Name: murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm
Uploaded: 2019-08-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

وقد تم دعم هذا العمل من خلال منحة تطوير العلماء AHA 14SDG18730000 (M.S.) وNIH K08 HL098560 (G.A.) وRO1 HL081629 (G.R.U.) المنح. وقد تم دعم هذا المشروع من قبل مؤسسة جراحة الصدر للبحوث والتعليم (TSFRE) منحة البحوث (PI: G. Ailawadi). المحتوى هو فقط من مسؤولية المؤلفين ولا يمثل بالضرورة وجهات نظر NHLBI أو TSFRE. نشكر أنتوني هيرينغ وسيندي دودسون على معرفتهما وخبرتهما التقنية.

تمت الموافقة على بروتوكولات الحيوانات من قبل لجنة رعاية الحيوانات واستخدامها المؤسسية في جامعة فرجينيا (رقم 3634).
1. تحريض التخدير والتنبيب
<ol><li>ضع فأر C57BL/6 الذكور البالغ من العمر 8-10 أسابيع في غرفة مغلقة مع تدفق مستمر من 5٪ isoflurane وخليط الأكسجين لمدة 5 دقائق، حتى يتم إبطاء التن?...

<ol>
	<li>Coady, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+appropriate+size+criterion+for+resection+of+thoracic+aortic+aneurysms.">What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).</li><li>Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm:+A+comprehensive+review.">Abdominal aortic aneurysm: A comprehensive review.</a> Experimental and Clinical Cardiology. 16 (1), 11-15 (2011).</li><li>Bickerstaff, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thoracic+aortic+aneurysms:+a+population-based+study.">Thoracic aortic aneurysms: a population-based study.</a> Surgery. 92 (6), 1103-1108 (1982).</li><li>Cheng, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+aortic+repair+versus+open+surgical+repair+for+descending+thoracic+aortic+disease+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+comparative+studies.">Endovascular aortic repair versus open surgical repair for descending thoracic aortic disease a systematic review and meta-analysis of comparative studies.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (10), 986-1001 (2010).</li><li>Walsh, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+stenting+versus+open+surgery+for+thoracic+aortic+disease:+systematic+review+and+meta-analysis+of+perioperative+results.">Endovascular stenting versus open surgery for thoracic aortic disease: systematic review and meta-analysis of perioperative results.</a> Journal of Vascular Surgery. 47 (5), 1094-1098 (2008).</li><li>Absi, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+patterns+of+gene+expression+distinguishing+ascending+aortic+aneurysms+from+abdominal+aortic+aneurysms:+complementary+DNA+expression+profiling+in+the+molecular+characterization+of+aortic+disease.">Altered patterns of gene expression distinguishing ascending aortic aneurysms from abdominal aortic aneurysms: complementary DNA expression profiling in the molecular characterization of aortic disease.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 126 (2), 344-357 (2003).</li><li>Ailawadi, G., Eliason, J. L., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+concepts+in+the+pathogenesis+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Current concepts in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Vascular Surgery. 38 (3), 584-588 (2003).</li><li>Ikonomidis, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">A murine model of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Surgical Research. 115 (1), 157-163 (2003).</li><li>Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+promotes+atherosclerotic+lesions+and+aneurysms+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1605-1612 (2000).</li><li>Trachet, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending+Aortic+Aneurysm+in+Angiotensin+II-Infused+Mice:+Formation,+Progression,+and+the+Role+of+Focal+Dissections.">Ascending Aortic Aneurysm in Angiotensin II-Infused Mice: Formation, Progression, and the Role of Focal Dissections.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (4), 673-681 (2016).</li><li>Johnston, W. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+interleukin-1beta+decreases+aneurysm+formation+and+progression+in+a+novel+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">Inhibition of interleukin-1beta decreases aneurysm formation and progression in a novel model of thoracic aortic aneurysms.</a> Circulation. 130 (11), 51-59 (2014).</li><li>Pope, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+Receptor+Inhibition+Prevents+Descending+Thoracic+Aortic+Aneurysm+Formation.">Interleukin-6 Receptor Inhibition Prevents Descending Thoracic Aortic Aneurysm Formation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 100 (5), 1620-1626 (2015).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Ailawadi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nonintrinsic+regional+basis+for+increased+infrarenal+aortic+MMP-9+expression+and+activity.">A nonintrinsic regional basis for increased infrarenal aortic MMP-9 expression and activity.</a> Journal of Vascular Surgery. 37 (5), 1059-1066 (2003).</li><li>Ruddy, J. M., Jones, J. A., Spinale, F. G., Ikonomidis, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+heterogeneity+within+the+aorta:+relevance+to+aneurysm+disease.">Regional heterogeneity within the aorta: relevance to aneurysm disease.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 136 (5), 1123-1130 (2008).</li><li>Trigueros-Motos, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryological-origin-dependent+differences+in+homeobox+expression+in+adult+aorta:+role+in+regional+phenotypic+variability+and+regulation+of+NF-kappaB+activity.">Embryological-origin-dependent differences in homeobox expression in adult aorta: role in regional phenotypic variability and regulation of NF-kappaB activity.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33 (6), 1248-1256 (2013).</li><li>Lu, G. S. G., Davis, J. P., Schaheen, B., Downs, E., Roy, R. J., Ailawadi, G., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+chronic+advanced+staged+abdominal+aortic+aneurysm+murine+model.">A novel chronic advanced staged abdominal aortic aneurysm murine model.</a> Journal of Vascular Surgery. 66 (1), 232-242 (2017).</li></ol>

الأبهر الصدري والبطني متميز ة خلوية وجنينية، وهو ذو صلة بمرض تمدد الأوعية الدموية14و15و16. لذلك، هناك حاجة إلى نموذج حيواني محدد لدراسة TAA. على الرغم من أن نماذج dTAA murine الأخرى قد نشرت8، لنا هو النموذج الوحيد لخلق توسع الأبهر الصد...

الغرض من هذه الطريقة هو دراسة التطور، والفيزيولوجيا المرضية، والتغيرات الهيكلية في الأبهر الصدري النقالة خلال تشكيل تمدد الأوعية الدموية الأبهري. يقدم نموذجنا طريقة قابلة للتكرار ومتسقة للحث على تمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري (dTAA) في الفئران مما يسمح لاختبار مختلف مثبطات وراثية ودوائية. ويمكن أن يساعد هذا العمل في تحديد الأدوية والعلاجات الجينية التي يمكن ترجمتها إلى استراتيجية علاجية قابلة للتطبيق للبشر المصابين بمرض الديتا.
dTAAs شكل عندما يصبح جدار الأبهر الصدري ضعفووين وينقطع مع مرور الوقت حتى يصل إلى قطر حرج عندما يمكن أن يحدث تمزق أو تمزق. سريريا، dTAA يمكن أن تتقدم في صمت، وزيادة في الحجم حتى يتم تشويه هيكل الجدار الأبهري بحيث يفشل في نهاية المطاف، مع عواقب كارثية. وفيما يتعلق ، عادة ما تتطور الأعراض فقط عندما يصل تمدد الأوعية الدموية إلى حجم محفوف بالمخاطر (100-150٪ توسع) ويكون في خطر كبير للتشريح أو تمزق1،2. تمزق dTAA هو قاتل ة عالميا تقريبا3، وإصلاح الجراحية الاختيارية يحمل اعتلال كبير4،5. وعلاوة على ذلك، فإن معظم المرضى يحملون تشخيص تمدد الأوعية الدموية الأبهري لمدة 5 سنوات تقريبا قبل الإصلاح الجراحي6،7. هذه النافذة تمثل الوقت المناسب للتدخل غير الجراحية. وهكذا، هناك حاجة إلى العلاجات الطبية لعلاج أو بطء تطور dTAA، وسوف تمثل تقدما كبيرا في مجال بحوث تمدد الأوعية الدموية. لا توجد حاليًا أي علاجات طبية لـ dTAA المتاحة، ويرجع ذلك في الغالب إلى عدم اكتمال فهم مسببات الأمراض dTAA.
على مدى السنوات ال 20 الماضية، تم تطوير العديد من النماذج الحيوانية dTAA، ولكن كل من هذه النماذج كانت متميزة عن منطقتنا ولم تنتج تمدد الأوعية الدموية قوية. تم تطوير نموذج dTAA murine الأكثر مماثلة للنا من قبل Ikonomidis وآخرون8، والذي يتضمن التطبيق المباشر من CaCl2 إلى adventitia من الأبهر. على الرغم من أن نموذجنا تم تكييفه من العديد من التقنيات التي وضعتها Ikonomidis, نموذجنا فريد من نوعه في ثلاث طرق منفصلة. أولا، في نموذجنا يتعرض الأبهر إلى elastase الموضعية لمدة 3-5 دقائق، مقارنة مع 15 دقيقة من التعرض CaCl 2. ثانيا، يحدث توسع الأبهر في 2 أسابيع، مقارنة مع 16 أسبوعا في نموذج CaCl2. وأخيرا، لدينا نموذج تنتج باستمرار تمدد الأوعية الدموية من ما يقرب من 100٪ التمدد، مقارنة مع التمدد الأبهري من 20-30٪ التي تنتجها CaCl2 التطبيق (والتي لا يمكن أن تعتبر حقا تمدد الأوعية الدموية كما يتم تعريفها على أنها زيادة في الأبهر قطر > 50٪). هناك نماذج أخرى غير الجراحية من المورين تشكيل تمدد الأوعية الدموية، مثل Apo E الفئران بالضربة القاضية، والتي تشكل تمدد الأوعية الدموية قوية مع ضخ أنجيوتنسين الثاني. ومع ذلك، فإن هذه الفئران تطوير تمدد الأوعية الدموية الأبهري فوق الكلوي أو التصاعدي بدلا من تمدد الأوعية الدموية على وجه التحديد في الأبهر الصدري تنازلي9،10.
العقلانيل لهذا البروتوكول هو أن يكون بسيطة، غير مكلفة، والوقت وسيلة مناسبة لدراسة dTAA في نموذج murine. يوفر نموذج الماوس فرصة فريدة للاستفادة من العديد من الضربات القاضية الوراثية والخاصة بالخلايا التي تم العثور على أنها مؤثرة في أمراض الأوعية الدموية الأخرى. وقد تم استقبال استخدام نموذج TAA المحدد لدينا بشكل جيد والتجارب التي تستخدم ها تم نشرها في المجلات عالية التأثير11،12. إلى هذه النقطة, وقد استخدم النموذج للتحقيق في العلاجات الوراثية والدوائية المحتملة التي كان لها تأثير كبير في تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) نماذج المورين; ومع ذلك، كما توسع مختبرنا استخدام نموذج dTAA، ونحن نجد أهداف فريدة من نوعها لتشكيل dTAA التي يمكن استخدامها كعلاجات مستهدفة في البشر.
هذا النموذج هو الأنسب للمختبرات التي لديها قدرات الجراحة الدقيقة مورين. على الرغم من أنه من الصعب من الناحية الفنية، فإنه يمكن تنفيذها باستمرار حتى من قبل الباحثين مع عدم وجود خبرة جراحية سابقة. بالنسبة للباحث الذي ليس لديه خبرة جراحية في البول، يمكن إتقان النموذج في حوالي 20 جلسة عمل (أو حوالي 50 فأرة). بالنسبة للباحث الذي له خبرة جراحية سابقة، يمكن إتقان النموذج في 5 جلسات عملية (حوالي 20 فأرة). ونحن نعتقد مع الفيديو عالية الجودة، ويمكن زيادة تخفيض الوقت لإتقان. بعد تحقيق الكفاءة، يمكن إكمال الإجراء في 35 دقيقة للجراحة، و 20 دقيقة للحصاد النهائي. يمكن للجراحين في مختبرنا إكمال 10-12 عملية جراحية كاملة في اليوم الواحد، مع معدل وفيات العمليات من 5-10٪. السبب الأكثر شيوعا للوفيات هو إصابة الرئة عند الدخول إلى الصدر، والسمية المخدرة، أو المسيل للدموع من الأبهر أثناء تشريح. بالإضافة إلى أبحاث dTAA، هذا النموذج هو أيضا بمثابة دليل للوصول الآمن والسهل إلى الأبهر الصدري والرئة هيلوم للباحثين الذين يدرسون التدخلات الأخرى في الصدر.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:761px;" width="760">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Angiocatheter (22G)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Used for ET Tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Dumont Tweezers; Pattern #7 x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-4982</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Graefe Tissue Forceps</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Harms Forceps x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Intracardiac Needle Holder; Extra Delicate; Carbide Jaws; 7&#34; Length</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-7800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;KL 1500 LED Light Source</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">150-400</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;M205A Dissction Microscope</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">CH 94-35</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Iris Scissors, 11cm, Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:161px;">500216-G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Metal Clip board</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Use with the Mouse Retractor Set&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Mouse Retractor Set</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;">SURGI-5001</td>
			<td style="width:167px;">Need 2 short and 1 tall fixators</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:243px;">Mouse Ventilator MiniVent Type 845, 115 V, Power Supply with US Connector</td>
			<td style="width:191px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">73-0043</td>
			<td style="width:167px;">MiniVent Ventilator for Mice (Model 845), Single Animal, Volume Controlled</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:191px;">Elastase from porcine pancreas</td>
			<td style="width:161px;">E0258-50MG</td>
			<td style="width:167px;">Can be purchased in various size bottles</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:191px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:161px;">18000-00</td>
			<td style="width:167px;">Recommend using rechargable AA batteries</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Spring Scissors, 10.5cm</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right" style="width:161px;">14127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Steril Swabs (Sponges)</td>
			<td style="width:191px;">Sugi</td>
			<td align="right" style="width:161px;">31603</td>
			<td style="width:167px;">Can be cut to size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Surgi Suite Surgical Platform</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Attach to clip board&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Tech IV Isoflurane Vap</td>
			<td style="width:191px;">Jorgensen&#160;Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:161px;">J0561A</td>
			<td style="width:167px;">Anesthesia vaporizer&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm

وفقا لمركز مكافحة الأمراض، تعتبر تمدد الأوعية الدموية الأبهري (AAs) سببا رئيسيا للوفاة في جميع الأعراق وكلا الجنسين من 1999-2016. يتشكل تمدد الأوعية الدموية نتيجة للضعف التدريجي وتوسع الأبهر في نهاية المطاف، والتي يمكن أن تمزق أو تمزق بمجرد أن تصل إلى قطر حرج. تشكل تمددات الأوعية الدموية في الأبهر التنازلي النازل في الصدر، وتسمى تمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري التنازلي (dTAA)، نسبة كبيرة من حالات تمدد الأوعية الدموية في الولايات المتحدة. وتمزق dTAA غير الوارد قاتل على نطاق عالمي تقريباً، كما أن الإصلاح الاختياري له معدل مرتفع من الاعتلال والوفيات. الغرض من نموذجنا هو دراسة dTAA على وجه التحديد، لتوضيح الفيزيولوجيا المرضية من dTAA والبحث عن أهداف جزيئية لوقف النمو أو تقليل حجم dTAA. من خلال وجود نموذج المورين لدراسة الأمراض الصدرية على وجه التحديد، يمكن تطوير العلاجات المستهدفة لاختبار dTAA على وجه التحديد. وتستند هذه الطريقة على وضع elastase البنكرياس porcine (PPE) مباشرة على الجدار الأبهري المورين الخارجي بعد التعرض الجراحي. وهذا يخلق رد فعل مدمر وتحريضي، مما يضعف الجدار الأبهري ويسمح لتشكيل تمدد الأوعية الدموية على مدى أسابيع إلى أشهر. على الرغم من أن نماذج المورين تمتلك قيودًا، إلا أن نموذج dTAA الخاص بنا ينتج تمدد تمدد الأوعية الدموية القوي بحجم متوقع. وعلاوة على ذلك، يمكن استخدام هذا النموذج لاختبار الأهداف الوراثية والصيدلانية التي قد توقف نمو dTAA أو منع التمزق. في المرضى البشر، يمكن أن تساعد مثل هذه التدخلات على تجنب تمزق تمدد الأوعية الدموية، والتدخل الجراحي الصعب.

تطبيق بروتوكولنا يؤدي إلى dTAA قوية في الفئران مقارنة مع عناصر التحكم المالحة. ال [تا] يطوّر [فوسفورم] في شكل ويحدث فقط في المعالجة جزء من الأبهر (الشكل1 والشكل 2)11. ويبين الشكل 2 مثالاً على قياس القياس المجهري للفيديو عند حصاد الأنس?...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

نحن نصف بروتوكول جراحي للحث باستمرار قوية الأوعية الدموية الأبهرية الصدرية تنازلي في الفئران. ينطوي الإجراء على استئصال الصدر الأيسر، والتعرض للأبهر الصدري، ووضع اسفنجة غارقة في elastase البنكرياس البورسيني على الجدار الأبهري.

نموذج مورين الجراحي ة من الإيلاستاز الموضعي ة مستحثة بتمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

هذا البروتوكول قادر على إنتاج تمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري القوي من الحجم والموقع ثابتين في الفئران ويعمل كدليل للوصول الآمن إلى الصدر المورين. هذا البروتوكول هو طريقة مباشرة ومتسقة لإنتاج تمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري في الفئران على مدى فترة زمنية معقولة مقارنة بالنماذج الأخرى. بعد التأكد من مستوى مناسب من التدليس في ثمانية إلى 10 أسابيع من العمر الذكور c57 أسود ستة الماوس، وضع الماوس في موقف اليمين ديسوبيتوس الجانبي وشريط الذراع الأيمن مُجَرَّد حتى أن الكف الأمامي يتماشى مع الأنف.سحب الذيل caudally لخلق خط التوتر بين الذراع اليمنى والذيل، وإنتاج تمديد العمود الفقري، وشريط الساق اليسرى في وضعها الطبيعي. ثم، الشريط الذراع اليسرى ventrally فوق الشاش المدلفن. قبل البدء في العملية، استخدم المقصات لحلاقة الجناح الأيسر من الكتف الأيسر إلى البطن الأيسر.استخدام قضيب القطن يميل إلى فرشاة حل بيتادين الأول، ثم 70٪ الإيثانول على موقع الجراحة. عندما يكون الجلد جافًا، ضع ستارة معقمة على الحيوان. قم بعمل شق جانبي طوله سنتيمترين عند نقطة منتصف الهيموثوراx واستخدمي الوتر الكهربائي باليد لتقسيم طبقات العضلات حتى تصبح الأضلاع مرئية.تحت 10 إلى 15x التكبير، الكي مباشرة جزء مليمترين بين الأضلاع واستخدام المالحة wetted، غرامة القطن يميل قضيب في الفضاء الأضلاع من أجل تشريح في الفضاء الجنبي من خلال جزء الكي. ضع إسفنجة ملحية، ثلاثة باثنين ملليمترين من الإسفنج في الصدر للمساعدة في انهيار الرئة. ثم، استخدام مقص لتوسيع الصدر حتى الحجاب الحاجز مرئيا ventrally والشق هو عدة ملليمترات بعيدا عن عضلات الطفيليات dorsally.لفضح الشريان الأورطي، ضع اضلع الداخر في شق الصدر وإزالة بعناية الاسفنج من سطح الرئة. تغطية الرئة مع المالحة wetted، ستة من أربعة ملليمتر اسفنجة مع نهايات مشيرا rostrally وcaudally ووضع واسعة، ونطحة الرئة على اسفنجة. ثم، حرك بلطف الداخر البطينية حتى يتعرض الشريان الأورطي الصدري التنازلي واستخدام عدد سبعة ملقط لتشريح ما يقرب من خمسة ملليمترات مقطع من النسيج الضام والدهون من الشريان الأورطي.لتطبيق elastase، أولا، استخدام ميكروبليت لتشبع 0.5 من قبل إسفنجة ملليمتر واحد مع 12 ميكرولترات من elastase البنكرياس بورسين ووضع الاسفنج على السطح المكشوف من الشريان الأورطي. بعد ثلاث إلى خمس دقائق، استخدم عدد سبعة ملقط لإزالة الاسفنج elastase وإزالة نازل الرئة. ري تجويف الصدر مع ما يقرب من نصف ملليلتر من المالحة العقيمة.إزالة إسفنج الرئة واستخدام قطعة تدحرجت اثنين في اثنين بوصة من الشاش لامتصاص الري المالحة المتبقية. إزالة الضواد الأضلاع وخلع الأضلاع مع ثلاثة توقف ستة أوه خياطة غير قابلة للامتصاص، ربط عقدة فضفاضة في كل خياطة دون ربط الغرز إلى أسفل. بعد إعادة تشغيل الرئة، وربط الغرز وإعادة ادمج طبقات العضلات مع خياطة مضفرة خمسة أوه قابلة للامتصاص.أغلق الجلد مع سبعة إلى 10 خياطة غير قابلة للامتصاص من 7 إلى 10. ثم، مراقبة الحيوان حتى إعادة شغل كامل. عند نقطة النهاية التجريبية المناسبة ، استخدم المقص لتمسيد الجلد من الجناح الأيسر إلى البطن المركزي ، مع الحرص على عدم دخول الصفاق.اِنْكِ الجلد من الجناح الأيسر الظهري إلى الكتف الأيسر و إجراء شق بزاوية 90 درجة من خلال الإبط إلى القص. باستخدام الكي، تشريح رفرف الجلد نحو الجانب البطني من الماوس لفضح الاندموم الأيسر واستخدام مقص لدخول البطن على طول الهامش كوستال الأيسر من البطن اتجاه الظهر لفضح الجانب السفلي من الحجاب الحاجز الأيسر. إذا لم يتم فتح الحافة الجانبية الأكثر من الحجاب الحاجز، incise الحجاب الحاجز على حافة الأكثر الجانبي.وضع غيض من الكي في هذا الثقب، الكي الحجاب الحاجز من الهامش كوستال لعملية xiphoid واستخدام قضيب رطبة، غرامة يميل القطن يميل لتحرير بلطف الرئة من أي التصاقات إلى جدار الصدر. مع ضمان الرئة هو للخروج من الطريق، واستخدام الكهرباء لقطع من خلال الأضلاع وجدار الصدر من هامش تكلفة إلى الضلع الأول، الظهر إلى خط منتصف الإبط، ولكن على الأقل اثنين ملليمتر من الشريان الأبهر. قطع على طول هامش متفوقة من الضلع الأول وتعكس القفص الصدري ventrally لفضح الهيموثوراك.وضع الداورس على الرئة وسحب medially. وضع الداخر أو الشاش المالحة wetted على الحجاب الحاجز ورسم caudally لفضح أكبر قدر ممكن من الشريان الأبهر. استخدم قضيبًا جافًا ومقلوبًا بالقطن لإزالة أي تصاقات من تمدد الأوعية الدموية الأبهري وجزء من الشق غير متأثر واستخدم قياس الفيديو الصغير لقياس قطر جزء التحكم غير المتأثر والجزء الأوسع من تمدد الأوعية الدموية المعالج بelastase.لحصاد الشريان الأورطي، فهم السفينة مع ملقط يضر مجرد قطيعة إلى الجزء المعالج واستخدام مقص لقطع قفص إلى ملقط. تشريح الشريان الأورطي الخروج من العمود الفقري وقطع السفينة القريبة إلى الجزء المعالج لإزالة الأنسجة الدهنية. ثم، باستخدام حقنة درنة و إبرة، وغسل التجويف الأبهري مع المالحة ومعالجة العينة وفقا للتحليل التجريبي المصب المخطط لها.المتقدمة تمدد الأوعية الدموية الصدرية كما fusiform في الشكل وتحدث فقط في الجزء المعالج على الشريان الأورطي. في هذا القياس القياس المجهري الفيديو التمثيلي، تم تحديد تمدد الأبهري ليكون 130٪ في حصاد الأنسجة. في الواقع ، في حين أن نوع الفئران المعالجة elastase تظهر زيادة كبيرة في التمدد الأبهري في الأيام الثلاثة والسابعة و14 و 21 بعد العلاج مع التمدد الأقصى الملاحظ في اليوم 14 مقارنة بفئران التحكم في النوع البري.تحليل الأنسجة يكشف أن نوع تمدد الأوعية الدموية البرية والألياف elastin التي هي رقيقة ومجزأة. وهناك أيضا أقل سلاسة خلية العضلات تلطيخ مع زيادة في الضامة والتعبير interlukin بيتا واحد. الرئة مورين حساسة للغاية، وعادة ما تكون الإصابة قاتلة.اتخاذ أقصى درجات الحذر مع الدخول الأولي إلى الصدر والتلاعب فقط الرئة مع الإسفنج المالحة. وقد ساعد هذا النموذج لتوضيح دور interlukin بيتا واحدة وinterlukin ستة في التسبب في تمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري التنازلي وكيف يمكن أن الحصار تسهيل الإدارة غير الجراحية لهذه تمدد الأوعية الدموية.

Research

JoVE Journal

Medicine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

نموذج الفئران من جديد اللف الأورطي إصلاح تمدد الأوعية الدموية

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproducable الشلل النصفي عن طريق الشريان الأورطي الصدري انسداد في نموذج الفئران من الحبل الشوكي نقص التروية، ضخه

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

A الفئران نموذج من عضلة القلب إصابة نقص التروية، ضخه من خلال ربط الشريان الأمامي اليسار تنازليا

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

نماذج الجراحية من الجزر المعدي مع الفئران

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

الفئران اليسار الأمامي تنازلي (LAD) التاجي ربط الشريان: نموذج تحسين والمبسطة لاحتشاء عضلة القلب

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

إنشاء نموذج القوارض من الابهر البطني عن طريق حظر أدفينتيتيال Vasa Vasorum التروية

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

تقنية موحدة لزرع الصمام الابهري إعادة لتجنيب الصمام الابهري الجذر الاستبدال

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

التحليل الكمي للأشعة المقطعية الصغرى من أورتوباثي في نموذج ماوس β-أمينوبروبيونيتريلي-المستحث الابهر والتشريح

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

التصوير بالموجات فوق الصوتية للشريان الاورطي الصدري والبطن في الفئران لتحديد أبعاد تمدد الأوعية الدموية

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

نموذج احتشاء عضلة القلب Murine باستخدام الربط الدائم للشريان التاجي الأمامي الأيسر

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...