Name: a cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse
Uploaded: 2019-09-19T14:30:00
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Wir danken Christiane Pahrmann für ihre technische Unterstützung. D.W. wurde von der Max Kade Foundation unterstützt. T.D. erhielt Stipendien der Else Kröner Fondation (2012_EKES.04) und der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1_. S. S. erhielt Forschungsstipendien der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG; SCHR992/3- 1, SCHR992/4-1).

Tiere wurden in Übereinstimmung mit dem Leitfaden für die Prinzipien von Labortieren, der vom Institut für Labortierressourcen erstellt und von den National Institutes of Health veröffentlicht wurde, humane Pflege erhalten. Alle Tierprotokolle wurden von der zuständigen lokalen Behörde (Dem Institutionellen Tierpflege- und Nutzungsausschuss der University of California San Francisco (UCSF) genehmigt.
1. Tierpflege
<ol><li>Erhalten Sie Mäuse im Alter von 14 Wochen mit einem Gewicht von...

<ol>
	<li>Writing Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2016+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 133 (4), 38-360 (2016).</li><li>de Alencar Neto, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphine,+Oxygen,+Nitrates,+and+Mortality+Reducing+Pharmacological+Treatment+for+Acute+Coronary+Syndrome:+An+Evidence-based+Review.">Morphine, Oxygen, Nitrates, and Mortality Reducing Pharmacological Treatment for Acute Coronary Syndrome: An Evidence-based Review.</a> Cureus. 10 (1), 2114 (2018).</li><li>Detry, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+myocardial+ischaemia.">The pathophysiology of myocardial ischaemia.</a> European Heart Journal. 17, 48-52 (1996).</li><li>Ertl, G., Frantz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Healing+after+myocardial+infarction.">Healing after myocardial infarction.</a> Cardiovascular Research. 66 (1), 22-32 (2005).</li><li>Jugdutt, B. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+remodeling+after+infarction+and+the+extracellular+collagen+matrix:+when+is+enough+enough.">Ventricular remodeling after infarction and the extracellular collagen matrix: when is enough enough.</a> Circulation. 108 (11), 1395-1403 (2003).</li><li>Velagaleti, R. S., Vasan, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+failure+in+the+twenty-first+century:+is+it+a+coronary+artery+disease+or+hypertension+problem.">Heart failure in the twenty-first century: is it a coronary artery disease or hypertension problem.</a> Cardiology Clinics. 25 (4), 487-495 (2007).</li><li>Benjamin, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2017+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2017 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 135 (10), 146-603 (2017).</li><li>Morrissey, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+standardized+myocardial+infarction+in+aged+rabbits.">A novel method of standardized myocardial infarction in aged rabbits.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 312 (5), 959-967 (2017).</li><li>Degabriele, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+appraisal+of+the+mouse+model+of+myocardial+infarction.">Critical appraisal of the mouse model of myocardial infarction.</a> Experimental Physiology. 89 (4), 497-505 (2004).</li><li>Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Fish, K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+in+coronary+artery+anatomy+affects+consistency+of+cardiac+damage+after+myocardial+infarction+in+mice.">Variability in coronary artery anatomy affects consistency of cardiac damage after myocardial infarction in mice.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 313 (2), 275-282 (2017).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Left+Anterior+Descending+(LAD)+Coronary+Artery+Ligation:+An+Improved+and+Simplified+Model+for+Myocardial+Infarction.">Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (122), e55353 (2017).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (65), e3896 (2012).</li><li>Antonio, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricle+radio-frequency+ablation+in+the+rat:+a+new+model+of+heart+failure+due+to+myocardial+infarction+homogeneous+in+size+and+low+in+mortality.">Left ventricle radio-frequency ablation in the rat: a new model of heart failure due to myocardial infarction homogeneous in size and low in mortality.</a> J Card Fail. 15 (6), 540-548 (2009).</li><li>Ovsepyan, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+myocardial+infarction+in+mice:+methodology,+monitoring,+pathomorphology.">Modeling myocardial infarction in mice: methodology, monitoring, pathomorphology.</a> Acta Naturae. 3 (1), 107-115 (2011).</li><li>Ciulla, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+remodeling+after+experimental+myocardial+cryoinjury+in+rats.">Left ventricular remodeling after experimental myocardial cryoinjury in rats.</a> Journal of Surgical Research. 116 (1), 91-97 (2004).</li><li>Grisel, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+MRL+mouse+repairs+both+cryogenic+and+ischemic+myocardial+infarcts+with+scar.">The MRL mouse repairs both cryogenic and ischemic myocardial infarcts with scar.</a> Cardiovascular Pathology. 17 (1), 14-22 (2008).</li><li>Duerr, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+myocardial+remodeling+between+cryoinfarction+and+reperfused+infarction+in+mice.">Comparison of myocardial remodeling between cryoinfarction and reperfused infarction in mice.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 961298 (2011).</li><li>Ma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intramyocardial+delivery+of+human+CD133++cells+in+a+SCID+mouse+cryoinjury+model:+Bone+marrow+vs.+cord+blood-derived+cells.">Intramyocardial delivery of human CD133+ cells in a SCID mouse cryoinjury model: Bone marrow vs. cord blood-derived cells.</a> Cardiovascular Research. 71 (1), 158-169 (2006).</li><li>Takagawa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarct+size+measurement+in+the+mouse+chronic+infarction+model:+comparison+of+area-+and+length-based+approaches.">Myocardial infarct size measurement in the mouse chronic infarction model: comparison of area- and length-based approaches.</a> Journal of Applied Physiology (1985). 102 (6), 2104-2111 (2007).</li><li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+a+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: a comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li></ol>

Dieser Artikel beschreibt ein Maus-Kryoverletzungsmodell zur Untersuchung von ACS und verwandten pharmakologischen und therapeutischen Optionen.
Der wichtigste Schritt ist die Anwendung der Kryoprobe auf das Herzgewebe. Die Kontaktdauer muss streng kontrolliert werden, um die optimale Infarktgröße zu erhalten und reproduzierbare Ergebnisse zu gewährleisten. Eine längere Abkühlung des Myokards führt zu übergroßen Infarkten oder ventrikulärer Senforation. Im Gegensatz dazu erzeugt verk?...

Akutes Koronarsyndrom (ACS) ist die häufigste Todesursache in der westlichen Welt1,2. Akute Okklusion der Herzkranzgefäße führt zur Aktivierung der ischämischen Kaskade und Nekrose des betroffenen Herzgewebes3. Beschädigtes Myokard wird nach und nach durch nicht-kontraktiles Narbengewebe ersetzt, das sich klinisch als Herzinsuffizienzmanifestiert 4,5. Trotz der jüngsten Fortschritte in der Behandlung von ACS, die Prävalenz von ACS und ACS-bedingte Herzinsuffizienz steigt, und therapeutische Optionen sind begrenzt6,7. Daher ist die Entwicklung von Tiermodellen zur Untersuchung von ACS und seinen Komplikationen von immensem Interesse.
Bis heute ist das am weitesten verbreitete Tiermodell zur Untersuchung von ACS- und ACS-induziertem Myokardumbau die Ligation der linken absteigenden Herzkranzgefäße (LAD). Ligation des LAD führt zu akuter Ischämie des Myokards, ähnlich wie beim menschlichen Myokardgewebe während ACS.  Inkonsistente Infarktgrößen bleiben jedoch die Achillesferse der LAD-Liga. Chirurgische Variation und anatomische Variabilität des LAD führen zu inkonsistenten Infarktgrößen und behindern die Reproduzierbarkeit und Reproduzierbarkeit dieses Verfahrens8,9,10. Darüber hinaus hat die LAD-Ligation eine hohe intra- und postchirurgische Sterblichkeit. Trotz der jüngsten Bemühungen, die Reproduzierbarkeit zu verbessern und die Sterblichkeit zu senken11,12, sind immer noch eine große Anzahl von Tieren erforderlich, um Anti-Remodeling-Therapien richtig zu bewerten.
Alternative Modelle von ACS wurden in den letzten Jahren vorgeschlagen und untersucht, einschließlich Hochfrequenz13, thermische14 oder kryogene Verletzungen15,16,17,18. Aktuelle Kryoverletzungsmethoden wenden einen metallenen Stab vorgekühlt in flüssigem Stickstoff an, um das Herzgewebe des Subjekts zu schädigen15,16. Dieses Verfahren muss jedoch mehrmals wiederholt werden, um eine ausreichende Infarktgröße zu erzeugen. Durch die hohe Leitfähigkeit und geringe Wärmekapazität der Stange im Vergleich zum Gewebe erwärmt sich die Sonde schnell und das Gewebe wird heterogen gekühlt (und damit infarktiert). Um diese Einschränkungen zu überwinden, beschreiben wir hier in einem Kryoinfarktmodell unter Verwendung eines handgehaltenen flüssigen Stickstoffabgabesystems. Dieses Modell ist reproduzierbar, einfach durchzuführen und lässt sich schnell und zuverlässig etablieren. Es entsteht eine reproduzierbare transmurale Infarktläsion unabhängig von der koronaren Anatomie, die schließlich zu Herzinsuffizienz führt. Diese Methode eignet sich besonders zur Untersuchung des Umbauprozesses zur Bewertung neuartiger therapeutischer pharmakologischer und gewebetechnischer Strategien.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:595px;" width="593">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">10 ml Syringe</td>
			<td style="width:155px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:145px;">03-377-23</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">5-0 prolene suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>EH7229H</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">6-0 prolene suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>8706H</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">8-0 Ethilon suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>2808G</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Absorption Spears</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18105-01</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">BALB/c</td>
			<td style="width:155px;">The Jackson Laboratory</td>
			<td>Stock number 000651</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Bepanthen Eye and Nose ointment</td>
			<td style="width:155px;">Bayer</td>
			<td>1578675</td>
			<td style="width:132px;">Eye ointment</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Betadine Solution</td>
			<td style="width:155px;">Betadine Purdue Pharma</td>
			<td>NDC:67618-152</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Blunt Forceps</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18025-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Buprenex</td>
			<td style="width:155px;">Reckitt Benckiser</td>
			<td style="width:145px;">NDC Codes:&#160;12496-0757-1, 12496-0757-5</td>
			<td style="width:132px;">Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr height="36">
			<td height="36" style="height:36px;width:163px;">Cryoprobe 3mm</td>
			<td style="width:155px;">Brymill Cryogenic Systems</td>
			<td>Cry-AC-3 B-800</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Ethanol 70%</td>
			<td style="width:155px;">Th. Geyer</td>
			<td>2270</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps curved</td>
			<td style="width:155px;">S&#38;T</td>
			<td>00284</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps fine</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11251-20</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps standard</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11023-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Gross Anatomy Probe</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>10088-15</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Hair clipper</td>
			<td style="width:155px;">WAHL</td>
			<td>8786-451A ARCO SE</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">High temperature cautery kit</td>
			<td style="width:155px;">Bovie</td>
			<td>18010-00</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">ISOFLURANE</td>
			<td style="width:155px;">Henry Schein Animal Health</td>
			<td>029405</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">IV Catheter 20G</td>
			<td style="width:155px;">B. Braun</td>
			<td>603028</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Mini-Goldstein Retractor</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>17002-02</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">NaCl 0.9%</td>
			<td style="width:155px;">B.Braun</td>
			<td style="width:145px;">PZN 06063042&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Art. Nr.: 3570160</td>
			<td style="width:132px;">saline</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:163px;">Needle holder</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>12075-14</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Needle Holder, Curved</td>
			<td style="width:155px;">Harvard Apparatus</td>
			<td>72-0146</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Novaminsulfon</td>
			<td style="width:155px;">Ratiopharm</td>
			<td>PZN 03530402</td>
			<td style="width:132px;">Metamizole</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Operating Board&#160;</td>
			<td style="width:155px;">Braintree Scientific</td>
			<td>39OP</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Replaceable Fine Tip</td>
			<td style="width:155px;">Bovie</td>
			<td>H101</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Scissors</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>14028-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Small Animal Ventilator</td>
			<td style="width:155px;">Kent Scientific</td>
			<td>RV-01</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Spring Scissors - Angled to Side</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>15006-09</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Surgical microscope</td>
			<td style="width:155px;">Leica&#160;</td>
			<td>M651</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Transpore Surgical Tape</td>
			<td style="width:155px;">3M</td>
			<td>1527-1</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Vannas Spring Scissors</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>15400-12</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Vaporizer&#160;</td>
			<td style="width:155px;">Kent Scientific</td>
			<td>VetFlo-1205S</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse

Die Verwendung von Tiermodellen ist für die Entwicklung neuer therapeutischer Strategien für das akute Koronarsyndrom und seine Komplikationen unerlässlich. In diesem Artikel zeigen wir ein murines Kryoverletzungsinfarktmodell, das präzise Infarktgrößen mit hoher Reproduzierbarkeit und Reproduzierbarkeit erzeugt. Kurz gesagt, nach Intubation und Sternotomie des Tieres wird das Herz aus dem Thorax gehoben. Die Sonde eines handgeführten flüssigen Stickstoffzufuhrsystems wird auf die Myokardwand aufgetragen, um Kryoverletzungen auszulösen. Beeinträchtigte ventrikuläre Funktion und elektrische Leitung können mit Echokardiographie oder optischer Kartierung überwacht werden. Die transmuraale myokardiale Umgestaltung des Infarktbereichs ist durch Kollagenablagerung und den Verlust von Kardiomyozyten gekennzeichnet. Im Vergleich zu anderen Modellen (z.B. LAD-Ligation) nutzt dieses Modell ein handgehaltenes Flüssigstickstoff-Liefersystem, um einheitlichere Infarktgrößen zu erzeugen.

Das Kryoverletzungsinfarktmodell eignet sich zur Untersuchung von ACS und seinen Komplikationen. Niedrige Sterblichkeitsraten und effiziente postoperative Genesung sind in diesem Modell zu sehen. Kryoverletzung induzierte Myokardschäden führen zu reduzierter Herzfunktion, elektrischer Entkopplung und transmuraalem Umbau.
Echokardiographie kann verwendet werden, um die Herzfunktion nicht invivo zu überwachen. In kryoverletzten Herzen zeigt die Echokardiographie eine signifikant reduzierte Au...

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A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse (Video) | JoVE

Dieser Artikel zeigt ein Modell zur Untersuchung des Herzumbaus nach Myokard-Kryoverletzung bei Mäusen.

Ein Cryoinjury-Modell zur Untersuchung des Myokardinfarkts in der Maus

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Diese Methode ist zuverlässig, um die Erzeugung von Myokardinfarkt zu studieren und eine ausgezeichnete Plattform für die Untersuchung der Herzerholung nach, zum Beispiel, Stammzelltransplantation. Der Hauptvorteil dieses Verfahrens ist, dass es verwendet werden kann, um einheitliche Infarktgrößen auf eine schnelle, einfache und reproduzierbare Weise zu erzeugen. In diesem Modell können neuartige experimentelle Interventionen wie pharmakologische oder gewebebasierte Strategien getestet werden.Und erfolgreich testen, dass Optionen in großen Tiermodellen weiter bestätigt werden können. Nach der Bestätigung einer mangelnden Reaktion auf Schmerzreflex in einer anästhesierten 27 Gramm, 14 Wochen alte Maus, verwenden Sie einen Haarschneider, um das Fell der Brust und Hals des Tieres zu entfernen und legen Sie die Maus in eine Supine-Position auf einem beheizten Pad. Verkleben Sie die Hinter- und Vorderbeine in einer ausgebreiteten Adlerposition und verwenden Sie sequenzielle Povidon-Jod- und 80%Ethanol-Peelings, um die exponierte Haut zu desinfizieren.Machen Sie einen Mittellinien-Hautschnitt vom unteren Drittel des Brustbeins bis zum Kinn, und verwenden Sie gekrümmte Zangen, um die Muskeln um den Hals vorsichtig zu trennen, um die Luftröhre freizulegen. Verwenden Sie eine Mikroschere, um eine Tracheotomie zwischen dem zweiten und dritten Knorpelringen durchzuführen. Und stellen Sie das Beatmungsgerät auf eine Belüftungsfrequenz von 110 pro Minute bei einem Gezeitenvolumen von 0,5 Millilitern ein.Legen Sie dann eine an das Beatmungsgerät angeschlossene Kanüle aus Kunststoff und 20 Gauge in die Luftröhre ein. Als nächstes verwenden Sie Kautery, um den rechten Pectoralis-Muskel von seinem sternalen Ursprung zwischen der dritten und siebten Rippe zu lösen. Und verwenden Sie seitlich abgewinkelte Federschere, um die vierte bis sechs Rippen so nah wie möglich am Brustbein zu schneiden.Sezieren Sie das darunter liegende Bindegewebe, um einen klaren Blick in die Brusthöhle zu erhalten, indem Sie die Brustarterie kauterisieren, um Blutungen bei Bedarf einzudämmen. Legen Sie einen Mini-Goldfleck-Retraktor ein, um die Rippen zu verteilen und die Brusthöhle offen zu halten. Und verwenden Sie stumpfe Zange, um das Perikard zu öffnen, um das Herz zu entblößen.Verwenden Sie eine stumpfe Stange, um das Herz aus der Brusthöhle zu heben und die Spannung des Retraktors zu verringern, um die Brustöffnung zu reduzieren und das Herz davon abzuhalten, in die Bauchhöhle zurückzufallen. Eine Kryoprobe mit einem Durchmesser von drei Millimetern für 10 Sekunden vorkühlen und die Kryoprobe 10 Sekunden lang auf die innere linke Ventrikelwand auftragen, um einen linksventrikulären Kryoverletzungsinfarkt zu erzeugen. Lösen Sie die Kryoprobe von der linken ventrikulären Wand mit Raumtemperatur-Salinenbewässerung und vergrößern Sie die Brustöffnung mit dem Retraktor.Verwenden Sie die Stange, um das Herz sanft in die Brusthöhle zurückundlassen und den Retraktor zu entfernen. Verwenden Sie eine 6-0 Naht, um die Sternotomie mit einem einzigen Knoten zu verbinden. Und verwenden Sie eine laufende 6-0 Naht, um die Brusthöhle zu schließen.Verwenden Sie eine 10 Milliliter Spritze, um die verbleibende Luft aus der Brust zu evakuieren, bevor Sie den Knoten binden und die Haut an der kaudalen Kante anpassen, bevor Sie eine laufende 5-0 Naht verwenden, um das Gewebe bis zum Punkt der Luftröhre zu schließen. Nach der Reduktion des Isoflurans und des tierischen Zufalls wird die Atempause den Luftröhrenkatheter entfernt und der Trachealschnitt mit einem 8-0 Naht. Ersetzen Sie die ventralen Nackenmuskeln wieder in ihre anatomische Position über die Luftröhre und vervollständigen Sie die Hautnaht.Dann fügen Sie Metamizol in das Trinkwasser für Schmerzanalgesie für drei Tage mit täglicher Tierüberwachung für acht Wochen. Bei kryoverletzten Herzen zeigt die Echokardiographie eine signifikant reduzierte Auswurffraktion und bruchstückhafte Veränderung des Bereichs, wobei funktionelle Beeinträchtigungen vom siebten Tag nach der Operation bis zum experimentellen Endpunkt bei 56 Tagen beobachtet wurden. Wie durch die Druck-Volumen-Loop-Analyse beurteilt, führt die Kryoinfraktion zu einer beeinträchtigten linken Ventrikelfunktion, die als Abnahme des Hubvolumens, der Hubarbeit, der Herzleistung und der vorlastangepassten maximalen Leistung reflektiert wird.Die optische Ex-vivo-Kartierung fluoreszierender spannungsempfindlicher gefärbter Herzen zeigt eine Blockade der elektrischen Leitung an der Grenze der Verletzung, was auf eine lokale elektrische Entkopplung hindeutet. Die histologische Färbung mit Massons Trichrom zeigt die transmuraale fibrotische Gewebebildung an der Stelle der Verletzung. Die Infarktgröße kann durch Messung der Infarktnarbenfläche oder mittelliniennarbenlangen Länge berechnet werden.Darüber hinaus bestätigen immunfluoreszierende Färbung enthäuerst gegen einen Kardiomyozytenmarker und Kollagen-I das Vorhandensein von fibrotischem Umbau und den Verlust von Kardiomyozyten an der Unfallstelle. Es ist wichtig, die gleiche Kontaktdauer des Kryoproblems zu halten, da eine unterschiedliche Dauer zu inkongruenten Infarktgrößen führen kann. Einmal gemeistert kann diese Technik in 20 Minuten durchgeführt werden, wenn sie richtig ausgeführt wird.Nachdem Sie sich dieses Video angeschaut haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie das Kryoverletzungsmodell ausführen. Viel Glück mit Ihren Experimenten.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

Acute Myocardial Infarction in Rats

Acute Myocardial Infarction in Rats (Video) | JoVE

Akuter Myokardinfarkt bei Ratten

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Forschung

Medizin

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury (Video) | JoVE

Induktion eines Myokardinfarktes in Adult Zebrafisch Mit Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction (Video) | JoVE

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs (Video) | JoVE

Myokardinfarkt und Functional Outcome Assessment in Schweine

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

A Hydrogel Construct and Fibrin-based Glue Approach to Deliver Therapeutics in a Murine Myocardial Infarction Model.

A Hydrogel Construct and Fibrin-based Glue Approach to Deliver Therapeutics in a Murine Myocardial Infarction Model. (Video) | JoVE

Ein Hydrogel Konstruieren und Fibrin-basierte Kleber Umgangs Therapeutics in einem murinen Myokardinfarkt Modell liefern.

The murine MI model is widely recognized in the field of cardiovascular disease, and has consistently been used as a first step to test the efficacy of ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction (Video) | JoVE

Primärer Ergebnisbeurteilung in einem Schwein Modell eines akuten Myokardinfarkts

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration (Video) | JoVE

Myokardinfarkts bei neugeborenen Mäusen, ein Modell von Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography (Video) | JoVE

Messung der isometrischen Kontraktilität der Maus mesenterialen Arterie mit Draht Myographie

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Establishing a Swine Model of Post-myocardial Infarction Heart Failure for Stem Cell Treatment

Establishing a Swine Model of Post-myocardial Infarction Heart Failure for Stem Cell Treatment (Video) | JoVE

Erstellung eines Schweinemodells für postmyokarde Infarkt-Herzinsuffizienz für die Stammzellbehandlung

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major ...

Intramyocardial Transplantation of MSC-Loading Injectable Hydrogels after Myocardial Infarction in a Murine Model

Intramyocardial Transplantation of MSC-Loading Injectable Hydrogels after Myocardial Infarction in a Murine Model (Video) | JoVE

Intramyokardiale Transplantation von MSC-Loading injizierbaren Hydrogelen nach Myokardinfarkt in einem Murine-Modell

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of ...