Name: isolation of macrophage subsets and stromal cells from human and mouse myocardial specimens
Uploaded: 2019-12-17T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Macrophage Subsets and Stromal Cells from Human and Mouse Myocardial Specimens at JoVE.com

Dette projekt blev muliggjort ved finansiering fra children's Discovery Institute of Washington University og St. Louis children's Hospital (CH-II-2015-462, CH-II-2017-628), Foundation of Barnes-Jewish Hospital (8038-88), og NHLBI (R01 HL138466, R01 HL139714). K.J.L. understøttes af NIH K08 HL123519 og Burroughs Welcome Fund (1014782).

Den forelagte protokol er blevet godkendt af Washington University i St. Louis institutionel revisions bestyrelse (#201305086). Alle forsøgspersoner giver informeret samtykke før prøveindsamlingen, og forsøgene udføres i overensstemmelse med den godkendte forsøgsprotokol. Den præsenterede protokol er udført med godkendelse af den institutionelle dyrepleje og brug udvalg på Washington University School of Medicine og følger de retningslinjer, der er beskrevet i NIH guide til pleje og brug af forsøgsdyr.
<p ...

<ol>
	<li>Pinto, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+abundant+tissue+macrophage+population+in+the+adult+murine+heart+with+a+distinct+alternatively-activated+macrophage+profile.">An abundant tissue macrophage population in the adult murine heart with a distinct alternatively-activated macrophage profile.</a> PLoS One. 7 (5), e36814 (2012).</li><li>Hulsmans, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+facilitate+electrical+conduction+in+the+heart.">Macrophages facilitate electrical conduction in the heart.</a> Cell. 169 (3), 510-522 (2017).</li><li>Hulsmans, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+macrophages+promote+diastolic+dysfunction.">Cardiac macrophages promote diastolic dysfunction.</a> Journal of Experimental Medicine. 215 (2), 423-440 (2018).</li><li>Aurora, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophages+are+required+for+neonatal+heart+regeneration.">Macrophages are required for neonatal heart regeneration.</a> Journal of Clinical Investigation. 124 (3), 1382-1392 (2014).</li><li>Lavine, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distinct+macrophage+lineages+contribute+to+disparate+patterns+of+cardiac+recovery+and+remodeling+in+the+neonatal+and+adult+heart.">Distinct macrophage lineages contribute to disparate patterns of cardiac recovery and remodeling in the neonatal and adult heart.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (45), 16029-16034 (2014).</li><li>Epelman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+and+adult-derived+resident+cardiac+macrophages+are+maintained+through+distinct+mechanisms+at+steady+state+and+during+inflammation.">Embryonic and adult-derived resident cardiac macrophages are maintained through distinct mechanisms at steady state and during inflammation.</a> Immunity. 40 (1), 91-104 (2014).</li><li>Leid, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primitive+embryonic+macrophages+are+required+for+coronary+development+and+maturation.">Primitive embryonic macrophages are required for coronary development and maturation.</a> Circulation Research. 118 (10), 1498-1511 (2016).</li><li>Bajpai, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+heart+contains+distinct+macrophage+subsets+with+divergent+origins+and+functions.">The human heart contains distinct macrophage subsets with divergent origins and functions.</a> Nature Medicine. 24 (8), 1234-1245 (2018).</li><li>Dick, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Self-renewing+resident+cardiac+macrophages+limit+adverse+remodeling+following+myocardial+infarction.">Self-renewing resident cardiac macrophages limit adverse remodeling following myocardial infarction.</a> Nature Immunology. 20, 29-39 (2019).</li><li>Nahrendorf, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+healing+myocardium+sequentially+mobilizes+two+monocyte+subsets+with+divergent+and+complementary+functions.">The healing myocardium sequentially mobilizes two monocyte subsets with divergent and complementary functions.</a> Journal of Experimental Medicine. 204 (12), 3037-3047 (2007).</li></ol>

Protokollen giver mulighed for udvinding af forskellige makrofag undergrupper fra humant myokardiet. Protokollen er enkel og tager 3 til 4 timer til at forberede enkelt cellesuspension klar til FACS analyse. Selv om protokollen er relativt enkel at udføre, er der visse tekniske aspekter, der skal overvejes, som vil minimere variabilitet. For det første er det nødvendigt at arbejde rettidigt med humant væv for at opnå optimal cellelevedygtighed. Det er vigtigt at holde vævet i koldt saltvand/HBSS for at minimere cel...

Makrofager repræsenterer den mest udbredte immuncelle type i hjertet, og de spiller en betydelig rolle i at generere robuste inflammatoriske og reparative reaktioner efter hjerte skade1,2,3,4. Tidligere identificerede vores gruppe to store undergrupper af makrofager i murine hjertet afledt af distinkte udviklingsmæssige oprindelser5,6. Bredt, forskellige populationer af væv residente hjerte makrofag undergrupper kan identificeres baseret på cellens overflade ekspression af CCR2 (C-C Motif chemokine receptor 2). CCR2- makrofager (celleoverflade udtryk: CCR2-MHCIIlav og CCR2-mhciihøj) er af embryonale oprindelse (primitive og erythromyeloid lineages), i stand til at selv forny, og repræsentere en dominerende befolkning under homeostatiske forhold. Residente CCR2+ makrofager er af endelig hæmatopoietisk oprindelse, opretholdes gennem rekruttering fra cirkulerende monocytter, og repræsenterer en mindre population under homeostatiske forhold. Funktionelt, CCR2- makrofager genererer minimal inflammation og er afgørende for koronar udvikling neonatal hjerte regenerering5,7. I modsætning hertil initierer CCR2+ makrofager robuste inflammatoriske reaktioner efter hjertets fornærmelser og bidrager til sikkerhedsstillelse kardiomyocyt skade, negativ remodeling af venstre ventrikel, og hjertesvigt progression8,9.
For nylig har vi vist, at det menneskelige myokardiet også indeholder to særskilte undergrupper af makrofager, der er identificeret på samme måde som enten CCR2- eller CCR2+8. Genekspression og funktionelle analyser afslørede, at humane CCR2- og CCR2+ makrofager repræsenterer funktionelt divergerende delsæt og er funktionelt analoge med CCR2- og CCR2+ makrofager, der findes i muse hjertet. Humane CCR2- makrofager udtrykker robuste niveauer af vækstfaktorer, herunder IGF1, PDGF, CYR61 og HB-EGF. CCR2+ makrofager er beriget med kemo okiner og cytokiner, der fremmer inflammation, såsom Il-1b, IL-6, CCL-2, CCL-7 og TNF-a. Stimuleret CCR2+ makrofager udskiller markant højere niveauer af den inflammatoriske cytokin interleukin-1β (Il-1β) i kulturen. Hvordan disse undergrupper differentielt bidrage til vævsreparation og venstre ventrikel (LV) remodeling i forbindelse med hjerte skade er fortsat et område med aktiv forskning.
Flow-cytometri-baseret analyse af makrofag heterogenitet i mus og menneskelige hjerte kræver at fordøje hjertevæv og generere en enkelt cellesuspension efterfulgt af flow cytometrisk analyse eller celle sortering for yderligere downstream processer såsom bulk RNA sekventering/enkelt celle RNA sekventering eller dyrkning cellerne for funktionelle assays. Den oprindelige protokol for at gøre en enkelt cellesuspension fra murine hjerter blev først rapporteret af Nahrendorf gruppe i Nahrendorf et al. 200710. Vores laboratorium har tilpasset og modificeret protokollen til at udtrække makrofager fra den menneskelige myokardiet. Ved hjælp af samme protokol, men med mindre modifikation i farvning og gating ordning, kan CD45- stromale celler fra det menneskelige myokardiet også høstes. Præsenteret her, i tekst og video, er en protokol, der udføres rutinemæssigt til udvinding af makrofager eller stromale fra det menneskelige myokardiet.
Kardiale vævsprøver fås hos voksne patienter med dilateret kardiomyopati (DCM: idiopatisk eller familiær) eller iskæmisk kardiomyopati (ICM), der gennemgår implantation af venstre ventrikel assistent (LVAD) eller hjertetransplantation. Forklarende hjerter eller LVAD-kerner er Intravaskulært perfekteret med koldt saltvand, før fordøjelses proceduren påbegyndes. Det er vigtigt at bemærke, at "kvalitet" af væv prøve bestemt i form af ardannelse eller fedtvæv infiltration kan i høj grad påvirke udbyttet af makrofager. Hjerte prøver med store områder af ardannelse vil have meget lavere celle udbytte og kan udgøre en alvorlig teknisk begrænsning, når det ønskes downstream analysemetoder kræver in vitro-celledyrkning.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL Conocal Tubes</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>14-959-53A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>40 &#181;m Cell Strainers</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>50-828-736</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL Conical Tubes</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>352098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACK Lysis Buffer</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A10492-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2058</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase 1</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C0130-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>D1306</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM 1x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11965-084</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNAse 1</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4527-20KU</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DRAQ5</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>62251</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA 0.5M pH 8</td>
			<td>Corning</td>
			<td>46-034-CI</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enzyme Deactivating Buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>490 mL HBSS, 10 mL FBS, 1 g BSA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FACS Buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>976 mL PBS, 20 mL FBS, 4mL EDTA (0.5M)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A3840201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-406</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS 1x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14175-079</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>VWR</td>
			<td>63042-052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase type 1-s</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3506-500MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS 1x</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>14190-136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petridishes</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>172931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor Blade</td>
			<td>VWR</td>
			<td>55411-050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-578</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of macrophage subsets and stromal cells from human and mouse myocardial specimens

Makrofager repræsenterer de mest heterogene og rigelige immuncelle populationer i hjertet og er centrale i kørsel betændelse og reparative reaktioner efter hjerte skade. Hvordan forskellige undergrupper af makrofager orkestrat immunresponser efter hjerte skade er et aktivt område af forskning. Præsenteret her er en simpel protokol, som vores laboratorium udfører rutinemæssigt, til udvinding af makrofager fra mus og humant myokardiet prøver opnået fra raske og syge individer. Kort, denne protokol indebærer enzymatisk fordøjelse af hjernevæv til at generere en enkelt cellesuspension, efterfulgt af antistof farvning, og flow cytometry. Denne teknik er velegnet til funktionelle assays udført på sorterede celler samt bulk og enkelt celle RNA Sequencing. En stor fordel ved denne protokol er dens enkelhed, minimal dag til dag variation og bred anvendelighed tillader undersøgelse af makrofag heterogenitet på tværs af forskellige musemodeller og menneskelige sygdoms enheder.

Den beskrevne protokol tillader isolering af makrofager fra mus og humant myokardiet. Ved hjælp af den samme protokol, men med en anden farvning og gating strategi, kan stromale celler også høstes fra den menneskelige myokardiet. FACS resultater præsenteret her blev erhvervet enten på BD LSRII eller BD FACS ARIA III platform. Kompensations kontrol blev genereret fra enkelt farve kontrolprøver fra farvede splenocytter. Figur 1 viser ubehandlet og forarbe...

Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Macrophage Subsets and Stromal Cells from Human and Mouse Myocardial Specimens at JoVE.com

Isolation of Macrophage Subsets and Stromal Cells from Human and Mouse Myocardial Specimens

Præsenteret her er en protokol til at isolere forskellige undergrupper af makrofager og andre ikke-immunceller fra menneske og mus myokardiet ved at forberede en enkelt cellesuspension gennem enzymatisk fordøjelse. Gating ordninger for flow cytometri baseret identifikation og karakterisering af isolerede makrofager er også præsenteret.

Isolering af makrofag-undergrupper og stromale celler fra humane og muse Myokardie prøver

Macrophages represent the most heterogeneous and abundant immune cell populations in the heart and are central in driving inflammation and reparative ...

Hjerte indeholder heterogene population af immunceller, der spiller afgørende roller i hjertebetændelse samt reparation. For at forstå heterogeniteten af immunceller og få yderligere indsigt i deres funktion, er det vigtigt at have en metode, der vil give mulighed for inddrivelse af disse celler fra hjertet. Denne teknik kan hjælpe afdække immun samt nonimmune celle mangfoldighed, der bor i det sunde eller en syg hjerte.Der er tre store fordele ved denne teknik. For det første er det en simpel enkelt arbejdsgang, der fører til generering af en enkelt celle suspension af forskellige celletyper inden for tre timer. For det andet fører det til høj genopretning af levedygtige immun- og ikke-immune cellepopulationer.Og for det tredje, det er en meget alsidig metode og kan anvendes på hjertevæv i andre arter samt. At være opmærksom på mængden af væv, der anvendes til en enkelt fordøjelse reaktion er vigtig. Brug steril saks, dissekere vævsprøve fra den apikale eller laterale væg af venstre hjertekammer i koldt saltvand eller HBSS.Forsigtigt dissekere ud epicardial fedt og chordae tendineae fra prøven. Ved hjælp af en steril klinge eller saks dissekeres vævsstykkerne i stykker, der vejer ca. 200 mg. Efter euthanizing musen, åbne brysthulen ved hjælp af skarpe saks.Brug stumpe hemostats til at løfte hjertet opad. Se hjertet med kold PBS ved hjælp af en 25 gauge nål fastgjort til en fem milliliter sprøjte. Se på, indtil hjertet ser ud blancheret i farver.Fjern hjertet og læg det i en steril petriskål på is. Placer 200 milligram humant hjertevæv stykker eller murine hjerte i en steril petriskål. Hak vævet fint med en steril klinge eller saks.At oprette fordøjelser, i en 15 milliliter konisk rør, forberede en endelig fordøjelse volumen af tre milliliter for hver humane hjertevæv luns eller en murine hjerte med enzymer kollagen I, DNase I, og hyaluronidase ved koncentrationer på 450, 60, og 60 enheder pr milliliter. Der tilsættes 2,5 milliliter DMEM i røret. Ved hjælp af rene snævninger anbringes det fint hakkede væv i hvert reaktionsrør.Bland godt ved blid vortexing. Fordøje i en time ved 37 grader Celsius i en rystende inkubator indstillet til en lav til medium agitation hastighed. Efter en times fordøjelse, tage rørene ud fra rugemaskinen og sted på is.Opsæt 50 milliliter koniske rør med en 40 mikron celle si på toppen. Våd filtrene med to milliliter enzymdeaktiveringsbuffer. Dernæst deaktivere fordøjelseen enzymer ved at tilføje otte milliliter enzym deaktivering buffer til hver fordøjelsesrør.Hæld derefter de resulterende 13 milliliter af den samlede blanding gennem 40 mikrocellestingen i de 50 milliliter koniske rør. De filtrerede prøver overføres tilbage i friske 15 milliliter koniske rør. Drej prøverne ved 400 gange g i seks minutter ved fire grader Celsius.Kassér supernatanten, der efterlader 0,5 milliliter medier. Resuspend cell pellet ved blid pipettering og tilsæt en milliliter ACK lysis buffer. Blid hvirvel røret og inkubere ved stuetemperatur i fem minutter til at udføre røde blodlegemer lysis.Efter fem minutter i ACK-buffer tilsættes der ni milliliter DMEM til prøven. Sæt låget tilbage på rørene og forsigtigt vende rørene til at blande. Gennem en 40 mikrocelles si filtreres gennem og filtratet opsamler i 15 milliliter koniske rør.Centrifuge rørene ved 400 gange g i seks minutter og kassér supernatanten. Tilsæt en milliliter FACS buffer og resuspend pellet. Derefter overføres det til et 1,5 milliliter mikrocentrifugerør.Centrifuge igen ved 400 gange g i fem minutter. Kassér supernatanten og opsplit pellet i 100 mikroliter af FACS buffer. En enkelt celle suspension er nu klar til antistof farvning.Tilføj en typisk humant antistof panel til hjertet prøver på en til 50 fortynding. Brug forskellige antistoffer til stromale celler og murine hjerte makrofager. Inkubere i 30 til 40 minutter ved fire grader Celsius i mørke.Tilsæt en milliliter FACS buffer, forsigtigt vortex og centrifuge ved 400 gange g i fem minutter. Gentag dette vasketrin en gang til. Derefter opslæmmes prøven i 350 mikroliter FACS-buffer, og DAPI tilsættes for at opnå en endelig koncentration af en mikromolar.Prøverne er nu klar til FACS-analyse. I denne protokol blev der opnået isolering af makrofager fra mus og humant myokardi. Denne figur viser uforarbejdede og forarbejdede menneskelige LVAD kerne.Gating ordningen for flow sortering af CCR2 negative og CCR2 positive menneskelige makrofager fra humant myokardi samt for CD45 negative stromale celler fra human iskæmisk kardiomyopati blev præsenteret. Billederne af Wright farves FACS sorteret CD45 positive og CD45 negative celler viser intakt cellemembran angiver levedygtighed. Gating ordningen for at sortere makrofager fra en mus hjerte var også en succes.Vægten af det væv, der anvendes til enzymatisk reaktion, er afgørende for en effektiv fordøjelse. Brug ikke mere end 200 milligram væv til de enzymkoncentrationer, der er angivet i protokollen. Efter denne metode kan celler dyrkes til in vitro stimulation assays.Celler kan sorteres til bulk RNA-sekvensering eller enkeltcellesekventering. Denne metode har tjent som en uvurderlig teknik til at opdage den tidligere ukendte makrofag heterogenitet, der er til stede i det sunde eller syge menneskelige hjerte. Ved hjælp af denne metode efterfulgt af enkelt celle sekventering, undersøgelser er i gang for at afdække, hvordan forskellige immun og ikke-immun celler varierer fra syge hjerte versus det sunde hjerte.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Isolation of Mouse Peritoneal Cavity Cells

The peritoneal cavity is a membrane-bound and fluid-filled abdominal cavity of mammals, which contains the liver, spleen, most of the gastro-intestinal ...

Isolation of Mouse Lung Dendritic Cells

Isolering af Mouse Lung dendritiske celler

Lung dendritic cells (DC) play a fundamental role in sensing invading pathogens 1,2 as well as in the control of tolerogenic responses 3 in the ...

Isolation and Characterization of Dendritic Cells and Macrophages from the Mouse Intestine

Isolering og karakterisering af dendritiske celler og makrofager fra mus Tarmen

Within the intestine reside unique populations of innate and adaptive immune cells that are involved in promoting tolerance towards commensal flora and ...

Isolation of Precursor B-cell Subsets from Umbilical Cord Blood

Isolering af precursor B-celle-undergrupper fra navlestrengsblod

Umbilical cord blood is highly enriched for hematopoietic progenitor cells at different lineage commitment stages. We have developed a protocol for ...

Isolation of Myeloid Dendritic Cells and Epithelial Cells from Human Thymus

Isolering af myeloide dendritiske celler og epitelceller fra human Thymus

In this protocol we provide a method to isolate dendritic cells (DC) and epithelial cells (TEC) from the human thymus. DC and TEC are the major antigen ...

Isolation of Murine Lymph Node Stromal Cells

Isolering af murine lymfeknuder stromacellers

Secondary lymphoid organs including lymph nodes are composed of stromal cells that provide a structural environment for homeostasis, activation and ...

Mouse Na&#239;ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Mouse NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4+ T Cell Isolation and In vitro Differentiation into T Cell Subsets

Mus Naïve CD4<sup&gt; +</sup&gt; T Cell Isolation og<em&gt; In vitro</em&gt; Differentiering til T-celledelmængder

Antigen inexperienced (na&#239;ve) CD4+ T cells undergo expansion and differentiation to effector subsets at the time of T cell receptor (TCR) recognition ...

Isolation of Leukocytes from the Human Maternal-fetal Interface

Isolering af leukocytter fra Human Maternal-føtal grænseflade

Pregnancy is characterized by the infiltration of leukocytes in the reproductive tissues and at the maternal-fetal interface (decidua basalis and decidua ...

Isolation of Viral Replication Compartment-enriched Sub-nuclear Fractions from Adenovirus-infected Normal Human Cells

Isolering af Viral Replication Rum-berigede underentreprise nukleare fraktioner fra Adenovirus-inficerede Normal humane celler

During infection of human cells by adenovirus (Ad), the host cell nucleus is dramatically reorganized, leading to formation of nuclear microenvironments ...

Isolation and Flow Cytometric Analysis of Immune Cells from the Ischemic Mouse Brain

Isolering og flowcytometrisk analyse af immunceller fra iskæmisk Mouse Brain

Ischemic stroke initiates a robust inflammatory response that starts in the intravascular compartment and involves rapid activation of brain resident ...