Name: electroporation method for in vivo delivery of plasmid dna in the adult zebrafish telencephalon
Uploaded: 2019-09-13T15:00:00
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原稿の編集のためのジェームズ・コプティに特別な感謝。我々はまた、SFB 870とSPPによるドイツ研究財団(DFG)からのJNへの資金を感謝し、「オルファクションの統合分析」とSPP 1738「神経系の発達、可塑性および疾患における非コーディングRNAの新たな役割」、SPP1757グリアの異質性」、およびシステム神経学のためのミュンヘンクラスターの枠組みの中での卓越性戦略(EXC 2145 SyNergy – ID 390857198)。

このプロトコルで使用されるすべての動物は、標準的な畜産条件の下で保持され、実験は、EUおよびアッパーバイエルン州政府(AZ 55.2-1-54-2532-0916)の取り扱いガイドラインおよび規制に従って行われました。
1. エレクトロポレーション用プラスミド混合物の調製
<ol><li>無菌水に関心のあるプラスミドを希釈し、速い緑色の汚れストック溶液[1mg/mL]を追加します。プラスミ?...

<ol>
	<li>Kaslin, J., Ganz, J., Brand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proliferation,+neurogenesis+and+regeneration+in+the+non-mammalian+vertebrate+brain.">Proliferation, neurogenesis and regeneration in the non-mammalian vertebrate brain.</a> Philosophical Transactions of the Royal Society of London Series B Biological Sciences. 363 (1489), 101-122 (2008).</li><li>Baumgart, E. V., Barbosa, J. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitotoxic+brain+injury+in+adult+zebrafish+stimulates+neurogenesis+and+long-distance+neuronal+integration.">Excitotoxic brain injury in adult zebrafish stimulates neurogenesis and long-distance neuronal integration.</a> Glia. 62 (12), 2061-2079 (2014).</li><li>Schmidt, R., Strahle, U., Scholpp, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenesis+in+zebrafish+-+from+embryo+to+adult.">Neurogenesis in zebrafish - from embryo to adult.</a> Neural Development. 8 (3), (2013).</li><li>Alunni, A., Bally-Cuif, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+view+of+regenerative+neurogenesis+in+vertebrates.">A comparative view of regenerative neurogenesis in vertebrates.</a> Development. 143 (5), 741-753 (2016).</li><li>Kizil, C., Kaslin, J., Kroehne, V., Brand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+neurogenesis+and+brain+regeneration+in+zebrafish.">Adult neurogenesis and brain regeneration in zebrafish.</a> Developmetal Neurobiology. 72 (3), 429-461 (2012).</li><li>Than-Trong, E., Bally-Cuif, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radial+glia+and+neural+progenitors+in+the+adult+zebrafish+central+nervous+system.">Radial glia and neural progenitors in the adult zebrafish central nervous system.</a> Glia. 63 (8), 1406-1428 (2015).</li><li>Lyons, D. 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J., Lo Celso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+seeing+to+believing:+labelling+strategies+for+in+vivo+cell-tracking+experiments.">From seeing to believing: labelling strategies for in vivo cell-tracking experiments.</a> Interface Focus. 3 (3), 20130001 (2013).</li><li>Kusumanto, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+of+in+vivo+transfer+of+plasmid+DNA+in+muscle:+comparison+of+electroporation+versus+ultrasound.">Improvement of in vivo transfer of plasmid DNA in muscle: comparison of electroporation versus ultrasound.</a> Drug Delivery. 14 (5), 273-277 (2007).</li><li>Zou, M., De Koninck, P., Neve, R. L., Friedrich, R. 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S., Di Giaimo, R., Gotz, M., Ninkovic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+in+vivo+imaging+of+adult+neural+stem+cells+in+the+zebrafish+telencephalon.">Single-cell in vivo imaging of adult neural stem cells in the zebrafish telencephalon.</a> Nature Protocols. 11 (8), 1360-1370 (2016).</li><li>Di Giaimo, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Aryl+Hydrocarbon+Receptor+Pathway+Defines+the+Time+Frame+for+Restorative+Neurogenesis.">The Aryl Hydrocarbon Receptor Pathway Defines the Time Frame for Restorative Neurogenesis.</a> Cell Reports. 25 (12), 3241-3251 (2018).</li><li>Breunig, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One+step+generation+of+customizable+gRNA+vectors+for+multiplex+CRISPR+approaches+through+string+assembly+gRNA+cloning+(STAgR).">One step generation of customizable gRNA vectors for multiplex CRISPR approaches through string assembly gRNA cloning (STAgR).</a> PLoS One. 13 (4), e0196015 (2018).</li><li>Barbosa, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In vivo single cell analysis reveals distinct behavior of neural stem and progenitor cells in homeostasis and regeneration in the adult brain. , (2014).</li><li>Kelsh, R. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+pigmentation+mutations+and+the+processes+of+neural+crest+development.">Zebrafish pigmentation mutations and the processes of neural crest development.</a> Development. 123, 369-389 (1996).</li><li>Torper, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Reprogramming+of+Striatal+NG2+Glia+into+Functional+Neurons+that+Integrate+into+Local+Host+Circuitry.">In Vivo Reprogramming of Striatal NG2 Glia into Functional Neurons that Integrate into Local Host Circuitry.</a> Cell Reports. 12 (3), 474-481 (2015).</li><li>Nguyen, L. T., Atobe, K., Barichello, J. M., Ishida, T., Kiwada, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complex+formation+with+plasmid+DNA+increases+the+cytotoxicity+of+cationic+liposomes.">Complex formation with plasmid DNA increases the cytotoxicity of cationic liposomes.</a> Biological and Pharmaceutical Bulletin. 30 (4), 751-757 (2007).</li><li>Chapouton, P., Godinho, L., Detrich, H. W., Westerfield, M., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Neurogenesis. Chapter IV in The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A Developmental Biology. 100, (2010).</li><li>Zhu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optogenetic+Dissection+of+Neuronal+Circuits+in+Zebrafish+using+Viral+Gene+Transfer+and+the+Tet+System.">Optogenetic Dissection of Neuronal Circuits in Zebrafish using Viral Gene Transfer and the Tet System.</a> Frontiers in Neural Circuits. 3 (21), (2009).</li></ol>

このエレクトロポレーションプロトコルは、個々のエペンディモグリア細胞を標識する生体内で信頼性の高い方法である。プロトコルは、ニューロンやオリゴデンドロサイトなどの他の細胞型にラベルを付けるために、さらなる適応が必要な場合があります。ラベリングを成功させるために、異なるプロモーターを含むプラスミドを使用することができます。チキンβアクチンプロモーター?...

ゼブラフィッシュは、刺し傷の損傷後の脳再生を調べる優れた動物モデルです。哺乳類と比較して、進化のはしごでは、ゼブラフィッシュのようなあまり進化した種は、一般的に構成的神経新生の高い率と成体神経幹細胞滞留のより広い領域を示し、全体で新しいニューロンの一定の生成につながります成人生活のほとんどの脳領域。この特徴は、ゼブラフィッシュが研究されたほとんどの脳損傷モデルで新しいニューロンを効率的に生成する顕著な可能性を有するように、哺乳類1と比較してゼブラフィッシュの著しく高い再生能力と相関しているように見える2、 3,4,5,6,7,8.ここでは、成人期に顕著な神経新生を有する脳領域であるため、ゼブラフィッシュテレンスファロンが研究される。成人神経新生のこれらのゾーンは、成人哺乳動物脳9、10、11における神経原ゾーンに相同である。
ゼブラフィッシュテレスファロン中の豊富な神経原領域は、細胞またはエペンディモリア細胞のような放射状グリアの存在に起因する。エペンディモグリア細胞は、常駐成人神経幹細胞として機能し、無傷および再生脳3、5の両方で新しいニューロンの生成を担当しています。系統トレース実験は、心室のエペンディモリアが傷害に反応し、増殖し、病変部位5に移行する新しい神経芽細胞を生成することを示している。ゼブラフィッシュテレスファロンの絶え間ない性質のために、エペンディモグリア細胞は心室表面に並び、心室壁を構築する。後部心室壁は、後頭形前形細胞層によって形成される(図1A)。重要なことに、ゼブラフィッシュエペンディモリアは、哺乳類の放射状グリアおよびエペンディマル細胞の両方の特性を具体化する。長い放射状プロセスは、放射状グリア細胞の典型的な特徴であるのに対し、細胞拡張およびタイトジャンクション(ならびにその心室位置)は、エペンディマル細胞12、13、14の典型的な特徴である。したがって、これらの細胞は、エペンディモグリア細胞と呼ばれる。
再生中の単一のエペンディモグリア細胞の生体内挙動に従うには、確実に標識する必要があります。蛍光顕微鏡検査用の生体内細胞標識における種々の方法は、内因性レポーターまたは親油性染料15など、以前に記載されている。これらの方法は、エレクトロポレーションとは対照的に、より長い期間の時間を必要とし、多くの場合、単一細胞標識または永久的な長期トレースの可能性を提供しない。しかし、エレクトロポレーションは(単一細胞標識の他に)、宿主細胞に新しいDNAを導入する可能性を提供する。また、細胞へのDNA移植の他の方法と比較して、エレクトロポレーションは、最も効率的な方法の一つであることが実証されている16、17、18、19。
ここで提示されるエレクトロポレーションプロトコルは、成体ゼブラフィッシュテレンセファロン中の単一のエペンディモグリア細胞を標識する目的で精製された。このプロトコルは、長期期間20にわたってそれらに従うか、または細胞自律的な方法で特定の経路を操作するために、単一のエペンディモグリア細胞の標識を可能にする21,22。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Reagent/Material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F7258-25G</td>
			<td>For coloring plasmid solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS222</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5040-25G</td>
			<td>MS222 should be stored at RT (up to two weeks) and protected from light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound gel</td>
			<td>SignaGel, Parker laboratories INC.</td>
			<td>15-60</td>
			<td>Electrode Gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Air pump</td>
			<td>TetraTec APS 50, 10l-60l</td>
			<td></td>
			<td>Can be bought in the pet shops</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BTX Tweezertrodes Electrodes</td>
			<td>Platinum Tweezertrode, BTX Harvard Apparatus</td>
			<td>45-0486</td>
			<td>1mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electroporation device</td>
			<td>BTX ECM830 Square Wave Electroporation System, BTX Harvard Apparatus</td>
			<td>45-0662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection device</td>
			<td>FemtoJet 4i, Eppendorf</td>
			<td>5252000013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Wall Borosillicate Glass Capillary</td>
			<td>Warner Instruments</td>
			<td>64-0766</td>
			<td>Model No: G100-4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microloader tips</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5242956003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-knife</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10056-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Joystick micromanipulator</td>
			<td>Narishige Japan</td>
			<td>MN - 151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>FemtoJet 4i, Eppendorf</td>
			<td>5252000013</td>
			<td>Needle holder comes together with the injection device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle pulling device</td>
			<td>Narishige Japan</td>
			<td>Model No: PC-10</td>
			<td>The PC-10 was discontinued by Narishige in 2017 and replaced by the PC-100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Greiner Bio-One International</td>
			<td>633161</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

electroporation method for in vivo delivery of plasmid dna in the adult zebrafish telencephalon

エレクトロポレーションは、細胞膜内に一時的な細孔を作り、透過性を高めるために電界を細胞に適用するトランスフェクション法であり、それによって異なる分子を細胞に導入することができます。本論文では、エレクトロポレーションを用いて、成体ゼブラフィッシュテレンセファロンの心室ゾーンに並ぶエペンディモグリア細胞にプラスミドを導入する。これらの細胞の一部は幹細胞特性を示し、ゼブラフィッシュ脳に新しいニューロンを生成します。したがって、神経新生および再生における彼らの役割を決定するためには、彼らの行動を研究することが不可欠です。エレクトロポレーションを介したプラスミドの導入は、単一のエペンディモグリア細胞の長期表示および追跡を可能にする。さらに、Cre recombinaseやCas9などのプラスミドを単一のエペンディモグリア細胞に送達することができ、遺伝子組み換えや遺伝子編集を可能にし、制御された自然な細胞の自律遺伝子機能を評価するユニークな機会を提供します。環境。最後に、この詳細な、ステップバイステップのエレクトロポレーションプロトコルは、多数の単一のエペンディモグリア細胞へのプラスミドの正常な導入を得るために使用される。

記載されたエレクトロポレーション法は、ゼブラフィッシュテレスファロンおよびちょうど後頭平形細胞層の下に表面的に位置するエピデンジモグリア細胞へのプラスミドDNAの送達を可能にする(図1A)。
エレクトロポレーションの結果が陽性の場合、標識された単一エペンディモグリア細胞(図2...

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Electroporation Method for In Vivo Delivery of Plasmid DNA in the Adult Zebrafish Telencephalon

ここで提示されるプラスミドDNA送達およびアジェンジモグリア細胞標識のエレクトロポレーション方法は、成人ゼブラフィッシュテレンセファロンにおける。このプロトコルは、個々のエペンディモグリア細胞を視覚化し、トレースするための迅速かつ効率的な方法であり、遺伝子操作の広い範囲にエレクトロポレーションを適用するための新しい可能性を開きます。

成体ゼブラフィッシュテレンスファロンにおけるプラスミドDNAの生体内送達に関するエレクトロポレーション法

Electroporation is a transfection method in which an electrical field is applied to cells to create temporary pores in a cell membrane and increase its ...

このプロトコルは、ゼブラフィッシュ・テレンセファロン内の個々のエペンディモグリア細胞の標識を可能にし、長期モニタリングを可能にし、細胞自律的な方法で特定の経路を操作することを可能にする。この技術の主な利点は、単一細胞標識を迅速かつ効率的な方法で行うだけでなく、遺伝子編集およびシグナル伝達経路操作を細胞自律的に行うことができる点である。この方法により、細胞の剥離、上皮恒常性の維持、細胞分裂の対称性など、細胞生物学の基本的な問題を調査することができます。まず、針を引く装置を使用して、ガラスの毛細血管を準備します。マイクロローダーのヒントを使用して、調製したガラスキャピラリーを10マイクロリットルのプラスミド溶液で満たします。次に、注射装置のメニュー変更毛細管」を押して、針を針ホルダーに積み込むことができます。次に、注射装置を毛細管の変更から注入モードに切り替えます。次に、4倍の倍率で実体顕微鏡を用い、フィンデン鉗子とし、毛細血管の先端のみを切断する。その後、フットペダルに圧力をかけ、プラスミド溶液が妨げなく針から簡単に出て行くことを確認します。針の準備ができたら、ゼブラフィッシュを畜産タンクから麻酔液の容器に移します。そして、エラの動きが治まるまで数分待ちます。鎮静した魚の後ろ側を天体顕微鏡の下で濡らしたスポンジの上に押し上げ、40ミリメートルの刃先と0.5ミリメートルの厚さのステンレス鋼の解剖マイクロナイフを使用して、眼圧テクタムの境界のすぐ隣にあるテレンセバロンの後部にある魚の頭蓋骨に小さな穴を慎重に作成します。必要に応じて魚を傾け、穴を通して毛細血管の先端の浸透を容易にするために、正しい角度で頭蓋骨に向けてガラスの毛細血管の先端を向けます。次に、毛細管の先端を細孔に慎重に挿入し、末端細胞層を通して、テレンスファルクタル心室に到達するまで、約10秒間フットペダルに圧力をかけて約1マイクロリットルのプラスミド溶液を送達する。分娩の成功は、心室全体に緑色の液体の広がりを観察することによって確認することができる。少量の超音波ゲルで魚のテレンスファルンをカバーします。プラスミド注入動物のエレクトロポレーションの場合、射出セットアップからスポンジを取り出し、電気チップの内側を超音波ゲルに浸します。電極の間に魚の頭部を配置し、正極を頭部の腹側に、負極を後側に置く。次に、魚の体をスポンジに保持しながら、電極をテレンセバロンに対して穏やかに正確に押し付け、フットペダルで電流を管理し、5つのパルスがすべて終了するまで電極を所定の位置に保持します。エレクトロポレーションが成功した場合、単一のエペンディモーリアル細胞に標識されたプラスミドは、非プラスミド標識されたエペンディモーリアル細胞の中で観察され得る。エレクトロポレーションプロセスの効率に応じて、より多くのまたはより少ない数のエペンディモリアル細胞が標識され得る。それにもかかわらず、実証されたプロトコルは、以前に公開されたプロトコルよりも多くのラベル付きセルを生成します。標識された細胞の最も高い密度は、注入されたプラスミド液体が半球間に分配する方法のために、主に両方の半球の内側の心室側に出現する傾向があることに注意してください。このビデオでは、ゼブラフィッシュのテレンセファロンの1つの半球が3Dで提示され、ラジオプロセスを有するエピデンディモリア細胞が側面から観察されるとマゼンタにある。核を標識する別のプラスミドとの共エレクトロポレーションを通して、エペンディモグリア細胞の細胞分裂が観察される。エレクトロポレーションが失敗すると、非常に低い数または標識されたエペンディモリア細胞が生じなくなる。しかし、後末の細胞は、標識される可能性が最も高い。彼らの相腫は立方体においてより大きく、彼らは、エペンディモリア細胞層の側面図から明らかなように、ラジオ細長いプロセスを持っていません。tdTomato-mem標識細胞は、最も可能性の高いエペンディマル細胞であり、これはエペンディモリアの層の上に位置する。これに対し、個々のエペンドミオグリア細胞にプラスミドを発現するtdTomato-memを導入すると、初期細胞標識に加えてtdTomato-mem発現が生じる。覚えておくべき最も重要なことは、毛細血管の先端だけを切断し、液体が心室全体に広がるように注入しながら、上層を貫通することです。この技術は、生体内イメージングを通じて単一のエペンディモリア細胞の長期的なモニタリングを可能にし、したがって、脳再生ならびにその広大な生体内遺伝的リンクにおけるその役割を確立する。

Research

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エバンスブルー色素でゼブラフィッシュ幼生骨格筋の整合性の分析

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

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チキン聴覚器官への遺伝子導入によって、<em&gt;卵内</em&gt;マイクロエレクト​​ロポレーション

Chicken embryos are ideal model systems for studying embryonic development as manipulations of gene function can be conducted with relative ease in ovo. ...

In Vivo Imaging of Transgenic Gene Expression in Individual Retinal Progenitors in Chimeric Zebrafish Embryos to Study Cell Nonautonomous Influences

In Vivo Imaging of Transgenic Gene Expression in Individual Retinal Progenitors in Chimeric Zebrafish Embryos to Study Cell Nonautonomous Influences

細胞非自律影響を研究するためのキメラゼブラフィッシュ胚における個々の網膜前駆細胞におけるトランスジェニック遺伝子発現のin vivoイメージング

The genetic and technical strengths have made the zebrafish vertebrate a key model organism in which the consequences of gene manipulations can be traced ...

In Ovo Electroporation in the Chicken Auditory Brainstem

In Ovo Electroporation in the Chicken Auditory Brainstem

鶏の聴覚脳幹における卵の電気穿孔

Electroporation is a method that introduces genes of interest into biologically relevant organisms like the chicken embryo. It is long established that ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

郭清ときのこ体の免疫蛍光染色と大人のショウジョウバエ脳光受容器ニューロン

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

線虫のニューロンに生殖細胞を再プログラムする RNAi と熱衝撃による転写因子の発現のアプリケーション

Studying the cell biological processes during converting the identities of specific cell types provides important insights into mechanism that maintain ...

Nanoparticle-mediated siRNA Gene-silencing in Adult Zebrafish Heart

ナノ粒子を介した siRNA 遺伝子サイレンシング アダルト ゼブラフィッシュ心臓で

Mammals have a very limited capacity to regenerate the heart after myocardial infarction. On the other hand, the adult zebrafish regenerates its heart ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

ノードと走査型電子顕微鏡と蛍光抗体法マウント全体を使用して Gastrulating のマウス胚における脊索板を可視化

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Adult Zebrafish Injury Models to Study the Effects of Prednisolone in Regenerating Bone Tissue

骨組織の再生にプレドニゾロンの効果を研究する大人のゼブラフィッシュ傷害モデル

Zebrafish are able to regenerate various organs, including appendages (fins) after amputation. This involves the regeneration of bone, which regrows ...