Name: microwave-assisted preparation of 1-aryl-1h-pyrazole-5-amines
Uploaded: 2019-06-23T14:00:00
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이 연구는 빌과 린다 서리 기금에 의해 지원되었다.

주의: 사용하기 전에 모든 관련 재료 안전 데이터 시트(MSDS)를 검토하십시오. 마이크로파 반응기 프로토콜 검토 및 개인 보호 장비(안전 안경, 장갑, 실험실 코트, 전신 바지, 닫힌 발가락 신발)의 사용을 포함하여 마이크로파 반응기를 사용할 때 는 모든 적절한 안전 관행을 따르십시오. 이 절차는 아릴 히드라진과 3-아미노노나이트릴 또는 α-시아노케톤을 사용하여 작동하도록 설계되었습니다. 적...

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	<li>Gradler, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fragment-based+discovery+of+focal+adhesion+kinase+inhibitors.">Fragment-based discovery of focal adhesion kinase inhibitors.</a> Bioorganic &amp; Medicinal Chemistry Letters. 23 (19), 5401-5409 (2013).</li><li>Chandak, N., Kumar, S., Kumar, P., Sharma, C., Aneja, K. R., Sharma, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploration+of+antimicrobial+potential+of+pyrazolo[3,4-b]pyridine+scaffold+bearing+benzenesulfonamide+and+trifluoromethyl+moieties.">Exploration of antimicrobial potential of pyrazolo[3,4-b]pyridine scaffold bearing benzenesulfonamide and trifluoromethyl moieties.</a> Medicinal Chemistry Research. 22 (11), 5490-5503 (2013).</li><li>Huo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+biological+activity+of+novel+N-(3-furan-2-yl-1-phenyl-1H-pyrazol-5-yl)+amides+derivatives.">Synthesis and biological activity of novel N-(3-furan-2-yl-1-phenyl-1H-pyrazol-5-yl) amides derivatives.</a> Chinese Chemical Letters. 27 (9), 1547-1550 (2016).</li><li>Anand, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antileishmanial+activity+of+pyrazolopyridine+derivatives+and+their+potential+as+an+adjunct+therapy+with+miltefosine.">Antileishmanial activity of pyrazolopyridine derivatives and their potential as an adjunct therapy with miltefosine.</a> Journal of Medicinal Chemistry. 60 (3), 1041-1059 (2017).</li><li>Eldehna, W. M., El-Naggar, D. H., Hamed, A. R., Ibrahim, H. S., Ghabbour, H. A., Abdel-Aziz, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-pot+three-component+synthesis+of+novel+spirooxindoles+with+potential+cytotoxic+activity+against+triple-negative+breast+cancer+MDA-MB-231+cells.">One-pot three-component synthesis of novel spirooxindoles with potential cytotoxic activity against triple-negative breast cancer MDA-MB-231 cells.</a> Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry. 33 (1), 309-318 (2017).</li><li>Briebenow, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+optimization+of+substituted+5-aminopyrazoles+as+potent+and+selective+adenosine+A1+receptor+antagonists.">Identification and optimization of substituted 5-aminopyrazoles as potent and selective adenosine A1 receptor antagonists.</a> Bioorganic &amp; Medicinal Chemistry Letters. 20 (19), 5891-5894 (2010).</li><li>Marinozzi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyrazole[3,4-e][1,4]thiazepin-7-one+derivatives+as+a+novel+class+of+Farnesoid+X+Receptor+(FXR)+agonists.">Pyrazole[3,4-e][1,4]thiazepin-7-one derivatives as a novel class of Farnesoid X Receptor (FXR) agonists.</a> Bioorganic &amp; Medicinal Chemistry. 20 (11), 3429-3445 (2012).</li><li>Ochiai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+new+orally+available+active+phosphodiesterase+inhibitors.">Discovery of new orally available active phosphodiesterase inhibitors.</a> Chemical and Pharmaceutical Bulletin. 52 (9), 1098-1104 (2004).</li><li>Ganesan, A., Heathcock, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+unsymmetrical+pyrazines+by+reaction+of+an+oxadiazinone+with+enamines.">Synthesis of unsymmetrical pyrazines by reaction of an oxadiazinone with enamines.</a> Journal of Organic Chemistry. 58 (22), 6155-6157 (1993).</li><li>Sumesh, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicomponent+dipolar+cycloaddition+strategy:+combinatorial+synthesis+of+novel+spiro-tethered+pyrazolo[3,4-b]quinoline+hybrid+heterocycles.">Multicomponent dipolar cycloaddition strategy: combinatorial synthesis of novel spiro-tethered pyrazolo[3,4-b]quinoline hybrid heterocycles.</a> ACS Combinatorial Science. 18 (5), 262-270 (2016).</li><li>Bagley, M. C., Davis, T., Dix, M. C., Widdowson, C. S., Kipling, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microwave-assisted+synthesis+of+N-pyrazole+ureas+and+the+p38&#945;+inhibitor+BIRB+796+for+study+into+accelerated+cell+ageing.">Microwave-assisted synthesis of N-pyrazole ureas and the p38&#945; inhibitor BIRB 796 for study into accelerated cell ageing.</a> Organic &amp; Biomolecular Chemistry. 4 (22), 4158-4164 (2006).</li><li>Su, W., Lin, T., Cheng, K., Sung, K., Lin, S., Wong, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+on-pot+synthesis+of+N-(1,3-diphenyl-1H-pyrazol-5-yl)amides.">An efficient on-pot synthesis of N-(1,3-diphenyl-1H-pyrazol-5-yl)amides.</a> Journal of Heterocyclic Chemistry. 47 (4), 831-837 (2010).</li><li>Eagon, S., Anderson, M. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microwave-assisted+synthesis+of+tetrahydro-&#946;-carbolines+and+&#946;-carbolines.">Microwave-assisted synthesis of tetrahydro-&#946;-carbolines and &#946;-carbolines.</a> European Journal of Organic Chemistry. (8), 1653-1665 (2014).</li><li>Everson, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microwave+synthesis+of+1-aryl-1H-pyrazole-5-amines.">Microwave synthesis of 1-aryl-1H-pyrazole-5-amines.</a> Tetrahedron Letters. 60 (1), 72-74 (2019).</li></ol>

다수의 1-아릴-1H-피라졸-5-아민을 α-시아노케톤 또는 3-아미노크로토니틸과 1 M HCl의 아릴 히드라진을 결합하고 마이크로파 반응기에서 150°C로 용액을 가열하여 제조하였다. 거의 모든 화합물은 10-15 분에서 합성되었고, 가장 느린 기판은 가열14의35 분을 필요로합니다. 용매로 물을 사용하면 용액의 급속한 가열이 가능하고 유해 유기 용매의 사용을 최소화할 수 있습니다.</...

1-아릴-1 H-피라졸-5-아민의 유선형 합성을 만드는 자극은 이러한 작은 분자의 무수한 응용에 기인한다. 그(것)들은 키나아제 억제제1,항생제2,살충제3,및 다른 많은 생물학 활성 화합물 중4,5에나타납니다. 이 화합물에 대 한 합성 계획은 풍부, 하지만 대부분 복잡 한 격리 및 정화 기술을 포함. 일반적인 방법은 크로마토그래피 및/또는 재결정화를 통해 후속 정제에 선행된 알콜 또는 수성 용액에 있는 아릴 히드라진 및 3-aminocrotononitrile의 역류를 관련시킵니다 6, 7,7, 8,9,10. 소수의 고립 된 보고서는 마이크로 파 방사선을 사용하여 이러한 화합물의 합성을 상세히 했지만, 모든 광범위한 가열 시간이 필요하고 이전에보고 된 다른 방법11,12에 비해 거의 이점을 제공했습니다. .
그들의 유용성에도 불구하고, 상업 공급 업체에서 사용할 수있는 1-아릴-1H-pyrazole-5-아민의 제한된 수가있다. 우리는 최근에 마이크로파 반응기13을 사용하여 질소 이종주기를 준비하는 데 성공했고, 피라졸-5-아민 유사체에 대한 관련 방법론을 조사하기로 결정했다. 이 논문에서는 전자 레인지 방사선 하에서 1 MHCl에서 3-아미노 노 노 나이트 릴 또는 α-시아노케톤으로 아릴 히드라진을 반응시켜 1-아릴-1 H-피라졸-5-아민을 준비하는 절차를 자세히 설명합니다. 이 절차의 장점은 짧은 반응 시간 및 할로나이드, 니트릴, 페놀, 설폰 및 니트로기(14)를포함하는 다양한 작용기를 통합하는 능력을 포함한다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:757px;" width="757">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">2-5mL Microwave vial set</td>
			<td style="width:121px;">Chemglass</td>
			<td style="width:185px;">CG-4920-01&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Set includes appropriate stir bars and 20mm aluminum seals</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">Biotage Initiator+ microwave</td>
			<td style="width:121px;">Biotage</td>
			<td style="width:185px;">356007</td>
			<td>Includes crimper and decapper tool.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">Sonicator</td>
			<td style="width:121px;">Kendal</td>
			<td style="width:185px;">Ultrasonic Cleaner GB-928</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">Glassware oven</td>
			<td style="width:121px;">Quincy Lab</td>
			<td style="width:185px;">20GC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">4-Fluorophenylhydrazine hydrochloride</td>
			<td style="width:121px;">Fisher</td>
			<td style="width:185px;">AC119590100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">3-Aminocrotonitrile</td>
			<td style="width:121px;">Fisher</td>
			<td style="width:185px;">AC152451000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">CDCl3</td>
			<td style="width:121px;">Cambridge Labs</td>
			<td style="width:185px;">DLM-7-100</td>
			<td>99.8% D</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">Hydrochloric acid, concentrated</td>
			<td style="width:121px;">Fisher</td>
			<td style="width:185px;">A144SI-212</td>
			<td>Used to prepare 1 M HCl solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:284px;">Sodium hydroxide pellets</td>
			<td style="width:121px;">Fisher</td>
			<td style="width:185px;">S318-100</td>
			<td>Used to prepare 10% NaOH solution</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microwave-assisted preparation of 1-aryl-1h-pyrazole-5-amines

다양한 1-아릴-1H-피라졸-5-아민의 제조를 위한 합성 공정이 개발되었다. 이 방법의 마이크로파 매개 특성은 시간과 자원 모두에서 효율적이며 물을 용매로 활용합니다. 3-아미노크로토노나이트릴 또는 적절한 α-시아노케톤은 아릴 히드라진과 결합되어 1 M HCl에 용해된다. 혼합물은 150°C에서 마이크로파 반응기에서 가열된 후, 전형적으로 10-15분 동안 가열된다. 이 제품은 10% NaOH로 용액을 기초화하고 간단한 진공 여과로 원하는 화합물을 분리함으로써 쉽게 얻을 수 있습니다. 이 반응에서 용매로 물을 사용하는 것은 생산의 용이성과 유용성을 빌려주며,이 방법은 다양한 기능 그룹으로 쉽게 재현 할 수 있습니다. 일반적인 단리된 수율은 70-90%의 범위이며, 관찰된 수율의 거의 또는 전혀 변화없이 밀리그램에서 그램 규모로 반응을 수행할 수 있습니다. 이 분자및 그들의 유도체의 응용의 몇몇은 많은 그 외의 사이에서 살충제, 반대로 말라리아 및 화학요법을 포함합니다.

본 데모에서, 3-아미노토노나이트릴 및 4-플루오로페닐히드라진 염산염을 1-(4-플루오로페닐)-3-메틸-1 H-피라졸-5-아민(도1)을생성하기 위해 반응하였다. 도 2에 나타낸 마이크로파 바이알내의 출발 물질의 혼합물은 1M HCl 용매에서 시작 물질을 결합하여 생성된 이기종 현탁액을 나타낸다. 교반 막대가 자유롭게 회전할 수 있도록 교반 ?...

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Microwave-Assisted Preparation of 1-Aryl-1H-pyrazole-5-amines

1-아릴-1H-피라졸-5-아민은 마이크로파 반응기를 사용하여 1 M HCl 용액에서 3-아미노크로토노이트릴 또는 α-시아노케톤과 결합된 아릴 히드라진으로부터 제조된다. 대부분의 반응은 10-15 분 안에 수행되며 순수 한 제품은 70-90 %의 일반적인 절연 수율로 진공 여과를 통해 얻을 수 있습니다.

1-아릴-1 H-피라졸-5-아민의 전자레인지 보조 제제

A synthetic process for the preparation of a variety of 1-aryl-1H-pyrazole-5-amines was developed. The microwave-mediated nature of this method makes it ...

이 절차는 전자레인지 방사선 하에서 3-아미노노나이트 또는 알파 시아노케톤으로 아릴 수드라진을 사용하여 1-Aryl-1H-pyrazole-5-아민을 분리하는 방법을 설명합니다. 이 절차의 주요 장점은 대부분의 반응이 분 이내에 완료되기 때문에 빠른 반응 시간입니다. 우리의 절차는 또한 halides, nitriles, 페놀, 설폰 및 이질 순환과 같은 다양한 기능 성 그룹을 허용합니다.반응이 성공하기 위해서는 반응이 제대로 저장되고 전자 레인지 가루가 가열되기 전에 완전히 밀봉되는 것이 중요합니다. 먼저 유리 제품 오븐에서 하룻밤 동안 건조된 2~5밀리리터의 반응량을 위해 설계된 전자레인지 사악을 구하고 적절한 교반바를 추가하십시오. 연기 후드에 4개의 플루오로페닐하이드라진 염산염 2밀리몰과 전자레인지 사블에 3밀리몰레 2밀리몰을 넣습니다.이어서, 1개의 어금반 염산의 5밀리리터를 첨가하여 시약 0.4 의 농도를 만든다. 이질적인 서스펜션을 저어 서 저어 접시에 사악한 배치. 반응제가 용해도가 좋지 고 반응 혼합물을 제대로 교반할 수 없는 경우 용액을 더 큰 사악하게 옮기고 1개의 해금염염을 추가로 첨가한다.전자레인지 반응기 작동 매뉴얼에서 지정한 권장 용매 부피를 초과하지 마십시오. 이제 적절한 크림퍼 도구를 사용하여 전자레인지 사악한 캡으로 전자레인지를 밀봉하십시오. 연기 후드에서 전자 레인지 반응기로 사악한 을 옮기고 전자 레인지 프로그램의 반응 시간을 10 분으로 조정하고 온도는 섭씨 150도에서 매우 높게 조절합니다.가열 단계에서는 반응기 압력에주의를 기울입니다. 압력이 급격히 떨어지면 누출이나 선박 고장이 발생할 수 있습니다. 반응이 섭씨 40도 미만으로 냉각되면 전자레인지 반응기에서 연기 후드로 사악한 것을 옮기십시오.적절한 디캡 도구를 사용하여 캡을 제거합니다. 연기 부우에서, 파운딩 스탠드에 전자 레인지 사악한 을 교반 접시 위에 고정. 수산화 나트륨 10%의 밀리리터 2개를 추가하여 제품의 즉각적인 강수량을 유발합니다.pH가 10보다 큰 것을 보여주기 위해 지표 용지에 용액 한 방울을 놓습니다. 그런 다음 필요에 따라 믹싱을 돕기 위해 5~10분 동안 사악을 초음파 처리기로 놓습니다. 진공 여과 장치를 설치하고 용액을 깔때기에 붓습니다.그릇 벽에서 제품을 제거하기 위해 주걱으로 사악한 긁어. 그런 다음, 탈이온 된 물을 사용하여 전자 레인지 사악에서 남은 제품을 헹구고 고립 된 고체 제품을 씻어 낸다. 경우에 따라, 제품은 알칼리성 용액에서 오일.디클로로메탄 또는 에틸 아세테이트를 사용하여 액체 액체 추출을 사용하여 제품을 얻습니다. 그 후, 하룻밤 건조건조기로 원유 제품을 전송합니다. 신염수로클로로폼에서 양성자 NMR 스펙트럼을 획득하여 제품 정체성과 순도를 확인한다.이 데모에서는 3-아미노크로토노나이트와 4-플루오로페닐하이드라진 염산염이 1, 4플루로페닐-3-메틸-1H-피라졸-5-아민을 생산하기 위해 반응되었다. NMR은 피라졸의 4위치에서 아로마 양성자에 대응하는 5.4~6.0ppm 사이의 화학적 시프트 영역에서 특징적인 단일 피크를 가진 표적 5-아미노피라졸의 합성을 확인한다. 반응의 규모를 변화하 여, 사용자는 신속 하 게 제품의 그램에 밀리 그램을 생산할 수 있습니다.또한 반응제를 다양시켜 추가 기능을 추가할 수도 있습니다. 우리의 방법의 주요 장점은 1-Aryl-1H-pyrazole-5-아민의 급속한 합성을 허용한다는 것입니다. 이들은 생리 활성 분자의 수에 통합 된 유용한 발판.가성 솔루션으로 작업하는 동안 표준 운영 절차를 따라야 합니다. 전자레인지 반응기를 사용할 때 안전 지침을 준수하십시오.

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Unit 1

Microwave-Assisted Preparation of 1-Aryl-1H-pyrazole-5-amines

Aromatic Compounds

SCIENTISTS IN ACTION

Microwave-assisted Intramolecular Dehydrogenative Diels-Alder Reactions for the Synthesis of Functionalized Naphthalenes/Solvatochromic Dyes

작용 Naphthalenes / Solvatochromic의 염료의 합성을위한 전자 레인지를 이용한 분자 Dehydrogenative Diels-앨더 반응

Functionalized naphthalenes have applications in a variety of research fields ranging from the synthesis of natural or biologically active molecules to ...

연구

화학

Microwave-assisted Functionalization of Poly(ethylene glycol) and On-resin Peptides for Use in Chain Polymerizations and Hydrogel Formation

Microwave-assisted Functionalization of Polyethylene glycol and On-resin Peptides for Use in Chain Polymerizations and Hydrogel Formation

전자 레인지를 이용한 폴리의 기능화 (에틸렌 글리콜) 및 체인 중합 및 하이드로 겔 형성에있는 사용을위한 온 수지 펩티드

One of the main benefits to using poly(ethylene glycol) (PEG) macromers in hydrogel formation is synthetic versatility. The ability to draw from a large ...

Preparation of Silica Nanoparticles Through Microwave-assisted Acid-catalysis

전자 레인지를 이용한 산 - 촉매 반응을 통해 실리카 나노 입자의 제조

Microwave-assisted synthetic techniques were used to quickly and reproducibly produce silica nanoparticle sols using an acid catalyst with nanoparticle ...

Preparation of Carbon Nanosheets at Room Temperature

실내 온도에서 탄소 나노 시트의 제조

Amphiphilic molecules equipped with a reactive, carbon-rich "oligoyne" segment consisting of conjugated carbon-carbon triple bonds self-assemble into ...

Preparation of Biopolymer Aerogels Using Green Solvents

녹색 용매를 사용하여 생체 고분자 에어로젤의 제조

Although the first reports on aerogels made by Kistler1 in the 1930s dealt with aerogels from both inorganic oxides (silica and others) and biopolymers ...

One-pot Microwave-assisted Conversion of Anomeric Nitrate-esters to Trichloroacetimidates

한 냄비 전자 렌지를 이용한 변환 Anomeric 질 산 에스테 르의 Trichloroacetimidates

The goal of the following procedure is to provide a demonstration of the one-pot conversion of a 2-azido-1-nitrate-ester to a trichloroacetimidate ...

Preparation and Characterization of C60/Graphene Hybrid Nanostructures

Preparation and Characterization of C60/Graphene Hybrid Nanostructures

준비 및 C60/Graphene 하이브리드 Nanostructures의 특성화

Physical thermal deposition in a high vacuum environment is a clean and controllable method for fabricating novel molecular nanostructures on graphene. We ...

Microfluidic Preparation of Liquid Crystalline Elastomer Actuators

액체 결정 탄성 액츄에이터의 미세 준비

This paper focuses on the microfluidic process (and its parameters) to prepare actuating particles from liquid crystalline elastomers. The preparation ...

Preparation of Functional Silica Using a Bioinspired Method

Bioinspired 메서드를 사용 하 여 기능성 실리 카의 준비

The goal of the protocols described herein is to synthesize bioinspired silica materials, perform enzyme encapsulation therein, and partially or totally ...

Reducing Willow Wood Fuel Emission by Low Temperature Microwave Assisted Hydrothermal Carbonization

저온 마이크로파 보조 열 량 화에의 한 버드 나무 연료 방출 감소

Biomass is a sustainable fuel, as its CO2 emissions are reintegrated in biomass growth. However, the inorganic precursors in the biomass cause a negative ...