Name: a cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse
Uploaded: 2019-09-19T14:30:00
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クリスチャン・ポールマンの技術支援に感謝します。D.W.はマックス・ケイド財団の支援を受けました。T.D.は、エルス・クレーナー・フォンダシオン(2012_EKES.04)とドイツ・フォルシュンゲインシャフト(DE2133/2-1_)から助成金を受け取りました。S. S. ドイツフォルシュンゲミンシャフト (DFG;SCHR992/3- 1、SCHR992/4-1)。

動物は、実験動物資源研究所が作成し、国立衛生研究所によって発行された実験動物の原則ガイドに従って人道的ケアを受けました。すべての動物プロトコルは、責任ある地方自治体(カリフォルニア大学サンフランシスコ校(UCSF)機関動物ケアおよび使用委員会)によって承認されました。
1. 動物の世話
<ol><li>約27gの重さの14週齢でマウスを得る(例えば、実験動物研究所?...

<ol>
	<li>Writing Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2016+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 133 (4), 38-360 (2016).</li><li>de Alencar Neto, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphine,+Oxygen,+Nitrates,+and+Mortality+Reducing+Pharmacological+Treatment+for+Acute+Coronary+Syndrome:+An+Evidence-based+Review.">Morphine, Oxygen, Nitrates, and Mortality Reducing Pharmacological Treatment for Acute Coronary Syndrome: An Evidence-based Review.</a> Cureus. 10 (1), 2114 (2018).</li><li>Detry, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+myocardial+ischaemia.">The pathophysiology of myocardial ischaemia.</a> European Heart Journal. 17, 48-52 (1996).</li><li>Ertl, G., Frantz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Healing+after+myocardial+infarction.">Healing after myocardial infarction.</a> Cardiovascular Research. 66 (1), 22-32 (2005).</li><li>Jugdutt, B. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+remodeling+after+infarction+and+the+extracellular+collagen+matrix:+when+is+enough+enough.">Ventricular remodeling after infarction and the extracellular collagen matrix: when is enough enough.</a> Circulation. 108 (11), 1395-1403 (2003).</li><li>Velagaleti, R. S., Vasan, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+failure+in+the+twenty-first+century:+is+it+a+coronary+artery+disease+or+hypertension+problem.">Heart failure in the twenty-first century: is it a coronary artery disease or hypertension problem.</a> Cardiology Clinics. 25 (4), 487-495 (2007).</li><li>Benjamin, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2017+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2017 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 135 (10), 146-603 (2017).</li><li>Morrissey, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+standardized+myocardial+infarction+in+aged+rabbits.">A novel method of standardized myocardial infarction in aged rabbits.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 312 (5), 959-967 (2017).</li><li>Degabriele, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+appraisal+of+the+mouse+model+of+myocardial+infarction.">Critical appraisal of the mouse model of myocardial infarction.</a> Experimental Physiology. 89 (4), 497-505 (2004).</li><li>Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Fish, K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+in+coronary+artery+anatomy+affects+consistency+of+cardiac+damage+after+myocardial+infarction+in+mice.">Variability in coronary artery anatomy affects consistency of cardiac damage after myocardial infarction in mice.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 313 (2), 275-282 (2017).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Left+Anterior+Descending+(LAD)+Coronary+Artery+Ligation:+An+Improved+and+Simplified+Model+for+Myocardial+Infarction.">Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (122), e55353 (2017).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (65), e3896 (2012).</li><li>Antonio, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricle+radio-frequency+ablation+in+the+rat:+a+new+model+of+heart+failure+due+to+myocardial+infarction+homogeneous+in+size+and+low+in+mortality.">Left ventricle radio-frequency ablation in the rat: a new model of heart failure due to myocardial infarction homogeneous in size and low in mortality.</a> J Card Fail. 15 (6), 540-548 (2009).</li><li>Ovsepyan, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+myocardial+infarction+in+mice:+methodology,+monitoring,+pathomorphology.">Modeling myocardial infarction in mice: methodology, monitoring, pathomorphology.</a> Acta Naturae. 3 (1), 107-115 (2011).</li><li>Ciulla, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+remodeling+after+experimental+myocardial+cryoinjury+in+rats.">Left ventricular remodeling after experimental myocardial cryoinjury in rats.</a> Journal of Surgical Research. 116 (1), 91-97 (2004).</li><li>Grisel, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+MRL+mouse+repairs+both+cryogenic+and+ischemic+myocardial+infarcts+with+scar.">The MRL mouse repairs both cryogenic and ischemic myocardial infarcts with scar.</a> Cardiovascular Pathology. 17 (1), 14-22 (2008).</li><li>Duerr, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+myocardial+remodeling+between+cryoinfarction+and+reperfused+infarction+in+mice.">Comparison of myocardial remodeling between cryoinfarction and reperfused infarction in mice.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 961298 (2011).</li><li>Ma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intramyocardial+delivery+of+human+CD133++cells+in+a+SCID+mouse+cryoinjury+model:+Bone+marrow+vs.+cord+blood-derived+cells.">Intramyocardial delivery of human CD133+ cells in a SCID mouse cryoinjury model: Bone marrow vs. cord blood-derived cells.</a> Cardiovascular Research. 71 (1), 158-169 (2006).</li><li>Takagawa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarct+size+measurement+in+the+mouse+chronic+infarction+model:+comparison+of+area-+and+length-based+approaches.">Myocardial infarct size measurement in the mouse chronic infarction model: comparison of area- and length-based approaches.</a> Journal of Applied Physiology (1985). 102 (6), 2104-2111 (2007).</li><li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+a+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: a comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li></ol>

この記事では、ACSおよび関連する薬理学的および治療的選択肢を調査するマウス凍結傷害モデルについて説明する。
最も重要なステップは、心臓組織上の凍結プローブの適用です。最適な梗塞サイズを得て、再現可能な結果を保証するために、接触時間を厳密に制御する必要があります。心筋の長時間の冷却は、特大梗塞または心室穿孔につながる。対照的に、短い冷?...

急性冠症候群(ACS)は、西洋の世界1、2の主要な死因である。冠状動脈の急性閉塞は、患部心臓組織3の虚血カスケードおよび壊死の活性化につながる。損傷した心筋は徐々に非収縮性瘢痕組織に置き換えられ、これは心不全4,5として臨床的に現れる。ACSの治療の最近の進歩にもかかわらず、ACSおよびACS関連心不全の有病率は上昇しており、治療選択肢は限られている6、7である。したがって、ACSとその合併症を研究する動物モデルの開発は非常に興味深い。
現在までに、ACSおよびACS誘発心筋リモデリングを研究するために最も広く使用されている動物モデルは、左下下冠動脈(LAD)のライゲーションである。LADのライゲーションは、ACS中のヒト心筋組織と同様に、心筋の急性虚血につながる。 しかし、一貫性のない梗塞のサイズは、LADライゲーションのアキレス腱のままです。LADの外科的変動および解剖学的変動は、一貫性のない梗塞サイズを引き起こし、この手順8、9、10の再現性および複製性を妨げる。さらに、LADライゲーションは、高い内および後の外科的死亡率を有する。再現性を向上させ、死亡率を11、12に減らす最近の努力にもかかわらず、多くの動物が反リモデリング療法を適切に評価するために依然として必要とされている。
ACSの代替モデルは、無線周波数13、熱14または低温傷害15、16、17、18を含む、近年提案され、研究されている。現在の凍結傷害法は、被験体の心臓組織15,16を損傷するために液体窒素中で予め冷却された金属棒を適用する。しかし、十分な梗塞サイズを生成するには、この手順を数回繰り返す必要があります。組織に比べてロッドの伝導性と低熱容量が高いため、プローブは迅速に温まり、組織は不均一に冷却(したがって梗塞)されます。これらの限界を克服するために、我々は、手持ち型液体窒素送達システムを利用した凍結梗塞モデルを本明細書で説明する。このモデルは再現性、実行が容易であり、速く、確実に確立することができる。冠動脈解剖学に依存しない再現可能なトランスムラール梗塞病変が発生し、最終的には心不全を引き起こす。この方法は、新規治療薬理学および組織工学ベースの戦略の評価のための改造プロセスを研究するのに特に適している。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:595px;" width="593">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">10 ml Syringe</td>
			<td style="width:155px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:145px;">03-377-23</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">5-0 prolene suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>EH7229H</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">6-0 prolene suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>8706H</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">8-0 Ethilon suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>2808G</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Absorption Spears</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18105-01</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">BALB/c</td>
			<td style="width:155px;">The Jackson Laboratory</td>
			<td>Stock number 000651</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Bepanthen Eye and Nose ointment</td>
			<td style="width:155px;">Bayer</td>
			<td>1578675</td>
			<td style="width:132px;">Eye ointment</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Betadine Solution</td>
			<td style="width:155px;">Betadine Purdue Pharma</td>
			<td>NDC:67618-152</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Blunt Forceps</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18025-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Buprenex</td>
			<td style="width:155px;">Reckitt Benckiser</td>
			<td style="width:145px;">NDC Codes:&#160;12496-0757-1, 12496-0757-5</td>
			<td style="width:132px;">Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr height="36">
			<td height="36" style="height:36px;width:163px;">Cryoprobe 3mm</td>
			<td style="width:155px;">Brymill Cryogenic Systems</td>
			<td>Cry-AC-3 B-800</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Ethanol 70%</td>
			<td style="width:155px;">Th. Geyer</td>
			<td>2270</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps curved</td>
			<td style="width:155px;">S&#38;T</td>
			<td>00284</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps fine</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11251-20</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps standard</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11023-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Gross Anatomy Probe</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>10088-15</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Hair clipper</td>
			<td style="width:155px;">WAHL</td>
			<td>8786-451A ARCO SE</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">High temperature cautery kit</td>
			<td style="width:155px;">Bovie</td>
			<td>18010-00</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">ISOFLURANE</td>
			<td style="width:155px;">Henry Schein Animal Health</td>
			<td>029405</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">IV Catheter 20G</td>
			<td style="width:155px;">B. Braun</td>
			<td>603028</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Mini-Goldstein Retractor</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>17002-02</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">NaCl 0.9%</td>
			<td style="width:155px;">B.Braun</td>
			<td style="width:145px;">PZN 06063042&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Art. Nr.: 3570160</td>
			<td style="width:132px;">saline</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:163px;">Needle holder</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>12075-14</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Needle Holder, Curved</td>
			<td style="width:155px;">Harvard Apparatus</td>
			<td>72-0146</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Novaminsulfon</td>
			<td style="width:155px;">Ratiopharm</td>
			<td>PZN 03530402</td>
			<td style="width:132px;">Metamizole</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Operating Board&#160;</td>
			<td style="width:155px;">Braintree Scientific</td>
			<td>39OP</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Replaceable Fine Tip</td>
			<td style="width:155px;">Bovie</td>
			<td>H101</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Scissors</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>14028-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Small Animal Ventilator</td>
			<td style="width:155px;">Kent Scientific</td>
			<td>RV-01</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Spring Scissors - Angled to Side</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>15006-09</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Surgical microscope</td>
			<td style="width:155px;">Leica&#160;</td>
			<td>M651</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Transpore Surgical Tape</td>
			<td style="width:155px;">3M</td>
			<td>1527-1</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Vannas Spring Scissors</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>15400-12</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Vaporizer&#160;</td>
			<td style="width:155px;">Kent Scientific</td>
			<td>VetFlo-1205S</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse

動物モデルの使用は、急性冠症候群とその合併症の新しい治療戦略を開発するために不可欠です。本稿では、再現性と再現性の高い正確な梗塞サイズを生成するマウス凍結傷害梗塞モデルを示す。簡単に言えば、動物の挿管と立体切除の後、心臓は胸部から持ち上げられます。手持ち式液体窒素送達システムのプローブは、凍結傷害を誘発するために心筋壁に適用される。心室機能の障害と電気伝導は、心エコー検査または光学マッピングで監視することができます。梗塞領域のトランスムラール心筋リモデリングは、コラーゲン沈着および心筋細胞の喪失を特徴とする。他のモデル(例えば、LAD-ligation)と比較して、このモデルはより均一な梗塞のサイズを生成するために手持ち型液体窒素送達システムを利用する。

凍結傷害梗塞モデルは、ACSおよびその合併症を研究するのに適している。低死亡率と効率的な術後回復は、このモデルで見られます。凍結傷害誘発心筋損傷は、心臓機能の低下、電気的結合解除、およびトランスムラールの改造につながる。
心エコー検査は、生体内の心臓機能を非侵襲的に監視するために使用することができる。凍結傷を負った心臓において、心エコ?...

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A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

この記事では、マウスの心筋凍結傷害後の心臓リモデリングを研究するモデルを示す。

マウスの心筋梗塞を研究する凍結傷害モデル

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

この方法は、例えば幹細胞移植後の心筋梗塞の発生や、心臓回復の調査に使用する優れたプラットフォームを研究する信頼性があります。この手順の主な利点は、迅速かつ容易に、再現可能な方法で均一な梗塞サイズを生成するために使用することができるということです。薬理学、または組織に基づく戦略を設計した組織などの新しい実験的介入は、このモデルでテストすることができる。そして、大きな動物モデルでさらにオプションを確認できることをテストに成功しました。麻酔付き27グラム、14週齢マウスにおける疼痛反射に対する反応の欠如を確認した後、ヘアトリマーを使用して動物の胸と首の毛皮を取り除き、マウスを加熱パッドの上に、マウスを置く。後ろと前肢を広げワシの位置にテープで貼り付け、シーケンシャルなポビドネヨウ素と80%エタノールスクラブを使用して、露出した皮膚を消毒します。胸骨の下3分の1から顎に中線の皮膚切開を行い、湾曲した鉗子を使用して首の周りの筋肉を慎重に分離して気管を露出させます。マイクロハサミを使用して、第2軟骨リングと第3軟骨リング間の気管切開を行います。そして、0.5ミリリットルの潮量で1分あたり110の換気周波数に換気装置を設定します。次に、換気装置に接続されたプラスチック、20ゲージカニューレを気管に挿入する。次に、焼灼を使用して、3番目と7番目の肋骨の間の胸骨起源から右胸筋を取り外します。そして、側面斜めのスプリングハサミを使用して、4番目から6本の肋骨を胸骨にできるだけ近づけます。基礎となる結合組織を解剖して胸腔に明確な視界を得て、必要に応じて出血を止めるために乳腺動脈を焼灼する。リブを広げ、胸腔を開いたままにするためにミニゴールドの汚れレトラクターを挿入します。そして、心臓を露出させるために心膜を開くために鈍い鉗子を使用してください。鈍い棒を使用して胸腔から心臓を持ち上げ、胸部の開口部を減らし、心臓が腹腔に戻らないようにレトラクターの緊張を下げます。直径3ミリのクライオプローブを10秒間予冷し、左心室壁の中にクライオプローブを10秒間塗布して左心室、凍結傷害梗塞を発生させます。室温生理満水性灌漑で左心室壁からクライオプローブを取り外し、レトラクタで胸の開口部を再び拡大します。ロッドを使用して心臓を胸腔にそっと戻し、レトラクタを取り外します。6-0縫合糸を使用して、単一の結び目でステノトミーを接続します。そして、胸腔を閉じるために走っている6-0縫合糸を使用してください。10ミリリットルの注射器を使用して、結び目を結ぶ前に胸から残りの空気を避難させ、尾骨端で皮膚を適応させ、ランニング5-0縫合糸を使用して組織を気管開口部のポイントまで閉じます。イオフルランを減らし、動物が自発的に呼吸を得た後、気管カテーテルを取り除き、気管切開を1つの8-0で閉じる縫合。腹側頸部の筋肉を気管の上の解剖学的位置に戻し、皮膚縫合を完了します。その後、8週間の毎日の動物モニタリングで3日間の痛み鎮痛のための飲料水にメタミゾールを追加します。凍結傷心心エコー検査では、7日目の手術後から56日の実験エンドポイントまで機能的障害が観察され、放出分率および分面積変化が有意に減少した。圧力量ループ解析によって評価されるように、凍結分は、脳卒中の体積、打撃の仕事、心拍出量、および前負荷調整最大電力の減少として反映される障害された左心室機能を導く。蛍光電圧に敏感な染色心臓の元生体光学マッピングは、傷害の境界における電気伝導の閉塞を示し、局所的な電気結合を示す。マッソンのトリクロムによる組織学的染色は、傷害部位における経壁線維組織形成を明らかにする。梗塞サイズは、梗塞の瘢痕領域または中線瘢痕長を測定することによって算出することができる。また、心筋細胞マーカーおよびコラーゲンIに対する免疫蛍光染色は、線維性リモデリングの存在および損傷部位における心筋細胞の喪失を確認する。異なる持続時間が不一致の梗塞サイズにつながる可能性があるため、各動物の凍結問題の同じ接触持続時間を維持することが重要です。この技術を習得したら、正しく実行すれば20分で実行できます。このビデオを見た後、あなたは凍結傷害モデルを実行する方法をよく理解している必要があります。あなたの実験で幸運を祈ります。

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute Myocardial Infarction in Rats

ラットにおける急性心筋梗塞

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新生児マウスの心筋梗塞、心臓再生のモデル

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Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

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Establishing a Swine Model of Post-myocardial Infarction Heart Failure for Stem Cell Treatment

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マウスモデルにおける心筋梗塞後のMSC負荷注入性ヒドロゲルの筋内移植

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