Name: isolation of macrophage subsets and stromal cells from human and mouse myocardial specimens
Uploaded: 2019-12-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Macrophage Subsets and Stromal Cells from Human and Mouse Myocardial Specimens at JoVE.com

وقد تسني هذا المشروع من خلال التمويل المقدم من معهد اكتشاف الأطفال بجامعه واشنطن ومستشفي سانت لويس للأطفال (CH-II-2015-462 ، CH-II-2017-628) ، ومؤسسه بارنز-المستشفى اليهودي (8038-88) ، و NHLBI (R01 HL138466, R01 HL139714). K.J.L. معتمد من قبل المعاهد القومية للصحة K08 HL123519 و Burخشونه صندوق الترحيب (1014782).

وقد وافقت جامعه واشنطن في مجلس سانت لويس للاستعراض المؤسسي علي البروتوكول المقدم (#201305086). وتوفر جميع المواد الموافقة المستنيرة قبل جمع العينات وتجري التجارب وفقا لبروتوكول الدراسة المعتمد. يتم تنفيذ البروتوكول المعروض بموافقه اللجنة المؤسسية للعناية بالماشية واستخدامها في كليه الطب بج?...

<ol>
	<li>Pinto, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+abundant+tissue+macrophage+population+in+the+adult+murine+heart+with+a+distinct+alternatively-activated+macrophage+profile.">An abundant tissue macrophage population in the adult murine heart with a distinct alternatively-activated macrophage profile.</a> PLoS One. 7 (5), e36814 (2012).</li><li>Hulsmans, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+facilitate+electrical+conduction+in+the+heart.">Macrophages facilitate electrical conduction in the heart.</a> Cell. 169 (3), 510-522 (2017).</li><li>Hulsmans, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+macrophages+promote+diastolic+dysfunction.">Cardiac macrophages promote diastolic dysfunction.</a> Journal of Experimental Medicine. 215 (2), 423-440 (2018).</li><li>Aurora, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+are+required+for+neonatal+heart+regeneration.">Macrophages are required for neonatal heart regeneration.</a> Journal of Clinical Investigation. 124 (3), 1382-1392 (2014).</li><li>Lavine, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+macrophage+lineages+contribute+to+disparate+patterns+of+cardiac+recovery+and+remodeling+in+the+neonatal+and+adult+heart.">Distinct macrophage lineages contribute to disparate patterns of cardiac recovery and remodeling in the neonatal and adult heart.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (45), 16029-16034 (2014).</li><li>Epelman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+and+adult-derived+resident+cardiac+macrophages+are+maintained+through+distinct+mechanisms+at+steady+state+and+during+inflammation.">Embryonic and adult-derived resident cardiac macrophages are maintained through distinct mechanisms at steady state and during inflammation.</a> Immunity. 40 (1), 91-104 (2014).</li><li>Leid, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primitive+embryonic+macrophages+are+required+for+coronary+development+and+maturation.">Primitive embryonic macrophages are required for coronary development and maturation.</a> Circulation Research. 118 (10), 1498-1511 (2016).</li><li>Bajpai, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+heart+contains+distinct+macrophage+subsets+with+divergent+origins+and+functions.">The human heart contains distinct macrophage subsets with divergent origins and functions.</a> Nature Medicine. 24 (8), 1234-1245 (2018).</li><li>Dick, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-renewing+resident+cardiac+macrophages+limit+adverse+remodeling+following+myocardial+infarction.">Self-renewing resident cardiac macrophages limit adverse remodeling following myocardial infarction.</a> Nature Immunology. 20, 29-39 (2019).</li><li>Nahrendorf, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+healing+myocardium+sequentially+mobilizes+two+monocyte+subsets+with+divergent+and+complementary+functions.">The healing myocardium sequentially mobilizes two monocyte subsets with divergent and complementary functions.</a> Journal of Experimental Medicine. 204 (12), 3037-3047 (2007).</li></ol>

يسمح البروتوكول لاستخراج المجموعات الفرعية الضامة المختلفة من عضله الام البشرية. البروتوكول بسيط ويستغرق 3 إلى 4 ساعات لاعداد تعليق خليه واحده جاهزه للتحليل FACS. وعلي الرغم من ان تنفيذ البروتوكول بسيط نسبيا ، فان هناك بعض الجوانب التقنية التي يتعين النظر فيها والتي ستقلل من التغير إلى ادني...

الضامة تمثل الأكثر وفره من نوع الخلايا المناعية في القلب ، وانها تلعب أدوارا هامه في توليد ردود الفعل التهابيه والتعويضية القوية بعد أصابه القلب1،2،3،4. في السابق ، حددت مجموعتنا مجموعتين رئيسيتين من الضامة في قلب murine مشتقه من أصول تنموية متميزة5،6. علي نطاق واسع ، يمكن تحديد السكان متميزة من الانسجه المقيمين القلب الضامة المجموعات الفرعية استنادا إلى التعبير سطح الخلية من CCR2 (C-C عزر المستقبلات chemokine 2). CCR2الضامة ( التعبير سطح الخلية: CCR2المنخفضة و CCR2-mhciiعاليه) هي من أصل جنيني (السلالات البدائية والحمرة) ، قادره علي التجديد الذاتي ، وتمثل السكان المهيمنة تحت ظروف التماثل المنزلي. CCR2المقيمين + الضامة هي من أصل نهائي الدم ، ويتم الحفاظ عليها من خلال التوظيف من الخلايا الاحاديه المتداولة ، وتمثل السكان القاصرين تحت ظروف التماثل المنزلي. وظيفيا ، CCR2الضامة توليد الحد الأدنى من التهابات وهي حاسمه للتنمية التاجية القلب الوليد التجديد5،7. في المقابل ،CCR2 + الضامة بدء استجابات التهابيه قويه بعد الإهانات القلبية والمساهمة في التبعية عضله الاصابه ، وأعاده عرض سلبيه من البطين الأيسر ، وفشل القلب التقدم8،9.
في الاونه الاخيره ، لقد أظهرنا ان عضله العين البشرية تحتوي أيضا علي مجموعتين فرعيتين متميزتين من الضامة التي تم تعريفها بالمثلاما CCR2 أو CCR2 +8. وكشفت التعبيرات الجينية والتحليلات الوظيفية ان الCCR2البشرية والCCR2 + الضامة تمثل مجموعات فرعيه متباعدة وظيفيا ومشابهه وظيفيالCCR2 والCCR2 + الضامة الموجودة في قلب الماوس. الإنسان CCR2الضامة التعبير عن مستويات قويه من عوامل النمو ، بما في ذلك IGF1 ، Pdgf ، Cyr61 ، و HB-egf. CCR2 + الضامة المخصب في مستقطبات والخلوية التي تعزز التهاب ، مثل il-1b ، آيل-6 ، سي سي-2 ، سي سي-7 ، و tnf-a. حفزCCR2 + الضامة تفرز مستويات اعلي بشكل ملحوظ من التهابات السايسيسين انترلوكين-1Β (IL-1β) في الثقافة. كيف تساهم هذه المجموعات الفرعية بشكل مختلف في إصلاح الانسجه وأعاده عرض البطين الأيسر (LV) في سياق أصابه القلب لا يزال مجالا للبحوث النشطة.
تحليل التدفق الخلوي القائم علي التجانس الضام في الماوس والقلب البشري يتطلب هضم انسجه القلب وتوليد تعليق خليه واحده تليها تحليل تدفق الخلوية أو فرز الخلايا لمزيد من العمليات المصب مثل التسلسل RNA السائبة/خليه واحده الجيش النيبالي التسلسلي التسلسل أو الخلايا لاختبارات وظيفية. البروتوكول الأصلي لاجراء تعليق خليه واحده من قلوب murine وأبلغت لأول مره من قبل مجموعه ناهريندورف في ناهريندورف وآخرون 200710. لدينا مختبر تكييف وتعديل البروتوكول لاستخراج الضامة من عضله العضل البشرية. باستخدام نفس البروتوكول ولكن مع تعديل طفيف في تلطيخ ومخطط النابضة ، ويمكن أيضا انتحصد الخلايا CD45 من عضله الام البشرية. يقدم هنا ، في النص والفيديو ، هو البروتوكول الذي يتم تنفيذه بشكل روتيني لاستخراج الضامة أو اللحمية من عضله الدم البشرية.
يتم الحصول علي عينات الانسجه القلبية من المرضي البالغين الذين يعانون من اعتلال عضله القلب المتوسع (DCM: مجهول الشخص أو العائلي) أو اعتلال العضلة الدماغية (ICM) الذي يخضع لعمليه غرس أو زرع القلب في جهاز مساعده البطين الأيسر (LVAD). القلوب المفسرة أو النوى LVAD هي إينترافاسكولارلي perfused مع المحلول الملحي البارد قبل بدء عمليه الهضم. من المهم ان نلاحظ ان "نوعيه" عينه من الانسجه التي تحدد من حيث درجه من تندب أو تسلل الانسجه الدهنية يمكن ان تؤثر بشكل كبير علي الغلة من الضامة. عينات القلب مع مساحات كبيره من تندب سيكون لها اقل بكثير من الغلة الخلية ويمكن ان تشكل القيود الفنية خطيره عند المطلوب أساليب التحليل المصب تتطلب في المختبر الخلية الخياطة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL Conocal Tubes</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>14-959-53A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell Strainers</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>50-828-736</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL Conical Tubes</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>352098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A10492-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2058</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase 1</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C0130-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM 1x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11965-084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse 1</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4527-20KU</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DRAQ5</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>62251</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA 0.5M pH 8</td>
			<td>Corning</td>
			<td>46-034-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enzyme Deactivating Buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>490 mL HBSS, 10 mL FBS, 1 g BSA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS Buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>976 mL PBS, 20 mL FBS, 4mL EDTA (0.5M)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A3840201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-406</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS 1x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14175-079</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>VWR</td>
			<td>63042-052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase type 1-s</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3506-500MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 1x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petridishes</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>172931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor Blade</td>
			<td>VWR</td>
			<td>55411-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-578</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of macrophage subsets and stromal cells from human and mouse myocardial specimens

الضامة تمثل الأكثر تجانسا ووفره الخلايا المناعية السكان في القلب وهي مركزيه في القيادة التهاب والاستجابات التعويضية بعد أصابه القلب. كيف المجموعات الفرعية المختلفة من الضامة تنسق الاستجابات المناعية بعد أصابه القلب هي منطقه نشطه من البحوث. المقدمة هنا هو بروتوكول بسيط ان مختبرنا ينفذ بشكل روتيني ، لاستخراج الضامة من الفئران والعينات البشرية عضله العين التي تم الحصول عليها من الافراد الأصحاء والمريضة. باختصار ، ينطوي هذا البروتوكول علي الهضم الانزيمي لأنسجه القلب لتوليد تعليق خليه واحده ، تليها تلطيخ الأجسام المضادة ، وتدفق الخلايا الخلوية. هذه التقنية هي مناسبه لاختبارات وظيفية أجريت علي الخلايا فرزها ، فضلا عن الجزء الأكبر وخليه واحده التسلسل RNA. ومن المزايا الرئيسية لهذا البروتوكول هو بساطته ، الحد الأدنى من يوم إلى يوم الاختلاف وتطبيق واسعه تسمح التحقيق في تغاير الضام عبر مختلف نماذج الماوس والكيانات البشرية المرض.

البروتوكول الموصوف يسمح بعزل الضامة من الماوس وعضله الام البشرية. باستخدام نفس البروتوكول ، ولكن مع تلطيخ مختلفه واستراتيجية النابضة ، ويمكن أيضا ان تحصد الخلايا اللحمية من عضله الام البشرية. تم الحصول علي نتائج FACS المعروضة هنا اما علي BD لسريي أو BD FACS ARIA الثالث منصة. تم إ?...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Macrophage Subsets and Stromal Cells from Human and Mouse Myocardial Specimens at JoVE.com

Isolation of Macrophage Subsets and Stromal Cells from Human and Mouse Myocardial Specimens

يقدم هنا بروتوكول لعزل مختلف المجموعات الفرعية من الضامة وغيرها من الخلايا غير المناعية من عضله الدم البشرية والماوس من خلال اعداد تعليق خليه واحده من خلال الهضم الانزيمي. وتعرض أيضا مخططات الصب لتحديد وتوصيف الضامة المعزولة علي أساس التدفق الخلوي.

عزل مجموعات الضامة والخلايا اللحمية من الإنسان والماوس عينات عضله القلب

Macrophages represent the most heterogeneous and abundant immune cell populations in the heart and are central in driving inflammation and reparative ...

القلب يحتوي على سكان غير متجانسة من الخلايا المناعية التي تلعب أدوارا حاسمة في التهاب القلب، فضلا عن إصلاح. من أجل فهم عدم تجانس الخلايا المناعية واكتساب المزيد من التبصر في وظيفتها ، من المهم أن يكون لديك طريقة تسمح باسترداد هذه الخلايا من القلب. يمكن أن تساعد هذه التقنية في الكشف عن تنوع الخلايا المناعية وغير المُمَنية التي توجد في القلب الصحي أو المريض.هناك ثلاث مزايا رئيسية لهذه التقنية. أولا ، انها سير عمل واحد بسيط يؤدي إلى توليد تعليق خلية واحدة من أنواع الخلايا المختلفة في غضون ثلاث ساعات من الوقت. ثانيا، أنه يؤدي إلى انتعاش عالية من السكان الخلايا المناعية وغير المناعة قابلة للحياة.وثالثا، انها طريقة متعددة جدا ويمكن تطبيقها على أنسجة القلب في الأنواع الأخرى كذلك. من المهم الانتباه إلى كمية الأنسجة المستخدمة في رد فعل الهضم الواحد. استخدام مقص معقمة، تشريح عينة الأنسجة من جدار apical أو الجانبي من البطين الأيسر في المالحة الباردة أو HBSS.تشريح بعناية من الدهون epicardial وتريال tendineae من العينة. مع مساعدة من شفرة معقم أو مقص، تشريح قطع الأنسجة إلى قطع تزن حوالي 200 ملليغرام. بعد القتل الرحيم الماوس، وفتح تجويف الصدر بمساعدة مقص حاد.استخدام الهيموستات حادة لرفع القلب صعودا. اثقب القلب بـ PBS البارد باستخدام إبرة قياس 25 متصلة بحقنة خمسة ملليلتر. perfuse حتى يظهر القلب مبيض في اللون.إزالة القلب ووضعها في طبق بيتري العقيمة على الجليد. ضع 200 ملليغرام من قطع الأنسجة القلبية البشرية أو قلب المورين في طبق بيتري معقمة. ناعما min الأنسجة باستخدام شفرة معقمة أو مقص.لإعداد الهضم، في أنبوب مخروطي 15 ملليلتر، إعداد حجم الهضم النهائي من ثلاثة ملليلتر لكل قطعة الأنسجة القلبية البشرية أو قلب مورين واحد مع الإنزيمات collagenase الأول، DNase الأول، وهيالورونيداز بتركيزات من 450، 60، و 60 وحدة لكل ملليلتر. إضافة 2.5 ملليلتر من DMEM في الأنبوب. مع مساعدة من ملقط نظيفة، ووضع الأنسجة المفروم ناعما في كل أنبوب رد فعل.تخلط جيدا من قبل دوامة لطيف. اجست لمدة ساعة واحدة في 37 درجة مئوية في حاضنة اهتزاز تعيين إلى سرعة التحريض منخفضة إلى متوسطة. بعد ساعة واحدة من الهضم، أخرج الأنابيب من الحاضنة ووضعها على الجليد.قم بإعداد 50 ملليلتر أنابيب مخروطية مع مصفاة 40 ميكرون خلية على القمة. الرطب المرشحات مع مليلتر اثنين من الإنزيم تعطيل العازلة. المقبل، إلغاء تنشيط الانزيمات الهضم عن طريق إضافة ثمانية ملليلتر من الإنزيم تعطيل العازلة لكل أنبوب الهضم.ثم صب الناتج 13 ملليلتر من مجموع خليط من خلال 40 ميكرون مصفاة الخلية في أنابيب مخروطية 50 ملليلتر. نقل العينات المصفاة مرة أخرى في أنابيب مخروطية 15 ملليلتر جديدة. تدور العينات في 400 مرات ز لمدة ست دقائق في أربع درجات مئوية.تجاهل supernatant ترك 0.5 ملليلتر من وسائل الإعلام. Resuspend بيليه الخلية عن طريق pipetting لطيف وإضافة ملليلتر واحد من ACK تحلل العازلة. دوامة لطيف الأنبوب واحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة خمس دقائق لأداء خلايا الدم الحمراء.بعد خمس دقائق في المخزن المؤقت ACK، إضافة تسعة ملليلتر DMEM إلى العينة. وضع الغطاء مرة أخرى على الأنابيب وعكس بلطف الأنابيب لخلط. تصفية من خلال مصفاة 40 ميكرون خلية وجمع الترشيح في أنابيب مخروطية 15 ملليلتر.الطرد المركزي الأنابيب في 400 مرات ز لمدة ست دقائق والتخلص من الفائق. إضافة ملليلتر واحد من العازلة FACS وإعادة تعليق بيليه. ثم نقله إلى أنبوب microcentuge 1.5 ملليلتر.مرة أخرى في جهاز طرد مركزي 400 مرة ز لمدة خمس دقائق. تجاهل الماوسين و resuspend بيليه في 100 ميكرولترات من العازلة FACS. تعليق خلية واحدة الآن على استعداد لتلوين الأجسام المضادة.أضف لوحة الأجسام المضادة البشرية النموذجية إلى عينات القلب عند تخفيف واحد إلى 50. استخدام الأجسام المضادة المختلفة للخلايا الوماضة و الضامة القلب مورين. احتضان لمدة 30 إلى 40 دقيقة في أربع درجات مئوية في الظلام.يضاف ملليلتر واحد من حاجز FACS ودوامة وبرفق والطرد المركزي بمعدل 400 مرة ز لمدة خمس دقائق. كرر هذه الخطوة الغسيل للمرة الثانية. ثم إعادة تعليق العينة في 350 ميكرولترات من المخزن المؤقت FACS وإضافة DAPI للوصول إلى تركيز نهائي من ميكرومولار واحد.وقد أصبحت العينات جاهزة الآن لتحليل نظام مراقبة الأصول الميدانية. في هذا البروتوكول، تم تحقيق عزل الضامة من الماوس و عضلة القلب البشرية. هذا الرقم يبين غير المجهزة والمعالجة الإنسان LVAD الأساسية.وقدم مخطط الغسور لتدفق الفرز من CCR2 السلبية وCR2 الضامة البشرية الإيجابية من عضلة القلب البشرية وكذلك لD45 الخلايا القوية السلبية من اعتلال عضلة القلب الإقفي الإنسان. صور رايت الملون FACS فرز CD45 إيجابية وCD45 تظهر الخلايا السلبية سليمة غشاء الخلية مما يدل على صلاحية. كما نجح مخطط البوابات لفرز الضامة من قلب الماوس.وزن الأنسجة المستخدمة للتفاعل الأنزيمي أمر بالغ الأهمية للهضم الفعال. لا تستخدم أكثر من 200 ملليغرام من الأنسجة لتركيزات انزيم المشار إليها في البروتوكول. بعد هذه الطريقة، يمكن أن تكون الخلايا مثقفا لتشيز في المختبر المقايسات.يمكن فرز الخلايا لتسلسل RNA المجمع أو تسلسل الخلايا المفردة. وقد خدم هذا الأسلوب كتقنية لا تقدر بثمن في اكتشاف التغايرية الضامة التي لم يتم التعرف عليها من قبل التي هي موجودة في قلب الإنسان صحي أو المريض. باستخدام هذه الطريقة متبوعة بتسلسل الخلايا المفردة، تجري دراسات للكشف عن كيفية اختلاف مختلف الخلايا المناعية وغير المناعية بين القلب المريض مقابل القلب السليم.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells

عزل خلايا فأر التجويف البريتوني

The peritoneal cavity is a membrane-bound and fluid-filled abdominal cavity of mammals, which contains the liver, spleen, most of the gastro-intestinal ...

Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

عزل خلايا الرئة ماوس شجيرى

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

Isolation and Characterization of Dendritic Cells and Macrophages from the Mouse Intestine

عزل وتوصيف الخلايا الجذعية والضامة من الأمعاء ماوس

Within the intestine reside unique populations of innate and adaptive immune cells that are involved in promoting tolerance towards commensal flora and ...

Isolation of Precursor B-cell Subsets from Umbilical Cord Blood

عزل مجموعات فرعية B-الخلية السلائف من دم الحبل السري

Umbilical cord blood is highly enriched for hematopoietic progenitor cells at different lineage commitment stages. We have developed a protocol for ...

Isolation of Myeloid Dendritic Cells and Epithelial Cells from Human Thymus

عزل الخلايا الجذعية متعلق بالنخاع الشوكي والخلايا الظهارية من الغدة الصعترية الإنسان

In this protocol we provide a method to isolate dendritic cells (DC) and epithelial cells (TEC) from the human thymus. DC and TEC are the major antigen ...

Isolation of Murine Lymph Node Stromal Cells

عزل خلايا الفئران العقدة الليمفاوية اللحمية

Secondary lymphoid organs including lymph nodes are composed of stromal cells that provide a structural environment for homeostasis, activation and ...

Mouse Na&#239;ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Mouse NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

الماوس السذاجة CD4<sup&gt; +</sup&gt; عزل T خلية و<em&gt; في المختبر</em&gt; التمايز إلى T مجموعات فرعية خلية

Antigen inexperienced (na&#239;ve) CD4+ T cells undergo expansion and differentiation to effector subsets at the time of T cell receptor (TCR) recognition ...

Isolation of Leukocytes from the Human Maternal-fetal Interface

عزل الكريات البيضاء من واجهة الإنسان الأم والجنين

Pregnancy is characterized by the infiltration of leukocytes in the reproductive tissues and at the maternal-fetal interface (decidua basalis and decidua ...

Isolation of Viral Replication Compartment-enriched Sub-nuclear Fractions from Adenovirus-infected Normal Human Cells

العزلة الفيروسية النسخ المتماثل حجرة التخصيب النووي الكسور الفرعية من اتش المصابة الخلايا الطبيعية الإنسان

During infection of human cells by adenovirus (Ad), the host cell nucleus is dramatically reorganized, leading to formation of nuclear microenvironments ...

Isolation and Flow Cytometric Analysis of Immune Cells from the Ischemic Mouse Brain

العزلة وتحليل تدفق Cytometric من الخلايا المناعية من الدماغ الدماغية ماوس

Ischemic stroke initiates a robust inflammatory response that starts in the intravascular compartment and involves rapid activation of brain resident ...