Name: murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique
Uploaded: 2019-11-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Alle eksperimenter blev udført i henhold til retningslinjerne i den tyske lov om dyrevelfærd (TierSchG.) (AZ: 55.2-1-54-2532. Vet_02-80-2015).
1. dyre boliger
<ol><li>Til eksperimenter, brug mandlige C57BL/6 og BALB/c mus vejer 20-25 g med C57BL/6 mus som recipient dyrene og BALB/c mus som donordyrene.</li>
	<li>Købe dyr og hus i en barriere patogen-fri facilitet, i overensstemmelse med FELASA retningslinjer for sundhedsovervågning12.</li>
	<li>Opbevar musene i st...

<ol>
	<li>Rana, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+benefit+of+solid-organ+transplant+in+the+United+States.">Survival benefit of solid-organ transplant in the United States.</a> JAMA Surgery. 150 (3), 252-259 (2015).</li><li>Rana, A., Godfrey, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+in+Solid-Organ+Transplantation:+Success+and+Stagnation.">Outcomes in Solid-Organ Transplantation: Success and Stagnation.</a> Texas Heart Institute Journal. 46 (1), 75-76 (2019).</li><li>Meier-Kriesche, H. U., Schold, J. D., Srinivas, T. R., Kaplan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+improvement+in+renal+allograft+survival+despite+a+marked+decrease+in+acute+rejection+rates+over+the+most+recent+era.">Lack of improvement in renal allograft survival despite a marked decrease in acute rejection rates over the most recent era.</a> American Journal of Transplantation. 4 (3), 378-383 (2004).</li><li>Bagnasco, S. M., Kraus, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+arteritis+in+renal+allografts:+new+takes+on+an+old+lesion.">Intimal arteritis in renal allografts: new takes on an old lesion.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 20 (3), 343-347 (2015).</li><li>Hollis, I. B., Reed, B. N., Moranville, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medication+management+of+cardiac+allograft+vasculopathy+after+heart+transplantation.">Medication management of cardiac allograft vasculopathy after heart transplantation.</a> Pharmacotherapy. 35 (5), 489-501 (2015).</li><li>Verleden, G. M., Raghu, G., Meyer, K. C., Glanville, A. R., Corris, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+classification+system+for+chronic+lung+allograft+dysfunction.">A new classification system for chronic lung allograft dysfunction.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (2), 127-133 (2014).</li><li>Ramzy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+review.">Cardiac allograft vasculopathy: a review.</a> Canadian Journal of Surgery. 48 (4), 319-327 (2005).</li><li>Skoric, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+diagnosis,+therapy,+and+prognosis.">Cardiac allograft vasculopathy: diagnosis, therapy, and prognosis.</a> Croatian Medical Journal. 55 (6), 562-576 (2014).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+Sleeve+Technique+in+a+Mouse+Model+of+Aortic+Transplantation+-+An+Instructional+Video.">Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video.</a> Journal of Visualized Experiments. (128), (2017).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+transplant+arteriosclerosis:+role+of+intercellular+adhesion+molecule-1.">Mouse model of transplant arteriosclerosis: role of intercellular adhesion molecule-1.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 20 (2), 343-352 (2000).</li><li>M&#228;hler Convenor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+mouse,+rat,+hamster,+guinea+pig+and+rabbit+colonies+in+breeding+and+experimental+units.">FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units.</a> Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+p38+MAPK+inhibits+chronic+allograft+vasculopathy.">Blockade of p38 MAPK inhibits chronic allograft vasculopathy.</a> Transplantation. 85 (2), 293-297 (2008).</li><li>Thomas, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SDF-1/CXCR4/CXCR7+is+pivotal+for+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+chronic+allograft+vasculopathy.">SDF-1/CXCR4/CXCR7 is pivotal for vascular smooth muscle cell proliferation and chronic allograft vasculopathy.</a> Transplant International. 28 (12), 1426-1435 (2015).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilirubin:+a+natural+inhibitor+of+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation.">Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation.</a> Circulation. 112 (7), 1030-1039 (2005).</li><li>Segura, A. M., Buja, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+complex+multifactorial+sequela+of+heart+transplantation.">Cardiac allograft vasculopathy: a complex multifactorial sequela of heart transplantation.</a> Texas Heart Institute Journal. 40 (4), 400-402 (2013).</li><li>McDaid, J., Scott, C. J., Kissenpfennig, A., Chen, H., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+animal+models+in+developing+immunosuppressive+agents.">The utility of animal models in developing immunosuppressive agents.</a> European Journal of Pharmacology. 759, 295-302 (2015).</li><li>Shi, C., Russell, M. E., Bianchi, C., Newell, J. B., Haber, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+accelerated+transplant+arteriosclerosis.">Murine model of accelerated transplant arteriosclerosis.</a> Circulation Research. 75 (2), 199-207 (1994).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+minor+histocompatibility+antigens+in+the+development+of+allograft+arteriosclerosis.">Importance of minor histocompatibility antigens in the development of allograft arteriosclerosis.</a> Clinical Immunology and Immunopathology. 80 (3 Pt 1), 273-277 (1996).</li><li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+heterotopic+vascularized+pancreas+transplantation+in+mice+to+assess+ischemia+reperfusion+injury+and+graft+pancreatitis.">A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis.</a> Surgery. 141 (5), 682-689 (2007).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Nakao, A., Ogino, Y., Tahara, K., Uchida, H., Kobayashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+intestinal+transplantation+using+the+cuff+method+in+rats:+a+histopathological+evaluation+of+the+anastomosis.">Orthotopic intestinal transplantation using the cuff method in rats: a histopathological evaluation of the anastomosis.</a> Microsurgery. 21 (1), 12-15 (2001).</li></ol>

Kronisk allograft vasculopati er den vigtigste årsag til forsinket transplantat tab efter solid organtransplantation af hjertet og sandsynlige nyre-og lunge allotransplantater8. Hidtil kan der ikke udvikles noget kausal terapeutisk regime for at forhindre dannelsen af CAV.
Den Patofysiologi af CAV er multifaktorisk og omfatter immunologiske og ikke-immunologiske aspekter16. Brugen af gnaver modeller til transplantation har været afgørende for ...

I løbet af de seneste seks årtier har solid organtransplantation udviklet sig fra en eksperimentel procedure til en standard for behandling af slutstadiet organsvigt1. På grund af forbedringen af antimikrobielle stoffer, kirurgiske teknikker og avancement i Immunsuppressive regimenter, den tidlige succesrate af solid organtransplantation er steget betydeligt i løbet af de seneste årtier2.
Men, langvarig transplantat overlevelsesrater er ikke væsentligt forbedret på samme måde3. Udviklingen af CAV er den vigtigste faktor, der begrænser langsigtet overlevelse4,5,6. Denne patologi er karakteriseret ved dannelsen af en koncentrisk neointimal lag bestående af glatte muskelceller, fører til progressiv indsnævring af fartøjet og på hinanden følgende malperfusion af det transplanterede solide organ. Hos hjerte transplantations modtagere kan der diagnosticeres CAV-læsioner hos op til 75% af patienterne 3 år efter transplantation7.
Den Patofysiologi af CAV er ikke fuldt forstået endnu. Det synes at være relateret til talrige immunologiske og ikke-immunologiske faktorer, fører til endotelskade med efterfølgende endotelal aktivering og dysfunktion8. Indtil videre findes der ingen kausal behandlingsmulighed for forebyggelse af CAV, idet det understreges, at der er behov for en reproducerbar smådyremodel for at studere CAV-dannelse og potentiel behandling.
Ved brug af murine aorta transplantations modeller kan CAV-lignende læsioner ses 4 uger efter transplantation. Disse læsioner består hovedsageligt af vaskulære glatte muskelceller, derved ligner den menneskelige patologi. På grund af en bred vifte af transgene og knock out mus, brugen af musemodeller i transplantations associerede patologier giver en unik mulighed for at identificere nye terapeutiske muligheder og forstå deres udvikling. På grund af den lille diameter af de transplanterede fartøjer dog, brugen af musemodeller er ofte forbundet med lange indlæringskurver og en indledende høj komplikation sats9. Med indførelsen af den ikke-sutur manchet teknik, kan denne mest udfordrende del af operationen lettes og diameteren af anastomose holdes konstant10,11.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balb-c Mice (H2-d)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 028</td>
			<td>Donor animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar cautery system</td>
			<td>ERBE</td>
			<td>ICC 50 / 20195-023</td>
			<td>Bipolar cautery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J (H-2b)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 027</td>
			<td>Recipient animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Needle Holders</td>
			<td>FST</td>
			<td>12501-12</td>
			<td>Needle Holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted-Mosquito Forceps</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>BH111R</td>
			<td>Curved Clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Polyimide Tubing</td>
			<td>Nordson MEDICAL</td>
			<td>141-0031</td>
			<td>Cuff-Material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefines</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td>Micro Vessel Clip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Adson Forceps (serrated)</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Standard Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td>Clipapplicator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Forceps - SuperGrip Tips (Angled 45&#176;)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00649-11</td>
			<td>Fine Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vessel Dilating Forceps - Angled 10&#176; (Tip diameter 0.2 mm)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00125-11</td>
			<td>Vesseldilatator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schott VisiLED Set</td>
			<td>Schott</td>
			<td>MC 1500 / S80-55</td>
			<td>Light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>SteREO Discovery.V8</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Fine Scissors / Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>FST</td>
			<td>91460-11 / 14001-12</td>
			<td>Standard Sissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15004-08</td>
			<td>Microsissors (curved)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15003-08</td>
			<td>Microsissors (straight)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique

Med introduktionen af kraftige immunosuppressive protokoller er der mulighed for markante fremskridt i forebyggelsen og behandlingen af akutte afstødningsepisoder. Der kunne imidlertid kun observeres mindre forbedringer i de langsigtede resultater af transplanterede solide organer i de seneste årtier. I denne sammenhæng udgør kronisk allograft vasculopati (CAV) stadig den førende årsag til forsinket organsvigt i hjerte-, nyre-og lungetransplantation.
Indtil videre er den underliggende patogenese af CAV-udviklingen fortsat uklar og forklarer, hvorfor effektive behandlingsstrategier i øjeblikket mangler, og understreger behovet for relevante forsøgsmodeller for at studere den underliggende Patofysiologi, der fører til CAV-dannelse. Følgende protokol beskriver en murine heterotop cervikale aorta transplantation model ved hjælp af en modificeret ikke-sutur manchet teknik. I denne teknik er et segment af thorax aorta interpositioneret i den rigtige fælles carotis arterier. Med brugen af ikke-sutur manchet teknik, en let at lære og reproducerbare model kan etableres, minimere den mulige heterogenitet af suturerede vaskulære mikro anastomoses.

I den fuldt MHC-mismatch transplantation model, et koncentrisk neointimal lag kan ses 4 uger efter transplantation (figur 2). Dette lag består primært af vaskulære glatte muskelceller som immun histologisk farvning for SM22 (en selektiv markør for modne vaskulære glatte muskelceller) afsløret. Som nævnt før, disse vaskulære glatte muskelceller er patognomonisk for læsioner, der ses i kronisk allograft vasculopati. Til yderligere analyser bør aorta segmenter opdeles og farves af El...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Her præsenterer vi en protokol af heterotop aorta transplantation i mus ved hjælp af ikke-sutur manchet teknik i en cervikal murine model. Denne model kan bruges til at studere den underliggende patologi af kronisk allograft vasculopati (CAV) og kan hjælpe med at evaluere nye terapeutiske agenser for at forhindre dannelsen.

Murine cervikale aorta transplantation model ved hjælp af en modificeret ikke-sutur manchet teknik

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Jeg er Martin Ryll fra forskningslaboratorierne i Institut for General, Visceral og Transplantation kirurgi af LMU i München. I dag vil vi vise dig en murine heterotopic aorta transplantation model ved hjælp af en modificeret ikke-sutur manchet teknik. Først bedøve modtageren dyret med en intraperitoneal injektion af midazolam, medetomidin og fentanyl.Klip alle hår af livmoderhalskræft laterale region med en elektrisk hårklipper til små dyr og anvende oftalmologiske salve med vatpinde for at forhindre øjnene i at tørre ud under proceduren. Placer dyret i liggende position på en varmepude under mikroskopet og tape forsigtigt benene til operationsbordet med hudfølsomme gips strimler. Vip hovedet tilbage og skrub det operative felt flere gange med alkohol.Lav et hud snit fra halspulsåren snit til højre underkæbe med lille saks. Fjern den højre nederste lap af submandibulær kirtel via bipolar ætsning af fartøjet pedicle og efterfølgende excision med mikro saks. Fjern den højre sternocleidomastoid muskel via bipolar ætsning af den øvre og nedre del og efterfølgende excision med mikro saks for at få adgang til den fælles halspulsåren.Mobilisere den fælles halspulsåren så langt distally og proksimalt som muligt ved at trække det omgivende bindevæv fra hinanden med fine snæv. Bind to 7-0 silkeligaturer med minimal afstand mellem hinanden omkring midten af den almindelige halspulsåre og transect den fælles halspulsåre med fine mikro saks mellem ligaturer. Før den proksimale ligated ende gennem manchetten og fastgør det med en lille arterie klemme.Tag ligaturen med en fin mikrosaks så tæt på ligaturen som muligt, og skyl lumen med hepariniseret saltvand med en 30 gauge nål, mens du skal passe på ikke at beskadige karvæggene. Distend den åbne lumen ved hjælp af fine vaskulære dilatatorer og vende carotis stump over manchetten ved at trække det forsigtigt over polyamid røret. Fastgør straks det omvendte carotis med en løst forbundne 7-0 silkeløkke.Udfør den samme procedure i den anden ende af halspulsåren med den anden manchet. Før den distale ligated ende gennem manchetten og fastgør det med en lille arterie klemme. Tag ligaturen med en fin mikrosaks så tæt på ligaturen som muligt, og skyl lumen med hepariniseret saltvand med en 30 gauge nål, mens du skal passe på ikke at beskadige karvæggene.Distend den åbne lumen ved hjælp af fine vaskulære dilatatorer og vende carotis stump over manchetten ved at trække det forsigtigt over polyamid røret. Fastgør straks det omvendte carotis med en løst forbundne 7-0 silkeløkke. Sæt recipientdyret til side og fugter den øverste to-tredjedel med saltvand, indtil aortasegmentet er explanted.Bedøve donormusen på samme måde som recipientdyret. Klip alle hår i mave-og thorax regionen med en elektrisk hårklipper til små dyr og anvende oftalmologiske salve med vatpinde for at forhindre øjnene i at tørre ud under proceduren. Placer dyret i liggende position på en varmepude under mikroskopet og tape forsigtigt benene til operationsbordet med hudfølsomme gips strimler.Skrub det operative felt flere gange med alkohol. Udfør en midterlinje abdominal laparotomi med små saks og skubbe tarmene lidt opad for at udsætte ringere vena cava. Injicer IVC med en cc af hepariniseret saltvand ved hjælp af en 30 gauge nål.Skær abdominal aorta og IVC under nyrearterier med lille saks til at exsanguinate donor dyret. Placer løst en komprimere i maven for at absorbere blodet. Udfør en thoracotomy via bilateral omdirigering af ribbenene med en saks og vip den forreste brystvæg kranielt med en kirurgisk klemme for at afsløre mediastinum.Skær IVC og spiserøret direkte over mellemgulvet med mikrosaks. Fjern hjertet og lungerne ved at titre dem opad med scelinter, der holder den afskårne IVC og spiserøret, og udleder dem derefter med mikrosaks fra basen for at få adgang til thoraxaorta og det dorsale mediastinum. Mobilisere thorax aorta fra det omgivende væv ved at trække fra hinanden de omkringliggende bindevæv og fedt med fine pincet og samtidig være omhyggelig med ikke at beskadige nogen interkostale arterier.Ætse alle grene fra brystta med bipolar cautery scelinter og punktafgifter aorta segmentet mellem mellemgulvet og aorta bue ved hjælp af mikro saks. Skyl det punkterede aortasegment med hepariniseret saltvand med en 30 gauge nål, mens du passe på ikke at beskadige fartøjets vægge for at fjerne eventuelle resterende blod eller blodpropper og overføre transplantatet til recipientdyret. Træk den proksimale ende af donoraortasegmentet over den proksimale manchet oven på den omvendte halspulsåre med fine spånbånd og fastgør den straks med en løst forbundne 7-0 silkeløkke.Trim den distale frie ende af aortatransplantatten med mikrosaks, så transplantatets længde passer til afstanden mellem de to manchetter. Træk den distale ende af donor aorta segment over den distale manchet på toppen af den omvendte halspulsåren med fine scefæcener og straks ordne det med en løst pre-tied 7-0 silke loop. Fjern den distale klemme først for at tillade retrograd perfusion.Efter at have opnået hæmostase, fjerne den proksimale klemme for at fuldføre anastomose. Endelig lukke såret med 6-0 kontinuerlig sutur. Efter 28 dage ofrer dyrene dyrene og transplantaterne bevares for histologisk farvning.Som vist i disse Van-Giesons pletter af aortasektioner udviklede fuldt MHC uoverensstemmende allografted aortas fra Balb/c-donorer til sorte seks modtagere en betydelig neointimal hyperplasi, hvilket resulterede i luminal indsnævring. På den anden side udviklede syngenic aorta transplantationer fra sorte seks donorer til sorte seks modtagere kun lidt neointimal hyperplasi. Immunfluorescens farvning mod SM22, en markør for vaskulære glatte muskelceller, som vist på dette billede i grøn fluorescens, viser, at neointima hovedsagelig består af vaskulære glatte muskelceller.Den murine aorta transplantation tjener som en model for kronisk transplantation vaskulopati, som er den mest almindelige årsag til sent graft fiasko. Sammenlignet med den ortopiske abdominalmodel er vores modificerede manchetteknik mindre mikrokirurgisk krævende, hvilket fører til en høj succesrate. Desuden kan variationer af den vaskulære anastomose, som det ses i andre mikrokirurgiske transplantationsmodeller, på grund af manchettens konstante diameter overses.Desuden holdes den varme iskæmiske tid konstant i alle forsøgsgrupperne, da recipientdyret tilberedes først, før aortasegmentet er explanted. Vores modificerede model bør hjælpe andre laboratorier til at etablere murine aorta transplantation.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

En ny musemodel af Endovaskulær aortaaneurisme Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Muse Livmoderhalskræft Heart transplantation model ved hjælp af en modificeret Cuff Teknik

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproducerbar Paraplegi af thorax aortaokklusion i en musemodel for Rygmarvsskader iskæmireperfusion

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

En murin model af cervikal Rygmarvsskader til Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticitet

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

Murine Heterotop Heart Transplant Teknik

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Transplantation af pulmonale ventilen med en musemodel af Heterotop Heart Transplantation

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified BergstrÃƒÆ’Ã‚Â¶m Technique

Human skeletmuskel biopsiprocedurer anvendelse af den modificerede Bergström Teknik

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Murin hornhindetransplantation: en model til at studere den mest almindelige form for organtransplantation

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotopisk Livmoderhalskræft hjertetransplantation i mus

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...