Name: murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique
Uploaded: 2019-11-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Alle eksperimenter ble utført i henhold til retningslinjene for den tyske dyrevelferd loven (TierSchG.) (AZ: 55.2-1-54-2532. Vet_02-80-2015).
1. Animal bolig
<ol><li>For eksperimenter bruker du hann C57BL/6-og BALB/c-mus som veier 20-25 g med C57BL/6-mus som mottaker dyr og BALB/c-mus som donor dyrene.</li>
	<li>Kjøp dyrene og huset i en barriere patogen-fritt anlegg, i samsvar med FELASA retningslinjer for helse overvåking12.</li>
	<li>Hold mus i standard Makrolon...

<ol>
	<li>Rana, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+benefit+of+solid-organ+transplant+in+the+United+States.">Survival benefit of solid-organ transplant in the United States.</a> JAMA Surgery. 150 (3), 252-259 (2015).</li><li>Rana, A., Godfrey, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+in+Solid-Organ+Transplantation:+Success+and+Stagnation.">Outcomes in Solid-Organ Transplantation: Success and Stagnation.</a> Texas Heart Institute Journal. 46 (1), 75-76 (2019).</li><li>Meier-Kriesche, H. U., Schold, J. D., Srinivas, T. R., Kaplan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+improvement+in+renal+allograft+survival+despite+a+marked+decrease+in+acute+rejection+rates+over+the+most+recent+era.">Lack of improvement in renal allograft survival despite a marked decrease in acute rejection rates over the most recent era.</a> American Journal of Transplantation. 4 (3), 378-383 (2004).</li><li>Bagnasco, S. M., Kraus, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+arteritis+in+renal+allografts:+new+takes+on+an+old+lesion.">Intimal arteritis in renal allografts: new takes on an old lesion.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 20 (3), 343-347 (2015).</li><li>Hollis, I. B., Reed, B. N., Moranville, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medication+management+of+cardiac+allograft+vasculopathy+after+heart+transplantation.">Medication management of cardiac allograft vasculopathy after heart transplantation.</a> Pharmacotherapy. 35 (5), 489-501 (2015).</li><li>Verleden, G. M., Raghu, G., Meyer, K. C., Glanville, A. R., Corris, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+classification+system+for+chronic+lung+allograft+dysfunction.">A new classification system for chronic lung allograft dysfunction.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (2), 127-133 (2014).</li><li>Ramzy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+review.">Cardiac allograft vasculopathy: a review.</a> Canadian Journal of Surgery. 48 (4), 319-327 (2005).</li><li>Skoric, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+diagnosis,+therapy,+and+prognosis.">Cardiac allograft vasculopathy: diagnosis, therapy, and prognosis.</a> Croatian Medical Journal. 55 (6), 562-576 (2014).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+Sleeve+Technique+in+a+Mouse+Model+of+Aortic+Transplantation+-+An+Instructional+Video.">Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video.</a> Journal of Visualized Experiments. (128), (2017).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+transplant+arteriosclerosis:+role+of+intercellular+adhesion+molecule-1.">Mouse model of transplant arteriosclerosis: role of intercellular adhesion molecule-1.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 20 (2), 343-352 (2000).</li><li>M&#228;hler Convenor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+mouse,+rat,+hamster,+guinea+pig+and+rabbit+colonies+in+breeding+and+experimental+units.">FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units.</a> Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+p38+MAPK+inhibits+chronic+allograft+vasculopathy.">Blockade of p38 MAPK inhibits chronic allograft vasculopathy.</a> Transplantation. 85 (2), 293-297 (2008).</li><li>Thomas, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SDF-1/CXCR4/CXCR7+is+pivotal+for+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+chronic+allograft+vasculopathy.">SDF-1/CXCR4/CXCR7 is pivotal for vascular smooth muscle cell proliferation and chronic allograft vasculopathy.</a> Transplant International. 28 (12), 1426-1435 (2015).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilirubin:+a+natural+inhibitor+of+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation.">Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation.</a> Circulation. 112 (7), 1030-1039 (2005).</li><li>Segura, A. M., Buja, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+complex+multifactorial+sequela+of+heart+transplantation.">Cardiac allograft vasculopathy: a complex multifactorial sequela of heart transplantation.</a> Texas Heart Institute Journal. 40 (4), 400-402 (2013).</li><li>McDaid, J., Scott, C. J., Kissenpfennig, A., Chen, H., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+animal+models+in+developing+immunosuppressive+agents.">The utility of animal models in developing immunosuppressive agents.</a> European Journal of Pharmacology. 759, 295-302 (2015).</li><li>Shi, C., Russell, M. E., Bianchi, C., Newell, J. B., Haber, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+accelerated+transplant+arteriosclerosis.">Murine model of accelerated transplant arteriosclerosis.</a> Circulation Research. 75 (2), 199-207 (1994).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+minor+histocompatibility+antigens+in+the+development+of+allograft+arteriosclerosis.">Importance of minor histocompatibility antigens in the development of allograft arteriosclerosis.</a> Clinical Immunology and Immunopathology. 80 (3 Pt 1), 273-277 (1996).</li><li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+heterotopic+vascularized+pancreas+transplantation+in+mice+to+assess+ischemia+reperfusion+injury+and+graft+pancreatitis.">A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis.</a> Surgery. 141 (5), 682-689 (2007).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Nakao, A., Ogino, Y., Tahara, K., Uchida, H., Kobayashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+intestinal+transplantation+using+the+cuff+method+in+rats:+a+histopathological+evaluation+of+the+anastomosis.">Orthotopic intestinal transplantation using the cuff method in rats: a histopathological evaluation of the anastomosis.</a> Microsurgery. 21 (1), 12-15 (2001).</li></ol>

Kronisk allograft vasculopathy er den viktigste årsaken til sen pode tap etter solid organ transplantasjon av hjertet og trolig nyre-og lunge allograft8. Hittil kan ingen årsaks terapeutisk regime utvikles for å hindre dannelse av CAV.
Den patofysiologi av CAV er multifaktoriell og innebærer immunologiske og ikke-immunologiske aspekter16. Bruk av gnager modeller i transplantasjon har vært avgjørende for å forstå den underliggende patofysi...

I løpet av de siste seks ti årene, har solid organ transplantasjon utviklet seg fra en eksperimentell prosedyre til en standard for omsorg for behandling av sluttfasen organ svikt1. På grunn av forbedring av antimikrobielle midler, kirurgiske teknikker og avansement i immunsuppressiv regimenter, tidlig suksess rate av solid organ transplantasjon har betydelig økt de siste ti årene2.
Men, langsiktige pode overlevelse har ikke signifikant forbedret på samme måte3. Utviklingen av CAV er den viktigste faktoren som begrenser lang tids overlevelse4,5,6. Patologi kjennetegnes ved dannelsen av et konsentrisk neointimal lag bestående av glatte muskelceller, som fører til progressiv innsnevring av fartøyet og påfølgende malperfusion av det transplanterte solide organet. I hjertet transplantasjon mottakere, kan CAV lesjoner bli diagnostisert i opptil 75% av pasientene 3 år etter transplantasjon7.
Den patofysiologi av CAV er ikke fullt ut forstått ennå. Det synes å være relatert til mange immunologiske og ikke-immunologiske faktorer, fører til endothelial Kader med påfølgende endothelial aktivisering og dysfunksjon8. Hittil er ingen årsaks behandlingsalternativ finnes for forebygging av CAV, understreker behovet for en reproduserbar liten dyr modell for å studere dannelsen og potensiell behandling av CAV.
Med bruk av murine aorta transplantasjon modeller, CAV som lesjoner kan sees 4 uker etter transplantasjon. Disse lesjoner består hovedsakelig av vaskulær glatte muskelceller, og dermed ligner den menneskelige patologi. På grunn av et bredt utvalg av transgene og knock ut mus, tilbyr bruk av musen modeller i transplantasjon forbundet patologi en unik mulighet til å identifisere nye terapeutiske alternativer og forstå deres utvikling. På grunn av den lille diameteren på de transplanterte fartøyene er imidlertid bruken av musemodeller ofte forbundet med lange lærings kurver og en innledende høy komplikasjon rate9. Med innføringen av ikke-Sutur cuff teknikken, kan denne mest utfordrende delen av operasjonen bli lettere og diameteren på anastomose holdes konstant10,11.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balb-c Mice (H2-d)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 028</td>
			<td>Donor animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar cautery system</td>
			<td>ERBE</td>
			<td>ICC 50 / 20195-023</td>
			<td>Bipolar cautery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J (H-2b)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 027</td>
			<td>Recipient animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Needle Holders</td>
			<td>FST</td>
			<td>12501-12</td>
			<td>Needle Holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted-Mosquito Forceps</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>BH111R</td>
			<td>Curved Clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Polyimide Tubing</td>
			<td>Nordson MEDICAL</td>
			<td>141-0031</td>
			<td>Cuff-Material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefines</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td>Micro Vessel Clip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Adson Forceps (serrated)</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Standard Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td>Clipapplicator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Forceps - SuperGrip Tips (Angled 45&#176;)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00649-11</td>
			<td>Fine Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vessel Dilating Forceps - Angled 10&#176; (Tip diameter 0.2 mm)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00125-11</td>
			<td>Vesseldilatator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schott VisiLED Set</td>
			<td>Schott</td>
			<td>MC 1500 / S80-55</td>
			<td>Light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>SteREO Discovery.V8</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Fine Scissors / Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>FST</td>
			<td>91460-11 / 14001-12</td>
			<td>Standard Sissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15004-08</td>
			<td>Microsissors (curved)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15003-08</td>
			<td>Microsissors (straight)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique

Med innføringen av kraftige immunsuppressiv protokoller, distinkte fremskritt er mulig i forebygging og behandling av akutte avvisning episoder. Men, bare mindre bedring i de langsiktige resultatene av transplanterte solide organer kan observeres de siste ti årene. I denne sammenhengen, kronisk allograft vasculopathy (CAV) representerer fortsatt den ledende årsak til sent organ svikt i hjerte, nyre og lunge transplantasjon.
Hittil er den underliggende patogenesen av CAV-utbyggingen uklart, og forklarer hvorfor effektive behandlings strategier for tiden mangler og understreker et behov for relevante eksperimentelle modeller for å studere de underliggende patofysiologi som fører til CAV-formasjon. Følgende protokoll beskriver en murine heterotopic cervical aorta transplantasjon modell ved hjelp av en modifisert ikke-Sutur cuff teknikk. I denne teknikken er et segment av bryst aorta interpositioned i den høyre felles hals puls arterien. Med bruk av ikke-Sutur cuff teknikk, en lett å lære og reproduserbar modell kan etableres, minimere mulige heterogenitet av sutured vaskulær mikro anastomoser.

I fullt MHC-konflikt transplantasjon modell, en konsentrisk neointimal lag kan sees 4 uker etter transplantasjon (figur 2). Dette laget består hovedsakelig av vaskulære glatte muskelceller som immunohistological farging for SM22 (en selektiv markør for modne vaskulære glatte muskelceller) avslørt. Som nevnt før, disse vaskulære glatte muskelceller er Patognomonisk for lesjoner sett i kroniske allograft vasculopathy. For ytterligere analyser, bør aorta segmenter være delt og beiset a...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Her presenterer vi en protokoll for heterotopic aorta transplantasjon i mus ved hjelp av ikke-Sutur cuff teknikk i en cervical murine modell. Denne modellen kan brukes til å studere den underliggende patologi av kronisk allograft vasculopathy (CAV) og kan bidra til å evaluere nye terapeutiske midler for å hindre dannelsen.

Murine cervical aorta transplantasjon modell ved hjelp av en modifisert ikke-Sutur cuff Technique

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Jeg er Martin Ryll fra forskningslaboratorier ved Institutt for generell, visceral og transplantasjon kirurgi av LMU i München. I dag skal vi vise deg en murine heterotopisk aortatransplantasjonsmodell ved hjelp av en modifisert ikke-sutur mansjettteknikk. Først bedøve mottaker dyret med en intraperitoneal injeksjon av midazolam, medetomidin og fentanyl.Klipp alt hår i cervical lateral regionen med en elektrisk hårklipper for små dyr og bruke oftalmisk salve med bomullspinner for å hindre øynene i å tørke ut under prosedyren. Plasser dyret i liggende stilling på en varmepute under mikroskopet og teip forsiktig beina til operasjonsbordet med hudfølsomme gipsstrimler. Vipp hodet tilbake og skrubb det operative feltet flere ganger med alkohol.Lag et hud snitt fra hals snitt til høyre lavere mandible med liten saks. Fjern høyre nedre flik av submandibulærkjertelen via bipolar cautery av fartøyets pedicle og påfølgende eksisjon med mikrosaks. Fjern høyre sternocleidomastoid muskel via bipolar cautery av øvre og nedre del og påfølgende eksisjon med mikro saks for å få tilgang til den vanlige halspulsåren.Mobiliser den vanlige halspulsåren så langt distally og proksimalt som mulig ved å trekke det omkringliggende bindevevet fra hverandre med fine tang. Bind to 7-0 silke ligaturer med minimal avstand mellom hverandre rundt midten av den vanlige halspulsåren og transect felles halspulsåren med fin mikro saks mellom ligaturene. Pass den proksimale ligated enden gjennom mansjetten og fest den med en liten arterieklemme.Fjern ligaturen med fin mikrosaks så nær ligaturen som mulig og skyll lumen med heparinisert saltvann med en 30 gauge nål mens du tar vare på å ikke skade karveggene. Distend den åpne lumen ved hjelp av fine vaskulære dilatatorer og inverter halsstubben over mansjetten ved å trekke den forsiktig over polyamidrøret. Fest umiddelbart den inverterte halsen med en løst forhåndsbundet 7-0 silkesløyfe.Utfør samme prosedyre i den andre enden av halspulsåren med den andre mansjetten. Pass den distale ligated enden gjennom mansjetten og fest den med en liten arterieklemme. Fjern ligaturen med fin mikrosaks så nær ligaturen som mulig og skyll lumen med heparinisert saltvann med en 30 gauge nål mens du tar vare på å ikke skade karveggene.Distend den åpne lumen ved hjelp av fine vaskulære dilatatorer og inverter halsstubben over mansjetten ved å trekke den forsiktig over polyamidrøret. Fest umiddelbart den inverterte halsen med en løst forhåndsbundet 7-0 silkesløyfe. Sett mottakerdyret til side og fukt den øvre to tredjedelen med saltvann til aortasegmentet er utjevn.Bedøve donormusen på samme måte som mottakerdyret. Klipp alt hår i buk- og thoraxområdet med en elektrisk hårklipper for små dyr og bruk oftalmisk salve med bomullspinner for å hindre at øynene tørker ut under prosedyren. Plasser dyret i liggende stilling på en varmepute under mikroskopet og teip forsiktig beina til operasjonsbordet med hudfølsomme gipsstrimler.Skrubb det operative feltet flere ganger med alkohol. Utfør en midtlinjet abdominal laparotomi med liten saks og skyv tarmene litt oppover for å avsløre den dårligere vena cava. Injiser IVC med en cc heparinisert saltvann ved hjelp av en 30 gauge nål.Klipp bukaorta og IVC under nyrearteriene med liten saks for å ekssanguminere donordyret. Legg løst en komprimering i magen for å absorbere blodet. Utfør en thoracotomi via bilateral avledning av ribbeina med saks og vipp fremre brystveggen kranielt med en kirurgisk klemme for å avsløre mediastinum.Klipp IVC og spiserøret rett over membranen med mikrosaks. Fjern hjertet og lungene ved å titrere dem oppover med tang som holder kuttet IVC og spiserøret og deretter excising dem med mikro saks fra basen for å få tilgang til thorax aorta og dorsal mediastinum. Mobiliser thorax aorta fra det omkringliggende vevet ved å trekke fra hverandre det omkringliggende bindevevet og fettet med fine tang samtidig som du er forsiktig så du ikke skader noen interkostalromarterier.Cauterize alle grener fra thorax aorta med bipolar cautery tang og avgiftsdirektoratet aorta segmentet mellom membranen og aorta buen ved hjelp av mikro saks. Skyll det utskåret aortasegmentet med heparinisert saltvann med en 30 gauge nål mens du ikke må skade karveggene for å fjerne gjenværende blod eller blodpropper og overføre transplantatet til mottakerdyret. Trekk den proksimale enden av donorasortasegmentet over den proksimale mansjetten på toppen av den inverterte halspulsåren med fine tang og fest det umiddelbart med en løst forhåndsbundet 7-0 silkesløyfe.Trim den distale frie enden av aortagrafen med mikrosaks, slik at graftlengden passer til avstanden mellom de to mansjettene. Trekk den distale enden av donoraortasegmentet over den distale mansjetten på toppen av den inverterte halspulsåren med fine tang og fest det umiddelbart med en løst forhåndsbundet 7-0 silkesløyfe. Fjern den distale klemmen først for å tillate retrograd perfusjon.Etter å ha oppnådd hemostase, fjern den proksimale klemmen for å fullføre anastomosen. Til slutt lukker du såret med 6-0 kontinuerlig sutur. Etter 28 dager blir dyrene ofret og transplantatene bevart for histologisk farging.Som vist i disse Van-Giesons flekker av aorta seksjoner, fullt MHC mismatched allografted aortas fra Balb / c givere til svarte seks mottakere utviklet en betydelig neointimal hyperplasi resulterer i luminal innsnevring. På den annen side utviklet syngenic aortatransplantasjoner fra svarte seks donorer til svarte seks mottakere bare lite neointimal hyperplasi. Immunofluorescensfarging mot SM22, en markør for vaskulære glatte muskelceller, som vist på dette bildet i grønn fluorescens, viser at neointima hovedsakelig består av vaskulære glatte muskelceller.Den murine aortatransplantasjon fungerer som en modell for kronisk transplantasjon vaskulopati som er den vanligste årsaken til sen pode svikt. Sammenlignet med den ortotopiske bukmodellen er vår modifiserte mansjettteknikk mindre mikrokirurgisk krevende som fører til en høy suksessrate. I tillegg, på grunn av den konstante diameteren på mansjetten, kan variasjoner av vaskulær anastomose som sett i andre mikrokirurgiske transplantasjonsmodeller bli neglisjert.Videre holdes den varme iskemiske tiden konstant gjennom de eksperimentelle gruppene, da mottakerdyret tilberedes først før aortasegmentet ekspenseres. Vår modifiserte modell bør hjelpe andre laboratorier med å etablere murine aortatransplantasjon.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

En ny murine modell av Endovascular aortaaneurisme Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Murint Cervical hjertetransplantasjon Model Ved hjelp av en modifisert Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproduserbar Paraplegi av Thoracic Aorta Okklusjon i en Muse Model of Spinal Cord iskemi-reperfusjon

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

En Murint Model of Cervical Spinal Cord Injury å studere Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

Murint Heterotop hjertetransplantasjon Teknikk

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Transplantasjon av Pulmonary Valve Bruke en mus modell av Heterotop hjertetransplantasjon

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified BergstrÃƒÆ’Ã‚Â¶m Technique

Menneskelige skjelettmuskelbiopsi prosedyrer ved hjelp av endret Bergström Technique

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Murine Hornhinnen Transplantasjon: En modell for å studere den vanligste formen for organtransplantasjon

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotop Cervical hjertetransplantasjon i Mus

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...