Name: hybrid microdrive system with recoverable opto-silicon probe and tetrode for dual-site high density recording in freely moving mice
Uploaded: 2019-08-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Hybrid Microdrive System with Recoverable Opto-Silicon Probe and Tetrode for Dual-Site High Density Recording in Freely Moving Mice at JoVE.com

Bu çalışma kısmen Japonya Bilim intidanSı Araştırma Burslarını Destekleme Derneği (HO), Donatılmış Bilgin Programı (TK), İnsan Sınırı Bilim Programı (TK), Beyin Araştırma Vakfı (TK), Fakülte Bilim ve Teknoloji Edinimi ve Tutma Programı (TK), Beyin ve Davranış Araştırma Vakfı (TK) ve Sumitomo Vakfı Araştırma Hibe (JY), NARSAD Genç Araştırmacı Araştırma Grant (JY) tarafından. Makalenin hazırlanması sırasında değerli yorum ve öneriler için W. Marks teşekkür ederiz.

Burada açıklanan tüm yöntemler Texas Üniversitesi Güneybatı Tıp Merkezi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır.
1. Mikrosürücü dizi parçalarının hazırlıkları
<ol><li>Mikrosürücü dizi parçalarını diş modeli reizini kullanarak 3D yazıcı kullanarak yazdırın (Şekil1A,B). Yazdırılan parçalardaki küçük delikleri açık ve uygulanabilir tutmak için tek tek 3B yazdırılan katmanların kalınlığının 5...

Protokol, bağımsız ayarlanabilir tetrodelar ve serbestçe davranan farelerde silikon sonda kullanarak iki beyin alanından nöral aktivitelerin kaydedilmesine olanak tanıyan melez bir mikrosürücü dizisinin nasıl inşa edilip yerleştirilecek olduğunu gösteriyor. Ayrıca optogenetik deneyler ve deneylerden sonra silikon sonda kurtarma gösterir. Ayarlanabilir silikon probu33 veya opto-silikon probu36 implantasyonu daha önce farelerde gösterilmiş olsa da, bu prot...

Farklı beyin bölgelerinin birbirleriyle nasıl dinamik olarak etkileşime girebildiğini araştırarak, nöronal aktivitenin öğrenme ve hafıza gibi bilişsel süreci nasıl desteklediğini anlamak çok önemlidir. Bilişsel görevlerin altında yatan nöral aktivitedinamiklerini açıklamak için, büyük ölçekli hücre dışı elektrofizyoloji mikrosürücüdizileri1 ,2,3yardımı ile serbestçe hareket eden hayvanlarda yapılmıştır, 4 . Son yirmi yılda, mikrosürücü dizi çeşitli fareler için birden fazla beyin bölgelerine elektrotlar implant geliştirilmiştir5,6,7,8 ve fareler9, 10.000 , 11.11.20 , 12. Bununla birlikte, mevcut mikrosürücü tasarımları genellikle birden fazla prob türünün kullanımına izin vermez, araştırmacıları belirli yararları ve sınırlamaları olan tek bir elektrot türünü seçmeye zorlar. Örneğin, tetrode dizileri dorsal hipokampus CA1gibiyoğun nüfuslu beyin bölgeleri için iyi çalışır1 ,13, silikon problar anatomik bağlantıları incelemek için daha iyi bir geometrik profil vermek ise14 , 15. yıl.
Tetrodes ve silikon problar genellikle in vivo kronik kayıt için kullanılır, ve her biri kendi avantajları ve dezavantajları vardır. Tetrodes maliyet etkinliği ve mekanik sertlik ek olarak, tek elektrotlar16,17daha iyi tek birim izolasyon önemli avantajları olduğu kanıtlanmıştır. Ayrıca microdrives8,18,19,20ile kombine edildiğinde tek birim faaliyetlerinin daha yüksek verim sağlar. Nöral devrelerin işlevini anlamak için aynı anda kaydedilen nöronların sayısını artırmak esastır21. Örneğin, zamana bağlı22 veya 23 hücreyi ödüllendirmek gibi işlevsel olarak heterojen hücre türlerinin küçük popülasyonlarını araştırmak için çok sayıda hücre gerekir. Başak dizilerinin kod çözme kalitesini artırmak için çok daha yüksek hücre numaraları gereklidir13,24,25.
Tetrodes, ancak, mekansal olarak dağıtılmış hücreleri kayıt bir dezavantaj var, korteks veya talamus gibi. Tetrodes aksine, silikon problar mekansal dağıtım ve yerel alan potansiyelleri etkileşim sağlayabilir (LPS) ve yerel bir yapı içinde spiking faaliyetleri14,26. Çok saplı silikon problar kayıt sitelerinin sayısını daha da artırır ve tek veya komşu yapılar arasında kayıt sağlar27. Ancak, bu tür diziler tetrodes göre elektrot sitelerinin konumlandırma daha az esnektir. Buna ek olarak, karmaşık başak sıralama algoritmaları tetrodes28,29,30tarafından elde edilen verileri yansıtmak için komşu kanalların eylem potansiyelleri hakkında bilgi ayıklamak için yüksek yoğunluklu problar gereklidir. Bu nedenle, tek birimlerin genel verim genellikle tetrodes daha azdır. Ayrıca, silikon problar kırılganlık ları ve yüksek maliyeti nedeniyle dezavantajlıdır. Bu nedenle, tetrodes vs silikon probların seçimi kayıt amacına bağlıdır, hangi kayıt sitelerinde tek birim veya mekansal profilleme yüksek verim elde edilmesi öncelikli olup olmadığı bir sorudur.
Nöral aktivite kayıt ek olarak, optogenetik manipülasyon belirli hücre tipleri ve / veya yolların nöral devrefonksiyonları 13,31katkıda nasıl incelemek için nörolojidaha güçlü araçlardan biri haline gelmiştir, 32,33. Ancak, optogenetik deneyler uyarım ışık kaynaklarına fiber konektör eklemek için mikrosürücü dizi tasarımı ek dikkate gerektirir34,35,36. Genellikle, fiber optik bağlantı beyinde sonda mekanik bir kayma yol açabilir nispeten büyük bir kuvvet gerektirir. Bu nedenle, geleneksel microdrive dizileri için implante edilebilir bir optik fiber birleştirmek için önemsiz bir görev değildir.
Yukarıdaki nedenlerden dolayı, araştırmacıların elektrot türünü optimize etmesi veya kaydın amacına bağlı olarak optik fiber yerleştirmeleri gerekmektedir. Örneğin tetrodes hipokampus daha yüksek birim verim elde etmek için kullanılır1,13, silikon problar kortikal alanların laminar derinlik profilini araştırmak için kullanılır, medial entorinal korteks gibi (MEC)37. Şu anda, tetrodes ve silikon probların eşzamanlı implantasyonu için mikrosürücüler sıçanlar için bildirilmişti5,11. Ancak, mikrosürücülerin ağırlığı, fare başında sınırlı alan ve farklı problar istihdam etmek için mikrosürücünün tasarımı için mekansal gereksinimler nedeniyle farelere birden fazla tetrode ve silikon prob yerleştirmek son derece zordur. Bir mikrosürücü olmadan silikon problar implant mümkün olmasına rağmen, Bu prosedür prob ayarı için izin vermez ve silikon-prob kurtarma başarı oranını düşürür12,38. Ayrıca, optogenetik deneyler microdrive dizi tasarımı ek hususlar gerektirir. Bu protokol, serbestçe hareket eden farelerde kronik kayıt için bir mikrosürücü dizisinin nasıl inşa edilip yerleştirilebildiğini göstermektedir, bu da dokuz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrode ve bir ayarlanabilir opto-silikon probun implantasyonuna olanak sağlar. Bu mikrosürücü dizisi aynı zamanda optogenetik deneyleri ve silikon sondanın kurtarılmasını da kolaylaştırır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>#00-90 screw</td>
			<td>J.I. Morris</td>
			<td>#00-90-1/8</td>
			<td>EIB screws</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>#0-80 nut</td>
			<td>Small Parts</td>
			<td>B00DGB7CT2</td>
			<td>brass nut for holding fiber ferrule holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>#0-80 screw</td>
			<td>Small Parts</td>
			<td>B000FMZ57G</td>
			<td>brass machine screw for probe connector mount, fiber ferrule holder, and shielding cone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 Ga polyetheretherketone tubes</td>
			<td>Small Parts</td>
			<td>SLPT-22-24</td>
			<td>for attaching to the shuttle, 0.025 inches inner diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23 Ga stainless tubing</td>
			<td>Small Parts</td>
			<td>HTX-23R</td>
			<td>for tetrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23 Ga stainless wire</td>
			<td>Small Parts</td>
			<td>HTX-23R-24-10</td>
			<td>for L-shape/support wire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26 Ga stainless wire</td>
			<td>Small Parts</td>
			<td>GWX-0200</td>
			<td>for guide-posts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 Ga stainless wire</td>
			<td>Small Parts</td>
			<td>HTX-30R</td>
			<td>for tetrode</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-D CAD software package</td>
			<td>Dassault Syst&#232;mes</td>
			<td>SolidWorks 2003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D printer</td>
			<td>FormLab</td>
			<td>Form2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5.5mil polyimide insulating tubes</td>
			<td>HPC Medical</td>
			<td>72113900001-012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aluminum foil tape</td>
			<td>Tyco</td>
			<td>Tyco Adhesives 617022 Aluminum Foil Tape</td>
			<td>for the alternative shielding cone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>conductive paste</td>
			<td>YSHIELD</td>
			<td>HSF54</td>
			<td>for shielding cone</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>customized screws for silicon-probe microdrive</td>
			<td>AMT</td>
			<td>UNM1.25-HalfMoon</td>
			<td>half-moon stainless screw, 1.5 mm diameter, 300 &#181;m thread pitch</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>customized screws for tetrode microdrive</td>
			<td>AMT</td>
			<td>Yamamoto_0000-160_9mm</td>
			<td>slotted stainless screw, 0.5 mm diameter, 160 &#181;m thread pitch, custom-made to order for our design</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dental acrylic</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>51459</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dental model resin</td>
			<td>FormLab</td>
			<td>RS-F2-DMBE-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dremel rotary tool</td>
			<td>Dremel</td>
			<td>model 800</td>
			<td>a grinder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>drill bit</td>
			<td>Fine Science Tool</td>
			<td>19007-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electric interface board</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td>EIB-36-Narrow</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>epoxy</td>
			<td>Devcon</td>
			<td>GLU-735.90</td>
			<td>5 minutes epoxy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>Puralube Ophthalmic Ointment</td>
			<td>to prevent mice eyes from drying during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fiber polishing sheet</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>LFG5P</td>
			<td>for polishing the optical fiber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fine tweezers</td>
			<td>Protech International</td>
			<td>15-368</td>
			<td>for loading/recovering the silicon probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gold pins</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td>EIB Pins Small</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ground wire</td>
			<td>A-M Systems</td>
			<td>781500</td>
			<td>0.010 inch bare silver wire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>headstage preamp</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td>HS-36</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>impedance meter</td>
			<td>BAK electronics</td>
			<td>Model IMP-2</td>
			<td>1 kHz testing frequency</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mineral oil</td>
			<td>ZONA</td>
			<td>36-105</td>
			<td>for lubricating screws and wires</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>optical fiber</td>
			<td>Doric</td>
			<td>MFC_200/260-0.22_50mm_ZF1.25(G)_FLT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recording system</td>
			<td>Neuralynx</td>
			<td>Digital Lynx 4SX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ruby fiber scribe</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>S90R</td>
			<td>for cleaving the optical fiber</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicon grease</td>
			<td>Fine Science Tool</td>
			<td>29051-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicon probe</td>
			<td>Neuronexus</td>
			<td>A1x32-Edge-5mm-20-177</td>
			<td>Fig. 3, 4A, 4B, 5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicon probe</td>
			<td>Neuronexus</td>
			<td>A1x32-6mm-50-177</td>
			<td>Fig. 4C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicon probe washing solution</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>AL10078844</td>
			<td>contact lens cleaner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silicone lubber</td>
			<td>Smooth-On</td>
			<td>Dragon Skin 10 FAST</td>
			<td>for preparation of microdrive mold</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silver paint</td>
			<td>GC electronic</td>
			<td>22-023</td>
			<td>silver print II coating, used for ground wires</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>skull screw</td>
			<td>Otto Frei</td>
			<td>2647-10AC</td>
			<td>0.8 mm diameter, 0.200 mm thread pitch</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>standard surgical scissors</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereotaxic apparatus</td>
			<td>Kopf</td>
			<td>Model 942</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>super glue</td>
			<td>Loctite</td>
			<td>LOC230992</td>
			<td>for applying to guide-posts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical tweezers</td>
			<td>ROBOZ</td>
			<td>RS-5135</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetrode Twister</td>
			<td>Jun Yamamoto</td>
			<td>TT-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tetrode wires</td>
			<td>Sandvik</td>
			<td>PX000004</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

hybrid microdrive system with recoverable opto-silicon probe and tetrode for dual-site high density recording in freely moving mice

Çok bölgesel nöral kayıtlar, birden fazla beyin bölgesi arasındaki ince zaman ölçeğietkileşimlerini anlamak için önemli bilgiler sağlayabilir. Ancak, geleneksel mikrosürücü tasarımları genellikle tek veya birden fazla bölgeden kaydetmek için tek bir elektrot türünün kullanılmasına izin vererek tek birimli veya derinlikprofil kayıtlarının verimini sınırlar. Ayrıca genellikle yol ve / veya hücre tipi belirli aktivite hedef optogenetik araçları ile elektrot kayıtları birleştirmek için yeteneği sınırlar. Burada sunulan serbestçe hareket eden fareler için bir hibrid microdrive dizi verim ve üretim ve microdrive dizi yeniden bir açıklama optimize etmektir. Mevcut tasarım dokuz tetrodes ve serbestçe hareket eden fareler de aynı anda iki farklı beyin alanlarına implante bir opto-silikon prob kullanır. Tetrodes ve opto-silikon prob bağımsız birim ve salınım faaliyetlerinin verimi maksimize etmek için beyinde dorsoventral eksen boyunca ayarlanabilir. Bu mikrosürücü dizisi aynı zamanda uzun menzilli nöral devrelerin bölgesel veya hücre tipine özgü tepkilerini ve işlevlerini araştırmak için optogenetik manipülasyona aracılık eden ışık için bir kurulum da içerir. Buna ek olarak, opto-silikon prob güvenli bir şekilde kurtarılabilir ve her deneyden sonra yeniden kullanılabilir. Microdrive dizisi 3D baskılı parçalardan oluştuğundan, mikro sürücülerin tasarımı çeşitli ayarları barındıracak şekilde kolayca değiştirilebilir. İlk açıklanan mikrosürücü dizisinin tasarımı ve optogenetik deneyler için bir silikon prob optik fiber eklemek için nasıl, tetrode demeti ve bir fare beynine dizi implantasyonu imalatı izledi. Optogenetik stimülasyonla birlikte yerel alan potansiyellerinin ve birim spikingin kaydedilmesi, serbestçe hareket eden farelerde mikrosürücü dizi sisteminin fizibilitesini de göstermektedir.

Microdrive dizisi 5 gün içinde inşa edildi. Mikrosürücü hazırlama zaman çizelgesi Tablo2'de açıklanmıştır. Bu mikrosürücü kullanılarak, dokuz tetrodes ve bir silikon sonda hipokampal CA1 ve farenin MEC içine implante edildi [21 hafta eski/ 29 g vücut ağırlığı erkek pOxr1-Cre (C57BL/6 arka plan)], sırasıyla. Bu transgenik fare MEC tabaka III piramidal nöronlarda Cre ifade eder. Fareye elektrot implantından 10 hafta önce MEC'ye 200 nL AAV5-DIO-ChR2-YFP (titre: 7.7 x 1012</...

Watch this Scientific Journal Video about Hybrid Microdrive System with Recoverable Opto-Silicon Probe and Tetrode for Dual-Site High Density Recording in Freely Moving Mice at JoVE.com

Hybrid Microdrive System with Recoverable Opto-Silicon Probe and Tetrode for Dual-Site High Density Recording in Freely Moving Mice

Bu protokol, serbestçe hareket eden farelerde iki beyin bölgesinde dokuz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrode ve bir ayarlanabilir opto-silikon probu implantasyonu sağlayan bir hibrid microdrive dizisinin yapımını açıklar. Ayrıca güvenli bir şekilde kurtarma ve birden fazla amaç için opto-silikon probu yeniden kullanmak için bir yöntemdir gösterilmiştir.

SerbestÇe Hareket Eden Farelerde Çift Alan Yüksek Yoğunluklu Kayıt için Kurtarılabilir Opto-Silikon Prob ve Tetrode ile Hibrid Microdrive Sistemi

Multi-regional neural recordings can provide crucial information to understanding fine-timescale interactions between multiple brain regions. However, ...

Hibrit mikrosürücü tasarımımız, deneycilerin sadece birden fazla beyin bölgesinden kayıt yapmamalarını değil, aynı zamanda verim ve stabiliteyi optimize etmek için farklı türde elektrotlar seçmelerine de olanak tanır. Dokuz tetrode, bir silikon lineer sonda ve serbestçe hareket eden farelerle in vivo deneyleri için mikrosürücü dizisinde ayarlanabilir ve yeniden kullanılabilir fiber optikleri birleştirdik. Bu teknik kolayca sıçan veya marmosets gibi diğer büyük hayvanlara adapte edilebilir.Silikon sondalar son derece kırılgandır. Sondalarla uğraşırken dikkatli olmalıyız, örneğin, optik fiberi adapte ederken ve mekik tertibatını mikrosürücüye dönüştürürken. Mikrosürücü dizisi beş bölümden oluşur.Silikon sonda için microdrive vida hazırlamak için ilk 3D mikrosürücü plastik bir desen baskı ve desen etrafında geçici bir duvar yapmak için desen etrafında bant yerleştirin. Desen içine sıvı silikon jel dökün ve nazik sallayarak hava kabarcıkları kaldırın. Silikon iyileştiğinde, silikon jel kalıbını deseninden dikkatlice çıkarın.Sonraki 23 gauge paslanmaz çelik tel tüp 18 ve 9.5mm uzunlukları kesmek ve tüplerin üst 2 ila 3mm pürüzlü öğütücü kullanmak için bir döner öğütücü kullanın. Özel bir vida silikon yağı küçük bir hacim uygulayın ve tüpleri ayarlayın ve kalıp içine vida. Kalıp içine diş akrilik dökün ve tüpler ve vida etrafında herhangi bir hava kabarcıkları ortadan kaldırmak için bir şırınga kullanın.Diş akrilik tamamen kalıp mikrosürücü vida kaldırmak ve 60 derecelik bir açıya 18mm tel ucu bir ucundan 6mm viraj için pliers kullanın. Bir tornalama aleti kullanarak, kaliteyi kontrol etmek için mikrosürücü vidasını döndürün ve mikrosürücü vidasını microdrive dizi gövdesine türün ve vidanın düzgün bir şekilde yukarı ve aşağı hareket edip edemeyeceğini kontrol etmek için çevirin. Silikon sonda için mekiği hazırlamak için iki 5mm peek uzunluğunda kesmek ve mesiğin her iki tarafındaki tüpleri hizalamak için keskin makas kullanın.Tüpleri epoksi ile mekiğe yapıştırın ve kılavuz direklere küçük bir hacim silikon yağı uygulayın. Epoksi kuruduğunda, kaliteyi kontrol etmek için mekiği microdrive dizi gövdesinin kılavuz direklerinin üzerine yerleştirin. Mekik aşırı sürtünme olmadan sorunsuz hareket etmelidir.Optorode hazırlamak için uzunluğu 21mm optik fiber bir parça cleave ve düz ve parlak olana kadar fiber ucu öğütmek için bir Rubi kesici kullanın. Uç hazır olduğunda, optik fiberi elektrot sitelerinin üst kısmından 200 ila 300 mikrometre yükseksilikon sondanın ön tarafına hafifçe yerleştirin ve şeffaf bantla fiberi geçici olarak sabitleyin sonra optik fiberi küçük bir epoksi hacmiyle silikon probun tabanına yapıştırın ve epoksinin beş saat boyunca tedavi etmesini bekleyin. Mekiği silikon sondaya takmak için silikon sonda tabanının arkasına küçük bir hacim epoksi uygulayın ve mekik ile silikon sonda tabanı arasında bir boşluk oluşmasını önlemek için mekiğin alt kısmını silikon prob tabanına karşı hafifçe 2-3 dakika tutun.Epoksi tamamen iyileştiğinde ince cımbızile mekiğin oluğunu tutun ve servis tüplerini ana gövdenin kılavuz direklerine dikkatlice yerleştirmek için bir mikroskop kullanın. Mikrosürücü vidasını vida deliğine takmak için vidayı çevirin ve l şeklindeki tüpün ucunu, silikon probu ve mikrosürücü vidasını devreye sokmak için mekik kafasının oluğuna yerleştirin. Sonraki 3.5mm iplik uzunluğu na iki numara 0 vida kesti ve çapak kaldırmak için ipuçları eziyet.Prob konektör tutucuyu dizi gövdesine yerleştirin ve silikon probu elektrik konektörünü tutucuya takın. Probu konektör tutucuyu tutmak için 0 vida numarasını takın. Probu mikrosürücü dizi gövdesine yapıştırmamaya dikkat eden tutucudaki silikon prob konektörünü sabitlemek için epoksi kullanın.Ferrule tutucuyu opto-silikon probuna ve mikrosürücü dizi gövdesine takmak için, iki adet 0 numaralı vidayı 6mm iplik uzunluğuna kesin ve uçları öğütün. 2,5 ila 3mm dış çapları ile küçük hex fındık yapmak ve tutucunun bileşen A içine 0 vida eklemek için iki numaralı 0 makine vida sıyrık dışında Grind. Vida başlarını epoksi ile yapıştırın.Vücutla sürtünmeyi azaltmak için A ve B bileşenlerine küçük bir hacimsilikon gres uygulayın. A bileşenini geçici olarak vücuda takmak ve Bileşen B'yi a.Thread'in vidalarına yerleştirmek için ters cımbız kullanın ve ferrule tutucuyu vücuda sabitlemek için somunları sıkmak için pliers kullanın. Lif ferrule'nin tutucudan 4 ila 5mm dışarı yapışmasını gözeterek fiber ferrule'yi lif ferrule tutucunun oluğuna takın.Ferrule ve tutucu oluk arasında az miktarda epoksi uygulayın. Epoksi tedavi edildiğinde, somunları gevşetin ve düzgün hareket için mekik ve ferrule tutucukontrol etmek için mikrosürücü vida açın sonra ferrule tutucu üst konumda ve mekik tüpleri hala kılavuz direkleri ile ilişkili olduğunda prob ucu tamamen vücuda geri çekilir onaylayın. Kalkan konisini takmak için, mikrosürücüyü yerinde tutmak için koninin dışından iki adet 3,5 mm'lik 0 numaralı vidayı sabitle.Mikrosürücü dizisi, yapı tabloda belirtilen zaman çizelgesine göre tamamlanırsa beş gün içinde kurulabilir. Tetrode ayarı ndan sonra davranışsal performans doğrusal bir pistte ve açık bir alanda test edilebilir. Her iki deney türünde de farenin yaklaşık 30 dakika boyunca serbestçe keşfetmesine izin verilirken, elektrofizyolojik sinyaller kayıt oturumu boyunca şiddetli hareketle ilgili gürültü olmadan kaydedilir.Işık stimülasyonu daha sonra medial entorinal kortekste medial entorinal korteks tabakası uyarmak için yapılabilir 3 nöronlar hipokampus CA1 alt alanına proje. Spontan spiking faaliyetleri ve yerel alan potansiyelleri daha sonra fare uyurken tetrodes ve silikon sonda kaydedilir. Bu temsili deneyde, tetrodlarda kaydedilen sol alan potansiyelleri, tüm tetrodların CA1 piramidal hücre tabakasının yakınında konumlandırıldığını düşündüren büyük dalgalanma etkinlikleri göstermiştir.Bu tözde ışık kaynaklı duyarlı aktiviteler ilk olarak medial entorinal kortekste gözlendi ve ardından CA1'de 13 ila 18 milisaniye gecikmeli etkinlik izlendi. Opto-silikon probu elektrostatik serbest bir ortamda mikrosürücü gövdesine yerleştirmeye özen. Kalkan Konisi kağıt ve bant gibi malzemelerle değiştirilebilir.Bu mikrosürücünün oranını %20'ye kadar düşürecek Mikrosürücü tasarımımız, birden fazla beyin bölgesini ölçmek ve işlemek ve farklı beyin yapılarının dinamiklerini ve etkileşimlerini araştırmak için kayıt elektrotlarının etkin kombinasyonu için esnek seçenekler sunar.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

High-density EEG Recordings of the Freely Moving Mice using Polyimide-based Microelectrode

Poliimid-temelli Mikroelektrod kullanarak Serbestçe Hareketli Fare Yüksek yoğunluklu EEG Kayıtlar

Electroencephalogram (EEG) indicates the averaged electrical activity of the neuronal populations on a large-scale level. It is widely utilized as a ...

Recording Single Neurons' Action Potentials from Freely Moving Pigeons Across Three Stages of Learning

Serbestçe Öğrenmenin üç aşamalı karşısında Güvercinler Hareketli gelen tek nöronların &#39;Aksiyon Potansiyelleri kayıt

While the subject of learning has attracted immense interest from both behavioral and neural scientists, only relatively few investigators have observed ...

Extracellular Wire Tetrode Recording in Brain of Freely Walking Insects

Serbestçe Böcekler Yürüyüş Beyin Ektraselüler Tel Tetrode Kaydı

Increasing interest in the role of brain activity in insect motor control requires that we be able to monitor neural activity while insects perform ...

Insect-machine Hybrid System: Remote Radio Control of a Freely Flying Beetle (Mercynorrhina torquata)

Insect-machine Hybrid System: Remote Radio Control of a Freely Flying Beetle Mercynorrhina torquata

Böcek-makine Hibrid Sistem: Serbest Uçan Beetle Uzaktan Radyo Kontrol (<em&gt; Mercynorrhina torquata</em&gt;)

The rise of radio-enabled digital electronic devices has prompted the use of small wireless neuromuscular recorders and stimulators for studying in-flight ...

Fabrication of High Contact-Density, Flat-Interface Nerve Electrodes for Recording and Stimulation Applications

Kayıt ve Stimülasyon Uygulamaları için Yüksek İletişim-Yoğunluk Fabrikasyon, Düz Arayüz Sinir Elektrotlar

Many attempts have been made to manufacture multi-contact nerve cuff electrodes that are safe, robust and reliable for long term neuroprosthetic ...

Recording EEG in Freely Moving Neonatal Rats Using a Novel Method

Yeni Bir Yöntemi Kullanarak Serbest Dolaşan Yenidoğan Sıçanlarında EEG Kaydı

EEG is a useful method to detect electrical activity in the brain. Moreover, it is a widely used diagnostic tool for various neurological conditions, such ...

Noninvasive EEG Recordings from Freely Moving Piglets

Domuz yavruları serbestçe hareket noninvaziv EEG kayıtları

The method allows the recording of high-quality electroencephalograms (EEGs) from freely moving piglets directly in the pigpen. We use a one-channel ...

Multi-Fiber Photometry to Record Neural Activity in Freely-Moving Animals

SerbestÇe Hareket Eden Hayvanlarda Nöral AktiviteYi Kaydetmek Için Çoklu Fiber Fotometri

Recording the activity of a group of neurons in a freely-moving animal is a challenging undertaking. Moreover, as the brain is dissected into smaller and ...

Intracerebroventricular Delivery of Gut-Derived Microbial Metabolites in Freely Moving Mice

Serbestçe Hareket Eden Farelerde Bağırsak Kaynaklı Mikrobiyal Metabolitlerin İntraserebroventriküler Verilmesi

The impact of gut microbiota and their metabolites on host physiology and behavior has been extensively investigated in this decade. Numerous studies have ...

Extracellular Electrophysiological Recording in the Motor Cortex of Mice

Multichannel Extracellular Recording in Freely Moving Mice

Advancements in Multichannel Extracellular Recording for Studying Neuronal Activity in Freely Moving Mice (Video) | JoVE

Serbestçe hareket eden farelerde çok kanallı hücre dışı kayıt

The protocol aims to uncover the properties of neuronal firing and network local field potentials (LFPs) in behaving mice carrying out specific tasks by ...