Name: analysis of learning and memory ability in an alzheimer's disease mouse model using the morris water maze
Uploaded: 2019-10-29T13:00:00
Duration: 7 min 7 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Learning and Memory Ability in an Alzheimer's Disease Mouse Model using the Morris Water Maze at JoVE.com

Huiling Тянь и Нин Дин являются со-первых авторов. Чжиган Ли и Цзин Цзян являются соавторами. Это исследование было поддержано грантами Национального фонда естественных наук Китая (Грант No 81804178, 81473774 и 81503654). Протокол и результаты, описанные здесь происходит из статьи, "Вовлеченность ручной иглоукалывания регулирует поведение и мозговой кровотока в SAMP8 Мышь Модель болезни Альцгеймера" д-р Нин Дин и др.

Этот протокол был одобрен Комитетом по этике животных Пекинского университета китайской медицины, и он был в соответствии со всеми руководящими принципами по уходу и использованию лабораторных животных Китая. В ходе экспериментальной процедуры не было случайной смерти, и в этом исследовании животных не нужно было усыпнуть.
1. Подготовка
<ol><li>Купить 30 мужчин SAMP8 мышей и 10 мужчин SAMR1 мышей (возраст: 8 месяцев).</li>
	<li>Размещайте мышей индивидуально в отдельных вентиляционных клетках при температуре 24 градусов по Цельсию и 12 ч темного/светлого цикла.</li>
	<li>Кормите мышей стандартной диетой гранул доступны объявление libitum и обеспечить стерильную питьевую воду.</li>
	<li>Акклиматизировать всех мышей к окружающей среде в течение 5 дней до экспериментов.</li>
</ol>2. Группировка животных
<ol><li>Случайно разделить 30 SAMP8 мышей на три группы (n no 10/group): Группа АД, ручная группа иглоукалывание (MA) и медицина (M) группы.</li>
	<li>Используйте 10 мышей SAMR1 в качестве нормальной контрольной (N) группы6.</li>
</ol>3. Введение таблеток гидрохлорида допезила
<ol><li>Измельчите таблетку гидрохлорида допезила (5 мг/таблетка) и растворите ее в 50 мл дистиллированной воды.</li>
	<li>Доставить лекарство, подготовленное в шаге 3.1 в дозах 1 мг/кг для мышей с помощью перорального гаважа один раз в день8 в течение всего эксперимента, в том числе дни, когда лечение МА и MWM тесты выполняются.</li>
</ol>4. Администрация ручной акупунктуры
<ol><li>Обездвижить мышей группы MA в мешках мыши.</li>
	<li>Используйте одноразовые стерильные иглы иглоукалывания (0,25 мм х 13 мм) и нанесите плоский колючий метод MA на Байхуэй (GV20) и Yintang (GV29)5 к носу в течение 20 мин. Убедитесь, что глубина иглы составляет 0,2-0,3 см.</li>
	<li>Двунаправленно вертеть манипуляции в пределах 90 "со скоростью около 180 р / мин каждые 5 минут в течение 15 с каждый раз в течение всего эксперимента, в том числе дней, когда лечение MA и MWM испытания выполняются.</li>
</ol>5. Тест MWM
ПРИМЕЧАНИЕ: На 24 ч после 15 дней подряд лечения, подвергите мышей в четырех группах к тесту MWM. Проведите испытание видимой платформы, испытание скрытой платформы, пробную версию зонда и реверсную пробу в порядке.
<ol><li>Подготовьтесь к тесту MWM.<ol>
<li>Позиция устройства MWM и системы приобретения и обработки сигнала в экспериментальном зале, предназначенном для поддержания звукоизоляции.</li>
		<li>Поместите круглый белый бак (диаметр 90 см, высота 50 см) в окружении непрозрачной ткани в середине устройства MWM.</li>
		<li>Прикрепите видеокамеру к потолку устройства MWM и подключите ее к видеорегистратору с автоматизированной системой слежения для сбора данных.</li>
		<li>Разделите резервуар лабиринта воды поровну в 4 равных зоны используя 2 взаимно перпендикулярные линии, обозначенные север (N), юг (S), восток (E), и запад (W). Концептуально разделите бассейн на четыре квадранта одинакового размера (NE, NW, SW и SE).</li>
		<li>В пределах видимости мыши, место визуальные сигналы различных форм на стене каждого квадранта в качестве визуальных ссылок (например, квадраты, треугольники и круги). ПРИМЕЧАНИЕ: Дистальные сигналы являются навигационными ориентирами животного для определения местоположения платформы. Поэтому не двигайте их во время теста. Позиция исследователя является потенциальным дистальным сигналом и может влиять на MWM. Таким образом, исследователь должен держаться подальше от поля мышей в ожидании животного для выполнения теста.</li>
		<li>Заполните круговой бак водой на глубину 30 см и поддерживать на 22 и 2 кв с электрическим обогревателем.</li>
		<li>Сделать воду непрозрачной с около 150 г сухого молока.</li>
	</ol></li>
	<li>Выполните видимую пробную версию платформы.<ol>
<li>Поместите пластиковую круглую платформу (диаметр 9,5 см; высота 28 см) на 1 см над поверхностью воды в любой квадрант наугад.</li>
		<li>Положите черный флаг на платформе.</li>
		<li>Отпустите каждую мышь мягко в воду на уровне воды из одного из четырех стартовых мест, обращенных к стене бака. Не опускайте мышь в воду.</li>
		<li>Активируйте программу компьютерного слежения, как только мышь выпущена в воду.</li>
		<li>Дайте каждой мыши 60 с для поиска платформы. В конце каждого испытания поместите каждую мышь на платформу и позвольте ей оставаться на ней в течение 10-30 с.</li>
		<li>Наблюдайте за траекториями плавания мышей на компьютере, записывайте время мыши, чтобы найти платформу в качестве задержки побега, и проанализируйте скорость плавания.</li>
		<li>Высушите каждую мышь полотенцами и подогрейте ее электрическим обогревателем. Обязательно используйте соответствующий источник тепла, чтобы предотвратить перегрев животного. ПРИМЕЧАНИЕ: Поместите каждую мышь в бассейн в каждом из четырех различных стартовых квадрантов в течение четырех испытаний, перемещая платформу в другое место с каждым последующим испытанием. Интервал между двумя испытаниями с помощью каждой мыши составляет 15–20 минут.</li>
	</ol></li>
	<li>Выполните испытание скрытой платформы/тест навигации.<ol>
<li>Поместите ту же платформу без флага в квадранте SE.</li>
		<li>Случайно поместите мышь в бассейн от каждого из четырех квадрантов (NE, NW, SW, N) перед стеной бассейна в течение четырех испытаний. Используйте временной интервал 15-20 мин между двумя испытаниями.</li>
		<li>Дайте каждой мыши 60 с для поиска скрытой платформы.</li>
		<li>Запишите задержку побега каждого испытания после того, как мышь поднимается на платформу для последующего анализа.</li>
		<li>Высушите каждую мышь полотенцами и подогрейте ее электрическим обогревателем. ПРИМЕЧАНИЕ: Проведение испытания скрытой платформы со дня 2–6 дней. Если мышь не может найти платформу в 60 с, привести мышь, чтобы подняться на платформу и позволить ему оставаться там в течение 10-30 с в конце каждого испытания. Выполните четыре испытания/день для каждой мыши в течение 5 дней подряд, с платформой и визуальными сигналами в постоянных позициях.</li>
	</ol></li>
	<li>Выполните пробную версию зонда. ПРИМЕЧАНИЕ: Найдите каждую мышь в бассейне в новом стартовом положении, чтобы наблюдать способность пространственного исследования мыши.<ol>
<li>Удалите платформу.</li>
		<li>Найдите каждую мышь, обращенную к стене бака в бассейне один раз за 60 с. Убедитесь, что местом начала является квадрант NW, который является самым дальним квадрантом от квадранта SE.</li>
		<li>Запишите расстояние плавания, скорость плавания и номер кроссовера платформы в лабиринте.</li>
		<li>Высушите каждую мышь полотенцами и обеспечьте тепло после суда.</li>
	</ol></li>
	<li>Выполните реверсную пробную версию. ПРИМЕЧАНИЕ: Выполните реверсную пробную версию с 8–11 дней.<ol>
<li>Расположите платформу в середине квадранта NW (вместо квадранта SE).</li>
		<li>Следуйте шагам 5.3.2 5.3.5, как описано в разделе суда скрытой платформы.</li>
	</ol></li>
</ol>6. Статистический анализ
<ol><li>Для выполнения статистического анализа используйте программное обеспечение для статистики (например, SPSS 20.0).</li>
</ol>

<ol>
	<li>Vorhees, C. V., Williams, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+water+mazes+for+assessing+spatial+and+egocentric+learning+and+memory+in+rodent+basic+research+and+regulatory+studies.">Value of water mazes for assessing spatial and egocentric learning and memory in rodent basic research and regulatory studies.</a> Neurotoxicology Teratology. 45, 75-90 (2014).</li><li>Vorhees, C. V., Williams, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morris+water+maze:+procedures+for+assessing+spatial+and+related+forms+of+learning+and+memory.">Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory.</a> Nature Protocol. 1 (2), 848-858 (2006).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+state+of+the+art+of+dementia+research:+New+frontiers;+World+Alzheimer+Report+2018.">The state of the art of dementia research: New frontiers; World Alzheimer Report 2018.</a> Alzheimer's Disease International. 9, 1-46 (2018).</li><li>Vorhees, C. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+neonatal+(+)-methamphetamine+on+path+integration+and+spatial+learning+in+rats:+effects+of+dose+and+rearing+conditions.">Effects of neonatal (+)-methamphetamine on path integration and spatial learning in rats: effects of dose and rearing conditions.</a> International Journal of Developmental Neuroscience. 26 (6), 599-610 (2008).</li><li>Ding, N., Jiang, J., Xu, A., Tang, Y., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+acupuncture+regulates+behavior+and+cerebral+blood+flow+in+the+SAMP8+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Manual acupuncture regulates behavior and cerebral blood flow in the SAMP8 mouse model of Alzheimer's disease.</a> Frontiers in Neuroscience. 13, 37 (2019).</li><li>Ding, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+acupuncture+suppresses+the+expression+of+proinflammatory+proteins+associated+with+the+NLRP3+inflammasome+in+the+hippocampus+of+SAMP8+mice.">Manual acupuncture suppresses the expression of proinflammatory proteins associated with the NLRP3 inflammasome in the hippocampus of SAMP8 mice.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2017, 1-8 (2017).</li><li>Cao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+changes+and+hippocampus+glucose+metabolism+in+APP/PS1+transgenic+mice+via+electro-acupuncture+at+governor+vessel+acupoints.">Behavioral changes and hippocampus glucose metabolism in APP/PS1 transgenic mice via electro-acupuncture at governor vessel acupoints.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 9, 5 (2017).</li><li>Amy, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+sub-chronic+donepezil+on+brain+Abeta+and+cognition+in+a+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Effects of sub-chronic donepezil on brain Abeta and cognition in a mouse model of Alzheimer's disease.</a> Psychopharmacology. 230, 279-289 (2013).</li><li>Garthe, A., Kempermann, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+old+test+for+new+neurons:+refining+the+Morris+water+maze+to+study+the+functional+relevance+of+adult+hippocampal+neurogenesis.">An old test for new neurons: refining the Morris water maze to study the functional relevance of adult hippocampal neurogenesis.</a> Frontiers in Neuroscience. 7, 63 (2013).</li><li>Schoenfeld, R., Schiffelholz, T., Beyer, C., Leplow, B., Foreman, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variants+of+the+Morris+water+maze+task+to+comparatively+assess+human+and+rodent+place+navigation.">Variants of the Morris water maze task to comparatively assess human and rodent place navigation.</a> Neurobiology of Learning and Memory. 139, 117-127 (2017).</li><li>Otnass, M. K., Brun, V. H., Moser, M., Moser, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pretraining+prevents+spatial+learning+impairment+after+saturation+of+hippocampal+long-term+potentiation.">Pretraining prevents spatial learning impairment after saturation of hippocampal long-term potentiation.</a> Journal of Neuroscience. 19 (24), 49 (1999).</li><li>Vorhees, C. V., Williams, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+spatial+learning+and+memory+in+rodents.">Assessing spatial learning and memory in rodents.</a> Ilar Journal. 55 (2), 310-332 (2014).</li><li>Vorhees, C. V., Skelton, M. R., Williams, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+effects+of+neonatal+methamphetamine+exposure+on+spatial+learning.">Age-dependent effects of neonatal methamphetamine exposure on spatial learning.</a> Behavioural Pharmacology. 18 (5-6), 549-562 (2007).</li><li>Iivonen, H., Nurminen, L., Harri, M., Tanila, H., Puoliv&#228;li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypothermia+in+mice+tested+in+Morris+water+maze.">Hypothermia in mice tested in Morris water maze.</a> Behaviour Brain Research. 141 (2), 207-213 (2003).</li><li>Lin, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ozone+inhibits+APP/A&#946;+production+and+improves+cognition+in+an+APP/PS1+transgenic+mouse+model.">Ozone inhibits APP/A&#946; production and improves cognition in an APP/PS1 transgenic mouse model.</a> Neuroscience. , (2019).</li><li>Zuo, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preoperative+vitamin-rich+carbohydrate+loading+alleviates+postoperative+cognitive+dysfunction+in+aged+rats.">Preoperative vitamin-rich carbohydrate loading alleviates postoperative cognitive dysfunction in aged rats.</a> Behavioural Brain Research. 373, 112107 (2019).</li></ol>

Авторы не заявляют о потенциальном конфликте интересов.

Хотя многие водные лабиринты, в том числе водном лабиринте Биль и лабиринт воды Цинциннати, были вокруг, по крайней мере столетие, только MWM широко используется для эффективной и объективной оценки пространственного обучения и памяти способности, поскольку она имеет много преимущества9. Несмотря на широкое использование MWM, процедура не всегда использовалась оптимально. Эксперименты MWM обычно занимают много времени и находятся под влиянием многих переменных факторов. Есть некоторые эффективные и надежные аспекты, которые помогают обнаружить изменения в пространственном обучении и памяти способности, которые должны быть приняты во внимание.
Было проведено четыре различных испытания MWM. Видимая пробная платформа была использована на дне 1 MWM. Если животные могли плавать непосредственно к платформе, он указал, что способность к плаванию и зрение животных были нормальными10. Otnass предложил, что видимая платформа суда должны быть проведены первые11. Результаты исследования видимой платформы в этом исследовании означали, что четыре группы начали на одном уровне обучения. Оттуда можно было бы начать последовательные эксперименты. Испытание скрытой платформы было использовано для оценки способности мышей приобретать способность к обучению и памяти. Испытание зонда было дирижировало на день 7, 24 h после конца пробы спрятанной платформы, для того чтобы определить рабочую память. Наконец, реверсное испытание было использовано для оценки рабочей памяти2. Изменения в четырех различных испытаниях MWM вместе показали, что модель AD мышей были низкие способности к обучению и памяти и что MA оказал положительное влияние на AD5.
Нет никаких специальных стандартов для размеров бассейна и платформы1. Бассейн диаметром 214 см используется в большинстве исследований MWM. Vorhees и Williams продемонстрировали что с идентичными протоколами, крысы учат более быстро в бассеине 122 см чем в бассее 210 см; крутой склон кривой обучения указывает на то, что 122-см диаметр бассейн очень легко для крыс, чтобы перейти12. В действующем протоколе, учитывая старость и слабый рост мышей АД, использовался бассейн диаметром 90 см и платформа диаметром 9,5 см. Результаты предварительных экспериментов показали, что мышам было труднее найти платформу в бассейне большего диаметра. Таким образом, тесты в больших пулах не представляют реальной разницы между группами. Экспериментальным животным было труднее найти платформу в большом бассейне с меньшей платформой4. Поэтому размер ы бассейна и платформы должен быть оптимизирован в предварительных экспериментах в соответствии с экспериментальными требованиями и состоянием опытных животных.
Вода при температуре от 20 до 24 градусов цельсия рекомендуется для выполнения теста MWM4. Пожилые экспериментальные животные плохо себя выполняют в холодной воде13,что указывает на явную возрастно-зависимую потерю терморегуляции14. В этом исследовании, термостат был помещен в нижней части бассейна для поддержания температуры воды на 20-24 градусов по Цельсию. Результаты исследования не показали существенной разницы в скорости плавания между четырьмя группами5.
MWM является мощным методом для оценки когнитивных функций и широко используется в исследованиях в настоящее время. Тем не менее, нет определенного, стандартного, последовательного оборудования для выполнения теста MWM, в том числе размеры пула и платформы15,16. Различные лаборатории имеют различные спецификации для MWM. Поэтому исследователи выбирают соответствующее экспериментальное устройство в соответствии с их индивидуальными экспериментальными требованиями, которые могут вызвать путаницу среди исследователей. Необходимы также предварительные эксперименты. Необходимо провести дополнительные исследования по основным экспериментам, таким как MWM. В настоящее время гибкость MWM как экспериментального инструмента заключается только в способности выбирать основные протоколы в соответствии с целью исследования. Таким образом, этот тест может быть применен для оценки когнитивных функций в большей глубине.

В настоящее время эксперимент MWM стал наиболее широко используемым и стандартным поведенческим экспериментом для оценки пространственного обучения и памяти животных1. Первоначально он был разработан британским психологом Ричардом Г. Моррисом и постоянно совершенствуется. Многие преимущества, такие как минимальная подготовка, кросс-видовполезность, нечувствительность к различиям в весе тела, и повторное тестирование способность MWM сделать его лучшим методом для оценки когнитивных функций2. Болезнь Альцгеймера (AD) является одной из основных медицинских проблем, в первую очередь характеризуется снижением обработки памяти и когнитивных функций3. MWM является незаменимым экспериментальным средством для оценки способности к обучению и памяти животных модели АД и эффективности методов вмешательства. Эксперименты MWM, как правило, отнимают много времени (6-11 дней) и включают в себя множество переменных факторов4. Хотя есть много статей об экспериментах с водными лабиринтами, на практике исследователям не хватает согласованного протокола. Поэтому особенно важно интуитивно едкие и строгие протокольные процессы. Используя предыдущий эксперимент в качестве примера5,описаны все шаги MWM. Использование MWM, предыдущие исследования показали, что иглоукалывание может облегчить симптомы модели АД мышей5,6,7.
При этом, протокол MWM, используемый в недавнем исследовании5 описывается, чтобы обеспечить простой и видимый метод для исследователей для оценки пространственного обучения и памяти животных модели АД.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>acupuncture needles</td>
			<td>Beijing Zhongyan Taihe Medical Instrument Limited Company</td>
			<td>511526</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>desktop computer</td>
			<td>Chengdu Techman Software Limited Liability Company</td>
			<td>Lenovo T4700D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donepezil Hydrochloride Tablet</td>
			<td>Eisai China</td>
			<td>H20050978</td>
			<td>Aricept</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mice</td>
			<td>Zhi Shan (Beijing) Academy of Medical Science</td>
			<td>SCXK2014-0003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mirros water maze device</td>
			<td>Chengdu Techman Software Limited Liability Company</td>
			<td>WMT-100S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse bags</td>
			<td>home-made</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Signal acquisition and processing system</td>
			<td>Chengdu Techman Software Limited Liability Company</td>
			<td>BL-420N</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of learning and memory ability in an alzheimer's disease mouse model using the morris water maze

Эксперимент Морриса (MWM) заставляет экспериментальных животных плавать и научиться находить платформу, спрятанную в воде. Он широко используется в научных исследованиях для оценки обучения и памяти животных. Из-за широкого использования теста MWM, визуальные экспериментальные протоколы имеют важное значение для исследователей. Данная рукопись использует последние исследования для введения протокола теста MWM. Болезнь Альцгеймера (AD) характеризуется прогрессирующей потерей памяти и когнитивных функций. Альтернативным и дополнительным методом лечения, используемого для АД, является ручная иглоукалывание (MA). Для оценки способности к обучению и памяти мышей модели АД был проведен тест MWM. Для оценки пространственного обучения и способности к памяти использовались видимые испытания платформы, пробная версия с скрытой платформы, пробная версия зонда и реверсная проба MWM. В испытании видимой платформы, скорость плавания и задержка избежания мышей в по-разному группах существенно не отличали. В скрытых испытаниях платформы и разворота группа AD показала длительную задержку побега. Задержка побега значительно снизилась после лечения МА. Низкое число кроссоверов платформы и доля времени в квадранте SW в пробе зонда увеличили после обработки MA (p qlt; 0.05 или p qlt; 0.01). Результаты испытаний MWM показывают, что MA может эффективно улучшить пространственное обучение и способности памяти мышей модели AD. Строгие экспериментальные операции обеспечили гарантию надежности результатов.

Диаграмма оси времени этого протокола отображается на рисунке 1.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60055/60055fig01.jpg"> Рисунок 1: Диаграмма оси времени протокола исследования. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60055/60055fig01large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
Ось времени показывает, что этот эксперимент длился в общей сложности 21 дней. Лечение было применено к мыши в течение всего эксперимента и MWM испытания начались после 15 дней лечения. Видимая платформа, скрытая платформа, зонд, и реверсные испытания были проведены в порядке.
Ранее опубликованные результаты Ding et al.5 представлены как типичные результаты MWM Рисунок 2.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60055/60055fig02.jpg"> Рисунок 2: Типичные результаты теста морриса в водного лабиринта (n No 10). (A) Изменения в задержке побега и скорости плавания крыс среди различных групп в видимой платформе суда. (B) Изменения в задержке побега крыс среди различных групп в скрытой платформе и разворотных испытаний. По сравнению с контрольной группой значения p-lt- sp 0.05 и qp qlt; 0,01. Символ означает p slt; 0.01 по сравнению с группой AD. (C) Изменения в номере кроссовера платформы и процент времени, проведенного крысами в северо-западном квадранте среди различных экспериментальных групп в пробе зонда. Показаны результаты видимой платформы, скрытой платформы и обратного испытания в каждой группе (n No 10, среднее sD). Эта цифра была изменена с Ding et al5. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60055/60055fig02large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть большую версию этой цифры.</a>
На рисунке 2A показаны результаты испытания видимой платформы. Статистических различий в задержке побега или скорости плавания между группами в первый день МВМ не наблюдалось. На рисунке 2B показаны результаты скрытой платформы и реверсного испытания от дней 2к6 и дней 8–11. Задержка в побеге группы АД оставалась на высоком уровне в каждый день теста. Задержка побега других трех групп постепенно уменьшалась. Задержка в побеге от дней 3–6 и дней 8–11 была больше в группе АД, чем в контрольной группе (p qlt; 0.01). Прожекторамы мышей в группах MA и наркотиков были короче, чем у мышей в группе АД в дни 2–6 и 8–11 дней, соответственно (p qlt; 0.01). На рисунке 2С показаны результаты исследования. Число кроссоверов платформы мышей в группе AD было статистически ниже, чем в группе управления (p qlt; 0.01). Номер кроссовера в группе MA был выше, чем в группе AD (p qlt; 0.05). Доля времени, проведенного мышами в группе AD в квадранте SW, была значительно ниже, чем в контрольной группе (p qlt; 0.01). Доля времени, затрачиваемого в квадранте SW в группе MA, была выше, чем в группе AD (p qlt; 0.01).

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Learning and Memory Ability in an Alzheimer's Disease Mouse Model using the Morris Water Maze at JoVE.com

Analysis of Learning and Memory Ability in an Alzheimer's Disease Mouse Model using the Morris Water Maze

При этом, протокол для проведения испытаний Моррис воды лабиринт для оценки способности обучения и памяти болезни Альцгеймера модели мышей и оценить влияние ручной иглоукалывание для их лечения описано.

Анализ обучения и памяти способность в болезни Альцгеймера мышь модель с помощью Моррис воды лабиринт

A Morris water maze (MWM) experiment forces experimental animals to swim and learn to find a platform hidden in the water. It is widely used in scientific ...

Моррис водный лабиринт, или MWM эксперимент, стал наиболее широко используемым и классическим поведенческим экспериментом для оценки пространственного обучения и памяти способности животных. Хотя Есть много статей о MWM, на практике, исследователи по-прежнему чувствуют себя смущенными. Таким образом, это интуитивно понятный и строгий процесс работы видео особенно важно.Ранее мы провели MWM-исследование, предположил, что иглоукалывание может облегчить симптомы АД модели мышей. В этом случае мы представляем протокол работы MWM, используемый в наших недавних исследованиях, чтобы обеспечить простой и видимый метод для исследователей для оценки пространственного обучения и памяти животных модели AD. MWM является мощным методом для оценки когнитивных функций и широко используется в исследованиях.Однако для выполнения задачи не существует определенных или стандартных параметров, таких как размер пула и платформы. Таким образом, реальная демонстрация метода имеет решающее значение. Начните с настройки для Морриса Водяного Лабиринта или MWM-теста в соответствии с рукописными указаниями.Устройство MWM и система получения и обработки сигналов должны быть расположены в экспериментальном помещении, предназначенном для поддержания звукоизоляции. Круговой белый резервуар, окруженный непрозрачной тканью, должен распоиться в середине устройства MWM. Видеокамера должна быть закреплена на потолке устройства и подключена к видеорегистратору с автоматизированной системой слежения.Разделите резервуар для лабиринта воды на четыре равных региона, используя линии, обозначенные на севере, юге, востоке и западе, которые концептуально разделят бассейн на четыре квадранта. Затем поместите уникальный визуальный сигнал на стене каждого квадранта в поле зрения мыши. Заполните круговой бак водой на глубину 30 сантиметров, и добавить 150 граммов сухого молока в воду, чтобы сделать его непрозрачным.Для проведения испытания Видимой Платформы поместите пластиковую круговую платформу на один сантиметр над поверхностью воды в любом квадранте наугад и поставь на нее черный флаг. Отпустите каждую мышь осторожно в воду из одного из четырех стартовых мест, стоящих перед стеной бака. Активируйте компьютерную программу слежения, как только мышь будет выпущена в воду, и дайте каждой мыши 60 секунд, чтобы добраться до платформы.В конце каждого испытания поместите мышь на платформу и позвольте ей оставаться там в течение 10-30 секунд. Наблюдайте за траекториями плавания мышей на компьютере. Завехать время, затяжая мышь, чтобы найти платформу в качестве задержки побега, и проанализировать скорость плавания мыши.Затем высушите мышь полотенцами и подогреете ее электрическим обогревателем. Перемести платформу и выполнить четыре испытания на мышь, начиная мышь в разных квадрантах. Разрешить мыши восстановить в течение 15 до 20 минут между каждой пробной версии.Для выполнения испытания Скрытой платформы поместите ту же платформу без флага в юго-восточном квадранте. Затем поместите мышь случайным образом в один из четырех квадрантов, и дать ему 60 секунд, чтобы найти скрытую платформу. Если мышь не может найти платформу в течение 60 секунд, направляйте ее на платформу и позвольте ей оставаться там в течение 10-30 секунд.Замечаете задержку побега каждого судебного разбирательства. Высушите мышь полотенцами и держите ее в тепле с помощью электрического обогревателя. Выполните четыре испытания на мышь с 15 до 20 минут между каждой пробной версии, начиная мышь в другом квадранте каждый раз.Повторите испытания в течение пяти дней подряд с платформой и визуальными сигналами в постоянных положениях. Для выполнения испытания зонда снимите платформу и поместите мышь в воду, обращенную к стене резервуара в северо-западном квадранте. Замеская его плавательную дистанцию, скорость и номер кроссовера платформы.Когда закончите, высушите мышь и держите ее в тепле. Для выполнения обратного испытания распоить платформу в северо-западном квадранте и повторить испытание Скрытой платформы. Этот протокол был использован для изучения влияния ручной иглоукалывания или MA на обучение и память мышей с болезнью Альцгеймера.Для группы МА лечение началось за 15 дней до тестирования MWM и продолжалось в течение 11 дней тестирования. Во время испытания Видимой платформы в первый день MWM, никаких статистических различий не наблюдалось в задержке побега или скорости плавания между группами. Во время скрытой платформы и исследования разворота задержка побега болезни Альцгеймера или группы АД оставалась высокой, в то время как задержка трех других групп постепенно снижалась.Важно отметить, что задержка побега группы MA была короче, чем у группы AD. Во время испытания зонда количество мышей в группе MA было ниже, чем у контрольной группы, но значительно выше, чем у группы AD. Кроме того, процент времени, которое мыши MA провели в квадранте, где ранее находилась платформа, был похож на группу наркотиков, которая была меньше, чем контроль, но больше, чем АД. Важно помнить, что если мышь не может найти платформу в течение 60 секунд, исследователь должен направлять ее к платформе и позволить ей оставаться там в течение 10 до 30 секунд.Конкретных стандартов размеров пула и размера платформы нет. Эти параметры должны быть оптимизированы в предварительных экспериментах в соответствии с экспериментальными требованиями и состоянием экспериментальных животных. Большинство исследований должны быть проведены на основных экспериментов, как MWM.В настоящее время гибкость MWM в качестве экспериментального инструмента заключается только в способности выбирать основные протоколы в соответствии с предлагаемым исследованием, и поэтому этот тест может быть применен для оценки когнитивных функций в большей глубине.

Research

JoVE Journal

Behavior

Shallow Water (Paddling) Variants of Water Maze Tests in Mice

Shallow Water Paddling Variants of Water Maze Tests in Mice

Мелководье (Детский) Варианты тесты с водным лабиринтом у мышей

When Richard Morris devised his water maze in 19817, most behavioral work was done in rats. However, the greater understanding of mouse genetics led to ...

Use of an Eight-arm Radial Water Maze to Assess Working and Reference Memory Following Neonatal Brain Injury

Working and reference memory are commonly assessed using the land based radial arm maze.&#160;However, this paradigm requires pretraining, food ...

The Double-H Maze: A Robust Behavioral Test for Learning and Memory in Rodents

Дважды Н лабиринт: Прочная Поведенческая Тест для обучения и памяти у грызунов

Spatial cognition research in rodents typically employs the use of maze tasks, whose attributes vary from one maze to the next. These tasks vary by their ...

Morris Water Maze Test: Optimization for Mouse Strain and Testing Environment

Водный лабиринт Морриса Тест: Оптимизация для штамма мыши и тестирования окружающей среды

 The Morris water maze (MWM) is a commonly used task to assess hippocampal-dependent spatial learning and memory in transgenic mouse models of disease, ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

Место и реагирования обучение в Открытом поле башня лабиринт

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

An Experimental Analysis of Children's Ability to Provide a False Report about a Crime

Экспериментальный анализ детской способности обеспечить ложное сообщение о преступлении

A considerable amount of research has evaluated children's lie-telling behaviors and skills1-2; however, limitations with the tasks used for eliciting ...

The 4 Mountains Test: A Short Test of Spatial Memory with High Sensitivity for the Diagnosis of Pre-dementia Alzheimer's Disease

Тест 4 горы: короткий тест пространственной памяти с высокой чувствительностью для диагностики Пре-деменции Болезнь Альцгеймера

This protocol describes the administration of the 4 Mountains Test (4MT), a short test of spatial memory, in which memory for the topographical layout of ...

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

Роман объект признание тест для расследования обучения и памяти у мышей

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze

Оценка нарушения пространственной памяти в мышиной модели травматической травмы головного мозга с использованием лабиринта с радиальной водой

Despite the recent increase in use of mouse models in scientific research, researchers continue to use cognitive tasks that were originally designed and ...

Utilizing the Modified T-Maze to Assess Functional Memory Outcomes After Cardiac Arrest

Использование модифицированных t-лабиринту для оценки результатов функциональных памяти после остановки сердца

Background: Evaluating mild to moderate cognitive impairment in a global cerebral ischemia (i.e. cardiac arrest) model can be difficult due to poor ...