Name: murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique
Uploaded: 2019-11-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Alle experimenten werden uitgevoerd volgens de richtlijnen van de Duitse dierenwelzijns akte (TierSchG). (AZ: 55.2-1-54-2532. Vet_02-80-2015).
1. huisvesting van dieren
<ol><li>Gebruik voor experimenten mannelijke C57BL/6-en BALB/c-muizen met een gewicht van 20-25 g met C57BL/6 muizen als de ontvangende dieren en BALB/c muizen als donordieren.</li>
	<li>Koop de dieren en huis in een barrière-pathogeen-vrije faciliteit, in overeenstemming met de FELASA richtlijnen voor Health Monitoring<sup ...

<ol>
	<li>Rana, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+benefit+of+solid-organ+transplant+in+the+United+States.">Survival benefit of solid-organ transplant in the United States.</a> JAMA Surgery. 150 (3), 252-259 (2015).</li><li>Rana, A., Godfrey, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+in+Solid-Organ+Transplantation:+Success+and+Stagnation.">Outcomes in Solid-Organ Transplantation: Success and Stagnation.</a> Texas Heart Institute Journal. 46 (1), 75-76 (2019).</li><li>Meier-Kriesche, H. U., Schold, J. D., Srinivas, T. R., Kaplan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+improvement+in+renal+allograft+survival+despite+a+marked+decrease+in+acute+rejection+rates+over+the+most+recent+era.">Lack of improvement in renal allograft survival despite a marked decrease in acute rejection rates over the most recent era.</a> American Journal of Transplantation. 4 (3), 378-383 (2004).</li><li>Bagnasco, S. M., Kraus, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+arteritis+in+renal+allografts:+new+takes+on+an+old+lesion.">Intimal arteritis in renal allografts: new takes on an old lesion.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 20 (3), 343-347 (2015).</li><li>Hollis, I. B., Reed, B. N., Moranville, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medication+management+of+cardiac+allograft+vasculopathy+after+heart+transplantation.">Medication management of cardiac allograft vasculopathy after heart transplantation.</a> Pharmacotherapy. 35 (5), 489-501 (2015).</li><li>Verleden, G. M., Raghu, G., Meyer, K. C., Glanville, A. R., Corris, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+classification+system+for+chronic+lung+allograft+dysfunction.">A new classification system for chronic lung allograft dysfunction.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (2), 127-133 (2014).</li><li>Ramzy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+review.">Cardiac allograft vasculopathy: a review.</a> Canadian Journal of Surgery. 48 (4), 319-327 (2005).</li><li>Skoric, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+diagnosis,+therapy,+and+prognosis.">Cardiac allograft vasculopathy: diagnosis, therapy, and prognosis.</a> Croatian Medical Journal. 55 (6), 562-576 (2014).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+Sleeve+Technique+in+a+Mouse+Model+of+Aortic+Transplantation+-+An+Instructional+Video.">Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video.</a> Journal of Visualized Experiments. (128), (2017).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+transplant+arteriosclerosis:+role+of+intercellular+adhesion+molecule-1.">Mouse model of transplant arteriosclerosis: role of intercellular adhesion molecule-1.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 20 (2), 343-352 (2000).</li><li>M&#228;hler Convenor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+mouse,+rat,+hamster,+guinea+pig+and+rabbit+colonies+in+breeding+and+experimental+units.">FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units.</a> Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+p38+MAPK+inhibits+chronic+allograft+vasculopathy.">Blockade of p38 MAPK inhibits chronic allograft vasculopathy.</a> Transplantation. 85 (2), 293-297 (2008).</li><li>Thomas, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SDF-1/CXCR4/CXCR7+is+pivotal+for+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+chronic+allograft+vasculopathy.">SDF-1/CXCR4/CXCR7 is pivotal for vascular smooth muscle cell proliferation and chronic allograft vasculopathy.</a> Transplant International. 28 (12), 1426-1435 (2015).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilirubin:+a+natural+inhibitor+of+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation.">Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation.</a> Circulation. 112 (7), 1030-1039 (2005).</li><li>Segura, A. M., Buja, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+complex+multifactorial+sequela+of+heart+transplantation.">Cardiac allograft vasculopathy: a complex multifactorial sequela of heart transplantation.</a> Texas Heart Institute Journal. 40 (4), 400-402 (2013).</li><li>McDaid, J., Scott, C. J., Kissenpfennig, A., Chen, H., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+animal+models+in+developing+immunosuppressive+agents.">The utility of animal models in developing immunosuppressive agents.</a> European Journal of Pharmacology. 759, 295-302 (2015).</li><li>Shi, C., Russell, M. E., Bianchi, C., Newell, J. B., Haber, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+accelerated+transplant+arteriosclerosis.">Murine model of accelerated transplant arteriosclerosis.</a> Circulation Research. 75 (2), 199-207 (1994).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+minor+histocompatibility+antigens+in+the+development+of+allograft+arteriosclerosis.">Importance of minor histocompatibility antigens in the development of allograft arteriosclerosis.</a> Clinical Immunology and Immunopathology. 80 (3 Pt 1), 273-277 (1996).</li><li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+heterotopic+vascularized+pancreas+transplantation+in+mice+to+assess+ischemia+reperfusion+injury+and+graft+pancreatitis.">A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis.</a> Surgery. 141 (5), 682-689 (2007).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Nakao, A., Ogino, Y., Tahara, K., Uchida, H., Kobayashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+intestinal+transplantation+using+the+cuff+method+in+rats:+a+histopathological+evaluation+of+the+anastomosis.">Orthotopic intestinal transplantation using the cuff method in rats: a histopathological evaluation of the anastomosis.</a> Microsurgery. 21 (1), 12-15 (2001).</li></ol>

Chronische allotransplantaat vasculopathie is de belangrijkste oorzaak van laat transplantaat verlies na een solide orgaantransplantatie van het hart en waarschijnlijk nier-en Long allograften8. Tot nu toe kon geen causaal therapeutisch regime worden ontwikkeld om de vorming van CAV te voorkomen.
De pathofysiologie van CAV is multifactoriaal en omvat immunologische en niet-immunologische aspecten16. Het gebruik van knaagdieren modellen bij transp...

In de afgelopen zes decennia is een solide orgaantransplantatie geëvolueerd van een experimentele procedure naar een standaard van zorg voor de behandeling van eindstadium orgaanfalen1. Als gevolg van de verbetering van antimicrobiële middelen, chirurgische technieken en vooruitgang in immunosuppressieve regimenten, de vroege succespercentage van de vaste orgaantransplantatie zijn aanzienlijk toegenomen in de afgelopen decennia2.
Echter, lange termijn transplantaat overleving percentages zijn niet significant verbeterd op dezelfde manier3. De ontwikkeling van CAV is de belangrijkste factor die de lange termijn Overleving4,5,6beperkt. Deze pathologie wordt gekenmerkt door de vorming van een concentrische neointimale laag bestaande uit gladde spiercellen, wat leidt tot progressieve vernauwing van het vat en opeenvolgende malperfusie van het getransplanteerde vaste orgaan. Bij ontvangers van harttransplantaties kunnen CAV laesies worden gediagnosticeerd bij maximaal 75% van de patiënten 3 jaar na transplantatie7.
De pathofysiologie van CAV is nog niet volledig begrepen. Het lijkt te zijn gerelateerd aan tal van immunologische en niet-immunologische factoren, leidt tot endotheliale schade met daaropvolgende endotheliale activering en dysfunctie8. Tot dusver bestaat er geen causale behandelingsoptie voor de preventie van CAV, met de nadruk op de noodzaak van een reproduceerbare kleine diermodel om de vorming en mogelijke therapie van CAV te bestuderen.
Met het gebruik van muriene aorta transplantatie modellen, CAV achtige laesies kan worden gezien 4 weken na transplantatie. Deze laesies bestaan voornamelijk uit vasculaire gladde spiercellen, daardoor, die lijken op de menselijke pathologie. Door een breed scala aan transgene en knock-out muizen biedt het gebruik van Muismodellen in transplantatie geassocieerde pathologieën een unieke kans om nieuwe therapeutische opties te identificeren en hun ontwikkeling te begrijpen. Vanwege de kleine diameter van de getransplanteerde vaten wordt het gebruik van Muismodellen echter vaak geassocieerd met lange leer curves en een initiële hoge complicatie rate9. Met de introductie van de niet-hecht manchet techniek kan dit meest uitdagende deel van de operatie worden vergemakkelijkt en wordt de diameter van de anastomose constant10,11gehouden.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balb-c Mice (H2-d)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 028</td>
			<td>Donor animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar cautery system</td>
			<td>ERBE</td>
			<td>ICC 50 / 20195-023</td>
			<td>Bipolar cautery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J (H-2b)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 027</td>
			<td>Recipient animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Needle Holders</td>
			<td>FST</td>
			<td>12501-12</td>
			<td>Needle Holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted-Mosquito Forceps</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>BH111R</td>
			<td>Curved Clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Polyimide Tubing</td>
			<td>Nordson MEDICAL</td>
			<td>141-0031</td>
			<td>Cuff-Material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefines</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td>Micro Vessel Clip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Adson Forceps (serrated)</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Standard Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td>Clipapplicator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Forceps - SuperGrip Tips (Angled 45&#176;)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00649-11</td>
			<td>Fine Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vessel Dilating Forceps - Angled 10&#176; (Tip diameter 0.2 mm)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00125-11</td>
			<td>Vesseldilatator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schott VisiLED Set</td>
			<td>Schott</td>
			<td>MC 1500 / S80-55</td>
			<td>Light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>SteREO Discovery.V8</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Fine Scissors / Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>FST</td>
			<td>91460-11 / 14001-12</td>
			<td>Standard Sissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15004-08</td>
			<td>Microsissors (curved)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15003-08</td>
			<td>Microsissors (straight)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique

Met de introductie van krachtige immunosuppressieve protocollen, zijn duidelijke vooruitgang mogelijk in de preventie en therapie van acute afwijzing afleveringen. In de afgelopen decennia kon echter slechts geringe verbetering van de lange termijn resultaten van getransplanteerde vaste organen worden waargenomen. In deze context vertegenwoordigt chronische transplantaat vasculopathie (CAV) nog steeds de belangrijkste oorzaak van laat-orgaanfalen bij cardiale, nier-en pulmonaire transplantatie.
Tot dusver blijft de onderliggende pathogenese van CAV-ontwikkeling onduidelijk, waarin wordt uitgelegd waarom effectieve behandelingsstrategieën momenteel ontbreken en de nadruk leggen op een behoefte aan relevante experimentele modellen om de onderliggende pathofysiologie te bestuderen die leidt tot CAV vorming. Het volgende protocol beschrijft een heterotope cervicale aorta transplantatie model Murine met behulp van een gemodificeerde niet-hecht manchet techniek. In deze techniek wordt een segment van de thoracische aorta in de rechter gemeenschappelijke halsslagader geplaatst. Met het gebruik van de niet-hecht manchet techniek, kan een gemakkelijk te leren en reproduceerbare model worden vastgesteld, waardoor de mogelijke heterogeniteit van gehecht vasculaire micro anastomoses wordt geminimaliseerd.

In het volledig MHC-mismatch-transplantatie model kan een concentrische neointimale laag worden gezien 4 weken na de transplantatie (Figuur 2). Deze laag bestaat hoofdzakelijk uit vasculaire gladde spiercellen als immunohistologische kleuring voor SM22 (een selectieve marker voor rijpe vasculaire gladde spiercellen) onthuld. Zoals eerder vermeld, deze vasculaire gladde spiercellen zijn Pathognomonisch voor laesies gezien in chronische transplantaat vasculopathie. Voor verdere analyses moeten...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Hier presenteren we een protocol van heterotopische aorta transplantatie in muizen met behulp van de niet-hecht manchet techniek in een cervicale Murine model. Dit model kan worden gebruikt om de onderliggende pathologie van chronische transplantaat vasculopathie (CAV) te bestuderen en kan helpen bij het evalueren van nieuwe therapeutische middelen om de vorming ervan te voorkomen.

Murine cervicaal aorta transplantatie model met behulp van een gemodificeerde niet-hecht manchet techniek

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Ik ben Martin Ryll van de onderzoekslaboratoria van het departement Viscerale en transplantatiechirurgie van de LMU in München. Vandaag gaan we u een murine heterotopische aortatransplantatie model met behulp van een gemodificeerde niet-hechting manchet techniek. Verdoven het ontvangende dier eerst met een intraperitoneale injectie van midazolam, medetomidine en fentanyl.Knip alle haren van het cervicale laterale gebied met een elektrische haarknipper voor kleine dieren en breng oogheelkundige zalf aan met wattenstaafjes om te voorkomen dat de ogen tijdens de procedure uitdrogen. Plaats het dier in de supine positie op een verwarmingskussen onder de microscoop en plak zachtjes zijn benen aan de operatietafel met huidgevoelige gipsstrips. Kantel zijn hoofd naar achteren en schrob het operatieve veld meerdere malen met alcohol.Maak een huidincisie van de halsslagader incisie naar de rechter onderkaak met kleine schaar. Verwijder de rechter onderste kwab van de submandibulaire klier via bipolaire cautery van de vaatpedicula en de daaropvolgende excisie met microschaar. Verwijder de rechter sternocleidomastoïde spier via bipolaire cautery van het bovenste en onderste gedeelte en de daaropvolgende excisie met micro schaar om toegang te krijgen tot de gemeenschappelijke halsslagader.Mobiliseer de gemeenschappelijke halsslagader zo ver mogelijk distally en proximally door het omringende bindweefsel uit elkaar te trekken met fijne tangen. Bind twee 7-0 zijden ligaturen met minimale afstand tussen elkaar rond het midden van de gemeenschappelijke halsslagader en transect de gemeenschappelijke halsslagader met fijne micro schaar tussen de ligaturen. Passeer het proximale ligated einde door de manchet en bevestig het met een kleine slagaderklem.Verwijder de ligatuur met fijne microschaar zo dicht mogelijk bij de ligatuur en spoel het lumen met gehepariniseerde zoutoplossing met een 30-meter naald terwijl u ervoor zorgt dat de vaatwanden niet worden beschadigd. Distend het open lumen met behulp van fijne vasculaire dilatators en omkeren de halsslagader stomp over de manchet door te trekken zachtjes over de polyamide buis. Bevestig onmiddellijk de omgekeerde halsslagader met een losjes voorgekeerde 7-0 zijden lus.Voer dezelfde procedure uit aan de andere kant van de halsslagader met de andere manchet. Passeer het distale gevleende uiteinde door de manchet en bevestig het met een kleine slagaderklem. Verwijder de ligatuur met fijne microschaar zo dicht mogelijk bij de ligatuur en spoel het lumen met gehepariniseerde zoutoplossing met een 30-meter naald terwijl u ervoor zorgt dat de vaatwanden niet worden beschadigd.Distend het open lumen met behulp van fijne vasculaire dilatators en omkeren de halsslagader stomp over de manchet door te trekken zachtjes over de polyamide buis. Bevestig onmiddellijk de omgekeerde halsslagader met een losjes voorgekeerde 7-0 zijden lus. Zet het ontvangende dier opzij en hydrateer de bovenste twee derde met zout tot het aortasegment is uitbeplant.Verdoven de donormuis op dezelfde manier als het ontvangende dier. Klem alle haren van de buik- en borststreek met een elektrische haarknipper voor kleine dieren en breng oogheelkundige zalf aan met wattenstaafjes om te voorkomen dat de ogen tijdens de procedure uitdrogen. Plaats het dier in de supine positie op een verwarmingskussen onder de microscoop en plak zachtjes zijn benen aan de operatietafel met huidgevoelige gipsstrips.Schrob het operatieve veld meerdere malen met alcohol. Voer een midline abdominale laparotomie met kleine schaar en duw de darmen iets omhoog om de inferieure vena cava bloot. Injecteer het IVC met een cc gehepariniseerde zoutoplossing met behulp van een 30-meter naald.Snijd de abdominale aorta en IVC onder de nierslagaders met een kleine schaar om het donordier uit te exsanguineren. Plaats los een kompres in de buik om het bloed te absorberen. Voer een thoracotomie uit via bilaterale afleiding van de ribben met een schaar en kantel de voorste borstwand cranially met een chirurgische klem om het mediastinum bloot te leggen.Snijd de IVC en de slokdarm direct boven het middenrif met een microschaar. Verwijder het hart en de longen door ze naar boven te tittelen met tangen die de snij-IVC en slokdarm vasthouden en ze vervolgens met een microschaar van de basis uitsnijden om toegang te krijgen tot de thoracale aorta en het rugmediastinum. Mobiliseer de thoracale aorta uit het omliggende weefsel door het omringende bindweefsel en vet uit elkaar te trekken met fijne tangen terwijl ze voorzichtig zijn om geen intercollete slagaders te beschadigen.Cauterize alle takken van de thoracale aorta met bipolaire cautery tangen en accijns het aorta segment tussen het middenrif en de aortaboog met behulp van micro schaar. Spoel het aortasegment met gehepariniseerde zoutoplossing met een naald van 30 meter terwijl u ervoor zorgt dat de vaatwanden niet worden beschadigd om het resterende bloed of stolsels te verwijderen en de graft over te brengen naar het ontvangende dier. Trek het proximale uiteinde van het donoraortasegment over de proximale manchet bovenop de omgekeerde halsslagader met fijne tangen en bevestig het onmiddellijk met een losjes voorgekeerde 7-0 zijden lus.Snijd het distale vrije uiteinde van de aortagraft met een microschaar, zodat de graftlengte past in de afstand tussen de twee manchetten. Trek het distale uiteinde van het donoraortasegment over de distale manchet bovenop de omgekeerde halsslagader met fijne tangen en bevestig het onmiddellijk met een losjes vooraf gebonden 7-0 zijden lus. Verwijder eerst de distale klem om retrograde perfusie mogelijk te maken.Na het bereiken van hemostase, verwijder de proximale klem om de anastomose te voltooien. Sluit ten slotte de wond met 6-0 continue hechting. Na 28 dagen worden de dieren geofferd en de grafts bewaard voor histologische vlekken.Zoals blijkt uit deze Van-Gieson's vlekken van aortasecties, volledig MHC mismatched allografted aorta's van Balb / c donoren aan zwarte zes ontvangers ontwikkelde een aanzienlijke neointimale hyperplasie resulterend in luminale vernauwing. Aan de andere kant, synogene aortatransplantaties van zwarte zes donoren tot zwarte zes ontvangers ontwikkelden slechts weinig neointimale hyperplasie. Immunofluorescentie kleuring tegen SM22, een marker voor vasculaire gladde spiercellen, zoals te zien is op deze foto in groene fluorescentie, toont aan dat de neointima voornamelijk bestaat uit vasculaire gladde spiercellen.De murine aortatransplantatie dient als een model voor chronische transplantatie vasculopathie die de meest voorkomende oorzaak van late graft falen. In vergelijking met het orthotopische buikmodel is onze gemodificeerde manchettechniek minder microchirurgisch veeleisend, wat leidt tot een hoog slagingspercentage. Bovendien kunnen variaties van de vasculaire anastomose, gezien in andere microchirurgische transplantatiemodellen, als gevolg van de constante diameter van de manchet worden verwaarloosd.Bovendien wordt de warme ischemische tijd constant gehouden in de experimentele groepen, omdat het ontvangende dier eerst wordt voorbereid voordat het aortasegment wordt uitbesteed. Ons gewijzigde model moet andere laboratoria helpen om murine aortatransplantatie vast te stellen.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Orthotope Aorta Transplantatie: Een Rat Model voor de ontwikkeling van chronische vasculopathie Study

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Een nieuw muizenmodel van endovasculaire aortaaneurismareparatie

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Muizen Baarmoederhalskanker harttransplantatie Model met een aangepaste manchet Techniek

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproduceerbaar Paraplegie door thoracale aorta-occlusie in een muizenmodel van Spinal Cord ischemie-reperfusie

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

Een muizenmodel van cervicale Spinal Cord Injury Study Post-letsels Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

Muizen Heterotope Heart Transplant Techniek

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Transplantatie van Pulmonary Valve een muis model van Heterotope Heart Transplantation

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified BergstrÃƒÆ’Ã‚Â¶m Technique

Human Skeletal Muscle biopsie procedures met behulp van de Modified Bergström Techniek

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Muizen hoornvliestransplantatie: een model om de meest voorkomende vorm van een orgaantransplantatie Bestudeer

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotopische Cervical harttransplantatie in Muizen

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...