Name: in vivo surface electrocardiography for adult zebrafish
Uploaded: 2019-08-01T15:00:00
Duration: 9 min 13 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish at JoVE.com

وقد دعم هذا العمل المعاهد الوطنية للصحة R01 HL141452 إلى شبكة البرامج المواضيعية. قدمت أداة أبوظبي للأدوات تمويلاً سخياً لتغطية تكاليف النشر المفتوح، ولكن لم يكن لها أي دور في التصميم التجريبي أو الحصول على البيانات أو تحليل البيانات الخاصة بهذه الدراسة أو أي إمكانية للوصول إلى المخطوطة قبل نشرها.

<ol>
	<li>Arnaout, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+model+for+human+long+QT+syndrome.">Zebrafish model for human long QT syndrome.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (27), 11316-11321 (2007).</li><li>Hassel, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deficient+zebrafish+ether-a-go-go-related+gene+channel+gating+causes+short-QT+syndrome+in+zebrafish+reggae+mutants.">Deficient zebrafish ether-a-go-go-related gene channel gating causes short-QT syndrome in zebrafish reggae mutants.</a> Circulation. 117 (7), 866-875 (2008).</li><li>Meder, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstitution+of+defective+protein+trafficking+rescues+Long-QT+syndrome+in+zebrafish.">Reconstitution of defective protein trafficking rescues Long-QT syndrome in zebrafish.</a> Biochemical and Biophysical Research Communication. 408 (2), 218-224 (2011).</li><li>Sieber, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+preclinical+in+vivo+screening+model+for+nanomedicines.">Zebrafish as a preclinical in vivo screening model for nanomedicines.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. , (2019).</li><li>Lin, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+rapid+and+economic+in+vivo+electrocardiogram+platform+for+cardiovascular+drug+assay+and+electrophysiology+research+in+adult+zebrafish.">Development of a rapid and economic in vivo electrocardiogram platform for cardiovascular drug assay and electrophysiology research in adult zebrafish.</a> Science Reports. 8 (1), 15986 (2018).</li><li>Milan, D. J., Jones, I. L., Ellinor, P. T., MacRae, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+recording+of+adult+zebrafish+electrocardiogram+and+assessment+of+drug-induced+QT+prolongation.">In vivo recording of adult zebrafish electrocardiogram and assessment of drug-induced QT prolongation.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulation Physiology. 291 (1), H269-H273 (2006).</li><li>Liu, C. C., Li, L., Lam, Y. W., Siu, C. W., Cheng, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+surface+ECG+recording+in+adult+zebrafish+reveals+that+the+value+of+this+model+exceeds+our+expectation.">Improvement of surface ECG recording in adult zebrafish reveals that the value of this model exceeds our expectation.</a> Science Reports. 6, 25073 (2016).</li><li>Matthews, M., Varga, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+and+euthanasia+in+zebrafish.">Anesthesia and euthanasia in zebrafish.</a> Ilar Journal. 53 (2), 192-204 (2012).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The zebrafish book: a guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2007).</li><li>Sagie, A., Larson, M. G., Goldberg, R. J., Bengtson, J. R., Levy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+adjusting+the+QT+interval+for+heart+rate+(the+Framingham+Heart+Study).">An improved method for adjusting the QT interval for heart rate (the Framingham Heart Study).</a> American Journal of Cardiology. 70 (7), 797-801 (1992).</li><li>Luo, S., Michler, K., Johnston, P., Macfarlane, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+commonly+used+QT+correction+formulae:+the+effect+of+heart+rate+on+the+QTc+of+normal+ECGs.">A comparison of commonly used QT correction formulae: the effect of heart rate on the QTc of normal ECGs.</a> Journal of Electrocardiology. 37 Suppl, 81-90 (2004).</li><li>Vornanen, M., Hassinen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+heart+as+a+model+for+human+cardiac+electrophysiology.">Zebrafish heart as a model for human cardiac electrophysiology.</a> Channels (Austin). 10 (2), 101-110 (2016).</li><li>Tsai, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vitro+recording+of+adult+zebrafish+heart+electrocardiogram+-+a+platform+for+pharmacological+testing).">In-vitro recording of adult zebrafish heart electrocardiogram - a platform for pharmacological testing).</a> Clinica Chimica Acta. 412 (21-22), 1963-1967 (2011).</li><li>Collymore, C., Tolwani, A., Lieggi, C., Rasmussen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+safety+of+5+anesthetics+in+adult+zebrafish+(Danio+rerio).">Efficacy and safety of 5 anesthetics in adult zebrafish (Danio rerio).</a> Journal of American Association of Lab Animal Sciences. 53 (2), 198-203 (2014).</li><li>Sun, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+Nkx2.5-Calr-p53+signaling+pathway+by+hyperglycemia+induces+cardiac+remodeling+and+dysfunction+in+adult+zebrafish.">Activation of the Nkx2.5-Calr-p53 signaling pathway by hyperglycemia induces cardiac remodeling and dysfunction in adult zebrafish.</a> Disease Model and Mechanism. 10 (10), 1217-1227 (2017).</li><li>Franz, M. R., Bargheer, K., Rafflenbeul, W., Haverich, A., Lichtlen, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monophasic+action+potential+mapping+in+human+subjects+with+normal+electrocardiograms:+direct+evidence+for+the+genesis+of+the+T+wave.">Monophasic action potential mapping in human subjects with normal electrocardiograms: direct evidence for the genesis of the T wave.</a> Circulation. 75 (2), 379-386 (1987).</li><li>Chiale, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+multiple+electrocardiographic+manifestations+of+ventricular+repolarization+memory.">The multiple electrocardiographic manifestations of ventricular repolarization memory.</a> Current Cardiology Reviews. 10 (3), 190-201 (2014).</li><li>Xu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+multifunctional+integumentary+membranes+for+spatiotemporal+cardiac+measurements+and+stimulation+across+the+entire+epicardium.">3D multifunctional integumentary membranes for spatiotemporal cardiac measurements and stimulation across the entire epicardium.</a> Nature Communications. 5, 3329 (2014).</li></ol>

وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

عند التسجيل في تخطيط القلب لسمك الحمار الوحشي للبالغين عن طريق الرصاص واحد كما أظهرنا في هذه الدراسة، وهناك عدد من المحاذير المتعلقة بنوعية وصحة نتائج تسجيل تخطيط القلب. أولا، في اختيار التخدير المناسب وتحديد الحد الأدنى اللازم تركيز التخدير، وعمق، والمدة، وتوازن السمية القلبية مخدر ضد الحاجة الحرجة لقمع التحف الحركة وتحديد مسبق ل البقاء على قيد الحياة مقابل تصميم المحطة الطرفية التجريبية. الاستفادة من قوة التآزر من مزيج من التخدير متعددة من مختلف فئات المخدرات5و14 والشلل1،6 لخفض جرعة من العوامل الفردية5 أو إدارة جرعة صيانة منخفضة بعد جرعة تحريض أعلى هي استراتيجيات نموذجية. ومع ذلك، على الرغم من السمية المحتملة المعروفة القلب والجهاز التنفسي، بما في ذلك الوفاة8، لا يزال tricaine الأكثر استخداما على نطاق واسع ، وأفضل المتاحة ، والتخدير الوحيد الذي وافقت عليه إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) لحمار وحشي التخدير. وقد استخدم التريكوين شعبيا في تسجيل تخطيط القلب لسمك الحمار الوحشي البالغ إما كعامل واحد أو بالاشتراك مع التخدير أو المحفزات الأخرى.
ثانيا، يمكن ضمان دقة وضع الرصاص على الأقل لحمار وحشي طبيعي صحي باستخدام معايير التحقق من صحة لدينا أربعة لECG حمار وحشي الكبار العادية. من بين المعايير الأربعة للتحقق التي نقترحها هنا، فإن المعيارين الأخيرين معا ً يؤكدان التوافق الأساسي بين قطبية موجة R وموجة T في تخطيط القلب العادي5و7و15. هذا التوافق موجة R و T هو التشابه الصدفة، ولكن حرجة، بين حمار وحشي والإنسان16،17 تخطيط القلب العادي الذي يسهم في الأهمية السريرية لنموذج القلب حمار وحشي كبديل للقلب البشري الفيزيولوجيا الكهربائية. ومع ذلك، قد تبطل عدة حالات حميدة أو خبيثة أي من المعايير الأربعة للتحقق من صحتها. على سبيل المثال، يتم فقدان التوافق موجة R و T في نقص تروية عضلة القلب7،15. هذا فقدان R و T موجة التوافق في نقص تروية عضلة القلب هو تشابه آخر ملفت للنظر بين حمار وحشي وECG الإنسان الذي يساهم في الأهمية السريرية لنموذج احتشاء عضلة القلب حمار وحشي.
وأخيرا، نوصي بممارسة موحدة في تحليل تخطيط القلب. مع ظهور التكنولوجيا، يمكن لبرنامج تحليل تخطيط القلب توليد تفسير تخطيط القلب التلقائي. ومع ذلك، نوصي بشدة بأن البشر المدربين يجب دائماً إعادة تفسير والتحقق من جميع ECGs استناداً إلى السيناريو السريري ة المعنية مما يؤدي إلى تسجيل تخطيط القلب. الاعتماد المفرط الروتيني فقط على التفسير التلقائي من قبل برنامج تحليل تخطيط القلب غير مستحسن، لا سيما في وجود المتغيرات تخطيط القلب العادية المشتركة، وأمراض القلب، أو وضع الرصاص دون الأمثل.
تركز هذه الدراسة على طريقة طفيفة التوغل لجلسات تسجيل تخطيط القلب القصيرة. ومع ذلك، إذا نشأت الحاجة إلى جلسات تسجيل تخطيط القلب طويلة المحطة الطرفية ساعات دائمة، والتعديلات ضرورية لتوفير الأوكسجين الكافي، والترطيب، والتخدير عن طريق التسريب المستمر6.
بالإضافة إلى ذلك، قم بتحسين نسبة الإشارة إلى الضوضاء بإحدى الطرق الثلاث على الأقل. اختيار مكبر للصوت أكثر قوة هو في كثير من الأحيان مكلفة، إن لم يكن غير عملي، الخيار. فتح الكيس المحيط يُحدِّد موصل الحجم هو نهج معقول،وإن كان غازياً، تم اعتماده 7. وضع الرصاص الاستراتيجي لمحاذاة محور الرصاص في اتجاه مواز لمحور القلب الرئيسي (الشكل4B)سوف تعظيم إشارات الجهد تخطيط القلب ولكن قد تتطلب التجربة والخطأ، وخاصة في غياب استئصال القلب.
في الجسم الحي ECG طريقة الاستجواب لحمار وحشي الكبار التي قدمناها هنا يقدم أربع مزايا رئيسية. أولاً، يتطلب نهجنا طفيف التوغل فقط إدخال القطب الكهربائي، ولكن لا إزالة نطاق السمك أو استئصال القلب في الصدر. لذلك، من خلال تقليل الألم للأسماك، نهجنا يتيح تكرار استجوابات تخطيط القلب في دراسات البقاء على قيد الحياة الطولية. ثانيا، عندما التخدير قمع حركة الأسماك بشكل كاف، ونظام تسجيل تخطيط القلب في الجسم الحي في دراستنا تنتج باستمرار نسبة إشارة مرضية إلى الضوضاء مع إشارات الخام خالية من الضوضاء. ثالثاً، يضمن التحقق من الجودة المكون من أربعة معايير الذي نقترحه هنا دقة البيانات وقوتها في وقت مبكر من عملية الحصول على بيانات تخطيط القلب ويقلل من الاختلافات المعتمدة على المشغل. وأخيرا، على وجه الخصوص، لدينا معيار التحقق من صحة الماضي (موجة T العادية تستقيم) يغلف التوافق من موجةR وموجة T، وهي سمة هامة مثل الإنسان من zebrafish ECG العادي (الشكل 1).
ومع ذلك، لا تزال هناك أربعة قيود رئيسية على منهجية تخطيط القلب الحالية في الجسم الحي لسمك الحمار الوحشي الكبار من قبل مجموعتنا وغيرها.
أولاً، يتطلب عدم التعاون في مجال الموضوع الحاجة إلى التخدير مع الحد من عواقب هتكى السمية القلبية التنفسية. لأنه في استجواب تخطيط القلب في الجسم الحي، في حين أن المرضى البشر لا تحتاج إلى التخدير، حمار وحشي تتطلب دائما التخدير أو الشلل، وكلها تسبب سمية القلب التنفسي متغير.
ثانيا، الحاجة إلى تأمين تخطيط القلب المرفق يؤدي قليلا يزيد من الغازية من إجراء غير الغازية خلاف ذلك. في حين أن وضع الرصاص في تسجيل تخطيط القلب سطح الجسم من البشر هو تماما غير الغازية لأن الأقطاب الكهربائية تلتزم البشرة البشرية، ووضع الرصاص لتسجيل في الجسم الحي ECG من حمار وحشي هو أكثر الغازية لأنه، على الأقل، يجب أن أقطاب الصلب ثقب جلد السمك للإدخال الآمن في عضلات السمك.
وتنبع القيود الأخيرة من القيود التشريحية لصدر وسمك الحمار الوحشي والقلب. ثالثاً، يتطلب الحجم الضئيل لقلب سمك الحمار الوحشي البالغ تخفيضاً حاداً في عدد خيوط تخطيط القلب. في حين أن البشر استيعاب بسهولة اثني عشر يؤدي في تسجيل تخطيط القلب القياسية، حمار وحشي الكبار يمكن أن تستوعب عادة فقط واحد أحادي القطب أو ثنائي القطب الرصاص. وتتمثل التشعب اتّصال واحد من الرصاص في تخطيط القلب في تحسين السعة في الوقت نفسه لموجات P وR وT الثلاثة جميعها. وبالتالي، لا يمكن المبالغة في أهمية وضع الرصاص الأمثل والدقيق في استجواب تخطيط القلب حمار وحشي. في حمار وحشي، موجة T يمثل تحديا كشف فريدة من نوعها لأنها غالبا ما تكون أصغر من هذه الموجات الثلاث. ولذلك، ينبغي أن تتلقى السعة موجة حمار وحشي T أولوية الأمثل على موجات P و R أكبر عادة.
رابعا، تحديد محور القلب الرئيسي حمار وحشي لتحقيق أقصى قدر من السعة موجة R يمكن أن يكون تحديا. والسبب هو أن قلب حمار وحشي لديه المزيد من حرية الحركة داخل كيس هالة فضفاضة بالمقارنة مع القلب البشري داخل شكل المناسب قفاز مثل التامور.
وعموما، فإن هذه القيود تحفز الابتكار الأسلوب في المستقبل. مع ظهور الطباعة ثلاثية الأبعاد والالكترونيات القابلة للتشوه18،هناك أمل في زرع الرصاص مباشرة يوم واحد في مستيقظا، والتنبيه، والسباحة حمار وحشي باستخدام "جورب القلب" من أجهزة الاستشعار القطب اللاسلكي.

يقع قلب حمار وحشي(دانيوريو) anteroventrally إلى تجويف الصدر بين operculum وحزام الصدرية. يتم إغلاق القلب بشكل فضفاض إلى حد ما داخل كيس التامور ذو اللون الفضي. من الناحية التشريحية، يختلف قلب سمك الحمار الوحشي عن قلوب الإنسان والثدييات الأخرى ذات الحجرات الأربع بسبب مقياسه الضئيل (100 ضعف أصغر من قلب الإنسان) وبنيته المكونة من غرفتين والتي تتكون من أتريوم واحد والبطين الواحد فقط. ومع ذلك، فإن الموجي تخطيط القلب الكهربائي (ECG) ومدة الفاصل الزمني QTمن كلا النوعين متشابهة بشكل ملحوظ (الشكل 1). وبناء على ذلك، ظهرت حمار وحشي كنموذج شعبية لدراسةعدم انتظام ضربات القلب البشرية الموروثة 1،2،3 ولفحص المخدرات عالية الإنتاجية من السمية القلبية البشرية المحتملة4،5 ، مثل إطالة QT.
في التقييم الروتيني لأمراض القلب البشرية، أصبح تخطيط القلب على سطح الجسم الأداة التشخيصية غير الغازية الأكثر استخداماً للخط الأول منذ اختراعه من قبل إينثوفن في عام 1903. وعلى النقيض من ذلك، منذ أول تكييف لطريقة تسجيل تخطيط القلب على سطح الجسم لسمك الحمار الوحشي البالغ في عام 20066 والعديد من التعديلات بعد ذلك7، ظلت هذه التقنية إلى حد كبير غير قابلة للوصول إلى العديد من الباحثين في هذا المجال على الرغم من شعبية هذا النموذج الحيواني. بالنسبة للباحثين الآخرين الذين أجروا في استجواب تخطيط القلب في الجسم الحي لسمك الحمار الوحشي الكبار، أدت الاختلافات الواسعة بين المشغلين إلى عدم الاتساق في نتائج تخطيط القلب من دراسات مختلفة. وتشمل الأسباب الشائعة الأجهزة والبرامج المتخصصة المرهقة والمكلفة، وانخفاض نسبة الإشارة إلى الضوضاء، والارتباك فيما يتعلق بوضع القطب الكهربائي، وتفاقمت جميعها بسبب الفهم غير الكامل لميزات تخطيط القلب من حمار وحشي للكبار و آليات الأنسجة الكامنة. وبالنظر إلى أن تخطيط القلب في الجسم الحي هو الأداة التشخيصية الوحيدة لسمك الحمار الوحشي الحي النمط الظاهري كهربائياً، فإن هناك حاجة واضحة إلى طريقة موحدة لتحسين الحساسية والخصوصية، وإمكانية التكرار وإمكانية الوصول.
هنا، نقدم نهجا عمليا وموثوقا به، والتحقق من صحة لتسجيل وتفسيرحمار وحشي في تخطيط القلب الحي (الشكل 2). باستخدام الرصاص ثنائي القطب واحد في الطائرة الأمامية، قمنا بالتحقيق في التغيرات في أشكال الموجات ECG وفترات الفاصل الزمني للأسماك الوحشية الكبار AB صحية من النوع البري.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Culture dishes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB087571</td>
			<td>100 mm x 20 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Forceps</td>
			<td>Fine Sciense Tools</td>
			<td>11253-20</td>
			<td>0.1 x 0.06 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FE136 Animal Bio Amp&#160;</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>FE231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Forceps</td>
			<td>Fine Sciense Tools</td>
			<td>11064-07</td>
			<td>0.6 x 0.5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabChart 8 Pro</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td></td>
			<td>Software with ECG Module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle electrodes for Animal Bio Amp&#160;</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>MLA1213</td>
			<td>29 gauge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Disposable Transfer Pipets</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-669-12</td>
			<td>6 in., 1.2 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/35</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>4//35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Sciense Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td>2.5 mm, 0.075 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E10521-10G</td>
			<td>MS-222</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo surface electrocardiography for adult zebrafish

أشكال الموجات الكهربائي من حمار وحشي الكبار وتلك من البشر متشابهة بشكل ملحوظ. هذه التشابهات تخطيط القلب تعزيز قيمة حمار وحشي ليس فقط كنموذج بحثي للفيزيولوجيا الكهربائية القلبية البشرية واعتلال عضلة القلب ولكن أيضا كنموذج بديل في ارتفاع الإنتاجية الفحص الصيدلاني للسمية القلبية المحتملة ل البشر، مثل إطالة QT. على هذا النحو، في التصوير الكهربائي الجسم الحي لحمار وحشي الكبار هو أداة الفينول الكهربائية التي هي ضرورية، إن لم يكن لا غنى عنها، لعبر التيكون أو الطولية في الخصائص الكهرولوجية الحية. ومع ذلك، في كثير من الأحيان، لا يزال الافتقار إلى طريقة تسجيل موثوقة وعملية وفعالة من حيث التكلفة يشكل تحديا رئيسيا يحول دون أن يصبح ذلك في أداة التشخيص في الجسم الحي أيسر من المنال. هنا، نقوم بوصف نهج عملي ومباشر في التصوير الكهربائي للسمك الوحشي للبالغين باستخدام نظام منخفض الصيانة وفعال من حيث التكلفة وشامل ينتج عنه تسجيلات متسقة وموثوق بها. نحن نوضح بروتوكولنا باستخدام سمك حمار وحشي ذكر بالغ صحي من 12-18 شهرا من العمر. كما نقدم استراتيجية تفسير سريعة في الوقت الحقيقي للتحقق من الجودة لضمان دقة البيانات وقوتها في وقت مبكر من عملية تسجيل تخطيط القلب.

يوضح الشكل 1 الأهمية السريرية للطريقة المعروضة هنا. في الجسم الحي السطحي الكهربائي لحمار وحشي الكبار هو أداة أساسية الفينول الكهربائية بسبب أوجه التشابه الملحوظة بين حمار وحشي وECG الإنسان على الرغم من اختلافاتهم التشريحية واسعة. يحتوي قلب سمك الحمار الوحشي على أتريوم واحد فقط وبطين واحد على النقيض من قلب الإنسان مع اثنين من الأذينين والبطينين (الصف العلوي؛ اليمين واليسار، على التوالي). ومع ذلك، على الرغم من بساطته التشريحية الظاهرة، يشارك قلب حمار وحشي العديد من ميزات تخطيط القلب مع القلب البشري (الصف السفلي؛ اليمين واليسار، على التوالي) وبالتالي، ظهر قلب سمك الحمار الوحشي كنموذج بديل للقلب البشري الفيزيولوجيا الكهربائية5،12،13. يوضح الشكل 1 موجة Q صغيرة ولكنها متميزة من سمكة حمار وحشي حية وصحية عمرها 14 شهرًا. ومع ذلك، في تخطيط القلب حمار وحشي، لا يتم تحسين تحديد المواقع الرصاص عادة لإظهار موجة Q. ولذلك، فإن موجة Q غير مرئية عادة، ومجمع RS هو أكثر شيوعا ينظر إليها من مجمع QRS كامل في ECG حمار وحشي.
ويلخص الشكل 2 خطوات العمل الأساسية الأربع لإجراء التصوير الكهربائي للإصابة بالقلب الحي للسمك الوحشي للبالغين. بعد الحث على التخدير (الخطوة 1) ووضع القطب الكهربائي (الخطوة 2)، سجلنا إشارات تخطيط القلب الأساسية (الخطوة 3) من سمك الحمار الوحشي AB من النوع البري الصحي من 12 إلى 18 شهرا من العمر(ن = 9). كانت تقنية إدخال القطب الكهربائي لدينا فقط طفيفة التوغل لأننا لم نكن بحاجة إلى قشر موازين الأسماك أو إجراء استئصال القلب. بعد الحصول على البيانات، قمنا بمراجعة والتحقق يدويًا من كل تسجيل تخطيط القلب (الخطوة 4) لتجنب سوء التفسير المحتمل عن طريق التحليل التلقائي للبرامج.
ويبين الشكل 3 العناصر الثلاثة التي لا غنى عنها لنظام نموذجي لاقتناء بيانات تخطيط القلب ومعالجته: جهاز لاقتناء البيانات عالية الأداء، ومكبر للصوت التفاضلي عالي الكسب، وحاسوب تم تحميله باستخدام برامج حاسوبية لبيانات تخطيط القلب الاستحواذ والتحليل. في مختبرنا، قمنا بتكييف إعلان قائم في نظام تسجيل تخطيط القلب في الجسم الحي الذي تم تصميمه في الأصل لنماذج الثدييات الصغيرة (مثل الفئران والجرذان والأرانب) لاستيعاب نموذج سمك الحمار الوحشي للبالغين.
ويبين الشكل 4 أن وضع الرصاص السليم يتطلب مواءمة الرصاص مع المحور الرئيسي القلبي المفترض. في حمار وحشي في تسجيل تخطيط القلب، لأنه يتم استخدام الرصاص واحد فقط، وتحديد المواقع الرصاص السليم لتحقيق أقصى قدر من السعة موجة R و T في وقت واحد أمر بالغ الأهمية. لتحقيق أقصى قدر من السعة موجة R و T، ونحن محاذاة أقطاب الرصاص الإيجابية والسلبية مع المحور الرئيسي القلب، ويفترض في اتجاه الجمجمة الصدوفي ة اليسرى إلى اليمين. بعد استئصال الصدر واستئصال القلب لفتح الكيس المحيط يُظهر القلب، يصبح المحور الرئيسي للقلب واضحاً (الشكل4B خط متقطع أبيض). في الواقع، حول القلب لفضح القلب هو استراتيجية شائعة الاستخدام لزيادة نسبة الإشارة إلى الضوضاء7 على حساب تحويل تسجيل تخطيط القلب من طفيفة التوغل إلى إجراء الغازية للغاية.
ويبين الشكل 5 الخطوات الحاسمة في تحليل تخطيط القلب. أولا، نحن قبل تعريف إعدادات المعلمة المختلفة للتحليل التلقائي البرمجيات باستخدام مربع الحوار إعدادات تخطيط القلب (الشكل5A). ولأننا نقوم بإعادة استخدام معدات تسجيل ECG موجودة مصممة لنماذج الثدييات لاستيعاب أسماك الحمار الوحشي البالغة، فإن إعداد الكشف والتحليل لسمك الحمار الوحشي غير متوفر. اخترنا مسبقا الإنسان بدلا من ذلك، نظرا لتشابه ملحوظ من تخطيط القلب حمار وحشي إلى تخطيط القلب البشري (الشكل5A). ثانيا، قمنا بالتحقق يدويا من تعريف ECG التلقائي (باللون الأسود) من قمم موجة R وتصحيح (باللون الأحمر) أي أخطاء R موجة التعرف التلقائي قبل قيادة البرنامج لإعادة حساب متوسط معدل البطين. على سبيل المثال، في الشكل 5B، حولت موجة P كبيرة فيما يتعلق بموجة R البرنامج إلى سوء تحديد موجات R، مما أدى إلى سوء التقدير التلقائي اللاحق لفاصل RR أو معدل البطين. ولذلك، فإن التحقق البشري والتصحيحات المناسبة حسب الحاجة أمر انما حاسم في تحليل تخطيط القلب. ثالثاً، قمنا بتقييم انتظام الإيقاع بسرعة وقمنا بحساب متوسط مدة الأمواج والفواصل الزمنية باستخدام عرض متوسط (الشكل5C)لتسلسل عدة دورات قلبية متتالية (خضراء) في إشارة واحدة متوسطة (أسود). هنا في الشكل 5C، والانحراف لا يذكر بين كل من دورات القلب التسع ومتوسط إشارة يجادل لانتظام إيقاع ممتاز من هذا القلب حمار وحشي. وأخيرا، قمنا بتمكين البرنامج لتصحيح تلقائيا الفاصل الزمني QT لمعدل ضربات القلب باستخدام Bazett، واحدة من الطرق السبعة المختلفة المتاحة (الشكل5D).
الشكل 6 ألف -C يوضح كيف يؤثر عمق وضع القطب الكهربائي على سعة إشارات تخطيط القلب. عندما أدخلنا بشكل غير صحيح الأقطاب الكهربائية بشكل سطحي جدا في الأدمة (الشكل6A)،وكان الرصاص "غير مباشر" مثل (أكثر من قطرين القلب من القلب، على غرار معيار غير مباشر الإنسان تخطيط القلب يؤدي الأول والثاني والثالث) والجهد وكانت إشارات صغيرة. عندما أدخلنا بشكل مناسب الأقطاب الكهربائية 1 ملم أعمق في العضلات الصدرية (الشكل6B)،أصبح الرصاص "شبه مباشر" (على مقربة ولكن ليس في اتصال مباشر مع القلب) وإشارات الجهد زيادة. أصبحت الأشكال الموجية ECG مرئية بسهولة. ومع ذلك، عندما أدخلنا بشكل غير صحيح الأقطاب الكهربائية أعمق في البطين (الشكل6C)،أصبح الرصاص "مباشرة" (في اتصال مباشر مع القلب) وإشارات الجهد زيادة أكثر. وارتفعت سعة موجة R في الشكل 6C بثمانية أضعاف مقارنة بالشكل 6A وأربعة أضعاف مقارنة بالشكل 6B. ومع ذلك، فإن تتبع تخطيط القلب في الشكل 6C كشفت علامات جديدة من الإصابة في عضلة القلب البطيني، مثل الاكتئاب ST جديدة وانعكاس موجة T جديدة.
يوضح الشكل 6D كيف أن الانحرافات غير العادية لجميع أشكال الموجة ECG (P, Q, R, S, and T) يجب أن تشير إلى خطأ عكس الرصاص، حيث تحولت الأقطاب الإيجابية والسلبية مكان. لاحظ أنه حسب التعريف Q و S دائماً سالبة في حين R دائماً إيجابية.
الشكل 6 هاء -F يبين كيف عمق التخدير غير لائق يمكن أن تضعف نوعية في تسجيل تخطيط القلب في الجسم الحي. في الشكل 6E، أدى عدم كفاية التخدير (0.017٪ ثلاثي الكوكايين) إلى الفشل في شل حمار وحشي تماما. وخفضت القطع الأثرية الناتجة عن الحركة نسبة الإشارة إلى الضوضاء عن طريق تلويث الإشارة (العلامة النجمية) وزيادة الضوضاء (الأسهم). في المقابل، في الشكل 6F، جرعة زائدة من التخدير (0.08٪ tricaine) الناجمة عن بطانتظام ضربات القلب الجيوب الأنفية الشديدة، فضلا عن التغيرات في الجزء ST وموجة T.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60011/60011fig1.jpg"> الشكل 1: التشريح المتناقض وتخطيط القلب من قلوب الإنسان وسمك الحمار الوحشي. على النقيض من قلب الإنسان مع اثنين من الأذينين والبطينين، وقلب حمار وحشي لديه أتريوم واحد فقط والبطين واحد (الصف العلوي). المختصرات: RA, الحق الأذين; لوس انجليس ، الأذين الأيسر ، و RV، البطين الأيمن. LV: البطين الأيسر. يشارك قلب سمك الحمار الوحشي العديد من ميزات تخطيط القلب الشائعة مع قلب الإنسان (الصف السفلي). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60011/60011fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60011/60011fig2.jpg"> الشكل 2: الحد الأدنى من التدخل في بروتوكول تسجيل تخطيط القلب. يوضح مخطط التدفق التخطيطي أربع خطوات عمل حاسمة في إجراء استجواب تخطيط القلب في الجسم الحي: حث التخدير، ووضع أقطاب الرصاص ECG، وتسجيل تخطيط القلب، وتحليل تسجيلات تخطيط القلب. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60011/60011fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60011/60011fig3.jpg"> الشكل 3: نظام الحصول على بيانات تخطيط القلب ومعالجتها. وتشمل المكونات الرئيسية الثلاثة لنظام تسجيل تخطيط القلب المتكامل في الجسم الحي جهازا ً للحصول على البيانات، ومكبر للصوت، وبرامج حاسوبية للحصول على البيانات وتحليلها. مكبر للصوت يأتي مع ثلاثة جاهزة للاستخدام 29 قياس الأقطاب الدقيقة الفولاذ المقاوم للصدأ. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60011/60011fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60011/60011fig4.jpg"> الشكل 4: وضع الرصاص تخطيط القلب. يتم إدخال ثلاثة أقطاب من الفولاذ المقاوم للصدأ مرمزة بالألوان عيار 29 بشكل آمن في عضلات الأسماك إلى عمق 1 مم تقريبًا. وضع القطب السلبي (الأسود) والقطب الإيجابي (الأحمر) يؤسس الرصاص ثنائي القطب في الطائرة الأمامية، على طول اتجاه الجمجمة الصدوفي الأيسر إلى اليمين. اختصار: المرجع، القطب المرجعي <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60011/60011fig4large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60011/60011fig5.jpg"> الشكل 5: جيم خطوات ritical في تحليل تخطيط القلب. (أ) ما قبل تحديد إعدادات المعلمة المختلفة للتحليل التلقائي للبرامج. (B) تصحيح يدويا (الأحمر) اثنين من الأخطاء التلقائيمن قبل البرنامج (أسود) من موجات P و R لتصحيح سوء حساب البرمجيات من معدل الأذيني والبطيني. (C) سلسلة تسع دورات قلبية متتالية (خضراء) في إشارة واحدة متوسط (أسود) لتقييم بسرعة انتظام الإيقاع / المخالفات وحساب متوسط مدة الأمواج والفواصل. (D) تصحيح الفاصل الزمني QT لمعدل ضربات القلب باستخدام واحدة من الطرق المختلفة، مثل Bazett. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60011/60011fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60011/60011fig6.jpg"> الشكل 6: آثار وضع الرصاص وعمق التخدير على إشارات تخطيط القلب. خطوتين الأكثر أهمية التي تحدد نجاح في تسجيل تخطيط القلب في الجسم الحي هي وضع الرصاص(A-D)وعمق التخدير(E-F). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60011/60011fig6large.jpg" target="_blank">الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a>

Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish at JoVE.com

In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish

هنا، نقدم طريقة موثوقة، طفيفة التوغل، وفعالة من حيث التكلفة لتسجيل وتفسير تخطيط القلب في أسماك الحمار الوحشي الكبار الحية التخدير.

في فيفو سطح الكهربائي لحمار وحشي الكبار

The electrocardiogram waveforms of adult zebrafish and those of humans are remarkably similar. These electrocardiogram similarities enhance the value of ...

في الزفيرة الكارتوغرافية الكهربائية هي الأداة التشخيصية الوحيدة للphenotyping الكهربائية في الحمار الوحشي الحي في الدراسات المقطعية والطولية. نهجنا عملي، الحد الأدنى من الغازية، وفعالة من حيث التكلفة لأننا إعادة استخدام نظام الحصول على البيانات للثدييات. ونحن نؤكد على استراتيجية تفسير تخطيط القلب في الوقت الحقيقي للتحقق المبكر من جودة البيانات.لأن الإنسان والحمار الوحشي ECGs متشابهة، في التخطيط الكهربائي للكشوف الحية يسهل استخدام حمار وحشي في نمسيد فسيولوجيا القلب الإنسان، فضلا عن فحص عالية الإنتاجية للأدوية لبطلات الكارديجان، مثل إطالة QT. إن تحديد موقع العميل المتوقع الصحيح هو مفتاح النجاح. لأن موجة الحمار الوحشي تي الطبيعية هي الأصغر، وإعطاء الأولوية لتحسين السعة على تلك التي من أكبر P و R موجات.دراسة أنماط تخطيط القلب العادي والمرضي لتفسير النتائج الخاصة بك ECG أنفسكم. لا تعتمد فقط على التفسير التلقائي لبرنامج تحليل تخطيط القلب. في يوم التجربة، نقل سمك الحمار الوحشي من الحوض إلى المختبر.لإعداد نظام تسجيل في الجسم الحي ECG، قم بتوصيل القطع الأساسية من المعدات وإدراج ثلاثة بتلوين، والفولاذ المقاوم للصدأ أقطاب من الرصاص ECG في ثلاثة بوابات الوصول مطابقة للون من مكبر للصوت. لتحريض من التخدير المستوى 4، غمر حمار وحشي بالغ في طبق يحتوي على محلول من التخدير في أدنى تركيزات محددة مسبقًا معتمدة من قبل لجنة الرعاية الحيوانية المؤسسية والاستخدام. مرة واحدة حافظت على حمار وحشي من مستوى 4 التخدير لمدة ثلاث ثوان، واستخدام زوج من ملقط حادة لنقل فورا الأسماك على اسفنجة رطبة مع شق، سطح البطن حتى، لوضع الأقطاب تخطيط القلب الثلاثة.أدخل بلطف القطب الموجب في خط الوسط البطني على مستوى الشرياني لمبة من ملليمتر واحد إلى ملليمترين فوق خط وهمي يربط بين حواف السفلية من operculums. ضع القطب السالب caudally و 0.5 إلى ملليمتر واحد تركا بشكل ثنئي إلى القطب الموجب على مسافة أكبر من طول أقصى apicobasal من البطين حمار وحشي بالغ، ثم ضع القطب المرجعي caudally بالقرب من المنطقة الشرجية. لتسجيل ECG، بدء تشغيل النظام وفتح برنامج الحصول على البيانات ECG.حدد الإعداد المطلوب من القوائم المنسدلة للنطاق، وتمرير منخفض، وتمريرة عالية. اضغط على ابدأ لبدء تسجيل تخطيط القلب المستمر الخالي من الفجوة بمعدل أخذ عينات من كيلو هرتز واحد. لتحسين تحديد المواقع الرصاص لنسبة إشارة إلى الضوضاء القصوى، اضغط على إيقاف لإيقاف التسجيل ومراجعة التتبع بعد وقت قصير من أول محاولة تسجيل لكل قلب.إذا كان من المتوقع أن تكون ECG طبيعية، تأكد من أن جميع أشكال الموجات ECG متميزة ومرئية بسهولة وأن موجة P، صافي مجمع QRS، وموجة T كلها إيجابية. الخطوة الأكثر أهمية هي تحديد موقع الرصاص لزيادة نسبة الإشارة إلى الضوضاء إلى أقصى حد. تطبيق معايير التحقق الأربعة بعد أول محاولة تسجيل ECG لكل سمكة للحصول على ردود الفعل التصحيحية.إذا كان من المتوقع تخطيط القلب العادي، إعادة وضع الأقطاب الكهربائية حسب الضرورة حتى يتم استيفاء كل هذه المعايير الأربعة التحقق. إذا كان من المتوقع موجة T العادي، ولكن موجة T صغيرة جداً، إعادة وضع الأقطاب الكهربائية لتعظيم السعة موجة تي. استئناف تسجيل ECG بعد تحسين تحديد المواقع الرصاص، حفظ كنس ECG للتحليل اللاحقة.في نهاية جلسة تسجيل ECG، قم بإزالة الأقطاب الكهربائية بعناية دون إصابة الأسماك. في دراسات البقاء على قيد الحياة، نقل الأسماك إلى الطازجة، والمياه السمكية المؤكسج خالية من tricaine. يرجى ملاحظة أنه في هذا الفيديو، لتسهيل مشاهدة القراء للانتعاش من الأسماك من التخدير، يتم وقف الأوكسجين.لتسهيل الشفاء من التخدير في دراسات البقاء على قيد الحياة ، استخدم ماصة باستور لبخ الماء بقوة على الخياشيم حتى يستأنف السمك حركة الخياشيم العادية أو السباحة ، ثم مراقبة الأسماك للتعافي الكامل من التخدير قبل إعادة الأسماك إلى الحوض. تعتبر الأسماك تعافى تماما من التخدير عندما يمكن أن تسبح تستقيم لمدة خمس ثوان على الأقل. لتحديد إعدادات التحليل، افتح برنامج تحليل بيانات تخطيط القلب (ECG) وافتح ملف تخطيط القلب (ECG) الذي يهمك لعرض تتبع تخطيط القلب الكامل.استخدام الماوس لسحب خارج قسم من الفائدة في تتبع ECG لتحليل. من القائمة تحليل تخطيط القلب ECG، حدد إعدادات تخطيط القلب لفتح مربع حوار لإعدادات المعلمة المتعددة مسبقًا للتحليل التلقائي للبرامج. تحليل ضربات القلب ومعدل وتحديد ما إذا كان إيقاع القلب الجيوب الأنفية أم لا، العادية أو غير النظامية.لتحديد معدل ضربات القلب، تأكد من أن البرنامج يحدد بشكل صحيح جميع موجات P و R لأن معدل الأذينية والبيني يستند إلى فاصل PP وRR، على التوالي. تصحيح أي أخطاء تعريف تلقائي عن طريق نقل المؤشرات في غير محله إلى P المناسبة و R الموجات. لحساب فترات ومدد الموجة، فتح تحليل تخطيط القلب و عرض المتوسط لسسلسل عدة دورات القلب المتعاقبة في إشارة متوسط واحد.تأكد من أن البرنامج يحدد بشكل صحيح بداية ونهاية موجة P ، ومجمع QRS ، وموجة T ، ثم قم بتحريك المؤشرات في غير موضعها إلى المواضع المناسبة لتصحيح أي أخطاء تعريف تلقائي. لتصدير قياسات تخطيط القلب، حدد Table View لمراجعة كافة قياسات ECG ونسخ ولصق قياسات الفائدة في جدول بيانات للتحليل اللاحق. لتصدير تتبع تخطيط القلب، استخدم المكبر لتمييز قسم من الاهتمام في sweep ECG ونسخ ولصق sweep في المستند المطلوب.في العقد على قلب الإنسان، الذي يحتوي على اثنين من الأذينين واثنين من البطينين، والقلب حمار وحشي لديه واحد فقط الأذين وبطين واحد. على الرغم من بساطته التشريحية الظاهرة، يشارك قلب سمك الحمار الوحشي العديد من ميزات تخطيط القلب مع قلب الإنسان. يتطلب وضع الرصاص المناسب محاذاة الرصاص مع المحور الرئيسي المفترض للقلب.عندما يتم إدراج الأقطاب سطحيا جدا في الأدمة، ويعتبر الرصاص شبه غير المباشرة وإشارات الجهد صغيرة. عندما يتم إدراج الأقطاب الكهربائية إلى عمق مليمتر واحد مناسب في العضلات الصدرية، يصبح الرصاص شبه مباشر وزيادة إشارات الجهد. إذا تم إدخال الأقطاب الكهربائية أعمق من ملليمتر واحد في البطين ، ومع ذلك ، يصبح الرصاص مباشرًا وتزيد إشارات الجهد أكثر من ذلك ، مع زيادة سعة الموجة R بمقدار أربعة أضعاف مقارنةً مع عندما يتم إدخال الأقطاب الكهربائية على العمق المناسب.تتبع ECG من الأقطاب الكهربائية التي تم إدخالها بعمق للغاية يكشف أيضًا عن علامات جديدة لإصابة عضلة القلب البطيني ، مثل اكتئاب ST جديد وانعكاس موجة T جديدة. إذا تم تبديل الأقطاب الموجبة والسلبية في موضعها ، لوحظ انقلابات غير عادية من جميع الأشكال الموجية لـ ECG. مستوى غير مناسب من عمق تخدير يمكن أيضا أن يضعف نوعية في تسجيل ECG في الجسم الحي.تذكر ل التخدير بعمق كاف لشل حركة السمك دون قتله. ضع الأقطاب الكهربائية لزيادة نسبة الإشارة إلى الضوضاء وتجنب الاعتماد المفرط على التحليل التلقائي للبرامج. بعد إجراء البقاء على قيد الحياة هذا الحد الأدنى من التدخل الجراحي ، من الممكن تنفيذ إجراءات أخرى مثل الاستئصال الجزئي ، أو استئصال القلب ، أو تحقيقات تخطيط القلب المتسلسل في استجابات المخدرات أو الدراسات الطولية.السمية الجهازية هي مضاعفات محتملة لأي مخدر، بما في ذلك ثلاثية. ويمكن تقليل هذه السميات عن طريق الاستفادة من التآزر من التخدير متعددة لخفض جرعة من العوامل الفردية.

Research

JoVE Journal

Biology

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

زرع نخاع الكلى في الجامعة اسماك الزرد الكبار

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

الرجعية المدارية في حقن اسماك الزرد الكبار

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

حقن داخل الصفاق الى اسماك الزرد الكبار

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

في الجسم الحي من Electroporation Morpholinos في شبكية العين اسماك الزرد الكبار

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

في Electroporation المجراة من Morpholinos في الكبار التجديد زعنفة الذيل الزرد

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

جمع الدم لتحليل الكيمياء الحيوية في الزرد الكبار

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Gavaging Adult Zebrafish

Gavaging اسماك الزرد الكبار

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

An Assay for Lateral Line Regeneration in Adult Zebrafish

على الفحص لتجديد الخط الجانبي في اسماك الزرد الكبار

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

التعافي من اسماك الزرد الكبار قلوب للتطبيقات عالية الإنتاجية

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

كرر جمع الدم لاختبارات الدم في اسماك الزرد الكبار

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...