Name: murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm
Uploaded: 2019-08-24T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm at JoVE.com

Diese Arbeit wurde durch AHA Scientist Development Grant 14SDG18730000 (M.S.), NIH K08 HL098560 (G.A.) und RO1 HL081629 (G.R.U.) Stipendien unterstützt. Dieses Projekt wurde von der Thoracic Surgery Foundation for Research and Education (TSFRE) Research Grant (PI: G. Ailawadi) unterstützt. Der Inhalt liegt allein in der Verantwortung der Autoren und stellt nicht unbedingt die Ansichten des NHLBI oder des TSFRE dar. Wir danken Anthony Herring und Cindy Dodson für ihr Wissen und ihr technisches Know-how.

Tierprotokolle wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee der University of Virginia (Nr. 3634) genehmigt.
1. Induktion von Anästhesie und Intubation
<ol><li>Legen Sie eine 8-10 Wochen alte männliche C57BL/6 Maus in eine geschlossene Kammer mit kontinuierlichem Fluss von 5% Isofluran und Sauerstoffgemisch für 5 min, bis die Atmung enden wird. HINWEIS: Je nach Experimentellem Protokoll können verschiedene Stämme, Geschlechter und Alter von Mäusen verwendet werden. Weiblic...

<ol>
	<li>Coady, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+is+the+appropriate+size+criterion+for+resection+of+thoracic+aortic+aneurysms.">What is the appropriate size criterion for resection of thoracic aortic aneurysms.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (3), 489-491 (1997).</li><li>Aggarwal, S., Qamar, A., Sharma, V., Sharma, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysm:+A+comprehensive+review.">Abdominal aortic aneurysm: A comprehensive review.</a> Experimental and Clinical Cardiology. 16 (1), 11-15 (2011).</li><li>Bickerstaff, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thoracic+aortic+aneurysms:+a+population-based+study.">Thoracic aortic aneurysms: a population-based study.</a> Surgery. 92 (6), 1103-1108 (1982).</li><li>Cheng, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+aortic+repair+versus+open+surgical+repair+for+descending+thoracic+aortic+disease+a+systematic+review+and+meta-analysis+of+comparative+studies.">Endovascular aortic repair versus open surgical repair for descending thoracic aortic disease a systematic review and meta-analysis of comparative studies.</a> Journal of the American College of Cardiology. 55 (10), 986-1001 (2010).</li><li>Walsh, S. 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F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+interleukin-1beta+decreases+aneurysm+formation+and+progression+in+a+novel+model+of+thoracic+aortic+aneurysms.">Inhibition of interleukin-1beta decreases aneurysm formation and progression in a novel model of thoracic aortic aneurysms.</a> Circulation. 130 (11), 51-59 (2014).</li><li>Pope, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-6+Receptor+Inhibition+Prevents+Descending+Thoracic+Aortic+Aneurysm+Formation.">Interleukin-6 Receptor Inhibition Prevents Descending Thoracic Aortic Aneurysm Formation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 100 (5), 1620-1626 (2015).</li><li>Vandivort, T. C., An, D., Parks, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Improved+Method+for+Rapid+Intubation+of+the+Trachea+in+Mice.">An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (108), e53771 (2016).</li><li>Ailawadi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+nonintrinsic+regional+basis+for+increased+infrarenal+aortic+MMP-9+expression+and+activity.">A nonintrinsic regional basis for increased infrarenal aortic MMP-9 expression and activity.</a> Journal of Vascular Surgery. 37 (5), 1059-1066 (2003).</li><li>Ruddy, J. M., Jones, J. A., Spinale, F. G., Ikonomidis, J. 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P., Schaheen, B., Downs, E., Roy, R. J., Ailawadi, G., Upchurch, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+chronic+advanced+staged+abdominal+aortic+aneurysm+murine+model.">A novel chronic advanced staged abdominal aortic aneurysm murine model.</a> Journal of Vascular Surgery. 66 (1), 232-242 (2017).</li></ol>

Die Thorax- und Bauchaorta sind zellulär und embryologisch verschieden, was für die aneurysmale Erkrankung14,15,16relevant ist. Daher ist ein spezifisches Tiermodell zur Untersuchung von TAA erforderlich. Obwohl andere murine dTAA-Modelle veröffentlicht wurden8, ist unser Modell das einzige Modell, um absteigende thorakale aortenhafte Dilatation zu schaffen, die wirklich aneurysmal angesehen werden kan...

Der Zweck dieser Methode ist es, die Entwicklung, Pathophysiologie und strukturelle Veränderungen in der murinen absteigenden thorakalen Aorta während der Aortenaneurysmbildung zu untersuchen. Unser Modell bietet eine reproduzierbare und konsistente Methode zur Induzieren von thorakalen Aortenaneurysmen (dTAA) bei Mäusen und ermöglicht so die Prüfung verschiedener genetischer und pharmakologischer Inhibitoren. Diese Arbeit kann helfen, Medikamente und Gen-Therapien zu identifizieren, die in eine praktikable Behandlungsstrategie für Menschen mit dTAA-Krankheit übersetzt werden könnten.
dTAAs bilden sich, wenn die Wand der Thoraxaorta geschwächt wird und sich im Laufe der Zeit ausdimiert, bis ein kritischer Durchmesser erreicht wird, wenn dann reißen oder brechen kann. Klinisch kann dTAA im Stillen voranschreiten und an Größe zunehmen, bis die Struktur der Aortenwand so verzerrt ist, dass sie schließlich versagt, mit katastrophalen Folgen. In der Regel entwickeln sich die Symptome nur, wenn das Aneurysm eine gefährliche Größe erreicht hat (100-150% Dilatation) und ein hohes Risiko für Sezieren oder Brechen1,2ist. dTAA-Ruptur ist fast universell tödlich3, und elektive chirurgische Reparatur trägt erhebliche Morbidität4,5. Darüber hinaus tragen die meisten Patienten die Diagnose eines Aortenaneurysms für ca. 5 Jahre vor der chirurgischen Reparatur6,7. Dieses Fenster ist ein geeigneter Zeitpunkt, um nicht-chirurgisch einzugreifen. Daher sind medizinische Therapien zur Behandlung oder Verlangsamung des Fortschreitens von dTAA erforderlich und würden einen bedeutenden Fortschritt auf dem Gebiet der Aneurysmenforschung darstellen. Derzeit gibt es keine medizinischen Behandlungen für dTAA, vor allem wegen eines unvollständigen Verständnisses der dTAA Pathogenese.
In den letzten 20 Jahren wurden mehrere dTAA-Tiermodelle entwickelt, aber jedes dieser Modelle unterscheidet sich von unseren eigenen und hat keine robusten Aneurysmen produziert. Ein murines dTAA-Modell, das unserem am ähnlichsten ist, wurde von Ikonomidis et al.8entwickelt, das die direkte Anwendung von CaCl2 auf die Adventitia der Aorta beinhaltet. Obwohl unser Modell von vielen der von Ikonomidis festgelegten Techniken angepasst wurde, ist unser Modell auf drei verschiedene Arten einzigartig. Erstens ist die Aorta in unserem Modell 3-5 Minuten lang der topischen Elastase ausgesetzt, verglichen mit 15 Minuten CaCl2 Exposition. Zweitens tritt eine aortenhafte Dilatation in 2 Wochen auf, verglichen mit 16 Wochen im CaCl 2-Modell. Schließlich erzeugt unser Modell konsequent Aneurysmen von ca. 100% Dilatation, im Vergleich zu den aortenförmigen Dilatationen von 20-30% durch CaCl2 Anwendung produziert (die nicht wirklich als Aneurysmen betrachtet werden, da sie als eine Erhöhung der Aorten Durchmesser >50%). Es gibt andere nicht-chirurgische murinische Modelle der Aneurysmenbildung, wie die Apo E Knockout Maus, die robuste Aneurysmen mit Infusion von Angiotensin II bilden. Diese Mäuse entwickeln jedoch suprarenale oder aufsteigende thorakale Aortenaneurysmen anstelle von Aneurysmen speziell in der absteigenden Thoraxaorta9,10.
Der Grund für dieses Protokoll ist, eine einfache, kostengünstige und zeitgerechte Möglichkeit zu haben, dTAA in einem murinen Modell zu studieren. Das Mausmodell bietet eine einzigartige Gelegenheit, viele genetische und zellspezifische Knockouts zu nutzen, die bei anderen Gefäßerkrankungen wirkungsvoll sind. Die Verwendung unseres spezifischen TAA-Modells wurde gut aufgenommen und Experimente, die es verwenden, wurden in den Fachzeitschriften11,12veröffentlicht. Bis zu diesem Punkt wurde das Modell verwendet, um mögliche genetische und pharmakologische Behandlungen zu untersuchen, die eine signifikante Wirkung in der Bauchaortenaneurysm (AAA) murinen Modelle hatten; Da unser Labor jedoch den Einsatz des dTAA-Modells erweitert hat, finden wir Ziele, die für die dTAA-Bildung einzigartig sind und als gezielte Therapien beim Menschen eingesetzt werden könnten.
Dieses Modell eignet sich am besten für Labore mit murinen mikrochirurgischen Fähigkeiten. Obwohl es technisch anspruchsvoll ist, kann es auch von Forschern ohne vorherige chirurgische Erfahrung konsequent ausgeführt werden. Für einen Forscher ohne murine chirurgische Erfahrung kann das Modell in etwa 20 operativen Sitzungen (oder etwa 50 Mäusen) gemeistert werden. Für den Forscher mit vorheriger chirurgischer Erfahrung kann das Modell in 5 operativen Sitzungen (ca. 20 Mäuse) gemeistert werden. Wir glauben, dass mit einem hochwertigen Video die Zeit zur Beherrschung weiter reduziert werden kann. Nach Erreichen der Befähigung kann der Eingriff in 35 Minuten für die Operation und 20 Minuten für die Endernte abgeschlossen werden. Die Chirurgen in unserem Labor können 10-12 volle Operationen pro Tag durchführen, mit einer operativen Sterblichkeitsrate von 5-10%. Die häufigste Todesursache ist Lungenverletzung beim Eintritt in die Brust, Anästhesietoxizität oder Riss der Aorta während der Zerlegung. Neben der dTAA-Forschung dient dieses Modell auch als Leitfaden für einen sicheren und einfachen Zugang zur Thoraxaorta und zum Lungenhilum für Forscher, die andere Eingriffe in die Brust untersuchen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:761px;" width="760">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Angiocatheter (22G)</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Used for ET Tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Dumont Tweezers; Pattern #7 x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-4982</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Graefe Tissue Forceps</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Harms Forceps x2</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-5097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Intracardiac Needle Holder; Extra Delicate; Carbide Jaws; 7&#34; Length</td>
			<td style="width:191px;">Roboz</td>
			<td style="width:161px;">RS-7800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;KL 1500 LED Light Source</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">150-400</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">&#160;M205A Dissction Microscope</td>
			<td style="width:191px;">Leica</td>
			<td style="width:161px;">CH 94-35</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Iris Scissors, 11cm, Tungsten Carbide</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:161px;">500216-G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Metal Clip board</td>
			<td style="width:191px;"></td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Use with the Mouse Retractor Set&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Mouse Retractor Set</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;">SURGI-5001</td>
			<td style="width:167px;">Need 2 short and 1 tall fixators</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:243px;">Mouse Ventilator MiniVent Type 845, 115 V, Power Supply with US Connector</td>
			<td style="width:191px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:161px;">73-0043</td>
			<td style="width:167px;">MiniVent Ventilator for Mice (Model 845), Single Animal, Volume Controlled</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:191px;">Elastase from porcine pancreas</td>
			<td style="width:161px;">E0258-50MG</td>
			<td style="width:167px;">Can be purchased in various size bottles</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:243px;">Small Vessel Cauterizer Kit</td>
			<td style="width:191px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:161px;">18000-00</td>
			<td style="width:167px;">Recommend using rechargable AA batteries</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:243px;">Spring Scissors, 10.5cm</td>
			<td style="width:191px;">World Precision Instruments</td>
			<td align="right" style="width:161px;">14127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Steril Swabs (Sponges)</td>
			<td style="width:191px;">Sugi</td>
			<td align="right" style="width:161px;">31603</td>
			<td style="width:167px;">Can be cut to size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Surgi Suite Surgical Platform</td>
			<td style="width:191px;">Kent</td>
			<td style="width:161px;"></td>
			<td style="width:167px;">Attach to clip board&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:243px;">Tech IV Isoflurane Vap</td>
			<td style="width:191px;">Jorgensen&#160;Laboratories&#160;</td>
			<td style="width:161px;">J0561A</td>
			<td style="width:167px;">Anesthesia vaporizer&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine surgical model of topical elastase induced descending thoracic aortic aneurysm

Nach Angaben des Center for Disease Control wurden Aortenaneurysmen (AAs) von 1999 bis 2016 in allen Rassen und beibeiden Geschlechtern als eine der Haupttodesursachen angesehen. Ein Aneurysmus bildet sich als Folge der fortschreitenden Schwächung und eventuellen Erweiterung der Aorta, die brechen oder reißen kann, sobald sie einen kritischen Durchmesser erreicht. Aneurysmen der absteigenden Aorta in der Brust, genannt absteigende thorakale Aortenaneurysmen (dTAA), machen einen großen Teil der Aneurysmenfälle in den Vereinigten Staaten aus. Der nicht enthaltene dTAA-Bruch ist fast überall tödlich, und die Wahlreparatur hat eine hohe Morbiditäts- und Sterblichkeitsrate. Der Zweck unseres Modells ist es, dTAA gezielt zu untersuchen, die Pathophysiologie von dTAA aufzuklären und nach molekularen Zielen zu suchen, um das Wachstum zu stoppen oder die Größe von dTAA zu reduzieren. Durch ein murines Modell, um die Thoraxpathologie genau zu untersuchen, können gezielte Therapien entwickelt werden, um dTAA gezielt zu testen. Das Verfahren basiert auf der Platzierung der Schweinepankrease (PPE) direkt auf der äußeren murinen Aortenwand nach chirurgischer Exposition. Dies erzeugt eine destruktive und entzündliche Reaktion, die die Aortenwand schwächt und eine Aneurysmusbildung über Wochen bis Monate ermöglicht. Obwohl murine Modelle Grenzen besitzen, erzeugt unser dTAA-Modell robuste Aneurysmen von vorhersehbarer Größe. Darüber hinaus kann dieses Modell verwendet werden, um genetische und pharmazeutische Ziele zu testen, die das dTAA-Wachstum aufhalten oder einen Bruch verhindern können. Bei menschlichen Patienten könnten Interventionen wie diese dazu beitragen, Aneurysmusbrüche und schwierige chirurgische Eingriffe zu vermeiden.

Die Anwendung unseres Protokolls führt zu robusten dTAA bei Mäusen im Vergleich zu Saline-Kontrollen. Die entwickelten TAAs sind fusiformförmig und kommen nur im behandelten Teil der Aorta vor (Abbildung 1 und Abbildung 2)11. Abbildung 2 zeigt ein Beispiel für eine Videomikrometriemessung bei der Gewebeernte. Bei Verwendung von Gleichung 1 beträgt die Aortendilatation in diesem Beispiel 130 %.
<p cla...

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Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

Wir beschreiben ein chirurgisches Protokoll, um bei Mäusen konsequent robuste absteigende thorakale Aortenaneurysmen zu induzieren. Das Verfahren beinhaltet linke Thorakotomie, thorakale Aorta-Exposition und Platzierung eines Schwamms, der in schweinepankreasischer Elastase auf der Aortenwand getränkt ist.

Murine chirurgisches Modell der topischen Elastase induzierte absteigende Thorax Aortenaneurysm

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Dieses Protokoll ist in der Lage, robuste thorakale Aortenaneurysmen von konstanter Größe und Position bei Mäusen zu produzieren und dient als Leitfaden für den sicheren Zugang zur murinen Brust. Dieses Protokoll ist eine einfache, konsistente Methode zur Herstellung von thorakalen Aortenaneurysmen bei Mäusen über einen angemessenen Zeitraum im Vergleich zu anderen Modellen. Nach der Bestätigung einer angemessenen Sedierung in einem acht bis zehn Wochen alten männlichen c57 schwarz sechs Maus, legen Sie die Maus in die rechte seitliche Dekubitus-Position und band den rechten Arm rostral, so dass die Vorderpfote in der Linie mit der Nase ist.Ziehen Sie den Schwanz kauarisch, um eine Spannungslinie zwischen dem rechten Arm und dem Schwanz zu schaffen, wodurch eine Verlängerung der Wirbelsäule entsteht, und kleben Sie das linke Bein in seiner natürlichen Position. Dann band den linken Arm entlüftung über gerollte Gaze. Bevor Sie mit dem Eingriff beginnen, verwenden Sie Clipper, um die linke Flanke von der linken Schulter zum linken Bauch zu rasieren.Verwenden Sie einen Baumwoll-Applikator, um zuerst Betadyne-Lösung zu bürsten, dann 70% Ethanol über der chirurgischen Stelle. Wenn die Haut trocken ist, legen Sie einen sterilen Vorhang über das Tier. Machen Sie einen zwei Zentimeter langen seitlichen Schnitt in der Mitte des Hemothorax und verwenden Sie handgehaltene Elektrokauterie, um die Muskelschichten zu teilen, bis die Rippen sichtbar sind.Unter 10 bis 15-facher Vergrößerung einen Zwei-Millimeter-Abschnitt zwischen den Rippen direkt kauterisieren und einen mit einer samenbenetzten, feinen Baumwoll-Applikator im Rippenraum verwenden, um durch den kauterisierten Teil in den Pleuraraum zu sezieren. Legen Sie einen mit Einer Linie benetzten, drei mal zwei Millimeter großen Schwamm in den Thorax, um die Lunge zu kollabieren. Dann verwenden Sie eine Schere, um die Thorakotomie zu erweitern, bis das Zwerchfell ventral sichtbar ist und der Schnitt mehrere Millimeter von den Paraspinusmuskeln dorsal entfernt ist.Um die Aorta freizulegen, legen Sie Rippenretraktoren in den Thorakotomieschnitt und entfernen Sie vorsichtig den Schwamm von der Oberfläche der Lunge. Bedecken Sie die Lunge mit einem salinebewetteten, sechs mal vier Millimeter großen Schwamm mit den Enden, die rostral und kauarisch zeigen, und legen Sie einen breiten, flachen Lungenretraktor auf den Schwamm. Schieben Sie dann den Retraktor beweglich, bis die absteigende Thoraxaorta freigelegt ist, und verwenden Sie die SiebenZangen, um einen etwa fünf Millimeter großen Abschnitt aus Bindegewebe und Fett aus der Aorta zu sezieren.Um die Elastase anzuwenden, verwenden Sie zunächst eine Mikropipette, um einen 0,5 mal ein Millimeter großen Schwamm mit 12 Mikroliter neiner Pankrease zu sättigen und den Schwamm auf die exponierte Oberfläche der Aorta zu legen. Verwenden Sie nach drei bis fünf Minuten die Zange Nummer sieben, um den Elastaseschwamm zu entfernen und den Lungenretraktor zu entfernen. Bewässern Sie die Brusthöhle mit etwa einem halben Milliliter steriler Saline.Entfernen Sie den Lungenschwamm und verwenden Sie ein gerolltes zwei mal zwei Zoll großes Stück Gaze, um die verbleibende Strandenbewässerung zu absorbieren. Entfernen Sie die Rippen-Retraktoren und setzen Sie die Rippen mit drei unterbrochenen sechs-oh nicht-resorbierbaren Nähten ab, wobei Sie einen lockeren Knoten in jeder Naht binden, ohne die Nähte nach unten zu binden. Nach dem Wiederaufblasen der Lunge, binden Sie die Nähte und nähern Sie die Muskelschichten mit einer laufenden fünf oh regeflechte faste Naht.Schließen Sie die Haut mit sieben bis zehn unterbrochenen fünf-oh nicht resorbierbaren Nähten. Überwachen Sie dann das Tier bis zur vollständigen Rektusität. Verwenden Sie am entsprechenden experimentellen Endpunkt eine Schere, um die Haut von der linken Flanke zum zentralen Bauch zu schneiden und dabei darauf zu achten, nicht in das Peritoneum einzutreten.Incise die Haut von der dorsalen linken Flanke rostral auf die linke Schulter und machen einen Schnitt in einem 90-Grad-Winkel durch die Achsel zum Brustbein. Mit Kauterie, sezieren Sie die Hautklappe in Richtung der ventralen Aspekt der Maus, um die linke Hemothorax aussetzen und verwenden Sie eine Schere, um den Bauch entlang der linken Kostenrand von der ventralen in dorsale Richtung zu betreten, um die Unterseite der linken Membran zu belichten. Wenn sich die seitlichste Kante des Zwerchfells nicht öffnet, schneiden Sie das Zwerchfell an seiner seitlichsten Kante.Platzieren Sie die Spitze der Kautery in diesem Loch, kauterisieren Sie das Zwerchfell vom Kostenrand bis zum xiphoiden Prozess und verwenden Sie einen feuchten, feingekippten Applikator mit Baumwolle, um die Lunge sanft von jeglichen Verklebungen an der Brustwand zu befreien. Während Sie sicherstellen, dass die Lunge aus dem Weg ist, verwenden Sie Elektrokauterie, um die Rippen und die Brustwand vom Costalrand bis zur ersten Rippe zu durchschneiden, dorsal bis zur mittleren Achsellinie, aber mindestens zwei Millimeter von der Aorta entfernt. Schneiden Sie entlang der oberen Rand der ersten Rippe und reflektieren Sie den Rippenkäfig ventral, um den Hemothorax auszusetzen.Retraktoren auf die Lunge legen und medial ziehen. Legen Sie einen Retraktor oder eine mit Einer Linie benetzte Gaze auf das Zwerchfell und zeichnen Sie kauarisch, um so viel wie möglich von der Aorta freizulegen. Verwenden Sie einen trockenen, mit Baumwolle gekippten Applikator, um jegliche Adhäsionen aus dem Aortenaneurysmus und einem nicht betroffenen distalen Segment zu entfernen und die Videomikrometrie zu verwenden, um den Durchmesser des nicht betroffenen Kontrollsegments und den breitesten Teil des mit Elastase behandelten Aneurysmus zu messen.Um die Aorta zu ernten, greifen Sie das Gefäß mit Schadenszangen nur distal zum behandelten Segment und verwenden Sie eine Schere, um distal zu den Zangen zu schneiden. Sezieren Sie die Aorta von der Wirbelsäule ab und schneiden Sie das Gefäß proximal in das behandelte Segment, um das aneurysmale Gewebe zu entfernen. Dann, mit einer Tuberkulinspritze und Nadel, waschen Sie das Aortenlumen mit Saline und verarbeiten Sie die Probe gemäß der geplanten nachgelagerten experimentellen Analyse.Die entwickelten Thoraxaneurysmen als Fusiform in Form und kommen nur im behandelten Teil auf der Aorta vor. In dieser repräsentativen Videomikrometriemessung wurde die Aortendilatation bei der Gewebeernte auf 130 % bestimmt. Während type elastase behandelte Mäuse an den Tagen drei, sieben, 14 und 21 eine signifikante Zunahme der Aortendilatation aufweisen, mit der maximalen Dilatation, die an Tag 14 beobachtet wurde, im Vergleich zur Kontrolle wildartiger Mäuse.Histologische Analysen zeigen, dass Wilde-Typ-Aneurysmen Elastinfasern haben, die dünn und fragmentiert sind. Es gibt auch weniger glatte Muskelzellfärbung mit einer Zunahme der Makrophagen und Interlukin Ein-Beta-Expression. Die murine Lunge ist extrem empfindlich, und Verletzungen sind in der Regel tödlich.Achten Sie beim ersten Eintrag in die Brust auf höchste Vorsicht und manipulieren Sie die Lunge nur mit mit Einer Linie benetzten Schwämmen. Dieses Modell hat dazu beigetragen, die Rolle von Interlukin One-Beta und Interlukin six bei der Pathogenese absteigender thorakaler Aortenaneurysmen aufzuklären und wie ihre Blockade das nicht-chirurgische Management dieser Aneurysmen erleichtern könnte.

Research

JoVE Journal

Medicine

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Ein neues Mausmodell der endovaskuläre Aortenaneurysma Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Forschung

Medizin

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproduzierbare Paraplegie von thorakalen Aorta Occlusion in einem Mausmodell der Spinal Cord Ischämie-Reperfusion

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Einem Mausmodell der myokardialen Ischämie-Reperfusion Injury durch Ligation des linken vorderen absteigenden Arterie

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Surgical Models of Gastroesophageal Reflux with Mice

Chirurgische Modelle aus gastroösophagealen Reflux mit Mäusen

Multiple surgical procedures have been reported to induce gastroesophageal reflux in animals. Herein, we report three surgical models with mice aiming to ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine linken vorderen absteigenden (LAD) Koronararterienligatur: ein verbessertes und vereinfachtes Modell für Myokardinfarkts

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

Erstellung eines Nagetier Modells der abdominalen Aortenaneurysma Vaskulogenese Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

Standardisierte Technik der Aortenklappe erneute Implantation für Ventil-sparing Aortic Root Ersatz

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Quantitative Micro-CT-Analyse der Aortopathy in einem Mausmodell der β-Aminopropionitrile-induzierte Aortenaneurysma und Dissektion

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

Ultraschall-Bildgebung der thorakalen und abdominalen Aorta bei Mäusen zu Aneurysma Abmessungen bestimmen

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Murine Myokardinfarkt Modell mit permanenten Ligation der linken Anterior absteigende Koronararterie

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...