Name: murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique
Uploaded: 2019-11-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

כל הניסויים בוצעו בהתאם להנחיות החוק לרווחת בעלי חיים בגרמניה (טישלג). (AZ: 55.2-1-54-2532. Vet_02-80-2015).
1. דיור בעלי חיים
<ol><li>עבור ניסויים, השימוש זכר C57BL/6 ו-BALB/c עכברים במשקל 20-25 g עם C57BL/6 עכברים כמו חיות הנמען ועכברים BALB/c כמו חיות התורם.</li>
	<li>לרכוש את בעלי החיים ואת הבית במתקן הפתוגן מכשו...

<ol>
	<li>Rana, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+benefit+of+solid-organ+transplant+in+the+United+States.">Survival benefit of solid-organ transplant in the United States.</a> JAMA Surgery. 150 (3), 252-259 (2015).</li><li>Rana, A., Godfrey, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+in+Solid-Organ+Transplantation:+Success+and+Stagnation.">Outcomes in Solid-Organ Transplantation: Success and Stagnation.</a> Texas Heart Institute Journal. 46 (1), 75-76 (2019).</li><li>Meier-Kriesche, H. U., Schold, J. D., Srinivas, T. R., Kaplan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+improvement+in+renal+allograft+survival+despite+a+marked+decrease+in+acute+rejection+rates+over+the+most+recent+era.">Lack of improvement in renal allograft survival despite a marked decrease in acute rejection rates over the most recent era.</a> American Journal of Transplantation. 4 (3), 378-383 (2004).</li><li>Bagnasco, S. M., Kraus, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+arteritis+in+renal+allografts:+new+takes+on+an+old+lesion.">Intimal arteritis in renal allografts: new takes on an old lesion.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 20 (3), 343-347 (2015).</li><li>Hollis, I. B., Reed, B. N., Moranville, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medication+management+of+cardiac+allograft+vasculopathy+after+heart+transplantation.">Medication management of cardiac allograft vasculopathy after heart transplantation.</a> Pharmacotherapy. 35 (5), 489-501 (2015).</li><li>Verleden, G. M., Raghu, G., Meyer, K. C., Glanville, A. R., Corris, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+classification+system+for+chronic+lung+allograft+dysfunction.">A new classification system for chronic lung allograft dysfunction.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (2), 127-133 (2014).</li><li>Ramzy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+review.">Cardiac allograft vasculopathy: a review.</a> Canadian Journal of Surgery. 48 (4), 319-327 (2005).</li><li>Skoric, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+diagnosis,+therapy,+and+prognosis.">Cardiac allograft vasculopathy: diagnosis, therapy, and prognosis.</a> Croatian Medical Journal. 55 (6), 562-576 (2014).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+Sleeve+Technique+in+a+Mouse+Model+of+Aortic+Transplantation+-+An+Instructional+Video.">Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video.</a> Journal of Visualized Experiments. (128), (2017).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+transplant+arteriosclerosis:+role+of+intercellular+adhesion+molecule-1.">Mouse model of transplant arteriosclerosis: role of intercellular adhesion molecule-1.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 20 (2), 343-352 (2000).</li><li>M&#228;hler Convenor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+mouse,+rat,+hamster,+guinea+pig+and+rabbit+colonies+in+breeding+and+experimental+units.">FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units.</a> Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+p38+MAPK+inhibits+chronic+allograft+vasculopathy.">Blockade of p38 MAPK inhibits chronic allograft vasculopathy.</a> Transplantation. 85 (2), 293-297 (2008).</li><li>Thomas, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SDF-1/CXCR4/CXCR7+is+pivotal+for+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+chronic+allograft+vasculopathy.">SDF-1/CXCR4/CXCR7 is pivotal for vascular smooth muscle cell proliferation and chronic allograft vasculopathy.</a> Transplant International. 28 (12), 1426-1435 (2015).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilirubin:+a+natural+inhibitor+of+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation.">Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation.</a> Circulation. 112 (7), 1030-1039 (2005).</li><li>Segura, A. M., Buja, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+complex+multifactorial+sequela+of+heart+transplantation.">Cardiac allograft vasculopathy: a complex multifactorial sequela of heart transplantation.</a> Texas Heart Institute Journal. 40 (4), 400-402 (2013).</li><li>McDaid, J., Scott, C. J., Kissenpfennig, A., Chen, H., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+animal+models+in+developing+immunosuppressive+agents.">The utility of animal models in developing immunosuppressive agents.</a> European Journal of Pharmacology. 759, 295-302 (2015).</li><li>Shi, C., Russell, M. E., Bianchi, C., Newell, J. B., Haber, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+accelerated+transplant+arteriosclerosis.">Murine model of accelerated transplant arteriosclerosis.</a> Circulation Research. 75 (2), 199-207 (1994).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+minor+histocompatibility+antigens+in+the+development+of+allograft+arteriosclerosis.">Importance of minor histocompatibility antigens in the development of allograft arteriosclerosis.</a> Clinical Immunology and Immunopathology. 80 (3 Pt 1), 273-277 (1996).</li><li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+heterotopic+vascularized+pancreas+transplantation+in+mice+to+assess+ischemia+reperfusion+injury+and+graft+pancreatitis.">A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis.</a> Surgery. 141 (5), 682-689 (2007).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Nakao, A., Ogino, Y., Tahara, K., Uchida, H., Kobayashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+intestinal+transplantation+using+the+cuff+method+in+rats:+a+histopathological+evaluation+of+the+anastomosis.">Orthotopic intestinal transplantation using the cuff method in rats: a histopathological evaluation of the anastomosis.</a> Microsurgery. 21 (1), 12-15 (2001).</li></ol>

השתלת האלופתיה כרונית היא הגורם העיקרי של אובדן השתל מאוחר לאחר השתלת איברים מוצק של הלב וכנראה הכליות והריאות האלושתלים8. עד כה, לא ניתן לפתח משטר תרפויטי מסיבתי על מנת למנוע היווצרות של קו.
הפתופסיולוגיה של קו הוא רב עצרת וכרוך היבטים אימונולוגיים ושאינם אימו...

במהלך ששת העשורים האחרונים, השתלת איברים מוצק התפתחה מהליך ניסיוני לתקן של טיפול לטיפול של כשל איבר בשלב הסופי1. בשל שיפור של סוכנים מיקרוביאלית, טכניקות כירורגי וקידום הגדודים מדכאים, שיעור ההצלחה המוקדמת של השתלת איברים מוצק הוגדלה באופן משמעותי במהלך העשורים האחרונים2.
עם זאת, שיעורי ההישרדות לטווח ארוך לא השתפר באופן משמעותי באותו אופן3. התפתחות קו הוא הגורם העיקרי הגבלת הישרדות לטווח ארוך4,5,6. פתולוגיה זו מתאפיינת היווצרות של שכבה מרכזית המורכבת של תאים שריר חלק, המוביל היצרות מתקדמת של הכלי ואת malperfusion ברציפות של האיבר המוצק מושתלים. ב השתלות לב המטופלים, נגעים קו ניתן לאבחן עד 75% מהחולים 3 שנים לאחר השתלת7.
. הפתופסולוגיה של קו-קו עדיין לא מובן לגמרי זה נראה קשור לגורמים אימונולוגיים ושאינם אימונולוגיים רבים, המובילים לנזק אנדותל עם הפעלה אנדותל הבאים בתפקוד בלתי מתפקדים8. עד כה, לא קיימת אפשרות טיפול סיבתי למניעת קו, ומדגיש את הצורך במודל בעל חיים קטן שהוא מהווה כדי ללמוד את היווצרות והטיפול הפוטנציאלי של קו.
עם שימוש במודלים השתלת אבי העורקים murine, קו כמו נגעים ניתן לראות 4 שבועות לאחר ההשתלה. נגעים אלה מורכבים בעיקר של תאי שריר וסקולריים חלקה, ובכך, דמוי הפתולוגיה האנושית. בגלל מגוון רחב של טרנסגניים לנקוש עכברים, השימוש במודלים העכבר בפתווגיות הקשורות להשתלות מציע הזדמנות ייחודית לזהות אפשרויות טיפוליות חדשות ולהבין את התפתחותם. בשל הקוטר הקטן של כלי הושתל עם זאת, השימוש במודלים העכבר משויך בדרך כלל עם עקומות למידה ארוכות ושיעור התחלתי בסיבוך גבוה9. עם המבוא של טכניקת השרוול שאינה תפר, החלק המאתגר ביותר של המבצע ניתן להקל וקוטר ההשקה נשמר באופן קבוע10,11.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balb-c Mice (H2-d)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 028</td>
			<td>Donor animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar cautery system</td>
			<td>ERBE</td>
			<td>ICC 50 / 20195-023</td>
			<td>Bipolar cautery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J (H-2b)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 027</td>
			<td>Recipient animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Needle Holders</td>
			<td>FST</td>
			<td>12501-12</td>
			<td>Needle Holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted-Mosquito Forceps</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>BH111R</td>
			<td>Curved Clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Polyimide Tubing</td>
			<td>Nordson MEDICAL</td>
			<td>141-0031</td>
			<td>Cuff-Material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefines</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td>Micro Vessel Clip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Adson Forceps (serrated)</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Standard Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td>Clipapplicator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Forceps - SuperGrip Tips (Angled 45&#176;)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00649-11</td>
			<td>Fine Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vessel Dilating Forceps - Angled 10&#176; (Tip diameter 0.2 mm)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00125-11</td>
			<td>Vesseldilatator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schott VisiLED Set</td>
			<td>Schott</td>
			<td>MC 1500 / S80-55</td>
			<td>Light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>SteREO Discovery.V8</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Fine Scissors / Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>FST</td>
			<td>91460-11 / 14001-12</td>
			<td>Standard Sissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15004-08</td>
			<td>Microsissors (curved)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15003-08</td>
			<td>Microsissors (straight)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique

עם המבוא של פרוטוקולים מדכאים חיסוני חזק, מקדמות נפרדות אפשריות במניעה וטיפול של פרקים דחייה חריפה. עם זאת, רק שיפור מינורי בתוצאות לטווח ארוך של איברים מוצקים מושתלים ניתן לצפות בעשורים האחרונים. בהקשר זה, השתלת האלופתיה כרונית (קו) עדיין מייצגת את הגורם המוביל לכשל איברים מאוחר בניתוחי לב, כליות וריאות.
עד כה, הפתוגנזה הבסיסית של התפתחות ה-קו לא ברור, המסביר מדוע אסטרטגיות הטיפול היעילות חסרות כרגע ומדגישים את הצורך במודלים ניסיוניים רלוונטיים כדי ללמוד את הפתופסיולוגיה הבסיסית המובילה ל . מערך קו הפרוטוקול הבא מתאר מודל הטרוההטרוסקסואלים הצוואר הרחם השתלת המודל באמצעות טכניקת שונה תפר השרוול. בטכניקה זו, קטע של העורקים הבית החזה הוא ממוקם בתוך העורק הראשי הנכון העורק. עם שימוש בטכניקת השרוול שאינו תפר, קל ללמוד ולאפשר מודל ניתן ליצור, למזער את הטרוגניות האפשרי של מיקרו מיקרוסטוסים כלי דם מסושמים.

במודל השתלת חוסר התאמה מלאה של MHC, ניתן לראות את השכבה 4 שבועות לאחר ההשתלה (איור 2). שכבה זו מורכבת בעיקר של תאי כלי דם חלק שרירים כמו כתמי אימונוהיסטולוגי עבור SM22 (סמן סלקטיבי עבור תאים בוגרים החלקה כלי דם) נחשף. כאמור בעבר, אלה תאים שריר וסקולריים חלקה הם pathognomonic לנגעים לראות ...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

כאן, אנו מציגים פרוטוקול של הטרוסקסואלים השתלת אבי העורקים בעכברים באמצעות שימוש בטכניקת השרוול שאינו תפר במודל מורטין הצווארי. מודל זה יכול לשמש כדי ללמוד את הפתולוגיה הבסיסית של השתלת האלופתיה כרונית (קו) והוא יכול לעזור להעריך סוכנים רפואיים חדשים כדי למנוע את הקמתה.

מורי צוואר הרחם מורנה השתלת מודל באמצעות שינוי שאינו תפר שיטה השרוול

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

אני מרטין רייל ממעבדות המחקר של המחלקה הכללית, ניתוחי הקרביים וההשתלות של LMU במינכן. היום אנחנו הולכים להראות לך מודל השתלת אבי היאור הטרוטופי מורין באמצעות טכניקת שרוול לא תפר שונה. ראשית, הרדמה של החיה המטופל עם הזרקה תוך-פרטית של midazolam, medetomidine ופנטניל.קליפ כל השיער של האזור הצדדי צוואר הרחם עם קוצץ שיער חשמלי עבור בעלי חיים קטנים ולהחיל משחה עיניים עם צמר גפן כדי למנוע את העיניים להתייבש במהלך ההליך. מניחים את החיה בתקרת העל-חוש על משטח חימום מתחת למיקרוסקופ ומדביקים בעדינות את רגליה לשולחן הניתוחים עם פסי גבס רגישים לעור. להטות את ראשו לאחור ולשפשף את השדה האופרטיבי מספר פעמים עם אלכוהול.הפוך חתך בעור מן החתך הצווארי לתוך הדם התחתון הימני עם מספריים קטנים. הסר את האונה הימנית התחתונה של הבלוטות submandibular באמצעות צריבה דו קוטבית של פדיקל כלי כריתה לאחר מכן עם מספריים מיקרו. הסר את שריר sternocleidomastoid הימני באמצעות צריבה דו קוטבית של החלק העליון והתחתון כריתה לאחר מכן עם מספריים מיקרו כדי לקבל גישה לעורק הראשי המשותף.לגייס את העורק הראשי נפוץ ככל האפשר distally ו proximally ככל האפשר על ידי משיכת רקמת החיבור שמסביב לגזרים עם מטליות בסדר. לקשור שתי ליגטורות משי 7-0 עם מרחק מינימלי אחד בין השני סביב אמצע העורק הראשי המשותף ולחנות את העורק הראשי המשותף עם מספריים מיקרו בסדר בין הקשירה. מעבירים את הקצה המלקחיים הפרוקסימלי דרך השרוול ומסדרים אותו עם מלחצי עורקים קטנים.הסר את הקשירה עם מספריים מיקרו עדין קרוב יותר קשירה ככל האפשר לשטוף את לומן עם מלוחים heparinized עם מחט 30 מד תוך כדי טיפול לא לפגוע בקירות כלי. מנפחים את הלומן הפתוח באמצעות דילאטורים כלי דם עדינים ומכוונים את גדם התרדמה מעל השרוול על ידי משיכתו בעדינות מעל צינור הפוליאמיד. מיד לתקן את התרפיד הפוך עם לולאת משי 7-0 קשורה מראש באופן רופף.בצע את אותו הליך בצד השני של העורק הראשי עם השרוול השני. מעבירים את הקצה הדיסטלי דרך השרוול ומסדרים אותו עם מלחצי עורקים קטנים. הסר את הקשירה עם מספריים מיקרו עדין קרוב יותר קשירה ככל האפשר לשטוף את לומן עם מלוחים heparinized עם מחט 30 מד תוך כדי טיפול לא לפגוע בקירות כלי.מנפחים את הלומן הפתוח באמצעות דילאטורים כלי דם עדינים ומכוונים את גדם התרדמה מעל השרוול על ידי משיכתו בעדינות מעל צינור הפוליאמיד. מיד לתקן את התרפיד הפוך עם לולאת משי 7-0 קשורה מראש באופן רופף. מניחים את החיה המטופלת בצד ומלחים את שני השלישים העליונים עם מלוחים עד שמקטע בית הישורי מושחל.הרדמה של עכבר התורם באותו אופן כמו החיה הנמען. קוצץ את כל השיער של אזור הבטן ובית החזה עם קוצץ שיער חשמלי לבעלי חיים קטנים ולהחיל משחה עיניים עם צמר גפן כדי למנוע את העיניים להתייבש במהלך ההליך. מניחים את החיה בתקרת העל-חוש על משטח חימום מתחת למיקרוסקופ ומדביקים בעדינות את רגליה לשולחן הניתוחים עם פסי גבס רגישים לעור.לשפשף את השדה האופרטיבי מספר פעמים עם אלכוהול. בצע לפרוטומיה בטן קו האמצע עם מספריים קטנים ולדחוף את המעיים מעט כלפי מעלה כדי לחשוף את ואנה קאווה נחות. להזריק IVC עם cc אחד של מלוחים heparinized באמצעות מחט מד 30.חותכים את אב העורקים הבטן IVC מתחת לעורקי הכליה עם מספריים קטנים כדי exsanguinate החיה התורמת. מניחים באופן רופף דחיסה לתוך הבטן כדי לספוג את הדם. בצע כריתת חזה באמצעות הסחה דו-צדדית של הצלעות עם מספריים ולהטות את קיר החזה לפנים עם מהדק כירורגי כדי לחשוף את mediastinum.חותכים את IVC ואת הוושט ישירות מעל הסרעפת עם מספריים מיקרו. הסר את הלב ואת הריאות על ידי ציוץ אותם כלפי מעלה עם מטלפים מחזיקים את IVC לחתוך ו הוושט ולאחר מכן להוציא אותם עם מספריים מיקרו מהבסיס כדי לקבל גישה בית החזה ואת mediastinum הגב. לגייס את אבי העורקים מבית החזה מן הרקמה הסובבת אותו על ידי פיזור רקמת החיבור שמסביב ושומן עם מטלחיים עדין תוך הקפדה לא לפגוע בעורקים בין צלטליים.לצרוב את כל הענפים מאבי בית החזה עם מלקחיים דו קוטביים צרובים ולבלו את קטע האאורטיק בין הסרעפת לבין קשת בית האביסטר באמצעות מספריים מיקרו. לשטוף את קטע העורקים excised עם מלוחים heparinized עם מחט 30 מד תוך כדי טיפול לא לפגוע בקירות כלי השיט כדי להסיר את כל הדם שנותרו או קרישי ולהעביר את השתל לחיה המטופל. משוך את הקצה הפרוקסימלי של קטע אבי העורק התורם מעל השרוול הפרוקסימלי על גבי העורק הראשי ההפוך עם מלקחי עדין ומיד לתקן אותו עם לולאת משי 7-0 קשורה מראש.חותכים את הקצה החופשי הדיסטלי של שתל אבי העורק עם מספריים זעירים כך שאורך השתל מתאים למרחק בין שני האזיקים. משוך את הקצה הדיסטלי של קטע אבי העורק התורם מעל השרוול הדיסטלי על גבי העורק הראשי ההפוך עם מלקחים עדין ומיד לתקן אותו עם לולאת משי 7-0 קשורה מראש. הסר תחילה את המהדק הדיסטלי כדי לאפשר תדלוק מדרדר.לאחר השגת כבד, להסיר את מהדק פרוקסימלי כדי להשלים את anastomosis. לבסוף, לסגור את הפצע עם 6-0 תפר מתמשך. לאחר 28 ימים, בעלי החיים מוקרבים והשתלים נשמרים להכתמות היסטולוגיות.כפי שמוצג אלה ואן-גיסון של כתמים של קטעי אב העורק, MHC מלא תואמים allografted aortas מתורמים Balb / c לשישה נמענים שחורים פיתחו היפרפלזיה ניאו-אינטימיאלית משמעותית וכתוצאה מכך צמצום זוהר. מצד שני, השתלות סינדרטיק סינגניות משישה תורמים שחורים לשישה נמענים שחורים פיתחו רק היפרפלזיה ניאו-אינטימית קטנה. כתמי immunofluorescence נגד SM22, סמן לתאי שריר חלקים בכלי הדם, כפי שמוצג בתמונה זו פלואורסצנטיות ירוקה, מדגים כי neointima מורכב בעיקר של תאי שריר חלקים בכלי הדם.השתלת אאורטיק מורין משמש מודל להשתלה כרונית vasculopathy שהוא הגורם השכיח ביותר של כישלון השתל מאוחר. בהשוואה למודל הבטן אורתוטופית, טכניקת השרוולים המתוקנת שלנו פחות מיקרוכירורגית תובענית המובילה לקצב הצלחה גבוה. בנוסף, בשל הקוטר המתמיד של השרוול, וריאציות של anastomosis כלי הדם כפי שניתן לראות במודלים אחרים השתלה מיקרוכירורגית ניתן להזניח.יתר על כן, הזמן האיסכמי החם נשמר קבוע בכל קבוצות הניסוי כאשר החיה המטופלת מוכנה תחילה לפני שהקטע של בית הישורי מושתל. המודל השונה שלנו אמור לעזור למעבדות אחרות להקים השתלת אורטי מורין.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

דגם Murine חדש של מפרצת אבי העורקים תיקון Endovascular

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

עכברי צוואר הרחם לב השתלת דגם שימוש בטכניקת חפתים השתנה

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

פרפלגיה Reproducable ידי בית חזה אבי העורקים ספיגה במודל Murine של חוט השדרה איסכמיה reperfusion

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

מודל Murine של חוט השדרה הצווארי פגיעה לחקר פוסט lesional הנשימה Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

טכניקת השתלות Murine Heterotopic לב

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

השתלה של הריאה Valve שימוש במודל עכבר של Heterotopic לב והשתלות

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified BergstrÃƒÆ’Ã‚Â¶m Technique

נהלי ביופסיה של שריר שלד אנושי באמצעות טכניקת Bergstrom השתנה

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

השתלת קרנית עכברית: דגם לחקר הצורה נפוצה ביותר של Solid השתלות איברים

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotopic צוואר הרחם לב השתלה בעכברים

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...