Name: identifying mutations by high resolution melting in a tilling population of rice
Uploaded: 2019-09-02T13:00:00
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この研究は、中国国家主要研究開発プログラム(No.2016YFD0102103)と中国国家自然科学財団(No.31701394)によって支援されました。

1. 準備
<ol><li>
γ線変異集団の開発
	<ol>
<li>乾燥米種子約20,000種(水分含有量14%)γ照射施設(例えば、ガンマ細胞)で100 Gy(1 Gy/min)で137Csガンマ線を持つジャポニカ米ライン(例えば、DS552)の。 注:治療に使用される種子は、高い生存率を有する必要があります(例えば、発芽率>85%)。インディカ米の照射量は150 Gyに増加することができる。</li>
		<li>苗木に発芽した後...

<ol>
	<li>McCallum, C. M., Comai, L., Green, E. A., Henikoff, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+induced+local+lesions+IN+genomes+(TILLING)+for+plant+functional+genomics.">Targeting induced local lesions IN genomes (TILLING) for plant functional genomics.</a> Plant Physiology. 123, 439-442 (2000).</li><li>Taheri, S., Abdullah, T. L., Jain, S. M., Sahebi, M., Azizi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TILLING,+high-resolution+melting+(HRM),+and+next-generation+sequencing+(NGS)+techniques+in+plant+mutation+breeding.">TILLING, high-resolution melting (HRM), and next-generation sequencing (NGS) techniques in plant mutation breeding.</a> Molecular Breeding. 37 (3), 40 (2017).</li><li>Till, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+discovery+of+induced+point+mutations+with+high+throughput+TILLING.">Large-scale discovery of induced point mutations with high throughput TILLING.</a> Genome Research. 13 (3), 524-530 (2003).</li><li>Comai, L., Henikoff, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TILLING:+practical+single+nucleotide+mutation+discovery.">TILLING: practical single nucleotide mutation discovery.</a> The Plant Journal. 45 (4), 684-694 (2006).</li><li>Comai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+discovery+of+DNA+polymorphisms+in+natural+populations+by+Ecotilling.">Efficient discovery of DNA polymorphisms in natural populations by Ecotilling.</a> The Plant Journal. 37, 778-786 (2004).</li><li>Rogers, C., Wen, J., Chen, R., Oldroyd, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion-based+reverse+genetics+in+Medicagotruncatula.">Deletion-based reverse genetics in Medicagotruncatula.</a> Plant Physiology. 151 (3), 1077 (2009).</li><li>Bush, S. M., Krysan, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ITILLING:+a+personalized+approach+to+the+identification+of+induced+mutations+in+arabidopsis.">ITILLING: a personalized approach to the identification of induced mutations in arabidopsis.</a> Physiology. 154 (1), 25-35 (2010).</li><li>Colasuonno, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DHPLC+technology+for+high-throughput+detection+of+mutations+in+a+durum+wheat+TILLING+population.">DHPLC technology for high-throughput detection of mutations in a durum wheat TILLING population.</a> BMC Genetics. 17 (1), 43 (2016).</li><li>Tsai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+rare+mutations+in+populations:+TILLING+by+sequencing.">Discovery of rare mutations in populations: TILLING by sequencing.</a> Plant Physiology. 156, 1257-1268 (2011).</li><li>Kumar, A. P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TILLING+by+Sequencing+(TbyS)+for+targeted+genome+mutagenesis+in+crops.">TILLING by Sequencing (TbyS) for targeted genome mutagenesis in crops.</a> Molecular Breeding. 37, 14 (2017).</li><li>Dong, C., Vincent, K., Sharp, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+mutation+detection+of+three+homoeologous+genes+in+wheat+by+High+Resolution+Melting+analysis+and+Mutation+Surveyor.">Simultaneous mutation detection of three homoeologous genes in wheat by High Resolution Melting analysis and Mutation Surveyor.</a> BMC Plant Biology. 9, 143 (2009).</li><li>Gady, A. L., Herman, F. W., Wal, M. H. V. D., Loo, E. N. V., Visser, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementation+of+two+high+through-put+techniques+in+a+novel+application:+detecting+point+mutations+in+large+EMS+mutated+plant+populations.">Implementation of two high through-put techniques in a novel application: detecting point mutations in large EMS mutated plant populations.</a> Plant Methods. 5 (41), 6974-6977 (2009).</li><li>Ririe, K. M., Rasmussen, R. P., Wittwer, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Product+differentiation+by+analysis+of+DNA+melting+curves+during+the+polymerase+chain+reaction.">Product differentiation by analysis of DNA melting curves during the polymerase chain reaction.</a> Analytical Biochemistry. 245, 154-160 (1997).</li><li>Lochlainn, S. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+melt+(HRM)+analysis+is+an+efficient+tool+to+genotype+EMS+mutants+in+complex+crop+genomes.">High resolution melt (HRM) analysis is an efficient tool to genotype EMS mutants in complex crop genomes.</a> Plant Methods. 7, 43 (2011).</li><li>Yoshida, S., Forno, D. A., Cock, J. H., Gomez, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+manual+for+physiological+rice.">Laboratory manual for physiological rice.</a> The International Rice Research Institute. , (1976).</li><li>Peng, S. T., Zhuang, J. Y., Yan, Q. C., Zheng, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SSR+markers+selection+and+purity+detection+of+major+hybrid+rice+combinations+and+their+parents+in+China.">SSR markers selection and purity detection of major hybrid rice combinations and their parents in China.</a> Chinese Journal of Rice Science. 17, 1-5 (2003).</li><li>Allen, G. C., Flores-Vergara, M. A., Krasynanski, S., Kumar, S., Thompson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+protocol+for+rapid+DNA+isolation+from+plant+tissues+using+cetyltrimethymmonium+bromide.">A modified protocol for rapid DNA isolation from plant tissues using cetyltrimethymmonium bromide.</a> Nature. 1 (5), 2320-2325 (2006).</li><li>Fu, H. W., Li, Y. F., Shu, Q. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+revisit+of+mutation+induction+by+gamma+rays+in+rice+(Oryza+sativa+L.):+implications+of+microsatellite+markers+for+quality+control.">A revisit of mutation induction by gamma rays in rice (Oryza sativa L.): implications of microsatellite markers for quality control.</a> Molecular Breeding. 22 (2), 281-288 (2008).</li><li>Li, S., Liu, S. M., Fu, H. W., Huang, J. Z., Shu, Q. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+melting-based+tilling+of+&#947;+ray-induced+mutations+in+rice.">High-resolution melting-based tilling of &#947; ray-induced mutations in rice.</a> Journal of Zhejiang University-Science B. 19 (8), 620-629 (2018).</li><li>Acanda, Y., &#211;scar, M., Prado, M. J., Gonz&#225;lez, M. V., Rey, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EMS+mutagenesis+and+qPCR-HRM+prescreening+for+point+mutations+in+an+embryogenic+cell+suspension+of+grapevine.">EMS mutagenesis and qPCR-HRM prescreening for point mutations in an embryogenic cell suspension of grapevine.</a> Cell Reports. 33 (3), 471-481 (2014).</li><li>Si, H. J., Wang, Q., Liu, Y. Y., Huang, J. Z., Shu, Q. Y., Tan, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+application+of+an+HRM-based,+safe+and+high-throughput+genotyping+system+for+photoperiod+sensitive+genic+male+sterility+gene+in+rice.">Development and application of an HRM-based, safe and high-throughput genotyping system for photoperiod sensitive genic male sterility gene in rice.</a> Journal of Nuclear Agricultural Sciences. 31 (11), 2081-2086 (2017).</li><li>Li, S., Zheng, Y. C., Cui, H. R., Fu, H. W., Shu, Q. Y., Huang, J. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frequency+and+type+of+inheritable+mutations+induced+by+&#947;+rays+in+rice+as+revealed+by+whole+genome+sequencing.">Frequency and type of inheritable mutations induced by &#947; rays in rice as revealed by whole genome sequencing.</a> Journal of Zhejiang University-Science B. 17 (12), 905 (2016).</li></ol>

TILLINGは、遺伝子機能解析および作物の繁殖のために誘導された変異を同定するための強力な逆遺伝的ツールであることが証明されています。容易に観察または決定されないいくつかの形質のために、高スループットPCRベースの変異検出を用いたTILLINGは、異なる遺伝子の変異体を得るのに有用な方法であり得る。HRM-TILLING法は、変異スクリーニングのためにトマト12、小麦11?...

変異体は、植物機能ゲノミクスの研究と新品種の繁殖のための重要な遺伝資源です。フォワード遺伝学のアプローチ(すなわち、変異型の選択から遺伝子クローニングまたは多様性の発達まで)は、約20年前に誘発された突然変異を使用するための主かつ唯一の方法でした。McCallumら1による新しい逆遺伝学法の開発は、マッカラムら1による新しいパラダイムを開き、それ以来、多数の動植物種2に適用されている。TILLINGは、技術的に決定が困難または高価な形質(例えば、耐病性、ミネラル含有量)の繁殖に特に有用である。
TILLINGは当初、化学変異原(EMS1、3)によって誘導されるスクリーニング点変異のために開発された。これには、次の手順が含まれます: TILLING 人口の確立(s)。個々の植物のDNA調製とプール;標的DNA断片のPCR増幅;PCRアンプリコンの脱化およびアニーリングによるヘテロドプレックス形成およびCEL Iヌクレアーゼによる切断;変異体およびその特異的分子病変3,4の同定。ただし、この方法は比較的複雑で、時間がかかり、スループットが低い場合があります。より効率的で高いスループットを実現するために、削除ティリング(De-TILLING)(表1)1、3、5、6など、多くの変更されたTILLING方法が開発されています。 7,8,9,10,11,12.
DNA二重の融解中の蛍光変化に基づくHRM曲線分析は、変異スクリーニングおよびジェノタイピング13のためのシンプルで費用対効果の高い、ハイスループット法である。HRMは、EMS変異14によって誘導されるSBS変異をスクリーニングするためのHRMベースのティリング(HRM-TILLING)を含む植物研究に既に広く使用されている。ここでは、米中のγ(γ)線によって誘導される変異(インデルとSBSの両方)をスクリーニングするための詳細なHRM-TILLINGプロトコルを提示した。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>2&#215; Taq plus PCR Master Mix</td>
			<td>Tiangen, China</td>
			<td>KT201</td>
			<td>PCR buffer, dNTP and polymerase for PCR amplification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well plate</td>
			<td>Bio-rad, America</td>
			<td>MSP-9651</td>
			<td>Specific plate for PCR in HRM analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mastercycler nexus</td>
			<td>Eppendorf, German</td>
			<td>6333000073</td>
			<td>PCR amplification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LightScanner</td>
			<td>Idaho Technology, USA</td>
			<td>LCSN-ASY-0011</td>
			<td>For fluorescence sampling and processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CALL-IT 2.0</td>
			<td>Idaho Technology, USA</td>
			<td></td>
			<td>For analysis of the fluorescence change</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EvaGreen</td>
			<td>Biotium, USA</td>
			<td>31000-T</td>
			<td>Fluorescence dye of HRM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop 2000</td>
			<td>Thermo Scientific, USA</td>
			<td>ND2000</td>
			<td>For DNA quantification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identifying mutations by high resolution melting in a tilling population of rice

ゲノムにおける標的誘発局所病変(TILLING)は、誘導変異のハイスループットスクリーニングのための逆遺伝学の戦略である。しかし、TILLINGシステムは挿入/欠失(Indel)検出の適用性が低く、従来のTILLINGはCEL Iヌクレアーゼ消化やゲル電気泳動のようなより複雑なステップを必要とします。スループットと選択効率を向上させ、インデルとシングルベース置換(SB)の両方のスクリーニングを可能にするために、新しい高解像度融解(HRM)ベースのTILLINGシステムが開発されました。ここでは、詳細なHRM-TILLINGプロトコルを提示し、変異スクリーニングにおけるその応用を示す。この方法は、高温での二本鎖DNAの変異を測定することにより、PCRアンプリコンの変異を解析することができる。HRM 分析は、追加の処理を行わずに PCR 後に直接実行されます。さらに、シンプルで安全で高速な(SSF)DNA抽出方法をHRM-TILLINGと統合し、インデルとSBの両方を識別します。そのシンプルさ、堅牢性と高いスループットは、米や他の作物の変異スキャンに潜在的に有用です。

HRM スキャンと分析
合計で、4,560M2苗から1,140個のプールされたDNAサンプルを製造し、PCR増幅を行った。OsLCT1とSPDTに対して 195 bp および 259 bp のサイズを持つ 2 つのフラグメントがそれぞれ増幅されました (表2)。ほとんどのサンプルは、WT(ΔF < 0.05)と有意に異なる溶融曲線を持っていました。WT (ΔF > 0.05) と有意に異なる HRM 曲?...

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Identifying Mutations by High Resolution Melting in a TILLING Population of Rice

本稿では、ゲノムにおける高分解能融解分析(HRM)ベースの標的誘導局所病変(TILLING)として説明されているプロトコルを紹介する。この方法は、DNA二重の融解時の蛍光変化を利用し、挿入/欠失(Indel)および単塩基下属(SBS)の両方のハイスループットスクリーニングに適しています。

米の耕作集団における高解像度溶融による変異の同定

Target Induced Local Lesions In Genomes (TILLING) is a strategy of reverse genetics for the high-throughput screening of induced mutations. However, the ...

これは、疾病耐性、ミネラル含有量など、技術的に困難または決定される高価な形質を繁殖させるために非常に有用であろう。これは非常にシンプルでコスト効率が高く、高スループットの手法です。まず、96 ウェル PCR プレートの各ウェルに 4 枚のリーフ ディスクを配置します。各井戸に50ミリリットルのバッファーA溶液を加えます。マイナス80度の冷凍庫でプレートを10分間冷凍します。その後、室温でプレートを凍結解除します。摂氏95度で10分間インキュベートします。各ウェルに50マイクロリットルのバッファーBを加え、渦を入れ、よく混ぜます。プレートを1、500回gで1分間遠心する。PCRのDNAとして上清を収集します。まず、1つからDNA上清を使用して、PCRテンプレートと同様に、アニーリング温度を最適化します。各PCRによく試薬とDNA上清の1マイクロリットルを追加します。PCRチューブを勾配可能な熱ブロックに入れ、原稿に従って加熱プログラムを調整し、各標的断片の最適なアニーリング温度を決定します。PCR産物の電気泳動を1%アガロースゲルで行い、アンプリコンを調べます。ターゲットフラグメントの特異的増幅を可能にする最適なアニーリング温度を決定します。HRM分析を行うために、HRM適合プレートの各ウェルに1マイクロリットルの蛍光色素と1マイクロリットルのDNA上清を含む試薬を組み合わせます。各プレートには、DNAを含まない1つの野生型の親子サンプルと1つの陰性対照を含む。蒸発を防ぐために、各井戸にミネラルオイルの滴を追加します。次いで、粘着フィルムでプレートを密封し、遠心分離機を1,000倍gで1分間密封する。最適化されたアニーリング温度を使用して PCR を実行します。次に、粘着フィルムをプレートから取り出し、プレートをHRMマシンに挿入します。ソフトウェアで、ファイルメニューから「新規実行」を選択するか、画面の上部にある「実行」ボタンを押します。55~95°Cの溶融の開始温度と終了温度を指定します。高解像度の溶解解析用のサンプルを選択し、負のコントロールに類似したサンプルを除外します。溶ける曲線を正規化して、同じ開始蛍光と終了蛍光を持つようにします。最小値と最大値の低いカーソルがカーブの領域内にあることを視覚的に確認します。デルタF、蛍光の差、デフォルト設定の05のレベルを保ちます。標準の選択リストから、共通の対バリアントを選択し、通常の感度を選択します。コントロールとしてワイルドタイプを使用するには、H12 を選択します。デルタF値が05より大きいサンプルは、変異植物を含むものと考えられる。次に、CTAB法を用いて、4つの植物のそれぞれから、野生型とは大きく異なる融解曲線を有する変異型プールからDNAを抽出する。分光光度計を用いて定量した後、NanoDrop 2000でDNAをマイクロリットル当たり約25ナノグラムの最終濃度に調整します。PCRチューブ内のDNAサンプルに0.4マイクロリットルのPCRプライマーを加え、サーマルサイクラーに入れ、ターゲット断片を増幅するようにプログラムを調整します。次に、シーケンシングのために PCR 製品を会社に送ります。サンガーシーケンシング後、M2植物と野生型の配列を比較して分子病変を比較します。本研究では、OsLCT1またはSPDT遺伝子における変異に対するM2苗のHRMスキャンおよび分析は、ほとんどのサンプルが05未満のデルタFを有する野生型と有意に異なっていない融解曲線を有することが示された。突然変異体は、それぞれ摂氏90〜92度の温度で05を超えるデルタFsと81.5〜83.5度の大きく異なるHRM曲線を示した。4,560M2の苗からの遺伝子上の変異型および位置を、シーケンシングクロマトグラムによって確認した。OsLCT1の4,304塩基対でGからAへの変異を有するヘテロ接合部位が同定された。1つの1つのヌクレオチドA挿入は、OsLCT1の4、240塩基対に出現し、TTCトリヌクレオチド欠失は、SPDTの5、948〜5、950塩基対の位置で観察された。HRM 分析の前に PCR を最適化します。ゲル中の染料は少し有害です。ゲルを動かすときは手袋を着用してください。

Research

JoVE Journal

Genetics

Parallel Measurement of Circadian Clock Gene Expression and Hormone Secretion in Human Primary Cell Cultures

ヒト初代細胞培養物における概日時計遺伝子発現やホルモン分泌のパラレル測定

Circadian clocks are functional in all light-sensitive organisms, allowing for an adaptation to the external world by anticipating daily environmental ...

High-resolution Melting PCR for Complement Receptor 1 Length Polymorphism Genotyping: An Innovative Tool for Alzheimer's Disease Gene Susceptibility Assessment

補体受容体1長多型のための高分解能Melting PCR Genotyping：アルツハイマー病の遺伝子感受性評価のための革新的なツール

Complement receptor 1 (CR1), a transmembrane glycoprotein that plays a key role in the innate immune system, is expressed on many cell types, but ...

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

ショウジョウバエの胚とパスチラミドシグナル信号増幅を利用した生体表面の高解像度蛍光In Situハイブリダイゼーション

In our efforts to determine the patterns of expression and subcellular localization of Drosophila RNAs on a genome-wide basis, and in a variety of ...

G2-seq: A High Throughput Sequencing-based Technique for Identifying Late Replicating Regions of the Genome

G2-seq: 高スループット シーケンス ベースを識別する方法後半ゲノムの領域を複製します。

Numerous techniques have been developed to follow the progress of DNA replication through the S phase of the cell cycle. Most of these techniques have ...

High-throughput Identification of Synergistic Drug Combinations by the Overlap2 Method

High-throughput Identification of Synergistic Drug Combinations by the Overlap2 Method

重複2法による相乗効果の薬剤の組合せの高スループット識別

Although antimicrobial drugs have dramatically increased the lifespan and quality of life in the 20th century, antimicrobial resistance threatens our ...

Promoter Capture Hi-C: High-resolution, Genome-wide Profiling of Promoter Interactions

プロモーター キャプチャこんにちは-c: 高解像度, ゲノム プロモーターの相互作用のプロファイリング

The three-dimensional organization of the genome is linked to its function. For example, regulatory elements such as transcriptional enhancers control the ...

Differentiation, Maintenance, and Analysis of Human Retinal Pigment Epithelium Cells: A Disease-in-a-dish Model for BEST1 Mutations

Differentiation, Maintenance, and Analysis of Human Retinal Pigment Epithelium Cells: A Disease-in-a-dish Model for BEST1 Mutations

差別化、保守、および人間の網膜色素上皮細胞の解析: BEST1変異の皿での疾患モデル

Although over 200 genetic mutations in the human BEST1 gene have been identified and linked to retinal degenerative diseases, the pathological mechanisms ...

High-Resolution Comparison of Bacterial Conjugation Frequencies

細菌の活用頻度の高解像度の比較

Bacterial conjugation is an important step in the horizontal transfer of antibiotic resistance genes via a conjugative DNA element. In-depth comparisons ...

Designing Automated, High-throughput, Continuous Cell Growth Experiments Using eVOLVER

EVOLVER を用いた自動、高スループット、連続細胞増殖実験の設計

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