Name: a cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse
Uploaded: 2019-09-19T14:30:00
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Agradecemos a Christiane Pahrmann por su asistencia técnica. D.W. fue apoyado por la Fundación Max Kade. T.D. recibió subvenciones de la Fundación Else Kr'ner (2012_EKES.04) y de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DE2133/2-1_. S. S. recibió becas de investigación de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; SCHR992/3- 1, SCHR992/4-1).

Los animales recibieron atención humana de conformidad con la Guía para los Principios de los Animales de Laboratorio, preparada por el Instituto de Recursos Animales de Laboratorio, y publicada por los Institutos Nacionales de Salud. Todos los protocolos de animales fueron aprobados por la autoridad local responsable (el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de California en San Francisco (UCSF).
1. Cuidado de animales
<ol><li>Obtener ratones a la edad de 14...

<ol>
	<li>Writing Group. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2016+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 133 (4), 38-360 (2016).</li><li>de Alencar Neto, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphine,+Oxygen,+Nitrates,+and+Mortality+Reducing+Pharmacological+Treatment+for+Acute+Coronary+Syndrome:+An+Evidence-based+Review.">Morphine, Oxygen, Nitrates, and Mortality Reducing Pharmacological Treatment for Acute Coronary Syndrome: An Evidence-based Review.</a> Cureus. 10 (1), 2114 (2018).</li><li>Detry, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+myocardial+ischaemia.">The pathophysiology of myocardial ischaemia.</a> European Heart Journal. 17, 48-52 (1996).</li><li>Ertl, G., Frantz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Healing+after+myocardial+infarction.">Healing after myocardial infarction.</a> Cardiovascular Research. 66 (1), 22-32 (2005).</li><li>Jugdutt, B. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+remodeling+after+infarction+and+the+extracellular+collagen+matrix:+when+is+enough+enough.">Ventricular remodeling after infarction and the extracellular collagen matrix: when is enough enough.</a> Circulation. 108 (11), 1395-1403 (2003).</li><li>Velagaleti, R. S., Vasan, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+failure+in+the+twenty-first+century:+is+it+a+coronary+artery+disease+or+hypertension+problem.">Heart failure in the twenty-first century: is it a coronary artery disease or hypertension problem.</a> Cardiology Clinics. 25 (4), 487-495 (2007).</li><li>Benjamin, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2017+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2017 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 135 (10), 146-603 (2017).</li><li>Morrissey, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+of+standardized+myocardial+infarction+in+aged+rabbits.">A novel method of standardized myocardial infarction in aged rabbits.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 312 (5), 959-967 (2017).</li><li>Degabriele, N. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+appraisal+of+the+mouse+model+of+myocardial+infarction.">Critical appraisal of the mouse model of myocardial infarction.</a> Experimental Physiology. 89 (4), 497-505 (2004).</li><li>Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Fish, K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+in+coronary+artery+anatomy+affects+consistency+of+cardiac+damage+after+myocardial+infarction+in+mice.">Variability in coronary artery anatomy affects consistency of cardiac damage after myocardial infarction in mice.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 313 (2), 275-282 (2017).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Left+Anterior+Descending+(LAD)+Coronary+Artery+Ligation:+An+Improved+and+Simplified+Model+for+Myocardial+Infarction.">Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (122), e55353 (2017).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> Journal of Visualized Experiments : JoVE. (65), e3896 (2012).</li><li>Antonio, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricle+radio-frequency+ablation+in+the+rat:+a+new+model+of+heart+failure+due+to+myocardial+infarction+homogeneous+in+size+and+low+in+mortality.">Left ventricle radio-frequency ablation in the rat: a new model of heart failure due to myocardial infarction homogeneous in size and low in mortality.</a> J Card Fail. 15 (6), 540-548 (2009).</li><li>Ovsepyan, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+myocardial+infarction+in+mice:+methodology,+monitoring,+pathomorphology.">Modeling myocardial infarction in mice: methodology, monitoring, pathomorphology.</a> Acta Naturae. 3 (1), 107-115 (2011).</li><li>Ciulla, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+remodeling+after+experimental+myocardial+cryoinjury+in+rats.">Left ventricular remodeling after experimental myocardial cryoinjury in rats.</a> Journal of Surgical Research. 116 (1), 91-97 (2004).</li><li>Grisel, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+MRL+mouse+repairs+both+cryogenic+and+ischemic+myocardial+infarcts+with+scar.">The MRL mouse repairs both cryogenic and ischemic myocardial infarcts with scar.</a> Cardiovascular Pathology. 17 (1), 14-22 (2008).</li><li>Duerr, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+myocardial+remodeling+between+cryoinfarction+and+reperfused+infarction+in+mice.">Comparison of myocardial remodeling between cryoinfarction and reperfused infarction in mice.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 961298 (2011).</li><li>Ma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intramyocardial+delivery+of+human+CD133++cells+in+a+SCID+mouse+cryoinjury+model:+Bone+marrow+vs.+cord+blood-derived+cells.">Intramyocardial delivery of human CD133+ cells in a SCID mouse cryoinjury model: Bone marrow vs. cord blood-derived cells.</a> Cardiovascular Research. 71 (1), 158-169 (2006).</li><li>Takagawa, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarct+size+measurement+in+the+mouse+chronic+infarction+model:+comparison+of+area-+and+length-based+approaches.">Myocardial infarct size measurement in the mouse chronic infarction model: comparison of area- and length-based approaches.</a> Journal of Applied Physiology (1985). 102 (6), 2104-2111 (2007).</li><li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+a+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: a comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li></ol>

Este artículo describe un modelo de criolesión de ratón para investigar ACS y opciones farmacológicas y terapéuticas relacionadas.
El paso más crucial es la aplicación de la criosonda en el tejido cardíaco. La duración del contacto debe estar estrechamente controlada para obtener el tamaño óptimo del infarto y garantizar resultados reproducibles. El enfriamiento prolongado del miocardio conducirá a infartos de gran tamaño o perforación ventricular. Por el contrario, el tiempo de ...

El síndrome coronario agudo (SCA) es la principal causa de muerte en el mundo occidental1,2. La oclusión aguda de las arterias coronarias conduce a la activación de la cascada isquémica y la necrosis del tejido cardíaco afectado3. El miocardio dañado se sustituye gradualmente por tejido cicatricial no contrácteo, que se manifiesta clínicamente como una insuficiencia cardíaca4,5. A pesar de los recientes avances en el tratamiento de la SCA, la prevalencia de la insuficiencia cardíaca relacionada con la SCA y la SCA está aumentando, y las opciones terapéuticas son limitadas6,7. Por lo tanto, el desarrollo de modelos animales para estudiar ACS y sus complicaciones son de inmenso interés.
Hasta la fecha, el modelo animal más utilizado para estudiar la remodelación miocárdica inducida por ACS y ACS es la ligadura de la arteria coronaria descendente izquierda (LAD). La ligadura del LAD conduce a la isquemia aguda del miocardio, similar al tejido miocárdico humano durante el SCA.  Sin embargo, los tamaños infartos inconsistentes siguen siendo el talón de Aquiles de la ligadura LAD. La variación quirúrgica y la variabilidad anatómica del LAD conducen a tamaños infartos inconsistentes y dificultan la reproducibilidad y replicabilidad de este procedimiento8,9,10. Además, la ligadura laD tiene una alta mortalidad intra y postquirúrgica. A pesar de los esfuerzos recientes para mejorar la reproducibilidad y reducir la mortalidad11,12, todavía se necesitan un gran número de animales para evaluar adecuadamente las terapias anti-remodelación.
En los últimos años se han propuesto y estudiado modelos alternativos de ACS, incluyendo radiofrecuencia13,14 térmicas o lesiones criogénicas15,16,17,18. Los métodos actuales de criolesiones aplican una varilla metálica preenfriada en nitrógeno líquido para dañar el tejido cardíaco del sujeto15,16. Sin embargo, este procedimiento debe repetirse varias veces para generar un tamaño de infarto suficiente. Debido a la alta conductividad y baja capacidad de calor de la varilla en comparación con el tejido, la sonda se calienta rápidamente, y el tejido se enfría (y por lo tanto infarta) heterogéneamente. Para superar estas limitaciones, aquí describimos un modelo de crioinfarción utilizando un sistema de entrega de nitrógeno líquido de mano. Este modelo es reproducible, fácil de realizar y se puede establecer de forma rápida y fiable. Se genera una lesión infarto transmural reproducible independiente de la anatomía coronaria, que eventualmente conduce a una insuficiencia cardíaca. Este método es especialmente adecuado para estudiar el proceso de remodelación para la evaluación de nuevas estrategias terapéuticas farmacológicas y basadas en la ingeniería de tejidos.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:595px;" width="593">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">10 ml Syringe</td>
			<td style="width:155px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:145px;">03-377-23</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">5-0 prolene suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>EH7229H</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">6-0 prolene suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>8706H</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">8-0 Ethilon suture</td>
			<td style="width:155px;">Ethicon</td>
			<td>2808G</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Absorption Spears</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18105-01</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">BALB/c</td>
			<td style="width:155px;">The Jackson Laboratory</td>
			<td>Stock number 000651</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Bepanthen Eye and Nose ointment</td>
			<td style="width:155px;">Bayer</td>
			<td>1578675</td>
			<td style="width:132px;">Eye ointment</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Betadine Solution</td>
			<td style="width:155px;">Betadine Purdue Pharma</td>
			<td>NDC:67618-152</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Blunt Forceps</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>18025-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Buprenex</td>
			<td style="width:155px;">Reckitt Benckiser</td>
			<td style="width:145px;">NDC Codes:&#160;12496-0757-1, 12496-0757-5</td>
			<td style="width:132px;">Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr height="36">
			<td height="36" style="height:36px;width:163px;">Cryoprobe 3mm</td>
			<td style="width:155px;">Brymill Cryogenic Systems</td>
			<td>Cry-AC-3 B-800</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Ethanol 70%</td>
			<td style="width:155px;">Th. Geyer</td>
			<td>2270</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps curved</td>
			<td style="width:155px;">S&#38;T</td>
			<td>00284</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps fine</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11251-20</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Forceps standard</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>11023-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Gross Anatomy Probe</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>10088-15</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Hair clipper</td>
			<td style="width:155px;">WAHL</td>
			<td>8786-451A ARCO SE</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">High temperature cautery kit</td>
			<td style="width:155px;">Bovie</td>
			<td>18010-00</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">ISOFLURANE</td>
			<td style="width:155px;">Henry Schein Animal Health</td>
			<td>029405</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">IV Catheter 20G</td>
			<td style="width:155px;">B. Braun</td>
			<td>603028</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Mini-Goldstein Retractor</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>17002-02</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">NaCl 0.9%</td>
			<td style="width:155px;">B.Braun</td>
			<td style="width:145px;">PZN 06063042&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Art. Nr.: 3570160</td>
			<td style="width:132px;">saline</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:163px;">Needle holder</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>12075-14</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Needle Holder, Curved</td>
			<td style="width:155px;">Harvard Apparatus</td>
			<td>72-0146</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Novaminsulfon</td>
			<td style="width:155px;">Ratiopharm</td>
			<td>PZN 03530402</td>
			<td style="width:132px;">Metamizole</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Operating Board&#160;</td>
			<td style="width:155px;">Braintree Scientific</td>
			<td>39OP</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Replaceable Fine Tip</td>
			<td style="width:155px;">Bovie</td>
			<td>H101</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Scissors</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>14028-10</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Small Animal Ventilator</td>
			<td style="width:155px;">Kent Scientific</td>
			<td>RV-01</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:163px;">Spring Scissors - Angled to Side</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>15006-09</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Surgical microscope</td>
			<td style="width:155px;">Leica&#160;</td>
			<td>M651</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Transpore Surgical Tape</td>
			<td style="width:155px;">3M</td>
			<td>1527-1</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Vannas Spring Scissors</td>
			<td style="width:155px;">Fine Science Tools</td>
			<td>15400-12</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:163px;">Vaporizer&#160;</td>
			<td style="width:155px;">Kent Scientific</td>
			<td>VetFlo-1205S</td>
			<td style="width:132px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse

El uso de modelos animales es esencial para desarrollar nuevas estrategias terapéuticas para el síndrome coronario agudo y sus complicaciones. En este artículo, demostramos un modelo de infarto de criolesión murinos que genera tamaños de infarto precisos con alta reproducibilidad y replicabilidad. En resumen, después de la intubación y la esternotomía del animal, el corazón se levanta del tórax. La sonda de un sistema de administración de nitrógeno líquido portátil se aplica sobre la pared miocárdica para inducir la criolesión. La función ventricular deteriorada y la conducción eléctrica se pueden controlar con ecocardiografía o mapeo óptico. La remodelación miocárdica transmural de la zona infartada se caracteriza por la deposición de colágeno y la pérdida de cardiomiocitos. En comparación con otros modelos (por ejemplo, LAD-ligation), este modelo utiliza un sistema de entrega de nitrógeno líquido portátil para generar tamaños de infarto más uniformes.

El modelo infarto de criolesiones es adecuado para estudiar ACS y sus complicaciones. En este modelo se ven bajas tasas de mortalidad y una recuperación postquirúrgica eficiente. El daño miocárdico inducido por criolesiones reduce la función cardíaca, el desacoplamiento eléctrico y la remodelación transmural.
La ecocardiografía se puede utilizar para controlar la función cardíaca no invasivamente in vivo. En los corazones criolesionados, la ecocardiografía demuestra una reducción ...

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A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

Este artículo demuestra un modelo para estudiar la remodelación cardíaca después de la criolesión miocárdica en ratones.

Un modelo de criolesiones para estudiar el infarto de miocardio en el ratón

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Este método es fiable para estudiar la generación de infarto de miocardio y una excelente plataforma para investigar la recuperación cardíaca después, por ejemplo, del trasplante de células madre. La principal ventaja de este procedimiento es que se puede utilizar para generar tamaños de infarto uniformes de una manera rápida, fácil y reproducible. En este modelo se pueden probar nuevas intervenciones experimentales, como las estrategias farmacológicas o las estrategias basadas en la ingeniería tisular.Y probar con éxito que las opciones se pueden confirmar aún más en modelos de animales grandes. Después de confirmar una falta de respuesta al reflejo del dolor en un ratón anestesiado de 27 gramos y 14 semanas de edad, utilice una recortadora de pelo para eliminar el pelaje del pecho y el cuello del animal y coloque el ratón en una posición supina sobre una almohadilla calentada. Tape las extremidades posteriores y las extremidades delanteras en una posición de águila extendida y utilice povidona-yodo secuencial y 80%exfoliantes de etanol para desinfectar la piel expuesta.Haga una incisión de la piel de la línea media desde el tercio inferior del esternón hasta la barbilla, y use fórceps curvos para separar cuidadosamente los músculos alrededor del cuello para exponer la tráquea. Utilice micro tijeras para realizar una traqueotomía entre el segundo y tercer anillo de cartílago. Y ajuste el ventilador a una frecuencia de ventilación de 110 por minuto con un volumen de marea de 0,5 mililitros.A continuación, inserte una cánula de plástico de calibre 20 conectada al ventilador en la tráquea. A continuación, utilice la cautela para separar el músculo pectoral derecho de su origen esternal entre la tercera y la séptima costillas. Y utilice tijeras de resorte en ángulo lateral para cortar las costillas de cuarta a seis lo más cerca posible del esternón.Disecciona el tejido conectivo subyacente para obtener una visión clara de la cavidad torácica, cauterizando la arteria mamaria para frenar el sangrado según sea necesario. Inserte un mini retractor de manchas de oro para extender las costillas y mantener la cavidad torácica abierta. Y usa fórceps contundentes para abrir el pericardio para exponer el corazón.Utilice una varilla contundente para levantar el corazón de la cavidad torácica y disminuir la tensión del retractor para reducir la abertura del pecho y evitar que el corazón vuelva a caer en la cavidad abdominal. Pre-enfriar una criosonda de tres milímetros de diámetro durante 10 segundos, y aplicar la criosonda en la pared interior del ventrículo izquierdo durante 10 segundos para generar un ventricular izquierdo, infarto de crioinjurio. Separar la criosonda de la pared ventricular izquierda con riego salino a temperatura ambiente y reenlazar la abertura del pecho con el retractor.Utilice la varilla para devolver suavemente el corazón a la cavidad torácica y retire el retractor. Utilice una sutura 6-0 para conectar la esternotomía con un solo nudo. Y usa una sutura 6-0 para cerrar la cavidad torácica.Utilice una jeringa de 10 mililitros para evacuar el aire restante del pecho antes de atar el nudo y adaptar la piel en el borde caudal antes de usar una sutura de 5-0 para cerrar el tejido hasta el punto de la abertura traqueal. Después de reducir el isoflurano y el animal gana respiración espontánea eliminar el catéter traqueal y cerrar la incisión traqueal con uno 8-0 Sutura. Sustituya los músculos del cuello ventral a su posición anatómica sobre la tráquea y complete la sutura cutánea.Luego, agregue metamizole al agua potable para la analgesia del dolor durante tres días con monitoreo diario de animales durante ocho semanas. En la ecocardiografía de corazones crioinjurados revela una fracción de eyección significativamente reducida y un cambio de área fraccionaria, con deterioro funcional observado desde el día siete después de la cirugía hasta la variable experimental a los 56 días. Según lo evaluado por el análisis de bucle de volumen de presión, la crioinfraction conduce a una función del ventrículo izquierdo deteriorada que se refleja como una disminución en el volumen de la carrera, el trabajo de carrera, la salida cardíaca y la potencia máxima ajustada previa a la carga.El mapeo óptico ex-vivo de corazones teñidos sensibles al voltaje fluorescente demuestra un bloqueo de la conducción eléctrica en el borde de la lesión, lo que indica un desacoplamiento eléctrico local. La tinción histológica con el tricromo de Masson revela la formación de tejido fibroso transmuros en el lugar de la lesión. El tamaño del infarto se puede calcular midiendo el área de la cicatriz de infarto o la longitud de la cicatriz de línea media.Además, la tinción inmunofluorescente contra un marcador de cardiomiocitos y colágeno-I confirman la presencia de remodelación fibrosa y la pérdida de cardiomiocitos en el lugar de la lesión. Es importante mantener la misma duración de contacto del crioproblema de cada animal, ya que una duración diferente puede conducir a tamaños de infarto incongruentes. Una vez masterada esta técnica se puede realizar en 20 minutos si se realiza correctamente.Después de ver este video usted debe tener una buena comprensión de cómo realizar el modelo de crioinjurio. Buena suerte con tus experimentos.

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute Myocardial Infarction in Rats

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With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Investigación

Medicina

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The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

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Resonancia magnética y PET en modelos de ratón de infarto de miocardio

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