Name: an antibody feeding approach to study glutamate receptor trafficking in dissociated primary hippocampal cultures
Uploaded: 2019-08-02T15:00:00
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우리는 Nikon A1 공초점 현미경의 사용과 실험 계획 및 분석에 있는 그들의 도움을 위한 고급 현미경 검사법에 대한 노스웨스턴 센터에 감사드립니다. 이 연구는 NIGMS (T32GM008061) (A. M. C.) 및 NIA (R00AG041225) 및 뇌 행동 연구 재단 (#24133)에서 NARSAD 젊은 조사자 보조금에 의해 지원되었다 (A. S. -C.).

해마 1 차 적인 문화 준비에 관련 된 작업 검토 하 고 노스 웨스턴 대학 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 (프로토콜 #IS00001151).
1. 라벨링 전 준비
<ol><li>
준비 및 기본 해 마 문화의 유지 보수
	<ol>
<li>폴리-D-리신 코팅(0.1 mg/mL) 18mm 커버 안경에 도금된 150,000개의 세포 밀도로 1차 해마 배양을 준비합니다. 해리 된 신경 배양 준비를위한 우수한 가이드는<sup class="x...

<ol>
	<li>Enns, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+protein+trafficking+in+the+secretory+and+endocytic+pathways.">Overview of protein trafficking in the secretory and endocytic pathways.</a> Current Protocols in Cell Biology. , (2001).</li><li>Bedford, F. K., Binder, M. D., Hirokawa, N., Windhorst, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Encyclopedia of Neuroscience. , 3385-3389 (2009).</li><li>Diering, G. H., Huganir, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+AMPA+Receptor+Code+of+Synaptic+Plasticity.">The AMPA Receptor Code of Synaptic Plasticity.</a> Neuron. 100 (2), 314-329 (2018).</li><li>Lussier, M. P., Sanz-Clemente, A., Roche, K. 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L., Moukhles, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+Cell-surface+Expression+and+Endocytic+Rate+of+Proteins+in+Primary+Astrocyte+Cultures+Using+Biotinylation.">Determining Cell-surface Expression and Endocytic Rate of Proteins in Primary Astrocyte Cultures Using Biotinylation.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), (2017).</li><li>Bermejo, M. K., Milenkovic, M., Salahpour, A., Ramsey, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+Synaptic+Plasma+Membrane+and+Postsynaptic+Density+Proteins+Using+a+Discontinuous+Sucrose+Gradient.">Preparation of Synaptic Plasma Membrane and Postsynaptic Density Proteins Using a Discontinuous Sucrose Gradient.</a> Journal of Visualized Experiments. 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세포와 그 환경 사이의 상호 작용 (예를 들어, 다른 세포와의 통신, 다른 자극에 대한 반응 등),은 세포 표면에서 수용체의 올바른 발현에 크게 의존합니다. 표면 발현 수용체 함량의 신속하고 미세 조정된 조절은 끊임없이 변화하는 환경에 대한 적절한 세포 반응을 가능하게 합니다. 뉴런의 경우, 합성적으로 발현된 수용체의 수, 국소화 및 소단위 조성의 변화는 시냅스 통신, 시냅스 가소성, 시냅?...

세포는 특정 세포 국소화에 단백질을 동원하고 그들의 기능에 엄격한 spatiotemporal 규정을발휘하기 위하여 인신 매매의 적극적인 프로세스를 이용합니다 1. 이 과정은 다른 환경 자극에 세포 응답 수용 체 활성화에 의해 트리거 된 세포 내 캐스케이드에 의존 으로, 막 전 수용 체에 대 한 특히 중요 하다. 세포는 수용체 세포 인신 매매 조절을 통해 세포 표면에서 발현되는 수용체의 밀도, 국소화 및소단위 조성을 변경함으로써 이러한 반응을 수정할 수 있다 2. 플라즈마 막에 새로 합성 된 수용체의 삽입, 내분비증 및 기존 수용체의 재활용은 표면 발현 수용체의 순 풀을 결정하는 인신 매매 과정의 예2. 많은 분자 기계장치는 단백질 인산화, 유비퀴틴화, 또는 palmitoylation 2와 같은 단백질 단백질 상호 작용 및번역 후 수정을 포함하여 단백질 인신 매매를 통제하기 위하여 협력합니다.
수용체 인신 매매의 조절은 고도로 전문화된 구조물을 가진 강하게 편광된 세포에서 특히 요구됩니다. 패러다임의 예는 글루타메이트 수용체(GluRs)의 규제된 인신매매에 의한 뉴런 기능의 조절이다3,4. 조미료, 주요 흥분 성의 신경 전달 물질, 바인딩 및 시 냅 스 신경 전달 및 시 냅 스 가소성 등 기본적인 생리 신경 기능을 제어 하는 표면 표현 된 GluRs를 활성화. 변경된 GluR 인신 매매가 신경 발달 장애에서 신경 퇴행성 질환에 이르기까지 광범위한 신경 병증에서 관찰되었다는 사실은이 과정의 중요성을강조5. 따라서, GluR 인신 매매를 제어하는 분자 사건을 이해하는 것은 연구의 많은 분야에서 관심입니다.
이 프로토콜에서, 항체 공급 기반 방법은 1 차적인 해마 뉴런에서 표면 발현 글루스의 수준을 정량화하고 관찰된 순 표면 발현에서 내재화 및 재활용의 변화가 어떻게 초래되는지 평가하기 위해 사용된다. 특정 돌연변이를 품고 있는 외인성 수용체의 약리학 및/또는 과발현의 사용은 이 프로토콜이 다른 환경 자극에 근본적인 신경 적응을 기초로 하는 분자 기계장치를 공부하기 위한 특히 강력한 접근을 만듭니다. 이 프로토콜의 유용성의 마지막 예는 환경의 다단계 변화(예: 질병 모델)가 이러한 모델의 표면 발현 검사를 통해 GluR 인신 매매에 미치는 영향을 연구하는 것입니다.
특정 한 예를 사용 하 여, 그것은 처음에 생리 적 시 냅 스 자극을 모방 하는 약리학 조작 을 입증 [화학 LTP (cLTP)] 내 인 성 GluA1 소부의 표면 발현을 증가 하는 글러스 (AMPARs)의 6. NMDA 형 글루어 (NMDARs)의 GluN2B 하위 단위의 과발광 인광 모방 형태의 인신 매매는 또한이 프로토콜이 특정 번역 후 인신 매매의 규제를 연구하는 데 사용할 수있는 방법을 예시하기 위해 분석됩니다. 수정. 이러한 특정 예가 사용되지만, 이 프로토콜은 항원 세포 외 도메인을 소유한 다른 GluRs 및 기타 수용체 및 단백질에 쉽게 적용될 수 있다. 세포외 도메인에 사용할 수 있는 항체가 없는 경우, 세포외 에피토프 태그(예를 들어, 플래그-, Myc-, GFP 태그 등)의 과발현단백질은 단백질 라벨링을 지원할 수 있다.
현재 프로토콜은 특정 GluR 아류형 밀도를 정량화하고 특정 항체를 사용하여 트래피킹을 위한 지침을 제공합니다. 이 프로토콜은 1) 총 GluR 표면 발현, 2) GluR 내재화 및 3) GluR 재활용을 연구하는 데 이용될 수 있다. 각 과정을 개별적으로 연구하려면 섹션 1과 2로 시작하여 섹션 3, 4 또는 5를 계속하는 것이 좋습니다. 모든 경우에 6과 8절(그림1)으로 마칩니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>18 mm dia. #1.5 thick coverglasses</td>
			<td>Neuvitro</td>
			<td>GG181.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 555-conjugated goat anti-mouse secondary</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A21424</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 555-conjugated goat anti-rabbit secondary</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A21429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 647-conjugated goat anti-mouse secondary</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A21236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 647-conjugated goat anti-rabbit secondary</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A21245</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17504044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C7902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning Costar Flat Bottom Cell Culture Plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dynasore</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2897</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>0219</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-rabbit Fab fragments</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>SAB3700970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H7006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P9541</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7513</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11668019</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-GluA1 antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MAB2263</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S6546</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal Media</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NGS</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Ab7481</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bemis</td>
			<td>PM999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pelco BioWave</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>36500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PFA</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>43368</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Picrotoxin</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>1128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-D-lysine hydrobromide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold Antifade Mountant</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>P36934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-GFP antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A11122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-PSD-95 antibody</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>2507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Strychnine</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>2785</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S0389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost plus microscope slides</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>12-550-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>X100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TTX</td>
			<td>Tocris</td>
			<td>1078</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an antibody feeding approach to study glutamate receptor trafficking in dissociated primary hippocampal cultures

외부 자극에 대한 세포 반응은 주어진 순간에 세포 표면에서 발현되는 수용체 세트에 크게 의존합니다. 따라서, 표면 발현 수용체의 집단은 지속적으로 적응하고 엄격한 조절 메커니즘에 따라 달라질 수 있다. 생물학에서 가장 많이 연구된 인신매매 사건 중 하나인 패러다임의 예는 글루타메이트 수용체(GluRs)의 시냅스 발현을 조절하는 것이다. GluRs는 중추 신경계에서 흥분성의 신경 전달의 대부분을 중재하고 시냅스 및 뉴런 수준 (예를 들어, 시냅스 가소성)에서 생리 적 활성 의존적 인 기능 및 구조적 변화를 제어합니다. 표면 표현 GluRs의 수, 위치 및 소단위 조성에 있는 수정은 신경 기능에 깊이 영향을 미치고, 사실, 이 요인에 있는 변경은 다른 신경병증과 연관됩니다. 여기에 제시된 것은 해리된 해마 1차 뉴런에서 GluR 인신매매를 연구하는 방법이다. "항체 공급" 접근법은 표면 및 내부 막에서 발현된 GluR 집단을 차별화하기 위해 사용됩니다. 살아있는 세포에 표면 수용체를 표지하고 수용체 내균증 및 / 또는 재활용을 허용하기 위해 다른 시간에 고정함으로써, 이러한 인신 매매 과정을 평가하고 선택적으로 연구 할 수 있습니다. 이것은 GluR 인신 매매에 영향을 미치는 자극 및 분자 메커니즘에 대 한 귀중 한 정보를 얻기 위해 약리학 접근 또는 변경 된 수용 체의 과발현과 함께에서 사용할 수 있는 다양 한 프로토콜. 유사하게, 다른 수용체 또는 표면 발현 단백질을 연구하기 위해 용이하게 적응될 수 있다.

글루타메이트 수용체 인신 매매를 연구하는 이 프로토콜은 세포 표면에서 발현되는 수용체와 내부 막에서 발현되는 수용체의 차동 라벨링에 기초한다. 분리는 막 투과 전후에 수용체를 표지하고, 동일한 원발성 항체를 사용하지만, 이차 항체를 다른 형광부로 공액화함으로써 달성된다. 프로토콜을 포함하는 선택적 단계에 의해 설명된 바와 같이, 이것은 내재화 및 재활?...

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An Antibody Feeding Approach to Study Glutamate Receptor Trafficking in Dissociated Primary Hippocampal Cultures

이 문서는 조미료 수용 체를 연구 하는 방법을 제시 (GluR) 해리 된 기본 해 마 문화에서 인신 매매. 약리학적 접근법과 함께 내인성 또는 과발현 수용체를 라벨링하는 항체 공급 접근법을 사용하여, 이 방법은 조절하여 GluR 표면 발현을 조절하는 분자 메커니즘의 식별을 허용합니다. 내재화 또는 재활용 프로세스.

해리 된 기본 해 마 문화에서 조미료 수용 체 인신 매매를 연구 하는 항 체 먹이 접근

Cellular responses to external stimuli heavily rely on the set of receptors expressed at the cell surface at a given moment. Accordingly, the population ...

외부 자극에 대한 세포 반응은 주어진 순간에 세포 표면에 발현되는 단백질 세트에 크게 의존합니다. 따라서, 이들 단백질의 수, 서브세포 국소화 및 서브유닛 조성물은 동적으로 조절된다. 여기서, 우리는 내재화 및 재활용이 재개되는 한, 세포 배양에서 표면 발현 수용체의 수준을 정량화하기 위해 항체 공급 접근법을 사용할 것입니다.이것은 표면 표현 단백질의 규칙의 기계론적인 정보를 제공하는 매우 다재다능한 프로토콜입니다. 우리의 예에서, 우리는 1 차적인 해마 뉴런에 있는 글루타민 수용체를 공부할 것입니다. 이 프로토콜은 항문 외 세포 외 에피토프를 소유하는 모든 단백질에 적응할 수 있고, 항체를 사용할 수 없는 경우에, 태그된 구조물의 transvection는 특정 돌연변이를 표지하고 공부하는 둘 다유용할 수 있습니다.우리의 예에서, 우리는 내인성 GluA1에 대하여 항체를 사용하고, 이 절차를 시작하기 B.To glu12를 태그하고, 커버 전표 세포 측을 파라핀 필름 커버 트레이로 옮기고, 시약을 저장하고, 조작을 용이하게 합니다. 인큐베이션 및 세척 단계를 위해 조건부 미디어를 섭씨 37도에서 저장하고 유지관리합니다. 조건부 매체, 실온에서 15분 동안 희석된 1차 항체로 세포를 배양한다.그 후, 진공 파이펫을 사용하여 미디어를 포함하는 항체를 조심스럽게 흡인시키고, 조건부 된 매체로 세포를 세 번 세척한다. 세포내 수용체 발현과 세포 내 수용체 발현을 연구하는 경우 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 이 단계 후 paraformaldehyde로 세포를 수정합니다. 항체 없이 조절된 매체에서 세포를 유지하고, 내산화를 허용하기 위해 섭씨 37도에서 인큐베이터로 돌려보라고 한다.내재화 프로세스를 공부하는 경우 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 이 단계 후 paraformaldehyde로 세포를 수정합니다. 내산화되지 않은 표면 발현 수용체에 부착된 1차 항체상의 에피토프를 차단하기 위해, 조건부 에서 희석된 Fab 안티-IgG 항체 단편을 사용하여 세포를 인큐베이션하여 실온에서 20분 동안 한다. 그 후, 조절된 매체로 세포를 세 번 씻는다.세척된 우물을 80마이크로몰러 Dynasore가 포함된 조건부 매체로 배양하여 섭씨 37도에 내부화된 수용체의 재활용을 허용합니다. 라이브 셀에 대한 수정을 완료 한 후 PBS 플러스로 한 번 세포를 씻으시다. 세포에 PBS에 4%의 파라포름알데히드와 4%의 자당의 용액을 추가하고, 세포를 고치기 위해 실온에서 연기 후드에 인큐베이션을 7~8분 간 배양한다.그런 다음 일반 PBS로 셀을 세 번 씻으시면 됩니다. PBS에 10%의 일반 염소 세럼의 용액을 세포에 추가하고 실온에서 30분 동안 배양하여 비특이적 결합 부위를 차단합니다. 다음으로, 1시간 동안 실온에서 PBS에서 3%NGS로 희석된 형광 태그이차항체를 사용하여 세포를 배양하여 1차 항체 라벨 수용체에 라벨을 부착한다.그 후 PBS로 셀을 세 번 씻으시면 됩니다. 세포내 수용체에 라벨을 붙이려면 PBS에서 0.25%의 TritonX용액을 추가하고 실온에서 5~10분 동안 배양하여 세포를 침투합니다. 그런 다음 실온에서 10%NGS로 30분 동안 차단합니다.표면대 총체를 연구하는 경우 이전에 사용한 동일한 1차 항체로 세포를 배양하고, PBS에서 3%NGS로 희석하여 1시간 동안 실온에서 세포내 수용체에 라벨을 부착합니다. 다음으로, PBS로 세포를 세 번 씻는다. 두 번째 형광 태그 이차 항체를 가진 라벨, PBS에서 3%NGS에 희석, 1 시간 동안 실온에서.이 후에 는 PBS로 세포를 세 번 씻는다. 먼저 커버 슬립, 셀 사이드를 12~15마이크로리터에 배치하여 셀을 장착합니다. 그런 다음 적절한 공초점 현미경으로 세포를 이미지화하고 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 세포를 분석합니다.글루타민산 수용체 인신 매매를 연구하는 이 프로토콜은 수용체의 차동 라벨링에 기초하여, 세포 표면에 표현되고, 내부 막에서 발현된 것. 공초점 심상을 습득한 후, 형광 신호는 화학 LTP에 따라 세포내 집단에 비해 표면 발현의 증가를 쉽게 정량화할 수 있다. PSD-95에 대한 신호는 비과성 세포에서 얻어질 수 없으며, 플라즈마 멤브레인의 무결성을 입증할 수 있다.이는 표면 GluA1에 대해 얻은 신호가 실제로 표면 발현 수용체에 해당한다는 것을 나타낸다. 중요한 것은, 내재화된 GluA1에 대한 최소한의 신호는 비과구화 조건하에서 관찰될 수 있으며, 이는 모든 표면 에피토프가 항체 라벨링의 초기 라운드에 의해 점유되고 있음을 보여준다. 내면화 된 수용체는 다음 식별됩니다.이 예는 S1480에서 GluN2B 인산화가 수용체 내산화를 촉진한다는 것을 강조합니다. 인산 돌연변이 S1480E는 야생형 수용체에 비해 내화비가 훨씬 더 높은 것으로 나타났다. 예상대로, 대조군 내산화 수용체에 대한 신호는 얻어지지 않습니다.다음으로, 재활용 수용체와 내부 수용체가 확인됩니다. 생성된 재활용 비율은 GluN2B S1480E가 NMDAR 재활용에 영향을 미치지 않는다는 것을 보여줍니다. 컨트롤에서, 팹 차단이 없는 경우, 표면 발현 GluN2B에 대해 강한 신호를 관찰할 수 있다.이러한 신호는 Fab 처리 배양에서 사라지며, 차단 프로토콜이 표면 발현 에피토프를 완전히 차단하기에 충분하며, 재활용 후 관찰된 표면 신호가 실제로 혈장 막에 다시 인신매매된 수용체에 해당한다는 것을 입증한다. 현재 프로토콜은 표면 발현 단백질의 조절을 연구하는 데 사용할 수있는 방법 중 하나일 뿐입니다. 다른 방법은 여기에서 얻은 데이터를 확장하거나 확인하기 위해 취할 수 있습니다.그(것)들은 생화확적인 방법, biotinylation로, 생활 화상 진찰 기술, 또는 전기 생리학 또는 칼슘 화상 진찰 같이 기능적인 접근으로 포함합니다. 우리는 PFA를 사용하여 수용체의 국소화를 동결, 그러나 PFA는 알려진 발암 물질, 그래서 연기 후드에서 PFA를 사용하여 단계를 수행하는 것이 중요합니다, 적절한 PPE를 착용하면서.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Organotypic Hippocampal Slice Cultures

Organotypic Hippocampal 슬라이스 문화

The hippocampus, a component of the limbic system, plays important roles in long-term memory and spatial navigation 1. Hippocampal neurons can modify the ...

연구

신경과학

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

글루타민산 염과 GABA의 빠른 마이크로 이온 도입 : 시냅틱 통합을 조사하는 유용한 도구

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

Calcium Phosphate Transfection of Primary Hippocampal Neurons

차 해마 신경 세포의 칼슘 인산염 형질

Calcium phosphate precipitation is a convenient and economical method for transfection of cultured cells. With optimization, it is possible to use this ...

Membrane Potential Dye Imaging of Ventromedial Hypothalamus Neurons From Adult Mice to Study Glucose Sensing

막 성인 쥐에서 Ventromedial 시상 하부 뉴런의 잠재적 인 염료 이미징은 포도당 감지를 연​​구하는

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with ...

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

Brain Slice Biotinylation: An Ex Vivo Approach to Measure Region-specific Plasma Membrane Protein Trafficking in Adult Neurons

뇌 슬라이스 바이오 티 닐화 :<em&gt; 전의 VIVO</em성인 뉴런에서 지역 고유의 플라즈마 막 단백질 인신 매매를 측정하는&gt; 접근

Regulated endocytic trafficking is the central mechanism facilitating a variety of neuromodulatory events, by dynamically controlling receptor, ion ...

Using an &#945;-Bungarotoxin Binding Site Tag to Study GABA A Receptor Membrane Localization and Trafficking

Using an ÃƒÅ½Ã‚Â±-Bungarotoxin Binding Site Tag to Study GABA A Receptor Membrane Localization and Trafficking

GABA 수용체 막 현지화 및 인신 매매를 연구하는 α-Bungarotoxin 바인딩 사이트 태그를 사용하여

It is increasingly evident that neurotransmitter receptors, including ionotropic GABA A receptors (GABAAR), exhibit highly dynamic trafficking and cell ...

The Analysis of Neurovascular Remodeling in Entorhino-hippocampal Organotypic Slice Cultures

에서 신경 혈관 리모델링의 분석 Entorhino - 해마 Organotypic 슬라이스 문화

Ischemic brain injury is among the most common and devastating conditions compromising proper brain function and often leads to persisting functional ...

Stripe Assay to Study the Attractive or Repulsive Activity of a Protein Substrate Using Dissociated Hippocampal Neurons

스트라이프 분석은 해리 해마 신경 세포를 사용하여 단백질 기판의 매력적인 또는 혐오감 활동을 연구하는

Growing axons develop a highly motile structure at their tip, termed the growth cone. The growth cone contacts extracellular environmental cues to ...

Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

낮은 밀도 차 해마 신경 세포 문화

The ability to probe the structure and physiology of individual nerve cells in culture is crucial to the study of neurobiology, and allows for flexibility ...

Organotypic Hippocampal Slice Cultures As a Model to Study Neuroprotection and Invasiveness of Tumor Cells

Organotypic Hippocampal 슬라이스 문화 연구 Neuroprotection 및 종양 세포의 침입을 모델로

In organotypic hippocampal slice cultures (OHSC), the morphological and functional characteristics of both neurons and glial cells are well preserved. ...