fluorescent Reporter Influenza Virus for Live Imaging and Quantification of Viral Infection at JoVE.com

Исследования вируса гриппа в лаборатории LM-S частично финансируется Нью-йоркским центром передового опыта по гриппу (NYICE) (NIH 272201400005C), членом НИАИД Центры передового опыта в области исследований и эпиднадзора за гриппом (CEIRS) контракт No. HHSN272201400005C (NYICE) и Министерством обороны (DoD) Программа медицинских исследований (PRMRP) грант W81XWH-18-1-0460.

Авторам нечего раскрывать.

Исследователи полагались на рекомбинантных репортер-выражение вирусов в качестве жизненно важных молекулярных инструментов, чтобы понять и расширить на текущее понимание вирусной репликации и патогенеза26,27,28, 29 , 30 год , 31 год , 32 год , 33 , 34 , 35 лет , 36 , 37 , 38 , 39 , 40 г. , 41 год , 54. Наиболее часто излюбленными генами репортера являются люциферазы и флуоресцентные белки, главным образом благодаря технологическим достижениям в их идентификации, разработке улучшенных вариантов и обнаружению с помощью технологий визуализации43 , 44 , 45 г. , 46 , 47 год , 48. Рекомбинантные вирусы репортера часто используются для ускорения вирусологических анализов, изучения динамики вирусов in vitro и in vivo, а также для проверки эффективности утвержденных в настоящее время или новых вакцин и терапевтических подходов26, 27,28,29,30,31,32,33,34,35, 36,37,38,39,40,41,54. К сожалению, в случае IAV, прошлые исследования были ограничены выражением одного гена репортера, что препятствует типу исследования, которое может быть проведено 26,27,28,29 , 30 год , 31 год , 32 год , 33 , 34 , 35 лет , 36 , 37 , 38 , 39 , 40 г. , 41 год , 54. Чтобы избежать этого ограничения, мы создали репликации компетентных би-репортер IAV, который выражает Nluc luciferase и Венера флуоресцентный белок (BIRFLU).
В этом докладе мы описываем характеристику in vitro BIRFLU и экспериментальные подходы к использованию BIRFLU для отслеживания вирусной инфекции in vivo с помощью мышиной модели инфекции IAV. Выражение BIRFLU Nluc и Venus коррелировало с вирусными титрами. Кроме того, BIRFLU оставался стабильным и продолжал выражать оба гена репортера после того, как выздоровел из легких инфицированных мышей. Такой подход предоставляет исследователям прекрасную возможность изучать БПЛА в культивированных клетках и в моделях животных, включая выявление и разработку новых терапевтических альтернатив для лечения инфекций ИАВ.
Хотя BIRFLU был создан с использованием позвоночника PR8, другие рекомбинантные IAV с использованием различных типов, подтипа или вирусного штамма позвоночника могут быть созданы с использованием того же экспериментального подхода. Аналогичным образом, в этом докладе мы описали экспериментальные процедуры использования BIRFLU в мышиной модели IAV. Тем не менее, BIRFLU может быть ценной технологией для оценки инфекции IAV в других животных моделях.

Вирус гриппа А (IAV) является окутанным одноцепочечным отрицательным чувством сегментированного РНК-вируса семьи Orthomyxoviridae 1,2,3. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) оценивает 3-5 миллионов ежегодных случаев гриппа иболее 250 000 случаев смерти от гриппа во всем мире 4,5,6. К группам, особенно уязвимым к гриппу, относятсяпожилые люди, люди с ослабленным иммунитетом, а также дети 7,8,9,10,11. Хотя вакцины доступны и представляют собой наиболее распространенное и эффективное вмешательство против вирусной инфекции, IAV способен быстро развиваться и избежать уже существующего иммунитета3,12,13, 14 Год , 15. Возрождение пандемического штамма H1N1 в 2009 году и появление патогенного IAV подтверждает постоянную угрозу для общественного здравоохранения во всем мире4,16.
Во время эпидемии или пандемии крайне важно быстро определить патогенность и трансмиссивность новых изолированных вирусов. Имеющиеся в настоящее время методы обнаружения вируса отнимают много времени и иногда требуют использования трудоемких подходов, которые могут задержать завершение этих анализов17,18,19,20. Кроме того, современные вирусные анализы трудно масштабировать, что может быть необходимо в случае вспышки. Наконец, использование проверенных животных моделей инфекции, таких как мыши, морские свинки и хорьки регулярно используются и имеют жизненно важное значение для изучения инфекций гриппа, иммунных реакций, и эффективность новых вакцин и / или противовирусных препаратов. Тем не менее, эти модели являются ограничительными из-за неспособности наблюдать вирусную динамику в режиме реального времени; это ограничивает исследования статического изображения вирусных инфекций21,22,23,24,25. Звери, используемые в этих анализов также усыпили для того, чтобы определить вирусную нагрузку, тем самым увеличивая количество животных, необходимых для завершения этих исследований26. Чтобы обойти все эти ограничения, многие исследователи полагаются на использование рекомбинантных репликации компетентных, репортер-выражение IAVs, которые способны ускорения вирусологических анализов и обнаружения вирусной нагрузки и распространения in vivo в режиме реального времени26 ,27,28,29,30,31,32,33,34,35 ,36,37,38,39,40,41. Важно отметить, что эти репортер-выражение IAVs способны воспроизвести аналогично дикого типа (WT) IAVs в культуре клеток и в животных моделях инфекции33,42.
Флуоресцентные и биолюминесцентные белки являются двумя системами репортеров, обычно используемых исследователями из-за их чувствительности, стабильности и простоты использования. Кроме того, существует огромная поддержка и продвижение в флуоресцентных и биолюминесцентных технологий обнаружения белка43,44,45,46,47,48 . Флуоресцентные белки и люциферазы имеют различные свойства, которые позволяют им светиться, особенно отличается тем, как возбужденные состояния генерируются и как обнаружены выбросы43,44,45, 46,47,48. Флуоресцентные белки сначала возбуждаются, поглощая энергию, которая впоследствии высвобождается как свет на другой длине волны, поскольку молекулы уменьшаются до более низкого энергетического состояния43. С другой стороны, биолюминесценция происходит от химической экзотермической реакции, которая включает в себя субстрат, кислород, а иногда и АТБ для того, чтобы произвести свет45. Из-за различных свойств этих двух типов репортер белков, один, может быть, более выгодным, чем другие в зависимости от изучения интереса. В то время как флуоресцентные белки широко используются для наблюдения клеточной локализации28,41, их сигналы in vivo имеют неадекватную интенсивность и часто затенены аутофлуоресценцией в живых тканях49. Таким образом, исследователи полагаются на люциферазы для оценки вирусной динамики в живых организмах, хотя флуоресцентные белки могут быть предпочтительными для исследований ex vivo50,51,52,53. В отличие от флуоресцентных белков, люциферазы более удобны для исследований in vivo и более применимы в неинвазивных подходах26,27,28,29,30 , 31 год , 32 год , 33 , 34 , 35 лет , 36 , 37 , 38 , 39 , 40 г. , 41 год , 54. В конечном счете, на основе типа исследования, исследователи должны выбирать между использованием либо флуоресцентных или люциферазы репортер белка, как их считывание, который подвергает их изучению компромисс функциональных и чувствительности, и серьезно ограничивает полезность рекомбинантных вирусов репортера. Кроме того, существуют опасения относительно корреляции между экспрессией различных генов репортеров, использующих флуоресценцию или люциферазу систем и репликацию вируса или распространение, что может поставить под угрозу интерпретацию данных, полученных с репортер-выражение IAVs.
Мы преодолели это ограничение, создав рекомбинантную репликацию-компетентную би-репортерi IAV (BIRFLU), которая кодирует как флуоресцентный, так и люциферазный белок в том же вирусном геноме55 (Рисунок 1). Здесь, NanoLuc luciferase (Nluc), небольшой и яркий биолюминесцентный белок48, был вставлен вверх по течению гемагглютинина (HA) последовательности в вирусном сегменте HA гриппа A/Puerto Rico/08/1934 H1N1 (PR8)24,33, 40,55,56,57. Кроме того, Венера, часто используемый мономерный флуоресцентный белок, была введена в неструктурный (NS) вирусный сегмент32,33,36,41,55. Так как BIRFLU кодирует как для флуоресцентных, так и для luciferase репортер агены, либо репортер белка сигнал может быть использован в качестве считывания для определения вирусной репликации и распространения в пробирке или in vivo55. Дополнительную информацию о генерации и in vitro или in vivo характеристика BIRFLU можно найти в нашей недавней публикации55. BIRFLU может быть использован для проверки эффективности противовирусных препаратов или нейтрализации антител с помощью нового флуоресцентного и биолюминесцентного микронейнейтрализации анализа55. Кроме того, BIRFLU также может быть использован для оценки вирусной динамики в мышиной модели инфекции55. В этой рукописи мы описываем процедуры для характеристики BIRFLU55 in vitro и как изучать инфекцию BIRFLU у мышей с использованием систем визуализации люминесценции in vivo для обнаружения Nluc in vivo или Venus ex vivo.
Сочетание передовых методов в молекулярной биологии, исследованиях на животных и технологиях визуализации, приносит исследователям уникальную возможность использовать BIRFLU для исследований IAV, включая изучение взаимодействия вирус-хозяин, динамика вирусной инфекции; разработка новых подходов к вакцинам для терапевтического лечения инфекций ИАВ или потенциального использования ВСУ в качестве переносчика вакцины для лечения других патогенных инфекций.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>12-well Cell Culture Plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>665102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well Cell Culture Plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>662160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well Cell Culture Plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>657160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well Cell Culture Plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>655-180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adobe Photoshop CS4</td>
			<td>Adobe</td>
			<td></td>
			<td>This software is used in 3.1.10 and 4.4.7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovin Albumin solution (BA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7409</td>
			<td>Store at 4&#176; C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovin Serum Albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9647</td>
			<td>Store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture dishes 100mm</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>664-160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ChemiDoc MP Imaging System</td>
			<td>BioRad</td>
			<td></td>
			<td>This instrument is used in 4.4.7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal Violet</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>C581-100</td>
			<td>Store at Room temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dounce Tissue Grinders</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>7722-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s modified Eagle&#8217;s medium (DMEM)</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>15-013-CV</td>
			<td>Store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Seradigm</td>
			<td>1500-050</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Five- to seven-week-old female BALB/c mice</td>
			<td>National Cancer Institute (NCI)</td>
			<td>555</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>1001936040</td>
			<td>Store at Room temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Spectrum</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>124262</td>
			<td>This instrument is used for in vivo imaging (4.2 and 4.3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IX81 Motorized Inverted Microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>Olympus IX81</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Image 4.7.2 software</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td>This instrument is used for in vivo imaging (4.2 and 4.3)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lumicount</td>
			<td>Packard</td>
			<td></td>
			<td>This instrument is used for quantifying luciferase activity (3.2.6)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) epithelial cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-34</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monoclonal Antibody anti-NP Influenza A Virus HB-65</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>H16-L10-4R5</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nano-Glo Luciferase Assay Reagent</td>
			<td>Promega</td>
			<td>N1110</td>
			<td>This reagent is used to measure Nluc activity. Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral Buffered Formalin 10%</td>
			<td>EMD</td>
			<td>65346-85</td>
			<td>Store at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nunc MicroWell 96-Well Microplates</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>269620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin (PS) 100x</td>
			<td>Corning</td>
			<td>30-00-CI</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin/L-Glutamine (PSG) 100x</td>
			<td>Corning</td>
			<td>30-009-CI</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retiga 20000R Fast1394 Camera</td>
			<td>Qimaging</td>
			<td>Retiga 2000R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanner</td>
			<td>HP</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Texas Red-conjugated anti-mouse -rabbit secondary antibodies</td>
			<td>Jackson</td>
			<td>715-075-150</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tosylsulfonyl phenylalanyl chloromethyl ketone (TPCK)-treated trypsin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8802</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>J.T.Baker</td>
			<td>X198-07</td>
			<td>Store at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vmax Kinetic plate reader</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a luciferase-fluorescent reporter influenza virus for live imaging and quantification of viral infection

Вирусы гриппа А (IAVs) вызывают респираторные заболевания человека, связанные со значительными последствиями для здоровья и экономики. Как и в случае с другими вирусами, изучение IAV требует использования трудоемких вторичных подходов для обнаружения присутствия вируса в инфицированных клетках и/или в животных моделях инфекции. Это ограничение было недавно обойти с поколением рекомбинантных IAVs выражая легко прослеживается флуоресцентные или биолюминесцентные (люцифераза) репортер белков. Тем не менее, исследователи были вынуждены выбрать флуоресцентные или luciferase репортер генов из-за ограниченной способности генома IAV для включения иностранных последовательностей. Чтобы преодолеть это ограничение, мы создали рекомбинантный репликации компетентных би-репортер IAV (BIRFLU) устойчиво выражая как флуоресцентные и luciferase репортер ген легко отслеживать IAV инфекций в пробирке и in vivo. С этой целью были модифицированы вирусные неструктурные (NS) и гемагглютинин (HA) вирусные сегменты гриппа A/Puerto Rico/8/34 H1N1 (PR8) для кодирования флуоресцентной Венеры и биолюминесцентных белков Nanoluc luciferase, соответственно. Здесь мы описываем использование BIRFLU в мышиной модели инфекции IAV и обнаружение обоих генов репортера с помощью системы визуализации in vivo. Примечательно, что мы наблюдали хорошую корреляцию между выражениями как репортеров, так и вирусной репликацией. Сочетание передовых методов в молекулярной биологии, исследованиях на животных и технологиях визуализации, предоставляет исследователям уникальную возможность использовать этот инструмент для исследований гриппа, включая изучение взаимодействий и динамики вирусов-хозяев вирусных инфекций. Важно отметить, что возможность генетически изменить вирусный геном, чтобы выразить два иностранных генов из различных вирусных сегментов открывает возможности для использования этого подхода для: i) разработка новых вакцин IAV, ii) поколение рекомбинантных IAVs, которые может быть использован в качестве вакцинных переносчиков для лечения других патогенных инфекций человека.

Watch this Scientific Journal Video about A Luciferase-fluorescent Reporter Influenza Virus for Live Imaging and Quantification of Viral Infection at JoVE.com

A Luciferase-fluorescent Reporter Influenza Virus for Live Imaging and Quantification of Viral Infection

Люциферазе-флуоресцентный вирус гриппа репортер для живой визуализации и количественной оценки вирусной инфекции

Вирусы гриппа А (ИАВ) являются заразными респираторными патогенами, вызывающими ежегодные эпидемии и периодические пандемии. Здесь мы описываем протокол для отслеживания вирусных инфекций in vivo с помощью нового рекомбинантного люциферазы и флуоресценции,выражающей би-репортер IAV (BIRFLU). Этот подход предоставляет исследователям отличный инструмент для изучения IAV in vivo.

Influenza A viruses (IAVs) cause human respiratory disease that is associated with significant health and economic consequences. As with other viruses, ...

Исследователи ранее создали рекомбинантные вирусы гриппа, которые выражают либо флуоресцентные или биолюминесцентные белковые репортеры. Часть нашего единственного выражения генов репортера в вирусе гриппа серьезно ограничивает его использование в экспериментах. Наш протокол описывает использование вируса бирепортера гриппа, который выражает как флуоресентные, так и биолюминесцентные гены репортера, и, следовательно, преодолевает его ограничение.Основным преимуществом этого метода является использование одного рекомбинантного вируса гриппа для исследований in vitro и in vivo. При выполнении этого метода, быстрая инъекция люциферазы субстрата и правильное планирование обработки мышей имеет важное значение, потому что субстрат быстро метаболизируется. Также для улучшения обнаружения биолюминесцентного сигнала рекомендуется бритье мышей.Чтобы заразить мышей, начните с подготовки BIRFLU в 1X PBS. Поддерживайте вирус на льду до прививки. Проверьте на отсутствие рефлекса щепотку ногой, чтобы убедиться, что мышь анестезируется, и привить его интраназально с подготовленным разбавления BIRFLU.Убедитесь, что все мыши дышат должным образом, прежде чем вернуть их в свои клетки. Откройте программное обеспечение для визуализации и нажмите Initialize, а затем установите параметры, которые будут использоваться для изображения. Чтобы контролировать мышей, инфицированных BIRFLU, брить грудь, чтобы улучшить обнаружение биолюминесцентного сигнала.После того, как мыши анестезии, использовать 22 калибровочных иглы ретро-орбитально управлять 100 микролитров Nluc luciferase субстрата, разбавленный от одного до 10 в PBS. Сразу же после инъекции поместите животных в изолятор с грудью вверх. Затем поместите изоляционную камеру в инструмент визуализации, закройте дверь и приобретете изображения.После визуализации верните мышей в клетки и следите за ними до тех пор, пока они полностью не выздоровеют. Используйте инструмент окупаемости программного обеспечения для визуализации для анализа полученных данных о биолюминесценции, навещая область интереса и нажимая на меру. Для выполнения ex vivo изображения легких мыши, собирать легкие в соответствии с рукописными направлениями, начать приобретение изображения программного обеспечения, и установить параметры для изображения.Как только машина инициализирована, поместите легкие в черный фон лоток, и убедитесь, что ткани отделены друг от друга. Ввемите лоток в изображение, закройте дверь и приобретите изображения. После визуализации немедленно удалите ткани и храните их на льду при четырех градусах цельсия, если образцы будут обработаны в тот же день.Если они будут обработаны позже, заморозить их быстро в трубке на сухой лед, и хранить их при 80 градусов по Цельсию. Чтобы обработать изображения, выберите инструмент окупаемости инвестиций, нарисуйте области интереса вокруг каждого из отдельных легких и нажмите меру. BIRFLU характеризуется в пробирке, определяя уровни экспрессии Венеры, Нлука и НП в инфицированных клетках.Выражение Венеры и Нлука обнаруживается только в клетках, инфицированных BIRFLU, в то время как NP выражается как в клетках, инфицированных диким типом PR8, так и в инфицированных БИРФЛУ клетках. В инсценировке инфицированных клеток экспрессия не наблюдается. Кроме того, активность Nluc была измерена в супернатантах культуры тканей в 24, 48, 72 и 96 часов после заражения.Он обнаруживается уже через 24 часа после инфицирования, а уровень экспрессии увеличивается на 96 часов. Можно также продемонстрировать, что репликационная кинетики BIRFLU сравнима с вирусом PR8 дикого типа. BIRFLU имеет возможность выражать как флуоресцентные и биолюминесцентные гены репортера, и корреляция между ними может быть оценена с помощью in vivo и ex vivo изображения легкого мыши.Легкие мышей, инфицированных BIRFLU отображается высокая биолюминесценция в виво и флуоресценции ex vivo. Определены также вирусные титеры и генетическая устойчивость BIRFLU in vivo. Анализы бляшек на вирусах из легких мышей показали, что вирус может образовывать бляшки и выражать оба гена репортера.BIRFLU также может быть использован для оценки эффективности противовирусных и нейтрализующих антител против гриппа. Выход из этих анализов все были коррелированы друг с другом и быстро и легко сделать.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Using Bioluminescent Imaging to Investigate Synergism Between Streptococcus pneumoniae and Influenza A Virus in Infant Mice

Использование изображений Биолюминесцентный по расследованию синергизм между Пневмококк И вируса гриппа А в младенческой Мыши

During the 1918 influenza virus pandemic, which killed approximately 50 million people worldwide, the majority of fatalities were not the result of ...

High-throughput Detection Method for Influenza Virus

Высокая пропускная способность Метод обнаружения для вируса гриппа

Influenza virus is a respiratory pathogen that causes a high degree of morbidity and mortality every year in multiple parts of the world. Therefore, ...

Nasal Wipes for Influenza A Virus Detection and Isolation from Swine

Носовые салфетки для гриппа обнаружения вируса и изоляции от свиного

Surveillance for influenza A viruses in swine is critical to human and animal health because influenza A virus rapidly evolves in swine populations and ...

In Vitro Disassembly of Influenza A Virus Capsids by Gradient Centrifugation

In Vitro Disassembly of Influenza A Virus Capsids by Gradient Centrifugation

In Vitro разборке вируса гриппа капсиды по градиентное центрифугирование

Acid-triggered molecular processes closely control cell entry of many viruses that enter through the endocytic system. In the case of influenza A virus ...

Measuring Influenza Neuraminidase Inhibition Antibody Titers by Enzyme-linked Lectin Assay

Измерение гриппа нейраминидазы ингибирования Титры антител методом ферментативного лектина Пробирной

Antibodies to neuraminidase (NA), the second most abundant surface protein on influenza virus, contribute toward protection against influenza. Traditional ...

Fluorescence-based Neuraminidase Inhibition Assay to Assess the Susceptibility of Influenza Viruses to The Neuraminidase Inhibitor Class of Antivirals

Флуоресцентный на основе нейраминидазы Анализ ингибирования для оценки восприимчивости вирусов гриппа к нейраминидазы Ингибитор классу противовирусных препаратов

The neuraminidase (NA) inhibitors are the only class of antivirals approved for the treatment and prophylaxis of influenza that are effective against ...

Influenza A Virus Studies in a Mouse Model of Infection

Исследования вирусов гриппа A в мышиной модели инфекции

Influenza viruses cause over 500,000 deaths worldwide1 and are associated with an annual cost of 12 - 14 billion USD in the United States alone ...

Generation of Escape Variants of Neutralizing Influenza Virus Monoclonal Antibodies

Поколение побег вариантов нейтрализующих антител моноклональных вирус гриппа

Influenza viruses exhibit a remarkable ability to adapt and evade the host immune response. One way is through antigenic changes that occur on the surface ...

Imaging Cell Interaction in Tracheal Mucosa During Influenza Virus Infection Using Two-photon Intravital Microscopy

Изображений взаимодействия клеток в слизистой оболочки трахеи во время инфекции вируса гриппа с помощью двух Фотон прижизненной микроскопии

The analysis of cell-cell or cell-pathogen interaction in vivo is an important tool to understand the dynamics of the immune response to infection. ...

Live Imaging and Quantification of Viral Infection in K18 hACE2 Transgenic Mice Using Reporter-Expressing Recombinant SARS-CoV-2

Живая визуализация и количественная оценка вирусной инфекции у трансгенных мышей K18 hACE2 с использованием репортер-экспрессирующего рекомбинантного SARS-CoV-2

The coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic has been caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2). To date, SARS-CoV-2 has ...