Name: in vivo surface electrocardiography for adult zebrafish
Uploaded: 2019-08-01T15:00:00
Duration: 9 min 13 s
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<ol>
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लेखकों को खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.

जब हम इस अध्ययन में प्रदर्शन के रूप में एक एकल नेतृत्व के माध्यम से वयस्क ज़ेब्राफ़िश के लिए vivo ईसीजी में रिकॉर्डिंग, वहाँ गुणवत्ता और ईसीजी रिकॉर्डिंग परिणामों की वैधता के विषय में चेतावनी के एक नंबर रहे हैं. सबसे पहले, उचित संज्ञाहरण चुनने और कम से कम आवश्यक संज्ञाहरण एकाग्रता, गहराई, और अवधि का निर्धारण करने में, गति कलाकृतियों को दबाने के लिए महत्वपूर्ण जरूरत के खिलाफ संवेदनाहारी cardiotoxicities संतुलन और के लिए एक प्राथमिकता निर्धारण एक अस्तित्व बनाम टर्मिनल प्रयोगात्मक डिजाइन. विभिन्न दवा वर्गों से कई एनेस्थेटिक्स के संयोजन के synergistic शक्ति पर कैपिटल 5,14 और पैरालिटिक्स1,6 व्यक्तिगत एजेंटों की खुराक कम करने के लिए5 या प्रशासन एक उच्च प्रेरण खुराक के बाद एक कम रखरखाव खुराक ठेठ रणनीतियों रहे हैं. हालांकि, अपनी अच्छी तरह से ज्ञातसंभावित cardirespiratory toxicities के बावजूद, मौत सहित 8, tricaine अभी भी सबसे व्यापक रूप से इस्तेमाल किया है, सबसे अच्छा उपलब्ध है, और केवल संवेदनाहारी अमेरिकी खाद्य एवं औषधि प्रशासन द्वारा अनुमोदित (एफडीए) ज़ेब्राफ़िश के लिए संज्ञाहरण. Tricaine लोकप्रिय वयस्क ज़ेब्राफ़िश की ईसीजी रिकॉर्डिंग में इस्तेमाल किया गया है या तो एक एजेंट के रूप में या अन्य एनेस्थेटिक्स या paralytics के साथ संयोजन में.
दूसरा, नेतृत्व प्लेसमेंट सटीकता एक सामान्य वयस्क ज़ेब्राफ़िश ईसीजी के लिए हमारे चार मान्य मानदंडों का उपयोग कर स्वस्थ सामान्य ज़ेब्राफ़िश के लिए कम से कम सुनिश्चित किया जा सकता है। चार मान्य मानदंडों में से जो हम यहां प्रस्तावित करते हैं , अंतिम दो मानदंड एक साथ आर तरंग की ध्रुवता और सामान्य ईसीजी5,7,15में टी तरंग के बीच मूलभूत सामंजस्य की पुष्टि करते हैं . इस आर और टी लहर सामंजस्य एक अप्रत्याशित, अभी तक महत्वपूर्ण, ज़ेब्राफ़िश और मानव16के बीच समानताहै,17 सामान्य ईसीजी कि मानव हृदय के लिए एक किराए के रूप में ज़ेब्राफ़िश दिल मॉडल के नैदानिक प्रासंगिकता के लिए योगदान देता है वैद्युत शरीर विज्ञान। हालांकि, कई सौम्य या घातक शर्तों चार मान्य मानदंडों में से किसी को अमान्य हो सकता है. उदाहरण के लिए, आर और टी तरंग सामंजस्य मायोकार्डियल इस्किमिया7,15में खो जाता है। मायोकार्डियल इस्कीमिया में आर और टी लहर सामंजस्य का यह नुकसान जेब्राफ़िश और मानव ईसीजी के बीच एक और हड़ताली समानता है जो जेब्राफ़िश मायोकार्डियल इंफार्क्शन मॉडल की नैदानिक प्रासंगिकता में योगदान देता है।
अंत में, हम ईसीजी विश्लेषण में एक मानक अभ्यास की सलाह देते हैं। प्रौद्योगिकी के आगमन के साथ, ईसीजी विश्लेषण सॉफ्टवेयर स्वत: ईसीजी व्याख्या उत्पन्न कर सकते हैं. हालांकि, हम दृढ़ता से अनुशंसा करते हैं कि प्रशिक्षित मनुष्य हमेशा फिर से व्याख्या और ईसीजी ईसीजी ईसीजी रिकॉर्डिंग के लिए अग्रणी संबंधित नैदानिक परिदृश्य के आधार पर सभी ईसीजी सत्यापित करना चाहिए। ईसीजी विश्लेषण सॉफ्टवेयर द्वारा स्वचालित व्याख्या पर केवल नियमित अति-निर्भरता अव्यवहार्य है, विशेष रूप से सामान्य सामान्य ईसीजी वेरिएंट, हृदय रोगों, या suboptimal नेतृत्व प्लेसमेंट की उपस्थिति में।
इस अध्ययन संक्षिप्त ईसीजी रिकॉर्डिंग सत्र के लिए न्यूनतम इनवेसिव विधि पर केंद्रित है. हालांकि, टर्मिनल लंबे समय तक ईसीजी रिकॉर्डिंग सत्र स्थायी घंटे के लिए आवश्यकता पैदा करनी चाहिए, संशोधन निरंतर perfusion6द्वारा पर्याप्त ऑक्सीजन, जलयोजन, और संज्ञाहरण प्रदान करने के लिए आवश्यक हैं।
इसके अतिरिक्त, कम से कम तीन तरीकों में से एक से संकेत-से-शोर अनुपात में वृद्धि. एक और अधिक शक्तिशाली एम्पलीफायर का चयन अक्सर एक महंगा है, अगर अव्यावहारिक नहीं, विकल्प. मात्रा कंडक्टर को कम करने के लिए हृदयावरदीय थैली खोलना एक उचित है, हालांकि आक्रामक, दृष्टिकोण है कि अपनाया गया है7. मुख्य हृदय अक्ष के समानांतर दिशा में लीड अक्षको संरेखित करने के लिए रणनीतिक लीड प्लेसमेंट ईसीजी वोल्टेज संकेतों को अधिकतम करेगा, लेकिन विशेष रूप से पेरिकार्डियोटोमी के अभाव में परीक्षण और त्रुटि की आवश्यकता हो सकती है।
वयस्क ज़ेब्राफ़िश के लिए इन विवो ईसीजी पूछताछ विधि है कि हम यहाँ प्रस्तुत चार मुख्य लाभ प्रदान करता है. सबसे पहले, हमारे न्यूनतम इनवेसिव दृष्टिकोण केवल इलेक्ट्रोड प्रविष्टि की आवश्यकता है, लेकिन कोई मछली पैमाने हटाने या thoracotomy-pericardiotomy. इसलिए, मछली के लिए दर्द को कम करके, हमारे दृष्टिकोण अनुदैर्घ्य अस्तित्व के अध्ययन में बार-बार ईसीजी पूछताछ सक्षम बनाता है. दूसरा, जब एनेस्थेटिक्स पर्याप्त रूप से मछली की गति को दबा, हमारे अध्ययन में इन विवो ईसीजी रिकॉर्डिंग प्रणाली लगातार शोर मुक्त कच्चे संकेतों के साथ एक संतोषजनक संकेत करने के लिए शोर अनुपात पैदावार. तीसरा, चार-कंसटकी गुणवत्ता सत्यापन जो हम यहां प्रस्तावित करते हैं, ईसीजी डेटा अधिग्रहण में डेटा सटीकता और मजबूती सुनिश्चित करता है और ऑपरेटर-निर्भर विविधताओं को कम करता है। अंत में, विशेष रूप से, हमारे पिछले मान्य कसौटी (सामान्य टी लहर ईमानदार है) आर लहर और टी लहर, ज़ेब्राफ़िश सामान्य ईसीजी की एक महत्वपूर्ण मानव की तरह सुविधा की सामंजस्य encapsulates (चित्र 1).
हालांकि, वहाँ अभी भी हमारे समूह और दूसरों द्वारा वयस्क ज़ेब्राफ़िश के लिए vivo ईसीजी पद्धति में वर्तमान के लिए चार प्रमुख सीमाएं मौजूद हैं.
सबसे पहले, विषय सहयोग की कमी इसके सीमित cardirespiratory विषाक्तता परिणामों के साथ संज्ञाहरण के लिए की आवश्यकता की आवश्यकता है. विवो ईसीजी पूछताछ में, जबकि मानव रोगियों को कभी भी सेडेशन की आवश्यकता नहीं होती है, जेब्राफ़िश को हमेशा एनेस्थेटिक्स या पैरालिटिक्स की आवश्यकता होती है, जिनमें से सभी चर कार्डियोरेस्पेरेटरी विषाक्तता का कारण बनते हैं।
दूसरा, संलग्न ईसीजी को सुरक्षित करने की आवश्यकता थोड़ा एक अन्यथा गैर इनवेसिव प्रक्रिया के आक्रामकता elevates. जबकि मानव के शरीर की सतह ईसीजी रिकॉर्डिंग में सीसा प्लेसमेंट पूरी तरह से गैर इनवेसिव है क्योंकि इलेक्ट्रोड मानव बाह्य त्वचा का पालन करते हैं, ज़ेब्राफ़िश के विवो ईसीजी रिकॉर्डिंग में के लिए लीड प्लेसमेंट अधिक आक्रामक है क्योंकि, कम से कम, स्टील इलेक्ट्रोड चाहिए मछली पेशी में सुरक्षित प्रविष्टि के लिए मछली की त्वचा पंचर.
पिछले दो सीमाओं ज़ेब्राफ़िश छाती और दिल की शारीरिक बाधाओं से स्टेम. तीसरा, वयस्क ज़ेब्राफ़िश हृदय के मामूली आकार ईसीजी लीड की संख्या में भारी कमी की आवश्यकता है। जबकि मनुष्य आसानी से एक मानक ईसीजी रिकॉर्डिंग में बारह सुराग को समायोजित, वयस्क ज़ेब्राफ़िश आम तौर पर केवल एक एकल एकध्रुवीय या द्विध्रुवी नेतृत्व को समायोजित कर सकते हैं. एक एकल ईसीजी नेतृत्व का असर एक साथ सभी तीन पी, आर, और टी तरंगों के आयाम अनुकूलन करने के लिए चुनौती है। इसलिए, जेब्राफ़िश ईसीजी पूछताछ में इष्टतम और सटीक लीड प्लेसमेंट के महत्व को अतिरंजित नहीं किया जा सकता है। ज़ेब्राफ़िश में, टी लहर एक अद्वितीय पता लगाने चुनौती प्रस्तुत करता है क्योंकि यह अक्सर इन तीन तरंगों की सबसे छोटी है. इसलिए, ज़ेब्राफ़िश टी लहर आयाम आम तौर पर बड़ा पी और आर तरंगों पर अनुकूलन प्राथमिकता प्राप्त करना चाहिए.
चौथा, आर लहर आयाम को अधिकतम करने के लिए ज़ेब्राफ़िश मुख्य हृदय अक्ष का निर्धारण चुनौतीपूर्ण हो सकता है। कारण यह है कि ज़ेब्राफ़िश दिल अपने रूप के भीतर मानव दिल की तुलना में अपने ढीले पेरिकार्डियल थैली के भीतर गति की अधिक स्वतंत्रता है-फिटिंग दस्ताने की तरह पेरिकार्डियम.
कुल मिलाकर, इन सीमाओं भविष्य विधि नवाचार को प्रोत्साहित करेंगे. 3 डी मुद्रण और विकृत इलेक्ट्रॉनिक्स18के आगमन के साथ, वहाँ जाग में प्रत्यक्ष नेतृत्व प्रत्यारोपण एक दिन के लिए आशा है, चेतावनी, तैराकी ज़ेब्राफ़िश वायरलेस इलेक्ट्रोड सेंसर के एक 'कार्डियक सोक' का उपयोग कर.

जेब्राफ़िश (दानियो रीरियो) हृदय ऑपरकुलम और पेक्टोरल गर्डल्स के बीच वक्ष गुहा के लिए पूर्वानुमति स्थित होता है। दिल बल्कि एक चांदी के रंग का पेरिकार्डियल थैली के भीतर ढीला संलग्न है. परमाणु, जेब्राफ़िश दिल चार कक्ष वाले मानव और अन्य स्तनधारी दिल से अलग है क्योंकि इसके छोटे पैमाने (100 गुना मानव दिल से छोटा) और इसके दो कक्ष वाली संरचना जिसमें केवल एक एट्रियम और एक वेंट्रिकल शामिल हैं। फिर भी, इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी) तरंग रूपों और दोनों प्रजातियों के क्यूटी अंतराल की अवधि उल्लेखनीय समान हैं (चित्र 1)। तदनुसार, जेब्राफ़िश मानव विरासत में मिला अतालता1,2,3 और संभावित मानव कार्डियोटॉक्सिसिटी के उच्च-थ्रूपुट दवा स्क्रीनिंग के लिए अध्ययन के लिए एक लोकप्रिय मॉडल के रूप में उभरा है4,5 , जैसे QT दीर्घीकरण।
मानव हृदय रोगों के नियमित मूल्यांकन में, शरीर की सतह ईसीजी 1903 में Einthoven द्वारा अपने आविष्कार के बाद से सबसे बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया पहली लाइन गैर इनवेसिव नैदानिक उपकरण बन गया है। इसके विपरीत, 2006 में वयस्क ज़ेब्राफ़िश के लिए शरीर की सतह ईसीजी रिकॉर्डिंग विधि के पहले अनुकूलन के बाद से6 और उसके बाद कई संशोधनों7, इस तकनीक के बावजूद क्षेत्र में कई शोधकर्ताओं के लिए काफी हद तक दुर्गम बनी हुई है इस पशु मॉडल की लोकप्रियता. वयस्क ज़ेब्राफ़िश के लिए विवो ईसीजी पूछताछ में प्रदर्शन करने वाले अन्य शोधकर्ताओं के लिए, ऑपरेटरों के बीच व्यापक भिन्नता विभिन्न अध्ययनों से ईसीजी निष्कर्षों में असंगति के लिए नेतृत्व किया. आम कारणों में बोझिल और महंगे विशेष उपकरणों और सॉफ्टवेयर, कम सिग्नल-टू-शोर अनुपात, और इलेक्ट्रोड प्लेसमेंट के बारे में भ्रम शामिल हैं, सभी आगे वयस्क ज़ेब्राफ़िश ईसीजी सुविधाओं की एक अधूरी समझ से बढ़ और अंतर्निहित ऊतक तंत्र. यह देखते हुए कि विवो ईसीजी में विद्युत रूप से फीनोटाइप लाइव जेब्राफ़िश के लिए केवल नैदानिक उपकरण है, संवेदनशीलता और विशिष्टता, पुन: उत्पादनीयता और पहुंच में सुधार करने के लिए एक मानकीकृत विधि की स्पष्ट आवश्यकता है।
यहाँ, हम विवो इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम में जेब्राफ़िश को रिकॉर्ड करने औरउसकी व्याख्या करने के लिए एक व्यावहारिक, विश्वसनीय और मान्य दृष्टिकोण प्रस्तुत करते हैं (चित्र 2)। ललाट विमान में एक द्विध्रुवी नेतृत्व का उपयोग करना, हम ईसीजी waveforms और जीना एनेस्थेटाइज़्ड स्वस्थ जंगली प्रकार एबी वयस्क ज़ेब्राफ़िश के अंतराल अवधि में परिवर्तन की जांच की.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Culture dishes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB087571</td>
			<td>100 mm x 20 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Forceps</td>
			<td>Fine Sciense Tools</td>
			<td>11253-20</td>
			<td>0.1 x 0.06 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FE136 Animal Bio Amp&#160;</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>FE231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris Forceps</td>
			<td>Fine Sciense Tools</td>
			<td>11064-07</td>
			<td>0.6 x 0.5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabChart 8 Pro</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td></td>
			<td>Software with ECG Module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle electrodes for Animal Bio Amp&#160;</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>MLA1213</td>
			<td>29 gauge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic Disposable Transfer Pipets</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-669-12</td>
			<td>6 in., 1.2 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PowerLab 4/35</td>
			<td>AD Instruments</td>
			<td>4//35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Sciense Tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td>2.5 mm, 0.075 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine (Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>E10521-10G</td>
			<td>MS-222</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo surface electrocardiography for adult zebrafish

वयस्क जेब्राफ़िश के इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम तरंग रूप और मनुष्यों के वे उल्लेखनीय समान हैं। इन इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम समानताएं न केवल मानव हृदय इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी और मायोपैथियों के लिए एक अनुसंधान मॉडल के रूप में, लेकिन यह भी संभावित cardiotoxicities के लिए उच्च थ्रूपुट दवा स्क्रीनिंग में एक सरोगेट मॉडल के रूप में जेब्राफ़िश के मूल्य में वृद्धि मनुष्य, जैसे क्यूटी दीर्घीकरण। इस प्रकार, वयस्क जेब्राफ़िश के लिए विवो इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी में एक विद्युत फीनोटाइपिंग उपकरण है जो आवश्यक है, यदि अपरिहार्य नहीं है, तो विवो इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल लक्षणों में क्रॉस-सेक्शनल या अनुदैर्घ्य के लिए। हालांकि, अक्सर, एक विश्वसनीय, व्यावहारिक, और लागत प्रभावी रिकॉर्डिंग विधि की कमी एक बड़ी चुनौती बनी हुई है जो विवो नैदानिक उपकरण में इसे और अधिक आसानी से सुलभ बनने से रोकती है। यहाँ, हम एक कम रखरखाव, लागत प्रभावी, और व्यापक प्रणाली है कि लगातार, विश्वसनीय रिकॉर्डिंग पैदावार का उपयोग वयस्क ज़ेब्राफ़िश के लिए vivo electrocardiography में करने के लिए एक व्यावहारिक, सीधा दृष्टिकोण का वर्णन. हम 12-18 महीने की उम्र के स्वस्थ वयस्क पुरुष जेब्राफ़िश का उपयोग कर हमारे प्रोटोकॉल वर्णन. हम भी डेटा सटीकता और मजबूती जल्दी इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम रिकॉर्डिंग प्रक्रिया में सुनिश्चित करने के लिए गुणवत्ता सत्यापन के लिए एक तेजी से वास्तविक समय व्याख्या रणनीति परिचय.

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In Vivo Surface Electrocardiography for Adult Zebrafish

यहाँ, हम लाइव एनेस्थेटाइज्ड वयस्क जेब्राफ़िश में इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम को रिकॉर्ड और व्याख्या करने के लिए एक विश्वसनीय, न्यूनतम इनवेसिव, और लागत प्रभावी विधि प्रस्तुत करते हैं।

वयस्क ज़ेब्राफ़िश के लिए विवो सतह इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी में

The electrocardiogram waveforms of adult zebrafish and those of humans are remarkably similar. These electrocardiogram similarities enhance the value of ...

वीवो इलेक्ट्रिकल कार्डियोग्राफी में क्रॉस-सेक्शनल और देशांतर अध्ययनों में लाइव जेब्राफिश में विद्युत फेनोटाइपिंग के लिए एकमात्र नैदानिक उपकरण है। हमारा दृष्टिकोण व्यावहारिक, न्यूनतम आक्रामक और लागत प्रभावी है क्योंकि हम स्तनधारियों के लिए एक डेटा अधिग्रहण प्रणाली को फिर से तैयार करते हैं। हम डेटा गुणवत्ता के प्रारंभिक सत्यापन के लिए वास्तविक समय ईसीजी व्याख्या की रणनीति पर जोर देते हैं।क्योंकि मानव और जेब्राफिश ईसीजी समान हैं, वीवो इलेक्ट्रोकार्डियोग्राफी में मानव हृदय शरीर विज्ञान मॉडलिंग में जेब्राफिश के उपयोग के साथ-साथ कार्डियोट एक्सीलेशन के लिए उच्च थ्रूपुट दवा स्क्रीनिंग की सुविधा प्रदान करता है, जैसे क्यूटी दीर्घीकरण। सही लीड पोजिशनिंग सफलता की कुंजी है। क्योंकि सामान्य ज़ेब्राफ़िश टी तरंग सबसे छोटी है, बड़े पी और आर तरंगों के ऊपर अपने आयाम को अनुकूलित करने को प्राथमिकता देती है।अपने ईसीजी निष्कर्षों की व्याख्या करने के लिए सामान्य और पैथोलॉजिकल ईसीजी पैटर्न का अध्ययन करें। ईसीजी विश्लेषण सॉफ्टवेयर की स्वचालित व्याख्या पर पूरी तरह भरोसा न करें। प्रयोग के दिन, ज़ेब्राफिश को मछलीघर से प्रयोगशाला तक पहुंचाएं।वीवो ईसीजी रिकॉर्डिंग सिस्टम में स्थापित करने के लिए, उपकरणों के आवश्यक टुकड़ों को कनेक्ट करें और ईसीजी लीड के तीन रंग-कोडित, स्टेनलेस स्टील इलेक्ट्रोड को एम्पलीफायर के तीन रंग-मिलान एक्सेस पोर्टल्स में डालें। स्तर 4 संज्ञाहरण के प्रेरण के लिए, संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित सबसे कम पूर्व निर्धारित सांद्रता पर एनेस्थेटिक्स का समाधान युक्त एक डिश में एक वयस्क जेब्राफिश विसर्जित करें। एक बार जब जेब्राफिश ने तीन सेकंड के लिए स्तर 4 संज्ञाहरण बनाए रखा है, तो तीन ईसीजी इलेक्ट्रोड के प्लेसमेंट के लिए मछली को तुरंत एक झिरी, वेंट्रल सतह के साथ एक नम स्पंज पर स्थानांतरित करने के लिए कुंद संदंश की एक जोड़ी का उपयोग करें।धीरे-धीरे एक काल्पनिक लाइन के ऊपर एक से दो मिलीमीटर बल्बस आर्टेरियोसस के स्तर पर वेंट्रल मिडलाइन में सकारात्मक इलेक्ट्रोड डालें जो ओपरक्यूम के दो निचले किनारों को जोड़ती है। वयस्क जेब्राफिश वेंट्रिकल की अधिकतम अपिकाबासल लंबाई से अधिक दूरी पर सकारात्मक इलेक्ट्रोड के लिए पार्श्व में छोड़े गए नकारात्मक इलेक्ट्रोड कोडाल और 0.5 से एक मिलीमीटर की स्थिति, फिर गुदा क्षेत्र के पास संदर्भ इलेक्ट्रोड कोडली स्थिति। ईसीजी रिकॉर्डिंग के लिए, सिस्टम शुरू करें और ईसीजी डेटा अधिग्रहण कार्यक्रम खोलें।रेंज, कम पास और हाई पास के लिए ड्रॉप-डाउन मेन्यू से मनचाहे सेटिंग का चयन करें। एक किलोहर्ट्ज की सैंपलिंग रेट पर लगातार गैप-फ्री ईसीजी रिकॉर्डिंग शुरू करने के लिए प्रेस स्टार्ट करें । अधिकतम सिग्नल-टू-शोर अनुपात के लिए लीड पोजिशनिंग को अनुकूलित करने के लिए, रिकॉर्डिंग को रोकने के लिए स्टॉप दबाएं और प्रत्येक दिल के लिए पहली रिकॉर्डिंग प्रयास के तुरंत बाद ट्रेस की समीक्षा करें।यदि ईसीजी सामान्य होने की उम्मीद है, तो पुष्टि करें कि सभी ईसीजी तरंग अलग और आसानी से दिखाई दे रहे हैं और पी वेव, नेट क्यूआरएस कॉम्प्लेक्स और टी वेव सभी सकारात्मक हैं। एक सबसे महत्वपूर्ण कदम सिग्नल-टू-शोर अनुपात को अधिकतम करने के लिए लीड पोजिशनिंग है। सुधारात्मक प्रतिक्रिया प्राप्त करने के लिए प्रत्येक मछली के लिए बहुत पहले ईसीजी रिकॉर्डिंग प्रयास के बाद हमारे चार मान्य मानदंड लागू करें।यदि एक सामान्य ईसीजी की उम्मीद है, तो इलेक्ट्रोड को तब तक आवश्यक रूप से फिर से स्थान दिया जाए जब तक कि ये सभी चार मान्य मानदंड संतुष्ट न हों। यदि एक सामान्य टी लहर की उम्मीद है, लेकिन टी तरंग बहुत छोटी है, तो टी तरंग आयाम को अधिकतम करने के लिए इलेक्ट्रोड को फिर से स्थान दें। लीड पोजिशनिंग को अनुकूलित करने के बाद ईसीजी रिकॉर्डिंग फिर से शुरू करें, बाद के विश्लेषण के लिए ईसीजी स्वीप्स को बचाएं।ईसीजी रिकॉर्डिंग सत्र के अंत में, मछली को घायल किए बिना इलेक्ट्रोड को सावधानी से हटा दें। अस्तित्व के अध्ययन में, मछली को ट्राइकेन से मुक्त ताजा, ऑक्सीजनयुक्त मछली के पानी में स्थानांतरित करें। कृपया ध्यान दें कि, इस वीडियो में, संज्ञाहरण से मछली वसूली के पाठकों को देखने की सुविधा के लिए, ऑक्सीजन बंद कर दिया है ।जीवित रहने के अध्ययन में संज्ञाहरण से वसूली की सुविधा के लिए, एक पाश्चर पिपेट का उपयोग करने के लिए तेजी से गहरे नाले पर पानी धार जब तक मछली नियमित गिल आंदोलन या तैराकी शुरू, तो मछली मछलीघर के लिए मछली लौटने से पहले संज्ञाहरण से पूर्ण वसूली के लिए मछली की निगरानी । मछली पूरी तरह से संज्ञाहरण से बरामद माना जाता है जब यह कम से पांच सेकंड के लिए सीधे तैर सकते हैं । विश्लेषण सेटिंग्स को परिभाषित करने के लिए, ईसीजी डेटा विश्लेषण कार्यक्रम खोलें और पूर्ण ईसीजी ट्रेस प्रदर्शित करने के लिए ब्याज की ईसीजी फाइल खोलें।विश्लेषण करने के लिए ईसीजी ट्रेस में रुचि के एक वर्ग को खींचने के लिए माउस का उपयोग करें। ईसीजी विश्लेषण मेनू से, सॉफ्टवेयर स्वचालित विश्लेषण के लिए विभिन्न पैरामीटर सेटिंग्स को प्रीडेफिन करने के लिए एक संवाद बॉक्स खोलने के लिए ईसीजी सेटिंग्स का चयन करें। दिल की लय और दर का विश्लेषण करें और यह निर्धारित करें कि हृदय लय साइनस है या नहीं, नियमित या अनियमित है।हृदय गति निर्धारित करने के लिए, यह सुनिश्चित करें कि सॉफ्टवेयर पी और आर तरंगों के सभी सही ढंग से पहचानता है क्योंकि एट्रियल और वेंट्रिकुलर दर क्रमशः पीपी और आरआर अंतराल पर आधारित है। गलत कर्सर को उपयुक्त पी और आर तरंगों में ले जाकर किसी भी ऑटो-पहचान गलतियों को सही करें। अंतराल और तरंग अवधि की गणना करने के लिए, ईसीजी विश्लेषण खोलें और लगातार कई हृदय चक्रों को एक औसत संकेत में संक्षिप्त करने के लिए औसत दृश्य।सुनिश्चित करें कि सॉफ्टवेयर पी तरंग, क्यूआरएस परिसर और टी वेव की शुरुआत और अंत को सही ढंग से पहचानता है, फिर किसी भी ऑटो-पहचान गलतियों को ठीक करने के लिए गलत कर्सर को उचित पदों पर ले जाता है। ईसीजी माप निर्यात करने के लिए, ईसीजी माप के सभी की समीक्षा करने के लिए टेबल व्यू का चयन करें और बाद के विश्लेषण के लिए एक स्प्रेडशीट में ब्याज के माप की नकल और पेस्ट करें। ईसीजी ट्रेस निर्यात करने के लिए, ईसीजी स्वीप में रुचि के एक वर्ग को उजागर करने के लिए मैग्नीफायर का उपयोग करें और वांछित दस्तावेज में स्वीप चिपकाएं।मानव हृदय के अनुबंध में, जिसमें दो अटरिया और दो वेंट्रिकल होते हैं, जेब्राफिश हार्ट में केवल एक एट्रियम और एक वेंट्रिकल होता है। अपनी स्पष्ट शारीरिक सादगी के बावजूद, जेब्राफिश हार्ट मानव दिल के साथ कई ईसीजी सुविधाओं को साझा करता है। उचित लीड प्लेसमेंट के लिए प्रकल्पित कार्डियक मुख्य धुरी के साथ लीड को संरेखित करने की आवश्यकता होती है।जब इलेक्ट्रोड को डर्मिस में बहुत सतही रूप से डाला जाता है, तो सीसा को अप्रत्यक्ष रूप से माना जाता है और वोल्टेज सिग्नल छोटे होते हैं। जब इलेक्ट्रोड को छाती पर मांसपेशी में उपयुक्त एक मिलीमीटर गहराई में डाला जाता है, तो सीसा अर्ध-प्रत्यक्ष हो जाता है और वोल्टेज संकेत बढ़ जाते हैं। यदि इलेक्ट्रोड वेंट्रिकल में एक मिलीमीटर से अधिक गहरा डाला जाता है, हालांकि, सीसा प्रत्यक्ष हो जाता है और वोल्टेज संकेतों में और भी वृद्धि होती है, आर तरंग आयाम के साथ चार गुना की तुलना में वृद्धि जब इलेक्ट्रोड उचित गहराई पर डाला जाता है ।बहुत गहराई से डाला इलेक्ट्रोड से ईसीजी ट्रेस भी इस तरह के एक नए अनुसूचित जनजाति अवसाद और एक नया टी लहर उलटा के रूप में वेंट्रिकुलर मायोकार्डियम, को चोट के नए संकेत से पता चलता है । यदि उनके प्लेसमेंट में सकारात्मक और नकारात्मक इलेक्ट्रोड बंद हो जाते हैं, तो ईसीजी तरंग के सभी असामान्य उलटा देखा जाता है। स्नेशन गहराई का एक अनुचित स्तर भी वीवो ईसीजी रिकॉर्डिंग में की गुणवत्ता ख़राब कर सकते हैं।मछली को मारने के बिना मछली को स्थिर करने के लिए पर्याप्त गहराई से एनेस्थेटाइज करना याद रखें। सिग्नल-टू-शोर अनुपात को अधिकतम करने और स्वचालित सॉफ्टवेयर विश्लेषण पर अधिक निर्भरता से बचने के लिए इलेक्ट्रोड की स्थिति रखें। इस न्यूनतम आक्रामक अस्तित्व प्रक्रिया के बाद, आंशिक एब्लेशन, दिल की रीसेक्शन, या दवा प्रतिक्रियाओं या देशांतर अध्ययनों में धारावाहिक ईसीजी जांच जैसी अन्य प्रक्रियाओं को करना संभव है।प्रणालीगत विषाक्तता ट्राइकेन सहित किसी भी संवेदनाहारी की संभावित जटिलताएं हैं। इन विषाक्तताओं को व्यक्तिगत एजेंटों की खुराक को कम करने के लिए कई एनेस्थेटिक्स के तालमेल को भुनाने से कम किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Biology

Transplantation of Whole Kidney Marrow in Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish में पूरे गुर्दे मज्जा का प्रत्यारोपण

Hematopoietic stem cells (HSC) are a rare population of pluripotent cells that maintain all the differentiated blood lineages throughout the life of an ...

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish में इंजेक्शन रेट्रो - कक्षीय

Drug treatment of whole animals is an essential tool in any model system for pharmacological and chemical genetic studies. Intravenous (IV) injection is ...

Intraperitoneal Injection into Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish में Intraperitoneal इंजेक्शन

A convenient method for chemically treating zebrafish is to introduce the reagent into the tank water, where it will be taken up by the fish. However, ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Adult Zebrafish Retina

Morpholinos के vivo electroporation में वयस्क Zebrafish रेटिना में

Many devastating inherited eye diseases result in progressive and irreversible blindness because humans cannot regenerate dying or diseased retinal ...

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

Morpholinos की में Regenerating वयस्क Zebrafish पूंछ फिन में vivo electroporation में

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Blood Collection for Biochemical Analysis in Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish में बायोकेमिकल विश्लेषण के लिए रक्त संग्रह

The zebrafish has been used as an animal model for studies of several human diseases. It can serve as a powerful preclinical platform for studies of ...

Gavaging Adult Zebrafish

वयस्क Zebrafish Gavaging

The zebrafish has become an important in vivo model in biomedical research. Effective methods must be developed and utilized to deliver compounds or ...

An Assay for Lateral Line Regeneration in Adult Zebrafish

वयस्क zebrafish में पार्श्व रेखा के उत्थान के लिए एक परख

Due to the clinical importance of hearing and balance disorders in man, model organisms such as the zebrafish have been used to study lateral line ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

उच्च throughput अनुप्रयोगों के लिए वयस्क zebrafish दिल की वसूली

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

Repeated Blood Collection for Blood Tests in Adult Zebrafish

वयस्क zebrafish में रक्त परीक्षण के लिए बार-बार रक्त संग्रह

Repeated blood collection is one of the most common techniques performed on laboratory animals. However, a non-lethal protocol for blood collection from ...