Name: murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm
Uploaded: 2019-08-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

Dette arbejde blev understøttet af AHA Scientist udvikling Grant 14SDG18730000 (M.S.), NIH K08 HL098560 (G.A.) og RO1 HL081629 (G.R.U.) Grants. Projektet blev støttet af forsknings tilskuddet fra Thoracic Surgery Foundation for Research and Education (TSFRE) (PI: G. Ailawadi). Indholdet er udelukkende forfatterens ansvar og repræsenterer ikke nødvendigvis de synspunkter, som NHLBI eller TSFRE har. Vi takker Anthony Herring og Cindy Dodson for deres viden og tekniske ekspertise.

Dyre protokoller blev godkendt af University of Virginia Institutionsudvalg for dyrepasning og-brug (nr. 3634).
1. induktion af anæstesi og intubation
<ol><li>Placer en 8-10-ugers gammel mandlig C57BL/6 mus i et lukket kammer med kontinuerlig strøm af 5% isofluran og oxygen blanding i 5 min, indtil respirationer er synligt bremset. Bemærk: forskellige stammer, køn og alder af mus kan anvendes afhængigt af forsøgsprotokollen. Hunmus kan være vanskeligere at intubate på grund af min...

<ol>
	<li>Coady, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+appropriate+size+criterion+for+resection+of+thoracic+aortic+aneurysms.">What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).</li><li>Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm:+A+comprehensive+review.">Abdominal aortic aneurysm: A comprehensive review.</a> Experimental and Clinical Cardiology. 16 (1), 11-15 (2011).</li><li>Bickerstaff, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thoracic+aortic+aneurysms:+a+population-based+study.">Thoracic aortic aneurysms: a population-based study.</a> Surgery. 92 (6), 1103-1108 (1982).</li><li>Cheng, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+aortic+repair+versus+open+surgical+repair+for+descending+thoracic+aortic+disease+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+comparative+studies.">Endovascular aortic repair versus open surgical repair for descending thoracic aortic disease a systematic review and meta-analysis of comparative studies.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (10), 986-1001 (2010).</li><li>Walsh, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+stenting+versus+open+surgery+for+thoracic+aortic+disease:+systematic+review+and+meta-analysis+of+perioperative+results.">Endovascular stenting versus open surgery for thoracic aortic disease: systematic review and meta-analysis of perioperative results.</a> Journal of Vascular Surgery. 47 (5), 1094-1098 (2008).</li><li>Absi, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+patterns+of+gene+expression+distinguishing+ascending+aortic+aneurysms+from+abdominal+aortic+aneurysms:+complementary+DNA+expression+profiling+in+the+molecular+characterization+of+aortic+disease.">Altered patterns of gene expression distinguishing ascending aortic aneurysms from abdominal aortic aneurysms: complementary DNA expression profiling in the molecular characterization of aortic disease.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 126 (2), 344-357 (2003).</li><li>Ailawadi, G., Eliason, J. L., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+concepts+in+the+pathogenesis+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Current concepts in the pathogenesis of abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Vascular Surgery. 38 (3), 584-588 (2003).</li><li>Ikonomidis, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">A murine model of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Surgical Research. 115 (1), 157-163 (2003).</li><li>Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+promotes+atherosclerotic+lesions+and+aneurysms+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1605-1612 (2000).</li><li>Trachet, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ascending+Aortic+Aneurysm+in+Angiotensin+II-Infused+Mice:+Formation,+Progression,+and+the+Role+of+Focal+Dissections.">Ascending Aortic Aneurysm in Angiotensin II-Infused Mice: Formation, Progression, and the Role of Focal Dissections.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (4), 673-681 (2016).</li><li>Johnston, W. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+interleukin-1beta+decreases+aneurysm+formation+and+progression+in+a+novel+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">Inhibition of interleukin-1beta decreases aneurysm formation and progression in a novel model of thoracic aortic aneurysms.</a> Circulation. 130 (11), 51-59 (2014).</li><li>Pope, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+Receptor+Inhibition+Prevents+Descending+Thoracic+Aortic+Aneurysm+Formation.">Interleukin-6 Receptor Inhibition Prevents Descending Thoracic Aortic Aneurysm Formation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 100 (5), 1620-1626 (2015).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Ailawadi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nonintrinsic+regional+basis+for+increased+infrarenal+aortic+MMP-9+expression+and+activity.">A nonintrinsic regional basis for increased infrarenal aortic MMP-9 expression and activity.</a> Journal of Vascular Surgery. 37 (5), 1059-1066 (2003).</li><li>Ruddy, J. M., Jones, J. A., Spinale, F. G., Ikonomidis, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+heterogeneity+within+the+aorta:+relevance+to+aneurysm+disease.">Regional heterogeneity within the aorta: relevance to aneurysm disease.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 136 (5), 1123-1130 (2008).</li><li>Trigueros-Motos, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryological-origin-dependent+differences+in+homeobox+expression+in+adult+aorta:+role+in+regional+phenotypic+variability+and+regulation+of+NF-kappaB+activity.">Embryological-origin-dependent differences in homeobox expression in adult aorta: role in regional phenotypic variability and regulation of NF-kappaB activity.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33 (6), 1248-1256 (2013).</li><li>Lu, G. S. G., Davis, J. P., Schaheen, B., Downs, E., Roy, R. J., Ailawadi, G., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+chronic+advanced+staged+abdominal+aortic+aneurysm+murine+model.">A novel chronic advanced staged abdominal aortic aneurysm murine model.</a> Journal of Vascular Surgery. 66 (1), 232-242 (2017).</li></ol>

Thorax og abdominal aorta er cellulært og embryo logisk adskilte, hvilket er relevant for Aneurysmal sygdom14,15,16. Derfor er der behov for en specifik dyremodel for at studere TAA. Selvom andre murine dTAA modeller er blevet offentliggjort8, vores er den eneste model til at skabe faldende thorax aorta dilatation, som kan betragtes virkelig Aneurysmal (over 50% dilation). Desuden er vores model relativt...

Formålet med denne metode er at studere udvikling, Patofysiologi, og strukturelle ændringer i murine faldende thorax aorta under aortaaneurisme dannelse. Vores model tilbyder en reproducerbar og konsekvent metode til at inducere thorax aorta aneurismer (dtaa) i mus, hvilket gør det muligt at afprøve forskellige genetiske og farmakologiske hæmmere. Dette arbejde kan hjælpe med at identificere stoffer og genterapier, som kan oversættes til en levedygtig behandlingsstrategi for mennesker med dTAA-sygdom.
dtaas form, når væggen af thorax aorta bliver svækket og udvider over tid, indtil de når en kritisk diameter, når rive eller ruptur kan derefter forekomme. Klinisk, dTAA kan fremskridt i stilhed, stigende i størrelse, indtil strukturen i aorta væggen er så forvrænget, at det i sidste ende mislykkes, med katastrofale konsekvenser. Concerningly, symptomer normalt udvikler kun, når aneurisme har nået en farefuld størrelse (100-150% dilatation) og er i høj risiko for dissektion eller ruptur1,2. dtaa brud er næsten universelt dødbringende3, og elektiv kirurgisk reparation bærer signifikant sygelighed4,5. Endvidere, de fleste patienter bærer diagnosen af en aorta aneurisme i ca 5 år før kirurgisk reparation6,7. Dette vindue er et belejligt tidspunkt til at intervenere ikke-kirurgisk. Således, medicinske behandlinger til behandling eller langsom progression af dTAA er nødvendige og ville repræsentere en betydelig avancement på området for aneurisme forskning. Der er i øjeblikket ingen medicinske behandlinger for dTAA tilgængelige, mest på grund af en ufuldstændig forståelse af dTAA patogenesen.
I løbet af de sidste 20 år er flere dTAA dyremodeller blevet udviklet, men hver af disse modeller var adskilte fra vores egen og producerede ikke robuste aneurismer. En murine dTAA model mest ligner vores blev udviklet af Ikonomidis et al.8, som omfatter direkte anvendelse af CaCl2 til adventitia af aorta. Selvom vores model blev tilpasset fra mange af de teknikker, der er fremlagt af Ikonomidis, er vores model unik på tre forskellige måder. Første, i vores model aorta er udsat for aktuel elastase i 3-5 minutter, sammenlignet med 15 minutter af CaCl2 eksponering. Anden, aorta dilatation forekommer i 2 uger, sammenlignet med 16 uger i CaCl2 model. Sidst, vores model konsekvent producerer aneurismer på ca 100% dilatation, sammenlignet med aorta dilatationer af 20-30% produceret af CaCl2 ansøgning (som ikke kan virkelig betragtes aneurismer, da de er defineret som en stigning i aorta diameter > 50%). Der er andre ikke-kirurgiske murine modeller af aneurisme dannelse, såsom APO E knockout Mouse, som danner robuste aneurismer med infusion af angiotensin II. Men, disse mus udvikle Supra-renal eller stigende thorax aorta aneurismer snarere end aneurismer specifikt i den nedadgående thorax aoric9,10.
Den rationelle for denne protokol er at have en enkel, billig, og tid egnet måde at studere dTAA i en murine model. Musemodellen giver en unik mulighed for at udnytte mange genetiske og celle-specifikke Knockouts, der har været fundet at være virkningsfulde i andre Vaskulære sygdomme. Brugen af vores specifikke TAA-model er blevet godt modtaget, og eksperimenter, der udnytter den, er blevet offentliggjort i high impact-tidsskrifter11,12. Til dette punkt, modellen er blevet anvendt til at undersøge mulige genetiske og farmakologiske behandlinger, der havde en signifikant effekt i den abdominale aorta aneurisme (AAA) murine modeller; men da vores laboratorium har udvidet brugen af dTAA-modellen, er vi ved at finde mål, der er unikke for dTAA-dannelse, som kan anvendes som målrettede terapier hos mennesker.
Denne model er mest egnet til laboratorier, der har murine mikro-kirurgiske kapaciteter. Selv om det er teknisk udfordrende, det kan udføres konsekvent selv af forskere uden forudgående kirurgisk erfaring. For en forsker uden murine kirurgisk erfaring kan modellen beherskes i ca. 20 operative sessioner (eller ca. 50 mus). For forskeren med forudgående kirurgisk erfaring, kan modellen beherskes i 5 operative sessioner (ca. 20 mus). Vi tror med en høj kvalitet video, tid til beherskelse kan reduceres yderligere. Når færdigheden er opnået, kan proceduren afsluttes i 35 minutter for operationen, og 20 minutter for terminalen høst. Kirurger i vores laboratorium kan fuldføre 10-12 fuld kirurgi per dag, med en udløsende dødelighed på 5-10%. Den mest almindeligt forekommende årsag til dødelighed er lungeskade ved indtræden i brystet, bedøvelse toksicitet, eller ælde af aorta under dissektion. Ud over dtaa forskning, denne model fungerer også som en guide til sikker og nem adgang til thorax aorta og lunge hilum for forskere, der studerer andre interventioner i brystet.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:761px;" width="760">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Angiocatheter (22G)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Used for ET Tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Dumont Tweezers; Pattern #7 x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-4982</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Graefe Tissue Forceps</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Harms Forceps x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Intracardiac Needle Holder; Extra Delicate; Carbide Jaws; 7&#34; Length</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-7800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;KL 1500 LED Light Source</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">150-400</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;M205A Dissction Microscope</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">CH 94-35</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Iris Scissors, 11cm, Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:161px;">500216-G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Metal Clip board</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Use with the Mouse Retractor Set&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Mouse Retractor Set</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;">SURGI-5001</td>
			<td style="width:167px;">Need 2 short and 1 tall fixators</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:243px;">Mouse Ventilator MiniVent Type 845, 115 V, Power Supply with US Connector</td>
			<td style="width:191px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">73-0043</td>
			<td style="width:167px;">MiniVent Ventilator for Mice (Model 845), Single Animal, Volume Controlled</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:191px;">Elastase from porcine pancreas</td>
			<td style="width:161px;">E0258-50MG</td>
			<td style="width:167px;">Can be purchased in various size bottles</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:191px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:161px;">18000-00</td>
			<td style="width:167px;">Recommend using rechargable AA batteries</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Spring Scissors, 10.5cm</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right" style="width:161px;">14127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Steril Swabs (Sponges)</td>
			<td style="width:191px;">Sugi</td>
			<td align="right" style="width:161px;">31603</td>
			<td style="width:167px;">Can be cut to size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Surgi Suite Surgical Platform</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Attach to clip board&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Tech IV Isoflurane Vap</td>
			<td style="width:191px;">Jorgensen&#160;Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:161px;">J0561A</td>
			<td style="width:167px;">Anesthesia vaporizer&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm

Ifølge Center for Disease Control, aorta aneurismer (AAs) blev betragtet som en førende dødsårsag i alle racer og begge køn fra 1999-2016. En aneurisme former som følge af progressiv svækkelse og eventuel dilatation af aorta, som kan Bristning eller rive, når den når en kritisk diameter. Aneurismer af den faldende aorta i brystet, kaldet faldende thorax aorta aneurismer (dtaa), udgør en stor del af aneurisme tilfælde i USA. Uindesluttet dTAA ruptur er næsten universelt dødbringende, og elektiv reparation har en høj sygelighed og dødelighed. Formålet med vores model er at studere dTAA specifikt, at belyse patofysiologien af dTAA og at søge efter molekylære mål at standse væksten eller reducere størrelsen af dTAA. Ved at have en murine model til at studere thorax patologi præcist, målrettede terapier kan udvikles til specifikt at teste dtaa. Metoden er baseret på placeringen af Porcin bugspytkirtel elastase (PPE) direkte på den ydre murine aorta væggen efter kirurgisk eksponering. Dette skaber en destruktiv og inflammatorisk reaktion, som svækker aorta væggen og giver mulighed for aneurisme dannelse over uger til måneder. Selvom murine modeller besidder begrænsninger, producerer vores dTAA-model robuste aneurismer af forudsigelig størrelse. Desuden kan denne model bruges til at teste genetiske og farmaceutiske mål, som kan arrestere dTAA vækst eller forhindre ruptur. I humane patienter, interventioner som disse kunne hjælpe med at undgå aneurisme ruptur, og vanskelige kirurgiske indgreb.

Anvendelsen af vores protokol resulterer i robust dTAA i mus sammenlignet med saltvand kontrol. De udviklede TAAs er fusiform i form og forekommer kun i den behandlede del af aorta (figur 1 og figur 2)11. Figur 2 viser et eksempel på en video mikrometri måling ved vævs høst. Ved hjælp af ligning 1, aorta dilatation er 130% i dette eksempel.
Den oprindelige undersøgelse af Joh...

Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

Vi beskriver en kirurgisk protokol til konsekvent at inducere robust nedadgående thorax aorta aneurismer i mus. Proceduren involverer venstre thoracotomi, thorax aorta eksponering, og placering af en svamp gennemblødt i Porcin pancreas elastase på aorta væggen.

Murine kirurgisk model af aktuel elastase induceret faldende Thoracic aorta aneurisme

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Denne protokol er i stand til at producere robuste thorax aorta aneurismer af ensartet størrelse og placering i mus og tjener som en guide til sikker adgang til murine brystet. Denne protokol er en enkel, konsekvent metode til fremstilling af thorax aorta aneurismer i mus over en rimelig tid i forhold til andre modeller. Efter at have bekræftet et passende niveau af sedation i en otte til 10-ugers gammel mand c57 sort seks mus, placere musen i højre lateral decubitus position og tape højre arm rostrally så den forreste pote er på linje med næsen.Træk halen caudally at skabe en linje af spænding mellem højre arm og hale, der producerer forlængelse af rygsøjlen, og tape venstre ben i sin naturlige position. Derefter tape venstre arm ventrally over rullet gaze. Før proceduren påbegyndes, skal du bruge klippere til at barbere venstre flanke fra venstre skulder til venstre mave.Brug en applikator med bomuldsspids til at børste første betadyneopløsning og derefter 70 % ethanol over operationsstedet. Når huden er tør, placere en steril drapere over dyret. Lav en to-centimeter lateral snit i midten af hæmothorax og bruge håndholdte elektrokauter til at opdele muskel lag, indtil ribbenene er synlige.Under 10 til 15x forstørrelse, direkte ætse en to-millimeter del mellem ribbenene og bruge en saltvand-wetted, fine bomuld-tippet applikator i ribbenet plads for at dissekere ind i pleural rummet gennem cauterized del. Placer en saltvand-wetted, tre af to-millimeter svamp i brystkassen til at hjælpe kollapse lungen. Brug derefter saks til at udvide thoracotomy indtil mellemgulvet er synlig ventrally og snittet er flere millimeter væk fra paraspinus muskler dorsally.For at eksponere aorta, sted ribben retractors i thoracotomy snit og forsigtigt fjerne svampen fra overfladen af lungen. Dæk lungen med en saltvand-wetted, seks af fire-millimeter svamp med enderne peger rostrally og caudally og placere en bred, flad lunge retractor på svampen. Skub derefter forsigtigt retractor ventrally indtil den faldende thorax aorta er udsat og bruge nummer syv kraftbefængte til at dissekere en ca. fem-millimeter sektion af bindevæv og fedt fra aorta.For at anvende elastase, først, bruge en mikropipette til at mætte en 0,5 af en millimeter svamp med 12 mikroliter af svin pancreas elastase og placere svampen på den udsatte overflade af aorta. Efter tre til fem minutter, bruge nummer syv kraftveces til at fjerne elastase svamp og fjerne lunge retractor. Overrisle brysthulen med cirka halvdelen af en milliliter sterilt saltvand.Fjern lunge svamp og bruge en rullet to-by-to-tommer stykke gaze til at absorbere de resterende saltvand kunstvanding. Fjern ribbensryptorer og afstuk ribbenene med tre afbrudte seks-oh ikke-absorberbare suturer, binde en løs knude i hver sutur uden at binde suturerne ned. Efter reinflating lungen, binde suturer og reapproximat musklen lag med en kørende fem-oh absorberbare flettet sutur.Luk huden med syv til 10 afbrudt fem-oh ikke-absorberbare suturer. Derefter overvåge dyret indtil fuld recumbency. På det relevante eksperimentelle endepunkt skal du bruge en saks til at indspænde huden medialt fra venstre flanke til den centrale mave, idet der drages omsorg for ikke at trænge ind i bughinden.Incise huden fra dorsal venstre flanke rostrally til venstre skulder og foretage et snit i en 90-graders vinkel gennem axilla til brystbenet. Brug cautery, dissekere huden flap mod ventrale aspekt af musen til at udsætte venstre hæmothorax og bruge en saks til at komme ind i maven langs venstre costal margin fra ventral til dorsale retning at udsætte undersiden af venstre membran. Hvis den laterale-mest kant af mellemgulvet ikke åbner, indsænske mellemgulvet på sin mest laterale kant.Placering spidsen af ætsningen i dette hul, ætse mellemgulvet fra costal margin til xiphoid processen og bruge en fugtig, fint tippet bomuld-tippet applikator til forsigtigt befri lungen fra eventuelle sammenvoksninger til brystvæggen. Samtidig med at gøre det godt igen at sikre, at lungen er ude af vejen, skal du bruge elektrocekuter til at skære gennem ribbenene og brystvæggen fra den omkostningsmargin til det første ribben, dorsal til midteraksillær linje, men mindst to millimeter fra aorta. Skær langs den overlegne margin af det første ribben og afspejler brystkassen ventrally at udsætte hæmothorax.Placer retraktorer på lungen og træk medialt. Placer en retractor eller saltvand-wetted gaze på mellemgulvet og tegne caudally at udsætte så meget af aorta som muligt. Brug en tør, bomuldsspidsapplikator til at fjerne eventuelle sammenvoksninger fra aortaaneurisme og et upåvirket distalt segment og brug videomikrometri til at måle diameteren af det upåvirkede kontrolsegment og den bredeste del af den elastasebehandlede aneurisme.At høste aorta, gribe fartøjet med skader scerpper bare distale til det behandlede segment og bruge en saks til at skære distale til syr. Disseker aortaen ud af rygsøjlen og skær karret proksimale til det behandlede segment for at fjerne det aneurysmale væv. Derefter vaskes aortalummen med saltvand ved hjælp af en tuberkulinsprøjte og -kanyle med saltvand, og prøven behandles i overensstemmelse med den planlagte downstream-forsøgsanalyse.De udviklede thorax aneurismer som fusiform i form og forekommer kun i den behandlede del på aorta. I denne repræsentative video mikrometri måling, aorta dilatation blev bestemt til at være 130% ved vævshøst. Mens type elastasebehandlede mus udviser en betydelig stigning i aortadilatationen på dag tre, syv, 14 og 21 efter behandling med den maksimale dilatation observeret på dag 14 sammenlignet med kontrol af vilde typemus.Histologisk analyse afslører, at vilde type aneurismer har elastin fibre, der er tynde og fragmenterede. Der er også mindre glat muskel celle farvning med en stigning i makrofag og interlukin one-beta udtryk. Den murine lunge er yderst delikat, og skaden er normalt dødelig.Vær yderst forsigtig med den første indtræden i brystet og kun manipulere lungen med saltvand-wetted svampe. Denne model har bidraget til at belyse rollen som mellemlukin one-beta og mellemlukin seks i patogenesen af faldende thorax aorta aneurismer, og hvordan deres blokade kunne lette ikke-kirurgisk behandling af disse aneurismer.

Research

JoVE Journal

Medicine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

En ny musemodel af Endovaskulær aortaaneurisme Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproducerbar Paraplegi af thorax aortaokklusion i en musemodel for Rygmarvsskader iskæmireperfusion

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

En murin model af myokardieiskæmi-reperfusionsskade gennem æggelederne for Venstre Anterior Faldende Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

Kirurgiske modeller af gastroøsofageal refluks med Mus

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Muse Venstre Anterior Faldende (LAD) kranspulsåreombinding: En forbedret og forenklet model for myokardieinfarkt

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Oprettelsen af en gnaver Model af abdominale aorta aneurisme ved at blokere Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

Standardiseret teknik af aortaklappen re implantation for ventil-besparende aorta Root udskiftning

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Kvantitative mikro-CT-analyse af Aortopathy i en musemodel af β-aminopropionitrile-induceret aorta aneurisme og dissektion

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

Ultralyd scanning af thorax og abdominale Aorta i mus til at bestemme aneurisme dimensioner

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Murine myokardieinfarkt model ved hjælp af permanent ligation af venstre anterior faldende koronararterie

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...