Name: murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique
Uploaded: 2019-11-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Toutes les expériences ont été réalisées conformément aux directives de la loi allemande sur le bien-être animal (TierSchG.) (AZ: 55.2-1-54-2532.Vet_02-80-2015).
1. Logement pour animaux
<ol><li>Pour les expériences, utilisez des souris mâles C57BL/6 et BALB/c pesant 20-25 g avec des souris C57BL/6 comme animaux receveurs et des souris BALB/c comme animaux donneurs.</li>
	<li>Acheter les animaux et la maison dans une installation exempte d'agents pathogènes, conformément aux ligne...

<ol>
	<li>Rana, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+benefit+of+solid-organ+transplant+in+the+United+States.">Survival benefit of solid-organ transplant in the United States.</a> JAMA Surgery. 150 (3), 252-259 (2015).</li><li>Rana, A., Godfrey, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+in+Solid-Organ+Transplantation:+Success+and+Stagnation.">Outcomes in Solid-Organ Transplantation: Success and Stagnation.</a> Texas Heart Institute Journal. 46 (1), 75-76 (2019).</li><li>Meier-Kriesche, H. U., Schold, J. D., Srinivas, T. R., Kaplan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+improvement+in+renal+allograft+survival+despite+a+marked+decrease+in+acute+rejection+rates+over+the+most+recent+era.">Lack of improvement in renal allograft survival despite a marked decrease in acute rejection rates over the most recent era.</a> American Journal of Transplantation. 4 (3), 378-383 (2004).</li><li>Bagnasco, S. M., Kraus, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+arteritis+in+renal+allografts:+new+takes+on+an+old+lesion.">Intimal arteritis in renal allografts: new takes on an old lesion.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 20 (3), 343-347 (2015).</li><li>Hollis, I. B., Reed, B. N., Moranville, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medication+management+of+cardiac+allograft+vasculopathy+after+heart+transplantation.">Medication management of cardiac allograft vasculopathy after heart transplantation.</a> Pharmacotherapy. 35 (5), 489-501 (2015).</li><li>Verleden, G. M., Raghu, G., Meyer, K. C., Glanville, A. R., Corris, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+classification+system+for+chronic+lung+allograft+dysfunction.">A new classification system for chronic lung allograft dysfunction.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (2), 127-133 (2014).</li><li>Ramzy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+review.">Cardiac allograft vasculopathy: a review.</a> Canadian Journal of Surgery. 48 (4), 319-327 (2005).</li><li>Skoric, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+diagnosis,+therapy,+and+prognosis.">Cardiac allograft vasculopathy: diagnosis, therapy, and prognosis.</a> Croatian Medical Journal. 55 (6), 562-576 (2014).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+Sleeve+Technique+in+a+Mouse+Model+of+Aortic+Transplantation+-+An+Instructional+Video.">Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video.</a> Journal of Visualized Experiments. (128), (2017).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+transplant+arteriosclerosis:+role+of+intercellular+adhesion+molecule-1.">Mouse model of transplant arteriosclerosis: role of intercellular adhesion molecule-1.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 20 (2), 343-352 (2000).</li><li>M&#228;hler Convenor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+mouse,+rat,+hamster,+guinea+pig+and+rabbit+colonies+in+breeding+and+experimental+units.">FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units.</a> Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+p38+MAPK+inhibits+chronic+allograft+vasculopathy.">Blockade of p38 MAPK inhibits chronic allograft vasculopathy.</a> Transplantation. 85 (2), 293-297 (2008).</li><li>Thomas, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SDF-1/CXCR4/CXCR7+is+pivotal+for+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+chronic+allograft+vasculopathy.">SDF-1/CXCR4/CXCR7 is pivotal for vascular smooth muscle cell proliferation and chronic allograft vasculopathy.</a> Transplant International. 28 (12), 1426-1435 (2015).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilirubin:+a+natural+inhibitor+of+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation.">Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation.</a> Circulation. 112 (7), 1030-1039 (2005).</li><li>Segura, A. M., Buja, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+complex+multifactorial+sequela+of+heart+transplantation.">Cardiac allograft vasculopathy: a complex multifactorial sequela of heart transplantation.</a> Texas Heart Institute Journal. 40 (4), 400-402 (2013).</li><li>McDaid, J., Scott, C. J., Kissenpfennig, A., Chen, H., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+animal+models+in+developing+immunosuppressive+agents.">The utility of animal models in developing immunosuppressive agents.</a> European Journal of Pharmacology. 759, 295-302 (2015).</li><li>Shi, C., Russell, M. E., Bianchi, C., Newell, J. B., Haber, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+accelerated+transplant+arteriosclerosis.">Murine model of accelerated transplant arteriosclerosis.</a> Circulation Research. 75 (2), 199-207 (1994).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+minor+histocompatibility+antigens+in+the+development+of+allograft+arteriosclerosis.">Importance of minor histocompatibility antigens in the development of allograft arteriosclerosis.</a> Clinical Immunology and Immunopathology. 80 (3 Pt 1), 273-277 (1996).</li><li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+heterotopic+vascularized+pancreas+transplantation+in+mice+to+assess+ischemia+reperfusion+injury+and+graft+pancreatitis.">A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis.</a> Surgery. 141 (5), 682-689 (2007).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Nakao, A., Ogino, Y., Tahara, K., Uchida, H., Kobayashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+intestinal+transplantation+using+the+cuff+method+in+rats:+a+histopathological+evaluation+of+the+anastomosis.">Orthotopic intestinal transplantation using the cuff method in rats: a histopathological evaluation of the anastomosis.</a> Microsurgery. 21 (1), 12-15 (2001).</li></ol>

La vasculopathie chronique d'allograft est la cause principale de la perte en retard de greffe après la transplantation pleine d'organe du coeur et les allogreffes rénales et pulmonaires probables8. Jusqu'ici, aucun régime thérapeutique causal n'a pu être développé afin d'empêcher la formation de CAV.
La physiopathologie du CAV est multifactorielle et implique des aspects immunologiques et non immunologiques16. L'utilisation de modèles d...

Au cours des six dernières décennies, la transplantation d'organes solides est passée d'une procédure expérimentale à une norme de soins pour le traitement de l'insuffisance d'organes en phase finale1. En raison de l'amélioration des agents antimicrobiens, des techniques chirurgicales et de l'avancement dans les régiments immunosuppresseurs, le taux de réussite précoce de la transplantation d'organes solides a considérablement augmenté au cours des dernières décennies2.
Cependant, les taux de survie à long terme de greffe ne se sont pas sensiblement améliorés de la même manière3. Le développement de CAV est le principal facteur limitant la survie à long terme4,5,6. Cette pathologie est caractérisée par la formation d'une couche néointimale concentrique composée de cellules musculaires lisses, conduisant à un rétrécissement progressif du vaisseau et une malperfusion consécutive de l'organe solide transplanté. Chez les receveurs de greffes cardiaques, les lésions de CAV peuvent être diagnostiquées dans jusqu'à 75% de patients 3 ans après la transplantation7.
La physiopathologie du CAV n'est pas encore entièrement comprise. Il semble être lié à de nombreux facteurs immunologiques et non immunologiques, conduisant à des dommages endothéliaux avec l'activation endothéliale suivante et le dysfonctionnement8. Jusqu'à présent, il n'existe aucune option de traitement causal pour la prévention de la CAV, soulignant la nécessité d'un modèle reproductible des petits animaux afin d'étudier la formation et la thérapie potentielle de cav.
Avec l'utilisation des modèles de transplantation aortique murine, les lésions de CAV comme peuvent être vues 4 semaines après transplantation. Ces lésions se composent principalement des cellules lisses vasculaires de muscle, ainsi ressemblant à la pathologie humaine. En raison d'une grande variété de souris transgéniques et assomées, l'utilisation de modèles de souris dans les pathologies associées à la transplantation offre une occasion unique d'identifier de nouvelles options thérapeutiques et de comprendre leur développement. En raison du petit diamètre des vaisseaux transplantés cependant, l'utilisation de modèles de souris est généralement associée à de longues courbes d'apprentissage et un taux de complication élevé initial9. Avec l'introduction de la technique de manchette non-suture, cette partie la plus difficile de l'opération peut être facilitée et le diamètre de l'anastomose est maintenu constant10,11.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balb-c Mice (H2-d)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 028</td>
			<td>Donor animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar cautery system</td>
			<td>ERBE</td>
			<td>ICC 50 / 20195-023</td>
			<td>Bipolar cautery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J (H-2b)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 027</td>
			<td>Recipient animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Needle Holders</td>
			<td>FST</td>
			<td>12501-12</td>
			<td>Needle Holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted-Mosquito Forceps</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>BH111R</td>
			<td>Curved Clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Polyimide Tubing</td>
			<td>Nordson MEDICAL</td>
			<td>141-0031</td>
			<td>Cuff-Material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefines</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td>Micro Vessel Clip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Adson Forceps (serrated)</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Standard Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td>Clipapplicator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Forceps - SuperGrip Tips (Angled 45&#176;)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00649-11</td>
			<td>Fine Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vessel Dilating Forceps - Angled 10&#176; (Tip diameter 0.2 mm)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00125-11</td>
			<td>Vesseldilatator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schott VisiLED Set</td>
			<td>Schott</td>
			<td>MC 1500 / S80-55</td>
			<td>Light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>SteREO Discovery.V8</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Fine Scissors / Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>FST</td>
			<td>91460-11 / 14001-12</td>
			<td>Standard Sissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15004-08</td>
			<td>Microsissors (curved)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15003-08</td>
			<td>Microsissors (straight)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique

Avec l'introduction de protocoles immunosuppresseurs puissants, des progrès distincts sont possibles dans la prévention et la thérapie des épisodes aigus de rejet. Cependant, seulement l'amélioration mineure des résultats à long terme des organes solides transplantés a pu être observée au cours des dernières décennies. Dans ce contexte, la vasculopathie chronique d'allograft (CAV) représente toujours la cause principale de l'échec tardif d'organe dans la transplantation cardiaque, rénale et pulmonaire.
Jusqu'à présent, la pathogénie sous-jacente du développement des CAV demeure floue, expliquant pourquoi les stratégies de traitement efficaces sont actuellement manquantes et mettant l'accent sur la nécessité de modèles expérimentaux pertinents afin d'étudier la pathophysiologie sous-jacente menant à Formation CAV. Le protocole suivant décrit un modèle hétérotopique de transplantation aortique cervicale murine utilisant une technique modifiée de manchette de non-suture. Dans cette technique, un segment de l'aorte thoracique est interpositionné dans l'artère carotide commune droite. Avec l'utilisation de la technique de manchette non-suture, un modèle facile à apprendre et reproductible peut être établi, minimisant l'hétérogénéité possible des micro anastomoses vasculaires sutured.

Dans le modèle de transplantation entièrement MHC-inmatch, une couche néointimale concentrique peut être vue 4 semaines après la transplantation (figure 2). Cette couche se compose principalement des cellules musculaires lisses vasculaires comme coloration immunohistologique pour SM22 (un marqueur sélectif pour les cellules musculaires lisses vasculaires mûres) indiquée. Comme indiqué précédemment, ces cellules musculaires lisses vasculaires sont pathognomoniques pour des lésions...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Ici, nous présentons un protocole de la transplantation aortique hétérotopique chez les souris utilisant la technique de manchette de non-suture dans un modèle murin cervical. Ce modèle peut être utilisé pour étudier la pathologie sous-jacente de la vasculopathie chronique d'allogreffe (CAV) et peut aider à évaluer de nouveaux agents thérapeutiques afin de prévenir sa formation.

Modèle de transplantation aortique cervicale de Murine utilisant une technique modifiée de manchette de non-suture

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Je suis Martin Ryll des laboratoires de recherche du Département de chirurgie générale, viscérale et transplantée de l’UML à Munich. Aujourd’hui, nous allons vous montrer un modèle de transplantation aortique hétérotopique murine utilisant une technique modifiée de manchette non suture. Tout d’abord, anesthésier l’animal receveur avec une injection intrapénitale de midazolam, de médetomidine et de fentanyl.Couper tous les poils de la région latérale cervicale avec une tondeuse à cheveux électrique pour les petits animaux et appliquer de l’onguent ophtalmique avec des cotons-tiges pour empêcher les yeux de sécher pendant la procédure. Placez l’animal en position supine sur un coussin chauffant sous le microscope et collez doucement ses jambes à la table d’opération avec des bandes de plâtre sensibles à la peau. Inclinez sa tête en arrière et frottez le champ opératoire plusieurs fois avec de l’alcool.Faire une incision cutanée de l’incision jugulaire à la mandibule inférieure droite avec de petits ciseaux. Retirez le lobe inférieur droit de la glande submandibulaire par cautérisation bipolaire du pedicle de navire et excision suivante avec des ciseaux micro. Retirez le muscle sternocleidomastoid droit par l’intermédiaire de la cautérisation bipolaire de la partie supérieure et inférieure et de l’excision suivante avec des micro ciseaux pour accéder à l’artère carotide commune.Mobilisez l’artère carotide commune aussi loin et proximalement que possible en tirant le tissu conjonctif environnant à part avec des forceps fins. Attachez deux ligatures de soie 7-0 avec une distance minimale entre eux autour du milieu de l’artère carotide commune et transectez l’artère carotide commune avec de fines micro ciseaux entre les ligatures. Passez l’extrémité ligatée proximale à travers le brassard et fixez-la avec une petite pince d’artère.Retirez la ligature avec de fines micro ciseaux aussi près que possible de la ligature et rincer le lumen avec de la solution saline héparinée avec une aiguille de calibre 30 tout en prenant soin de ne pas endommager les parois du navire. Distendez le lumen ouvert à l’aide de dilatateurs vasculaires fins et inversez la souche carotide sur la manchette en la tirant doucement sur le tube de polyamide. Fixez immédiatement la carotide inversée avec une boucle de soie 7-0 lâchement pré-attachée.Effectuez la même procédure à l’autre extrémité de l’artère carotide avec l’autre manchette. Passer l’extrémité ligated distal à travers le brassard et le fixer avec une petite pince d’artère. Retirez la ligature avec de fines micro ciseaux aussi près que possible de la ligature et rincer le lumen avec de la solution saline héparinée avec une aiguille de calibre 30 tout en prenant soin de ne pas endommager les parois du navire.Distendez le lumen ouvert à l’aide de dilatateurs vasculaires fins et inversez la souche carotide sur la manchette en la tirant doucement sur le tube de polyamide. Fixez immédiatement la carotide inversée avec une boucle de soie 7-0 lâchement pré-attachée. Mettre l’animal receveur de côté et hydrater les deux tiers supérieurs avec de la solution saline jusqu’à ce que le segment aortique soit explanté.Anesthésier la souris donneuse de la même manière que l’animal receveur. Couper tous les poils de la région abdominale et thoracique avec une tondeuse à cheveux électrique pour les petits animaux et appliquer de l’onguent ophtalmique avec des cotons-tiges pour empêcher les yeux de sécher pendant l’intervention. Placez l’animal en position supine sur un coussin chauffant sous le microscope et collez doucement ses jambes à la table d’opération avec des bandes de plâtre sensibles à la peau.Frottez le champ opératoire plusieurs fois avec de l’alcool. Effectuez une laparotomie abdominale de midline avec de petits ciseaux et poussez les intestins légèrement vers le haut pour exposer le cava inférieur de vena. Injecter l’IVC avec un cc de solution saline héparinée à l’aide d’une aiguille de calibre 30.Couper l’aorte abdominale et l’IVC sous les artères rénales avec de petits ciseaux pour exsanguiner l’animal donneur. Placez lâchement une compresse dans l’abdomen pour absorber le sang. Effectuer une thoracotomie par le détournement bilatéral des côtes avec des ciseaux et incliner la paroi thoracique antérieure cranially avec une pince chirurgicale pour exposer le mediastinum.Couper l’IVC et l’œsophage directement au-dessus du diaphragme à l’aide de micro ciseaux. Retirez le cœur et les poumons en les titillant vers le haut avec des forceps tenant l’IVC coupé et l’œsophage, puis les exciser avec des micro ciseaux de la base pour accéder à l’aorte thoracique et le mediastinum dorsal. Mobilisez l’aorte thoracique de son tissu environnant en démonter le tissu conjonctif environnant et la graisse avec des forceps fins tout en prenant soin de ne pas endommager les artères intercostales.Cautériser toutes les branches de l’aorte thoracique avec des forceps cautérisaires bipolaires et exciser le segment aortique entre le diaphragme et l’arc aortique à l’aide de micro ciseaux. Rincer le segment aortique excisé avec une solution saline héparinée avec une aiguille de calibre 30 tout en prenant soin de ne pas endommager les parois du vaisseau pour enlever le sang ou les caillots restants et transférer la greffe à l’animal receveur. Tirez l’extrémité proximale du segment aortique donneur sur le brassard proximal sur le dessus de l’artère carotide inversée avec des forceps fins et fixez-le immédiatement avec une boucle de soie 7-0 lâchement pré-attachée.Couper l’extrémité libre distale de la greffe aortique avec des micro ciseaux de sorte que la longueur de la greffe corresponde à la distance entre les deux poignets. Tirez l’extrémité distale du segment aortique donneur sur le brassard distal sur le dessus de l’artère carotide inversée avec des forceps fins et fixez-le immédiatement avec une boucle de soie 7-0 lâchement pré-attachée. Retirez d’abord la pince distale pour permettre la perfusion rétrograde.Après avoir atteint l’hémostase, enlever la pince proximale pour compléter l’anastomose. Enfin, fermez la plaie avec une suture continue de 6-0. Après 28 jours, les animaux sont sacrifiés et les greffons préservés pour la coloration histologique.Comme indiqué dans ces taches de Van-Gieson des sections aortiques, les aortas allografted complètement MHC mal acquérillées des donateurs de Balb/c aux six destinataires noirs ont développé une hyperplasie néointimale significative ayant pour résultat le rétrécissement luminal. D’autre part, les greffes aortiques syngéniques de six donneurs noirs à six destinataires noirs ont développé seulement peu d’hyperplasie néointimale. La coloration d’immunofluorescence contre SM22, un marqueur pour les cellules vasculaires lisses de muscle, comme montré dans cette image dans la fluorescence verte, démontre que le neointima se compose principalement des cellules lisses vasculaires de muscle.La transplantation aortique murine sert de modèle pour la vasculopathie chronique de transplantation qui est la cause la plus commune de l’échec tardif de greffe. Par rapport au modèle abdominal orthotopique, notre technique modifiée de manchette est moins exigeante microchirurgical menant à un taux de succès élevé. En outre, en raison du diamètre constant du brassard, les variations de l’anastomose vasculaire comme on le voit dans d’autres modèles de transplantation microchirurgical peuvent être négligées.En outre, le temps ischémique chaud est maintenu constant dans tous les groupes expérimentaux pendant que l’animal destinataire est préparé d’abord avant que le segment aortique soit explanté. Notre modèle modifié devrait aider d’autres laboratoires à établir la transplantation aortique murine.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Orthotopique aortique transplantation: un modèle de rat pour étudier le développement de la vasculopathie chronique

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

Recherche

Médecine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Un nouveau modèle murin de endovasculaire anévrisme de l&#39;aorte réparation

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Murin col de l&#39;utérus Cœur, la transplantation en utilisant une technique de modification de manchette

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproductible paraplégie par l&#39;aorte thoracique occlusion dans un modèle murin de la moelle épinière ischémie-reperfusion

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

Un modèle murin de la moelle épinière cervicale blessures à étude post-lésionnelle respiratoire neuroplasticité

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

Murin de transplantation cardiaque hétérotopique Technique

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Transplantation de valve pulmonaire en utilisant un modèle de souris de transplantation cardiaque hétérotopique

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified BergstrÃƒÆ’Ã‚Â¶m Technique

Procédures Muscle squelettique humain biopsie aide de la technique de modification Bergström

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Murin de transplantation de la cornée: Un modèle pour étudier la forme la plus courante de la transplantation d&#39;organes solides

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotopic col de l&#39;utérus chez la souris Transplantation cardiaque

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...