Name: murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique
Uploaded: 2019-11-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Alla experiment utfördes enligt anvisningarna av tysken djurvälfärd agerar (TierSchG.) (AZ: 55,2-1-54-2532. Vet_02-80-2015).
1. djur hus
<ol><li>För experiment, Använd manliga C57BL/6 och BALB/c möss som väger 20-25 g med C57BL/6 möss som mottagar djur och BALB/c möss som donatordjur.</li>
	<li>Köpa djuren och hus i en barriär patogen fri anläggning, i enlighet med FELASA riktlinjer för hälsoövervakning12.</li>
	<li>Håll mössen i standard Makrolon bur...

<ol>
	<li>Rana, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+benefit+of+solid-organ+transplant+in+the+United+States.">Survival benefit of solid-organ transplant in the United States.</a> JAMA Surgery. 150 (3), 252-259 (2015).</li><li>Rana, A., Godfrey, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+in+Solid-Organ+Transplantation:+Success+and+Stagnation.">Outcomes in Solid-Organ Transplantation: Success and Stagnation.</a> Texas Heart Institute Journal. 46 (1), 75-76 (2019).</li><li>Meier-Kriesche, H. U., Schold, J. D., Srinivas, T. R., Kaplan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+improvement+in+renal+allograft+survival+despite+a+marked+decrease+in+acute+rejection+rates+over+the+most+recent+era.">Lack of improvement in renal allograft survival despite a marked decrease in acute rejection rates over the most recent era.</a> American Journal of Transplantation. 4 (3), 378-383 (2004).</li><li>Bagnasco, S. M., Kraus, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+arteritis+in+renal+allografts:+new+takes+on+an+old+lesion.">Intimal arteritis in renal allografts: new takes on an old lesion.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 20 (3), 343-347 (2015).</li><li>Hollis, I. B., Reed, B. N., Moranville, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medication+management+of+cardiac+allograft+vasculopathy+after+heart+transplantation.">Medication management of cardiac allograft vasculopathy after heart transplantation.</a> Pharmacotherapy. 35 (5), 489-501 (2015).</li><li>Verleden, G. M., Raghu, G., Meyer, K. C., Glanville, A. R., Corris, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+classification+system+for+chronic+lung+allograft+dysfunction.">A new classification system for chronic lung allograft dysfunction.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (2), 127-133 (2014).</li><li>Ramzy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+review.">Cardiac allograft vasculopathy: a review.</a> Canadian Journal of Surgery. 48 (4), 319-327 (2005).</li><li>Skoric, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+diagnosis,+therapy,+and+prognosis.">Cardiac allograft vasculopathy: diagnosis, therapy, and prognosis.</a> Croatian Medical Journal. 55 (6), 562-576 (2014).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+mouse+aortic+transplant+model+of+chronic+rejection.">Development of a mouse aortic transplant model of chronic rejection.</a> Microsurgery. 16 (2), 110-113 (1995).</li><li>Rowinska, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+Sleeve+Technique+in+a+Mouse+Model+of+Aortic+Transplantation+-+An+Instructional+Video.">Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video.</a> Journal of Visualized Experiments. (128), (2017).</li><li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+transplant+arteriosclerosis:+role+of+intercellular+adhesion+molecule-1.">Mouse model of transplant arteriosclerosis: role of intercellular adhesion molecule-1.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 20 (2), 343-352 (2000).</li><li>M&#228;hler Convenor, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+mouse,+rat,+hamster,+guinea+pig+and+rabbit+colonies+in+breeding+and+experimental+units.">FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units.</a> Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+p38+MAPK+inhibits+chronic+allograft+vasculopathy.">Blockade of p38 MAPK inhibits chronic allograft vasculopathy.</a> Transplantation. 85 (2), 293-297 (2008).</li><li>Thomas, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SDF-1/CXCR4/CXCR7+is+pivotal+for+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation+and+chronic+allograft+vasculopathy.">SDF-1/CXCR4/CXCR7 is pivotal for vascular smooth muscle cell proliferation and chronic allograft vasculopathy.</a> Transplant International. 28 (12), 1426-1435 (2015).</li><li>Ollinger, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bilirubin:+a+natural+inhibitor+of+vascular+smooth+muscle+cell+proliferation.">Bilirubin: a natural inhibitor of vascular smooth muscle cell proliferation.</a> Circulation. 112 (7), 1030-1039 (2005).</li><li>Segura, A. M., Buja, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+allograft+vasculopathy:+a+complex+multifactorial+sequela+of+heart+transplantation.">Cardiac allograft vasculopathy: a complex multifactorial sequela of heart transplantation.</a> Texas Heart Institute Journal. 40 (4), 400-402 (2013).</li><li>McDaid, J., Scott, C. J., Kissenpfennig, A., Chen, H., Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+utility+of+animal+models+in+developing+immunosuppressive+agents.">The utility of animal models in developing immunosuppressive agents.</a> European Journal of Pharmacology. 759, 295-302 (2015).</li><li>Shi, C., Russell, M. E., Bianchi, C., Newell, J. B., Haber, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+accelerated+transplant+arteriosclerosis.">Murine model of accelerated transplant arteriosclerosis.</a> Circulation Research. 75 (2), 199-207 (1994).</li><li>Koulack, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+minor+histocompatibility+antigens+in+the+development+of+allograft+arteriosclerosis.">Importance of minor histocompatibility antigens in the development of allograft arteriosclerosis.</a> Clinical Immunology and Immunopathology. 80 (3 Pt 1), 273-277 (1996).</li><li>Maglione, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+heterotopic+vascularized+pancreas+transplantation+in+mice+to+assess+ischemia+reperfusion+injury+and+graft+pancreatitis.">A novel technique for heterotopic vascularized pancreas transplantation in mice to assess ischemia reperfusion injury and graft pancreatitis.</a> Surgery. 141 (5), 682-689 (2007).</li><li>Oberhuber, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+cervical+heart+transplantation+model+using+a+modified+cuff+technique.">Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).</li><li>Nakao, A., Ogino, Y., Tahara, K., Uchida, H., Kobayashi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+intestinal+transplantation+using+the+cuff+method+in+rats:+a+histopathological+evaluation+of+the+anastomosis.">Orthotopic intestinal transplantation using the cuff method in rats: a histopathological evaluation of the anastomosis.</a> Microsurgery. 21 (1), 12-15 (2001).</li></ol>

Kronisk transplantatavstötning vaskulopati är den största orsaken till sena transplantat förlust efter fast organtransplantation av hjärtat och sannolika njurar och lung organtransplantationer8. Hittills kan ingen kausala terapeutisk regim utvecklas för att förhindra bildandet av CAV.
Patofysiologin för CAV är multifaktoriell och involverar immunologiska och icke-immunologiska aspekter16. Användning av gnagare modeller i transplantation...

Under de senaste sex decennierna har solid organtransplantation utvecklats från ett experimentellt förfarande till en standard av vård för behandling av slutstadiet organsvikt1. På grund av förbättringen av antimikrobiella medel, kirurgiska tekniker och avancemang i immunsuppressiva regementen, den tidiga framgången för fast organtransplantation har ökat markant under de senaste decennierna2.
Emellertid, långsiktiga transplantat överlevnad har inte förbättrats signifikant på samma sätt3. Utvecklingen av CAV är den viktigaste faktorn som begränsar överlevnad på lång sikt4,5,6. Denna patologi kännetecknas av bildandet av en koncentrisk neointial skikt bestående av släta muskelceller, vilket leder till progressiv förträngning av fartyget och på varandra följande mal av den transplanterade solida organ. I hjärttransplantation mottagare, CAV lesioner kan diagnostiseras i upp till 75% av patienterna 3 år efter transplantation7.
Den patofysiologi av CAV är inte helt klarlagd ännu. Det verkar vara relaterat till många immunologiska och icke-immunologiska faktorer, vilket leder till endotelial skada med efterföljande endotelial aktivering och dysfunktion8. Hittills finns ingen kausala behandlingsalternativ för förebyggande av CAV, betona behovet av en reproducerbar liten djurmodell för att studera bildandet och potentiell behandling av CAV.
Med hjälp av murina aorta transplantation modeller, CAV som lesioner kan ses 4 veckor efter transplantation. De lesioner består främst av vaskulära glatta muskelceller, därmed, som liknar den mänskliga patologi. På grund av en mängd olika transgena och knock out möss, användning av musmodeller i transplantation associerade patologier erbjuder en unik möjlighet att identifiera nya terapeutiska alternativ och förstå deras utveckling. På grund av den lilla diametern hos de transplanterade fartygen är dock användningen av musmodeller ofta förknippad med långa inlärningskurvor och en initial hög komplikations hastighet9. Med införandet av den icke-sutur manschetten teknik, denna mest utmanande del av operationen kan underlättas och diametern på anastomos hålls konstant10,11.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balb-c Mice (H2-d)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 028</td>
			<td>Donor animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar cautery system</td>
			<td>ERBE</td>
			<td>ICC 50 / 20195-023</td>
			<td>Bipolar cautery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J (H-2b)</td>
			<td>Charles River</td>
			<td>Strain# 027</td>
			<td>Recipient animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsey Needle Holders</td>
			<td>FST</td>
			<td>12501-12</td>
			<td>Needle Holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted-Mosquito Forceps</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>BH111R</td>
			<td>Curved Clamp</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Polyimide Tubing</td>
			<td>Nordson MEDICAL</td>
			<td>141-0031</td>
			<td>Cuff-Material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefines</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-04</td>
			<td>Micro Vessel Clip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Adson Forceps (serrated)</td>
			<td>FST</td>
			<td>11018-12</td>
			<td>Standard Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Serrefine Clamp Applying Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td>Clipapplicator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Forceps - SuperGrip Tips (Angled 45&#176;)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00649-11</td>
			<td>Fine Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S&#38;T Vessel Dilating Forceps - Angled 10&#176; (Tip diameter 0.2 mm)</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>00125-11</td>
			<td>Vesseldilatator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schott VisiLED Set</td>
			<td>Schott</td>
			<td>MC 1500 / S80-55</td>
			<td>Light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope</td>
			<td>ZEISS</td>
			<td>SteREO Discovery.V8</td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Fine Scissors / Surgical Scissors - Sharp-Blunt</td>
			<td>FST</td>
			<td>91460-11 / 14001-12</td>
			<td>Standard Sissors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (curved, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15004-08</td>
			<td>Microsissors (curved)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas-T&#252;bingen Spring Scissors (straight, 8.5 cm)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15003-08</td>
			<td>Microsissors (straight)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine cervical aortic transplantation model using a modified non-suture cuff technique

Med införandet av kraftfulla immunsuppressiva protokoll, distinkta framsteg är möjliga i förebyggande och behandling av akuta avstötning episoder. Men endast smärre förbättringar av de långsiktiga resultaten av transplanterade solida organ kunde observeras under de senaste decennierna. I detta sammanhang, kronisk transplantatavstötning vaskulopati (CAV) representerar fortfarande den vanligaste orsaken till sena organsvikt vid hjärt-, njur-och lungtransplantation.
Hittills är den bakomliggande patogenesen för CAV-utveckling oklar, vilket förklarar varför effektiva behandlingsstrategier för närvarande saknas och betonar ett behov av relevanta experimentella modeller för att studera den bakomliggande patofysiologin som leder till CAV-bildning. Följande protokoll beskriver en murina heterotopisk livmoderhalscancer aorta transplantation modell med en modifierad icke-sutur manschetten teknik. I denna teknik, ett segment av bröstkorg aorta är interpositionerade i rätt gemensamma halspulsådern. Med hjälp av den icke-sutur manschetten teknik, en lätt att lära och reproducerbara modell kan fastställas, minimera den möjliga heterogenitet av sys vaskulär mikro anastomoser.

I den fullständigt MHC-mismatch transplantation modellen, ett koncentriskt neointial skikt kan ses 4 veckor efter transplantation (figur 2). Detta skikt består främst av vaskulära glatta muskelceller som immunohistologisk färgning för SM22 (en selektiv markör för mogna vaskulära glatta muskelceller) avslöjade. Som tidigare nämnts, dessa vaskulära glatta muskelceller är patognomona för lesioner ses i kronisk transplantatavstötning vasculopathy. För ytterligare analyser, aorta ...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique at JoVE.com

Murine Cervical Aortic Transplantation Model using a Modified Non-Suture Cuff Technique

Här presenterar vi ett protokoll för heterotopisk aorta transplantation i möss med den icke-sutur manschetten teknik i en livmoderhalscancer murina modell. Denna modell kan användas för att studera den underliggande patologi kronisk transplantatavstötning vaskulopati (CAV) och kan hjälpa till att utvärdera nya terapeutiska medel för att förhindra dess bildande.

Murina cervikal aorta transplantation modell med en modifierad icke-sutur manschetten teknik

With the introduction of powerful immunosuppressive protocols, distinct advances are possible in the prevention and therapy of acute rejection episodes. ...

Jag är Martin Ryll från forskningslaboratorierna vid institutionen för allmän, visceral och transplantationskirurgi av LMU i München. Idag ska vi visa dig en murine heterotopic aorta transplantation modell med hjälp av en modifierad icke-sutur manschett teknik. Först söva mottagardjuret med en intraperitoneal injektion av midazolam, medetomidin och fentanyl.Klipp alla hår av livmoderhalscancer laterala regionen med en elektrisk hårklippare för små djur och tillämpa oftalmisk salva med bomullspinner för att förhindra att ögonen torkar ut under förfarandet. Placera djuret i ryggläge på en värmedyna under mikroskopet och tejpa försiktigt fast benen i operationsbordet med hudkänsliga gipsremsor. Luta huvudet bakåt och skrubba det operativa fältet flera gånger med alkohol.Gör ett hudanstår från det halspulsådriga snittet till höger nedre kägla med liten sax. Ta bort den högra nedre LOB av submandibular körtel via bipolär cautery av kärlet pedicle och efterföljande excision med mikro sax. Ta bort den högra sternocleidomastoid muskel via bipolär cautery av den övre och nedre delen och efterföljande excision med mikro sax för att få tillgång till den gemensamma halsartären.Mobilisera den gemensamma halspulsådern så långt distally och proximally som möjligt genom att dra den omgivande bindväv isär med fina tång. Tie två 7-0 silke ligaturer med minimalt avstånd mellan varandra runt mitten av den gemensamma halspulsådern och transect den gemensamma halspulsådern med fina mikro saxar mellan ligaturerna. Passera den proximala ligerade änden genom manschetten och fixera den med en liten artärklämma.Ta bort ligaturen med fin mikrosax så nära ligaturen som möjligt och spola lumen med hepariniserad koksaltlösning med en 30 gauge nål samtidigt som man är noga med att inte skada kärlets väggar. Distend den öppna lumen med hjälp av fina vaskulära dilatatorer och invertera halspulsådern stubben över manschetten genom att dra den försiktigt över polyamidröret. Omedelbart fixera den inverterade halspulsådern med en löst förbunden 7-0 silkeslinga.Utför samma procedur på andra änden av halspulsådern med den andra manschetten. Passera den distala ligated änden genom manschetten och fixa den med en liten artärklämma. Ta bort ligaturen med fin mikrosax så nära ligaturen som möjligt och spola lumen med hepariniserad koksaltlösning med en 30 gauge nål samtidigt som man är noga med att inte skada kärlets väggar.Distend den öppna lumen med hjälp av fina vaskulära dilatatorer och invertera halspulsådern stubben över manschetten genom att dra den försiktigt över polyamidröret. Omedelbart fixera den inverterade halspulsådern med en löst förbunden 7-0 silkeslinga. Ställ mottagardjuret åt sidan och återfukta den övre två tredjedelen med saltlösning tills aortasegmentet explanteras.söva donatormusen på samma sätt som mottagardjuret. Klipp alla hår i buken och bröstregionen med en elektrisk hårklippare för små djur och applicera oftalmisk salva med bomullspinner för att förhindra att ögonen torkar ut under förfarandet. Placera djuret i ryggläge på en värmedyna under mikroskopet och tejpa försiktigt fast benen i operationsbordet med hudkänsliga gipsremsor.Skrubba det operativa fältet flera gånger med alkohol. Utför en mittlinjen buken laparotomy med små saxar och tryck tarmarna något uppåt för att exponera sämre vena cava. Injicera IVC med en cc hepariniserad saltlösning med hjälp av en 30 gauge nål.Skär buken aorta och IVC under njurartärerna med små saxar till exsanguinate givaren djuret. Placera löst en kompress i buken för att absorbera blodet. Utför en thoracotomy via bilaterala avledning av revbenen med sax och luta främre bröstväggen cranially med en kirurgisk klämma för att exponera mediastinum.Skär IVC och matstrupen direkt ovanför membranet med mikrosax. Ta bort hjärtat och lungorna genom att titera dem uppåt med tuppar som håller snittet IVC och matstrupe och sedan excising dem med mikro sax från basen för att få tillgång till bröst aorta och dorsala mediastinum. Mobilisera bröst aorta från dess omgivande vävnad genom att dra isär den omgivande bindväv och fett med fina tång samtidigt som man är noga med att inte skada några intercostal artärer.Cauterize alla grenar från bröst aorta med bipolär kauteri tång och punktskatt aorta segmentet mellan mellangärde och aortic arch med hjälp av mikro sax. Spola struket aortasegmentet med hepariniserad koksaltlösning med en 30 gauge nål samtidigt som du är noga med att inte skada kärlväggarna för att avlägsna eventuellt kvarvarande blod eller blodproppar och överföra transplantatet till mottagardjuret. Dra den proximala änden av givaren aorta segmentet över proximala manschetten ovanpå den inverterade halspulsådern med fina tlyck och omedelbart fixa den med en löst pre-bundet 7-0 silke slinga.Trimma den distala fria änden av aortatransplantatet med mikrosax så att transplantatlängden passar avståndet mellan de två manschetterna. Dra den distala änden av givaren aorta segmentet över den distala manschetten ovanpå den inverterade halsartären med fina tlyckor och omedelbart fixera den med en löst förbunden 7-0 silke slinga. Ta bort den distala klämman först för att möjliggöra retrograd perfusion.Efter att ha uppnått hemostas, ta bort den proximala klämman för att slutföra anastomosen. Slutligen, stäng såret med 6-0 kontinuerlig sutur. Efter 28 dagar offras djuren och transplantaten bevaras för histologisk färgning.Som framgår av dessa Van-Giesons färgningar av aortasektioner, helt MHC felmatchade allografted aortas från Balb / c givare till svarta sex mottagare utvecklat en betydande neointimal hyperplasi resulterar i luminal förträngning. Å andra sidan utvecklade syngenic kolorat transplanteringar från svarta sex givare till svarta sex mottagare endast lite neointimal hyperplasi. Immunofluorescens färgning mot SM22, en markör för Vaskulär glatta muskelceller, som visas i denna bild i grön fluorescens, visar att neointima huvudsakligen består av vaskulär glatt muskelceller.Den murine aortic transplantation fungerar som en modell för kronisk transplantation vasculopathy som är den vanligaste orsaken till sena moderplantor misslyckande. I jämförelse med den orthotopic buken modellen, är vår modifierade manschett teknik mindre microsurgical krävande leder till en hög framgång. Dessutom, på grund av den konstant diameter manschetten, variationer av den vaskulära anastomos som ses i andra mikrokirurgiska transplantation modeller kan försummas.Vidare hålls den varma ischemiska tiden konstant i hela försöksgrupperna eftersom mottagardjuret bereds först innan aortasegmentet explanteras. Vår modifierade modell bör hjälpa andra laboratorier att fastställa murin aorta transplantation.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Orthotopic Aorta Transplantation: En Rat modell för att studera utvecklingen av kronisk vaskulopati

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

En ny mus modell av endovaskulär aortaaneurysm reparation

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique

Murina Cervical Heart Transplantation Modell hjälp av en modifierad Cuff Technique

Mouse models are of special interest in research since a wide variety of monoclonal antibodies and commercially defined inbred and knockout strains are ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproducerbar Paraplegia från Thoracic Aorta ocklusion i en musmodell av ryggmärgs ischemi-reperfusion

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

En mus modell av cervikal ryggmärgsskada att studera efter lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

Murina Heterotopisk Heart Transplant Teknik

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Transplantation av pulmonell ventil med hjälp av en musmodell av Heterotopisk hjärttransplantation

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergstr&#246;m Technique

Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified BergstrÃƒÆ’Ã‚Â¶m Technique

Human Skeletal Muscle Prov Använda Modified Bergström Technique

The percutaneous biopsy technique enables researchers and clinicians to collect skeletal muscle tissue samples. The technique is safe and highly ...

Murine Corneal Transplantation: A Model to Study the Most Common Form of Solid Organ Transplantation

Murina hornhinnetransplantation: En modell för att studera vanligaste formen av organtransplantation

Corneal transplantation is the most common form of organ transplantation in the United States with between 45,000 and 55,000 procedures performed each ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

Heterotopisk Cervical hjärttransplantation i möss

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...