Name: performing human skeletal muscle xenografts in immunodeficient mice
Uploaded: 2019-09-16T14:30:00
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这项工作得到了肌炎协会和彼得·巴克基金会的支持。我们要感谢张元凡博士分享她在异种移植外科技术方面的专长和培训。

约翰霍普金斯大学机构审查委员会（IRB）批准了所有人类研究标本的使用，以保护参与者的权利和福利。所有动物实验都根据国家卫生研究院（NIH）《实验室动物护理和使用指南》获得约翰霍普金斯大学机构动物护理和使用委员会（IACUC）的批准。雄性NOD-Rag1nullIL2r®（NRG）宿主小鼠（8-12周大）用于进行异种移植实验。这些小鼠被安置在通风架中，并带有...

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	<li>Wong, C. H., Siah, K. W., Lo, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+clinical+trial+success+rates+and+related+parameters.">Estimation of clinical trial success rates and related parameters.</a> Biostatistics. , 1-14 (2018).</li><li>Hay, M., Thomas, D. W., Craighead, J. L., Economides, C., Rosenthal, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+development+success+rates+for+investigational+drugs.">Clinical development success rates for investigational drugs.</a> Nature Biotechnology. 32, 40-51 (2014).</li><li>Perel, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+treatment+effects+between+animal+experiments+and+clinical+trials:+systematic+review.">Comparison of treatment effects between animal experiments and clinical trials: systematic review.</a> BMJ. 334, 1-6 (2007).</li><li>Rubio-Viqueira, B., Hidalgo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+in+vivo+xenograft+tumor+model+for+predicting+chemotherapeutic+drug+response+in+cancer+patients.">Direct in vivo xenograft tumor model for predicting chemotherapeutic drug response in cancer patients.</a> Clinical Pharmacology Therapeutics. 85, 217-221 (2009).</li><li>Roberts, K. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targetable+Kinase-Activating+Lesions+in+Ph-like+Acute+Lymphoblastic+Leukemia.">Targetable Kinase-Activating Lesions in Ph-like Acute Lymphoblastic Leukemia.</a> New England Journal of Medicine. 371, 1005-1015 (2014).</li><li>Kim, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GDF11+Controls+the+Timing+of+Progenitor+Cell+Competence+in+Developing+Retina.">GDF11 Controls the Timing of Progenitor Cell Competence in Developing Retina.</a> Science. 308, 1927-1930 (2005).</li><li>Sako, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+ligand+binding+functionality+of+the+extracellular+domain+of+activin+receptor+type+IIB.">Characterization of the ligand binding functionality of the extracellular domain of activin receptor type IIB.</a> Journal of Biological Chemisty. 285, 21037-21048 (2010).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+skeletal+muscle+xenograft+as+a+new+preclinical+model+for+muscle+disorders.">Human skeletal muscle xenograft as a new preclinical model for muscle disorders.</a> Human Molecular Genetics. 23, 3180-3188 (2014).</li><li>Gabellini, D., Green, M. R., Tupler, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inappropriate+Gene+Activation+in+FSHD+:+A+Repressor+Complex+Binds+a+Chromosomal+Repeat+Deleted+in+Dystrophic+Muscle.">Inappropriate Gene Activation in FSHD : A Repressor Complex Binds a Chromosomal Repeat Deleted in Dystrophic Muscle.</a> Cell. 110, 339-348 (2002).</li><li>Lemmers, R. J. L. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Unifying+Genetic+Model+for+Facioscapulohumeral+Muscular+Dystrophy.">A Unifying Genetic Model for Facioscapulohumeral Muscular Dystrophy.</a> Science. 329, 1650-1654 (2010).</li><li>Chen, J. C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morpholino-mediated+Knockdown+of+DUX4+Toward+Facioscapulohumeral+Muscular+Dystrophy+Therapeutics.">Morpholino-mediated Knockdown of DUX4 Toward Facioscapulohumeral Muscular Dystrophy Therapeutics.</a> Molecular Therapy. 24, 1405-1411 (2016).</li><li>Medical Research Council. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Aids to the investigation of the peripheral nervous system. , (1943).</li><li>Jones, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+Molecular+Anatomy+of+the+Human+Neuromuscular+Junction.">Cellular and Molecular Anatomy of the Human Neuromuscular Junction.</a> Cell Reports. 21, 2348-2356 (2017).</li></ol>

患者衍生的异种移植是模拟肌肉疾病和进行临床前研究的一种创新方法。此处描述的方法创建骨骼肌异种移植是快速、直接和可重现的。单方手术可在15至25分钟内进行，或以双边方式在30至40分钟内进行。双边异种移植可以提供额外的实验灵活性。例如，研究人员可以对一种异种移植物进行局部治疗，另一种作为对照。NRG小鼠在无病原体设施中工作时对手术部位感染具有抗药性;以我们的经验，执?...

据报道，所有进行临床试验的药物开发项目中，只有13.8%是成功的，并导致了1批准的疗法。虽然这个成功率高于先前报道的10.4%，但仍有重大改进的余地。提高临床试验成功率的一个方法是改进临床前研究中使用的实验室模型。美国食品和药物管理局（FDA）要求动物研究在第一阶段临床试验之前显示治疗效果和评估毒性。然而，动物研究和临床试验3之间的治疗结果往往有限。此外，临床前动物研究的需要可能是缺乏公认动物模型的疾病的治疗发展的不可逾越的障碍，而罕见或零星疾病往往就是这种情况。
模拟人类疾病的一种方法是将人体组织移植到免疫缺陷小鼠体内，以产生异种移植物。异种移植模型有三个关键优点：首先，它们可以概括人类疾病中存在的复杂遗传和表观遗传异常，这些异常可能永远无法在其他动物模型中重现。其次，如果患者样本可用，异种移植可用于模拟罕见或零星疾病。第三，异种移植物在一个完整的体内系统中对疾病进行建模。由于这些原因，我们假设治疗效果导致异种移植模型更有可能转化为在患者的试验。人类肿瘤异种移植已经成功地用于开发常见癌症的治疗方法，包括多发性骨髓瘤，以及针对个别患者的个性化治疗4、5、6、 7.
最近，异种移植物已经被用来开发人类肌肉疾病的模型8。在这个模型中，人类肌肉活检标本被移植到免疫缺陷NRG小鼠的后肢，形成异种移植物。移植的人类肌纤维死亡，但异种移植物中的人类肌肉干细胞随后膨胀并分化成新的人类肌纤维，重新填充移植的人类基础层。因此，这些异种移植物中再生的肌纤维完全是人，由小鼠宿主自发地重新血管化并内化。重要的是，移植到小鼠体内的肌肉萎缩症（FSHD）患者肌肉组织重述了人类疾病的主要特征，即DUX4转录因子8的表达。FSHD是由DUX4的过度表达引起的，在正常的肌肉组织中，DUX4在表观遗传上是沉默的9，10。在FSHD异种移植模型中，使用DUX4特异性形态诺治疗已被证明能够成功地抑制DUX4的表达和功能，并且可能是FSHD患者11的潜在治疗选择。这些结果表明，人类肌肉异种移植是模拟人类肌肉疾病和测试小鼠潜在疗法的新方法。在这里，我们详细介绍了在免疫缺陷小鼠中创建人类骨骼肌异种移植物的手术方法。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>100 mm x 15 mm Petri dish</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB0875712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Methylbutane</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>O3551-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 x 30 mm micro cover glass</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48393-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal Weighing Scale</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>SCL- 1015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic-Antimycotic Solution</td>
			<td>Corning, Cellgro</td>
			<td>30-004-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AutoClip System</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12020-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo Needle Holder</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12565-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chick embryo extract</td>
			<td>Accurate</td>
			<td>CE650TL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM1860 UV cryostat</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>CM1860UV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coplin staining jar</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>19-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection Pins</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S13976</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry Ice - pellet</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9584462</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embryonic Myosin antibody</td>
			<td>DSHB</td>
			<td>F1.652</td>
			<td>recommended concentration 1:10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>459836</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>GE Healthcare Life Sciences</td>
			<td>SH30071.01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiber-Lite MI-150</td>
			<td>Dolan-Jenner</td>
			<td>Mi-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11295-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-mouse IgG1, Alexa Fluor 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-21121</td>
			<td>recommended concentration 1:500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-mouse IgG2b, AlexaFluor 594</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-21145</td>
			<td>recommended concentration 1:500</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gum tragacanth</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G1128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hams F-10 Medium</td>
			<td>Corning</td>
			<td>10-070-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histoacryl Blue Topical Skin Adhesive</td>
			<td>Tissue seal</td>
			<td>TS1050044FP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human specific lamin A/C antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab40567</td>
			<td>recommended concentration 1:50-1:100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human specific spectrin antibody</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>NCLSPEC1</td>
			<td>recommended concentration 1:20-1:100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction Chamber</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>941444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Forceps</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>11066-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Irradiated Global 2018 (Uniprim 4100 ppm)</td>
			<td>Envigo</td>
			<td>TD.06596</td>
			<td>Antibiotic rodent diet to protect again respiratory infections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>MWI Veterinary Supply</td>
			<td>502017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimberly-Clark</td>
			<td>34155</td>
			<td>surgical wipes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mapleson E Breathing Circuit</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>921412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mobile Anesthesia Machine</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>901805</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse on Mouse Basic Kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>BMK-2202</td>
			<td>mouse IgG blocking reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nail Polish</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAIR Hair remover lotion/oil</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC0132811</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOD-Rag1null IL2rg null (NRG) mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>007799</td>
			<td>2 to 3 months old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O.C.T. Compound</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23-730-571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>OX USPEA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (phosphate buffered saline) buffer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>4870500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone Iodine Prep Solution</td>
			<td>Dynarex</td>
			<td>1415</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong&#8482; Gold Antifade Mountant</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P10144 (no DAPI); P36935 (with DAPI)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puralube Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl (carprofen) injectable</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>10000319</td>
			<td>surgical analgesic, administered subcutaneously at a dose of 5mg/kg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blades - #11</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>10011-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Handle - #3</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>10003-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Microscope</td>
			<td>Accu-scope</td>
			<td>3075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost Plus Microscope Slides</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>12-550-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture, Synthetic, Non-Absorbable, 30 inches long, CV-11 needle</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>VP-706-X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1ml Syringe (26 gauge, 3/8 inch needle)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>329412</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trimmer</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>CL9990-KIT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas Spring Scissors, 8.0 mm cutting edge</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>15009-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VaporGaurd Activated Charcoal Filter</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>931401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wound clips, 9 mm</td>
			<td>F.S.T</td>
			<td>12022-09</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

performing human skeletal muscle xenografts in immunodeficient mice

在动物研究中观察到的治疗效果往往不能在临床试验中重新概括。虽然这个问题是多方面的，但造成这种失败的原因之一是实验室模型使用不足。在传统实验室生物体中模拟复杂的人类疾病是具有挑战性的，但是这个问题可以通过研究人类异种移植来规避。我们在这里描述的手术方法允许创建人类骨骼肌异种移植物，可用于模拟肌肉疾病和进行临床前治疗测试。根据机构审查委员会（IRB）批准的协议，从患者身上获取骨骼肌标本，然后移植到NOD-Rag1空IL2rénull （NRG）宿主小鼠中。这些小鼠是移植研究的理想宿主，因为它们无法制造成熟的淋巴细胞，因此无法发展细胞介导和体液适应性免疫反应。宿主小鼠用肌胶麻醉，小鼠前体和外展性长肌被去除。然后，将一块人类肌肉放在空的骨骼隔间中，并缝合到直龙肌的近端和远端肌腱。异种移植的肌肉由小鼠宿主自发血管化并内化，从而产生强健再生的人类肌肉，可以作为临床前研究的模型。

正如张元凡等人所证明的，这种手术方案是一种直接的方法来产生人类骨骼肌异种移植物8。再生异种移植物自发地内化，并表现出功能收缩性。此外，从FSHD患者身上移植的肌肉异构体重述了在FSHD患者8中观察到的基因表达变化。
根据我们的经验，从对照患者标本中执行的8种异种移植中，大约7种将显示出成功的肌肉移植。成功的异种移植?...

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Performing Human Skeletal Muscle Xenografts in Immunodeficient Mice

在传统的实验室模型系统中，复杂的人类疾病对建模可能具有挑战性。在这里，我们描述了一种通过将人类骨骼肌活检移植到免疫缺陷小鼠中来模拟人类肌肉疾病的外科方法。

在免疫缺陷小鼠中表演人类骨骼肌异种移植物

Treatment effects observed in animal studies often fail to be recapitulated in clinical trials. While this problem is multifaceted, one reason for this ...

该协议是重要的，因为它可以用来创建人类骨骼肌异种移植，可用于建模肌肉疾病和进行临床前治疗测试。这种异种移植模型使研究人员能够研究人体体内的肌肉，以更好地了解人类肌肉细胞生物学，并开发稀有或后天肌肉疾病的新模型。获得人体肌肉活检后，将标本放在含有肌肉介质的100至15毫米培养皿中，并使用立体显微镜和手术剪刀去除剩余的筋膜或脂肪组织。将肌肉活检分解成大约七由三毫米的碎片，注意纤维在标本内纵向排列。接下来，将含有解剖肌肉的培养皿转移到冰上，将合成的、不可吸收的缝合线放在100乘15毫米的培养皿中，其中含有70%乙醇。在确认8至12周大的NOT-Rag-Gamma小鼠对脚趾捏没有反应后，对免疫缺陷动物的眼睛涂抹软膏，并使用修剪器将头部从脚踝到膝盖的头饰覆盖。然后，在暴露的皮肤涂抹脱毛霜一分钟，然后用波维酮碘溶液和70%乙醇对手术地点进行消毒。要移植人体组织，首先将胶带下到小鼠腿部，并在源自侧肌腱的头骨前进行直切口，并在膝盖以下终止。使用钝解剖将皮肤与肌肉组织分离，并使用剪刀通过前肌的表皮切口进行小于0.5毫米的切口，从肌腱开始，到膝盖结束。切下头骨的侧肌腱后，用虹膜钳抓住肌腱，将肌肉拉到膝盖上。接下来，切开外向数字耳长的外向肌腱，将拉伸器数字肌腱向上拉向膝盖。一旦佩罗努斯长肌的近侧肌腱可见，用剪刀去除外侧数字耳长和头骨前部。使用带 PBS 的手术擦拭来施加轻微压力，直到达到同部性，并通过近端长牙肌腱缝合线，在肌腱的两侧留下一块大约 1.5 英寸的螺纹。使两手手术方结的上半部分不紧，形成一个圆圈，并放置一个异种移植到圆，拧紧循环，以确保移植组织。完成方结的另一半，将异种移植缝合到佩罗内乌斯长肌腱的近端肌腱上，并通过端骨长肌腱将缝合线线，以在端端肌腱上重复方结技术。当移植物的两端都固定好时，将皮肤拉过异种移植的肌肉，用手术胶水密封切口，并在胶水上放置两到三个手术钉。然后，将鼠标放在加热垫上的清洁笼中，进行监控，直至完全保持。手术后4至6个月，在异种收获前至少30分钟将装有200毫升2-甲基丁烷的盖杯放在一盒干冰中。当2甲基丁烷冷却后，确认对脚趾捏没有反应，用修剪剂和脱毛霜将前身的头骨从脚踝到膝盖的毛发去除。应通过皮肤观察将异种移植处在位的缝合线。用胶带固定腿部，并使用剪刀和虹膜钳打开异种移植上的皮肤，直到两个缝合线都被揭开。使用手术刀在异种移植体和头骨之间切割，以释放异种移植的一侧，然后再在佩罗努斯长肌和胃骨肌肉之间切割。切入远端缝合线下方，通过佩罗内乌斯长牙的远端肌腱，并使用虹膜钳抓住缝合线，将缝合线偏转到膝盖上，同时用剪刀将异种体切离底层肌肉组织。然后，用剪刀在近端缝合线上方切割，以去除异种和佩罗内斯长牙，并将收获的标本放在一小块纸板上。将组织固定到尽可能靠近缝合线，同时轻轻拉伸肌肉，以确保在捕捉冻结过程中保持纤维方向。当针脚牢固地固定到位时，将肌肉向上滑动针脚，使组织位于纸板的正上方，并在预冷却的 2 甲基丁烷中捕捉冻结异种移植物，以进行零下 80 摄氏度的存储。成功的异种移植表明，与人特异性抗体鉴定的人类异体体具有强大的再生。阳性胚胎胚胎米奥辛染色在一定比例的 myofibers 表明再生过程仍在进行中。相比之下，糟糕的手术技术或不足的标本可能会导致肌肉纤维再生不良。一名被诊断为特发性炎症性肌病的患者在4个月和6个月的收集中表现出适量的再生人类肌黄体，胚胎肌黄辛染色在6个月时持续。炎症细胞也存在于异种体中，如H和E染色所观察到的。在特发性炎症性肌病异种移植体中，个体肌纤维大小在4到6个月之间相似。在异种移植体内观察到的横截面面积大于 3，500 微米的稀有纤维，但在特发发性炎症性肌病活检中未观察到，这表明异种移植体中的一些肌纤维可以再生到与健康肌黄体相似的横截面区域。这个过程最重要的部分是在进行初始切口后识别脚踝的所有肌腱，并成功地切入表皮。异种移植器的功能能力可以通过酶隔离单个 myofibers 和测试钙瞬变或通过电刺激后执行唤起的强制测量来评估。

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Isolation and Quantitative Immunocytochemical Characterization of Primary Myogenic Cells and Fibroblasts from Human Skeletal Muscle

从人类骨骼肌成肌原细胞和成纤维细胞的分离和定量免疫细胞化学表征

The repair and regeneration of skeletal muscle requires the action of satellite cells, which are the resident muscle stem cells. These can be isolated ...

科研

发育生物学

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

斑马鱼幼虫骨骼肌诚信与伊文思蓝分析

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Using Isolated Mitochondria from Minimal Quantities of Mouse Skeletal Muscle for High throughput Microplate Respiratory Measurements

使用分离线粒体从小鼠骨骼肌进行高通量微孔板呼吸测量最小数量

Skeletal muscle mitochondria play a specific role in many disease pathologies. As such, the measurement of oxygen consumption as an indicator of ...

Induction of Acute Skeletal Muscle Regeneration by Cardiotoxin Injection

通过注射心脏毒素急性骨骼肌再生的诱导

Skeletal muscle regeneration is a physiological process that occurs in adult skeletal muscles in response to injury or disease. Acute injury-induced ...

Evaluation of Injury-induced Senescence and In Vivo Reprogramming in the Skeletal Muscle

Evaluation of Injury-induced Senescence and In Vivo Reprogramming in the Skeletal Muscle

骨骼肌损伤诱导衰老和体内重编程的评价

Cellular senescence is a stress response that is characterized by a stable cellular growth arrest, which is important for many physiological and ...

Application of Chronic Stimulation to Study Contractile Activity-induced Rat Skeletal Muscle Phenotypic Adaptations

慢性刺激在收缩活动性大鼠骨骼肌表型适应性研究中的应用

Skeletal muscle is a highly adaptable tissue, as its biochemical and physiological properties are greatly altered in response to chronic exercise. To ...

Identification of Skeletal Muscle Satellite Cells by Immunofluorescence with Pax7 and Laminin Antibodies

Pax7 和层粘连蛋白抗体免疫荧光法鉴定骨骼肌卫星细胞

Immunofluorescence is an effective method that helps to identify different cell types on tissue sections. In order to study the desired cell population, ...

In Vivo Imaging of Muscle-tendon Morphogenesis in Drosophila Pupae

In Vivo Imaging of Muscle-tendon Morphogenesis in Drosophila Pupae

在体内果蝇蛹肌肌腱形态的影像学研究

Muscles together with tendons and the skeleton enable animals including humans to move their body parts. Muscle morphogenesis is highly conserved from ...

Isolation, Culture, Characterization, and Differentiation of Human Muscle Progenitor Cells from the Skeletal Muscle Biopsy Procedure

从骨骼肌活检程序分离、培养、表征和分化人类肌肉祖细胞

The use of primary human tissue and cells is ideal for the investigation of biological and physiological processes such as the skeletal muscle ...

Isolation and Differentiation of Primary Myoblasts from Mouse Skeletal Muscle Explants

小鼠骨骼肌肉外泄原发性肌基器的分离和分化

Primary myoblasts are undifferentiated proliferating precursors of skeletal muscle. They can be cultured and studied as muscle precursors or induced to ...