Name: identifying mutations by high resolution melting in a tilling population of rice
Uploaded: 2019-09-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identifying Mutations by High Resolution Melting in a TILLING Population of Rice at JoVE.com

Эта работа была поддержана Национальной программой исследований и разработок Китая (No 2016YFD0102103) и Национальным фондом естественных наук Китая (No31701394).

1. Подготовка
<ol><li>
Развитие мутагенизированных популяций, связанных с лучами,
	<ol>
<li>Лечить около 20 000 сушеных семян риса (с содержанием влаги около 14%) рисовой линии японики (например, DS552) с 137С гамма-лучей при 100 Ги (1 Г/мин) в объекте облучения (например, гамма-клетка). П...

<ol>
	<li>McCallum, C. M., Comai, L., Green, E. A., Henikoff, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+induced+local+lesions+IN+genomes+(TILLING)+for+plant+functional+genomics.">Targeting induced local lesions IN genomes (TILLING) for plant functional genomics.</a> Plant Physiology. 123, 439-442 (2000).</li><li>Taheri, S., Abdullah, T. L., Jain, S. M., Sahebi, M., Azizi, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TILLING,+high-resolution+melting+(HRM),+and+next-generation+sequencing+(NGS)+techniques+in+plant+mutation+breeding.">TILLING, high-resolution melting (HRM), and next-generation sequencing (NGS) techniques in plant mutation breeding.</a> Molecular Breeding. 37 (3), 40 (2017).</li><li>Till, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large-scale+discovery+of+induced+point+mutations+with+high+throughput+TILLING.">Large-scale discovery of induced point mutations with high throughput TILLING.</a> Genome Research. 13 (3), 524-530 (2003).</li><li>Comai, L., Henikoff, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TILLING:+practical+single+nucleotide+mutation+discovery.">TILLING: practical single nucleotide mutation discovery.</a> The Plant Journal. 45 (4), 684-694 (2006).</li><li>Comai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+discovery+of+DNA+polymorphisms+in+natural+populations+by+Ecotilling.">Efficient discovery of DNA polymorphisms in natural populations by Ecotilling.</a> The Plant Journal. 37, 778-786 (2004).</li><li>Rogers, C., Wen, J., Chen, R., Oldroyd, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion-based+reverse+genetics+in+Medicagotruncatula.">Deletion-based reverse genetics in Medicagotruncatula.</a> Plant Physiology. 151 (3), 1077 (2009).</li><li>Bush, S. M., Krysan, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ITILLING:+a+personalized+approach+to+the+identification+of+induced+mutations+in+arabidopsis.">ITILLING: a personalized approach to the identification of induced mutations in arabidopsis.</a> Physiology. 154 (1), 25-35 (2010).</li><li>Colasuonno, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DHPLC+technology+for+high-throughput+detection+of+mutations+in+a+durum+wheat+TILLING+population.">DHPLC technology for high-throughput detection of mutations in a durum wheat TILLING population.</a> BMC Genetics. 17 (1), 43 (2016).</li><li>Tsai, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+rare+mutations+in+populations:+TILLING+by+sequencing.">Discovery of rare mutations in populations: TILLING by sequencing.</a> Plant Physiology. 156, 1257-1268 (2011).</li><li>Kumar, A. P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TILLING+by+Sequencing+(TbyS)+for+targeted+genome+mutagenesis+in+crops.">TILLING by Sequencing (TbyS) for targeted genome mutagenesis in crops.</a> Molecular Breeding. 37, 14 (2017).</li><li>Dong, C., Vincent, K., Sharp, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+mutation+detection+of+three+homoeologous+genes+in+wheat+by+High+Resolution+Melting+analysis+and+Mutation+Surveyor.">Simultaneous mutation detection of three homoeologous genes in wheat by High Resolution Melting analysis and Mutation Surveyor.</a> BMC Plant Biology. 9, 143 (2009).</li><li>Gady, A. L., Herman, F. W., Wal, M. H. V. D., Loo, E. N. V., Visser, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementation+of+two+high+through-put+techniques+in+a+novel+application:+detecting+point+mutations+in+large+EMS+mutated+plant+populations.">Implementation of two high through-put techniques in a novel application: detecting point mutations in large EMS mutated plant populations.</a> Plant Methods. 5 (41), 6974-6977 (2009).</li><li>Ririe, K. M., Rasmussen, R. P., Wittwer, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Product+differentiation+by+analysis+of+DNA+melting+curves+during+the+polymerase+chain+reaction.">Product differentiation by analysis of DNA melting curves during the polymerase chain reaction.</a> Analytical Biochemistry. 245, 154-160 (1997).</li><li>Lochlainn, S. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+melt+(HRM)+analysis+is+an+efficient+tool+to+genotype+EMS+mutants+in+complex+crop+genomes.">High resolution melt (HRM) analysis is an efficient tool to genotype EMS mutants in complex crop genomes.</a> Plant Methods. 7, 43 (2011).</li><li>Yoshida, S., Forno, D. A., Cock, J. H., Gomez, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+manual+for+physiological+rice.">Laboratory manual for physiological rice.</a> The International Rice Research Institute. , (1976).</li><li>Peng, S. T., Zhuang, J. Y., Yan, Q. C., Zheng, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SSR+markers+selection+and+purity+detection+of+major+hybrid+rice+combinations+and+their+parents+in+China.">SSR markers selection and purity detection of major hybrid rice combinations and their parents in China.</a> Chinese Journal of Rice Science. 17, 1-5 (2003).</li><li>Allen, G. C., Flores-Vergara, M. A., Krasynanski, S., Kumar, S., Thompson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+protocol+for+rapid+DNA+isolation+from+plant+tissues+using+cetyltrimethymmonium+bromide.">A modified protocol for rapid DNA isolation from plant tissues using cetyltrimethymmonium bromide.</a> Nature. 1 (5), 2320-2325 (2006).</li><li>Fu, H. W., Li, Y. F., Shu, Q. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+revisit+of+mutation+induction+by+gamma+rays+in+rice+(Oryza+sativa+L.):+implications+of+microsatellite+markers+for+quality+control.">A revisit of mutation induction by gamma rays in rice (Oryza sativa L.): implications of microsatellite markers for quality control.</a> Molecular Breeding. 22 (2), 281-288 (2008).</li><li>Li, S., Liu, S. M., Fu, H. W., Huang, J. Z., Shu, Q. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+melting-based+tilling+of+&#947;+ray-induced+mutations+in+rice.">High-resolution melting-based tilling of &#947; ray-induced mutations in rice.</a> Journal of Zhejiang University-Science B. 19 (8), 620-629 (2018).</li><li>Acanda, Y., &#211;scar, M., Prado, M. J., Gonz&#225;lez, M. V., Rey, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EMS+mutagenesis+and+qPCR-HRM+prescreening+for+point+mutations+in+an+embryogenic+cell+suspension+of+grapevine.">EMS mutagenesis and qPCR-HRM prescreening for point mutations in an embryogenic cell suspension of grapevine.</a> Cell Reports. 33 (3), 471-481 (2014).</li><li>Si, H. J., Wang, Q., Liu, Y. Y., Huang, J. Z., Shu, Q. Y., Tan, Y. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+application+of+an+HRM-based,+safe+and+high-throughput+genotyping+system+for+photoperiod+sensitive+genic+male+sterility+gene+in+rice.">Development and application of an HRM-based, safe and high-throughput genotyping system for photoperiod sensitive genic male sterility gene in rice.</a> Journal of Nuclear Agricultural Sciences. 31 (11), 2081-2086 (2017).</li><li>Li, S., Zheng, Y. C., Cui, H. R., Fu, H. W., Shu, Q. Y., Huang, J. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Frequency+and+type+of+inheritable+mutations+induced+by+&#947;+rays+in+rice+as+revealed+by+whole+genome+sequencing.">Frequency and type of inheritable mutations induced by &#947; rays in rice as revealed by whole genome sequencing.</a> Journal of Zhejiang University-Science B. 17 (12), 905 (2016).</li></ol>

TILLING оказался мощным обратным генетическим инструментом для выявления индуцированных мутаций для функционального анализа генов и разведения сельскохозяйственных культур. Для некоторых черт, которые не легко наблюдать или определить, TILLING с высокой пропускной памятью ПЦР на основе му...

Мутанты являются важными генетическими ресурсами для исследования функциональной геномики растений и разведения новых сортов. Передовой подход к генетике (т.е. от выбора мутантов до клонирования генов или развития разнообразия) был основным и единственным методом использования индуцированных мутаций около 20 лет назад. Разработка нового метода обратной генетики, TILLING (Нацеливание индуцированных местных поражений в геномах) McCallum et al.1 открыл новую парадигму, и с тех пор она была применена в большом количестве животных и растений видов2. TILLING особенно полезен для размножения, которые технически трудно или дорого определить (например, устойчивость к болезням, содержание минералов).
TILLING был первоначально разработан для мутаций точек скрининга, индуцированныххимическими мутагенами (например, EMS 1,3). Она включает в себя следующие шаги: создание TILLING населения (ы); подготовка ДНК и объединение отдельных растений; ПЦР усиление фрагмента ДНК-мишени; формации гетеродплексов путем денатурации и аннулирования ампулктонов ПЦР и расщепления с помощью cel I nuclease; и идентификация мутантов и ихспецифических молекулярных поражений 3,4. Тем не менее, этот метод по-прежнему является относительно сложным, отнимает много времени и низкой пропускной их. Чтобы сделать его более эффективным и с более высокой пропускной их, многие модифицированные методы TILLING были разработаны, такие как удаление TILLING (De-TILLING) (Таблица 1)1,3,5,6, 7,8,9,10,11,12.
Анализ кривой HRM, который основан на изменениях флуоресценции во время плавления дуплекса ДНК, является простым, экономичным и высокопроизводительным методом для скрининга мутаций и генотипирования13. HRM уже широко используется в исследованиях растений, включая HRM на основе TILLING (HRM-TILLING) для скрининга мутаций SBS, индуцированных EMS mutagenesis14. Здесь мы представили подробные протоколы HRM-TILLING для скрининга мутаций (как Indel, так и SBS), индуцированных гамма-лучами в рисе.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>2&#215; Taq plus PCR Master Mix</td>
			<td>Tiangen, China</td>
			<td>KT201</td>
			<td>PCR buffer, dNTP and polymerase for PCR amplification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well plate</td>
			<td>Bio-rad, America</td>
			<td>MSP-9651</td>
			<td>Specific plate for PCR in HRM analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mastercycler nexus</td>
			<td>Eppendorf, German</td>
			<td>6333000073</td>
			<td>PCR amplification</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LightScanner</td>
			<td>Idaho Technology, USA</td>
			<td>LCSN-ASY-0011</td>
			<td>For fluorescence sampling and processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CALL-IT 2.0</td>
			<td>Idaho Technology, USA</td>
			<td></td>
			<td>For analysis of the fluorescence change</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EvaGreen</td>
			<td>Biotium, USA</td>
			<td>31000-T</td>
			<td>Fluorescence dye of HRM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanodrop 2000</td>
			<td>Thermo Scientific, USA</td>
			<td>ND2000</td>
			<td>For DNA quantification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identifying mutations by high resolution melting in a tilling population of rice

Целевая индуцированная локальная поражения в геномах (TILLING) является стратегией обратной генетики для высокой пропускной проверки индуцированных мутаций. Тем не менее, система TILLING имеет меньшую применимость для обнаружения вставки/удаления (Indel) и традиционные TILLING нуждается в более сложных шагах, таких как самоанализ пищеварения CEL I и электрофорез геля. Для повышения эффективности пропускной способностью и отбора, а также для того, чтобы сделать возможным скрининг как Indels, так и отдельных базовых субстанций (SBSs), разработана новая система плавления с высоким разрешением (HRM) tillING. Здесь мы представляем подробный протокол HRM-TILLING и показываем его применение при скрининге мутаций. Этот метод может анализировать мутации ампулконов ПЦР путем измерения денатурации двухцепочечной ДНК при высоких температурах. Анализ HRM непосредственно выполняется после ПЦР без дополнительной обработки. Кроме того, простой, безопасный и быстрый (SSF) метод извлечения ДНК интегрирован с HRM-TILLING для идентификации как Indels, так и SBS. Его простота, надежность и высокая пропускная готовность делают его потенциально полезным для сканирования мутаций в рисе и других культурах.

Сканирование и анализ HRM
В общей сложности было произведено 1140 объединенных образцов ДНК из 4560 м2 саженцев, которые подверглись усилению ПЦР. Два фрагмента размером 195 б.п. и 259 б.п. были усилены для OsLCT1 и SPDTсоответственно (таблица2). В больши...

Watch this Scientific Journal Video about Identifying Mutations by High Resolution Melting in a TILLING Population of Rice at JoVE.com

Identifying Mutations by High Resolution Melting in a TILLING Population of Rice

В этой статье мы представляем протокол, который описывается как анализ плавления с высоким разрешением (HRM) на основе целевых индуцированных локальных поражений в геномах (TILLING). Этот метод использует изменения флуоресценции во время плавления дуплекса ДНК и подходит для высокой пропускной связи скрининга как вставки / удаления (Indel) и одной базы субстанции (SBS).

Выявление мутаций путем таяния высокого разрешения в TILLING населения риса

Target Induced Local Lesions In Genomes (TILLING) is a strategy of reverse genetics for the high-throughput screening of induced mutations. However, the ...

Было бы весьма полезно для размножения черты, которые технически трудно или дорого, чтобы быть определены, такие как устойчивость к болезням, содержание минералов. Это довольно простая, экономия и высокая пропускная способность. Для начала поместите четыре листа дисков в каждый колодец 96-хорошо ПЦР пластины.Добавьте в каждую колодец 50 миллилитров буферного раствора А. Заморозить тарелку в морозильной камере минус 80 градусов по Цельсию в течение 10 минут. Затем разморозить пластину при комнатной температуре.Инкубировать при 95 градусах по Цельсию в течение 10 минут. Добавьте 50 микролитров буфера B к каждой хорошо, и хорошо перемешать вихрем. Центрифуга пластины в течение одной минуты при 1500 раз г.Соберите супернатант в качестве ДНК для ПЦР. Во-первых, используйте супернатант ДНК от одного хорошо, как шаблон ПЦР для оптимизации температуры annealing. Добавьте реагенты и один микролитр супернатанта ДНК в каждый ПЦР хорошо.Поместите трубы ПЦР в тепловой блок, способный градиента, и отрегулируйте программу нагрева в соответствии с рукописью, чтобы определить оптимальную температуру для каждого фрагмента цели. Выполните электрофорез для продукта ПЦР на 1%agarose гели для изучения ампликонов. Определите оптимальную температуру анеаля, которая позволяет конкретное усиление фрагмента цели.Для проведения анализа HRM объедините реагенты, включая один микролитер 10-х раз флуоресцентного красителя и один микролитер супернатанта ДНК в каждом колодец HRM-совместимых пластин. В каждой пластине, включают один дикий тип родительского образца и один отрицательный контроль без ДНК. Добавьте каплю минерального масла в каждую колодец, чтобы предотвратить испарение.Затем загерметив пластину клейкой пленкой и центрифугой по 1000 раз г в течение одной минуты. Запустите ПЦР с использованием оптимизированной температуры аннеаля. Теперь снимите клейкую пленку с пластины и вставьте пластину в машину HRM.В программном обеспечении выберите New Run из меню файла или нажмите кнопку Run в верхней части экрана. Укажите начальную и окончание температуры расплава от 55 до 95 градусов по Цельсию. Выберите образцы для анализа плавления с высоким разрешением и исключите образцы, аналогичные отрицательному контролю.Нормализация кривых плавления, чтобы иметь то же начало и окончание флуоресценции. Визуально подтвердите, что курсоры более низкой минимальной и низкой максимальной температуры находятся в области кривых. Держите дельту F, разницу флуоресценции, уровень по умолчанию настройки 05.Из списка выбора Стандартов выберите общий по сравнению с вариантом и выберите нормальную чувствительность. Выберите H12 для использования дикого типа в качестве элементов управления. Образцы с значением дельты F, более 05, считаются содержат мутантное растение.Затем, используя метод CTAB, извлечь ДНК из каждого из четырех растений из мутантного бассейна с кривой плавления значительно отличается от дикого типа. После количественной оценки с помощью спектрофотометра, отрегулируйте ДНК с NanoDrop 2000 до окончательной концентрации примерно 25 нанограмм на микролитр. Добавьте 0,4 микролитров праймеров ПЦР в образец ДНК в трубах ПЦР, поместите их в тепловой циклер и отрегулируйте программу для усиления фрагмента цели.Затем отправьте продукты PCR компании для секвенирования. После секвенирования Sanger сравните молекулярное поражение, сравнив последовательности между растением M2 и диким типом. В этом исследовании, HRM сканирования и анализа саженцев M2 для мутаций в OsLCT1 или SPDT генов показали, что большинство образцов были плавления кривых не значительно отличается от дикого типа с дельтой F менее 05.Мутанты показали значительно разные кривые HRM с дельтой Fs больше 05 при температуре от 90 до 92 градусов по Цельсию и от 81,5 до 83,5 градусов по Цельсию, соответственно. Тип мутации и положение на генах из 4 560 M2 саженцев были подтверждены секвенированием хроматограмм. Выявлен гетерозиготный участок с мутацией от G до A на 4, 304 базовых парах OsLCT1.Одна вставка нуклеотида А появилась на 4, 240 базовых парах OsLCT1, а удаление тринуклеотида TTC наблюдалось в положении 5, 948 до 5, 950 базовых пар SPDT. Я оптимизирую ПЦР до анализа HRM. Краситель в гель немного вредно.Не забудьте надеть перчатки при запуске геля.

Research

JoVE Journal

Genetics

Parallel Measurement of Circadian Clock Gene Expression and Hormone Secretion in Human Primary Cell Cultures

Параллельное измерение циркадных часов экспрессии генов и гормональную секрецией человека первичных клеточных культур

Circadian clocks are functional in all light-sensitive organisms, allowing for an adaptation to the external world by anticipating daily environmental ...

High-resolution Melting PCR for Complement Receptor 1 Length Polymorphism Genotyping: An Innovative Tool for Alzheimer's Disease Gene Susceptibility Assessment

Плазменная ПЦР с высоким разрешением для рецептора комплемента 1 Полиморфизм длины генотипа Генотипирование: инновационный инструмент для оценки чувствительности генов к болезням Альцгеймера

Complement receptor 1 (CR1), a transmembrane glycoprotein that plays a key role in the innate immune system, is expressed on many cell types, but ...

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

Высокое разрешение флуоресцентные в Situ гибридизация дрозофилы эмбрионов и тканей с помощью усиления сигнала Tyramide

In our efforts to determine the patterns of expression and subcellular localization of Drosophila RNAs on a genome-wide basis, and in a variety of ...

G2-seq: A High Throughput Sequencing-based Technique for Identifying Late Replicating Regions of the Genome

G2-seq: Высокая пропускная способность на основе последовательности техника для выявления поздно репликации областей генома

Numerous techniques have been developed to follow the progress of DNA replication through the S phase of the cell cycle. Most of these techniques have ...

High-throughput Identification of Synergistic Drug Combinations by the Overlap2 Method

High-throughput Identification of Synergistic Drug Combinations by the Overlap2 Method

Высок объём идентификации наркотиков синергических сочетаний методом дублирования2

Although antimicrobial drugs have dramatically increased the lifespan and quality of life in the 20th century, antimicrobial resistance threatens our ...

Promoter Capture Hi-C: High-resolution, Genome-wide Profiling of Promoter Interactions

Промоутер захват Привет C: С высоким разрешением, геном общесистемной Профилирование взаимодействия промоутер

The three-dimensional organization of the genome is linked to its function. For example, regulatory elements such as transcriptional enhancers control the ...

Differentiation, Maintenance, and Analysis of Human Retinal Pigment Epithelium Cells: A Disease-in-a-dish Model for BEST1 Mutations

Differentiation, Maintenance, and Analysis of Human Retinal Pigment Epithelium Cells: A Disease-in-a-dish Model for BEST1 Mutations

Дифференциация, техническое обслуживание и анализ клеток человека сетчатки пигментного эпителия: модель болезни в блюдо для BEST1 перегласовок

Although over 200 genetic mutations in the human BEST1 gene have been identified and linked to retinal degenerative diseases, the pathological mechanisms ...

High-Resolution Comparison of Bacterial Conjugation Frequencies

Высоким разрешением сравнение частот бактериальных спряжение

Bacterial conjugation is an important step in the horizontal transfer of antibiotic resistance genes via a conjugative DNA element. In-depth comparisons ...

Designing Automated, High-throughput, Continuous Cell Growth Experiments Using eVOLVER

Проектирование автоматизированных, высокая пропускная способность, непрерывный рост клеток эксперименты с использованием Эволюционивер

Continuous culture methods enable cells to be grown under quantitatively controlled environmental conditions, and are thus broadly useful for measuring ...